JPS61289042A - 寄生虫感染治療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 寄生虫感染、主としてマラリャ、しかしさらにシーシュ
マニア症、トリパノソーマ症、アメーバ症等は、世界に
おける疾病及び死亡の最も重要な原因を成している。こ
の分野の研究には特に地域的に、はとんど南方の国々に
ついてのみならず、土着的な感染が現在存在するか又は
頻度は大きく低下したが他の大陸からの旅行者によって
常に持ち込まれる他の地域についても関心が寄せられて
いる。

寄生性疾患の抑制のための試みは４つの主たるグループ
、すなわちａ）感染を完全に撲滅する試み、ｂ）寄生虫
によって非常に容易に示される薬剤耐性現象の封じ込め
、Ｃ）一層活性な薬剤の発見、及び治療用品への導入、
並びにｄ）主要な拮抗手段すなわち宿主の反応の活性化
に分けることができる。

問題の最適の解決策は言うまでもなく寄生虫の撲滅によ
って代表されるが、しかしこの目的の達成は数世紀とい
う時間を必要とし、そして非常に広範囲の地域に生活す
る人々の環境的及び社会経済的条件の革命的変化を必要
とするであろう。治療耐性変異体を生じさせることがで
きない化学療法的予防及び治療の方策を確立する可能性
も同様に遼遠である。寄生種が本来的に変化し、そして
化学療法剤の不調和な適用を抑制することができないの
で、薬剤耐性の問題を回避するための実りある試みを行
うことができない。このアプローチが困難であることを
示す最も印象的な例の１つは、Ｐ、ファルシパルム（Ｐ
、　ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）の多剤耐性株に支配される
地域の絶えまなき拡大である。寄生虫感染の治療のため
新しい薬剤を得ることはあまり期待できない。

新しい抗寄生虫化合物の探索は、世界保健機構の特別計
画の努力及び少数の評論家の推奨にもかかわらず、他の
分野の化学療法と比較した場合特に、非常に低いレベル
にあるようである。この背景に対して、免疫的治療又は
予防のアプローチを展望することは特に適切である。

免疫学は生体医科学のよく確立された分野であるが、免
疫寄生生学はここ数年の間実験的及び臨床的データを得
るためにのみ始められた非常に新しい分野である。寄生
虫の侵入に挑戦された場合、宿主は無条件降伏する場合
があり、あるいは複雑な免疫反応を演することによって
自ら苦闘し、この免疫反応は最終的に不稔免疫（ｓｔｅ
ｒｉｌｅ　ｉｍｍｕｎｉ−ｔｙ）、調節免疫（ｍｏｄｕ
ｌａｔｉｎｇ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ）　、又は付随免疫（
ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ　ｉｍｍｕｎｉｔｙ）をもたら
すであろう。不稔免疫（ｓｔｅｒｉｌｅ　ｉｍｍｕｎｉ
ｔｙ）は次回の感染に対する残留耐性（時として長期間
続く）を伴って寄生虫が除去されることにより証明され
る。調節免疫（ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ　ｉｍｍｕｎｉｔ
ｙ）は、寄生虫の抗原構造に対する完全且つ効果的な免
疫反応が宿主により惹起される場合に現われ、そして感
染集団の大部分を破壊することに成功する。

しかしながら、多数の寄生虫は、種々の機構、例えば異
る抗原決定基を発現する能力により、宿主の反応を回避
することができる。このような耐性集団の増加により新
たな寄生虫のうねりが起こり、そして連続するサイクル
中の先行する反応段階に続いて新しい宿主反応が演じら
れる。この結果、寄生虫集団の特徴が宿主の反応によっ
て継続的に調節される。病気の自然の歴史はこれらの現
象により深く影響される。基本的な例が、アフリカトリ
バノソーマ症におけるこれらの寄生虫病の定期的発生に
より与えられる。この場合、寄生虫は中枢神経系に侵入
し、そして増殖し、この中枢神経系を反復的免疫反応の
攻撃に対して適切な保護をもたらすを域にする。

付随的免疫（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ　ｉｍｍｕｎｉｔ
ｙ）の場合は非常に異る。この場合、寄生虫により惹起
される免疫反応は感染を撲滅することはできず、そして
寄生虫が宿主内に留る限り持続する。目的論的観点から
、この条件は両パートナ−にとって最も有利なものであ
る。効果的な付随免疫反応は一方において、そうでなけ
ればほとんど耐えられない重複感染に対する宿主の“許
容性”を低下せしめ、そして他方において寄生虫の増殖
速度を低下せしめ、しかし最初に到着した寄生虫集団に
後のそれが追放される可能性を保証し、駆除をもたらす
。

