JPS61164159A - 細胞自動計測方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分舒〉 本発明は、細胞の個数を顕微鏡を用いて自動的に計測す
る細胞自動計測方法に関する。

〈従来の技術〉 従来、顕微鏡を用いて細胞の個数を計測する場合、手動
で焦点を合わせ、目視で計数する方法が用いられている
。焦点合わせは、人手で行なうので、特に、多量の試料
についての測定を行なうようなときは、作業者は、各試
料ごとに手動で顕微鏡の鏡筒を上下させて焦点合わせを
行ない、そして夫々目視で計数するという□作業を繰抄
返えす。作業には、相応の熟練が必要とされ、また作業
者には相当の注意力も要求され、正確な計測を手早く行
なうには熟練者であってもかなりの疲労を伴なう。

そこで、この対策として、顕微鏡の自動焦点装置及び顕
微鏡像の画像処理装置によってこれを自動化することが
考えられるが、細胞がコントラストが低く輪郭しかコン
トラストが得られない場合、最適焦点位置を決めるのは
困難である。プレパラート上の細胞はその位置によって
最適焦点位置が異なり、ましてや異なるプレパラートの
試料では、その麦焦点合わせがなされる必要があるので
あるから、画一的に物体と対物レンズの距離だけで焦点
を合わすというようなことは難しい。従って、得られた
像で焦点を決めなければならないが、コントラストが低
い場合、これも非常に困難であり、自動化が難しく、多
量の試料の測定ができない。

また、自動焦点が難しいのみならず、輪郭しかコントラ
ストが得られないため、画像処理方法も複雑となり、こ
れも自動化する上での支障となる。

〈発明が解決しようとする問題点〉 本発明は、上述のように細胞の個数を計測する場合に自
動化が難しく、多量の試料の迅速、正確な測定が容易に
はなし得ないという問題に鑑みてなされたもので、たと
え低コントラストで輪郭しかコントラストが得られない
細胞であってもその個数の自動計測を容易に実現し得、
しかも複雑な自動焦点装置などを必要とせずにこれを可
能とする細胞自動計測方法を提供することを目的とする
。

く問題点を解決するための手段〉 上記目的を達成するため、本発明に係る細胞自動計測方
法は、顕微鏡を用いて細胞の個数を計測する場合、細胞
像として焦点及び焦点近傍の像が得られるように鏡筒を
自動駆動装置によって移動させ、得られた複数の画像を
積算することにより低コントラストの細胞のコントラス
トを高めて細胞の個数の自動的な計測を行なうようにし
たことを特徴とするものである。

〈実施例〉 以下、本発明の一実施例を図面に基づいて説明する。

図は本発明の一実施例に係る細胞自動計測方法を実施し
た細胞の個数を計測するための装置を示す。本装置は、
光学顕微鏡の鏡筒１と、乙の鏡筒１を矢印ａのように自
動的に上下に移動させる鏡筒駆動装置２と、顕微鏡の像
を撮影するＴＶカメラ３と、このＴＶカメラ３により撮
影された顕微鏡像を収納するメモリ４と、このメモリ４
を介して画像が送られる画像処理装置５を有している。

６は光学顕微鏡のステージで、このステージ６には計測
すべき細胞が含まれた試料７をのせたプレパラート８を
設置する。

上記鏡筒１ば、大体の焦点を設定した以後は自動駆動装
置２により焦点位置前後に自動的に移動せしめられる。

鏡筒１の移動範囲に関しては、その範囲内に最適焦点位
置を含むような範囲とし、この移動範囲内を移動させる
ようにする。また、上記メモリ４、画像処理装置５は、
これらによって低コントラストの細胞の場合でも、コン
トラストの高い像が得られるようにして細胞の個数の計
測を行なう。すなわち、上記のように鏡筒１を移動させ
た場合に少なくとも最適焦点位置を含む複数位置での像
を得てメモリ４に収納するようにし、そしてそれらの像
を積算してコントラストを高め、各細胞の認識を行なっ
て、個数計測を行なう。

