JPS61215331A - 血栓溶解剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は医薬、殊に酵素を有効成分とする血栓溶解剤に
係る。

（従来の技術） 循環器系障害を伴う成人病や外傷性疾患の治療に際して
は血栓溶解剤を必要とする場合が多々あり、この目的で
各種の血栓溶解剤が開発使用されている。血栓溶解剤の
有効成分として酵素類を用いる場合もあり、例えばウロ
キナーゼ等はその有効性が認められているが、従来のこ
の種の酵素系血栓溶解剤はその有効成分が生体からの抽
出物であるために高価である点並びに吸収性及び安定性
の観点から剤形が注射剤に制限される点に難点があった
。

（発明が解決しようとする問題点乃至発明の課題）本発
明の基本的課題は、安全性の高い酵素製剤であるにも拘
らず容易に且つ安価に製造可能であり、従って廉価な血
栓溶解剤を提供することにある。

本発明の他の課題は、通常の製剤技術により経口投与剤
にも非経口投与剤にも容易になすことができ、従って剤
形に制限を受けない血栓溶解剤を提供することにある。

（問題点乃至課題を解決するための手段及び作用）本発
明によれば、上記の問題点乃至課題は、セミアルカリプ
ロテアーゼ又はそのポリアルキレングリコール修飾体を
有効成分としていることを特徴とする、血栓溶解剤によ
り解決される。本発明によるこの血栓溶解剤は少なくと
も１種類の製剤用安定化担体を含有していることもでき
る。

即ち１本発明は抗炎症及び抗腫瘍作用を有する蛋白分解
酵素として従来から知られていたセミアルカリプロテア
ーゼが血栓溶解作用をも有していることの発見を基礎と
するものである。

セミアルカリプロテアーゼは白色結晶状を呈し、分子量
約３００００、等電点６゜５．１７［３１４個のアミノ
酸より構成される物質であって。

Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｍ５ｌｌｅｕｓの培養により
工業的に大量生産することができ、従って廉価に入手す
ることができる。このセミアルカリプロテアーゼはポリ
アルキレングリコール、例えばポリエチレングリコール
で修飾することができ、これによって抗原性を低下させ
且つ経口投与時における吸収性を向とさせることができ
、更には血液中での安定性を著しく増加させることが可
能になる。製剤化に際して担体として高分子系物質例え
ばアミノ酸、アルブミン、ヒドロキシプロピルメチルセ
ルロース等を用いればセミアルカリプロテアーゼ又はそ
の修飾体の保存安定性を向上させることができ、又作用
の安定持続性をもたらすことができる。

本発明による血栓溶解剤は通常の製剤技術により例えば
錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等となして経口的に投
与することができ、又注射剤、坐剤、軟膏剤等となして
非経口的に投与することができる。更に、本発明による
血栓溶解剤は他の薬剤例えば制癌剤等と併用してその効
果を助長させるために用いることができる。

投与量は疾病の程度、投与方法、剤形等に依存するが、
経口投与の場合に成人に対して１−１０００ｍｇ／日の
範囲内、殊に１００ｍｇ／日程度が好ましい。

（実施例等） 次に修飾セミアルカリプロテアーゼの製造例。

製剤例、薬効薬理試験例等に関連して本発明を更に詳細
に説明する。

Ｊ（修飾セミアルカリプロテアーゼの製造）２−ｏ−メ
トキシポリエチレングリコール−４゜６−ジクロロ−８
−トリアジン　２００ｍｇとセミアルカリプロテアーゼ
　２５ｍｇとを０．１Ｍ硼酸緩衝液中で冷温条件下（４
℃）に２時間反応させた後に限外濾過し、凍結乾燥すれ
ばポリエチレングリコール修飾セミアルカリプロテアー
ゼが得られる。

ｌ肛涯−よ（錠剤） 下記処方で諸成分を配合し、混合し、打錠して錠剤化し
１次いでメタクリル酸ポリマーによる腸溶性皮膜を常法
により施して経口用錠剤を得た。

セミアルカリプロテアーゼ　　２０（ｍｇ）アビセル　
　　　　　　　　　　２０ バフィラ−１０１，２０ ステアリン酸マグネシウム　　　２ 乳糖　　　　　　　　　　　　５８ 計　　　　１２０ｍｇ／錠 婁す狭量１　２（外用クリーム剤） ４％牛血清アルブミン溶液にセミアルカリプロテアーゼ
を添加溶解させて２．０％濃度のセミアルカリプロテア
ーゼ溶液を調製し、次いで凍結乾燥させた。この組成物
を下記処方で賦形剤等と配合し、常法により外用クリー
ム剤を調製した。

