JPS6126848A - 二次元電気泳動装置 - Google Patents
二次元電気泳動装置Info
- Publication number
- JPS6126848A JPS6126848A JP59148978A JP14897884A JPS6126848A JP S6126848 A JPS6126848 A JP S6126848A JP 59148978 A JP59148978 A JP 59148978A JP 14897884 A JP14897884 A JP 14897884A JP S6126848 A JPS6126848 A JP S6126848A
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- JP
- Japan
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- dimensional
- weight
- staining
- gel
- electrophoresis
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- Granted
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
- G01N27/44773—Multi-stage electrophoresis, e.g. two-dimensional electrophoresis
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- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
この発明は二次元電気泳動装置に関し、詳しくは被検対
象の定量精度を向上できる二次元電気泳動装置に関する
。
象の定量精度を向上できる二次元電気泳動装置に関する
。
（ロ）従来技術
従来の二次元電気泳動装置における試料中の被検対象の
重量測定は、二次元目の電気泳動終了後にその平板ゲル
内に分離された被検対象の泳動スポットを銀染色法、ク
マレーブルー法などで染色して、その染色度の濃淡を光
学的、例えば吸光法により計測することによって得られ
た光学情報をコンピュータで量の情報に演算して行なっ
ていた。
重量測定は、二次元目の電気泳動終了後にその平板ゲル
内に分離された被検対象の泳動スポットを銀染色法、ク
マレーブルー法などで染色して、その染色度の濃淡を光
学的、例えば吸光法により計測することによって得られ
た光学情報をコンピュータで量の情報に演算して行なっ
ていた。
しかし、この方法では、被検試料のロフト毎に、被検対
象の泳動スポットの染色濃度が相違したり、また、二次
元目のゲル、染色試薬、染色時の温度などが変わると上
記の泳動スポットの重量が同じでもその染色濃度が異な
ったりして、各泳動スポットの定量精度が低下していた
。
象の泳動スポットの染色濃度が相違したり、また、二次
元目のゲル、染色試薬、染色時の温度などが変わると上
記の泳動スポットの重量が同じでもその染色濃度が異な
ったりして、各泳動スポットの定量精度が低下していた
。
（ハ）目的
この発明は以上の事情に鑑みなされたもので、その主要
な目的の１つは、二次元目の電気泳動終了後の平板ゲル
内に被検対象と同じで重量既知の比較試料を添加してお
いて、比較試料の染色濃度と重量との検量線を二次元目
のゲル毎に作成して、被検試料のロフト毎に染色濃度が
相違しても被検対象の各泳動スポットを高精度に定量測
定できるようにすることにある。
な目的の１つは、二次元目の電気泳動終了後の平板ゲル
内に被検対象と同じで重量既知の比較試料を添加してお
いて、比較試料の染色濃度と重量との検量線を二次元目
のゲル毎に作成して、被検試料のロフト毎に染色濃度が
相違しても被検対象の各泳動スポットを高精度に定量測
定できるようにすることにある。
（ニ）構成
この発明は、二次元目のゲル、一次元目の電気泳動終了
後の被検試料の被検対象を前記ゲルの二次元目の方向へ
泳動分離する二次元目の泳動分離手段、前記被検対象と
同じでかつ重量既知で異なる重量の複数の比較試料を二
次元目のゲルに二次元目の泳動分離終了後にその二次元
目の分離方向又は一次元目の分離方向のいずれか一方又
は両方に向けてスポット状に添加する添加手段、これら
の比較試料及び被検対象を染色しこれら両者の染色濃度
を計測する染色度計測手段、この染色度計測手段から出
力される染色度信号に基づいて各比較試料の重量と染色
濃度との検量線を作成し記憶する作成記憶手段、及びこ
の作成記憶手段から出力される記憶信号に基づいて被検
対象の各泳動スポットの重量を演算する演算手段を備え
てなる二次元電気泳動装置である。
後の被検試料の被検対象を前記ゲルの二次元目の方向へ
泳動分離する二次元目の泳動分離手段、前記被検対象と
同じでかつ重量既知で異なる重量の複数の比較試料を二
次元目のゲルに二次元目の泳動分離終了後にその二次元
目の分離方向又は一次元目の分離方向のいずれか一方又
は両方に向けてスポット状に添加する添加手段、これら
の比較試料及び被検対象を染色しこれら両者の染色濃度
を計測する染色度計測手段、この染色度計測手段から出
力される染色度信号に基づいて各比較試料の重量と染色
濃度との検量線を作成し記憶する作成記憶手段、及びこ
の作成記憶手段から出力される記憶信号に基づいて被検
対象の各泳動スポットの重量を演算する演算手段を備え
てなる二次元電気泳動装置である。
（ホ）実施例
以下図に示す実施例に基づいてこの発明を詳述する。な
お、これによってこの発明が限定されるものではない。
お、これによってこの発明が限定されるものではない。
