JPS62100293A - ストレプトミセテスベクタ−用のプロモ−タ−配置 - Google Patents

ストレプトミセテスベクタ−用のプロモ−タ−配置

Info

Publication number
JPS62100293A
JPS62100293A JP61239432A JP23943286A JPS62100293A JP S62100293 A JPS62100293 A JP S62100293A JP 61239432 A JP61239432 A JP 61239432A JP 23943286 A JP23943286 A JP 23943286A JP S62100293 A JPS62100293 A JP S62100293A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
promoter
fragment
plasmid
streptomyces
vector
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP61239432A
Other languages
English (en)
Inventor
クラウス−ペーター、コラー
ギュンター、ヨハネス、リース
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hoechst AG
Original Assignee
Hoechst AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoechst AG filed Critical Hoechst AG
Publication of JPS62100293A publication Critical patent/JPS62100293A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/36—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Actinomyces; from Streptomyces (G)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/74—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora
    • C12N15/76—Vectors or expression systems specially adapted for prokaryotic hosts other than E. coli, e.g. Lactobacillus, Micromonospora for Actinomyces; for Streptomyces
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/886—Streptomyces

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Electrotherapy Devices (AREA)
  • Channel Selection Circuits, Automatic Tuning Circuits (AREA)
  • Measurement And Recording Of Electrical Phenomena And Electrical Characteristics Of The Living Body (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ストレプトミセス（Ｓｔ　ｒｃｐｔｏＢｅｅ
−ｔｃｓ　）において有効であり、しかも、順次にかつ
真正読取り枠中に配置されるプロモーターの組合せに関
する。この“タンデム配置（Ｌａｎｄｅｍａｒｒａｎｇ
ｅｍｅｎｔ　）”によれば、タンパク質発現を著しく増
加させることができる。本発明は更に、このプロモータ
ー配列を＠何するベクター、このようなベクターを六角
゛するストレブトミセテス宿主株、及びタンパク質産生
のためのそれらの用途に関する。本発明の好ましい態様
