JPS61265100A - アルドラ−ゼ測定用試薬およびそれを用いたアルドラ−ゼ分析方法 - Google Patents
アルドラ−ゼ測定用試薬およびそれを用いたアルドラ−ゼ分析方法Info
- Publication number
- JPS61265100A JPS61265100A JP10564485A JP10564485A JPS61265100A JP S61265100 A JPS61265100 A JP S61265100A JP 10564485 A JP10564485 A JP 10564485A JP 10564485 A JP10564485 A JP 10564485A JP S61265100 A JPS61265100 A JP S61265100A
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- aldolase
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- measurement
- measuring
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明はアルドラーゼ測定用試薬およびそれを用いたア
ルドラーゼ分析方法に係り、特に自動分析装置での測定
に用いるのに好適なアルドラーゼ測定用試薬およびそれ
を用いたアルドラーゼ分析方法に関する。
ルドラーゼ分析方法に係り、特に自動分析装置での測定
に用いるのに好適なアルドラーゼ測定用試薬およびそれ
を用いたアルドラーゼ分析方法に関する。
アルドラーゼはフルクトース１．６−２リン酸を三炭酸
に分解する酵素であり、諸細胞中に存在し、特に筋肉中
に多量に含まれている。このアルドラーゼは細胞の崩壊
により血液中に増量するために、心筋梗塞、急性肝炎、
進行性筋ジストロフィ、悪性腫瘍、白血病、出血性およ
び化濃性膵炎、肺栓塞、溶血性貧血、四肢の壊死等で血
清中のアルドラーゼの活性が−Ｅ昇する。したがって、
アルドラーゼの活性値を測定することは、上記疾患に対
する臨床的な意義をもち生化学検査での重要な測定項目
として重視されている。
に分解する酵素であり、諸細胞中に存在し、特に筋肉中
に多量に含まれている。このアルドラーゼは細胞の崩壊
により血液中に増量するために、心筋梗塞、急性肝炎、
進行性筋ジストロフィ、悪性腫瘍、白血病、出血性およ
び化濃性膵炎、肺栓塞、溶血性貧血、四肢の壊死等で血
清中のアルドラーゼの活性が−Ｅ昇する。したがって、
アルドラーゼの活性値を測定することは、上記疾患に対
する臨床的な意義をもち生化学検査での重要な測定項目
として重視されている。
従来のアルドラーゼ活性値の測定は、紫外部の波長を使
用し補酵素であるＮ Ａ Ｄ Ｈの貼付時間当りの吸光
度の変化（減少又は上昇）をａ＋ＩＩ定し、上記アルド
ラーゼの活性値を求める紫外部測定方法が主なものであ
る（例えば臨床酵素ハンドブック講談社発行第５３９頁
、実践臨床化学（増補版）医歯業出版発行第４４６頁）
。
用し補酵素であるＮ Ａ Ｄ Ｈの貼付時間当りの吸光
度の変化（減少又は上昇）をａ＋ＩＩ定し、上記アルド
ラーゼの活性値を求める紫外部測定方法が主なものであ
る（例えば臨床酵素ハンドブック講談社発行第５３９頁
、実践臨床化学（増補版）医歯業出版発行第４４６頁）
。
Ｎ Ａ ｒ） Ｈは第２図に示すように、３００〜４０
０ｎｍに吸収特性をもちその最大吸収は３４０ｎｍにあ
る。一方、ＮＡＤＨの酸化型であるＮＡＤ”は、上記３
４０ｎｍでは吸収を示さない。従って、上記紫外部測定
法はこの事実を利用しＮＡｒ）Ｈの酸化型への変化（Ｎ
ＡＤの還元型もある）を利用し、一つの酵素反応の生成
