JPS61189283A - ７−ｎ−アミノメチレンマイトマイシン誘導体、製造法及び抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は抗菌活性、抗腫瘍活性を有する新規マイトマイ
シン誘導体、それらの製造法、および遁れらを含有する
抗腫瘍剤に関する。

従来の技術 マイトマイシン類は抗菌活性、抗腫瘍活性を有する抗生
物質として一般に知られている。代表的なマイトマイシ
ンとしてはマイトマイシンＡ１マイトマイシンＢ１マイ
トマイシンＣ１ポルフイロマイシン（以上はメルクイン
デックス第１０版に記載されている。〉、マイトマイシ
ンＤ１マイトマイシンＥ（以上は特開昭５４−１２２７
９７に記載されている。）、マイトイシンＦ（特開昭５
５−４５３２２に記載されている。）等がある。これら
のマイトマイシン類はストレプトミセス・ケスピトーサ
スの培養液から単離することができる。また、マイトマ
イシンＢから９−エピ−マイトマシンＢおよび９−エピ
−マイトマイシンＤが化学的に誘導される（特開昭５６
−３０９７８　）。最近、マイトマイシンの絶対配置が
修正された（Ｊ、　Ａｍ、Ｃｈｅｍ、Ｓａｃ、、１０５
゜７１９９　（１９８３）。式Ａ、Ｂにそれにしたがっ
て修正した上記各種マイトマイシン類の構造を示す（弐
Ｃについても同様である。）。

式Δ　天然から得られる主なマイトマイシン類口 マイトマイシン　　　　　　ｘＡ　　　　　　　　ＹＡ
　　　　　　ＺＡ　　　　　Ｃ−９Ａ　　　　　　　　
　０ＣＲ３ＣＨ３ＨβＢ　　　　　　　　　ＯＣＨ３１
１ＣＨ３αＣＮ１−１２　　　　　　　　ＣＨ３ＨβＤ
　　　　　　　　　Ｎｆ１２　　　　　　　　Ｉｔ、　
　　　　　　ＣＨ３αＰ　　　　　　　　　ＮＨ２ＣＨ
３ＣＨ３αＰ　　　　　　　　　ＯＣＨ３ＣＨ３［：Ｎ
３　　　　βＪ　　　　　　　　　ＯＣＨ３ＣＨ，ＣＨ
３αボルプイロマイシン　　　ＮＬ　　　　　　　　Ｃ
Ｈ３ＣＨ３β弐Ｂ　９の位に水酸基をもつ９β−マイト
マイシン９−エピ−マイトマイシンＢ　　　　ＸＢ＝Ｏ
ＣＨ３９−エピ−マイトマイシンＤ　　　　ＸＢ＝ＮＨ
２さらに９，１０位が二重結合になったマイトマイシン
類も知られており、それらの製造法は特開昭５５−１５
４０８．５６−７７８７　に示されている。式Ｃに二重
結合型マイトマイシンの構造を示ス。

式Ｃ二重結合型マイトマイシン マイトマイシンＨＸｃ”Ｃｔｌｓ　　Ｙｃ＝ＨＺｃ＝Ｃ
ＨｓマイトマイシンＧ　　ＸＣ−Ｎ）＋２　　ＹＣ＝Ｃ
Ｈ３ＺＣ＝ＣＨ３マイトマイシンＫ　　Ｘｃ：ＣＮ３Ｙ
Ｃ＝ＣＨ３Ｚｃ＝ＣＨ３９ａ−〇−デメチルマイトマイ
シンＧ　　　ＸＣ”Ｎ）＋２　　　　ＹＣ＝ＨＺｃ−Ｃ
Ｌｌａ−デメチルマイトマイシンＧ　　　　　ＸＣ＝Ｎ
Ｈ２Ｙｏ＝ＣＨ３ＺＣ−１（１ａ−デメチルマイトマイ
シンＫ　　　　　ＸＣ−０ＣＨ３ＹＣ＝ＣＨ３ＺＣ＝Ｈ
マイトマイシン類はすぐれた抗腫瘍活性を有するが、一
方では白血球の減少等の副作用も有することから、活性
の増強あるいは毒性の軽減を目的として多数の誘導体が
合成され、それらの生物学的性質が調べられてきた。

これらのマイトマイシン誘導体の中で、本発明と関係の
ある７位のアミノ基が修飾されたものとしテハ、たとえ
ば、ＪｌＭｅｄ、　Ｃｈｅｍ、、２４．９７５（１９８
１）。

Ｊ、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、、　２６．１６　（１９８
３）、　Ｊ、　Ｍｅｄ、Ｃｈｅｍ、。

２６．１４５３−（１９８３）、　Ｊ、　Ｍｅ’ｄ、Ｃ
ｈｅｍ、、　２７．７０１　（１９８４）などにその例
が報告されている。またこれらの文献には７位のアミノ
基が修飾されたマイトマイシン誘導体は生体中において
抗腫瘍活性を示すことも記載されている。７位のアミン
基が修飾されたマイトマイシン誘導体の中でもさらに本
発明と関係の深い化合物の例は最近公開された特開昭５
９−１４８６中に見出すことができる。なかでも該特許
中実施例８に記載されている７−（ジメチルアミノメチ
レン）アミノ−９ａ−メトキシマイトサン（以下、化合
物Ａという）は特にすぐれた抗腫瘍活性を有するとされ
ている。しかしながら該特許に記載されている化合物は
マイトマイシンＡ１マイトマイシンＣ１ポルフイロマイ
シンおよび７−Ｎ−メチルマイトマイシンＣを出発原料
にする化合物であり、立体化学的にはマイトマイシンＣ
と同一の立体化学をもつ化合物に限定されている（特開
昭５９−１４８６．１０頁参照）。

