JPS6127965A

JPS6127965A - ベンゾイルウレア系化合物・リン脂質複合体

Info

Publication number: JPS6127965A
Application number: JP59148322A
Authority: JP
Inventors: Takahiro Haga; 隆弘芳賀; Shuitsu Yamada; 山田　修逸; Tsunekazu Fukushima; 恒和福島; Hiroshi Enomoto; 浩榎本; Kazumasa Yokoyama; 和正横山; Masayuki Nishida; 正行西田
Original assignee: Green Cross Corp Japan; Ishihara Sangyo Kaisha Ltd; Green Cross Corp Korea
Current assignee: Ishihara Sangyo Kaisha Ltd; Tanabe Pharma Corp; GC Biopharma Corp
Priority date: 1984-07-16
Filing date: 1984-07-16
Publication date: 1986-02-07
Also published as: JPH0469146B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】〔利用分野〕本発明はベンゾイルウレア系化合物・リン脂質複合体に
関する。

〔従来技術〕

一般式（式中、Ｘはハロゲン原子又はニトロ基を、ＹおよびＺ
２は水素原子またはハロゲン原子を、Ｚｌ？、、ン原子
又はトリフルオロメチル基を示す）で表わされるベンゾ
イルウレア系化合物は制癌剤として有用なことが既に開
示されている（特開昭５７−１０９７２１）。

このベンゾイルウレア系化合物は水にも有機溶媒にも熔
けにくい性質を有している。一般に難溶性薬物の製剤化
あるいは可溶化の手段としては、界面活性剤による乳化
、シクロデキストリン等による包接化、誘導体化、リポ
ソーム化、マイクロカプセル化などがある。ところが、
これらの手段を施しても、ベンゾイルウレア系化合物の
場合、薬効を充分発揮できる製剤を調製することは困難
であった。

そこで本発明者らは、このベンゾイルウレア系化合物の
製剤化について種々検討を行ったところ、ベンゾイルウ
レア系化合物とリン脂質との親和性を利用し、その複合
体を形成させればベンゾイルウレア系化合物の安定性に
優れ、医薬品として使用可能になり、しかも当該複合体
の粒子径を調整することにより静注投与も可能であるこ
とを見出して本発明を完成した。

〔発明の開示〕

本発明はベンゾイルウレア系化合物・リン脂質複合体に
関する。

本発明で用いられるベンゾイルウレア系化合物は一般式はハロゲン原子又はトリフルオロメチル基を示す）で表
わされるものであれば特に限定されない。またその製法
も前述の特開昭５７−１０９７２１に開示されている。

当該複合体を形成するためのリン脂質は、生理的に許容
され、そして代謝されうる無毒のリン脂質であればいず
れも本発明に用いられる。たとえば、ホスファチジルコ
リン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸、ホス
ファチジルグリセリン、ホスファチジルエタノールアミ
ン、ホスフプチジルイノシトール、スフィンゴミエリン
、ジセチルホスフェート、リゾホスファチジルコリン（
リゾレシチン）、ステアリルアミン、あるいはこれらの
混合物である大豆リン脂質、卵黄リン脂質などが用いら
れる。好ましいリン脂質としては、大豆あるいは卵黄の
リン脂質が例示される。

これら両成分を用いて、本発明の複合体をｍ製する。ま
ず、リン脂質およびベンゾイルウレア系化合物をを機溶
媒、例えばクロロホルムなどに熔解させる。両者の割合
は、リン脂質の１重量部に対してベンゾイルウレア系化
合物が０．０１〜１０重量部であることが好ましい。当
該薬物およびリン脂質を混和した溶液含有容器を、好ま
しくはロータリーエバポレータを用いて減圧して、溶媒
を留去し、容器の内壁にリン脂質を薄く付着させてベン
ゾイルウレア系化合物を含んだリン脂質の薄膜を形成さ
せる。この場合、好ましくはリン脂質の安定化のために
、抗酸化剤、例えばα−トコフェロールを、好適にはリ
ン脂質に対する重量％が０．０００１〜０．５％（Ｗ／
Ｗ）程度になるように添加する。また、公知の安定化剤
を添加することももちろん可能である。

形成された薄膜に、生理的に受は入れられる水溶液（例
えば、ｐＨ５，５〜８、好ましくはｐＨ６〜７に調整し
たもの。具体的には、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、リ
ン酸緩衝液、生理食塩溶液など）を、リン脂質１ｇに対
して１０〜５００ａｌになるように添加して、直ちに振
盪あるいは攪拌を行うことにより薄膜を破壊し、複合体
からなる粒子を形成させる。具体的には、通常、丸底フ
ラスコにガラスピーズ数個を入れ、手で激しく振りまぜ
る（室温下、３〜２０分間）方法が取られる。こうして
濃度０．５〜］００ｍｇリン脂質／ｍｌの複合体懸濁液
が調製される。