上記組成物　　　　　　　　　０．５　（ｇ）セパチン
酸ジエチル　　　　　８．０ 鯨蝋　　　　　　　　　　　　５．０ ポリオキシエチレンオイル エーテルリン酸ナトリウム　６．０ ワセリン　　　　　　　−１−一 計　　１００　　ｇ ｌ亙涯−立（坐剤） 下記の処方で配合し、常法により坐剤を調製した。

セミアルカリプロテア−・ゼポリ エチレングリコール修飾体　　３０（ＩＩｌｇ）油脂性
基剤（カカオ脂）　　−一１に一−１個当り　１７００
（ＩＩｌｇ） 理験　１ （フィブリン分解活性、　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ試験）ａ）
被験薬物 １）セミアルカリプロテアーゼ （天野製薬株式会社製の［セアプロー ゼ　　５Ｊ） ２）トリプシン　（牛膵起原） （マイルス、ラボラトリーズ、リミテ ッド製） ３）α−キモトリプシン　（牛膵起原）（マイルス、ラ
ボラトリーズ、リミテ ッド製） ｂ）測定法 ０．１５　Ｍ　ＮａＣ１含有０．０１　Ｍ燐酸緩衝液（
ｐＨ７，５）に被験薬物を各種濃度で溶解させ、その１
０μ悲をプラスミノーゲンフリーのフィブリン平板５（
北里研究所−第１化学薬品株式会社の「北研」ロット番
号８３０４）の穴に入れる。次いで、このプレートを湿
潤箱に入れ３７℃で４時間反応処理した。得られた溶解
窓の面積を測定しく但し穴の大きさ３　ｘ　３　■を差
、し引いた）、この測定値から被験薬物のフィブリン分
解作用を比較検討した。

Ｃ）結果及び考察 結果は第１図に示される通りであり、被験薬物は何れも
フィブリン分解作用を示し、その作用強さは トリプシン≧セミアルカリプロテ アーゼ〉α−キモトリプシン の順序であった。

一般にトリプシンはフィブリン分解作用を有しているが
、セミアルカリプロテアーゼのこの作用はトリプシンに
匹敵するものであることが判明した。

理　　　　　　２ （血栓溶解作用、ｉｎ　ｖｉｖｏ試験）ａ）試験方法 体重１０−１５　ｋｇの雄性雑種犬を実験動物とし、２
４時間の絶食後に麻酔下で筋弛緩薬を投与して不動化さ
せた。その後に人工呼吸下で大腿動脈に作製した血栓の
大きさをセミアルカリプロテアーゼ（天野製薬株式会社
製の「セアプローゼＳＪ）及び修飾セミアルカリプロテ
アーゼの経口投与前並びに投与（１０単位／ｋｇ）後３
，６．９及び１２時間後に測定して血栓溶解率を算定し
た。

尚、血液凝固を防止するために、ヘパリンを初回１００
０単位／ｋｇ、以後１００単位／ｋｇ／ｈｒで静脈内に
持続注入した。

ｂ）結果及び考察 結果は第２図に示される通りであり、対照区（薬物無投
与群）と比較する場合に試験区では薬物の投与後３時間
目から血栓溶解率の上昇が見られ、又薬物に関して修飾
体と非修飾体とを比較する場合に修飾体に優位性が認め
られた。

これらの事実はセミアルカリプロテアーゼが血栓溶解作
用を有していることを如実に示すものである。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明による血栓溶解剤の有効成分であるセミ
アルカリプロテアーゼと対照体であるトリプシン及びα
−キモトリプシンとのフィブリン溶解活性を比較して示
したグラフ、第２図はセミアルカリプロテアーゼ及びそ
の修飾体の血栓溶解率をその時間経過と共に示したグラ
フである。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）セミアルカリプロテアーゼ又はそのポリアルキレ
   ングリコール修飾体を有効成分としていることを特徴と
   する、血栓溶解剤。
2. （２）ポリアルキレングリコール修飾体がポリエチレン
   グリコール修飾セミアルカリプロテアーゼであることを
   特徴とする、特許請求の範囲第１項に記載の血栓溶解剤
   。
3. （３）セミアルカリプロテアーゼ又はそのポリアルキレ
   ングリコール修飾体を有効成分とし、少なくとも１種類
   の製剤用安定化担体を含有していることを特徴とする、
   血栓溶解剤。
4. （４）製剤用安定化担体が高分子性物質であることを特
   徴とする、特許請求の範囲第３項に記載の血栓溶解剤。
5. （５）高分子性物質がアミノ酸類、アルブミン類又はセ
   ルロース類であることを特徴とする、特許請求の範囲第
   ４項に記載の血栓溶解剤。