これに対し、本発明に含まれる抗腫瘍活性を有するマイ
トマイシン誘導体は次の式（Ｉ−１）。

（１−２）および（Ｉ−３）で表される。

（式中、Ｒ，、Ｒ２は水素原子または低級アルキル基を
表す。ＹおよびＺはそれぞれ水素原子またはメチル基を
表し、んＶはαまたはβ結合を表す。

ただし９位の置換基がβ配置をしている場合にはＹは水
素原子を表す。

式（Ｉ−１）で表される化合物〔以下、化合物（Ｉ−１
）と言う。他の大番号の化合物についても同様に表現す
る。〕は、９位の置換基がαの場合にはマイトマイシン
Ｂまたはその類縁体を原料として合成される。該類縁体
としては７位がアミノ基であるマイトマイシンＤおよび
マイトマイシンＥがあるが、これらは天然界からはマイ
トマイシンＣ発酵の際に極めて微量の成分として得られ
るものであり（特開昭５４−１２２７９７）　、マイト
マイシンＢから化学的に誘導しなければ入手困難な化合
物である。

一方、マイトマイシンＢはやはりマイトマイシンＣ発酵
の際の微量成分として単離される化合物であり、化学合
成の原料として使用しろる量を人手することは困難とさ
れていた。しかし本発明者らの研究協力者はマイトマイ
シンＣ発酵について、マイトマイシンＢをより多量に生
成させる目的で、培養条件ならびに分離精製法を詳細に
検討し、マイトマイシンＢの発酵単位を大巾に改良する
ことに成功した。そのためにマイトマイシンＢを安価に
、かつ大量に人手することが可能となり、マイトマイシ
ンＢを出発原料とすることのできる本発明が産業上重要
な意味をもつことができるようになった。

また、９位の置換基がβの場合は、一般的に良く知られ
たマイトマイシンに属する。その代表はマイトマイシン
Ｃである。しかしながら９位の置換基がβであるマイト
マイシンでは天然界から得られるものぼ全で９ａ位にメ
トキシ基を有している。立体化学がマイトマイシンＣと
同一、すなわち９−βで、かつ９ａ−ＯＨを有するマイ
トマイシン（式Ａ参照）は一般的には人手しがたい化合
物であり、本発明に関係する９−エピ−マイトマイシン
ＤはマイトマイシンＢを原料にすることによって入手す
ることのできる特殊な化合物である。

このように本発明に含まれる化合物は、−口にマイトマ
イシンとは言え同業者によっても容易には検討しがたい
、化学構造上極めて特徴のあるものであり、このような
背景は二重結合型マイトマイシン〔化合物（Ｉ−３）］
にあっても同様である。

さらに本発明に含まれる化合物には前記特開昭５９−１
４８６中に記載されている化合物Δ（参考例に示す）と
比較しても、白血病ｐ−３８８に対してよりすぐれた抗
腫瘍活性を示すことが実験的に証明されて右り（後述す
る）、従来の技術と対比して明らかな特徴がある。

本発明が解決しようとする問題点 前記に引用した文献類からも明らかなように、すでに数
多くのマイトマイシン誘導体が合成されているが、抗腫
瘍活性の強さ、あるいは毒性の軽減という観点からする
とさらにすぐれた抗腫瘍剤の開発が望まれている。こう
した性質を有する物質の製造を目的として研究を重ねる
過程において、特開昭５９−１４８６とは独立に、本発
明者らも化合物Ａを合成し、それがすぐれた抗腫瘍活性
を有することに注目していた。そしてさらにすぐれた抗
菌・Ｅ”　Ｊｆト　　）−！−Ｉｌ舌膚・犀Ａ井九六：
　　　清＼っ牢Ｊキ小ンｄ１ψ乎、−＝１２・ノドマイ
シン誘導体の製造を目的として研究を重ねた結果、化合
物Ａを上まわる生化学的性質を有する化合物を見出し、
本発明を完成させることかできた。

問題点を解決するための手段 本発明は式（Ｔ） （式中、Ｒ１、Ｒ２は同一もしくは異なって水素原子ま
たは低級アルキル基を表す。Ｒ３、Ｒ４は一体となって
−ＣＨ２を表す。ＹおよびＺは同一もしくは異なって水
素原子またはメチル基を表す。

ｗはα結合またはβ結合を表す。ただし、Ｒ１がβ配位
をしている場合にはＹは水素原子を表す。）で表される
マイトマイシン誘導体に関する。

化合物（Ｉ＞は前記化合物（１〜１）、（１−２）およ
び（Ｉ−３）よりなっている。

式（１）において、Ｒ１、Ｒ２の定義中、低級アルキル
基は炭素数１−５の直鎮状もしくは分枝ピル等を包含す
る。

次に化合物（Ｉｉ）を得る工程式を示す。

工程１ 工程２　　　（Ｉ−２）　　−□−（ＩＩ）工程３　　
　（ＩＶ）　　＋　　（ＩＩＩ）　　−一　（ＴＩ）化
合物（１）は不活性溶媒中、化合物（ｒＪ）と化合物（
ＩＩＩ）とを反応させることによって製造できる。この
とき化合物（Ｉ−２）と（ＩＶ）が副生ずるが、化合物
（Ｉ−２）は１０位の一０ＣＯＮ＝ＣＨＮＲ，Ｒ２を選
択的に加溶媒分解することにより化合物（ＩＩ）に導く
ことができる（工程２）。化合物（ＩＶ）はさらに（Ｉ
）と工程１と同様条件下反応させて化合物（Ｉ−２）と
しく工程３）、上記のように化合物（Ｉ−１）に導くこ
とができる。工程１で用いられる溶媒は、クロロホルム
、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、テトラヒドロフ
ラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテ
ル、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチル
ホルムアミド等であり、これらは単独もしくは混合して
用いられる。