は、以下で詳細に説明され、特許請求の範囲において規
定されている。
ストレブトミセテスにおいて有効なプロモーターのＤＮ
Ａ構造についてはさぼど知られていない。
二つのストレブトミセテスプロモーターを真正読取り枠
中に配置させることによりゃ期し得ぬ程にタンパク質発
現を増加させ得ることがここに見出されたのである。こ
のためには、二つのプロモーターか順次直接に配置され
ていることは必要ではなく、しかも、これらプロモータ
ーのＤＮＡ構造に関する現在の知識二がまだ乏しいとい
う事実からも困難であろう。したがって、プロモーター
は両者及び発現すべき構造遺伝子に関する真正読取り枠
中に配置されているだけでよく、様々な長さのＤＮＡセ
グメントが二つのプロモーターの間に（ｆ在していもよ
い。このＤＮＡ架橋の最も好ましい大きさは簡単な予備
実験から容易に調べることかでき、例えば化学的に合成
されたＤＮＡ架橋を適切なリンカ−又はアダプターとし
て使用することができる。
ストレブトミセテスにおいて有効な適切なプロモーター
は、西独特許公開第３，３３１，８６０号明細書に記載
されたハイブリッドプラスミドｐＫＡ１１から得ること
ができる。このためには、この公開明細書の図２で詳細
に説明されている２、３ｋｂＤＮＡセグメントを制限酵
素５ｓｔｌ及びＨｉｎｃｌｌと反応させて、６５０ｂｐ
からなるフラグメントを単離する。このＤＮＡフラグメ
ントはα−アミラーゼインヒビター“テンダミスタット
（ｔｅｎｄａｍｉｓＬａｔ　）　”についての構造遺伝
子及び関連プロモーターを含仔する。このＤＮＡ配列は
、酵素ＰｓｔＩ及びＢａｍＨＩについての制限部位間の
９４０ｂｐからなるセグメント中に位置する（西独特許
公開第３，３３１．８６０号明細書の図２）。
本発明における“タンデム配置”に適したもう一つのプ
ロモーターは、市販プラスミドｐＩＪ７０２　［Ｅ、　
Ｋａｔｚ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｍｌｃｒ
ｏｂｉｏｌ。
１２９（１９８３）　　２７０３−２７１４　　、Ｄ、
　Ａ、　　Ｈｏｐｖｏｏｄ　ｅｔａｌ、、　　Ｇｅｎｅ
ｔｉｃ　Ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｏ［’　５ｔｒ
ｅｐｔｏＬＩＩｙｃｅｓ。
Ａ　　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　　Ｍａｎｕａｉ、　　Ｔ
ｈｅ　　Ｊｏｈｎ　　１ｎｎｅｓ　　Ｆｏｕｎｄａｔ！
ｏｎ、　Ｎｏｒｖｉｃｈ、　Ｅｎｇｌａｎｄ、　　１９
８５．　ｐａｇｅ　２９２　］中に存在している。この
ため、このプラスミドは制限酵素ｓｐｈ　Ｉ及びＰｓｔ
Ｉで切断され、３５０ｂｐからなるフラグメントが単離
される。
プラスミドを制限酵素ＳｐｈＩ及びＢｃｌＩと反応させ
て２７０ｂｐのＤＮＡフラグメントを単離することも可
能である。タンパク質チロシナーゼをコードするｍｅｌ
遺伝子についてのプロモーターはこの２７０ｂｐＤＮＡ
フラグメント上に位置する。
ｍｅｌプロモーターを含有したこれらＤＮＡフラグメン
トは、次いで、それらがストレブトミセテスにおいて有
効なもう一つのプロモーターの−Ｌ流に位置するか、又
はプロモーターと構造遺伝子との間に位置するようにさ
せて、いずれかの望ましい発現ベクター中に、真正読取
り枠中において、挿入することができる。
本発明の他の態様において、ｍｅｌプロモーターをプラ
スミドｐＩ　Ｊ　７０２からはＱｊ−離しないか、構造
遺伝子及び第二プロモーターをこのプラスミド中に、ま
たｉ記と同様に真正読取り枠中において、挿入する。第
二プロモーター及び描込遺伝子をｍｅｌプロモーターの
下流に１Ｊド位として組込むこと、即ち、テンダミスタ
ット構造遺伝子及び関連プロモーターを有するこのＤＮ
Ａフラグメントを利用することが好都合である。この遺
伝子構造体はは１０倍に増大して正しく発現して、α−
アミラーゼインヒビターのテンダミスタットを分ｌ必さ
せるようになる。
プラスミドの細胞当りのコピー数か多い場合は、タンパ
ク質発現は長期の発酵期間にわたって減少することかあ
る。このような場合は、コピー数の少ないベクターが好
ましい。
この遺伝子構造（−例とじて示しただけのものである）
