JPS6163609A - チロシナ−ゼ活性阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は例えばシミ、ソバカスの防除、日焼は防止、色
素沈着症治療などｔ目的とした化粧料、医薬品等に使用
されるチロシナーゼ活性阻害剤に関する。

従来の技術 メラニンはチロシンの酸化重合によって生成するとされ
る黒色〜褐色の生体色素であり、酵素チロシナーゼによ
りその形成が促進される。メラニンの形成自体は生体の
防御機構の一部であり、よ〈コントロールこれた均一な
メラニンの形成は、生体の正常な機能の維持にとっても
、また美容上の観点からも好ましいものである０ところ
が、紫外線等による外部刺激とか、代謝異常などによっ
て生起される局部的なメラニン過剰形成は、シミ、ソバ
カスとか色素沈着症等の美容上好ましくない現象をひき
起す。

このような局部的メラニン過剰形成症の真の原因は不明
であるが、現象的にはメラニン形成に関与する酵素チロ
シナーゼの活性完遂に起因している０ チロシナーゼ活性阻害剤は、チロシナーゼの活性を１狙
害することにより、このようなメラニン過剰形成を抑制
し、皮Ｒの美白さを増進する０こ力皮膚美白効果を利用
して、チロシナーゼ活性阻害剤は、シミ、ソバカスの防
除、日焼は防止、色素沈着症の治療等を目的とした化粧
料、医薬品等に使用されている。

従来、美白効果を目的とするチロシナーゼ活性阻害剤と
して、生薬抽出物Ｃ特開昭ｊｊ−７９０３３号、同ｊｊ
−ｇｇ３３３号、同！グー２３グＺ号。

同ｊ７−１６３３０７号〕、アスコルビン酸と生・にト
抽出物の混合物（特開昭よ、：ｌ−７９０３λ号）、ア
スコルビン酸とアコインの混合物（特開昭！１−ｑ６１
り０　号）　％アスコルビン酸と２評、乙−ハイドロキ
シプロピオフェノンとの混合物（’４開昭３ｌ−ＩＱ）
１３ｇ号）、Ｘペプチド系化合物（特開昭６７−３８２
７号、同！２−グ０グ９！号）、リポ酸系化合物Ｃ特開
昭！７−ノ、２３１０７号）、チオプロニン系化合物（
特開昭ｊ乙−７ｊクグｏ９号）、グルタチオン系化合物
（特開昭６７−１３４１’ｌｊＯ号）、パンテチン系化
合物（特開昭ｊｌｈ−７３０／、２号）、パンテティン
系化合物〔特開昭Ｊ−７−７’ｌＯ！号、同！９−３６
４０４号〕、トロボロン系化合物〔特開昭６１．−２１
．ｇ４ｔ１号、同ｊｌ＞−／４ｔ７７０’１号。

同６６−／グ２７０５号〕、クロモン系化合物（特開昭
６３−−　／　／Ｚ）０号、同！！−ｌグ３９Ｄｇ号）
、フラボノール系化合物Ｃ特開昭５！−９二３０Ｊ−号
。

同！Ｊ’−／／／１ｌｉ１号、同！！−１６７Ｊ’ＫＯ
号、同ｊｇ−／３１９１１号）、ピロン系化合物Ｃ特開
昭６３−３３’３ｇ号、同６７−７２７７ｇ号、同Ｊ’
７−／３’ｌグ０９号〕、コウジ酸系化合物（特開昭！
３−６グ３２号、同ｊ６−７７７６号、同！ｌ、−７７
２７２号、同６９−３３．２０７号）等、多数のものが
開示されている。

発明が解決しようとする問題点 従来知られているチロシナーゼ活性阻害剤は、あるもの
は著効性に欠け、あるものは安定性、安全外に問題があ
ると思われ、またあるものは入手困難であるなど、著効
性、安定性、安全性、経済性等の全てｔ満足した理想的
なものは未だない。

そして現在、チロシナーゼ活性阻害剤には、著効性を第
１としつつも、ζらに安定性、安全性、経済性等をも満
足させた理想的なものの出現が求められている。

問題を解決するための手段 本発明者らは、上記の問題を解決すべ（チロシナーゼに
よるチロシンからのメラニン形成反応を阻害する物質を
広（探索した結果、従来用いられている化合物とは全（
異なる３、４ｔ−メチレンジオキシフェノール及びその
エステル誘導体、エーテル誘導体がチロシナーゼ活性阻
害に著効性を有″′「ること？見出し、さらにその安定
性、安全性、経済性等にも充分なる検討を加え、かつそ
の美白効果を化粧料、医薬品等に応用した結果、これら
化合物がほぼ理想的なチロシナーゼ活性阻害剤を構成し
うろことを確認して、本発明を完成した０才なわち、本
発明は３．Ｚ−メチレンジオキシフェノール、またはそ
のエステル誘導体あるいはエーテル誘導体を有効成分と
して含有するチロシナーゼ活性阻害剤である。