操作上の観点から、免疫反応の主要な３つの群が特定さ
れる。これらは、“前−宿主反応（ｐｒｏ−ｈｏｓｔ　
ｒｅａｃｔｉｏｎ）”（これは、寄生虫の増殖の制限、
又は宿主の生物学的平衡を危険にさらす寄生虫関連反応
の回避に向けられる）、“前−寄生虫反応（ｐｒｏ−ｐ
ａｒａ−ｓｉｔｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ）″（これは寄生
虫感染に好都合に作用する）、及びいわゆる“無関係反
応（ｉｎｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔｉｎｌ　ｒｅａｃｔｉｏ
ｎ）”（これは、宿主−寄生虫関係に対する直接かつ密
接な効果が欠けているものと予想される）である。

機械的観点から、上記の現象は、直接的又は間接的寄生
虫の作用により選択的に誘導される免疫細胞機能の混乱
として説明することができる。多くの異る機構が機能し
ている可能性がある。幾らかの寄生虫は免疫細胞に侵入
することによって免疫細胞の反応を回避することができ
、これはリンパ球及びレイシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａ
ｎｉａ）の亜集団を優先的にコロニー形成させてマクロ
ファージ中で増殖させるテイレリア・パルバ（Ｔｈｅｉ
ｌｅｒｉａ　ｐａｒｖａ）の能力により例示される。お
そらく、長範囲調節物質、すなわち可溶性因子により寄
生虫により惹起される免疫細胞に対する影響が一層適切
であろう。Ｂ細胞レパートリ−の広範囲の発現及び有用
でない抗体又は自己免疫抗体の氾濫による、寄生虫関連
の又は非関連の抗原に対する特異抗原の効果的な生産を
妨害するＢ細胞のポリクローナル活性化が良い例である
。フィードバック機構を介して、ポリクローナルＢ細胞
活性化はまたサプレッサー細胞の刺激を誘導し、そして
液性反応を激しく害する過程を破壊するための免疫系の
この時としてバカげた試みは、一般化された免疫抑制を
維持するために機能するサプレッサーの長時間活性化を
もたらす。

種々の情報は、寄生虫病の病原における抑制現象により
演じられる役割を指摘する。すなわち、マラリアに感染
したマウスの肺臓マクロファージはｐＨＡ及びＬＰＳに
対する正常な牌細胞反応を阻害することができる。活性
化されたマクロファージは肺臓に存在するのみならず、
これらの動物の肝臓にも存在し、そしてそれらの機能は
変化するが、しかしそれらの抗原を与える能力は害され
ないようである。これらの感染において生ずる細胞性及
び液性免疫反応の深刻な混乱、例えば寄生虫により誘導
される抗−Ｎ及び抗−Ｔ自己抗体の合成、並びに培養に
おいてのみならず宿主の血液中における寄生虫によるサ
プレッサー物質の生産、の持続中に幾つかの他の事実が
起る。

実験的マラリャ又はヒトのマラリアにおいてＴ−リンパ
球及び細胞性免疫により演じられる中枢的な部分が強調
されてきたが、しかし幾つかの問題点、例えばＮＫ細胞
及びその調節物質の役割はなお議論の余地がある。プラ
スモジウムの感染により生ずる多数の症状、例えば牌腫
、貧血、及び強化された食細胞性の胸腺依存性、並びに
胸腺摘出された動物における病気の経過の変化について
のすでに報告された観察が存在する。さらに、レーシュ
マニアの動物モデルにおいて、細胞性免疫の役割の重要
性が実験的知見により支持される。

（Ｃｏｕｔｉｎｈｏ等、Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　５
ｐｅｃｉｆｉｃ　Ｔ　Ｌｙｍｐｈ−ｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ
　Ｔｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｏ
ｎ　ｏｆ　Ｌｅｉ−ｓｈｍａｎｉａ　ｉｎ　Ｉｎｆｅｃ
ｔｅｄ　Ｍｕｒｉｎｅ　Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ＋Ｐａ
ｒｄｓ。