反応温度、反応時間は化合物（ＩＶ）によっ、て、また
反応試剤の濃度によって異なるが、通常は一３０℃〜７
０℃の範囲で、数十分から数時間で十分である。

工程２で用いられる溶媒としてはメタノーノヘエタノー
ル、プロパツール等の低級アルコール類が適している。

これらは単独でも用いられるが、エーテル類、アセトニ
トリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド
等と混合しても用いることができる。反応温度、反応時
間は通常−３０℃〜７０℃の範囲で、数十分から数時間
でよい。

触媒には弱い無機塩基類も使用できるが、弱塩基性でか
つ立体障害の大きいアミン類が適当である。

後者の例としてはアミノジフェニルメタン、第三級ブチ
ルアミンなどがあげられるが、このようなジアルキルア
ミノメチレンイミン基の加溶媒分解については特開昭５
９−１４８６にも記載されている。

化合物（Ｉ−１）は化合物（■）（特開昭５６−７７８
７に記載されている）を出発物質として次の工程式によ
っても合成することができる。

すなわち、化合物（Ｖ）にトリクロロアセチルイソシア
ネートを反応させて化合物（Ｖｌ）としだ後（工程４）
、工程１と同様にして化合物（１）を反応させて化合物
（■）を得る（工程５）。化合物（■）は、先ず化合物
（Ｖ）と化合物（ＩＩＩ）とを反応させて化合物（■）
とした後にトリクロロアセチルイソシアネートを反応さ
せても同様に合成することができる。このようにして得
られた化合物（■）を加溶媒分解することにより、化合
物Ｍ）が得られる（工程６）。工程４におけるトリクロ
ロアセチルカルバモイル化および工程６におけるカルバ
モイル基の生成反応は公知の手法と同様に行うことがで
きる（　Ｊ、　Ｎａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔ４２５
４９　（１９７’９）および日本化学会第４３回春季年
会、予稿集９１０頁、１９８１年、東京）。工程４で用
いられる溶媒にはクロロホルム、ジクロロメタン、ジエ
チルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチ
レングリコールジメチルエーテル、ベンゼン、トルエン
などがある。これらは単独もしくは混合して用いられる
。反応温度、反応時間は通常−３０℃〜３０℃の範囲で
、数分から数時間でよい。工程６における触媒としては
アルカリ金属またはアルカリ土類金属の炭酸塩または重
炭酸塩等の無機塩類、トリエチルアミン、シイ（１５〉 ソプロピルエチルアミン、ピロリジン、ピペリジン等の
アミン類が用いられる。反応温度、反応時間は通常−３
０℃〜７０℃の範囲で、数十分から数十時間でよい。工
程５は前記の工程１に準する。

次に化合物（１−３）の製造法を説明する。

化合物（Ｉ−３）は不活性溶媒中、化合物（ＩＸ）と化
合物（ＩＩＩ）とを反応させることによって製造される
。この工程は前記の工程１と同様にして行なえる。

次に実施例により本発明を具体的に説明する。

各化合物の物理化学的データは次の機器類によって測定
された。

’Ｈ−ＮＭＲ：ＪＢＯＬ　ＦＸ−１００スヘク）　ロメ
−９−０Ｍ５：旧ｔａｃｈｉ　Ｍ−８０Ｂマススペクト
ロメーター。

Ｉ　Ｒ：　Ｓｈｉｍａｚｕ　ＩＲ−２７−ＧおよびＪＡ
ＳＣＯＩＲ８１０゜シリカゲルＴ　Ｌ　Ｃ：　Ｍｅｒｋ
　Ａｒｔ　５７１４゜実施例１９ａ−０−デメチル−７
−Ｎ−ジメチルアミノメチレンマイトマイシンＧ（化合
物１）乾燥したジメチルホルムアミド（以下ＤＭＦと略
す）１ｍｌにジメチルホルムアミドジメチルアセタール
（以下ＤＭＦＡと略す）０．１ｍｌと９ａ−〇−デメチ
ルマイトマイシン０９０ｍｇを加え、窒素気流下に室温
で６時間攪拌する。

溶媒を減圧下で留去した後、Ｃ）（Ｃ１，−ＭｅＯＨ（
９８：　２　ｖ／ｖ）を展開溶媒とするシリカゲルカラ
ムクロマ・トゲラフイーにより生成物を分離する。

生成物は再度シリカゲルカラムクロマトグラフィーによ
り精製し、ＡｃＯＥｔ−ＭｅＯＨ（９９：ＩＶ／Ｖ）で
溶出した溶液を減圧濃縮し、暗緑色ペースト状物質を単
離する。この物質を少量のＣＨｃＬにとかし、その溶液
をシクロヘキサン中に滴下すると化合物１が緑色の沈殿
として析出する。

これを炉別して８１ｍｇの化合物１を得る。収率７５％
。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨＣＪ！３）：δ１．８
６（３Ｎ、　ｓ）。

２．１９（３Ｈ，Ｓ）、　２．２６（２Ｈ，ｍ）、　３
．０３（３１１，Ｓ）、３．０７（３ｔｌ、　ｓ）、　
３．４８（ｌｆｔ、　ｄｄ、　Ｊ＝１２．７．１．３）
。

４．１７（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝１２．７）、　５．４４（
ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝０．５）。

Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ　）　　：３４００．　２９２Ｂ、　
　２８５４．　１６４４．　１６２０゜１５２９、　１
３７６、　１３０６．　１１１３．　１０５４ｃｍ−’
。