３、Ｚ−メチレンジオキシフェノール（セザモールと称
されろ。す、下、セザモールという）は式（工〕の溝造
式 で表わされる化合物で、天然にはゴマ油中にセザミン、
セザモリン等と共に微量含有され、精製したものは、弱
いフェノール香を有する無色の結晶（融点、４ｇｔｌ？
）である。セザモールが抗酸化作用を有することは広く
知られているが、セザモールが優れたチロシナーゼ活性
阻害作用’Ｙ！することを報告した文献は未だ見当らな
い。

セザモールは天然にはゴマ油中に含有されるが、微量で
あるため、それから分離精製するのは得策ではな（、セ
ザモールを得るには合成法によるのがよい。セザモール
の合成は、コーデンらの方法ＣＲｅｃ、ｔｒａｖ、　ｃ
ｈｉｍ、＋タＪ−、ｇｊ！　〜２０（／９３Ａ））に従
い、ビベロナールに少量のｐ−トルエンスルホン酸を含
有した過酢酸ｌ夜乞加え。

室温にて反応せしめた後、アルカリにて過酢酸を分解し
、続いてフェニルヒドラジンと酢酸１７′１混合液にて
未反応ピベロナールを除去した後、溶媒抽出することに
より、容易に収率よ（行いうろ。その具体例を示すと、
次の如（である。

セザモールの合成 ピベロナールＩｊＱ〕に、少量”　ｐ　−）　／ｌ／　
エフスルホン酸を含有した２０％過酢酸グ２θノを攪拌
下に内温を３０に保ちながらゆつ（つと添加する。反応
混合物を一夜放置して反応を完成させた後、減圧で酢酸
の大部分！留去する。これにアルコール性苛性カリを加
えて過酢酸を分解させた後、ｌＯノのフェニルヒドラジ
ンとｕ　Ｍ、定ノ酢ｅ　ｓ　。

ノを加えて未反応のビペロナールを除去する。これに希
硫酸を加えて酸性とした後、エーテルで抽出する。エー
テル層を重曹水、次いで水で洗浄し。

芒硝で乾燥した後、エーテルを留去して固形のセザモー
ル約９０ｉＰを得る０これをトルエンから再結精製する
。

セザモールはフェノール性水酸基を有するが、皮膚に対
する刺激性は低（、刺毛したモルモットにセザモールの
７２．ｓ％アセトン溶液を塗布しても、紅斑や発赤は認
められず、また感作性も認められなかった。

本発明で有効成分として用いるセザモールのエステル誘
導体の形成に参加するカルボン酸類としては、脂肪族飽
和及び不飽和カルボン酸、例えば酢酸、酪酸、カプロン
酸、オレイン酸等、芳香族カルボン酸、例えば安息香酸
、桂皮酸等、鎖状及び環状テルペン系カルボン酸、例え
ばロジン酸、レチン酸等がある。

またセザモールのエーテル誘導体の形成に参加するアル
コール類には、脂肪族飽和及び不飽和アルコール、例え
ばエタノール、ブタノール、メチルセロンルフ、ヘキセ
ノール、プレニルアルコール等、芳香族アルコール、例
エバベンジルアルコール、フェネチルアルコール等、鎖
状及び環状テルペン系アルコール、例えハケラニオール
、レチノール等がある。

セザモールのエステル及びエーテル誘導体ハ、セザモー
ルとカルボン酸類、またはアルコール類とから常法によ
り合成できる。例えば、セザモール酢酸エステルは、セ
ザモールに少量の燐酸を含有する無水酢酸を加え室温で
反応させた後、水を加えて有機層を分離させ、その有機
層を分取し、蒸留して得られる。また、セザモールプレ
ニルエーテルは、セザモールソーダ塩にプレニルクロラ
イトド少量のベンジルトリエチルアンモニウムクロライ
ドを加えて数時間攪拌還流させ１反応後、１機層を分取
し、蒸留することにより得られる。