Ｉｍｍｕｎｏｌ、　、　６　、１５７−１７０　（１９
８４））　、特異的Ｔ−細胞クローンはヘルパー活性、
ＤＴＨ反応と及びマクロファージ活性化を中介すること
ができる。

（Ｌｏｕｉｓ等％　Ｔｈｅ　ＩｎＶｉｔｒｏ　Ｇｅｎｅ
ｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｆｕｎｃ−ｔｔｏｎａｌ　Ａｎ
ａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｍｕｒｉｎｅ　Ｔ　Ｃｅ１ｌ　Ｐ
ｏｐｕｌａｔｉｏｎｓａｎｄ　Ｃ１ｏｎｅｓ　５ｐｅｃ
ｉｆｉｃ　ｆｏｒ　ａ　Ｐｒｏｔｏｚｏａｎ　Ｐａｒａ
ｓｉｔｅ：Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ　ｔｒｏｐｉｃａ、　
Ｉｍｍｕｎｏｌ、　Ｒｅｖ、　＋且、　２１５−２４０
（１９８２）　）。これはレーシュマニアの除去のため
の主たる機構を代表する［Ｍａｎｕａｌ等、Ｌｅｉｓｈ
ｍａ−ｎｉａｉｓ：　Ｉｍｍｕｎｉｔｙ、　Ｉｍｍｕｎ
ｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｉｍｍｕｎｏ−ｄｉａ
ｇｎｏｓｉｓ　ｉ’ｎ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　
Ｐａｒａｓｉｔｉｃ　Ｉｎｆｅｃ−ｔｉｏｎｓ　（Ｃｏ
ｈｅｎ及び−ａｒｒｅｎ［，２９９頁、Ｂｌａｃｈｗｅ
ｌｌＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ　Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ
　、オックスフォード（１９８２）　）　　。

上記の考察は寄生虫病の治療における免疫調節物質の使
用を示唆しているようであるが、後に示すように、交換
可能なそして常に有益な物質の一群と考えることはでき
ないことが見出された。強力な親リンパ球性で且つ免疫
調節性の物質であるデキサメサゾンを用いる臨床試験に
よっても多くの証明が得られた。しかしながら、ヒト脳
マラリアの治療におけるステロイドの使用は有害である
。

（Ｗａｒｒｅｌ　１等＼Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎ　Ｐ
ｒｏｖｅｓ　Ｄｅｌｅｔｅｒｉｏｕｓｉｎ　Ｃｅｒｅｂ
ｒａｌ　Ｍａｌａｒｉａ：　Ａ　Ｄｏｕｂｌｅ　Ｂ１１
ｎｄ　Ｔｒｉａｌ　ｉｎＣｏｍａｔｏｓｅ　Ｐａｔｉｅ
ｎｔｓ、　Ｎｅｗ　Ｅｎｇ、　Ｊ、　Ｍｅｄ、、３０６
　＋３１３−３１９（１９８２））　　。

ネズミのプラスモイド感染に対するシクロホスファミド
（以下“ＣＰＡ　’″と称する）及びＴＰ−１（後にさ
らに記載する）の活性の研究が行われた。ＣＰＡ及びＴ
Ｐ−１の両者は、Ｔ−細胞及び胸腺機能に対して直接活
性を有するが直接的な耐寄生虫活性を欠く免疫調節物質
である。

寄生虫処理（ｐａｒａｓｉｆｉｚｅ）　Ｌ／た１０’個
の赤血球（ＰＲＢＣ）を異系交配したマウス（チャール
スリバー、１８〜２０ｇ）に腹腔内接種して維持したプ
ラスモジウム・ベルディ　（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ　　
ｂｅｒｇｈｅｉ）を用いた。

１８〜２０ｇの体重の雌性ＣＤＩ　Ｃｏｂｓマウス（チ
ャールスリバー）２０匹の群に、１０’個／マウス（ス
キーム１及び２）、又は１０６個／マウス（スキーム３
）のＰＲＢＣを腹腔内感染せしめ、そしてその後２５日
間にわたり死亡を記録した。商業的に人手したＣＰＡ及
びＴＰ−１を無菌塩溶液に溶解した。表に示す治療スキ
ームにおいて、１０ｍｇ／ｋｇ　ｓ、ｃ。