当該粒子は、次いで超音波処理を施し、粒子径を０．２
〜２μ以下に調整する。この時、超音波による発熱（液
温の上昇）を防ぐために、水冷下で超音波処理を行う。

また、好ましくは、窒素のような不活性ガス雰囲気下で
行う。

さらに遠心分離を温度５〜２０℃で１万ｇ以上、好まし
くは２〜３万ｇ、３０分〜２時間程度行う。

この結果、懸濁液は３層に分かれる。即ち、上層（Ｆｒ
　Ｉと称する）は、リン脂質の色を示す上清であり、通
常のリポソーム（Ｓｍａｌｌ　ｕｎｉｌ’ａｍｅｌａｒ
シロ５ｉｃｌｅ　）画分に値する。中層（Ｆｒｌｌと称
する）は、薬物とリン脂質の混合色を示す沈渣であり、
超音波処理で破壊されずに残った脂質粒子の層である。

ＦｒＩ［はさらに超音波処理を行うことによりＦｒｌ及
びＦｒｍに移行する。最下層（Ｆｒ　ｍと称する）の沈
渣は薬物に応じた色となる。この最下層沈渣Ｆｒｌ［ｌ
を回収し、上述の生理的に受け、入れられる水溶液、リ
ン脂質を含む水溶液あるいは上清Ｆｒｌを用いて遠心洗
浄する。か（して、水難溶性薬物・リン脂質複合体がベ
レ７）状、懸濁状として調製される。

本発明で得られる複合体の製剤化は、医薬品において広
く公知の方法に準ずればよい。さらに液状製剤を凍結乾
燥することにより乾燥製剤としても提供される。この場
合、各々の薬物あるいはリン脂質に応じて、適宜公知の
安定化剤を用いることはもちろん自由である。また、非
イオン系界面活性剤を添加しておくことは乾燥製剤の可
溶性を高めるのに有用である。かかる乾燥製剤は、生理
的に許容される水溶液、例えば生理食塩溶液あるいは上
述した上清Ｆｒｌによって熔解または希釈して用いられ
るのが一般的であるが、製剤上の常套手段によって錠剤
化、カプセル化、腸溶剤化、懸濁剤化、顆粒化、粉末化
、注射剤化、坐剤化などを行ってもよい。

本発明により得られる複合体は、ベンゾイルウレア系化
合物自体に比べて水への溶解度が増し、可溶化に伴い数
倍から数十倍の活性の上昇が見られる。また、毒性も単
独投与に比べて低く抑えられるため、投与量の増加に伴
う効果の上昇が期待される。

また、注射剤化が可能になり、複合体の粒子径を０．２
〜２μに調整することにより、静脈内投与が可能となっ
て速効性あるいは局所親和性の向上が期待されるうえ、
経口投与時の薬物による腸管部への副作用を抑え、同時
に腸管吸収の増加による効果の上昇が期待される。

かくして提供される本発明からなる複合体は、水Ｈ溶性
薬物の従来にない効果的な製剤化が可能なものであり、
医療産業上また臨床上においても新たな発展を可能にす
るものである。

実験例１遠心分離後の各１ｉｆ（ｐｒｒ〜■）におけるリン脂質
中へのベンゾイルウレア系化合物（化合物１）の取り込
みの度合を調べた。各層を分取しトリトンＸ−１００で
処理して複合体を破壊し、生理食塩水中に懸濁させ、遠
心後の上清中に含まれる化合物量を高速液体クロマトグ
ラフィーで測定して、リン脂質１００ｍｇ当りの薬物量
を算出した（第１表）。

実験例２各層（Ｆｒ　Ｉ〜■）の粒子の大きさを遠心沈降法（コ
ールタ−・カウンター法）により調べた（第１表）。

第１表実験例３本発明により得られたベンゾイルウレア系化合物・リン
脂質複合体のＰ−３８８白血病細胞に対するイン・ヴイ
ボでの効果をｉ、ｐ、　−ｉ、ｐ、の系で調べた。即ち
、ＣＤＦ、マウスにＰ−３８８白血病細胞をｌＸｌｏｅ
個／マウスの割合で腹腔内移植し、本発明複合体を接種
後１日目及び４日目に腹腔内投与し、３０日間マウスの
生死を観察した。

コントロールとして生理食塩液を用い、その効果を１０
０％とした場合の各薬物の効果を算出し、Ｔ／Ｃで表し
た。

（以下余白）実験例４ＢＤＦＩマウスにＬ−１２１０白血病細胞を１×１０５
個／マウスの割合で腹腔内移植し、本発明複合体を静脈
内投与した。３０日間マウスの生死を観察し、生理食塩
液を投与した対照群のマウスの生存日数を１００として
、各処理群（１群１０匹）の延命率（％）を求めた（第
３表）。

