JPS613044A - 核酸塩基配列自動決定装置 - Google Patents
核酸塩基配列自動決定装置Info
- Publication number
- JPS613044A JPS613044A JP59123710A JP12371084A JPS613044A JP S613044 A JPS613044 A JP S613044A JP 59123710 A JP59123710 A JP 59123710A JP 12371084 A JP12371084 A JP 12371084A JP S613044 A JPS613044 A JP S613044A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- gel
- nucleic acid
- base sequence
- electrophoretic
- support plate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44708—Cooling
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
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- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明は、核酸の塩基配列決定装置に係り、特にその高
速化、高精度化に好適なゲル電気泳動装置に関する。
速化、高精度化に好適なゲル電気泳動装置に関する。
従来、核酸の塩基配列決定は、たとえばマキサム・ギル
バート法（蛋白質・核酸・酵素、 Ｖｏｌ。
バート法（蛋白質・核酸・酵素、 Ｖｏｌ。
Ｉ立、ｐｐ、１８２〜１９６ （１９７８） ） に
より行なわれてきた。この方法では、放射性同位体で標
識された核酸を化学的に断片化した後、電気泳動法で長
さの異なる断片をゲル中で分子量類に整列後、ゲルをガ
ラス板よりはがし、このオートラジオグラムを撮ること
で放射性断片を含む泳動帯の検出を行ない、核酸の塩基
配列を決定する。従来の電気泳動法では、ゲルが熱伝導
率の小さなガラス板で支持されていたため、電気泳動に
伴い発生する熱の放散が不十分でゲル中の温度が不均一
になり、温度の高い中心部では核酸断片の移動度が大き
く。
より行なわれてきた。この方法では、放射性同位体で標
識された核酸を化学的に断片化した後、電気泳動法で長
さの異なる断片をゲル中で分子量類に整列後、ゲルをガ
ラス板よりはがし、このオートラジオグラムを撮ること
で放射性断片を含む泳動帯の検出を行ない、核酸の塩基
配列を決定する。従来の電気泳動法では、ゲルが熱伝導
率の小さなガラス板で支持されていたため、電気泳動に
伴い発生する熱の放散が不十分でゲル中の温度が不均一
になり、温度の高い中心部では核酸断片の移動度が大き
く。
逆に温度の低い周辺部では核酸断片の移動度が小さくな
る。その結果、例えば第１図に示すように、末端塩基の
異なる４つレーン間で、核酸断片の移動度に差があるた
め、泳動パターンに歪みが生じ、レーン相互間の位置の
読取りが不正確になるという欠点があった。特に装置の
自動化にあたり、処理速度の高速化のため電気泳動ゲル
にかける電圧を高くし、核酸断片の移動度を大きくしよ
うとすると、上記の欠点が一層顕著になる６ 〔発明の目的〕 本発明の目的はゲル中の温度不均一に伴う電気泳動パタ
ーンの歪みをなくし、読み取り精度が高く、高速の核酸
塩基配列決定装置を提供することにある。
る。その結果、例えば第１図に示すように、末端塩基の
異なる４つレーン間で、核酸断片の移動度に差があるた
め、泳動パターンに歪みが生じ、レーン相互間の位置の
読取りが不正確になるという欠点があった。特に装置の
自動化にあたり、処理速度の高速化のため電気泳動ゲル
にかける電圧を高くし、核酸断片の移動度を大きくしよ
うとすると、上記の欠点が一層顕著になる６ 〔発明の目的〕 本発明の目的はゲル中の温度不均一に伴う電気泳動パタ
ーンの歪みをなくし、読み取り精度が高く、高速の核酸
塩基配列決定装置を提供することにある。
本発明は、電気泳動用ゲルの支持板を熱伝導率が高く、
電気Ｍ縁性に優れたセラミックスあるいは金属に絶縁皮
膜をほどこしたものとすることで、電気泳動に伴なって
発生する熱のため生ずるゲル中の温度の不均一を最小限
にすることを特徴とする。
電気Ｍ縁性に優れたセラミックスあるいは金属に絶縁皮
膜をほどこしたものとすることで、電気泳動に伴なって
発生する熱のため生ずるゲル中の温度の不均一を最小限
にすることを特徴とする。
以下、本発明の一実施例を第２図により説明する０本装
置は、２枚のセラミックス板３に挾まれた泳動分離用ゲ
ル２、その両端を浸す電極液槽１、高電圧直流電源Ｓで
構成する。
置は、２枚のセラミックス板３に挾まれた泳動分離用ゲ
ル２、その両端を浸す電極液槽１、高電圧直流電源Ｓで
構成する。
まず、上記セラミックス板として、ＢｅＯを約３重量％
含むＳｉＣを用いた場合のセラミックス材の特性を詳細
に説明する。
含むＳｉＣを用いた場合のセラミックス材の特性を詳細
に説明する。
セラミックスの組成は次の通りである。
純度９８％のＳｉＣ１００部
（不純物中に０．１％のＡｆｌ、Ｏ，を含む）上記組成
の材料を真空ホットプレス装置により真空度１０−’−
１０−ｓＴｏｒｒの減圧下で、加圧力２００ｋｇ／、１
１、温度２０００℃で焼結して、セラミックス材と得る
。
の材料を真空ホットプレス装置により真空度１０−’−
１０−ｓＴｏｒｒの減圧下で、加圧力２００ｋｇ／、１
１、温度２０００℃で焼結して、セラミックス材と得る
。
上記セラミックス材の特徴の概要は次の通りである。す
なわち、熱伝導率は０ 、７ ｃａ Ｑ ／ ａｉｓｓ
ｅ”ｃで金属アルミニウムやＢｅＯセラミックスより大
きく、ガラス板より３桁以上大きい。
なわち、熱伝導率は０ 、７ ｃａ Ｑ ／ ａｉｓｓ
ｅ”ｃで金属アルミニウムやＢｅＯセラミックスより大
きく、ガラス板より３桁以上大きい。
電気抵抗は２ Ｘ １０”Ω■で絶縁体とみなせる程度
である。
である。
放射性同位体（たとえば３− ｐ ）あるいは螢光体（
たとえばエチジウムプロミド）でｗ識された核酸試料を
ゲル２の負極側に乗せ、ゲルの両端を電極液１に接しさ
せゲル長あたり５０Ｖ／ａｍ程度の電圧５で泳動すると
、同一分子量を持つ成分はそれぞれ泳動帯４を形成しつ