物をＮＡｒ）Ｈを酵素とする他の酵素反応に結び付ける
ことによって目的の酵素の活性値を測定するものである
。
０ｎｍに吸収特性をもちその最大吸収は３４０ｎｍにあ
る。一方、ＮＡＤＨの酸化型であるＮＡＤ”は、上記３
４０ｎｍでは吸収を示さない。従って、上記紫外部測定
法はこの事実を利用しＮＡｒ）Ｈの酸化型への変化（Ｎ
ＡＤの還元型もある）を利用し、一つの酵素反応の生成
物をＮＡｒ）Ｈを酵素とする他の酵素反応に結び付ける
ことによって目的の酵素の活性値を測定するものである
。
Ｎ Ａ Ｄ ＴＴの酸化型の変化を用いたアルドラーゼ
の反応について説明すると、検体に酵素および補酵素を
含んだ第１試液と、基質を含んだ第２試液を作用させる
と基質であるフルクトース１．６−２リン酸（Ｆ”ｒ）
Ｐ）は、検体中のアルドラーゼ（ＡＬＤ）の作用により
グリセルアルデビドー３リン酸（Ｇ Ａ Ｐ ）とジヒ
ドロキシアセトンリン酸（ＤＡＰ）に分解される。・・
・（１）武生じたグリセルアルデヒド−３リン酸（Ｇ
Ａ Ｐ ）はさらにトリオースフォスフニー１〜イソメ
ラーゼ（Ｔ Ｉ Ｎ）の作用によりジヒドロキシアセト
ンリン酸（ＤＡＰ）になる。・・・（２）式（２）式で
生成したジヒドロキシアセトンリン酸（ｒ）ＡＰ）が、
グリセロール−３リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）の
存在下でグリセロール−３リン酸（Ｇ Ｐ ）に変化す
る際、Ｎ Ａ Ｄ ＨはＮ Ａ Ｄ Ｈの酸化型（ＮＡ
Ｄ”） に変化する。この際のＮＡＤＨの吸光度の減
少を３４０ ｎ ｍ −３８０ｎｍの適当な２波長、も
しくは−波長で測定することによってアルドラーゼの活
性を求めている。
の反応について説明すると、検体に酵素および補酵素を
含んだ第１試液と、基質を含んだ第２試液を作用させる
と基質であるフルクトース１．６−２リン酸（Ｆ”ｒ）
Ｐ）は、検体中のアルドラーゼ（ＡＬＤ）の作用により
グリセルアルデビドー３リン酸（Ｇ Ａ Ｐ ）とジヒ
ドロキシアセトンリン酸（ＤＡＰ）に分解される。・・
・（１）武生じたグリセルアルデヒド−３リン酸（Ｇ
Ａ Ｐ ）はさらにトリオースフォスフニー１〜イソメ
ラーゼ（Ｔ Ｉ Ｎ）の作用によりジヒドロキシアセト
ンリン酸（ＤＡＰ）になる。・・・（２）式（２）式で
生成したジヒドロキシアセトンリン酸（ｒ）ＡＰ）が、
グリセロール−３リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＤＨ）の
存在下でグリセロール−３リン酸（Ｇ Ｐ ）に変化す
る際、Ｎ Ａ Ｄ ＨはＮ Ａ Ｄ Ｈの酸化型（ＮＡ
Ｄ”） に変化する。この際のＮＡＤＨの吸光度の減
少を３４０ ｎ ｍ −３８０ｎｍの適当な２波長、も
しくは−波長で測定することによってアルドラーゼの活
性を求めている。
これらの反応を反応式で示すと下記のようになる。
Ｌ Ｄ
Ｆ Ｄ Ｐ □ Ｇ Ａ Ｐ ＋ Ｄ Ａ−Ｐ
・・・（１）ＩＭ Ｇ Ａ Ｐ□→ｒ）ＡＰ ・・・ （２
） Ｄ Ｈ ２Ｄ Ａ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ＋ ２ Ｈ＋
−−−−−−−ン ２ Ｇ Ｐ＋２ＮＡＤＨ”
・・・ （３）またＮＡｎ＋の還元型（ＮＡ
ｒ）Ｈ）への変化を利用したアルドラーゼの活性値の測
定は下記の反応によって行われる。この反応ではＮＡＤ
Ｈの吸光度の増加を測定することで、上記活性値を求め
ることにある。
・・・（１）ＩＭ Ｇ Ａ Ｐ□→ｒ）ＡＰ ・・・ （２
） Ｄ Ｈ ２Ｄ Ａ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ＋ ２ Ｈ＋
−−−−−−−ン ２ Ｇ Ｐ＋２ＮＡＤＨ”