ＭＳ　　（ｍ／　ｚ）　　：３２８（Ｍ”）　　３１１
．　２８４．　２９５゜高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ”　＝
　３２８．１５１７（ＣＩ７Ｈ２ＯＮ４０３　に対する
計算値−３２８，１５３３）。

ＴＬＣ（ＣＨＣＡ３　　ＭｅＯＨ，１９：　　１　　ｖ
／ｖ　）：Ｒｆ＝０．４０゜ 実施例２　１ａ−デメチル−７−Ｎ−ジメチルアミノメ
チレンマイトマイシンＧ（化合物２）５３ｍｇの１ａ−
デメチルマイトマイシンＧを出発原料として、実施例１
とほぼ同様の操作により緑色粉末として化合物２４７ｍ
ｇが得られる。

収率７４％。

’　Ｈ−Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨ　Ｃ１３）　　
：δ１．９５（３Ｈ，ｓ）。

２．８５（２８，ｂｒ、ｓ）、　　　３．０５（３ｔ（
、ｓ）、　　　３．ＩＱ（３ｆｔ、　　　ｓ）。

３．１１（３Ｈ，ｓ）、　３．５５（ＩＨ、ｂｒ、ｄ、
　Ｊ＝１２．９）。

４．２７（１Ｎ、　ｄ、　Ｊ＝１２．９）、　５．４２
（１１（、ｄ、　Ｊ＝０．６）。

６．２２（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝０．６）、　７．７４（Ｉ
Ｈ，５）ＩＲ（ＫＢｒ）　　：３２９２．２９３０．２
８５４．１６４５．１６２２゜１５９９、１５７２．１
５３２．１４３５．１３７６、１３０４．１２５４゜１
２１４、１１１１．１０８３．１０５３．９３９　ｃｍ
−’。

ＭＳ　（ｍ／ｚ）　　：３２８（Ｍ＋）、　３１３．２
９７．２８２，２５４゜高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ”　＝
　３２８．１５３２（ｃ、７■２ｏＮ、ｏ３に対オス玉
十１１相打＝３９８１ら３４）　−ＴＬＣ（ＣＨＣβ３
　　　Ｍ　ｅＯＨ，１９：　１　　ｖ／ｖ　）：Ｒｆ＝
０．４８゜ 実施例３　７−　Ｎ−ジメチルアミノメチレンマイトマ
イシンＤ（化合物３ａ）および７−Ｎ、Ｎｌ０−　ヒス
（ジメチルアミノメチレン）マイトマイシンＤ（化合物
３ｂ）（本化合物の命名において、Ｎ１０はマイトマイ
シンの１０位のカルバモイルオキシ基の窒素原子を指す
ものとする。以下においても同様である。） Ｄ、ＭＦＡ　　８０μｐを含む乾燥ＤＭＦ　　Ｏ，４ｍ
ｌに８３ｍｇのマイトマイシンＤを溶解し、窒素気流下
にて室温で４０分間攪拌する。

溶媒を減圧下で留去した後シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーにかけ、ＣＨＣβ３　　ＭｅＯＨ（９５：５Ｖ
／ν）で溶出する緑色の分画（分画Ａとする）を分取す
る。ひき続き、ＣＨＣｊ？　３ＭｅＯ）１（９３：　７
　ｖ／ｖ）で展開し別の緑色の分画（分画Ｂとする）を
分取する。最後に溶媒をＣＨＣ１３−ＣＨ３０Ｈ（８５
：　１５　ｖ／ｖ）　　に変えて得られる分画を集める
と、そこからマイトマイシンＤが２６ｍｇ回収される。

分画Ｂを濃縮した後、再度シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーにより精製する。ＡＣＯＥｔ−Ｍ　ｅＯＨ（９
２：　８　ｖ／ｖ）で溶出する緑色の分画を集め濃縮す
ると２５ｍｇの暗緑色の粉末として化合物３ａが得られ
る。収率４５％。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨＣＡ３　）：δ１．９
０（３Ｈ，ｓ）。

２．２５（５１１，ｓ）、　３．０３（３１１，ｓ）、
　３．０８（３１１，ｓ）。

３、４６（ＬＨ，ｂｒ、　ｄ、　Ｊ＝１２．７）、　３
．７Ｈ１１１，ｔ、　Ｊ＝４．２）４．０８（ｌｆｔ、
　ｄ、　Ｊ＝１２．７）、　４．２０（ＩＨ，ｂｒ、）
　。

４．７０　（２１イ、　　ｄ、　　Ｊ＝４．２）、　　
４．７２（２ｔイ、　ｂｒ、　ｓ）。

７．７０（ＬＨ，ｓ）。

Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ　）　＋３４３０．２９３０．１７３
０．１６２１．１５３５゜１３１０ｃｍ−’。

ＭＳ　（ｍ／　ｚ　）　＋３８９（Ｍ”）、　３７１．
３４６．３２８゜３１０、２９５．２７３．２５９゜ 高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ”−３８９，１６９４（Ｃ，、
Ｈ２３Ｎ５０５に対する計算値−３８９，１６９７）。

ＴＬＣ（ＣＨＣＩＩ３　ＭｅＯＨ，１９：　１　ｙ／ｖ
　）：Ｒｆ＝０．１７゜ 分画Ａを濃縮した後、さらに分取用シリカゲル薄層クロ
マトグラフィーにより精製する。ＡｃＯＥｔ−ＭｅＯｌ
ｌ　（］　９　：　１　ｖ／ｖ　）で展開し、Ｒｆ＝０
．０９の緑色バンドを集めて２６ｍｇの暗緑色粉末とし
て化合物３ｂを得る。収率３４％。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨ（１３）：６１．９０
（３１１，Ｓ）。