つ負極より正極に向かい１分子量にほぼ反比例した移動
度で泳動する。
たとえばエチジウムプロミド）でｗ識された核酸試料を
ゲル２の負極側に乗せ、ゲルの両端を電極液１に接しさ
せゲル長あたり５０Ｖ／ａｍ程度の電圧５で泳動すると
、同一分子量を持つ成分はそれぞれ泳動帯４を形成しつ
つ負極より正極に向かい１分子量にほぼ反比例した移動
度で泳動する。
上記泳動中に生ずるジュール熱のため、従来のガラス板
を使った電気泳動装置では泳動パターンに歪みが生じ、
読み取りが困難となる場合があった。特に読み取りの自
動化、装置化にあたって、その高精度化への障害となる
。本実施例によれば、ガラス板に代わる上記特性のセラ
ミックスの使用により、生じた熱が迅速かつ一様に拡散
するため、ゲル中の温度勾配が少なくなり、泳動パター
ンの歪みが小さくなるという効果がある。
を使った電気泳動装置では泳動パターンに歪みが生じ、
読み取りが困難となる場合があった。特に読み取りの自
動化、装置化にあたって、その高精度化への障害となる
。本実施例によれば、ガラス板に代わる上記特性のセラ
ミックスの使用により、生じた熱が迅速かつ一様に拡散
するため、ゲル中の温度勾配が少なくなり、泳動パター
ンの歪みが小さくなるという効果がある。
次に本発明の他の一実施例を第３図により説明する。本
装置の構成は、第２図のセラミックス板３を絶縁皮膜を
ほどこした金属板６により買き換えたものである。本実
施例によれば、たとえばテフロンの薄膜を金属にコート
することで、第２図の実施例で説明した場合と同様の効
果が期待できる。
装置の構成は、第２図のセラミックス板３を絶縁皮膜を
ほどこした金属板６により買き換えたものである。本実
施例によれば、たとえばテフロンの薄膜を金属にコート
することで、第２図の実施例で説明した場合と同様の効
果が期待できる。
（−５ｉ！明の効果〕
本発明によれば、高い熱伝導率の基板でゲルを支持する
ことにより、ゲル中の温度勾配が小さくなるために、電
気泳動パターンの歪みが小さくなり、高精度な核酸の塩
基配列決定装置が実現できる。さらに本発明によれば電
気泳動パターンの歪みが小さくなるので、従来より高い
電圧で電気泳動が可能となり、高速の塩基配列決定装置
が実現する。
ことにより、ゲル中の温度勾配が小さくなるために、電
気泳動パターンの歪みが小さくなり、高精度な核酸の塩
基配列決定装置が実現できる。さらに本発明によれば電
気泳動パターンの歪みが小さくなるので、従来より高い
電圧で電気泳動が可能となり、高速の塩基配列決定装置
が実現する。
第１図は、従来の電気泳動法の構成図、第２図。
ｆｆ１３図は、それぞれ本発明の一実施例を示す構成図
である。 １・・・電極液槽、２・ゲル、３・・・セラミック板、
４・・泳動帯、５・・・高圧直流電源、６・・金属板、
７・・第 １ 図 第 ２ 霞 第 ３ 図
である。 １・・・電極液槽、２・ゲル、３・・・セラミック板、
４・・泳動帯、５・・・高圧直流電源、６・・金属板、
７・・第 １ 図 第 ２ 霞 第 ３ 図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、核酸断片をゲル電気泳動法により分子量分離し核酸
塩基配列を決定する装置において、電気泳動ゲルを熱伝
導率が高く、電気絶縁力が大きなセラミックスからなる
支持板で支えたことを特徴とする核酸塩基配列自動決定
装置。 ２、上記セラミックス材が、焼結助剤として数％のＢｅ
またはＢｅ含有化合物、ＢまたはＢ含有化合物、Ａｌま
たはＡｌ含有化合物を１種または２種以上含むＳｉＣセ
ラミックス材であることを特徴とする特許請求の範囲第
１項記載の核酸塩基配列自動決定装置。 ３、上記支持板が金属に絶縁被膜をコートしたものであ
ることを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の核酸塩
基配列自動決定装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59123710A JPS613044A (ja) | 1984-06-18 | 1984-06-18 | 核酸塩基配列自動決定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP59123710A JPS613044A (ja) | 1984-06-18 | 1984-06-18 | 核酸塩基配列自動決定装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS613044A true JPS613044A (ja) | 1986-01-09 |
Family
ID=14867435
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59123710A Pending JPS613044A (ja) | 1984-06-18 | 1984-06-18 | 核酸塩基配列自動決定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS613044A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5073246A (en) * | 1990-05-16 | 1991-12-17 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Slab electrophoresis system with improved sample wells and cooling mechanism |
-
1984
- 1984-06-18 JP JP59123710A patent/JPS613044A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5073246A (en) * | 1990-05-16 | 1991-12-17 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Slab electrophoresis system with improved sample wells and cooling mechanism |
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