・・・ （３）またＮＡｎ＋の還元型（ＮＡ
ｒ）Ｈ）への変化を利用したアルドラーゼの活性値の測
定は下記の反応によって行われる。この反応ではＮＡＤ
Ｈの吸光度の増加を測定することで、上記活性値を求め
ることにある。
Ａ ｒ、 ｎ
Ｆｒ）Ｐ−−一→ Ｇ Ａ Ｐ ＋ Ｄ Ａ Ｐ
・・・ （４）ＩＭ ＤＡＰ−一一四 Ｇ Ａ Ｐ ・・・
（５）Ｇ Ａ Ｐ Ｄ Ｈ ２Ｇ Ａ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ ” ＋ ２ ＨＰ
Ｏ４−−□２ Ｄ Ｇ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ
・・・ （６）次に、従来試みられているＮＡ Ｉ）Ｈ
の酸化型への変化を用いたアルドラーゼの酵素分析用の
処理を第１表に示す。
・・・ （４）ＩＭ ＤＡＰ−一一四 Ｇ Ａ Ｐ ・・・
（５）Ｇ Ａ Ｐ Ｄ Ｈ ２Ｇ Ａ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ ” ＋ ２ ＨＰ
Ｏ４−−□２ Ｄ Ｇ Ｐ ＋ ２ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ
・・・ （６）次に、従来試みられているＮＡ Ｉ）Ｈ
の酸化型への変化を用いたアルドラーゼの酵素分析用の
処理を第１表に示す。
第 １ 表
上記試薬組成において検体量２０μＱ、第１液３００μ
Ω、第２液７５μＱ、測定波長λ２ （主波長）＝３４
０ｎｍ、λ１ （副波長）＝３７６ｎｍの分析条件で測
定すると、アルドラーゼの活性値は（７）式から算出で
きる。
Ω、第２液７５μＱ、測定波長λ２ （主波長）＝３４
０ｎｍ、λ１ （副波長）＝３７６ｎｍの分析条件で測
定すると、アルドラーゼの活性値は（７）式から算出で
きる。
ｍｕ／ｍＱ＝７１Ｅ／ｍ１ｎＸＫ −（７）ε
ＸｖＸｄ 但し ε＝ＮＡｒ）Ｈのモル吸光係数 ｄ＝セル長 ■−検体址 ■＝総液量 ｌ Ｈ／ｍ１ｎ＝ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ１分間当りの吸光度
変化に一理論定数 上記（７）式からアルドラーゼ活性０．１ｍｕ／ｍＱ当
りの測定感度は、０．５Ｘ１０−’ＯＤ／ｗｉｎとなる
。この測定感度からアルドラーゼ活性の測定限界値を求
めると、自動分析装置の紫外部類域で用いている測定波
長（λ、＝３４０ｎｍ、λ□＝３７６ｎｍ）でのノイズ
レベルを５×１０−’ＯＤ／ｍｉｎとしＳ／Ｎ＝２とす
れば、上記ラミドラーゼの活性値の測定限界値は２．０
ｍｕ／ｍＱとなる。アルドラーゼ活性の参考正常値範囲
は１ 、２−７ 、６ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑであり、特
に正常値下限である１、 、 ２ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑ
付近では、−上記限界値から、その測定が困難とな
る。
ＸｖＸｄ 但し ε＝ＮＡｒ）Ｈのモル吸光係数 ｄ＝セル長 ■−検体址 ■＝総液量 ｌ Ｈ／ｍ１ｎ＝ Ｎ Ａ Ｄ Ｈ１分間当りの吸光度
変化に一理論定数 上記（７）式からアルドラーゼ活性０．１ｍｕ／ｍＱ当
りの測定感度は、０．５Ｘ１０−’ＯＤ／ｗｉｎとなる
。この測定感度からアルドラーゼ活性の測定限界値を求
めると、自動分析装置の紫外部類域で用いている測定波
長（λ、＝３４０ｎｍ、λ□＝３７６ｎｍ）でのノイズ
レベルを５×１０−’ＯＤ／ｍｉｎとしＳ／Ｎ＝２とす
れば、上記ラミドラーゼの活性値の測定限界値は２．０
ｍｕ／ｍＱとなる。アルドラーゼ活性の参考正常値範囲