に従って、ストレプトミセス属において自°効な他のプ
ロモーターをこのような”タンデム配置”中に挿入して
、いずれの所望の構造遺伝子をち発現させることが可能
である。
本発明は下記例において詳細に説明されている。
例　　１ ６５０ｂｐのＨｉｎｅＩＩ−５ｓ　ｔ　Ｉフラグメント
を電気溶出法によりｐＫＡｌｌ（西独特許公開第’３，
３３１．，８６０号明細書）由来のＤＮＡ７μｇから単
離する。プラスミドｐＫＡ１１由来の２．３ｋｂフラグ
メント中に７ｆ在するこのフラグメントの配置は第１図
に示されている。図中“ＳＧ”はα−アミラーゼインヒ
ビターの（１１４造遺伝子を示す。構造遺伝子の他に、
６５０ｂｐフラグメントはストレプトミセス・リビダン
ス（ＳＬｒｃｐＬｏｍｙｃｅｓ　ｌ　１ｖｉｄａｎｓ　
）　Ｔ　Ｋ　２４での発現に必°皮なすべての調節領域
を含ｆ４シている。
市販大腸菌ベクターｐ　Ｕ　ＣＩ　Ｑ　（Ｃ，Ｙａｎｉ
ｓｅｈ−Ｐｅｒｒｏｎ　　ｅＬ　　ａｌ、、　　Ｇｅｎ
ｅ　　３３　　（１９１’１５）、　　１０３−１１９
、Ｎｅｗ　Ｅｎｇｌａｎｄ　ｌ’３ｉｏ１ａｂｓ　１９
８５／ＨＣａＬａｌｏｇ、　ｐａｇｅｓ９０／９１　、
１１Ｒ１，、ＢｅＬｈｅｓｄａ　Ｒｅ５ｅａｒｅｈ　Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＣａＬａｌｏｇｕｅ　＆　Ｉ？
ｅｒｅｒｅｎｅｅ　Ｇｕｉｄｅ、　ｐａｇｅｓ　１３６
／１３７］を制限エンドヌクレアーゼＨｉｎｃＩＩ及び
Ｓｓｔ■で二重消化し、直鎖プラスミドを」１記のテン
ダミスタフ１−遺伝子劇自“６５０ｂｐのＳｓ　ｔ　Ｉ
　−Ｈ１ｎｃｌＩフラグメントと連結させる。大腸菌Ｊ
　Ｍ　１０１の形質転換後、ｐＫＡＩ６５０と称されか
つ組込まれた６５ｏｂｐフラグメントを釘するキ■換え
プラスミドをＤ−８シたクロー　ンを単離する。このプ
ラスミドは第２図に示されている（スケール通りではな
い）。図中、Ｐはプロモーター領域を示す。
単離されたｐＫＡ１６５０プラスミドＤＮＡを；Ｌ１１
限エンドヌクレアーセ５ｓｔＩ及びｓｐｈ　Ｉで又は５
ｓｔｌ及びＰｓｔＩて二重消化し、しかる後分離用ゲル
゛市気泳動及び電気溶出に付して、約６５０ｂｐのフラ
グメントを’ｌ’−Ｍする。
例　　２ プラスミドｐ　Ｉ　Ｊ　７０２　　（Ｊｏｈｎ　Ｉｎｎ
ｅｓ　Ｐｏｕｎｄａ−ｃｉｏｎ、　Ｎｏｒｗｉｅｈ、　
Ｅｎｇｌａｎｄから入手）を制限エンドヌクレアーゼ５
ｓｔＩ及びｓｐｈ　Ｉて消化し、４００ｂｐの５ｓｔＩ
−３ｐｈｌフラグメントをアガロースゲル電気泳動によ
り残留ベクターＤＮＡから分離する。ｌｌｊ離精製され
たベクターＤＮＡ１μｇをｐＫＡＩ６５０山来ｂｐの５
ｓｔ１−ＳｐｈＩフラグメント（例１）０．’３μｇと
連結し、ストレプトミセス・リビダンスＴＫ　２Ｊ（Ｊ
ｏｈｎ　Ｉｎｎｅｓ　Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎから人手）
をそれ自体公知のノＪ′法により連結生成物で形質転換
する。望ましいクローンを、下記プレート試験によりチ
オストレプトンに対する耐性およびα−アミラーゼイン
ヒビターの産生を調べて選択する。
パンクレアチン０．４〜１．　０ｍｇ／ｍｌ含有水溶液
５ｍｌをコロニーに注ぎ、混合物を３７℃て】時間イン
キュベートする。溶液を次いて除去し１．２ｍ　Ｑ　Ｏ
６のデンプン寒天５ｍｌと交換する。３７℃で２時間イ
ンキュベート後、発色させるためにヨウ素／ヨウ化カリ
ウム溶液５ｍｌをブし・−１−、ｈに７主ぐ。
青色環を形成するコロニーは、クローンかヂングミスタ
ノトを合成放出していることをボす。
ｐ　Ａ　Ｘ　６５０と称されかつα−アミラーゼインヒ
ビターのテンダミスタットを合成する組換えプラスミド
は第３図に示されている（スｒ−ル通りてはない）。こ
の図において　ｐ　／　はｐＩＪ７０２由来ｍｅｌ遺伝
子のプロモーター領域を示す。
例′３（比較例） 操作は例２と同様に行うが、６５０ｂｐのＰｓｔＩ−３
ｓｔｌフラグメントをプラスミドｐＩＪ７０２から除去
し、残部プラスミドをｐＫＡＩ６５０由来の約６５０ｂ
ｐからなる５ｓｔＩ−ＰｓｔＩフラグメントと連結させ
る。
このようにして得られる組換えプラスミドｐＡＸ６５１
は、α・アミラーゼ阻害試験において、プラスミドｐＡ