２、２５　（３１１ｓ）、２．２８（２Ｈ，ｍ）、　３
．０３（３Ｈ，ｓ）。

３．０５（３Ｈ，ｓ　）、　３．０７（３Ｈ，ｓ　）、
３．１Ｈ３１１，ｓ　）。

３．４８（ＬＨ，ｄｄ、　　Ｊ＝１２．７．　１．７）
、　　３．７８（ｉｌｌ、　　ｍ　）。

４．０８（］、Ｈ，ｄ、　　Ｊ＝１２．７　）、　　４
．５１（１Ｎ、　　ｂｒ、）。

４．７５（２）１．　　ｍ　＞、　　７．７０（ＩＩ（
、ｓ）、　　８．３８（ＩＮ、　　ｓ＞　　。

Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ　）　　＋３３８０．　２９２０．　
１６１７．　１５２６．　１４１９　。

１３７４、　１３０９．　１２６３．　１２２６，１１
１３．　１０７６、　１０５９　ｃｍ　’。

ＭＳ　（ｍ　／　、Ｚ　）　　：　４４４（Ｍ”　、　
Ｃ２１８２８ＮＢＯ５に対する計算値−４４４）、　４
２６．３２８　　。

ＴＬＣ（ＣＨＣｊ！３　ＭｅＯＨ，１９：　　１　　ｖ
／ｖ　）：Ｒｆ＝０．２９゜ ｌｉ例４　７−Ｎ−ジメチルアミノメチレンマイトマイ
シンＥ（化合物４ａ）および７−Ｎ、Ｎ”−ビス（ジメ
チルアミノメチレン）マイトマイシンＥ（化合物４ｂ）
。

８０＃のＤＭＦＡを含む乾ＨＤ　Ｕ　Ｆ　Ｏ，４ｍｌに
マイトマイシンＥ３９ｍｇを溶解し、窒素気流下に室温
で１時間２０分間攪拌する。溶媒を減圧下に留去した後
、ＣＨ（１３−ＭｅＯＨ（９７：　３　ｖ／ｖ）を溶出
溶媒とするカラムクロマトグラフィーを行い緑色の分画
を分取する（分画Ａとする）。ひき、続きＣ）ｌ（Ｊ！
３−ＭｅＯＨ（９２：　８　ｖ／ｖ）で溶出すると別の
青色の分画が得られる（分画Ｂとする）。

分画Ｂを濃縮し、シリカゲル薄層クロマイグラフィーで
精製するとマイトマイシンＥ１５ｍｇが回収六＋Ｉ　ス 分画Ａは、濃縮後にシリカゲル薄層クロマトグラフィー
にかけ、ΔｃＯＥｔ−ＭｅＯＨ（１９：ＩＶ／Ｖ）で展
開してＲｆ＝０．１６の緑色のバンドから７ｍｇの暗緑
色の粉末として化合物４ａの暗緑色粉末（収率２５％）
を、Ｒｆ＝０．０２の緑色ハンドから４ｍｇの粉末とし
て化合物４ｂの暗緑色粉末（収率１３％）をそれぞれ単
離する。

化合物４ａ ’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨ（Ｊ！３　）：δ１．
９１（３１−１，ｓ）。

２．２０（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝４．６）、　　２．３１（
３Ｈ，ｓ）、　２．３６（ｉＨ。

ｄｄ、　Ｊ＝４．６．２．０）、　３．０３（３Ｈ，Ｓ
）、　３．０７（３Ｈ，Ｓ）。

３．３１（３ｔｌ、　ｓ）、　３．５６（ｌｔｌ、　ｄ
ｄ、　Ｊ＝１２．７．２．０）。

３．８４（ＩＩＩ、　ｄｄ、　Ｊ＝９．５．３．９）、
　３．９５（ＬＨ，ｄ、　Ｊ＝１２．７）。

４．４３（１１−１，ｄｄ、　Ｊ＝１０．７．９．５）
、　４．６Ｎ２）１．　ｂｒ、ｓ）。

４．８４（ＬＨ，ｄｄ、　Ｊ＝１０．７．３．９）、　
７．６８（ｉｌｌ、　ｓ）　　。

ＩＲ（ＫＢ　ｒ　）　：３４５０．３３６２．２９２２
．１７１３．１６２５゜１５４８、１５３８．１３２６
．１３０４．１１１７．１０７４．１０５１ｃｍ−’。

ＭＳ　（ｍ／　ｚ　）　：４０３（Ｍ”）、　３７２．
３４２．３２７゜３１１、２９５゜ 高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ＋＝　４０３．１８７１（Ｃ，
９１１２５Ｎ５０５に対する計算値−４０３，１８５４
＞。

化合物４ｂ ’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨＣβ３）；δ１．９Ｈ
３１１，ｓ）。

２．３Ｈ３Ｈ，ｓ）、　　　２．３３（２１１，ｍ）、
　　　３．０２（３ｆｔ、　　　ｓ）。

すなわち、化合物（Ｖ）にトリクロロアセチルイソシア
ネートを反応させて化合物（Ｖｌ）としだ後（工程４）
、工程１と同様にして化合物（Ｉ）を反応させて化合物
（■）を得る（工程５）。化合物（■）は、先ず化合物
（Ｖ）と化合物（Ｉ）とを反応させて化合物（■）とし
た後にトリクロロアセチルイソシアネートを反応させて
も同様に合成することができる。このようにして得られ
た化合物（■）を加溶媒分解することにより、化合物（
１）が得られる（工程６）。工程４におけるトリクロロ
アセチルカルバモイル化および工程６におけるカルバモ
イル基の生成反応は公知の手法と同様に行うことができ
る（　Ｊ、Ｎａｔｕｒａｌ　Ｐｒｏｄｕｃｔ４２５４９
　（１９７’９）および日本化学会第４３回春季年会、
予稿集９１０頁、１９８１年、東京）。工程４で用いら
れる溶媒にはクロロホルム、ジクロロメタン、ジエテル
エーテノペテトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレン
グリコールジメチルエーテル、ベンゼン、トルエンなど
がある。これらは単独もしくは混合して用いられる。反
応温度、反応時間は通常−３０℃〜３０℃の範囲で、数
分から数時間でよい。工程６における触媒としてはアル
カリ金属またはアルカリ土類金属の炭酸塩または重炭酸
塩等の無機塩類、トリエチルアミン、ジイソプロピルエ
チルアミン、ピロリジン、ピペリジン等のアミン類が用
いられる。反応温度、反応時間は通常−３０℃〜７０℃
の範囲で、数十分から数十時間でよい。工程５は前記の
工程１に準する。