は１ 、２−７ 、６ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑであり、特
に正常値下限である１、 、 ２ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑ
付近では、−上記限界値から、その測定が困難とな
る。
しかし、実際の検体ではこれ以下の活性を示すものもあ
る。そこで、測定限界値を０ 、５ ｍ ｕ ／ｍＱと
すると、この測定限界値を得るためにハードウェアから
解決するとすれば、上記測定波長におけるノイズレベル
に対してさらに４倍の性能向上が要求されることになる
。従って、現状ではハードウェアによる解決は技術的に
困難となる。
る。そこで、測定限界値を０ 、５ ｍ ｕ ／ｍＱと
すると、この測定限界値を得るためにハードウェアから
解決するとすれば、上記測定波長におけるノイズレベル
に対してさらに４倍の性能向上が要求されることになる
。従って、現状ではハードウェアによる解決は技術的に
困難となる。
以上のごと〈従来のアルドラーゼ測定用試薬でのＮ Ａ
Ｄ Ｈの酸化型への変化（またはＮＡＤ”の還元型へ
の変化）を利用した試薬組成によるアルドラーゼの活性
値測定法では、その測定感度が０．５Ｘ］ Ｏ−’ＯＤ
／ｗｉｎと低いため、２ 、０ ｍ ｕ／ ｍ Ｑ以下
の活性を精度よく測定することができないという欠点が
あった。
Ｄ Ｈの酸化型への変化（またはＮＡＤ”の還元型へ
の変化）を利用した試薬組成によるアルドラーゼの活性
値測定法では、その測定感度が０．５Ｘ］ Ｏ−’ＯＤ
／ｗｉｎと低いため、２ 、０ ｍ ｕ／ ｍ Ｑ以下
の活性を精度よく測定することができないという欠点が
あった。
本発明の目的は、高精度で試料中のアルドラーゼの活性
を測定することができるアルドラーゼ測定用試薬および
それを用いたアルドラーゼ分析方法を提供することにあ
る。
を測定することができるアルドラーゼ測定用試薬および
それを用いたアルドラーゼ分析方法を提供することにあ
る。
本発明者らは試料中アルドラーゼの活性値の測定方法に
ついて種々の検討をおこなった結果、試薬による測定感
度の向上を図ることができる下記の知見を得るに至った
。
ついて種々の検討をおこなった結果、試薬による測定感
度の向上を図ることができる下記の知見を得るに至った
。
すなわち、従来法のＮ Ａ Ｄ Ｈの酸化型への変化に
よる反応系をベースとし、さらにテトラゾリウム塩−ホ
ルマザンへの反応へ導くことで、有色のホルマザンを生
成させることができる。このホルマザンは、従来からそ
の有色度合が大きいと言われており、かつその有色は可
視部領域でも分光光度計としてのエネルギー強度が高い
５００ｎｍ〜６００ｎｍに吸収体を有する。このため、
ノイズレベルに対しても測定上有利であり、これから測
定感度の向上が図れることになる。ホルマザンの生成か
らアルドラーゼの活性値を求めるには、ホルマザンが吸
収する波長光を用い同一条件にて、アルドラーゼの標準
血清と検体との単位時間当りの吸光度変化を比較測定す
ることで容易にアルドラーゼの活性値を求めることがで
きる。
よる反応系をベースとし、さらにテトラゾリウム塩−ホ
ルマザンへの反応へ導くことで、有色のホルマザンを生
成させることができる。このホルマザンは、従来からそ
の有色度合が大きいと言われており、かつその有色は可
視部領域でも分光光度計としてのエネルギー強度が高い
５００ｎｍ〜６００ｎｍに吸収体を有する。このため、
ノイズレベルに対しても測定上有利であり、これから測
定感度の向上が図れることになる。ホルマザンの生成か
らアルドラーゼの活性値を求めるには、ホルマザンが吸
収する波長光を用い同一条件にて、アルドラーゼの標準
血清と検体との単位時間当りの吸光度変化を比較測定す