その具体例を挙げると、次の如（である。

セザモール酢酸エステルの合成 セザモール、２０９−に無水酢酸３０ｉＰ、燐酸０．２
ｇ−を加え、室温で７時間攪拌した後、−夜装置する０
水ｔｏＯｒｎ８’ｌ加えて２時間攪拌し、分離した有機
層を取り、さらに充分水洗を行った後、１機層を蒸留し
Ｂｂ　ｇ　ｊ°〜Ａ’　４ｔ’／　０．２ｍｍＨ！；Ｐ
の留分な集めて約２３〕のセザモール酢酸エステルヲ得
る０ セサモールブレニルエーテルの合成 セザモール、ｌ／９−に！％苛性ソーダ［／コロ？を加
えてソーダ塩とし、これにプレニルクロライド３３）、
ベンジルトリエチルアンモニウムクロライト”　ｔ　、
ｙを加えて２０〜２ＩＣで７時間、攪拌還流させる。−
夜放置後、分離した有機層を取り。

希塩酸、次いで水で洗浄した後、蒸留しＢｌ）　９７゜
〜／ＤＯ°１０．３ｍｍＨ？の留分を集めて約１Ｋｇ−
のセザモールブレニルエ−ｆ　）Ｌ”％：　（Ｇ　ル。

チル訪導体では、経時的変質はほとんど認められない。

また、セザモールとそのエステル及びエーテル誘導体の
チロシナーゼ活性阻害効果を比較すると、誘導体の方が
若干低い傾向にあるが、使用にあたっては活性阻害効果
のみならず、物質としての安定性、安全性、基材との混
合性、皮膚への吸収性等ｔも勘案して用いるのが望まし
い０チロシナーゼ活性阻害剤としてのセザモール及びそ
の誘導体の化粧料、医薬品への使用は、基材への添加量
り、０／−３重量％で用いることができるが、多くの場
合、０．０１−０．２重量％の添加で充分な効果が得ら
れる。

その添加方法は、エタノール、グリセリン、プロピレン
グリコール等の親水性＠剤か、トリエチルントレート、
ベンジルベンゾエート、ジオクチルフタレート等の親油
性溶剤に溶解して行うが。

基材中に既に上記溶剤類や、油脂、界面活性剤等のよう
なセザモール及びその誘導体を容易に溶解する成分が混
合されているときは直接添加することもできる。

実施列 以下に実施例をあげて本発明をさらに詳しく説明するが
、本発明はこれら実施例のみに限定これイ）で）のでｌ
ｅｔ、ない。

実施列　１ セザモール及びその誘導体のチロシナーゼ活性阻害効果 ０、ノ％のＬ−チロシンとｏ　−ｏ　ｏ　、２％Ｆ＞Ｈ
ｅ銅を含有するＱ、ｌ規定リン酸塩緩衝液（ｐＨ７，０
）コ、０配をとり、これにセザモールまたはその誘導体
を各々０．コ％含有￥るエタノール溶液をｏ、ｏｓｍｔ
加える。次いで市販のチロシナーゼ（シグマケミカル社
ＭＩ１ｍｇ当り！００単位）／（７ｍ９をＱ、ｌ規定リ
ン酸塩緩衝ｆｉ（ｐＨ７，ｏ　）　／　。

ｍ乙に俗解した酵素液を０．Ｏｊｍｉ加える。混合物を
、？２Ｃで６０分間振侃した後、ｇＩＣに！分間保持し
て反応を止・め、Ｑ、ｌ規定リン酸塩緩衝液（ｐＨ７，
０）２ｒｎｉを加えて波長５　ｇ　ｏ　ｎｒｎの吸光Ｋ
　（ＯＤ　）を測定し、次式により、チロシナーゼ反応
の阻害率を求めたところ、第１表の結果が得られた。

阻害率＝ 第１表 実施例　２ メラノーマ細胞中のチロシナーゼ活性阻害効果ウシ胎児
血清２０％を含有するイーグルＭＥＭ培地（日本水産製
〕にメラニン産生腫瘍細胞であるＢ−／６メラノーマ細
胞を接種し、これにセザモール、セザモールレチノエー
ト、セザモールレチノールエーテルを各々０．２％含石
するジメチルスルホキシド浴／ｆｊｌｏ、ｓ％を添加し
て％３２Ｃ１炭酸ガス農度！％の条件下で、−日毎に培
地の４を更新しながら６日間培養した後、細胞を分離し
た０ メラニン含量はライツタ−力−の方法〔Ｄｅｖ。