次に化合物（１３）の製造法を説明する。

化合物（Ｉ−３）は不活性溶媒中、化合物（ＩＸ）と化
合物（Ｉ）とを反応させることによって製造される。こ
の工程は前記の工程１と同様にして行なえる。

次に実施例により本発明を具体的に説明する。

各化合物の物理化学的データは次の機器類によって測定
された。

’Ｈ−ＮＭＲ：ＪＢＤＬ　ＰＸ−１００スヘク）　０メ
ーター。

Ｍ　Ｓ　：　Ｈｉｔａｃｈｉ　Ｍ−８０８マススペクト
ロメーター。

Ｉ　Ｒ：　Ｓｈｉｍａｚｕ　ＩＲ−２７−ＧおよびＪへ
ＳＣＨ２ＤＣＯＮＨ　ＩＲ８１０゜１Ｊノ シリカゲルＴ　Ｌ　Ｃ：　Ｍｅｒｋ　Ａｒｔ　５７１４
゜実施例１９ａ−０−デメチル−７−Ｎ−ジメチルアミ
ノメチレンマイトマイシンＧ（化合物１）乾燥したジメ
チルホルムアミド（以下ＤＭＦと略ｔ）１ｍｌにジメチ
ルホルムアミドジメチルアセクール（以下ＤＭＦＡと略
す）０．１ｍｌと９ａ−〇−デメチルマイトマイシンＧ
９０．ｍｇを加え、窒素気流下に室温で６時間攪拌する
。

溶媒を減圧下で留去した後、ＣＨＣＲｓ　Ｍ　ｅ　ＯＨ
（９８：　２　ｖ／ｖ）を展開溶媒とするシリカゲルカ
ラムクロマ・トゲラフイーにより生成物を分離する。

生成物は再度シリカゲルカラムクロマトグラフィーによ
り精製し、ＡｃＯＥｔ−ＭｅＯＨ（９９：ＩＶ／Ｖ）で
溶出した溶液を減圧濃縮し、暗緑色ペースト状物質を単
離する。この物質を少量のＣＨＣｌ３にとかし、その溶
液をシクロヘキサン中に滴下すると化合物１が緑色の沈
殿として析出する。

これを戸別して８１ｍｇの化合物１を得る。収率７５％
。

’　Ｈ−Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨ　ＣＩ　３）　
　：δ１．８６（３Ｈ，Ｓ）。

２．１９（３Ｈ，ｓ）、　２．２６（２８，’ｍ）、　
３．０３（３Ｈ，ｓ）。

３．０７（３Ｈ，ｓ）、　３．４８（ｌｔｌ、　ｄｄ、
　Ｊ＝１２．７．１．３）。

ＩＲ（ＫＢｒ）　　＋３４００．　２９２８．　２８５
４．　１６４４．　１６２０゜１５２９、　１３７６、
　１３０６．　１１１３．　１０５４ｃｍ−’。

ＭＳ　　（ｍ／ｚ）　　：３２８（Ｍ＋）３１１．　２
８４．　２９５゜高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ”−３２８，
１５１７（ｃ、ＬｏＬＯ３に対する計算値−３２８，１
５３３）。

ＴＬＣ（ＣＨＣｊ２ｓ　　　Ｍ　ｅＯＨ，１９：　１　
　ｖ／ｖ　）：Ｒｆ＝０．４０゜ 実施例２　１ａ−デメチル−７−Ｎ−ジメチルアミノメ
チレンマイトマイシンＧ（化合物２）５３ｍｇの１ａ−
デメチルマイトマイシンＧを出発原料として、実施例１
とほぼ同様の操作により緑色粉末として化合物２４７ｍ
ｇが得られる。

収率７４％。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨＣｌ２　）：δ１．９
５　（３Ｎ、　ｓ）　。

２．８５（２Ｈ，ｂｒ、ｓ）、　３．０５（３Ｈ，ｓ）
、　３．１０（３ｆｌ、　ｓ）。

３．１Ｈ３Ｈ，ｓ）、　３．５５（ＩＨ、ｂｒ、ｄ、　
Ｊ＝１２．９）。

４．２７（１８，ｄ、　Ｊ＝１２．９）、　５．４２（
ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝０．６）。

６．２２（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝０．６）、　７．７４（Ｉ
Ｈ，Ｓ）Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ　）　　＋３２９２．２９３
０．２８５４．１６４５．１６２２゜１５９９、１５７
２．１５３２．１４３５．１３７６、１３０４．１２５
４゜１２１４、１１１１．１０８３．１０５３．９３９
　ｃｍ−’。

ＭＳ　（ｍ／ｚ）　　：３２８（Ｍａ、　３１３．２９
７．２８２，２５４゜計算値−３８９）、　３７１．３
４６．３２８．２９５゜ＴＬＣ（ＣＨＣＩ３−ＣＨ３０
Ｈ，９：　１　ｖ／ｖ　）：Ｒｆ＝０．３３゜ 分画Ａを濃縮すると４０．３　ｍｇの化合物６ｄが暗緑
色の固体として得られる。収率３６％。