Ｘ６５０　（例２）と比べ約ｌ／１０の値を示す。
例４ “シャトルベクター”ｐｓＷｌ　（欧州特許出願公開節
０．１５８，２０１号明細書の図２６）を制限酵素Ｂｅ
１ｌで部分的に消化し、１６，６ｋｂの直鎖フラグメン
トを０．４％アガロースゲルによる電気泳動後に単離す
る。Ｃド離されたＤＮＡフラグメントを緩衝フェノール
溶液で抽出し５、エタノールで沈降させる。
この方法で精製されたＤＮＡフラグメントを、α−アミ
ラーゼインヒビターの完全遺伝子を含有したｐＡＸ６５
０由来１．８１ｋｂのＢｅ１ｌフラグメントと連結させ
る。連結混合物をストレプトミセス争リビダンスＴＫ２
４に導入して形質転換させる。チオストレプトンに対し
て耐性の絹換えクローンは、長期の発酵時間にわたり、
一定の収率でα−アミラーゼインヒビターのテンダミス
タットを産生放出する。
【図面の簡単な説明】
第１図は、ｐＫＡ１１由来の２．３ｋｂフラグメント中
に存在する０、６５ｋｂのＨｉｎｃｌＩ−３ｓｔｌフラ
グメントの配置を示す説明図である。 第２図は、プラスミドｐＫＡＩ６５０の制限酵素地図で
ある。 第３図は、プラスミドｐＡＸ６５０の制限酵素地図であ
る。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、ストレプトミセス（ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）に
    おいて活性であり、かつ、ストレプトミセスにおいて活
    性な他のプロモーターの後の真正読取り枠中に配置され
    ているプロモーター。 ２、プロモーターの一つがプラスミドｐＩＪ７０２の３
    ５０ｂｐのＰｓｔ I −Ｓｐｈ I フラグメント中に位置
    するものである、特許請求の範囲第１項記載のプロモー
    ター配置。 ３、プロモーターがプラスミドｐＩＪ７０２の２７０ｂ
    ｐのＢｃｌ I −Ｓｐｈ I フラグメント中に位置する、
    特許請求の範囲第２項記載のプロモーター配置。 ４、プロモーターの一つがプラスミド ｐＫＡ I １の６５０ｂｐのＨｉｎｃII−Ｓｓｔ I フラ
    グメント中に位置するものであって、そのフラグメント
    が０．９４ｋｂのＰｓｔ I −ＢａｍＨ I フラグメント
    中に位置しているものである、特許請求の範囲第１項記
    載のプロモーター配置。 ５、第二プロモーターがプラスミドｐＩＪ ７０２の３５０ｂｐのＰｓｔ I −Ｓｐｈ I フラグメン
    ト中に位置するものである、特許請求の範囲第４項記載
    のプロモーター配置。 ６、第二プロモーターがプラスミドｐＩＪ ７０２の２７０ｂｐのＢｃｌ I −Ｓｐｈ I フラグメン
    ト中に位置するものである、特許請求の範囲第４項記載
    のプロモーター配置。 ７、特許請求の範囲第１項記載のプロモーター配置を有
    する、ストレプトミセスにおいて活性なベクター。 ８、特許請求の範囲第７項記載のベクターを含有する、
    ストレプトミセス宿主細胞。 ９、ストレプトミセス・リビダンス種に属する、特許請
    求の範囲第８項記載の宿主細胞。 １０、ストレプトミセス宿主細胞内において特許請求の
    範囲第７項記載のベクターを発現させることからなる、
    タンパク質生産方法。 １１、宿主細胞がストレプトミセス・リビダンスである
    、特許請求の範囲第１０項記載の方法。 １２、タンパク質がテンダミスタット （ｔｅｎｄａｍｉｓｔａｔ）である、特許請求の範囲第
    １０項記載の方法。 １３、プラスミドｐＫＡ I ６５０（第２図）。 １４、プラスミドｐＡＸ６５０（第３図）。
JP61239432A 1985-10-10 1986-10-09 ストレプトミセテスベクタ−用のプロモ−タ−配置 Pending JPS62100293A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3536182.4 1985-10-10
DE19853536182 DE3536182A1 (de) 1985-10-10 1985-10-10 Promotor-anordnung fuer streptomyceten-vektoren