Ｂｉｏｌ、、　ｇ、　９９〜／　２７　（／ワ６３）〕
に従い、波長グｏ　ｏ　ｎｍにおける細胞７０１１個当
りの吸光度（ＯＤ）で表わした。またチロシナーゼ活性
は岩田ら０方法ＣＰｒｏｃ、Ｊａｐａｎ　Ａｃａｄ、、
　ｓ　ｂ、　　ｓ　Ａ　ｘ　〜Ｊ［７（／９ＫＯ）］に
従い、分離した細胞をコール醒ンーダ０．！％を含有す
る０、００１規定苛性ソーダ液に懸濁し、ホモジナイズ
して細胞を破壊したのち、超高速遠心分離（３ｏ　、　
０００ｒｐｍ。

２０分）を行い、得られた上澄液につき波長り２！ｎｍ
における細胞／　０６個当りのΔに／ｍｉｎとして表わ
した。

その結果を第２表に示す０ 第２表より、セザモール及びその誘導体とも。

細胞内に吸収され、細胞内でチロシナーゼ活性阻害剤と
して有効に作用していることが知られ（−る０ 実施例　３ 黒色金魚の退色実験 直径３０ｃｒＩｔ１深さユｏｃｍの水槽Ａ、Ｂ、Ｃ１Ｄ
に水）Ｏ１ｊｔ入れ、これにセザモール、セザモールア
セテート、セザモールプレニルエーテルノ各Ｏ，Ｓ％エ
タノール溶［／　０１＋１Ｊを加え、Ｄをコントロール
（無添加）として、各水槽に黒色出目金３尾ずつｔ入れ
て飼育した。水槽の水は３日毎に更新した。阻害剤を加
えた水槽中の金魚はいずれも３週目頃より退色化し始め
た０６週口の退色の度合い及び顕微鏡観察による鱗中の
色素胞の数の多少を第３表に示す。

第３表 １二； 充分推測させるものであった０ 実施例　４ クリーム剤 （重量％） ステアリン酸モノグリセリド３．ｊ ステアリン酸　　　　　　　　　　グ、７セチルアルコ
ー、＋１／　　　　　　　　　’、り軽質流動パラフィ
ン　　　　　　ツタ、Ｏイソプロピルミリステート３．
０ グリセリン　　　　　　　　　　ｇ・０ステアリルアル
コール　　　　　　　　３．２プチルバラペ１０　０１ メチルパラベン　　　　　　　　　Ｄ　Ｏタトリエタノ
ールアミン　　　　　　　　　０．１純水　　　　　　
６０４ｔ ｊ易セザモールエタノール液　　　　　　　　１．０香
料　　　　　　０．３ 上記処方中、グリセリン、水、香料を除いたものを先ず
混合し、約７４７’Ｃの加熱下に十分攪拌混合し、その
温度に保ってグリセリン、水を加え、さらによ〈攪拌混
合する。その後、ゆるやかに攪拌を続けながら冷却し、
約よＯＣに下った段階で香料を加え、さらに攪拌を続け
ながら常温まで冷却することによりクリーム剤を得た。

実施例　５ 軟膏 （重量％） カリテバター　　　　　　　　　り００オリーブ油　　
　　　　　　　　２０　０ミツロウ　　　　　　　　　
　　　　２０　０パラフイン　　　　　　　　　　　１
９　タセザモールｎ−ブチルエーテル　　　　　　　ｏ
、１上記処方に従い各成分を混合し、約２０Ｃに加温し
てよく攪拌し、充分均一にした後、容器に流し込み放冷
して軟膏をつくった。

一入Ｘ施例　　６ 化　　粧　　水 （重量係） エタノール　　　　　　　　　　２ｏ　　。

プロピレングリコール　　　　　　　　　　　ｊ、０グ
リセリン　　　　　　　　　　グ、！メチルパラベン　
　　　　　　　　Ｄ、／純　　水　　　　　　　　　　
　　　　　　　　２０　０セザモールアセテートＯ，ｌ 香　　料　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　０
．３７Ｑσ０ 上記処方に従い各成分を混合して化粧水をっ（つだ〇 発明の効果 本発明のセザモールまたはそのエステル誘導体性等の全
てビはぼ満足し、かつ充分なる美白効果、日焼は防止効
果１色素法着症治療効果を有するものである。

手　　続　　補　　正　　書 昭和６０年７２月　３　日

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. ３，４−メチレンジオキシフェノール、またはそのエス
   テル誘導体あるいはエーテル誘導体を有効成分として含
   有するチロシナーゼ活性阻害剤。