ることで容易にアルドラーゼの活性値を求めることがで
きる。
本発明は上記知見に基づきなされたものであり本願節１
の発明はフルクトース１．６−２リン酸、トリオースフ
ォスフェートイソメラーゼ、ニコチンアミドアデニンヌ
クレオチド、メトキシフェナージンメトサルフェイト、
ニトロブル−テトラゾリウム、グリセロール−３リン酸
デヒドロゲナーゼを主成分とすることを特徴とする検体
中のアルドラーゼ測定用試薬である。
の発明はフルクトース１．６−２リン酸、トリオースフ
ォスフェートイソメラーゼ、ニコチンアミドアデニンヌ
クレオチド、メトキシフェナージンメトサルフェイト、
ニトロブル−テトラゾリウム、グリセロール−３リン酸
デヒドロゲナーゼを主成分とすることを特徴とする検体
中のアルドラーゼ測定用試薬である。
そして、本願節２の発明はフルクトース１．６−２リン
酸、トリオースフォスフェートイソメラーゼ、ニコチン
アミドアデニンヌクレオチド、メトキシフェナージンメ
トサルフェイト、ニトロブル−テトラゾリウム、グリセ
ロール−３リン酸デヒドロゲナーゼを主成分とするアル
ドラーゼ測定用試薬と、アルドラーゼを含有する検体と
を混合し、所定時間経過後に上記混合液が吸収する波長
光の吸光度を測定することにより、前記検体中のアルド
ラーゼの活性値を求めることを特徴とするアルドラーゼ
分析方法である。
酸、トリオースフォスフェートイソメラーゼ、ニコチン
アミドアデニンヌクレオチド、メトキシフェナージンメ
トサルフェイト、ニトロブル−テトラゾリウム、グリセ
ロール−３リン酸デヒドロゲナーゼを主成分とするアル
ドラーゼ測定用試薬と、アルドラーゼを含有する検体と
を混合し、所定時間経過後に上記混合液が吸収する波長
光の吸光度を測定することにより、前記検体中のアルド
ラーゼの活性値を求めることを特徴とするアルドラーゼ
分析方法である。
次に本発明の詳細な説明する。
まず、本願節１の発明に係るアルドラーゼ測定用試薬の
処理を第２表に示す。
処理を第２表に示す。
第 ２ 表
上記第２表の試薬組成によるアルドラーゼの測定原理を
説明すると、下記のとおりになる。
説明すると、下記のとおりになる。
ＬＤ
ＦＴ）Ｐ −ｍ−→ Ｇ Ａ Ｐ ＋ Ｄ Ａ Ｐ
・・・ （８）ＴＩＭ Ｇ Ａ Ｐ −−−→ ＤＡＰ ・・・
（９）ＤＨ ２１）ＡＰ＋２ＮＡＤＨ＋２Ｈ”−□１２０Ｐ＋２ＮＡ
Ｄ” ・・・ （１０）メーーー□＼ 」 ｍＰＭｓ（酸化型） ｍＰＭｓ（還元型）但し ｍ
ＰＭｓ ：メトロキシフエナージンメトサルフエイト ＮＢＴ：ニトロブル−テトラゾリウム 上記各式のごとくアルドラーゼを含有した検体に、第１
試液および第２試液を作用させると、基質であるＦＤＰ
はＧ Ａ ＰとＤＡＰに分解される。
・・・ （８）ＴＩＭ Ｇ Ａ Ｐ −−−→ ＤＡＰ ・・・
（９）ＤＨ ２１）ＡＰ＋２ＮＡＤＨ＋２Ｈ”−□１２０Ｐ＋２ＮＡ
Ｄ” ・・・ （１０）メーーー□＼ 」 ｍＰＭｓ（酸化型） ｍＰＭｓ（還元型）但し ｍ
ＰＭｓ ：メトロキシフエナージンメトサルフエイト ＮＢＴ：ニトロブル−テトラゾリウム 上記各式のごとくアルドラーゼを含有した検体に、第１
試液および第２試液を作用させると、基質であるＦＤＰ
はＧ Ａ ＰとＤＡＰに分解される。
分解にて生じたＧＡＰはＴＩＭの作用でＤＡＰになりそ
の結果ＤＡＰは系２分子となる。この２分子のＤＡＰは
酵素Ｇ Ｄ Ｈの存在で２ＮＡＤＨと作用する。この際
第２試液中のＮＢＴはｍ Ｐ Ｍ Ｓの介在により容易
に還元され有色のホルマザンを生成する。このときのホ
ルマザンは、上記（１０）式から２ＤＡＰの反応に基づ
く２分子の反応であるために、１分子の対して２倍の発
色を有することになる。ホルマザンは第２図のとと＜、
５３０ｎｍ付近に最大吸収を示す。本実施例では、測定