のＴＰ−１、及び２００ｍｇ／に＋ｒ　ｉ、ｐ、　（７
）　ＣＰＡを投与した。

スキーム３はスキーム２と同じであるが、但し低いメロ
ゲニックユニット（ｍｅｒｏｇｅｎｉｃ　ｕｎｉｔ）の
Ｐ、ベルゲイ　（慢性コース）の代りに高単位（急性コ
ース）を負荷−した。結果を次の第１表〜第２表に示す
・　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　以下禦
日第１表（スキーム１） ＣＰＡ　　　　−１４０６１２１７，５ｃｐ八　十　　
　　　　−１６５１０１４，５１８ＴＰ−１−３，−２ ＴＰ−１−３，−２１００１５２５２５塩溶液−３，−
２，−１５０９１３，５１９ＣＰＡ　　　　−１３５４
，５１０１５，２ＣＰＡ＋　　　−１６０９１６２１ ＴＰ−１＋１．＋２．＋３ 塩溶液−１，＋１．＋２．＋３　４５　　　８　　１２
　　１６第３表（スキーム３） ＣＰＡ　　　　　　　４５　　　　９　　１３　　２４
ＣＰＡ　＋　ＴＰ−１７０１０，５１９２５塩溶液　　
　　　２０　　　　６．５　７，５　２２．５解剖組織
学的試験は炎症反応にお吠るリンパ球成分の支配性を確
認した。感染した動物において、種々の器官、主として
肝臓に浸潤する細胞の大部分が、Ｔ系のマーカーを支配
的に有する活性化されたリンパ球の形態学的特徴を示す
がしかしさらに多数のプラズマ細胞を含む。肺臓におい
ては、典型的な構造的混乱のほかに、そして特に一層徐
々に進行する病気の場合には、目抜細胞の数の劇的な増
加も容易に検出される。

生存について結果により、感染の経過は、対照動物に比
較して治療された動物においては有意に異る経過をたど
ることが証明される。

・感染がゆるやかな亜急性のコースをたどる場合、プラ
スモジウムの接種の１日前（又は１日後）におけるＣＰ
Ａの投与は前−感染活性（ｐｒｏ−１ｎｆｅｃｔｉｏｕ
ｓａｃｔｉｖｉｔｙ）を示す。これに対して、より大き
なメロゲニックユニットにより感染された動物において
同じ治療を行った場合、前−宿主効果（ｐｒｏ−ｈｏｓ
ｔｅｆｆｅｃｔ）が観察され、そして病気は急速な死へ
の経過をたどる。

ＴＰ−１の挙動は非常に異る。その投与は常に前−宿主
効果を示し、この効果はＣＰＡの前−宿主効果と相乗的
であるか、又はＣＰＡの前−寄生虫作用に拮抗的である
。ＣＰへの活性とは異り、ＴＰ−１の活性は病気の経過
の特徴には依存しない。言うまでもな（ＣＰＡとＴＰ−
１の相乗作用に基くすべての治療は、ＣＰＡの既知の毒
性を考慮して注意深く計画されなければならない。ＴＰ
−１はそれ自体すでに記載されている既知のウシ胸腺抽
出物である（Ｆａｌｃｈｅｔｔｉ等、“ウシ胸腺ファク
ターの単離、部分的特徴付は及び生物学的効果”、Ａｂ
ｓｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　Ｔｈ１ｒｄ　Ｅｕｒｏｐｅａｎ
　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　Ｍｅｅｔｉｎｇ＋　コペンハ
ーゲン１１９７６年８月２５〜２７日；　Ｆａｌｃｈｅ
ｔｔｉ等、“ウシ胸腺抽出物（ＴＰ−１）の薬理学的及
び生物学的性質”、Ｄｒｕ　ｓ　Ｅｘ　ｔｌ、　Ｃｌ１
ｎ、Ｒｅｓ、、　３（２）３９−４７（１９７７）；Ｂ
ｅｒｇｅｓ　ｉ等、“新規な胸腺抽出物の化学的特徴付
は及び生物学的活性”　、　Ｆｏｌｉａ　Ａ１１ｅｒ　
ｏｌ、　Ｉｍｍｕｎｏｌ。

Ｃｈｉｎ、　　２１　：　２０１（１９７７）　；及び
Ｆａｌｃｈｅｔｔｉ等、′胸腺抽出物のバイオアッセイ
：モルモット肺細胞リンパ球−急速赤血球ロゼツト法”
　、Ｃａｎｃｅｒ　Ｂｉｏｃｈｅｍ。