細胞の個数を計測する場合、まず、光学顕微鏡のステー
ジ６に試料７をのせたプレパラート８を設置する。多量
の試料についての測定を行なう場合は、予めそれらの各
試料をのせたプレパラート８を用意しておけばよい。ス
テージ６上へのプレパラ−・ト８の設置が行なわれた後
は、ＴＶカメラ３により顕微鏡の像が撮影され、メモリ
４に収納された後画像処理装置５に画像が送られること
になるが、本実施例方法では、試料７中の細胞の個数を
計測するに当って、一度手動で大体の焦点を設定する。

すなわち、従来の場合は焦点合わせは各試料ごとに作業
者が手動で鏡筒を上下させて行なうのに対し、上記のよ
うに作業者は一度大体の焦点を設定するだけでよい。

このように焦点を設定すると、以後は試料７測定の際鏡
筒１は焦点位置前後を自動的に移動する。鏡筒１は既述
したように最適焦点位置を含むような範囲で移動させる
ので、この移動する範囲内には最適焦点位置が含まれて
いる。このような鏡筒１の移動の過程において、コント
ラストが低く輪郭しかコントラストが得ら゛れない細胞
も焦点を少しはずすと細胞内部が黒くなり位置があるか
ら、焦点位置の像（輪郭のみの像）と、それ以外に焦点
はずれ像（内部が黒くなる像）が得られ、と・れらの積
算を行なえば、よりコントラストの高い像が得られる。

第２図では、９ａのような輪郭のみの最適焦点位置の像
と９ｂのような内部が黒くなる焦点はずれ像の積算を行
なって、９Ｃのようによりコントラストの高い積算像を
得るようにしている。

上記のようにして、最適焦点位置の前後の像を得るため
前述の如くに鏡筒１を移動させることにより各焦点位置
での像をメモリ４に収納し画像処理装置５で積算して明
瞭な状態のものとし、この状態で各細胞の認識を行ない
、試料７中の細胞の個数を計測する。

光学顕微鏡を用いて細胞の個数を計測する場合、このよ
うに細胞像として焦点及び焦点の前後の像が得られるよ
うに鏡筒１を自動駆動装置２によって上下させ、得られ
た各焦点での画像を積算することで低コントラストの細
胞のコントラストを高めて計測を行なうことができる。

このため、低コントラストで輪郭しかコントラストが得
られない細胞の個数の自動計測が可能で、従って多数の
試料７を容易に自動的に計測できる。多数の試料７の測
定の場合でも、作業者は一度焦点設定に関する作業を行
なえばよく、しかもそれも大体でよいのであり、低コン
トラストの細胞像も焦点位置近傍で少しずつ焦点をずら
せた像を積算することでコントラストが高められ、正確
かつ迅速な個数計測が可能となる。

しかも、複雑な自動焦点装置も不要である。既述したよ
うに、物体と対物レンズの距離だけで焦点を合わすこと
は難しく、一方、得られた像で焦点を決めるという方法
によるときは、コントラストが低い場合、これも非常に
困難である。

しかるに、上述のように積算するという方法によれば、
焦点近傍をスキャンするだけでよいので、個々の試料ご
との精密な位置制御、焦点合わせのための画像処理装置
も不要となるのである。

〈発明の効果〉 以上のように、本発明の細胞自動計測方法によれば、た
とえ低コントラストで輪郭しかコントラストが得られな
い細胞であってもその個数の自動計測を容易に実現でき
、しかも複雑な自動焦点装置などを使用することもない
ので、多量の試料の計測処理をする場合でも簡単に正確
かつ迅速な個数の計測を行なうことができる等の効果を
奏する。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明に係る細胞自動計測方法を実施した計測
装置の一例を示す構成図、細２図は第１図の装置におい
て細胞像の積算の態様の一例を示すための説明図である
。 図面中、１・・・鏡筒、２・・・鏡筒駆動装置、３・・
・ＴＶカメラ、４・・・メモリ、５・・・画像処理装置
、６・・・ステージ、７・・・試料、８・・・プレパラ
ート、９ａ・・・最適焦点位置の像、９ｂ・・・焦点は
ずれ像、９ｃ・・・積算像。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 顕微鏡を用いて細胞の個数を計測する場合、細胞像とし
   て焦点及び焦点近傍の像が得られるように鏡筒を自動駆
   動装置によつて移動させ、得られた複数の画像を積算す
   ることにより低コントラストの細胞のコントラストを高
   めて細胞の個数の自動的な計測を行なうようにしたこと
   を特徴とする細胞自動計測方法。