JPS6163624A - エイコサペンタエン酸含量の高い糖脂質の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 「産業上の利用分野」 本発明は、海産クロレラからエイコサペンタエン酸（以
下、ＥＰＡという）を高度に含有する糖脂質を製造する
方法に関する。

「従来の技術」 ＥＰＡは、近年脳血栓や動脈硬化症の予防・治療薬とし
て有効であることが認められている物質である。このＥ
ＰＡは、魚油や海水産植物（藻類）油脂中に含まれるこ
とが知られており、ＥＰＡ純度純度２０〜３穏 分別精製され、健康食品用として市販されている。

”またこれとは別に医薬品用として、ＳＯＷ以上の純度
のＥＰＡエテルエステルも試作されている。しかしなが
ら魚油にはＥＰＡと性状の似かよりたドコサヘキサエン
酸などの高度不飽和酸が多く含まれているため、魚油を
原料とした場合、Ｅｌ：ＰＡの含量はたかだか２０チ程
度である。そこでＥＰＡエテルエステル含量を８０％以
上にまで高めるためには、尿素付加法，溶剤分別法１分
別蒸留法，カラムクロマトグラフィーなどをいくつか組
み合わせて実施する必要があシ、操作が繁雑で容易では
ない。

また高純度のＥＰＡエチルエステルの腸管吸収効率はあ
まり良いとは云えず、この点でも効率の良いものが望捷
れていた。

「発明が解決しようとする問題点」 本発明の目的は、ＥＰＡを高度に含有し、吸収性にも優
れた物質を効率良く、簡易に得ることのできる製造方法
を見出すことにある。

「問題点を解決するための手段」 本発明者らは、上記のような目的に合った物質を得るこ
とのできる製造方法を見出すために鋭意研究の結果、次
のような知見を得た。即ちまず、前記の目的を達成する
には、出発原料全魚油に求めるよりも、海産藻類に求め
るべきであると考えた。この海産藻類の脂質中にＥＰＡ
が比較的高濃度に含まれていることはすでに数多くの文
献に報告されているが、いずれも、乾物中に占める脂質
含量が５係以下と極端に低いものがほとんどであった。

そこで本発明者等は海産クロレラの脂質を調べ次のよう
な興味ある結果を得た。即ち、■海産クロレラの総脂質
含量は３５チ〜４０％と高いこと、■総脂質の脂肪酸組
成を見てもＥＰＡが４０％と高いこと、■総脂質を溶剤
分別とシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、リ
ン脂質、糖脂質、トリグリセリド、その他に分画すると
、糖脂質中の総脂肪酸に占めるＥＰＡの割合が７０％以
上と非常に高いことを見出した。一般に、海産藻類の総
脂質の中でも特に糖脂質の中にＥＰＡが高いことは知ら
れているが、海産クロレラの場合は乾物に対する総脂質
分が３５〜４０％と高く、またそのうち約２０〜３０％
（従って乾物に対し８〜１２チ）が糖脂質ということで
、本発明で目的とする糖脂質の供給源としては、最も好
ましいと考えられる。

該糖脂質は、ＥＰＡが持つ血小板凝集抑制作用、血１１
マコレステロール上昇抑制作用等の生理作用を持ち、し
かもＥＰＡのトリグリセリドやエチルエステルと比較す
ると腸管での吸収速度が速いという特徴°を持っている
。

本発明は以上の知見に基づいて完成されたもので、海産
クロレラの総脂質を溶剤分別およびカラムクロマトグラ
フィーを組み合せて分画することを特徴とするＥＰＡ含
量の高い糖脂質の製造性である。

海産クロレラの糖脂質は、溶剤分別およびカラムクロマ
トグラフィーにより、リン脂質、糖脂質、トリグリセリ
Ｐその他に分画される。海産クロレラの総脂質は、乾物
換算で３５〜４０％と高く、そのうち約２０〜３０％が
本発明の目的とする糖脂質である。

以下、本発明を詳述する。

本発明で使用できる海産クロレラはＥＰＡ含量さえ高い
ものであれば特に種属などを限定するものではないが、
通常はｃｈｌｏｒｅｌｌａ　ｍｌｎｕｔｌａｓｌｍｍな
どに分類される海産クロレラを用いる。

まず、この海産クロレラ粉末から、極性及び非極性の有
機溶剤の任意の割合の混合物を用いて脂質抽出を行い、
脱溶剤後、エーテルなどの非極性溶剤にて、中性脂質、
クロロフィル、ステロール類を除く。残った画分をアセ
トンで洗浄し、溶出する物質を集めれば、糖脂質の粗分
画物が得られる。さらにこの方法だけではロスや、他成
分の混入も多いので、得られたすべての両分をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーで再分画し糖脂質の画分を
集めると高純度の糖脂質が高収率で得られる。ただし、
ここに示した分別法は一例であり、本発明の糖脂質の分
画法がこれに限定されるものではない。