分画Ａから得られる化合物が６ｄであることは次の事実
から明らかである。

Δから得られた固体４０．３　ｍｇを１ｍｌのＣＨ，Ｏ
Ｈに溶解し、４ｍｇのＫ　２　ＣＯ３を加え、室温で８
０分間攪拌する。反応液に９ｍｌのＣＨＣＡ３を加え、
短いシリカゲルカラムを用いるクロマトグラフィーを行
い、ＣＨＣ１３−ＭｅＯＨ（９：　１　ｖ／ｖ）で溶出
する。溶出液を減圧濃縮し、再度ＣＨＣｌ３−’ＣＨ３
０Ｈ（９２：　８　ｖ／ｖ）を用いてシリカゲルカラム
クロマトグラフィーを行い、溶出する緑色バンド部分を
減圧濃縮する。残渣にｎ−へキサンを少量加えて再び減
圧下に溶媒を留去、乾燥し、１３、８　ｍｇの暗緑色粉
末を得る。本物質の物理化学的性質は前記の化合物６Ｃ
と同一である。収率４７％。

実施例７ 本発明に含まれるいくつかの化合物の各種細菌類に対す
る抗菌活性を最少生育阻止濃度（μｇ／ｍｌ）により第
１表に示す。最少生育阻止濃度は寒天希釈法により、ｐ
　Ｈ７，０で測定された。表中細菌に対して用いられて
いる記号は次の通りである。

ＳＦ　　ストレプトコッカス・フェカリスＡＴＣＣ１０
５４１、ｓＡ　スフフィロコツカス・アウレウスΔＴＣ
Ｃ６５３８Ｐ、ＢＳ　　バチルス　ズブチリス　１０７
０７．ＰＶ　　プロテウス・ブルガリスＡＴＣＣ６８９
７，ＳＳ　　シゲラ・ソンネイＡＴＣＣ９２４）Ｏ，Ｋ
Ｐ　　クレブシラ・ニューモニアエＡＴＣＣ１００３１
゜ また表中ＭＭ−ＣはマイトマイシンＣを表す。

第１表　抗菌活性（最少生育阻止濃度、ｘ／ｍｌ＞実施
例８　サルコーマ１８０固型腫瘍に対する抗腫瘍活性お
よび毒性。

本発明に含まれる化合物の中からいくつかの化合物を例
にとり、ザルコーマ１８０固型腫瘍に対する抗腫瘍活性
（ＥＤｓｏ）と急性毒性（ＬＤｓｏ）および末梢白血球
数に対する影響（ＷＢＣ４０００）を第２表に示した。

ＷＢＣ，。。。は末梢白血球数を４０００／ｍｍ３に減
少させる薬物の投与量を表す。実験はすべてｄｄｙマウ
スを用いて行ったものであり、具体的な実験操作は特願
昭５９（１２４２８に示されている。

第２表 実施例９　白血病Ｐ−３８８に対する抗腫瘍活性移植後
７日目のＰ−３８８腹水腫瘍胆癌マウス（ＤＢＡ／２）
の腹腔から腹水を採取した。この腹水中のＰ−３８８細
胞数を計測し、滅菌生理食塩水を用いて、５Ｘ１０６個
／ｍｌの腫瘍細胞浮遊液を調製し、その０．２ｍｌ　（
Ｉ　Ｘ　１０６個の細胞を含む）を、体重が２０−２５
ｇのＣＨ２ＤＣＯＮＨＦ、マウスの腹腔内に移植した。

腫瘍移植後２４時間目に１群６匹のＣＨ２ＤＣＯＮＨＦ
、マウスの腹腔内に被検薬剤を一回投与し、生存日数を
３３日間観察した。薬剤の効果判定は、移植後３３３日
目平均生存日数の、対照群（無処理群）の平均生存日数
に対する比（延命率、ＩＬＳ％、Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　
Ｌｉｆｅ　５ｐａｎ）で行い、その結果を第３表に示し
た。またマイトマイシンＣに対して耐性のＰ−３８８を
用いて行った同様の実験結果を第４表に示した。第３表
、第４表から化合物３ａの最大延命率は夫々２１３％。

１４３％であり、化合物Ａ（合成例を参考例に示す）の
７５％、７３％と比べると、３ａが優位にすぐれた抗腫
瘍活性を有することが明らかであり、したがって化合物
３ａは化合物Ａに比べて、よりすぐれた臨床効果が期待
できる。なお、同様な実験で投与量１０ｍｇ／ｋｇにお
ける化合物１のＩＬＳは８３％であった。

第３表　Ｐ−３８３ｌｅｕｋｅｍｉａ　　に対する効果
（ＩＬＳ％）投与量　　　　化合物３ａ　　　　化合物
Δｍｇ　／　ｋｇ ０、０６２５　　　　　　　　　　　　１５０、１２５
　　　　　　　　　　　　　４８０、２５　　　　　　
２ｆｌ　　　　　　　４５０、５　　　　　　　５３　
　　　　　６３１、０　　　　　　　５８　　　　　　
６８２、０　　　　　　　５８　　　　　　７５４．０
　　　　　　１４５　　　　　　２０６、０　　　　　
　２１３　　　　　−第４表　マイトマイシンＣ耐性ｐ
−３３８１ｅｕｋｅｌＴｌｉａに対する効果（ＩＩ、８
％） 参考例　？−Ｎ−ジメチルアミノメチレンマイトマイシ
ンＣ（化合物Ａ；特開昭５９−１４８６の実施例８に記
載されている化合物） マイトマイシンＣを原料として実施例３と同様の操作に
より化合物Δが得られる。