第３表実験例５本発明で得られる複合体の急性毒性、投与量および投与
方法について検討した。

（急性毒性）ＣＤＦＩマウス（１０匹）を用いての静脈内投与におい
て５００ｍｇ／ｋｇ投与しても死に到るマウスは１匹も
いなかったことから、急性毒性（ＬＤｓｏ）は５００ｍ
ｇ／　ｋｇ以上であることが確認された。

（投与量）投与量は、投与条件の違いにより一概に規定できないが
、普通有効成分について１日当り約５〜１０００ｍｇ／
　ｋｇである。本複合体の投与にあたり、前記投与量を
一時に、あるいは分割で投与することはもちろん可能で
ある。

（投与方法）本発明で得られる複合体は、先に述べたような製剤化の
手段を施すことにより、経口、静脈内、直腸内などの方
法で投与することができる。

実施例１化合物ｌ　（実験例参照）５０ｍｇ、精製卵黄リン脂質
５００＋ｇ及びα−トコフェロール０．５ｍｇをクロロ
ホルム１０ｍ１に溶解した後、ロータリーエバポレータ
を用いて減圧で加温してクロロホルムを留去し、化合物
１を含んだリン脂質の薄膜を形成させた。この薄膜に生
理食塩液１０ｍ１を添加し、直ちに室温で２０分間激し
く振盪させた後、ソニケータ（Ｂｒａｎｓｏｎ　５ｏｎ
ｉｃ　Ｐｏｗｅｒ社製−Ｃｅｌｌ　Ｄｉｓｒｕｔｏｒ＃
３５０　、出力６０Ｗ）を用いて、氷冷しながら１時間
超音波処理を行った。さらに室温で遠心分離（２５，０
００ｇ　、　１時間）を行って得られた最下層沈渣を回
収し、上述の生理食塩液を用いて数回遠心洗浄した後、
除菌濾過を行い、懸濁状のリン脂質複合体を得た。

実施例２実施例１で得られた懸濁状製剤を凍結乾燥することによ
り、リン脂質複合体の乾燥製剤５２０ｍｇを得た。

実施例３化合物１（５０ｍｇ）の代わりに化合物８（２５ｍｇ）
を用いた以外は実施例１に準じて行い、除菌濾過後にア
ルブミン（最終濃度０．５％）を添加し、凍結乾燥を行
い、リン脂質複合体の乾燥製剤を得た。

手続補正書印釦昭和５９年８月８　日１、事件の表示ベンゾイルウレア系化合物・リン脂質複合体３、補正を
する者事件との関係　特許出願人氏名（名称）　株式会社　ミドリ十字石原産業株式会社４、代理人　　■５４１住　所　大阪市東区平野町４丁目５３番地３ニューライ
フ平野町４０６号電話（０６）　２２７４１５１３６、補正の内容ｆｌ＋特許請求の範囲を別紙の通りに訂正する。

（２）明細書第２頁の式に訂正する。

（３）同書第２頁、下から第１２行の「Ｚ２は」の次に
「それぞれ」を加入する。

（４）同書第２頁、下から第１）行の「それぞれ」を削
除する。

（５）同書第２頁、下から第１）行の「メチル基を」の
次に「、Ａは基−ＣＨ−または−Ｎ−を」加入する。

に訂正する。

（７）同書第３頁、最終行の「メチル基を」の次に「、
Ａは基＝ＣＨ−または＝Ｎ−を」加入する。

（別紙）特許請求の範囲ｆｉ＋　　一般式（式中、Ｘはハロゲン原子又はニトロ基を、ＹおよびＺ
２はそれぞれ水素原子またはハロゲン原子を、Ｚ、はハ
ロゲン原子又はトリフルオロメチル基を、Ａは基＝ＣＨ
−または＝Ｎ−を示す）で表わされるベンゾイルウレア
系化合物とリン脂質よりなるベンゾイルウレア系化合物
・リン脂質複合体。

（２）ベンゾイルウレア系化合物とリン脂質を有機溶媒
に溶解後、溶媒を留去して脂質薄膜を形成させ、この薄
膜の懸濁液をさらに超音波処理後、遠心分離して得られ
た最下層沈渣を回収することにより得られる特許請求の
範囲第（１）項記載のベンゾイルウレア系化合物・リン
脂質複合体。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｘはハロゲン原子又はニトロ基を、ＹおよびＺ
＿２はそれぞれ水素原子またはハロゲン原子を、Ｚ＿１
はハロゲン原子又はトリフルオロメチル基を示す）で表
わされるベンゾイルウレア系化合物とリン脂質よりなる
ベンゾイルウレア系化合物・リン脂質複合体。
（２）ベンゾイルウレア系化合物とリン脂質を有機溶媒
に溶解後、溶媒を留去して脂質薄膜を形成させ、この薄
膜の懸濁液をさらに超音波処理後、遠心分離して得られ
た最下層沈渣を回収することにより得られる特許請求の
範囲第（１）項記載のベンゾイルウレア系化合物・リン
脂質複合体。