「実施例」 以下本発明を実施例により更に詳しく説明する。

実施例１゜ 海産クロレラ（ｃｈｌｏｒ＠ｌｌａ　ｍｌｎｕｔｌｓａ
ｉｍａ）の乾燥粉末１ゆから、クロロホルム：メタノー
ル＝２：１混合溶剤で総脂質の抽出を行い、３８０．９
の抽出脂質を得た。この脱溶剤後の総脂質にジエチルエ
ーテル２１を加えよく混合し、中性脂質、ステロール類
、クロロフィルを除去した。口過によりエーテル不溶分
を回収し、少量のクロロホルム；メタノール−２二１に
溶解した。次にこの溶液をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーにかけ、クロロホルム：メタノール＝２　：　
１〜クロロホルム：メタノール＝１：１〜メタノールで
順次展開した。

得られた各フラクションを薄層クロマトグラフイ−でチ
ェックし、目的とする糖脂質成分のピークを見出し、こ
れを集め、脱溶剤したところ約９０１の糖脂質成分が得
られた。このものの脂肪酸組成を表−１に示す。

表−１ このようにして得られた糖脂質は表−１のように、脂肪
酸の炭素数：不飽和結合数＝２０　：　５のＥＰＡを７
６．０％と高度に含むものであることが確認きれた。ま
た、この糖脂質の糖部分の構造を知るため、このものを
酸加水分解した後糖部分を集め、常法により酵素分析を
行ったところ、ガラクトースデヒドロｒナーゼと特異的
に反応することから、この糖はガラクトースと推定され
た。またガラクトースの含量は、糖脂質１モル当り、約
１モルと推定された。従って、該糖脂質は糖成分がガラ
クトースを主成分とするモノガラクトシルジグリセリド
と認められる。

実施例２゜ 実施例１と同様の方法で得られた糖脂質成分（以下、Ｇ
Ｌという）とＥＰＡエチルエステル（以下ＥＰＡ−ＥＥ
という）（７０％純度）の血小板凝集抑制効果について
比較検討を行った。即ち、ＧＬとＥＰＡ−ＥＥをそのＥ
ＰＡ含量を考慮して、ＥＰＡ投与量が同一になるよう調
整し、これを胃チューブによる強制投与法によりＥＰＡ
として０．５９７日をラット（体重１５０、！ｉ’）に
１０日間投与した。なお、飼料は自由摂取とした。投与
終了後、１夜の絶食を行い、採血を行った。遠心分離法
による通常の方法によシ多血小板血漿（ｐｌａｔｏｌｓ
ｔ　ｒｌａｈ　ｐｌａｓｍａ）と乏血小板血漿（ｐｌａ
ｔｅｌｅｔ　ｐｏｏｒ　ｐｌｍｓｍｍ　）を取シ、血小
板濃度を同一とし、血小板凝集針による凝集能を測定し
た。なお凝集剤としてはコラ−ダンを用いた。

対照群としてＥＰＡを投与しないものの凝集能を１００
とした場合の各群の相対値を表−２に示す。

表−２ このようにＧＬは、ＥＰＡ−ＥＥよ）も有意に血小板凝
集能を抑制することが認められた。

実施例３゜ ラットの小腸でのＥＰＡ−ＥＥとＧＬの吸収性の差を見
るため、実施例２と同様の条件でＥＰＡ−ＥＥとＧＬを
１回だけ（ＥＰＡとして０．５ｉ／ラツト）投与し４時
間後にラットを層殺し、小腸管腔内に残溜する物質を集
め、凍結乾燥した。これより総脂質を抽出し、その中に
含まれるｇＰＡの含量を測定した結果、表−３のようで
あった。なお、ブランクを対照に用いた。

表−３ 表−３から明らかな如くこのＧＬを経口投与した場合の
腸管吸収性は、ＫＰＡ−ＥＥの場合と比べてかなり良い
ものであった。

「発明の効果」 本発明によって得られる糖脂質は、その構成脂肪酸中の
ＥＰＡが７０ｑ６以上と高く、本発明はかような糖脂質
を、海産クロレラの総脂質を溶剤分別およびカラムクロ
マトグラフィーを組み合せて分画するという簡便な操作
で得ることができる。

更に、この糖脂質は実施例に示したように、ＥＰＡが持
つ血小板凝集抑制作用、血清コレステロール上昇抑制作
用等の生理作用を持ち、しかもＥＰＡのトリグリセリド
やエチルエステルと比較すると腸管での吸収速度が速い
という特徴を持っている。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）海産クロレラの総脂質を溶剤分別およびカラムク
   ロマトグラフィーを組み合せて分画することを特徴とす
   るエイコサペンタエン酸含量の高い糖脂質の製造法。
2. （２）海産クロレラがクロレラ・ミニュティシマ（Ｃｈ
   ｌｏｒｅｌｌａ　ｍｉｎｕｔｉｓｓｉｍａ）である特許
   請求の範囲第１項記載のエイコサペンタエン酸含量の高
   い糖脂質の製造法。
3. （３）構成脂肪酸中のエイコサペンタエン酸含量が７０
   ％以上である特許請求の範囲第１項記載のエイコサペン
   タエン酸含量の高い糖脂質の製造法。