’Ｈ−ＮＭＲ（ＣＨ２ＤＣＯＮＨ（１３）：δ１．９３
　（３Ｈ，ｓ）　。

２．８０（ＩＨ，ｄｄ、Ｊ＝４．４．２．０）、　２．
９０（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝４．４）。

３．０４（３Ｈ，ｓ）、　３．０８（３８，ｓ）、　３
．２２（３Ｈ，Ｓ）。

３．５０（ＩＨ，ｄｄ、　Ｊ＝１２、？、　２．０）、
　３．６１（ＩＨ，ｄｄ。

Ｊ＝ｉｏ、５．４．４）、　４．２０（ＬＨ，ｄ、　Ｊ
＝　１２．ｎ。

４．５０（ＩＨ，ｄｄ；　δ４０．７．１０．５＞、　
４．７４（２Ｎ、　ｂｒ、）。

４．７８（１１（、ａａ、　Ｊ＝１０．７．４．４）、
　７．６９（ｌｔｌ、　ｓ　）。

Ｉ　Ｒ（ＫＢ　ｒ　）　　：３３１０．２９４０．１７
１８．１６２４．１５４０１３０６、１０５９ｃｍ−’
。

ＭＳ　（ｍ／　ｚ）　　：３８９（Ｍ”）、　　３５７
．　３４６．　３２８゜３１３、　２９７　。

高分解能Ｍ　Ｓ　：　Ｍ＋＝　３８９．１７２０（ｃ、
ａｒｔ□３ＮＳＯ５に対する計算値＝３８９．１６９７
）。

Ｔ　Ｌ　Ｃ（ＣＨＣＲ３Ｍ　ｅ　ＯＨ１９：ｌｖ／ｖ）
：Ｒｆ＝０．４０゜ 発明の効果 化合物（１）は優れた抗菌、抗腫瘍作用を有する。

特許出願人　（１０２）協和醗酵工業株式会社代表者　
　加　　藤　　幹　　夫 く３２） 手続補正書 １、事件の表示 昭和６０年特許願第３１０７４号 ２、発明の名称 ７−Ｎ−アミノメチレンマイトマイシン誘導体、製造法
及び抗腫瘍剤 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 郵便番号　１００ 住所　　東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称　（
１０２＞協和醗酵工業株式会社する。

／ｎＩ　　Ｑ　ｎ賓Ｑ４：、ｔｒｚ　ｒ／　ｌｌ：ｏＺ
ｌ　？　ｒつＱ　ＯＺＩ　Ｉ−を丁ｒする。

（３）２０頁９行のｒｌ　７３０Ｊをｒｌ　７０３」に
訂正する。

（４）２３頁１行のｒ３．ｏ　２　（３Ｈ，ｓ）、Ｊを
削除する。

手続補正書 昭和６０年？月／日 １、事件の表示 昭和６０年特許願第３１０７４号 ２、発明の名称 ７−Ｎ−アミノメチレンマイトマイシン誘導体、製造法
及び抗腫瘍剤 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 郵便番号　１００ 住所　　東京都千代田区大手町−丁目６番１号名称　（
１０２）協和醗酵工業株式会社明細書の発明の詳細な説
明の欄 ５、補正の内容 （１）　　１０頁Ｔ１行〜１１頁１行の「１−プロピル
」を（３）　　１２頁３行のｒ（Ｉ）Ｊをｒ（ＴＩ）Ｊ
に訂正する。

（４）　　１２真下７行のｒ　（ｒＶ）　Ｊをｒ（ＩＩ
）、Ｊに訂正する。

（５）　　１７頁１行のｒＭｅｒｋ」を「ＭｅｒＣｋ」
に訂正する。

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. （１）式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２は同一もしくは異なって水素原
   子または低級アルキル基を表す。Ｒ＿３、Ｒ＿４はＲ＿
   ３が水素原子でＲ＿４が−ＣＨ＿２ＯＣＯＮＨ＿２また
   は▲数式、化学式、表等があります▼を表すか、または Ｒ＿３とＲ＿４が一体となって＝ＣＨ＿２を表す。 ＹおよびＺは同一もしくは異なって水素原子またはメチ
   ル基を表す。■はα結合またはβ 結合を表す。ただし、Ｒ＿４がβ配位をしている場合に
   はＹは水素原子を表す。）で表されるマイトマイシン誘
   導体。
2. （２）式（ I ）でＲ＿３が水素原子でＲ＿４が−ＣＨ
   ＿２ＤＣＯＮＨ＿２である特許請求の範囲第１項記載の
   マイトマイシン誘導体〔以下、化合物（ I −１）とい
   う〕。
3. （３）Ｒ＿３がβ−水素原子でＲ＿４がα−ＣＨ＿２Ｏ
   ＣＯＮＨ＿２である特許請求の範囲第２項記載のマイト
   マイシン誘導体。
4. （４）Ｒ＿１、Ｒ＿２およびＺがメチル基で、Ｙが水素
   原子である特許請求の範囲第２項記載のマイトマイシン
   誘導体。
5. （５）式（ I ）でＲ＿３が水素原子でＲ＿４が▲数式
   、化学式、表等があります▼である特許請求の 範囲第１項記載のマイトマイシン誘導体。
6. （６）式（ I ）でＲ＿３およびＲ＿４が一体となって
   ＝ＣＨ＿２を表す場合の特許請求の範囲第１項記載のマ
   イトマイシン誘導体。
7. （７）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｙ、Ｚおよび■は前記と同義
   である）で表される化合物を加溶媒分解することを特徴
   とする化合物（ I −１）の製造法。
8. （８）式（ I ）で表されるマイトマイシン誘導体を有
   効成分とする抗腫瘍剤。