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JPS62100293A true JPS62100293A (ja) 1987-05-09

Family

ID=6283273

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP61239432A Pending JPS62100293A (ja) 1985-10-10 1986-10-09 ストレプトミセテスベクタ−用のプロモ−タ−配置

Country Status (17)

Country Link
US (1) US4918007A (ja)
EP (1) EP0218204B1 (ja)
JP (1) JPS62100293A (ja)
AT (1) ATE70306T1 (ja)
AU (1) AU592825B2 (ja)
CA (1) CA1296271C (ja)
DE (2) DE3536182A1 (ja)
DK (1) DK482686A (ja)
ES (1) ES2038118T3 (ja)
FI (1) FI91887C (ja)
GR (1) GR3003950T3 (ja)
IE (1) IE59590B1 (ja)
IL (1) IL80250A (ja)
NO (1) NO175319C (ja)
NZ (1) NZ217842A (ja)
PT (1) PT83519B (ja)
ZA (1) ZA867697B (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5426036A (en) * 1987-05-05 1995-06-20 Hoechst Aktiengesellschaft Processes for the preparation of foreign proteins in streptomycetes
ZA929284B (en) * 1991-12-12 1993-06-02 Serono Lab P0438, an new calcium-regulated promoter.

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2701890C2 (de) * 1977-01-19 1983-08-04 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Peptielischer Glycosidhydrolase-Inhibitor aus einem Streptomyceten und seine Verwendung
ES505959A0 (es) * 1980-10-09 1982-09-01 Hoechst Ag Procedimiento para la preparacion de un inactivador de alfa-amilasa
US4717666A (en) * 1984-03-05 1988-01-05 Smithkline Beckman Corporation Cloned streptomycete lividans excretable β-galactosidase gene
CA1203185A (en) * 1982-06-03 1986-04-15 Thomas G. Eckhardt Cloned streptomycete gene
JPS5965099A (ja) * 1982-10-05 1984-04-13 Takeda Chem Ind Ltd 発現用プロモ−タ−およびその用途
DE3331860A1 (de) * 1983-09-03 1985-03-21 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren zur herstellung von tendamistat
JPS60160887A (ja) * 1984-02-02 1985-08-22 Green Cross Corp:The ベクタ−