波長を主波長＝ ５４６ ｎ ｍ、副波長＝７００ｎｍ
に設定して吸光度測定を行った。
の結果ＤＡＰは系２分子となる。この２分子のＤＡＰは
酵素Ｇ Ｄ Ｈの存在で２ＮＡＤＨと作用する。この際
第２試液中のＮＢＴはｍ Ｐ Ｍ Ｓの介在により容易
に還元され有色のホルマザンを生成する。このときのホ
ルマザンは、上記（１０）式から２ＤＡＰの反応に基づ
く２分子の反応であるために、１分子の対して２倍の発
色を有することになる。ホルマザンは第２図のとと＜、
５３０ｎｍ付近に最大吸収を示す。本実施例では、測定
波長を主波長＝ ５４６ ｎ ｍ、副波長＝７００ｎｍ
に設定して吸光度測定を行った。
第３表に従来のＮＡＤＨの酸化型への変化によってアル
ドラーゼの活性値を測定する従来法と、上記本実施例で
のアルドラーゼの活性値を測定する本発明法との０ 、
１ ｍ ｕ ／ ｍΩ 当りの測定感度を比較した結果
を示す。
ドラーゼの活性値を測定する従来法と、上記本実施例で
のアルドラーゼの活性値を測定する本発明法との０ 、
１ ｍ ｕ ／ ｍΩ 当りの測定感度を比較した結果
を示す。
第 ３ 表
上記第３表のごとく、本発明法では従来法に対し最終的
に４倍の測定感度を有している。また、この結果から本
発明法での測定感度、装置のノイズレベル、Ｓ／Ｎ＝２
から測定限界値を算出すると０ 、３ ｍ ｕ ／ ｍ
Ω の活性値となる。
に４倍の測定感度を有している。また、この結果から本
発明法での測定感度、装置のノイズレベル、Ｓ／Ｎ＝２
から測定限界値を算出すると０ 、３ ｍ ｕ ／ ｍ
Ω の活性値となる。
また、測定精度について従来法と本発明法との比較結果
を第４表に示す。
を第４表に示す。
第 ４ 表
一般に酵素の測定に必要な精度は、その測定の標準偏差
（ＳＤ）がその酵素の正常値幅の１７８〜１７１６以下
であることが必要であるといわれているために、アルド
ラーゼの場合はその精度はｌ５Ｐ＝０．３４〜０．６８
（ｍｕ／ｍＱ）より小さくなることが要求される。
（ＳＤ）がその酵素の正常値幅の１７８〜１７１６以下
であることが必要であるといわれているために、アルド
ラーゼの場合はその精度はｌ５Ｐ＝０．３４〜０．６８
（ｍｕ／ｍＱ）より小さくなることが要求される。
上記第４表のごとく、従来法ではその測定感度が低いた
め１ 、０ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑ 付近のアルドラーゼ
活性値における測定が困難であることがわかる。
め１ 、０ ｍ ｕ ／ ｍ Ｑ 付近のアルドラーゼ
活性値における測定が困難であることがわかる。
これに対し本発明法では、上記活性値においては約６倍
の高精度を得ることができるため正常値下限である１
、 ２ ｍ ｕ ／ ｍΩ 付近の低活性アルドラーゼ
でも精度よく測定することができる。
の高精度を得ることができるため正常値下限である１
、 ２ ｍ ｕ ／ ｍΩ 付近の低活性アルドラーゼ
でも精度よく測定することができる。
なお、第４表においてＣｖは変動率を示し、■は活性値
の平均値を示す。
の平均値を示す。
以上説明したように本発明によれば、試料中アルドラー
ゼ活性の測定において、その測定感度を向上することが
できる。したがって、ハードウェアを変更することなく
アルドラーゼ測定限界値を向上でき、かつ高精度の測定
結果を得ることができる。
ゼ活性の測定において、その測定感度を向上することが
できる。したがって、ハードウェアを変更することなく
アルドラーゼ測定限界値を向上でき、かつ高精度の測定
結果を得ることができる。
第１図は本発明によるアルドラーゼ分析方法により生成
したホルマザンの可視部領域での吸収スペクトルを示す
図、第２図は従来のアルドラーゼ測定法においてＮＡＤ
Ｈの紫外部類域での吸収スペクトルを示す図である。 １・・・ＮＡＤＨの波長に対する吸光特性、２・・・ホ
ルマザンの波長に対する吸光特性。
したホルマザンの可視部領域での吸収スペクトルを示す
図、第２図は従来のアルドラーゼ測定法においてＮＡＤ
Ｈの紫外部類域での吸収スペクトルを示す図である。 １・・・ＮＡＤＨの波長に対する吸光特性、２・・・ホ
ルマザンの波長に対する吸光特性。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、フルクトース１，６−２リン酸、トリオースフォス
フェートイソメラーゼ、ニコチンアミドアデニンヌクレ
オチド、メトキシフェナージンメトサルフェイト、ニト
ロブル−テトラゾリウム、グリセロール−３リン酸デヒ
ドロゲナーゼを主成分とすることを特徴とする検体中の
アルドラーゼ測定用試薬。 ２、フルクトース１，６−２リン酸、トリオースフォス
フェートイソメラーゼ、ニコチンアミドアデニンヌクレ
オチド、メトキシフェナージンメトサルフェイト、ニト
ロブル−テトラゾリウム、グリセロール−３リン酸デヒ
ドロゲナーゼを主成分とするアルドラーゼ測定用試薬と
、アルドラーゼを含有する検体とを混合し、所定時間経
過後に上記混合液が吸収する波長光の吸光度を測定する
ことにより、前記検体中のアルドラーゼの活性値を求め
ることを特徴とするアルドラーゼ分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10564485A JPS61265100A (ja) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | アルドラ−ゼ測定用試薬およびそれを用いたアルドラ−ゼ分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10564485A JPS61265100A (ja) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | アルドラ−ゼ測定用試薬およびそれを用いたアルドラ−ゼ分析方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61265100A true JPS61265100A (ja) | 1986-11-22 |
Family
ID=14413160
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10564485A Pending JPS61265100A (ja) | 1985-05-17 | 1985-05-17 | アルドラ−ゼ測定用試薬およびそれを用いたアルドラ−ゼ分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS61265100A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01113662A (ja) * | 1987-09-11 | 1989-05-02 | Abbott Lab | 特異的結合アッセイ装置および方法 |
-
1985
- 1985-05-17 JP JP10564485A patent/JPS61265100A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH01113662A (ja) * | 1987-09-11 | 1989-05-02 | Abbott Lab | 特異的結合アッセイ装置および方法 |
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