ｌ鰭上拍１ユＶｏ１４．６９〜７４頁（１９７９）　）
。

シ胸腺を０．１５Ｍ酢酸アンモニウムで抽出し、そして
脱灰剤（ｄｅｃａｌｃｉｔｅ）の存在下で遠心分離した
。

こうして得られた液を集め、そして７０℃に３０分間加
熱した。この方法により凝固した蛋白質を濾過により分
離し、そして透明な溶液を、４５％飽和に対するまで硫
酸アンモニウムを添加することによって沈澱せしめた。

遠心分離により沈澱を分離した後に得られる透明な液を
硫酸アンモニウムにより９０％飽和にした。こうして生
じた沈澱を濾過により集め、水に溶解し、そしてＰト１
０膜を通して限外濾過した。塩類及び分子量が約１０．
０００以下の蛋白質を含有する限外濾過物を次に凍結乾
燥し、セファデックスＧ−２５上で脱塩し、そして次に
セファデックスＧ−５０上でゲル濾過した。ｐＨ８，６
におけるポリアクリルアミドゲル中での電気泳動におい
て、トレーサーとして使用されたブロモフェノールブル
ーと比較して約０．２５及び０．４４のＲ２を有する２
個の特徴的なバンドを示す両分を集めた。

ＴＰ−１は、フェトヘモグルチニン（ｐＨＡ）及びコン
カナバリンＡ刺激に対するマウス肺臓リンボイド細胞の
反応性を増強する能力を有し、他方リポポリサッカライ
ド刺激に対する反応を増強せず、ヒト索血液からのＥ−
ロゼツト形成リンパ球の増加を刺激し、マウス肺臓のテ
ラー陽性細胞の比率を上昇せしめ、そしてＸ−線を照射
されたマウスにおける移植片対宿主反応を減少せしめる
同種（ａｌ　Ｉｏｇｅｎｅｉｃ）マウス骨髄細胞の能力
を刺激することが見出された。ＴＰ−１は１００ｍｇ／
ｋｇまでの投与量で腹腔内投与された場合、マウスでは
２１時間、そしてラットでは３１日間、なんらの急性毒
性効果又は顕著な副作用も示さず、５０ｍｇ／に＋ｒま
での投与量でラットに１８０日間腹腔内投与した場合も
、１０ｍｇ／ｋｇまでの投与量で１８０日間イヌに投与
した場合も同様である。このものは、ラット横隔膜神経
においてインビトロで評価した場合、及びマウス脛骨筋
についてインビボで評価した場合も神経−筋肉伝達を変
化させず、そして血圧又は心電図及び呼吸運動図も変化
させなかった。ＴＰ−１は他の胸腺抽出物から容易に区
別することができる。

なぜなら、このものはｐＨ８，６におけるポリアクリル
アミドゲル上での電気泳動に際して２個の主たる特徴的
なバンドを示し、他方、他の胸腺抽出物は１個のみの特
徴的バンドを示すことが現在知られているからである。

ｐ）１８．６において、ＴＰ−１の２個ノハントはＲ，
＝０．２５＋０．０５、及びＲｔ　＝０．４５±０．０
５である。

今まで、ＴＰ−１を主として筋肉内投与したが、他の方
法で投与することもできる。

医薬組成物は抗−寄生虫感染有効量のＴＰ−１を適合性
の医薬として許容される担体又は稀釈と共に含有し、こ
の担体又は稀釈剤は筋肉注射剤の場合は無菌水であって
よい。他の常用される賦形剤、例えばマンニトールを含
めることもでき、そして他の網形に使用される通常の賦
形剤を使用することができる。

ＴＰ−１の抗−寄生虫（例えば抗プラスモジウム）有効
量は治療される個体の年令及び体重、適用方法、並びに
他の感染又は疾患の存否に依存する。

１日当り投与される量は典型的には約０．５〜約１、０
　ｍｇ／　ｋｇであることができる。反応は個体により
かなり異り、そしてそれ故に医師により最もよく決定さ
れる。

以上具体的に記載したが、この発明の範囲内で種々の変
更を行うことができよう。

嵐−ト館Ｌヨ

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、ｐＨ８．６におけるポリアクリルアミドゲル上での
   電気泳動においてＲ＿ｆが約０．２５及び０．４４の２
   個の主たる特徴的バンドを示す子ウシ胸腺抽出物を含ん
   でなる寄生虫感染治療剤。