Also Published As

Publication number Publication date
PT83519A (de) 1986-11-01
FI864071A0 (fi) 1986-10-08
FI91887B (fi) 1994-05-13
ATE70306T1 (de) 1991-12-15
ES2038118T3 (es) 1993-07-16
IL80250A (en) 1991-07-18
DE3682861D1 (de) 1992-01-23
AU592825B2 (en) 1990-01-25
US4918007A (en) 1990-04-17
IE59590B1 (en) 1994-03-09
GR3003950T3 (ja) 1993-03-16
IE862658L (en) 1987-04-10
EP0218204A3 (en) 1988-09-07
EP0218204B1 (de) 1991-12-11
PT83519B (pt) 1989-05-31
EP0218204A2 (de) 1987-04-15
FI91887C (fi) 1994-08-25
ZA867697B (en) 1987-05-27
AU6363486A (en) 1987-04-16
IL80250A0 (en) 1987-01-30
NO864020L (no) 1987-04-13
NO175319C (no) 1994-09-28
NZ217842A (en) 1988-09-29
NO175319B (no) 1994-06-20
DK482686A (da) 1987-04-11
CA1296271C (en) 1992-02-25
FI864071L (fi) 1987-04-11
NO864020D0 (no) 1986-10-09
DE3536182A1 (de) 1987-04-16
DK482686D0 (da) 1986-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Carr et al. Cloning and expression of the isopenicillin N synthetase gene from Penicillium chrysogenum
Christie et al. The Agrobacterium tumefaciens virE2 gene product is a single-stranded-DNA-binding protein that associates with T-DNA
Kollek et al. Isolation and characterization of the minimal fragment required for autonomous replication (“Basic replicon”) of a copy mutant (pKN 102) of the antibiotic resistance factor R1
An et al. Both TATA box and upstream regions are required for the nopaline synthase promoter activity in transformed tobacco cells
JPS59166086A (ja) 新規な発現型プラスミドとそれらを用いて仔牛プロキモシン遺伝子を大腸菌内で発現させる方法
JPS59205996A (ja) 蛋白質ａの生産方法
Zhou et al. Mutagenesis of the Agrobacterium VirE2 single-stranded DNA-binding protein identifies regions required for self-association and interaction with VirE1 and a permissive site for hybrid protein construction
JPS59501693A (ja) 組換えｄｎａ分子及びその製造方法
Allan et al. Differential response of multiple ϵ-globin cap sites to cis-and trans-acting controls
Lopez‐Agudelo et al. Rhizobium rhizogenes A4‐derived strains mediate hyper‐efficient transient gene expression in Nicotiana benthamiana and other solanaceous plants
Zheng et al. Stripe rust fungi hijack a host transcriptional repressor to induce TaSWEET14d for enhanced sugar uptake in wheat
JPH01503753A (ja) 豚のマイコプラズマ感染診断に有用なポリペプチド及びそれを製造するための組換えｄｎａ法
JPS62100293A (ja) ストレプトミセテスベクタ−用のプロモ−タ−配置
Klug A DNA sequence upstream of the puf operon of Rhodobacter capsulatus is involved in its oxygen-dependent regulation and functions as a protein binding site
Serrano et al. β3-tubulin is directly repressed by the Engrailed protein in Drosophila
IE831099L (en) Cloning vehicles for polypeptide expression in microbial¹hosts
Lee et al. Analysis of Two Transcription Activation Elements in the Promoter of the Developmentally Regulatedcon-10Gene ofNeurospora crassa
JPS61500588A (ja) クロ−ニング及びγ−インタ−フエロンの発現用ベクタ−、形質転換された細菌及びγ−インタ−フエロンの製法
US4865982A (en) Cloned streptomycete gene
WO2021085852A1 (ko) 질소결핍 유도성 프로모터, 클로렐라 유래 신호 펩타이드 및 이를 포함하는 유전자 발현 시스템
WO1992022640A1 (en) Rb TRANSFERRED CELLS AND METHOD
Jing et al. Plasmid pKKH: an improved vector with higher copy number for expression of foreign genes in Escherichia coli
KR100196676B1 (ko) 방선균과 대장균에서 유용한 다기능 플라스미드 벡터
JPH0195785A (ja) プラスミドｐＢＹ５０３
CN118813701A (zh) 提升大片段基因编辑效率的转染分选方法和转染系统