第１図において二次元電気泳動装置（１１は、作成記憶
手段（２）、演算手段（３）及び添加手段（４）とから
主として構成される。
手段（２）、演算手段（３）及び添加手段（４）とから
主として構成される。
作成記憶手段（２）及び演算手段（３）はマイクロコン
ピュータ（Ｃ）からなり、二次元目の長方板ゲル（５）
の上方から発光され、そのゲル（５）内の後述する染色
後の試料（６１（７１を透過した測光（８）を受光して
それらの試料の染色濃度を計測する染色度計測手段（９
）に電気的に接続されている。 この計測手段は発光部
（図示省略）、受光部αＯ）及び測光信号処理部（１１
）からなるデンシトメータで構成されている。
ピュータ（Ｃ）からなり、二次元目の長方板ゲル（５）
の上方から発光され、そのゲル（５）内の後述する染色
後の試料（６１（７１を透過した測光（８）を受光して
それらの試料の染色濃度を計測する染色度計測手段（９
）に電気的に接続されている。 この計測手段は発光部
（図示省略）、受光部αＯ）及び測光信号処理部（１１
）からなるデンシトメータで構成されている。
作成記憶手段（２）は前記計測手段（９）から出力され
る染色度信号に基づいて前記試料（６１（７１のうち重
量既知の比較試料（６）の重量と染色濃度との検量線を
作成するよう構成されている。 一方、演算手段（３）
は、作成記憶手段（２）から出力される記憶信号及び前
記染色度信号に基づいて前記試料（６） （７）のうち
重量未知の被検試料（７）の重量を演算するよう構成さ
れている。
る染色度信号に基づいて前記試料（６１（７１のうち重
量既知の比較試料（６）の重量と染色濃度との検量線を
作成するよう構成されている。 一方、演算手段（３）
は、作成記憶手段（２）から出力される記憶信号及び前
記染色度信号に基づいて前記試料（６） （７）のうち
重量未知の被検試料（７）の重量を演算するよう構成さ
れている。
添加手段（４）は、ピペット、シリンジなどで構成され
ている。
ている。
次に上記装置において、被検試料（７）中の被検対象、
例えば血清中の蛋白質の重量を定量測定する方法を説明
する。
例えば血清中の蛋白質の重量を定量測定する方法を説明
する。
まず、第２図に示すように、二次元目の電気泳動終了後
のゲル（５）内に、被検対象と同じで重量既知の複数の
比較試料（６）をスポット状に添加する。
のゲル（５）内に、被検対象と同じで重量既知の複数の
比較試料（６）をスポット状に添加する。
これらの比較試料（６）はそれらの重量がそれぞれ異な
り、例えば１０−ｔｏｇ〜１０−６ｇのものが用いられ
、重い順に二次元目ゲル（５）の分子量レベル方向く二
次元方向）に向かって並べられている。 そして、二次
元目ゲル（５）内に分離された被検対象の各泳動スポッ
ト（１２）と各比較試料（６）とを同時に銀染色し
□てこれらの両者の染色濃度を計測する。 次
いで、比較試料（６）のみについてその重量が軽い方か
ら重い方に向かってその染色濃度が比例して薄くなる検
量線（Ａ）を作成する（第３図参照）。 そして、被検
対象の各泳動スポット（１２）の染色濃度に対応する染
色濃度を検量線（Ａ）上にとり、これに対応する重量を
演算測定する。
り、例えば１０−ｔｏｇ〜１０−６ｇのものが用いられ
、重い順に二次元目ゲル（５）の分子量レベル方向く二
次元方向）に向かって並べられている。 そして、二次
元目ゲル（５）内に分離された被検対象の各泳動スポッ
ト（１２）と各比較試料（６）とを同時に銀染色し
□てこれらの両者の染色濃度を計測する。 次
いで、比較試料（６）のみについてその重量が軽い方か
ら重い方に向かってその染色濃度が比例して薄くなる検
量線（Ａ）を作成する（第３図参照）。 そして、被検
対象の各泳動スポット（１２）の染色濃度に対応する染
色濃度を検量線（Ａ）上にとり、これに対応する重量を
演算測定する。
また、二次元目のゲル（５）の荷電量レベル方向（−次
元方向）に前記の比較試料（６）を第２図のごとく添加
してもよい。 この場合、第３図の破線のように検量線
（Ｂ）を上記と同様に作成して被検対象の重量を測定す
る。
元方向）に前記の比較試料（６）を第２図のごとく添加
してもよい。 この場合、第３図の破線のように検量線
（Ｂ）を上記と同様に作成して被検対象の重量を測定す
る。
さらに、比較試料（６）を添加する位置によって検量線
の勾配が変わることが考えられる場合は、比較試料４６
）を第２図のごとく二次元目のゲル（５）の周縁近傍で
はなく、ゲル（５）の−次元方向及び二次元方向におけ
る被検対象の各泳動スポツ）（１２）の近傍にそれぞれ
添加して行ってもよい。
の勾配が変わることが考えられる場合は、比較試料４６
）を第２図のごとく二次元目のゲル（５）の周縁近傍で
はなく、ゲル（５）の−次元方向及び二次元方向におけ
る被検対象の各泳動スポツ）（１２）の近傍にそれぞれ
添加して行ってもよい。
以上のような比較試料を用いて二次元目のゲル交換毎に
検量線を作成して、被検対象の各泳動スポットを定量測
定することによって、染色濃度が被検試料のロット毎に
相違しても、また、二次元目のゲル、染色時の温度、染
色試薬などが変化しても、同一条件で染色濃度を計測で
きるため、被検対象の各泳動スポットの定量精度を向上
させることができる。
検量線を作成して、被検対象の各泳動スポットを定量測
定することによって、染色濃度が被検試料のロット毎に
相違しても、また、二次元目のゲル、染色時の温度、染
色試薬などが変化しても、同一条件で染色濃度を計測で
きるため、被検対象の各泳動スポットの定量精度を向上
させることができる。
（へ）効果
この発明は二次元目の平板ゲルにその一次元方向又は二
次元方向に向けて會妾手書重量既知の複数の比較試料を
添加し、これらの比較試料の重量と染色濃度との検量線
を作成し、この検量線に基づいて被検対象の各泳動スポ
ットの重量を演算したものであるから、被検試料ロフト
間の染色濃度が相違しても被検対象の各泳動スポットを
高精度に定量測定でき、しかも二次元目のゲル、染色試
薬、染色時の温度などが変わっても同精度で各泳動スポ
ットを定量測定できる。
次元方向に向けて會妾手書重量既知の複数の比較試料を
添加し、これらの比較試料の重量と染色濃度との検量線
を作成し、この検量線に基づいて被検対象の各泳動スポ
ットの重量を演算したものであるから、被検試料ロフト
間の染色濃度が相違しても被検対象の各泳動スポットを
高精度に定量測定でき、しかも二次元目のゲル、染色試
薬、染色時の温度などが変わっても同精度で各泳動スポ
ットを定量測定できる。
第１図はこの発明に係る二次元電気泳動装置の一実施例
を示す要部構成説明図、第２図はこの比較試料添加状態
を示す二次元目のゲル斜視図、第３図はこの検量線グラ
フである。 （１）・−二次元電気泳動装置、（２１−作成記憶手段
、Ｔ３）−演算手段、（４）−添加手段、ｆ５）−二次
元目のゲル、ｆ６）−比較試料、（７）−被検試料、（
９１−染色度計測手段、（１２）−被検対象の泳動スポ
ット、（Ａ） （Ｂ）−・−検量線。 ・ −”ｊ
を示す要部構成説明図、第２図はこの比較試料添加状態
を示す二次元目のゲル斜視図、第３図はこの検量線グラ
フである。 （１）・−二次元電気泳動装置、（２１−作成記憶手段
、Ｔ３）−演算手段、（４）−添加手段、ｆ５）−二次
元目のゲル、ｆ６）−比較試料、（７）−被検試料、（
９１−染色度計測手段、（１２）−被検対象の泳動スポ
ット、（Ａ） （Ｂ）−・−検量線。 ・ −”ｊ
Claims (1)
- １、二次元目のゲル、一次元目の電気泳動終了後の被検
試料の被検対象を前記ゲルの二次元目の方向へ泳動分離
する二次元目の泳動分離手段、前記被検対象と同じでか
つ重量既知で異なる重量の複数の比較試料を二次元目の
ゲルに二次元目の泳動分離終了後にその二次元目の分離
方向又は一次元目の分離方向のいずれか一方又は両方に
向けてスポット状に添加する添加手段、これらの比較試
料及び被検対象を染色しこれら両者の染色濃度を計測す
る染色度計測手段、この染色度計測手段から出力される
染色度信号に基づいて各比較試料の重量と染色濃度との
検量線を作成し記憶する作成記憶手段、及びこの作成記
憶手段から出力される記憶信号に基づいて被検対象の各
泳動スポットの重量を演算する演算手段を備えてなる二
次元電気泳動装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59148978A JPS6126848A (ja) | 1984-07-17 | 1984-07-17 | 二次元電気泳動装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59148978A JPS6126848A (ja) | 1984-07-17 | 1984-07-17 | 二次元電気泳動装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6126848A true JPS6126848A (ja) | 1986-02-06 |
| JPH0542625B2 JPH0542625B2 (ja) | 1993-06-29 |
Family
ID=15464939
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59148978A Granted JPS6126848A (ja) | 1984-07-17 | 1984-07-17 | 二次元電気泳動装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6126848A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6176990B1 (en) * | 1995-06-08 | 2001-01-23 | Visible Genetics Inc. | Micro-electrophoresis chip for moving and separating nucleic acids and other charged molecules |
-
1984
- 1984-07-17 JP JP59148978A patent/JPS6126848A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6176990B1 (en) * | 1995-06-08 | 2001-01-23 | Visible Genetics Inc. | Micro-electrophoresis chip for moving and separating nucleic acids and other charged molecules |
| US6261430B1 (en) | 1995-06-08 | 2001-07-17 | Visible Genetics Inc. | Micro-electrophoresis chip for moving and separating nucleic acids and other charged molecules |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0542625B2 (ja) | 1993-06-29 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |