JPS6216638B2 - - Google Patents
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- JPS6216638B2 JPS6216638B2 JP56189856A JP18985681A JPS6216638B2 JP S6216638 B2 JPS6216638 B2 JP S6216638B2 JP 56189856 A JP56189856 A JP 56189856A JP 18985681 A JP18985681 A JP 18985681A JP S6216638 B2 JPS6216638 B2 JP S6216638B2
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Description
本発明は微生物、特に放線菌目
（Actinomyceta―les）の微生物からのグリコシ
ド―加水分解酵素阻害剤の製造方法に関する。 α―アミラーゼは例えばサリチル酸およびアビ
スシシン（abscisin）のごとき種々の低分子物質
により抑制されることが出来ることが知られてい
る〔T.ヘムベルグ（Hemberg）、J.ラルソン
（Larsson）、Physiol.Plant.14巻861頁（1961年）、
T.ヘムベルグ、ActaChem.Scand.21巻1665頁
（1967年）〕。更に物理的吸着によつて〔T.クルザ
スズクズ（Chrzaszcz）、J.ジヤニツキー
（Janicki）、Bioch.Z.260巻354頁（1933年）および
Bioch.J.28巻296頁（1934年）〕もしくは酵素の変
性および沈澱によつて〔B.S.ミラー（Miller）、
E.ニーン（Kneen）、Arch.Biochem.15巻251頁
1947年、D.H.ストルーマイヤー（Struhmeyer）、
M.H.マリン（Malin）、Biochem.Biophys.
Acta184巻643頁（1969年）〕或る種のアミラーゼ
の作用を非特異的に阻害することが出来る高分子
物質のあることも知られている。唾液アミラーゼ
のデキストリン化作用を低下させるが膵臓
（Pancreatic）アミラーゼの作用に対しては殆ん
ど影響を有しない物質を小麦から蒸溜水によつて
溶出させることが出来ることも観察されている
〔E.ニーン、R.M.サンドステツト（Sandstedt）、
Arch.Bioch.9巻235頁（1946年）〕。 アミラーゼへの阻害作用が非特異的であるこ
と、または阻害剤の阻害作用が、本発明者の研究
により示されたごとく、特に膵臓アミラーゼに対
して微少である、即ち阻害剤：酵素の比が極めて
高い場合にのみアミラーゼの殆んど完全な阻害作
用（90％までおよびそれ以上）が達せられること
がこれら公知の阻害剤の欠点である。 従前の提案の一つ（英国特許出願20581／71）
はアミラーゼ阻害剤に関する。実際、従前の提案
は、電解質水溶液好ましくは稀薄な酸を用いるこ
とにより、またはとりわけ好ましくは酸性PH値に
おいて水―アルコール（C1〜C3アルコール）混
合物を用いることにより上記の欠点を示さない膵
臓アミラーゼに対する極めて活性な阻害剤を小麦
（粗びき小麦、小麦粉もしくは小麦グルテン）か
ら高収率にて抽出することが出来ることを示して
いる。このようにして得られた物質は極めて低い
阻害剤：酵素比においてさえも90％以上程度まで
膵臓アミラーゼを阻害する。 本発明は放線菌類から得られるグリコシド―加
水分解酵素に対する阻害剤、および特定的には放
線菌類から得られる好ましくは消化管水化物分解
酵素であるグリコシド―加水分解酵素に対する阻
害剤に関する。これらの阻害剤は放線菌目の微生
物、特にアクチノプラナ科（Actinoplanacea）の
微生物により産生される。それらはまたアクチノ
プラネス属（Actinoplanes）、アンプウラリエラ
属（Ampullariella）、ストレプトスホランジユウ
ム属（Straptostosporangium）、ピリメリア属
（Pilimelia）及びプラノモノスホラ属
（Planomonospora）の菌株により高度産生され
る。 従つて、本発明により、新規の産生物として微
生物源のグリコシド―加水分解酵素阻害剤が提供
される。 本発明はアクチノプラナ科に属するグリコシド
―加水分解酵素阻害剤生産菌を培養しそして得ら
れた培養物からグリコシド―加水分解酵素阻害剤
を抽出することを特徴とするグリコシド―加水分
解酵素阻害剤の製造方法を提供する。 下記の方法を用いて有効な菌株を検索すること
が出来る。 放線菌目の菌株、特にアクチノプラナ科の菌株
は微生物寄託機関から得られるこれらの目の菌株
もしくは土壌の試料から公知の方法により分離さ
れる。この種の菌株を成育させることが出来る培
養液を入れた培養フラスコにこの種の菌株を接種
して培養する。例えば、フオン、プロト（von
plotho）に従う２％グリセリン、0.25％グリシ
ン、0.1％NaCl、0.1％K2HPO4、0.01％FeSO4・
7H2O、0.01％MgSO4・7H2Oおよび0.1％CaCO3
なる組成のグリセリン―グリシン培養液を用いる
ことが出来る。更に迅速に成育させるためには、
この種の培養液に、例えばとうもろこし浸漬液も
しくは大豆粉もしくは酵母抽出物もしくは蛋白加
水分解物例えばNZ―アミン類、もしくはそれら
の物質の混合物のごとき複合炭素源を加えること
も推奨される。これらの場合、培養液のPHを調節
しなければならない。培養液の初期PHは6.0と8.0
の間、とくに6.5と7.5の間が好ましい。 培養液のグリセリンの代りにまた例えばグリコ
ーズもしくはシユクローズもしくは澱粉もしくは
それらの物質の混合物のごとき他の炭素源を使用
することも出来る。グリシンの代りに、例えば酵
母抽出物、大豆物、NZ―アミン類、フアーマメ
デイアおよび他のもののごとき他の窒素源を用い
ることも可能である。炭素源および窒素源の濃
度、かつまた塩類の濃度は広い範囲内で変えるこ
とが出来る。FeSO4、CaCO3およびMgSO4はま
た完全に省くことも出来る。例えば、培養液100
〜200mlを１リツトル容エルレンマイヤー・フラ
スコに導入し、公知の方法で滅菌しそして検索さ
れるべき菌株を接種し、そしてそのフラスコを15
〜60℃、好ましくは24〜50℃にて振とう機上にて
培養する。 培養体が成育を示すならば、それは一般に１〜
10日後、殆んどの場合３〜５日後に起るが、例え
ば試料５mlをとりそしてこの試料の菌糸体を過
もしくは遠心分離により分離する。下記の試験に
おいては培養物液０〜100μを用いそして１ml
当りの阻害能を計算する。 菌糸体を１回にアセトン５容（菌糸体の容積１
容に対して）を用いて２回、そのあとジエチルエ
ーテル１×５容を用いて抽出し、抽出菌糸体残留
物を真空中20℃にて乾燥しそして得られた乾燥菌
糸体粉末をジメチルスルホキシド（DMSO）４〜
８重量部を用いて抽出する。 この二つのアセトン抽出液およびエーテル抽出
液を合しそして真空中にて濃縮し殆んど乾固す
る。これら抽出液からの残渣を乾燥粉末からの
DMSO抽出液と合し、その０〜100μを下記の
試験において用いる。 アミラーゼ試験 １アミラーゼ阻害剤単位（1AIU）は２アミラ
ーゼ単位を50％の程度まで阻害する阻害剤の量と
定義される。１アミラーゼ単位（AU）は下記の
試験条件下にて１分間に澱粉中のグリコシド結合
１μ当量を分解する酵素の量である。分解された
結合合のμValは生成される還元糖のμValとし
てジニトロサリチル酸を用いて比色法により測定
され、そしてマルトーズ検量線を用いてマルトー
ズ当量のμValとして明示される。試験を行うた
めには、アミラーゼ溶液（20〜22AU／ml）0.1ml
を0.02Mグリセロ燐酸ナトリウム緩衝液／
0.001MCaCl2PH6.9 0.4ml中にて試験されるべき阻
害剤０〜400μｇもしくは培養物液０〜100μも
しくは菌糸体抽出物を用いて処理し、そしてその
混合物を湯浴中で35℃にて約10〜20分間恒温維持
（equilibrate）させる。次にそれを、予め35℃に
加温された１％濃度の澱粉溶液〔メルク社、ダル
ムスタツト（Messrs.Merck.Darmstadt）No.1252
の可溶性澱粉〕0.5mlを用いて35℃にて３分間培
養し、そしてそのあとジニトロサリチル酸試薬１
mlを用いて処理する〔P.ベルンフエルト
（Bernfeld）、コロビツク―カプラン（Colowick
―Kaplan）、Meth.Enzymol.，１巻149頁に従
う〕。色を発色させるために、該バツチを沸騰湯
浴上にて５分間加熱し、次に冷却しそして蒸溜水
10mlを用いて処理する。アミラーゼを含まない適
当に混合した空実験試料に対して540nmにおける
吸光を測定する。評価としては、阻害剤の添加後
なお活性を示すアミラーゼ活性度を、前もつて記
録されたアミラーゼの検量線から読みとり、そし
てそれから用いたアミラーゼのパーセント阻害度
を計算する。 パーセント阻害度は商 阻害剤＋のμｇ／ＡＵ＋＋ （＋固体分に対して、＋＋同一系の阻害されて
いない混合物中のAU）なる関数としてプロツト
され、そして50％阻害点を曲線からよみとりそし
て阻害剤のAIU／mgに換算する。 サツカラーゼ試験 １サツカラーゼ阻害剤単位（SIU）は２サツカ
ラーゼ単位を50％程度まで阻害する阻害剤の量と
して定義される。１サツカラーゼ単位（SU）は
下記の試験条件下にて１分間にシユクローズ１μ
モルをグルコーズおよびフラクトーズに分解する
酵素の量である。分解されたシユクローズのμ
molを生成したグルコーズおよびフラクトーズと
してジニトロキリチル酸を用いて比色法により測
定し、そしてグルコーズ／フラクトーズ検量線を
用いて計算した。 試験を行うためには、サツカラーゼ溶液1)
（0.3〜0.4SU／ml）0.1mlを、0.1Mマレイン酸ナ
トリウムPH6.0の0.1ml中にて、阻害剤０〜400μ
ｇもしくは研究されるべき菌糸体抽出物の培養物
液０〜５μと混合し、そしてその混合物を湯浴
中35℃にして約10〜20分間恒温維持する。次にそ
れを予め35℃に加温された0.056Mシユクローズ
溶液（シユクローズ：メルク社、ダルムスタツ
ト、No.7652）0.2mlを用いて35℃にて60分間培養
し、そしてつづいてジニトロサリチル酸試薬0.5
mlを用いて処理する（P.ベルンフエルト、コロビ
ツク―カプラン、Meth.Enzymol.，１巻149頁に
従う）。色を発色するために、該混合物を沸騰湯
浴上で５分間加熱し、次に冷却しそして蒸溜水５
mlを用いて処理する。サツカラーゼを含まない適
当な空実験値に対して540nmにて測定する。 評価としては、阻害剤の添加後なお活性を示
す。 １ B.ボルグストロム（Borgstrom）、A.ダール
クイスト（Dahlguist）、ActaChem.Scand.12巻
1997頁（1958年）に従つて、豚の腸管粘膜から
の可溶化サツカラーゼ。 サツカラーゼ単位を検量線から測定しそして用
いたサツカラーゼのパーセント阻害度をそれから
計算する。パーセント阻害度は商 阻害剤＋のμｇ／ＳＵ＋＋ ＋固体分に対して ＋＋同一系統の阻害されていない混合物中の
SUなる関数としてプロツトされそして50％阻害
点を曲線から読みとりそして阻害剤のSIU／mgに
換算する。 マルターゼ試験 １マルターゼ阻害剤単位（1MIU）は２マルタ
ーゼ単位を50％の程度まで阻害する阻害剤の量と
して定義される。１マルターゼ単位（MU）は下
記の試験条件下にて１分間にｐ―ニトロフエニル
―α―Ｄ―グルコピラノシド中のグルコシド結合
１μ当量を分解酵素の量である。分解された結合
のμValはｐ―ニトロフエノレートのμValとし
て吸光光度法により測定される。 試験を行うためには、マルターゼ溶液1)（0.09
〜0.12MU／ml）0.05mlを阻害剤０〜400μｇもし
くは研究されるべき培養液もしくは菌糸体抽出物
０〜20μと0.1Mマレイン酸ナトリウム緩衝液
0.05ml中でPH6.0にて約10〜20分間35℃の湯浴中
で恒温に維持する。次に該混合物を予め35℃に加
温されたPHの0.1M １ B.ボルグストロム、A.ダールクイスト、
Acta Chem.Scand.12巻1997頁（1958年）に従
つて豚の腸管粘膜からの可溶化マルターゼ、ま
たは人間の膵液の凍結乾燥物。 マレイン酸ナトリウム緩衝液にｐ―ニトロフエ
ニル―α―Ｄ―グルコピラノシド〔セルバ社、ハ
イデルベルグ（Messrs.Serva，Heidelberg）No.
30，716〕を0.4％の濃度にとかした溶液0.1mlと
共に35℃にて30分間培養し、そしてそのあとPH
7.6の0.565Mトリス緩衝液２mlを加えることによ
り停止させる。マルターゼを含まない適当に混合
された空実験試料と対照して403nmにおける吸光
を直ちに測定する。 評価としては、阻害剤添加後においてなお活性
なマルターゼ単位をPH7.6においてｐ―ニトロフ
エノレート陰イオンに対してE403＝13.2×103の
モル吸光係数を基準にして計算し、そしてそのな
お活性なマルターゼ単位から、用いたマルターゼ
のパーセント阻害度を計算する。パーセント阻害
度は商 阻害剤のμｇ＋／ＭＵ＋＋ ＋固体分に対して ＋＋阻害されていない混合物中のMU なる関数としてプロツトされそして50％阻害点を
曲線から読みとりそして阻害剤のMIU／mgに換
算する。 この簡単な日常試験において、マルターゼの実
際的な期基質でなく人工的な基質（マルトーズ）
が用いられるので、製剤は更にダールクイスト
（Dahlquist）（Enzyme.biol.clin.11巻52頁（1970
年）により記載されている更に複雑なマルターゼ
試験によりマルターゼ阻害作用について試験され
る。本発明においてはマルトーズに対するマルタ
ーゼの作用中に生成されるグリコーズがグリコー
ズオキシダーゼ、ペルオキシダーゼおよびジアニ
シジンを用いて酵素作用を用いる方法で比色法に
より測定される。ここに記載されるマルターゼ阻
害剤のすべてはこの試験においても阻害作用を示
す。 放線菌目の種々の科および属の菌株を全体の系
統にわたつて上記の方法に従つて試験した。その
試験において、明瞭な、時として弱い、グリコシ
ド―加水分解酵素阻害作用が種々の科および属に
ついて見出された。特にアクチノプラナ科の菌株
が収率に関して最も有益であることが示された。 これらの科のなかで、アクチノプラナ属、アム
プウラリエラ属およびストレプトスホランジユウ
ム属において特に活性な菌株が見出された。試験
される菌株のうち、下に列記される菌株が明示さ
れた試験の一つもしくはそれ以上において特に活
性であることが示された。 なお、以下に例示する菌株の菌学的性質に関し
て、ATCC19190の公知菌株については、例え
ば、C.Gupta.J.Antibiol.，Ser.A.，18，125頁
（1965年）に更に詳細に記載されている。 又、ATCC12428公知菌株については、
Bergey′s Manual第８版、712〜713頁に、さら
に、CBS367.66（ATCC14539）及びCBS191・64
（ATCC15349）公知菌株については、夫々、例え
ば、J.Busha Mitunell，Sci.Soc.，79，69頁
（1963年）及びJ.Elisha Mitchell，Sci，Soc.，
79，61頁（1953年）にさらに詳細に記載されてい
る。 そしてCBS190・64（ATCC15348）公知菌株に
ついてはBergey′s manual，８版，717頁に、
夫々、詳しく記載されている。 又、KCC―A0027（CBS43261）、KCC―A0025
（CBS42961）及びKCC―A0028（CBS43361）公
知菌株については、野村及び大原、J.Ferm.
Techn.，38，405頁（1960年）に詳しく記載され
ており、又更に、CBS193.64公知菌株について
は、J.N.Couch and Elisha Mitchell，Sci.Soc.
，79，54頁（1963年）に、記載されている。
（Actinomyceta―les）の微生物からのグリコシ
ド―加水分解酵素阻害剤の製造方法に関する。 α―アミラーゼは例えばサリチル酸およびアビ
スシシン（abscisin）のごとき種々の低分子物質
により抑制されることが出来ることが知られてい
る〔T.ヘムベルグ（Hemberg）、J.ラルソン
（Larsson）、Physiol.Plant.14巻861頁（1961年）、
T.ヘムベルグ、ActaChem.Scand.21巻1665頁
（1967年）〕。更に物理的吸着によつて〔T.クルザ
スズクズ（Chrzaszcz）、J.ジヤニツキー
（Janicki）、Bioch.Z.260巻354頁（1933年）および
Bioch.J.28巻296頁（1934年）〕もしくは酵素の変
性および沈澱によつて〔B.S.ミラー（Miller）、
E.ニーン（Kneen）、Arch.Biochem.15巻251頁
1947年、D.H.ストルーマイヤー（Struhmeyer）、
M.H.マリン（Malin）、Biochem.Biophys.
Acta184巻643頁（1969年）〕或る種のアミラーゼ
の作用を非特異的に阻害することが出来る高分子
物質のあることも知られている。唾液アミラーゼ
のデキストリン化作用を低下させるが膵臓
（Pancreatic）アミラーゼの作用に対しては殆ん
ど影響を有しない物質を小麦から蒸溜水によつて
溶出させることが出来ることも観察されている
〔E.ニーン、R.M.サンドステツト（Sandstedt）、
Arch.Bioch.9巻235頁（1946年）〕。 アミラーゼへの阻害作用が非特異的であるこ
と、または阻害剤の阻害作用が、本発明者の研究
により示されたごとく、特に膵臓アミラーゼに対
して微少である、即ち阻害剤：酵素の比が極めて
高い場合にのみアミラーゼの殆んど完全な阻害作
用（90％までおよびそれ以上）が達せられること
がこれら公知の阻害剤の欠点である。 従前の提案の一つ（英国特許出願20581／71）
はアミラーゼ阻害剤に関する。実際、従前の提案
は、電解質水溶液好ましくは稀薄な酸を用いるこ
とにより、またはとりわけ好ましくは酸性PH値に
おいて水―アルコール（C1〜C3アルコール）混
合物を用いることにより上記の欠点を示さない膵
臓アミラーゼに対する極めて活性な阻害剤を小麦
（粗びき小麦、小麦粉もしくは小麦グルテン）か
ら高収率にて抽出することが出来ることを示して
いる。このようにして得られた物質は極めて低い
阻害剤：酵素比においてさえも90％以上程度まで
膵臓アミラーゼを阻害する。 本発明は放線菌類から得られるグリコシド―加
水分解酵素に対する阻害剤、および特定的には放
線菌類から得られる好ましくは消化管水化物分解
酵素であるグリコシド―加水分解酵素に対する阻
害剤に関する。これらの阻害剤は放線菌目の微生
物、特にアクチノプラナ科（Actinoplanacea）の
微生物により産生される。それらはまたアクチノ
プラネス属（Actinoplanes）、アンプウラリエラ
属（Ampullariella）、ストレプトスホランジユウ
ム属（Straptostosporangium）、ピリメリア属
（Pilimelia）及びプラノモノスホラ属
（Planomonospora）の菌株により高度産生され
る。 従つて、本発明により、新規の産生物として微
生物源のグリコシド―加水分解酵素阻害剤が提供
される。 本発明はアクチノプラナ科に属するグリコシド
―加水分解酵素阻害剤生産菌を培養しそして得ら
れた培養物からグリコシド―加水分解酵素阻害剤
を抽出することを特徴とするグリコシド―加水分
解酵素阻害剤の製造方法を提供する。 下記の方法を用いて有効な菌株を検索すること
が出来る。 放線菌目の菌株、特にアクチノプラナ科の菌株
は微生物寄託機関から得られるこれらの目の菌株
もしくは土壌の試料から公知の方法により分離さ
れる。この種の菌株を成育させることが出来る培
養液を入れた培養フラスコにこの種の菌株を接種
して培養する。例えば、フオン、プロト（von
plotho）に従う２％グリセリン、0.25％グリシ
ン、0.1％NaCl、0.1％K2HPO4、0.01％FeSO4・
7H2O、0.01％MgSO4・7H2Oおよび0.1％CaCO3
なる組成のグリセリン―グリシン培養液を用いる
ことが出来る。更に迅速に成育させるためには、
この種の培養液に、例えばとうもろこし浸漬液も
しくは大豆粉もしくは酵母抽出物もしくは蛋白加
水分解物例えばNZ―アミン類、もしくはそれら
の物質の混合物のごとき複合炭素源を加えること
も推奨される。これらの場合、培養液のPHを調節
しなければならない。培養液の初期PHは6.0と8.0
の間、とくに6.5と7.5の間が好ましい。 培養液のグリセリンの代りにまた例えばグリコ
ーズもしくはシユクローズもしくは澱粉もしくは
それらの物質の混合物のごとき他の炭素源を使用
することも出来る。グリシンの代りに、例えば酵
母抽出物、大豆物、NZ―アミン類、フアーマメ
デイアおよび他のもののごとき他の窒素源を用い
ることも可能である。炭素源および窒素源の濃
度、かつまた塩類の濃度は広い範囲内で変えるこ
とが出来る。FeSO4、CaCO3およびMgSO4はま
た完全に省くことも出来る。例えば、培養液100
〜200mlを１リツトル容エルレンマイヤー・フラ
スコに導入し、公知の方法で滅菌しそして検索さ
れるべき菌株を接種し、そしてそのフラスコを15
〜60℃、好ましくは24〜50℃にて振とう機上にて
培養する。 培養体が成育を示すならば、それは一般に１〜
10日後、殆んどの場合３〜５日後に起るが、例え
ば試料５mlをとりそしてこの試料の菌糸体を過
もしくは遠心分離により分離する。下記の試験に
おいては培養物液０〜100μを用いそして１ml
当りの阻害能を計算する。 菌糸体を１回にアセトン５容（菌糸体の容積１
容に対して）を用いて２回、そのあとジエチルエ
ーテル１×５容を用いて抽出し、抽出菌糸体残留
物を真空中20℃にて乾燥しそして得られた乾燥菌
糸体粉末をジメチルスルホキシド（DMSO）４〜
８重量部を用いて抽出する。 この二つのアセトン抽出液およびエーテル抽出
液を合しそして真空中にて濃縮し殆んど乾固す
る。これら抽出液からの残渣を乾燥粉末からの
DMSO抽出液と合し、その０〜100μを下記の
試験において用いる。 アミラーゼ試験 １アミラーゼ阻害剤単位（1AIU）は２アミラ
ーゼ単位を50％の程度まで阻害する阻害剤の量と
定義される。１アミラーゼ単位（AU）は下記の
試験条件下にて１分間に澱粉中のグリコシド結合
１μ当量を分解する酵素の量である。分解された
結合合のμValは生成される還元糖のμValとし
てジニトロサリチル酸を用いて比色法により測定
され、そしてマルトーズ検量線を用いてマルトー
ズ当量のμValとして明示される。試験を行うた
めには、アミラーゼ溶液（20〜22AU／ml）0.1ml
を0.02Mグリセロ燐酸ナトリウム緩衝液／
0.001MCaCl2PH6.9 0.4ml中にて試験されるべき阻
害剤０〜400μｇもしくは培養物液０〜100μも
しくは菌糸体抽出物を用いて処理し、そしてその
混合物を湯浴中で35℃にて約10〜20分間恒温維持
（equilibrate）させる。次にそれを、予め35℃に
加温された１％濃度の澱粉溶液〔メルク社、ダル
ムスタツト（Messrs.Merck.Darmstadt）No.1252
の可溶性澱粉〕0.5mlを用いて35℃にて３分間培
養し、そしてそのあとジニトロサリチル酸試薬１
mlを用いて処理する〔P.ベルンフエルト
（Bernfeld）、コロビツク―カプラン（Colowick
―Kaplan）、Meth.Enzymol.，１巻149頁に従
う〕。色を発色させるために、該バツチを沸騰湯
浴上にて５分間加熱し、次に冷却しそして蒸溜水
10mlを用いて処理する。アミラーゼを含まない適
当に混合した空実験試料に対して540nmにおける
吸光を測定する。評価としては、阻害剤の添加後
なお活性を示すアミラーゼ活性度を、前もつて記
録されたアミラーゼの検量線から読みとり、そし
てそれから用いたアミラーゼのパーセント阻害度
を計算する。 パーセント阻害度は商 阻害剤＋のμｇ／ＡＵ＋＋ （＋固体分に対して、＋＋同一系の阻害されて
いない混合物中のAU）なる関数としてプロツト
され、そして50％阻害点を曲線からよみとりそし
て阻害剤のAIU／mgに換算する。 サツカラーゼ試験 １サツカラーゼ阻害剤単位（SIU）は２サツカ
ラーゼ単位を50％程度まで阻害する阻害剤の量と
して定義される。１サツカラーゼ単位（SU）は
下記の試験条件下にて１分間にシユクローズ１μ
モルをグルコーズおよびフラクトーズに分解する
酵素の量である。分解されたシユクローズのμ
molを生成したグルコーズおよびフラクトーズと
してジニトロキリチル酸を用いて比色法により測
定し、そしてグルコーズ／フラクトーズ検量線を
用いて計算した。 試験を行うためには、サツカラーゼ溶液1)
（0.3〜0.4SU／ml）0.1mlを、0.1Mマレイン酸ナ
トリウムPH6.0の0.1ml中にて、阻害剤０〜400μ
ｇもしくは研究されるべき菌糸体抽出物の培養物
液０〜５μと混合し、そしてその混合物を湯浴
中35℃にして約10〜20分間恒温維持する。次にそ
れを予め35℃に加温された0.056Mシユクローズ
溶液（シユクローズ：メルク社、ダルムスタツ
ト、No.7652）0.2mlを用いて35℃にて60分間培養
し、そしてつづいてジニトロサリチル酸試薬0.5
mlを用いて処理する（P.ベルンフエルト、コロビ
ツク―カプラン、Meth.Enzymol.，１巻149頁に
従う）。色を発色するために、該混合物を沸騰湯
浴上で５分間加熱し、次に冷却しそして蒸溜水５
mlを用いて処理する。サツカラーゼを含まない適
当な空実験値に対して540nmにて測定する。 評価としては、阻害剤の添加後なお活性を示
す。 １ B.ボルグストロム（Borgstrom）、A.ダール
クイスト（Dahlguist）、ActaChem.Scand.12巻
1997頁（1958年）に従つて、豚の腸管粘膜から
の可溶化サツカラーゼ。 サツカラーゼ単位を検量線から測定しそして用
いたサツカラーゼのパーセント阻害度をそれから
計算する。パーセント阻害度は商 阻害剤＋のμｇ／ＳＵ＋＋ ＋固体分に対して ＋＋同一系統の阻害されていない混合物中の
SUなる関数としてプロツトされそして50％阻害
点を曲線から読みとりそして阻害剤のSIU／mgに
換算する。 マルターゼ試験 １マルターゼ阻害剤単位（1MIU）は２マルタ
ーゼ単位を50％の程度まで阻害する阻害剤の量と
して定義される。１マルターゼ単位（MU）は下
記の試験条件下にて１分間にｐ―ニトロフエニル
―α―Ｄ―グルコピラノシド中のグルコシド結合
１μ当量を分解酵素の量である。分解された結合
のμValはｐ―ニトロフエノレートのμValとし
て吸光光度法により測定される。 試験を行うためには、マルターゼ溶液1)（0.09
〜0.12MU／ml）0.05mlを阻害剤０〜400μｇもし
くは研究されるべき培養液もしくは菌糸体抽出物
０〜20μと0.1Mマレイン酸ナトリウム緩衝液
0.05ml中でPH6.0にて約10〜20分間35℃の湯浴中
で恒温に維持する。次に該混合物を予め35℃に加
温されたPHの0.1M １ B.ボルグストロム、A.ダールクイスト、
Acta Chem.Scand.12巻1997頁（1958年）に従
つて豚の腸管粘膜からの可溶化マルターゼ、ま
たは人間の膵液の凍結乾燥物。 マレイン酸ナトリウム緩衝液にｐ―ニトロフエ
ニル―α―Ｄ―グルコピラノシド〔セルバ社、ハ
イデルベルグ（Messrs.Serva，Heidelberg）No.
30，716〕を0.4％の濃度にとかした溶液0.1mlと
共に35℃にて30分間培養し、そしてそのあとPH
7.6の0.565Mトリス緩衝液２mlを加えることによ
り停止させる。マルターゼを含まない適当に混合
された空実験試料と対照して403nmにおける吸光
を直ちに測定する。 評価としては、阻害剤添加後においてなお活性
なマルターゼ単位をPH7.6においてｐ―ニトロフ
エノレート陰イオンに対してE403＝13.2×103の
モル吸光係数を基準にして計算し、そしてそのな
お活性なマルターゼ単位から、用いたマルターゼ
のパーセント阻害度を計算する。パーセント阻害
度は商 阻害剤のμｇ＋／ＭＵ＋＋ ＋固体分に対して ＋＋阻害されていない混合物中のMU なる関数としてプロツトされそして50％阻害点を
曲線から読みとりそして阻害剤のMIU／mgに換
算する。 この簡単な日常試験において、マルターゼの実
際的な期基質でなく人工的な基質（マルトーズ）
が用いられるので、製剤は更にダールクイスト
（Dahlquist）（Enzyme.biol.clin.11巻52頁（1970
年）により記載されている更に複雑なマルターゼ
試験によりマルターゼ阻害作用について試験され
る。本発明においてはマルトーズに対するマルタ
ーゼの作用中に生成されるグリコーズがグリコー
ズオキシダーゼ、ペルオキシダーゼおよびジアニ
シジンを用いて酵素作用を用いる方法で比色法に
より測定される。ここに記載されるマルターゼ阻
害剤のすべてはこの試験においても阻害作用を示
す。 放線菌目の種々の科および属の菌株を全体の系
統にわたつて上記の方法に従つて試験した。その
試験において、明瞭な、時として弱い、グリコシ
ド―加水分解酵素阻害作用が種々の科および属に
ついて見出された。特にアクチノプラナ科の菌株
が収率に関して最も有益であることが示された。 これらの科のなかで、アクチノプラナ属、アム
プウラリエラ属およびストレプトスホランジユウ
ム属において特に活性な菌株が見出された。試験
される菌株のうち、下に列記される菌株が明示さ
れた試験の一つもしくはそれ以上において特に活
性であることが示された。 なお、以下に例示する菌株の菌学的性質に関し
て、ATCC19190の公知菌株については、例え
ば、C.Gupta.J.Antibiol.，Ser.A.，18，125頁
（1965年）に更に詳細に記載されている。 又、ATCC12428公知菌株については、
Bergey′s Manual第８版、712〜713頁に、さら
に、CBS367.66（ATCC14539）及びCBS191・64
（ATCC15349）公知菌株については、夫々、例え
ば、J.Busha Mitunell，Sci.Soc.，79，69頁
（1963年）及びJ.Elisha Mitchell，Sci，Soc.，
79，61頁（1953年）にさらに詳細に記載されてい
る。 そしてCBS190・64（ATCC15348）公知菌株に
ついてはBergey′s manual，８版，717頁に、
夫々、詳しく記載されている。 又、KCC―A0027（CBS43261）、KCC―A0025
（CBS42961）及びKCC―A0028（CBS43361）公
知菌株については、野村及び大原、J.Ferm.
Techn.，38，405頁（1960年）に詳しく記載され
ており、又更に、CBS193.64公知菌株について
は、J.N.Couch and Elisha Mitchell，Sci.Soc.
，79，54頁（1963年）に、記載されている。
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
【表】
SB18／４菌株（アクチノプラネス菌種）は
SB18菌株（アクチノプラネス科菌種）の菌学的
性質と殆んど同一の菌学的性質を有するが、たゞ
SB18菌株に比しCPC寒天培地上でやゝ多くの気
性菌糸をつくる。またSB18／５菌株（アクチノ
プラネス菌種）もSB18菌株の菌学的性質と殆ん
ど同一の菌学的性質を有するが、たゞSB18菌株
に比し、CPC寒天培地上での生育がやゝ遅い。
SB18菌株（アクチノプラネス科菌種）の菌学的
性質と殆んど同一の菌学的性質を有するが、たゞ
SB18菌株に比しCPC寒天培地上でやゝ多くの気
性菌糸をつくる。またSB18／５菌株（アクチノ
プラネス菌種）もSB18菌株の菌学的性質と殆ん
ど同一の菌学的性質を有するが、たゞSB18菌株
に比し、CPC寒天培地上での生育がやゝ遅い。
【表】
【表】
表１に記載された菌株はザ・アメリカン・タイ
プ・カルチヤー・コレクシヨン（the American
type Chlture Collection）およびザ・セントラ
ールビユーロー・ボール・シメルカルチヤーズ
（the Centraalbureau voor Schimmelcultures）
のごとき確立された微生物寄託機関から得られた
か、またはオランダのバールン（Baarn）のある
ザ・セントラールビユーロー・ボール・シメルカ
ルチヤーズに上記のCBS番号にて寄託されたもの
である。 また、微生物工業技術研究所への寄託番号は表
の寄託番号の欄に記載した通りである。さら
に、SB18/4Actino＝Planes spec.（アクチノプ
ラナ菌種）がFRI寄託番号第1258号として、また
SB18/5Actino―Planes spec.（アクチノプラネ
ス菌種）が、FRI寄託番号第1259号として寄託さ
れている。 表２および表３には上記の菌株のいくつかの特
徴が列記されている。 グリコシド―加水分解酵素阻害剤を得るには、
上記の菌株を上記の培養液中にて培養する。それ
を行う場合、最適の生成を得るには実際上すべて
の各菌株が異なつた性質および量の組成を有する
異つた培養液を必要とすることに留意すべきであ
る。 種々の大きさの醗酵器もしくは振とうフラスコ
中にて15〜60℃、好ましくは24〜50℃にて１〜10
日間培養した後、培養物液から菌糸体を分離しそ
して阻害剤の発生に依存して活性要素成分を培養
物液および／もしくは菌糸体を用いて濃縮する。 阻害剤は培養物液から、凍結乾燥または塩類も
しくは水溶性有機溶媒（例えば低級アルコールお
よびケトンのごときもの）を用いる沈澱またはイ
オン交換体上への活性物質の吸着により得られ
る。 阻害剤は菌糸体から、例えばアルコール、ケト
ン、エーテル、エステルおよびスルホキシドのご
とき有機溶媒を用いる抽出によりり得られる。 この目的のために、醗酵液は毎分3000〜20000
回転、好ましくは毎分６〜10000回転にて10〜60
分間好ましくは30分間遠心分離されるか、または
好ましくは加圧下で且つ例えばクラリセル
（Claricel）のごとき過助剤を用いて過さ
れ、そしてそれにより培養物液と菌糸残渣が分離
される。 阻害剤は特定の培養物液から次のような種々の
方法により分離することが出来る。 ａ 減圧（10〜50mmＨｇ）のもとで20〜100℃、
好ましくは40〜80℃の浴温度にて最初の容積の
約1/5乃至1/50まで培養物液を濃縮する。濃縮
抽出物を過もしくは遠心分離しそして透明な
液（もしくは透明な上澄液）を、必要ならば
前以つて脱塩した後に、凍結乾燥する。 ｂ 培養物液（もしくはａ）に従つて濃縮された
培養物液）から、例えばアルコールおよびケト
ンのごとき水溶性有機溶媒、好ましくはメタノ
ール、エタノールもしくはアセトンを60〜90％
の含量まで加えることにより阻害剤を沈澱させ
る。不活性な混濁物質は溶媒の低濃度にて沈澱
するので、この沈澱操作は特に望ましくない混
濁物質を除去するための分別沈澱に適してい
る。 ｃ 抽出物（もしくはａ）に従つて濃縮された抽
出物）から、例えば硫酸アンモニウム、塩化ナ
トリウムおよび同様のものを用いて阻害剤を塩
析させる。生成した沈澱を遠心分離もしくは
過により捕集しそして直接アセトンおよびエー
テルにより洗浄しそして真空乾燥するかまたは
水に再溶解し、透析しそして凍結乾燥する。 ｄ 阻害剤をイオン交換体上に吸着させる。この
方法は阻害剤の化学的性質のために電荷を有す
る阻害剤を分離するのに適している。阻害剤は
イオン強度もしくは溶離媒質のPH値を変えるこ
とにより脱着せしめられる。 阻害剤のほかに、望ましくない混濁物質がしば
しば培養液中に存在する。これらの混濁物質は
種々の方法により、例えば熱に対して安定な阻害
剤の場合には熱によつて混濁物質を変性すること
により、または低分子量阻害剤の場合には適当な
膜を通して透析して望ましくない混濁物質を膜に
より残留せしめることにより、または分別沈澱
（ｂ参照）によりまたはイオン交換体に混濁物質
を吸着させることにより分離除去することが出来
る。 阻害剤は、有機溶媒による菌糸体の反復抽出、
好ましくは３〜５容のアセトン（湿潤菌糸体容積
に対して）を用いて10〜20分間２回抽出しそのあ
とエーテルで５〜10分間１回抽出することによ
り、菌糸体から得られる。この方法により抽出さ
れた菌糸体を真空中で乾燥しそしてそのあと撹拌
しながらジメチルスルホキシド３〜10重量部を用
いて２〜８時間抽出し、そのあと毎分10000乃至
20000回転にて遠心分離する。アセトン抽出物お
よびエーテル抽出物は真空中で濃縮乾固されそし
てDMSO抽出物と合せられらる。 乾燥菌糸体粉末をDMSOを用いて抽出する代り
に、それはまた水もしくは稀薄電解質溶液を用い
て更に長い時間、好ましくは12〜24時間抽出する
ことも出来る。 新規の物質は水によく溶解する。阻害剤の一群
は中性PH値で熱に安定であり、酸（PH２）に安定
であり、アルカリ（PH12）に安定でありそして
徐々に透析し得る。この種の阻害剤はトリプシン
およびペプシンにより不活性化されずそして更に
上記の酵素を阻害しない。それらは典型的な蛋白
染料により染色されずそして250nmまでの紫外線
では特徴的吸収を示さない。これらの阻害剤は尿
素およびβ―メルカプトエタノールにより不活性
化することが出来ない。ゲル過からの推定に従
えば、これらの阻害剤の分子量は500以上且つ
6000以下である。加水分解的分解により、モノサ
ツカライド、例えばグルコーズが得られる。この
実験結果に従えば、これらの阻害剤はオリゴサツ
カライドもしくはポリサツカライドもしくはそれ
らの誘導体である。 この群の最良の阻害剤はアミラーゼに対して
8000AIU／mgの阻害能を示す。 更に一つの一群の阻害剤は熱に不安定でありそ
して透析することが出来ずまたは殆んど透析する
ことが出来ない。これらの阻害剤は多少共迅かに
トリプシンにより不活性化される。尿素およびα
―メルカプトエタノールはまたこの種の阻害剤の
殆んどを不活性化する。この種の阻害剤は恐らく
ペプチド性の物質である。 この群の最良の阻害剤はアミラーゼに対して
80AIU／mgの阻害能を示す。 動物および人間の場合炭水化物を含む食品およ
び野菜（例えばとうもろこし澱分、馬鈴薯澱粉、
果実、果汁もしくはチヨコレート）を摂取した後
に過血糖症状（hyperqlycaemias）が起ることが
知られており、この過血糖症状は炭水化物がグリ
コシド―加水分解酵素（例えば唾液アミラーゼお
よび膵臓アミラーゼ、マルターゼおよびサツカラ
ーゼ）により
プ・カルチヤー・コレクシヨン（the American
type Chlture Collection）およびザ・セントラ
ールビユーロー・ボール・シメルカルチヤーズ
（the Centraalbureau voor Schimmelcultures）
のごとき確立された微生物寄託機関から得られた
か、またはオランダのバールン（Baarn）のある
ザ・セントラールビユーロー・ボール・シメルカ
ルチヤーズに上記のCBS番号にて寄託されたもの
である。 また、微生物工業技術研究所への寄託番号は表
の寄託番号の欄に記載した通りである。さら
に、SB18/4Actino＝Planes spec.（アクチノプ
ラナ菌種）がFRI寄託番号第1258号として、また
SB18/5Actino―Planes spec.（アクチノプラネ
ス菌種）が、FRI寄託番号第1259号として寄託さ
れている。 表２および表３には上記の菌株のいくつかの特
徴が列記されている。 グリコシド―加水分解酵素阻害剤を得るには、
上記の菌株を上記の培養液中にて培養する。それ
を行う場合、最適の生成を得るには実際上すべて
の各菌株が異なつた性質および量の組成を有する
異つた培養液を必要とすることに留意すべきであ
る。 種々の大きさの醗酵器もしくは振とうフラスコ
中にて15〜60℃、好ましくは24〜50℃にて１〜10
日間培養した後、培養物液から菌糸体を分離しそ
して阻害剤の発生に依存して活性要素成分を培養
物液および／もしくは菌糸体を用いて濃縮する。 阻害剤は培養物液から、凍結乾燥または塩類も
しくは水溶性有機溶媒（例えば低級アルコールお
よびケトンのごときもの）を用いる沈澱またはイ
オン交換体上への活性物質の吸着により得られ
る。 阻害剤は菌糸体から、例えばアルコール、ケト
ン、エーテル、エステルおよびスルホキシドのご
とき有機溶媒を用いる抽出によりり得られる。 この目的のために、醗酵液は毎分3000〜20000
回転、好ましくは毎分６〜10000回転にて10〜60
分間好ましくは30分間遠心分離されるか、または
好ましくは加圧下で且つ例えばクラリセル
（Claricel）のごとき過助剤を用いて過さ
れ、そしてそれにより培養物液と菌糸残渣が分離
される。 阻害剤は特定の培養物液から次のような種々の
方法により分離することが出来る。 ａ 減圧（10〜50mmＨｇ）のもとで20〜100℃、
好ましくは40〜80℃の浴温度にて最初の容積の
約1/5乃至1/50まで培養物液を濃縮する。濃縮
抽出物を過もしくは遠心分離しそして透明な
液（もしくは透明な上澄液）を、必要ならば
前以つて脱塩した後に、凍結乾燥する。 ｂ 培養物液（もしくはａ）に従つて濃縮された
培養物液）から、例えばアルコールおよびケト
ンのごとき水溶性有機溶媒、好ましくはメタノ
ール、エタノールもしくはアセトンを60〜90％
の含量まで加えることにより阻害剤を沈澱させ
る。不活性な混濁物質は溶媒の低濃度にて沈澱
するので、この沈澱操作は特に望ましくない混
濁物質を除去するための分別沈澱に適してい
る。 ｃ 抽出物（もしくはａ）に従つて濃縮された抽
出物）から、例えば硫酸アンモニウム、塩化ナ
トリウムおよび同様のものを用いて阻害剤を塩
析させる。生成した沈澱を遠心分離もしくは
過により捕集しそして直接アセトンおよびエー
テルにより洗浄しそして真空乾燥するかまたは
水に再溶解し、透析しそして凍結乾燥する。 ｄ 阻害剤をイオン交換体上に吸着させる。この
方法は阻害剤の化学的性質のために電荷を有す
る阻害剤を分離するのに適している。阻害剤は
イオン強度もしくは溶離媒質のPH値を変えるこ
とにより脱着せしめられる。 阻害剤のほかに、望ましくない混濁物質がしば
しば培養液中に存在する。これらの混濁物質は
種々の方法により、例えば熱に対して安定な阻害
剤の場合には熱によつて混濁物質を変性すること
により、または低分子量阻害剤の場合には適当な
膜を通して透析して望ましくない混濁物質を膜に
より残留せしめることにより、または分別沈澱
（ｂ参照）によりまたはイオン交換体に混濁物質
を吸着させることにより分離除去することが出来
る。 阻害剤は、有機溶媒による菌糸体の反復抽出、
好ましくは３〜５容のアセトン（湿潤菌糸体容積
に対して）を用いて10〜20分間２回抽出しそのあ
とエーテルで５〜10分間１回抽出することによ
り、菌糸体から得られる。この方法により抽出さ
れた菌糸体を真空中で乾燥しそしてそのあと撹拌
しながらジメチルスルホキシド３〜10重量部を用
いて２〜８時間抽出し、そのあと毎分10000乃至
20000回転にて遠心分離する。アセトン抽出物お
よびエーテル抽出物は真空中で濃縮乾固されそし
てDMSO抽出物と合せられらる。 乾燥菌糸体粉末をDMSOを用いて抽出する代り
に、それはまた水もしくは稀薄電解質溶液を用い
て更に長い時間、好ましくは12〜24時間抽出する
ことも出来る。 新規の物質は水によく溶解する。阻害剤の一群
は中性PH値で熱に安定であり、酸（PH２）に安定
であり、アルカリ（PH12）に安定でありそして
徐々に透析し得る。この種の阻害剤はトリプシン
およびペプシンにより不活性化されずそして更に
上記の酵素を阻害しない。それらは典型的な蛋白
染料により染色されずそして250nmまでの紫外線
では特徴的吸収を示さない。これらの阻害剤は尿
素およびβ―メルカプトエタノールにより不活性
化することが出来ない。ゲル過からの推定に従
えば、これらの阻害剤の分子量は500以上且つ
6000以下である。加水分解的分解により、モノサ
ツカライド、例えばグルコーズが得られる。この
実験結果に従えば、これらの阻害剤はオリゴサツ
カライドもしくはポリサツカライドもしくはそれ
らの誘導体である。 この群の最良の阻害剤はアミラーゼに対して
8000AIU／mgの阻害能を示す。 更に一つの一群の阻害剤は熱に不安定でありそ
して透析することが出来ずまたは殆んど透析する
ことが出来ない。これらの阻害剤は多少共迅かに
トリプシンにより不活性化される。尿素およびα
―メルカプトエタノールはまたこの種の阻害剤の
殆んどを不活性化する。この種の阻害剤は恐らく
ペプチド性の物質である。 この群の最良の阻害剤はアミラーゼに対して
80AIU／mgの阻害能を示す。 動物および人間の場合炭水化物を含む食品およ
び野菜（例えばとうもろこし澱分、馬鈴薯澱粉、
果実、果汁もしくはチヨコレート）を摂取した後
に過血糖症状（hyperqlycaemias）が起ることが
知られており、この過血糖症状は炭水化物がグリ
コシド―加水分解酵素（例えば唾液アミラーゼお
よび膵臓アミラーゼ、マルターゼおよびサツカラ
ーゼ）により
【表】
なる式に従つて迅速に分解されることに起因す
る。この過血糖症状は糖尿病の場合に特に強く且
つ長時間つづく性格のものである。脂肪性食の場
合に、食餌性過血糖症状はしばしばインシユリン
の特に強い分泌を起し、そのために更に脂肪の合
成が増大しそして脂肪の分解が減少する結果とな
る。この種の過血緒症状と関連して、インシユリ
ン分泌の結果として低血糖症はしばしば代謝的に
健康でありそして脂肪性の人に起る。低血糖症の
みならず胃中に残留する〓び汁もまた胃液の生成
を刺戟し、そのことが胃炎もしくは胃潰瘍もしく
は十二指腸潰瘍の発生を促進もしくは刺戟するこ
とが知られている。 本発明において、上記の方法に従つて得られそ
して分離される本発明に従うグリコシド―加水分
解酵素阻害剤がねずみおよび／もしくは人間に小
麦澱粉もしくはシユクローズもしくは麦芽糖を投
与したあとの食餌性過血糖症、過インシユリン症
および低血糖症を著しく軽減しそして炭水化物の
胃中の通過を速かにすることが見出された。 更に、炭水化物特にシユクローズは口腔中にて
微生物により分解されることおよびそれによりむ
しばの発生が促進されることが知られている。 従つてグリコシド―加水分解酵素阻害剤は、肥
満症、脂肪症、過類脂質血症〔アテリオス・クレ
ロシス（atherios―clerosis）〕、糖尿病、糖尿病
前期、胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍およびむしば
のような症状に対する治療薬として用いるのに適
している。 従つて、界面活性剤を存在させる場合を除いて
200（好ましくは350）より低分子量の溶媒以外の
液体稀釈剤と混合された形の本発明の阻害剤を活
性成分として含む医薬組成物にすることができ
る。 更に滅菌水溶液もしくは等張水溶液の形で本発
明の阻害剤を活性成分として含む医薬組成物にす
ることができる。 また単独もしくは稀釈剤と混合された形の本発
明の阻害剤を含む投与単位形の薬物にすることが
できる。 また本発明の阻害剤を単独でもしくは稀釈剤と
混合された形で含むタブレツト、（ロゼンジおよ
び顆粒剤を含む）、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、
アンプルおよび坐薬の形態の薬物にすることがで
きる。 本明細書において用いられている「薬物」なる
語は医薬投与に適した物理的に分理した１つの形
をなした部分を意味する。本明細書において用い
られている「投与単位形の薬物」は、本発明の阻
害剤の単位投与量もしくは単位投与量の数倍量
（４倍まで）もしくは単位投与量の何分の―（40
分の１まで）の量を各々含む、医薬投与に適した
物理的に分離した一つの形をなしたものを意味す
る。薬物が単位投与量を含むかまたは例えば単位
投与量の1/2、1/3もしくは1/4を含むかは、薬物
が１日にそれぞれ１回、また例えば２回、３回も
しくは４回に投与されるかどうかに依存するだろ
う。 単位投与量は一つの場合において投与されるべ
き阻害剤の量である。 本医薬組成物は例えばゲル、ペースト（たとえ
ば歯みがきペースト）、クリーム、チユーインガ
ム、懸濁液、水性もしくは非水性稀釈剤中に活性
成分を加えた溶液および乳濁液、シラツプ、顆粒
剤もしくは散剤の形とすることが出来る。 医薬組成物（たとえば顆粒剤）において、タブ
レツト、糖衣錠、カプセル剤および丸剤の形に作
るために用いられる稀釈剤には、(a)充填剤および
増量剤、例えば澱粉、砂糖、マンニトールおよび
サリチル酸、(b)バインダー剤、例えばカルボキシ
メチルセルローズおよび他のセルローズ誘導体、
アルギン酸塩、ゼラチンおよびポリビニルピロリ
ドン、(c)湿潤剤例えばグリセロール、(d)崩壊剤、
例えば寒天、炭酸カルシウムおよび重炭酸ナトリ
ウム、(e)溶解阻止剤、例えばパラフイン、(f)吸収
促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物、(g)界
面活性剤、例えばセチルアルコール、グリセロー
ルモノステアレート、(h)吸着担体、例えばカオリ
ンおよびベントナイト、(i)滑沢剤、例えばタル
ク、ステアリン酸カルシウムおよびマグネシウム
および固体ポリエチレングリコール、(j)チクルの
ごときエラストマー・バインダーなどが含まれ
る。 本医薬組成物から作られるタブレツト、糖衣
錠、カフセル剤および丸剤は通常の被覆、外包お
よび保護基剤を有することが出来、それらは乳白
剤を含むことが出来る。それらは、それらが腸管
のある特定の部分においてのみもしくは好ましく
は該部分において、恐らくある時間の間にわたつ
て活性成分を放出するように作ることが出来る。
被覆、外包および保護基剤は例えば重合体物質も
しくはろうから作ることが出来る。 成分はまた上記の稀釈剤の一つもしくはいくつ
かと共に合した微小被嚢形にすることも出来る。 坐薬にするために採用される該医薬組成物中に
用いられる稀釈剤は例えば、ポリエチレンのグリ
コールおよび脂肪（例えばココア油および高級エ
ステル〔例えばC14アルコールおよびC16脂肪
酸〕）のごとき通常の水溶性もしくは水不溶性稀
釈剤ままたはそれらの稀釈剤の混合物とすること
が出来る。 ペースト、クリームおよびゲルである該医薬組
成物は例えば通常の稀釈剤、例えば動物性および
植物性脂肪、ろう、パラフイン、澱粉、トラガカ
ント、セルローズ誘導体、ポリエチレングリコー
ル、シリコン、ベントナイト、珪酸、タルクおよ
び酸化亜鉛もしくはそれらの物質の混合物を含む
ことが出来る。 散剤である該医薬組成物は例えば通常の稀釈
剤、例えば乳糖、タルク、珪酸、水酸化アルミニ
ウム、珪酸カルシウムおよびポリアミド粉末もし
くはそれらの物質の混合物を含むことが出来る。 溶液および乳濁液である該医薬組成物は例えば
通常の稀釈剤（勿論、上記のごとく界面活性剤を
存在させる場合を除いた200以下の分子量を有す
る溶媒を除外して）例えば溶解剤および乳化剤を
含むことが出来、その種の稀釈剤の特定の例は
水、エチルアルコール、イソプロピルアルコー
ル、エチルカルボネート、酢酸エチル、ベンジル
アルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレン
グリコール、１，３―ブチレングリコール、ジメ
チルホルムアミド、油類〔例えば粉砕くるみ
油〕、グリセロール、テトラヒドロフルフリルア
ルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビ
トールの脂肪酸エステルまたはそれらの混合物で
ある。 非経口投与の場合、溶液および乳濁液は滅菌さ
れねばならずそして適当ならば血液と等張でなけ
ればならない。 懸濁液である該医薬組成物は、液体稀釈剤例え
ば水、エチルアルコール、プロピレングリコー
ル、界面活性剤（例えばエトキシル化イソステア
リルアルコール、ポリオキシエチレンソルビツト
およびソルビタンエステル）、微結晶セルロー
ズ、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒
天およびトラガカントまたはそれらの混合物のご
とき通常の稀釈剤を含むことが出来る。 本医薬組成物はまた着色剤および保存剤並びに
香料および芳香付加剤（例えば薄荷油およびユー
カリ油）および甘味剤（例えばサツカリン）を含
むことが出来る。特にチユーインガムおよび歯み
がきペーストは芳香剤を含む。 本医薬組成物は好ましくは全組成物重量を基準
にして約0.1乃至99.5％、更に好ましくは約0.5％
から95％までの阻害剤を含む。 本発明の阻害剤のほかに、本医薬組成物はまた
他の医薬活性化合物を含むことも出来る。それら
はまた本発明の２種類以上の異つた阻害剤を含む
ことも出来る。この種の他の医薬活性化合物の特
定の例は血糖値に影響を与えるβ―シトトロピツ
クスルホニル―尿素誘導体およびビグアニドのご
とき経口的抗糖尿病剤である。 本薬物中の稀釈剤は本医薬組成物に関して上に
記載された任意のものとすることが出来る。この
種の薬物は単独の稀釈剤として200以下の分子量
の溶媒を含むことが出来る。 本薬物を構成する分離した一つの形をなした部
分は（投与単位形であるか正味であるかを問わ
ず）例えば、タブレツト（ロゼンジおよび顆粒剤
を含んで）、丸剤、糖衣錠、カプセル、坐薬およ
びアンプルのいずれであつてもよい。この種の形
態のあるものは阻害剤を徐放するように作ること
が出来る。カプセルのごときあるものは薬物の各
部分に物理的分離したそして一つの形を与える保
護外包を含む。 本発明の薬物に対する好ましい単位投与量は
5000〜500000AIU、2.5〜250MIU、もしくは100
〜10000SIUの阻害剤である。単位投与量は経口
的に通常食事の直前、間もしくは後に１日に１回
もしくは数回投与されるであろう。 阻害剤は経口的に投与されることが意図され
る。従つて好ましい薬物はタブレツト、糖衣錠お
よびチユーインガムの部分のごとき経口的投与に
適合するものである。 この種のグリコシド―加水分解酸素阻害剤のあ
るものの毒性は極めて低い。実施例14および37か
ら得られた活性物質は経口投与の場合二十日ねず
みもしくはねずみに対して５×105AIU／Kgの投
与量まで許容され、症候を示さなかつた。静脈注
射の場合、二十日ねずみおよびねずみについて
105AIU／Kgまで忍容性がある。 下記の実施例により本発明に従う阻害剤の製造
方法を例示する。 実施例 １ ２％澱粉、１％グルコーズ、0.5％NZ―アミ
ン、1.0％酵母抽出物および0.4％CaCO3なる組成
の培養液200mlを含む３ケの１容エルレンマイ
ヤーフラスコ（滅菌：121℃にて30分間、滅菌前
にPHを72に調節）の各々に菌株SB2の予備培養物
１ml（オートミル寒天を有する傾斜試験管培養物
から接種され、同じ培養液中にて得られたもの）
を接種し、そして該フラスコを回転振とう機上に
て28℃にて培養した。5.5日間の培養時間の後、
３ケのフラスコの内容物を合しそして遠心分離に
より菌糸体を分離除去した。100AIU／mlを含む
上澄液425mlが得られた。 遠心分離された上澄液を15〜20mmＨｇおよび約
37℃の湯浴温度にて回転蒸発器を用いて60mlまで
濃縮した。その粘稠な溶液を８容＝480mlのエタ
ノールに撹拌しながら注入した。生成した沈澱を
遠心分離により捕集し、再び水60mlに溶解し、そ
して蒸溜水中で６時間透析した。透析物を凍結乾
燥した。収率は1.6ｇで、19×103AIU／ｇを含ん
だ。 実施例 ２ 実施例１に従うバツチを用いて100AIU／mlを
含む遠心分離上澄液440mlが得られた。 この遠心分離上澄液440mlを回転蒸発器を用い
て100mlまで濃縮した。その濃縮液を８容＝800ml
のエタノールに撹拌しながら注入しそして沈澱物
を遠心分離により捕集し、アセトンで２回且つエ
ーテルで１回洗浄しそして室温にて真空中で乾燥
した。 収率は15×103AIU／ｇを含むもの2.2ｇであつ
た。 実施例 ３ 実施例１に従うバツチを用い、５日間の培養の
後に120AIU／mgを含む遠心分離上澄液500mlが得
られた。この500mlを直接凍結乾燥した。収量は
8.3×10-3AIU／ｇを含むもの7.1ｇであつた。 実施例 ４ ３％グリセリン、３％大豆粉および0.2％
CaCO3なる組成の培養液200mlを含む３ケの１
容エルレンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃に
て30分；滅菌後PH7.2）の各々に菌株SB12の予備
培養物（ツアペツク―ペプトン―カゼイン寒天を
含む傾斜試験管培養物から接種され、同一の培養
液から得られたもの）１mlを接種し、そして該フ
ラスコを回転振とう器上で28℃にて３日間培養し
た。培養後、フラスコの内容物を合しそして菌糸
体を遠心分離により除去した。450AIU／mlを含
む上澄液500mlが得られた。 該上澄液を硫酸アンモニウム250ｇを一部分づ
つ撹拌しながら加えて処理しそして該混合物をそ
のあと毎分12000回転にて10分間遠心分離した。
沈澱を蒸溜水100mlに溶解しそして４容（＝400
ml）のアセトンを撹拌しながら加えた。良好に沈
降する沈澱が生成した。液体を傾斜法で除去しそ
して沈澱をアセトンで２回およびエーテルで１回
洗浄しそして真空乾燥した。 収量：10×103AIU／ｇを含むもの13.4ｇ。 実施例 ５ 実施例４に従い硫酸アンモニウムにより沈澱さ
せた後に得られた沈澱を水100mlに溶解しそして
蒸溜水中で６時間透析した。透析物が得られ、そ
れを凍結しそして凍結乾燥した。収量：80AIU／
mgを含むもの1.5ｇ。 実施例 ６ 実施例４に従う混合物を32℃にて３日間培養し
た場合、350AIU／mgを含む培養液が菌糸体の
過除去後に得られた。 実施例 ７ 実施例１に従う培養液に実施例４に従つて接種
した場合、28℃にて３日間培養後270AIU／mlを
含む培養液が得られた。 実施例 ８ ３％グルコーズ、３％大豆粉および0.2％
CaCO3から成る培養液100mlを各々含む６ケの１
容エルレンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃
にて30分、滅菌後のPH7.2）の各々に菌株SB5の
予備培養物（実施例１におけると同様にして得ら
れたもの）１mlを接種し、そして回転振とう機上
にて28℃にて４日間培養した。フラスコの内容物
を合しそして菌糸体を遠心分離により分離除去し
た。得られた150AIU／mlを含む上澄液500mlを冷
凍しそして凍結乾燥した。 収量：11×103AIU／ｇを含むもの6.9ｇ。 実施例 ９ 実施例４に従う混合物を各々120mlに入れたフ
ラスコ24ケに菌株SB11の予備培養物（実施例４
に従つて得られたもの）を接種しそして28℃にて
５日間培養した場合、遠心分離後に1.1MIU／ml
を含む上澄液2.0リツトルが得られた。この２リ
ツトルを回転蒸発器により200mlに濃縮した。濃
縮物200mlを室温にて蒸溜水２リツトル中でビス
キング（Visking）透析管〔タイプ27／100FT、
ユニオン・カーバイド・コーポレーシヨン
（Union Carbide Corporation）〕中で24時間透析
した。阻害剤を含む外側の培地を回転蒸発器を用
いて100mlに濃縮しそして無水エタノール900mlに
撹拌しながら滴々添加した。分離した殆んど不活
性な沈澱を遠心分離除去して捨て、そしてアルコ
ール上澄液を回転蒸発器により30mlに濃縮した。 この濃縮物１mlは70MIU／mlを含んだ。 更に精製するために、この溶液を陰イオン交換
カラム〔アンバライト（Amberlite）IRA410、酢
酸塩形、0.05M酢酸アンモニウム中、PH７、2.5
×20cmカラム〕上に流しそして活性フラクシヨン
を合しそしてセフデツクス（Sephadex）RG75に
より水を用いてゲル過した。ゲル過により得
られた活性フラクシヨンを12mlに濃縮した。この
溶液１mlは150MIU／mlを含んだ。 菌糸体（約500ml）をアセトン１を用いて２
回およびエーテル１を用いて１回抽出しそして
抽出物を合しそして回転蒸発器を用いて真空中で
蒸発乾固した。菌糸体残渣を20℃にて真空乾燥し
そして得られた乾燥菌糸体粉末（約51ｇ）をその
あとDMSO150mlを用いて室温にて２時間抽出し
た。遠心分離（15000rpm、30分）の後、蒸発乾
固されたアセトン／エーテル抽出物を乾燥菌糸体
粉末からのDMSO上澄液と合した。 収量：3MIU／mlを含むもの120ml。 実施例 10 実施例１に従う培養液120mlを含む１容エル
レンマイヤー・フラスコに実施例８に従つて接種
しそして回転振とう機上で28℃にて６日間培養し
た場合、0.9MIU／mlを含む培養液が得られ
た。 実施例 11 2.5％澱粉、0.5％グルコーズ、0.5％NZ―アミ
ン、1.0％酵母抽出物および0.4％CaCO3なる組成
の培養液120mlを各々入れた５ケの１容エルレ
ンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃にて30分；
PHを滅菌前に7.2に調節）に、菌株SB27の予備培
養物（実施例１に従つて得られたもの）２mlを
各々接種しそしてこれらのフラスコを回転振とう
機上で28℃にて４日間培養した場合、フラスコを
合しそして菌糸体を遠心分離除去した後に、
70AIU／mlを含む上澄液500mlが得られた。その
遠心分離上澄液を冷凍しそして凍結乾燥した。 収量：3.5×103AIU／ｇを含むもの7.7ｇ。 実施例 12 実施例１に従う混合物（実施例１に従つて得ら
れた）菌糸体SB18の予備培養物２mlを接種しそ
して28℃にて３日間培養した場合、1100AIU／
ml、0.17MIU／mlおよび1.0SIU／mlを含む培養物
液が得られた。 実施例 13 各々実施例１に従う培養液８リツトルを入れた
５ケの実験醗酵器に（実施例１に従つて得られ
た）予備培養物120mlを接種しそして撹拌且つ通
気しながら28℃にて65時間培養した場合、醗酵液
を合しそして菌糸体を分離除去した後に醗酵液30
が得られた。この遠心分離された培養物液30リ
ツトル（0.57MIU／ml、6.2SIU／mlおよび
8000AIU／ml）を100℃の浴温度にて20mmＨｇに
て真空中で５リツトルまで濃縮し、アセトン４容
（＝20リツトル）を撹拌しつつ該濃縮物に加え、
そして生成した黒色のべとべとした沈澱を
6000rpmにて30分間遠心分離により捕集し、該沈
澱を水2.5リツトル中に溶解しそしてその黒く色
のついた溶液を湿潤したアンバライトIRA410
（酢酸塩形、PH７）500ｇと共に60分間撹拌した。
この混合物を6000rpmにて10分間遠心分離により
上澄液とアンバライト沈降物に分離した。同様に
して、上澄液を更に各回アンバライト500ｇと共
に60分間３回撹拌し、そのあと更にアンバライト
500ｇと共に一夜（約15時間）撹拌した。この処
理の後、上澄液は淡黄色を示し、他方黒色の混濁
色素はイオン交換体に結合した。捕集したアンバ
ライト残渣を水1.5リツトルを用いて２回洗浄し
そしてこの洗浄水を阻害剤を含む上澄液に合し
た。洗浄水と合した上澄液を15mmＨｇおよび80℃
の浴温度にて回転蒸発器中で１リツトルまで濃縮
し、そのあとアセトン10リツトルにはげしく撹拌
しながら滴々添加した。その結果、白色羽毛状の
沈澱が生じ、それを別し、アセトンおよびエー
テルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：１×105AIU／ｇおよび450SIU／ｇを含
む白色粉末150ｇ。 実施例 14 実施例１に従う培養液中で、他の糖もしくは糖
アルコールをグルコーズの代りに用いそして各々
培養液120mlを入れた振とうフラスコに各々（実
施例１に従つて製造された）菌株SB18の予備培
養物１mlを接種した場合、下記のアミラーゼ阻害
剤濃度を含む培養物液が回転振とう機上にて28℃
にて３もしくは４日間培養した後に得られた。
る。この過血糖症状は糖尿病の場合に特に強く且
つ長時間つづく性格のものである。脂肪性食の場
合に、食餌性過血糖症状はしばしばインシユリン
の特に強い分泌を起し、そのために更に脂肪の合
成が増大しそして脂肪の分解が減少する結果とな
る。この種の過血緒症状と関連して、インシユリ
ン分泌の結果として低血糖症はしばしば代謝的に
健康でありそして脂肪性の人に起る。低血糖症の
みならず胃中に残留する〓び汁もまた胃液の生成
を刺戟し、そのことが胃炎もしくは胃潰瘍もしく
は十二指腸潰瘍の発生を促進もしくは刺戟するこ
とが知られている。 本発明において、上記の方法に従つて得られそ
して分離される本発明に従うグリコシド―加水分
解酵素阻害剤がねずみおよび／もしくは人間に小
麦澱粉もしくはシユクローズもしくは麦芽糖を投
与したあとの食餌性過血糖症、過インシユリン症
および低血糖症を著しく軽減しそして炭水化物の
胃中の通過を速かにすることが見出された。 更に、炭水化物特にシユクローズは口腔中にて
微生物により分解されることおよびそれによりむ
しばの発生が促進されることが知られている。 従つてグリコシド―加水分解酵素阻害剤は、肥
満症、脂肪症、過類脂質血症〔アテリオス・クレ
ロシス（atherios―clerosis）〕、糖尿病、糖尿病
前期、胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍およびむしば
のような症状に対する治療薬として用いるのに適
している。 従つて、界面活性剤を存在させる場合を除いて
200（好ましくは350）より低分子量の溶媒以外の
液体稀釈剤と混合された形の本発明の阻害剤を活
性成分として含む医薬組成物にすることができ
る。 更に滅菌水溶液もしくは等張水溶液の形で本発
明の阻害剤を活性成分として含む医薬組成物にす
ることができる。 また単独もしくは稀釈剤と混合された形の本発
明の阻害剤を含む投与単位形の薬物にすることが
できる。 また本発明の阻害剤を単独でもしくは稀釈剤と
混合された形で含むタブレツト、（ロゼンジおよ
び顆粒剤を含む）、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、
アンプルおよび坐薬の形態の薬物にすることがで
きる。 本明細書において用いられている「薬物」なる
語は医薬投与に適した物理的に分理した１つの形
をなした部分を意味する。本明細書において用い
られている「投与単位形の薬物」は、本発明の阻
害剤の単位投与量もしくは単位投与量の数倍量
（４倍まで）もしくは単位投与量の何分の―（40
分の１まで）の量を各々含む、医薬投与に適した
物理的に分離した一つの形をなしたものを意味す
る。薬物が単位投与量を含むかまたは例えば単位
投与量の1/2、1/3もしくは1/4を含むかは、薬物
が１日にそれぞれ１回、また例えば２回、３回も
しくは４回に投与されるかどうかに依存するだろ
う。 単位投与量は一つの場合において投与されるべ
き阻害剤の量である。 本医薬組成物は例えばゲル、ペースト（たとえ
ば歯みがきペースト）、クリーム、チユーインガ
ム、懸濁液、水性もしくは非水性稀釈剤中に活性
成分を加えた溶液および乳濁液、シラツプ、顆粒
剤もしくは散剤の形とすることが出来る。 医薬組成物（たとえば顆粒剤）において、タブ
レツト、糖衣錠、カプセル剤および丸剤の形に作
るために用いられる稀釈剤には、(a)充填剤および
増量剤、例えば澱粉、砂糖、マンニトールおよび
サリチル酸、(b)バインダー剤、例えばカルボキシ
メチルセルローズおよび他のセルローズ誘導体、
アルギン酸塩、ゼラチンおよびポリビニルピロリ
ドン、(c)湿潤剤例えばグリセロール、(d)崩壊剤、
例えば寒天、炭酸カルシウムおよび重炭酸ナトリ
ウム、(e)溶解阻止剤、例えばパラフイン、(f)吸収
促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物、(g)界
面活性剤、例えばセチルアルコール、グリセロー
ルモノステアレート、(h)吸着担体、例えばカオリ
ンおよびベントナイト、(i)滑沢剤、例えばタル
ク、ステアリン酸カルシウムおよびマグネシウム
および固体ポリエチレングリコール、(j)チクルの
ごときエラストマー・バインダーなどが含まれ
る。 本医薬組成物から作られるタブレツト、糖衣
錠、カフセル剤および丸剤は通常の被覆、外包お
よび保護基剤を有することが出来、それらは乳白
剤を含むことが出来る。それらは、それらが腸管
のある特定の部分においてのみもしくは好ましく
は該部分において、恐らくある時間の間にわたつ
て活性成分を放出するように作ることが出来る。
被覆、外包および保護基剤は例えば重合体物質も
しくはろうから作ることが出来る。 成分はまた上記の稀釈剤の一つもしくはいくつ
かと共に合した微小被嚢形にすることも出来る。 坐薬にするために採用される該医薬組成物中に
用いられる稀釈剤は例えば、ポリエチレンのグリ
コールおよび脂肪（例えばココア油および高級エ
ステル〔例えばC14アルコールおよびC16脂肪
酸〕）のごとき通常の水溶性もしくは水不溶性稀
釈剤ままたはそれらの稀釈剤の混合物とすること
が出来る。 ペースト、クリームおよびゲルである該医薬組
成物は例えば通常の稀釈剤、例えば動物性および
植物性脂肪、ろう、パラフイン、澱粉、トラガカ
ント、セルローズ誘導体、ポリエチレングリコー
ル、シリコン、ベントナイト、珪酸、タルクおよ
び酸化亜鉛もしくはそれらの物質の混合物を含む
ことが出来る。 散剤である該医薬組成物は例えば通常の稀釈
剤、例えば乳糖、タルク、珪酸、水酸化アルミニ
ウム、珪酸カルシウムおよびポリアミド粉末もし
くはそれらの物質の混合物を含むことが出来る。 溶液および乳濁液である該医薬組成物は例えば
通常の稀釈剤（勿論、上記のごとく界面活性剤を
存在させる場合を除いた200以下の分子量を有す
る溶媒を除外して）例えば溶解剤および乳化剤を
含むことが出来、その種の稀釈剤の特定の例は
水、エチルアルコール、イソプロピルアルコー
ル、エチルカルボネート、酢酸エチル、ベンジル
アルコール、ベンジルベンゾエート、プロピレン
グリコール、１，３―ブチレングリコール、ジメ
チルホルムアミド、油類〔例えば粉砕くるみ
油〕、グリセロール、テトラヒドロフルフリルア
ルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビ
トールの脂肪酸エステルまたはそれらの混合物で
ある。 非経口投与の場合、溶液および乳濁液は滅菌さ
れねばならずそして適当ならば血液と等張でなけ
ればならない。 懸濁液である該医薬組成物は、液体稀釈剤例え
ば水、エチルアルコール、プロピレングリコー
ル、界面活性剤（例えばエトキシル化イソステア
リルアルコール、ポリオキシエチレンソルビツト
およびソルビタンエステル）、微結晶セルロー
ズ、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒
天およびトラガカントまたはそれらの混合物のご
とき通常の稀釈剤を含むことが出来る。 本医薬組成物はまた着色剤および保存剤並びに
香料および芳香付加剤（例えば薄荷油およびユー
カリ油）および甘味剤（例えばサツカリン）を含
むことが出来る。特にチユーインガムおよび歯み
がきペーストは芳香剤を含む。 本医薬組成物は好ましくは全組成物重量を基準
にして約0.1乃至99.5％、更に好ましくは約0.5％
から95％までの阻害剤を含む。 本発明の阻害剤のほかに、本医薬組成物はまた
他の医薬活性化合物を含むことも出来る。それら
はまた本発明の２種類以上の異つた阻害剤を含む
ことも出来る。この種の他の医薬活性化合物の特
定の例は血糖値に影響を与えるβ―シトトロピツ
クスルホニル―尿素誘導体およびビグアニドのご
とき経口的抗糖尿病剤である。 本薬物中の稀釈剤は本医薬組成物に関して上に
記載された任意のものとすることが出来る。この
種の薬物は単独の稀釈剤として200以下の分子量
の溶媒を含むことが出来る。 本薬物を構成する分離した一つの形をなした部
分は（投与単位形であるか正味であるかを問わ
ず）例えば、タブレツト（ロゼンジおよび顆粒剤
を含んで）、丸剤、糖衣錠、カプセル、坐薬およ
びアンプルのいずれであつてもよい。この種の形
態のあるものは阻害剤を徐放するように作ること
が出来る。カプセルのごときあるものは薬物の各
部分に物理的分離したそして一つの形を与える保
護外包を含む。 本発明の薬物に対する好ましい単位投与量は
5000〜500000AIU、2.5〜250MIU、もしくは100
〜10000SIUの阻害剤である。単位投与量は経口
的に通常食事の直前、間もしくは後に１日に１回
もしくは数回投与されるであろう。 阻害剤は経口的に投与されることが意図され
る。従つて好ましい薬物はタブレツト、糖衣錠お
よびチユーインガムの部分のごとき経口的投与に
適合するものである。 この種のグリコシド―加水分解酸素阻害剤のあ
るものの毒性は極めて低い。実施例14および37か
ら得られた活性物質は経口投与の場合二十日ねず
みもしくはねずみに対して５×105AIU／Kgの投
与量まで許容され、症候を示さなかつた。静脈注
射の場合、二十日ねずみおよびねずみについて
105AIU／Kgまで忍容性がある。 下記の実施例により本発明に従う阻害剤の製造
方法を例示する。 実施例 １ ２％澱粉、１％グルコーズ、0.5％NZ―アミ
ン、1.0％酵母抽出物および0.4％CaCO3なる組成
の培養液200mlを含む３ケの１容エルレンマイ
ヤーフラスコ（滅菌：121℃にて30分間、滅菌前
にPHを72に調節）の各々に菌株SB2の予備培養物
１ml（オートミル寒天を有する傾斜試験管培養物
から接種され、同じ培養液中にて得られたもの）
を接種し、そして該フラスコを回転振とう機上に
て28℃にて培養した。5.5日間の培養時間の後、
３ケのフラスコの内容物を合しそして遠心分離に
より菌糸体を分離除去した。100AIU／mlを含む
上澄液425mlが得られた。 遠心分離された上澄液を15〜20mmＨｇおよび約
37℃の湯浴温度にて回転蒸発器を用いて60mlまで
濃縮した。その粘稠な溶液を８容＝480mlのエタ
ノールに撹拌しながら注入した。生成した沈澱を
遠心分離により捕集し、再び水60mlに溶解し、そ
して蒸溜水中で６時間透析した。透析物を凍結乾
燥した。収率は1.6ｇで、19×103AIU／ｇを含ん
だ。 実施例 ２ 実施例１に従うバツチを用いて100AIU／mlを
含む遠心分離上澄液440mlが得られた。 この遠心分離上澄液440mlを回転蒸発器を用い
て100mlまで濃縮した。その濃縮液を８容＝800ml
のエタノールに撹拌しながら注入しそして沈澱物
を遠心分離により捕集し、アセトンで２回且つエ
ーテルで１回洗浄しそして室温にて真空中で乾燥
した。 収率は15×103AIU／ｇを含むもの2.2ｇであつ
た。 実施例 ３ 実施例１に従うバツチを用い、５日間の培養の
後に120AIU／mgを含む遠心分離上澄液500mlが得
られた。この500mlを直接凍結乾燥した。収量は
8.3×10-3AIU／ｇを含むもの7.1ｇであつた。 実施例 ４ ３％グリセリン、３％大豆粉および0.2％
CaCO3なる組成の培養液200mlを含む３ケの１
容エルレンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃に
て30分；滅菌後PH7.2）の各々に菌株SB12の予備
培養物（ツアペツク―ペプトン―カゼイン寒天を
含む傾斜試験管培養物から接種され、同一の培養
液から得られたもの）１mlを接種し、そして該フ
ラスコを回転振とう器上で28℃にて３日間培養し
た。培養後、フラスコの内容物を合しそして菌糸
体を遠心分離により除去した。450AIU／mlを含
む上澄液500mlが得られた。 該上澄液を硫酸アンモニウム250ｇを一部分づ
つ撹拌しながら加えて処理しそして該混合物をそ
のあと毎分12000回転にて10分間遠心分離した。
沈澱を蒸溜水100mlに溶解しそして４容（＝400
ml）のアセトンを撹拌しながら加えた。良好に沈
降する沈澱が生成した。液体を傾斜法で除去しそ
して沈澱をアセトンで２回およびエーテルで１回
洗浄しそして真空乾燥した。 収量：10×103AIU／ｇを含むもの13.4ｇ。 実施例 ５ 実施例４に従い硫酸アンモニウムにより沈澱さ
せた後に得られた沈澱を水100mlに溶解しそして
蒸溜水中で６時間透析した。透析物が得られ、そ
れを凍結しそして凍結乾燥した。収量：80AIU／
mgを含むもの1.5ｇ。 実施例 ６ 実施例４に従う混合物を32℃にて３日間培養し
た場合、350AIU／mgを含む培養液が菌糸体の
過除去後に得られた。 実施例 ７ 実施例１に従う培養液に実施例４に従つて接種
した場合、28℃にて３日間培養後270AIU／mlを
含む培養液が得られた。 実施例 ８ ３％グルコーズ、３％大豆粉および0.2％
CaCO3から成る培養液100mlを各々含む６ケの１
容エルレンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃
にて30分、滅菌後のPH7.2）の各々に菌株SB5の
予備培養物（実施例１におけると同様にして得ら
れたもの）１mlを接種し、そして回転振とう機上
にて28℃にて４日間培養した。フラスコの内容物
を合しそして菌糸体を遠心分離により分離除去し
た。得られた150AIU／mlを含む上澄液500mlを冷
凍しそして凍結乾燥した。 収量：11×103AIU／ｇを含むもの6.9ｇ。 実施例 ９ 実施例４に従う混合物を各々120mlに入れたフ
ラスコ24ケに菌株SB11の予備培養物（実施例４
に従つて得られたもの）を接種しそして28℃にて
５日間培養した場合、遠心分離後に1.1MIU／ml
を含む上澄液2.0リツトルが得られた。この２リ
ツトルを回転蒸発器により200mlに濃縮した。濃
縮物200mlを室温にて蒸溜水２リツトル中でビス
キング（Visking）透析管〔タイプ27／100FT、
ユニオン・カーバイド・コーポレーシヨン
（Union Carbide Corporation）〕中で24時間透析
した。阻害剤を含む外側の培地を回転蒸発器を用
いて100mlに濃縮しそして無水エタノール900mlに
撹拌しながら滴々添加した。分離した殆んど不活
性な沈澱を遠心分離除去して捨て、そしてアルコ
ール上澄液を回転蒸発器により30mlに濃縮した。 この濃縮物１mlは70MIU／mlを含んだ。 更に精製するために、この溶液を陰イオン交換
カラム〔アンバライト（Amberlite）IRA410、酢
酸塩形、0.05M酢酸アンモニウム中、PH７、2.5
×20cmカラム〕上に流しそして活性フラクシヨン
を合しそしてセフデツクス（Sephadex）RG75に
より水を用いてゲル過した。ゲル過により得
られた活性フラクシヨンを12mlに濃縮した。この
溶液１mlは150MIU／mlを含んだ。 菌糸体（約500ml）をアセトン１を用いて２
回およびエーテル１を用いて１回抽出しそして
抽出物を合しそして回転蒸発器を用いて真空中で
蒸発乾固した。菌糸体残渣を20℃にて真空乾燥し
そして得られた乾燥菌糸体粉末（約51ｇ）をその
あとDMSO150mlを用いて室温にて２時間抽出し
た。遠心分離（15000rpm、30分）の後、蒸発乾
固されたアセトン／エーテル抽出物を乾燥菌糸体
粉末からのDMSO上澄液と合した。 収量：3MIU／mlを含むもの120ml。 実施例 10 実施例１に従う培養液120mlを含む１容エル
レンマイヤー・フラスコに実施例８に従つて接種
しそして回転振とう機上で28℃にて６日間培養し
た場合、0.9MIU／mlを含む培養液が得られ
た。 実施例 11 2.5％澱粉、0.5％グルコーズ、0.5％NZ―アミ
ン、1.0％酵母抽出物および0.4％CaCO3なる組成
の培養液120mlを各々入れた５ケの１容エルレ
ンマイヤー・フラスコ（滅菌：121℃にて30分；
PHを滅菌前に7.2に調節）に、菌株SB27の予備培
養物（実施例１に従つて得られたもの）２mlを
各々接種しそしてこれらのフラスコを回転振とう
機上で28℃にて４日間培養した場合、フラスコを
合しそして菌糸体を遠心分離除去した後に、
70AIU／mlを含む上澄液500mlが得られた。その
遠心分離上澄液を冷凍しそして凍結乾燥した。 収量：3.5×103AIU／ｇを含むもの7.7ｇ。 実施例 12 実施例１に従う混合物（実施例１に従つて得ら
れた）菌糸体SB18の予備培養物２mlを接種しそ
して28℃にて３日間培養した場合、1100AIU／
ml、0.17MIU／mlおよび1.0SIU／mlを含む培養物
液が得られた。 実施例 13 各々実施例１に従う培養液８リツトルを入れた
５ケの実験醗酵器に（実施例１に従つて得られ
た）予備培養物120mlを接種しそして撹拌且つ通
気しながら28℃にて65時間培養した場合、醗酵液
を合しそして菌糸体を分離除去した後に醗酵液30
が得られた。この遠心分離された培養物液30リ
ツトル（0.57MIU／ml、6.2SIU／mlおよび
8000AIU／ml）を100℃の浴温度にて20mmＨｇに
て真空中で５リツトルまで濃縮し、アセトン４容
（＝20リツトル）を撹拌しつつ該濃縮物に加え、
そして生成した黒色のべとべとした沈澱を
6000rpmにて30分間遠心分離により捕集し、該沈
澱を水2.5リツトル中に溶解しそしてその黒く色
のついた溶液を湿潤したアンバライトIRA410
（酢酸塩形、PH７）500ｇと共に60分間撹拌した。
この混合物を6000rpmにて10分間遠心分離により
上澄液とアンバライト沈降物に分離した。同様に
して、上澄液を更に各回アンバライト500ｇと共
に60分間３回撹拌し、そのあと更にアンバライト
500ｇと共に一夜（約15時間）撹拌した。この処
理の後、上澄液は淡黄色を示し、他方黒色の混濁
色素はイオン交換体に結合した。捕集したアンバ
ライト残渣を水1.5リツトルを用いて２回洗浄し
そしてこの洗浄水を阻害剤を含む上澄液に合し
た。洗浄水と合した上澄液を15mmＨｇおよび80℃
の浴温度にて回転蒸発器中で１リツトルまで濃縮
し、そのあとアセトン10リツトルにはげしく撹拌
しながら滴々添加した。その結果、白色羽毛状の
沈澱が生じ、それを別し、アセトンおよびエー
テルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：１×105AIU／ｇおよび450SIU／ｇを含
む白色粉末150ｇ。 実施例 14 実施例１に従う培養液中で、他の糖もしくは糖
アルコールをグルコーズの代りに用いそして各々
培養液120mlを入れた振とうフラスコに各々（実
施例１に従つて製造された）菌株SB18の予備培
養物１mlを接種した場合、下記のアミラーゼ阻害
剤濃度を含む培養物液が回転振とう機上にて28℃
にて３もしくは４日間培養した後に得られた。
【表】
実施例 15
３％大豆粉、２％澱粉、１％グルコーズおよび
0.2％CaCO3から成る培養液に接種しそして実施
例14に従つて培養した場合、４日間の醗酵後に
5600AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 16 SB18の形態学的変種、菌株SB18／５を用い
て、実施例12に従う混合物に接種し且つ培養した
場合、４日間の醗酵後に27400AIU／mlを含む培
養物液が得られた。 菌株SB18／５はバールンのセントラル・ビユ
ロー・ボール・シメルカルチヤーズにCBSNo.
613.71なる番号にて寄託された。 実施例 17 SB18の形態学的変種、SB18／４を用いて、実
施例12に従う混合物に接種し且つ培養した場合、
４日間の醗酵後に13900AIU／mlを含む培養液が
得られた。 菌株SB18／４はバールンのセントラル・ビユ
ロー・ボール・シメルカルチヤーズにCBSNo.
612.71なる番号にて寄託された。 実施例 18 ２％澱粉、１％グルコーズ、0.3％グリシン、
0.25％とうもろこし浸漬液、0.4％大豆粉、0.1％
NaCl、0.1％K2HPO4、0.0.1％FeSO4および0.01
％CaCO3なる組成の培養液に実施例11に従つて
接種し且つ培養した場合、３日間の培養後に
2900AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 19 実施例１に従う混合物の２ケのフラスコに菌株
SB46の予備培養物１mlを接種しそして回転振と
う機上で28℃にて４日間培養した場合、
250AIU／mlを含む上澄液250mlが遠心分離後に得
られた。 この上澄液250mlを硫酸アンモニウム150ｇを一
部づつ撹拌しながら加えて処理しそして該混合物
をそのあと10000rpmにて15分間遠心分離した。
残渣をH2O12mlに溶解しそして蒸溜水中で３時間
透析した。透析物20mlを氷浴中にてアセトン６容
（＝120ml）を用いて沈澱させそして沈澱を別
し、アセトンおよびエーテルで洗浄し、そのあと
真空乾燥した。収量：220×103AIU／ｇを含むも
の0.28ｇ。 実施例 20 実施例１に従う培養液120mlを含む１容エル
レンマイヤー・フラスコに（実施例４に従つて生
成された）菌株SE5の予備培養物２mlを接種しそ
して28℃にて回転振とう機上で７日間培養した場
合、0.09MIU／mlを含む培養物液が得られた。 菌糸体をアセトン50mlを用いて処理しそしてウ
ルトラツラツクス・ホモジナザー（UItratu―
rrax homogeniser）〔ヤンケ・アンド・クンケル
社、スタウフエン、ブライスガウ（Messrs.
Janke and Kunkel、Staufen，Breisgan）〕を用
いて１分間均質化しそして該混合物をそのあと
3000rpmにて10分間遠心分離した。残渣を再び同
じ方法でアセトン50mlを用いて抽出し、そのあと
エーテル50mlを用いて１回抽出し、そしてその三
つの抽出液を合しそして約10〜20mmＨｇおよび37
℃の湯浴温度にて回転蒸発器中で殆んで乾固する
まで濃縮した。菌糸体残渣を真空乾燥しそしてそ
のあとジメチルスルホキシド15mlを用いて処理
し、ウルトラツラツクスを用いて２分間均質化し
そして撹拌（マグネツク・スタラー）しながら２
時間抽出した。そのあと該混合物を20000rpmに
て30分間遠心分離した。次にDMSO抽出物を抽出
菌糸体から傾斜法で分離し、アセトン／エーテル
抽出残渣に加え、そして該混合物を（マグネチツ
ク・スタラーにより）約30分間撹拌しそして再び
20000rpmにて10分間遠心分離にかけ、そして上
澄液を菌糸体抽出物として試験した。0.14MIU／
ml。 実施例 21 投入物160mlを各々含む実施例１に従う２ケの
振とうフラスコの各々に菌株SE21の（（実施例１
に従う）予備培養物１mlを接種し且つ培養した場
合、遠心分離後に360AIU／mlを含む上澄液200ml
が得られた。 遠心分離した上澄液を硫酸アンモニウム100ｇ
を撹拌しながら一部分づつ加えて処理し且つ遠心
分離し、沈澱を水20ml溶解しそして該溶液をアセ
トン２容（約40ml）を用いて沈澱させた。沈澱を
アセトンおよびエーテルで洗浄し且つ真空乾燥し
た。 収量：25×103AIU／ｇを含むもの２ｇ。 実施例 22 菌株SE21の予備培養物を用いて、実施例13に
従う混合物に接種し且つ培養した場合、65時間の
醗酵後に140AIU／mlを含む培養物液が得られ
た。 実施例 23 実施例４に従う組成の培養液120mlを含む１
容エルレンマイヤー・フラスコに実施例１に従つ
て菌株SE39の予備培養物１mlを接種しそして実
施例１に従つて培養した場合、僅かに３日間の醗
酵後に50AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 24 実施例23に従う混合物中グリセリンの代りにグ
リコーズを用いた場合、３日間の後に60AIU／ml
を含む培養物液が得られた。 実施例 25 実施例23に従う混合物において実施例１に従う
培養液を変形して澱粉をグルコーズで置きかえた
場合、３日間の培養後に140AIU／mlを含む培養
物液が得られた。 実施例 26 ３％グルコーズ、0.5％NZ―アミン、0.1％酵母
抽出物および0.4％CaCO3なる組成の培養液120ml
を各々含む５ケの１容エルレンマイヤー・フラ
スコ（滅菌：121℃にて30分；滅菌前のPH7.2）に
（実施例４に従つて製造された）菌株SE39の予備
培養物１mlを接種し且つ28℃にて回転振とう機上
で３日間培養した場合、遠心分離後に160AIU／
mlを含む上澄液500mlが得られた。 該上澄液500mlにアセトン６容（＝３リツト
ル）を撹拌しながら加えて沈澱させそして淡褐色
の沈澱を別し、アセトンおよびエーテルで洗浄
し且つ真空乾燥した。 収量：13.5×103AIU／ｇを含むもの3.5ｇ。 実施例 27 実施例４に従う培養液120mlを含むエルレンマ
イヤー・フラスコに（実施例４に従つて製造され
た予備培養物）菌株SE50の予備培養物１mlを接
種し且つ再び実施例５に従つて培養した場合、５
日後に1.0SIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 28 実施例１に従う培養液を用い、実施例27の方法
に従つて操作した場合、５日間の培養後に、
26000AIU／mlおよび0.18MIU／mlおよび
1.8SIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 29 200mlのフラスコ投入物を用いて実施例28に従
う方法を行つた場合、５日間の培養後に
24500AIU／mlおよび0.18MIU／ml（および
2.1SIU／ml）を含む培養物液が得られた。 実施例 30 ２％澱粉、１％グルコーズ、0.3％グリシン、
0.25％とうもろこし浸漬液、0.4％大豆粉、0.1％
NaCl、0.1K2HPO4、（0.01％MgSO4）0.01％
CaCO3および0.001％FeSO4なる組成の培養液を
用いて実施例27の方法に従つて行つた場合、５日
間の醗酵後に12900AIU／mlを含む培養物液が得
られた。 実施例 31 実施例１に従う培養液において、グルコーズの
代りに糖アルコールの他の糖を用いそしてその溶
液に実施例27に従つて接種し且つ培養した場合下
記のアミラーゼ阻害剤濃度を含む培養物液が得ら
れた。
0.2％CaCO3から成る培養液に接種しそして実施
例14に従つて培養した場合、４日間の醗酵後に
5600AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 16 SB18の形態学的変種、菌株SB18／５を用い
て、実施例12に従う混合物に接種し且つ培養した
場合、４日間の醗酵後に27400AIU／mlを含む培
養物液が得られた。 菌株SB18／５はバールンのセントラル・ビユ
ロー・ボール・シメルカルチヤーズにCBSNo.
613.71なる番号にて寄託された。 実施例 17 SB18の形態学的変種、SB18／４を用いて、実
施例12に従う混合物に接種し且つ培養した場合、
４日間の醗酵後に13900AIU／mlを含む培養液が
得られた。 菌株SB18／４はバールンのセントラル・ビユ
ロー・ボール・シメルカルチヤーズにCBSNo.
612.71なる番号にて寄託された。 実施例 18 ２％澱粉、１％グルコーズ、0.3％グリシン、
0.25％とうもろこし浸漬液、0.4％大豆粉、0.1％
NaCl、0.1％K2HPO4、0.0.1％FeSO4および0.01
％CaCO3なる組成の培養液に実施例11に従つて
接種し且つ培養した場合、３日間の培養後に
2900AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 19 実施例１に従う混合物の２ケのフラスコに菌株
SB46の予備培養物１mlを接種しそして回転振と
う機上で28℃にて４日間培養した場合、
250AIU／mlを含む上澄液250mlが遠心分離後に得
られた。 この上澄液250mlを硫酸アンモニウム150ｇを一
部づつ撹拌しながら加えて処理しそして該混合物
をそのあと10000rpmにて15分間遠心分離した。
残渣をH2O12mlに溶解しそして蒸溜水中で３時間
透析した。透析物20mlを氷浴中にてアセトン６容
（＝120ml）を用いて沈澱させそして沈澱を別
し、アセトンおよびエーテルで洗浄し、そのあと
真空乾燥した。収量：220×103AIU／ｇを含むも
の0.28ｇ。 実施例 20 実施例１に従う培養液120mlを含む１容エル
レンマイヤー・フラスコに（実施例４に従つて生
成された）菌株SE5の予備培養物２mlを接種しそ
して28℃にて回転振とう機上で７日間培養した場
合、0.09MIU／mlを含む培養物液が得られた。 菌糸体をアセトン50mlを用いて処理しそしてウ
ルトラツラツクス・ホモジナザー（UItratu―
rrax homogeniser）〔ヤンケ・アンド・クンケル
社、スタウフエン、ブライスガウ（Messrs.
Janke and Kunkel、Staufen，Breisgan）〕を用
いて１分間均質化しそして該混合物をそのあと
3000rpmにて10分間遠心分離した。残渣を再び同
じ方法でアセトン50mlを用いて抽出し、そのあと
エーテル50mlを用いて１回抽出し、そしてその三
つの抽出液を合しそして約10〜20mmＨｇおよび37
℃の湯浴温度にて回転蒸発器中で殆んで乾固する
まで濃縮した。菌糸体残渣を真空乾燥しそしてそ
のあとジメチルスルホキシド15mlを用いて処理
し、ウルトラツラツクスを用いて２分間均質化し
そして撹拌（マグネツク・スタラー）しながら２
時間抽出した。そのあと該混合物を20000rpmに
て30分間遠心分離した。次にDMSO抽出物を抽出
菌糸体から傾斜法で分離し、アセトン／エーテル
抽出残渣に加え、そして該混合物を（マグネチツ
ク・スタラーにより）約30分間撹拌しそして再び
20000rpmにて10分間遠心分離にかけ、そして上
澄液を菌糸体抽出物として試験した。0.14MIU／
ml。 実施例 21 投入物160mlを各々含む実施例１に従う２ケの
振とうフラスコの各々に菌株SE21の（（実施例１
に従う）予備培養物１mlを接種し且つ培養した場
合、遠心分離後に360AIU／mlを含む上澄液200ml
が得られた。 遠心分離した上澄液を硫酸アンモニウム100ｇ
を撹拌しながら一部分づつ加えて処理し且つ遠心
分離し、沈澱を水20ml溶解しそして該溶液をアセ
トン２容（約40ml）を用いて沈澱させた。沈澱を
アセトンおよびエーテルで洗浄し且つ真空乾燥し
た。 収量：25×103AIU／ｇを含むもの２ｇ。 実施例 22 菌株SE21の予備培養物を用いて、実施例13に
従う混合物に接種し且つ培養した場合、65時間の
醗酵後に140AIU／mlを含む培養物液が得られ
た。 実施例 23 実施例４に従う組成の培養液120mlを含む１
容エルレンマイヤー・フラスコに実施例１に従つ
て菌株SE39の予備培養物１mlを接種しそして実
施例１に従つて培養した場合、僅かに３日間の醗
酵後に50AIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 24 実施例23に従う混合物中グリセリンの代りにグ
リコーズを用いた場合、３日間の後に60AIU／ml
を含む培養物液が得られた。 実施例 25 実施例23に従う混合物において実施例１に従う
培養液を変形して澱粉をグルコーズで置きかえた
場合、３日間の培養後に140AIU／mlを含む培養
物液が得られた。 実施例 26 ３％グルコーズ、0.5％NZ―アミン、0.1％酵母
抽出物および0.4％CaCO3なる組成の培養液120ml
を各々含む５ケの１容エルレンマイヤー・フラ
スコ（滅菌：121℃にて30分；滅菌前のPH7.2）に
（実施例４に従つて製造された）菌株SE39の予備
培養物１mlを接種し且つ28℃にて回転振とう機上
で３日間培養した場合、遠心分離後に160AIU／
mlを含む上澄液500mlが得られた。 該上澄液500mlにアセトン６容（＝３リツト
ル）を撹拌しながら加えて沈澱させそして淡褐色
の沈澱を別し、アセトンおよびエーテルで洗浄
し且つ真空乾燥した。 収量：13.5×103AIU／ｇを含むもの3.5ｇ。 実施例 27 実施例４に従う培養液120mlを含むエルレンマ
イヤー・フラスコに（実施例４に従つて製造され
た予備培養物）菌株SE50の予備培養物１mlを接
種し且つ再び実施例５に従つて培養した場合、５
日後に1.0SIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 28 実施例１に従う培養液を用い、実施例27の方法
に従つて操作した場合、５日間の培養後に、
26000AIU／mlおよび0.18MIU／mlおよび
1.8SIU／mlを含む培養物液が得られた。 実施例 29 200mlのフラスコ投入物を用いて実施例28に従
う方法を行つた場合、５日間の培養後に
24500AIU／mlおよび0.18MIU／ml（および
2.1SIU／ml）を含む培養物液が得られた。 実施例 30 ２％澱粉、１％グルコーズ、0.3％グリシン、
0.25％とうもろこし浸漬液、0.4％大豆粉、0.1％
NaCl、0.1K2HPO4、（0.01％MgSO4）0.01％
CaCO3および0.001％FeSO4なる組成の培養液を
用いて実施例27の方法に従つて行つた場合、５日
間の醗酵後に12900AIU／mlを含む培養物液が得
られた。 実施例 31 実施例１に従う培養液において、グルコーズの
代りに糖アルコールの他の糖を用いそしてその溶
液に実施例27に従つて接種し且つ培養した場合下
記のアミラーゼ阻害剤濃度を含む培養物液が得ら
れた。
【表】
実施例 32
実施例27に従う混合物において、グリセリンの
代りにグルコーズを用いた場合、330AIU／mlを
含む培養物液が得られた。 実施例 33 実施例27に従う混合物において、澱粉の代りに
グルコーズを用いた場合、660AIU／mlを含む培
養物液が得られた。 実施例 34 実施例28に従う混合物において、NZ―アミン
の代りに他の複合窒素源を用いた場合、３日間の
醗酵後に下記のアミラーゼ阻害剤単位を含む培養
物液が得られた。 代替物質 AIU／ml 大豆粉 13500 魚可溶性成分 16800 トリプトン 25200 肉抽出物 32700 フアーマメデイア 23100 実施例 35 菌株SE50の形態学的変種、即ち菌株SE50／12
を用いて実施例28に従う混合物に接種した場合、
３日間の醗酵後に51500AIU／mlを含む培養物液
が得られた。 実施例 36 実施例１に従う培養液、但しバイエル
（Bayer）E100発泡防止剤0.1容量％を含むもの８
リツトルを各々入れた５ケの実験醗酵品の各々に
菌株SE50の予備培養物（実施例１に従つて得ら
れたもの）120mlを接種しそして撹拌且つ通気し
ながら28℃にて65時間培養し、醗酵混合物を合し
そして菌糸体を分離除去した場合、13000AIU／
mlおよび6SIU／mlを含む培養物液24リツトルが
得られた。該醗酵液を20mmＨｇの真空度および
100℃の浴温度にて蒸発させて１リツトルまで濃
縮した。その黒色に着色した濃縮物を15000rpm
にて60分間遠心分離し、黒い上澄液をアンバライ
トIRA410のカラム（９cmφ、高さ50cm、アンバ
ライトIRA410酢酸塩、水中PH７）に入れ、カラ
ムをH2O50ml／時を用いて溶離しそして20mlのフ
ラクシヨンをフラクシヨン・コレクターに捕集し
た。阻害剤を含む淡黄色のフラクシヨン（全量
300＝６リツトル）を合し、回転蒸発器により１
リツトルに濃縮しそして無水アルコール10リツト
ルにはげしく撹拌しながら滴々添加し、それによ
り羽毛状の殆んど白色の沈澱が析出した。沈澱を
別し、無水アルコールで洗浄しそのあとエーテ
ルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：３×106AIU／ｇおよび400SIU／ｇを含
む白色粉末60ｇ 実施例 37 不活性混濁物質、特に暗色の着色物質の大部分
はまた等容積のメタノールを用いて沈澱させるこ
とにより分離除去することが出来た。この目的の
ために、遠心分離された培養物液26リツトル〔実
施例36に従い、ただしバイエル・シリコン
（Bayer silicone）Ｅ発泡防止剤0.02容量％を用い
て生成まれたもの〕（43000AIU／ml）を20mmＨｇ
および100°の浴温度にて真空蒸発することによ
り1.2リツトルまで濃縮した。その深黒色の溶液
を撹拌しながら等容積（1.2リツトル）のメタノ
ールを用いて処理し、それにより羽毛状の黒色の
沈澱が生成した。それを縦みぞつきのフイルター
を通して過しそして褐色の液（2.2リツト
ル）を乾燥スピリツト（spirit）10リツトル中に
はげしく撹拌しながら滴々添加した。淡褐色の沈
澱が生成し、それを別し、アセトンおよびエー
テルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：3700AIU／mgを含む白色の粉末80ｇ。 実施例 38 実施例４に従う培養液120mlを含む１リツトル
エルレンマイヤー・フラスコに菌株SE55の予備
培養物（実施例４に従つて製造されたもの）２ml
を接種しそして培養物を28℃にて回転振とう機上
で６日間培養し、菌糸体を分離除去したのちに、
30AIU／mlおよび0.15MIU／mlおよび0.5SIU／ml
を含む培養物液が得られた。 菌糸体を実施例19に従つて抽出した場合、
15AIU／ml、0.17MIU／mlおよび0.58SIU／mlを
含む抽出物が得られた。 実施例 39 実施例１に従う培養液を用いて実施例39に従つ
て操作した場合、60AIU／ml、0.16MIU／mlおよ
び0.65SIU／mlを含む培養物液および30AIU／ml
および0.16MIU／mlおよび0.33SIU／mlを含む菌
糸体抽出物が得られた。 実施例 40 実施例38に従う培養液に、菌株SS26をオート
ミル寒天上にて傾斜試験管培養したものを接種
し、そして該培養物を実施例39に従つて５日間培
養した場合、実施例20に従つて菌糸体の抽出後に
培養液を分離した後に0.14MIU／mlを含む抽出物
が得られた。 実施例 41 菌株SS45の培養物を用いて実施例40に従い操
作を行つた場合、0.1MIU／mlを含む菌糸体抽出
物が得られた。 実施例 42 菌株SS53の培養物を用いて実施例40に従う操
作を行つた場合、0.05MIU／mlを含む培養物液お
よび0.07MIU／mlを含む菌糸体抽出物が得られ
た。 実施例 43 0.5％バクトペプトン、0.5％肉抽出物、0.2％酵
母抽出物、0.03％カゼイン加水分解物、１％ｉ―
イノシトール、１％ソルビトール、１％Ｄ―マン
ニトール、１％グリコーズ、0.1％K2HPO40.05％
MgSO4、0.05％KClおよび0.01％FeSO4なる組成
を有しPHを7.2に調節した。培養液120mlを１リツ
トルエルレンマイヤー・フラスコに入れ、それに
菌株SS51の傾斜寒天培養物（実施例１に従つて
製造されたもの）を接種した場合、28℃にて７日
間回転振とう機上で培養した後に0.072MIU／ml
を含む培養物液および0.054MIU／mlを含む菌糸
体抽出物（実施例20に従つて製造されたもの）が
得られた。 実施例 44 ねずみおよび人間におけるグリコシド―加水分
解酵素阻害剤の作用を示すための実験的方法 炭水化分摂取後の餌食性過血糖症および過イン
シユリン症を発生させるために、ねずみ（ｎ＝
６）に１Kg当り2.5の澱粉もしくは麦芽糖もしく
はシユクローズを溶液もしくは懸濁液として経口
的に投与した（比較動物）。６つの他のねずみ郡
に上記の炭水化物の一つのほかに指示投与量のグ
リコシド―加水分解酵素阻害剤を経口的に投与し
た。眼窩後部静脈叢（retro―orbital venous
plexus）からの血液中の血糖値を炭水化物投与
後短い時間間隔にてオート・アナライザー
（Auto―Analyzer）〔テクニコン（Technicon）
、ホフマン（Hoffman）に従う：J.biol.
Chem.120巻51頁（1937年）〕を用いて測定した。 人間に食餌性過血糖症を発生させるために、50
ｇ澱粉／vpを水性懸濁液として経口的に投与し
た。指先からの毛細血管の血液中の血糖値を実験
開始の直前および開始後短い時間間隔にて上記の
方法により測定した。更に一つの実験において、
活性物質を澱粉懸濁液に加えた。 ６匹のねずみ郡の血清中のインシユリンを炭水
化物投与後短い時間間隔で測定し、その際該ねず
みの一群には2.5ｇ澱粉／Kgを経口的に投与し
（比較）そして他の一群には更にグリコシド―加
水分解酵素阻害剤を与えた。 ヘイルスおよびランドル（Hales and
Randle）〔Biochem.J.88巻137頁（1963年）〕の二
重抗体法に基く、放射線免疫法により血清中のイ
ンシユリンの測定を行つた。 ねずみの胃腸管中の澱粉の測定を300mg澱粉／
ねずみの経口投与後短い時間間隔にて行つた。こ
の目的のために、動物を殺した後消化管の個々の
部分を調製し且つ洗浄し、そしてその中に含まれ
る未消化澱粉を酸加水分解後のグルコーズとして
測定した。
代りにグルコーズを用いた場合、330AIU／mlを
含む培養物液が得られた。 実施例 33 実施例27に従う混合物において、澱粉の代りに
グルコーズを用いた場合、660AIU／mlを含む培
養物液が得られた。 実施例 34 実施例28に従う混合物において、NZ―アミン
の代りに他の複合窒素源を用いた場合、３日間の
醗酵後に下記のアミラーゼ阻害剤単位を含む培養
物液が得られた。 代替物質 AIU／ml 大豆粉 13500 魚可溶性成分 16800 トリプトン 25200 肉抽出物 32700 フアーマメデイア 23100 実施例 35 菌株SE50の形態学的変種、即ち菌株SE50／12
を用いて実施例28に従う混合物に接種した場合、
３日間の醗酵後に51500AIU／mlを含む培養物液
が得られた。 実施例 36 実施例１に従う培養液、但しバイエル
（Bayer）E100発泡防止剤0.1容量％を含むもの８
リツトルを各々入れた５ケの実験醗酵品の各々に
菌株SE50の予備培養物（実施例１に従つて得ら
れたもの）120mlを接種しそして撹拌且つ通気し
ながら28℃にて65時間培養し、醗酵混合物を合し
そして菌糸体を分離除去した場合、13000AIU／
mlおよび6SIU／mlを含む培養物液24リツトルが
得られた。該醗酵液を20mmＨｇの真空度および
100℃の浴温度にて蒸発させて１リツトルまで濃
縮した。その黒色に着色した濃縮物を15000rpm
にて60分間遠心分離し、黒い上澄液をアンバライ
トIRA410のカラム（９cmφ、高さ50cm、アンバ
ライトIRA410酢酸塩、水中PH７）に入れ、カラ
ムをH2O50ml／時を用いて溶離しそして20mlのフ
ラクシヨンをフラクシヨン・コレクターに捕集し
た。阻害剤を含む淡黄色のフラクシヨン（全量
300＝６リツトル）を合し、回転蒸発器により１
リツトルに濃縮しそして無水アルコール10リツト
ルにはげしく撹拌しながら滴々添加し、それによ
り羽毛状の殆んど白色の沈澱が析出した。沈澱を
別し、無水アルコールで洗浄しそのあとエーテ
ルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：３×106AIU／ｇおよび400SIU／ｇを含
む白色粉末60ｇ 実施例 37 不活性混濁物質、特に暗色の着色物質の大部分
はまた等容積のメタノールを用いて沈澱させるこ
とにより分離除去することが出来た。この目的の
ために、遠心分離された培養物液26リツトル〔実
施例36に従い、ただしバイエル・シリコン
（Bayer silicone）Ｅ発泡防止剤0.02容量％を用い
て生成まれたもの〕（43000AIU／ml）を20mmＨｇ
および100°の浴温度にて真空蒸発することによ
り1.2リツトルまで濃縮した。その深黒色の溶液
を撹拌しながら等容積（1.2リツトル）のメタノ
ールを用いて処理し、それにより羽毛状の黒色の
沈澱が生成した。それを縦みぞつきのフイルター
を通して過しそして褐色の液（2.2リツト
ル）を乾燥スピリツト（spirit）10リツトル中に
はげしく撹拌しながら滴々添加した。淡褐色の沈
澱が生成し、それを別し、アセトンおよびエー
テルで洗浄しそして真空乾燥した。 収量：3700AIU／mgを含む白色の粉末80ｇ。 実施例 38 実施例４に従う培養液120mlを含む１リツトル
エルレンマイヤー・フラスコに菌株SE55の予備
培養物（実施例４に従つて製造されたもの）２ml
を接種しそして培養物を28℃にて回転振とう機上
で６日間培養し、菌糸体を分離除去したのちに、
30AIU／mlおよび0.15MIU／mlおよび0.5SIU／ml
を含む培養物液が得られた。 菌糸体を実施例19に従つて抽出した場合、
15AIU／ml、0.17MIU／mlおよび0.58SIU／mlを
含む抽出物が得られた。 実施例 39 実施例１に従う培養液を用いて実施例39に従つ
て操作した場合、60AIU／ml、0.16MIU／mlおよ
び0.65SIU／mlを含む培養物液および30AIU／ml
および0.16MIU／mlおよび0.33SIU／mlを含む菌
糸体抽出物が得られた。 実施例 40 実施例38に従う培養液に、菌株SS26をオート
ミル寒天上にて傾斜試験管培養したものを接種
し、そして該培養物を実施例39に従つて５日間培
養した場合、実施例20に従つて菌糸体の抽出後に
培養液を分離した後に0.14MIU／mlを含む抽出物
が得られた。 実施例 41 菌株SS45の培養物を用いて実施例40に従い操
作を行つた場合、0.1MIU／mlを含む菌糸体抽出
物が得られた。 実施例 42 菌株SS53の培養物を用いて実施例40に従う操
作を行つた場合、0.05MIU／mlを含む培養物液お
よび0.07MIU／mlを含む菌糸体抽出物が得られ
た。 実施例 43 0.5％バクトペプトン、0.5％肉抽出物、0.2％酵
母抽出物、0.03％カゼイン加水分解物、１％ｉ―
イノシトール、１％ソルビトール、１％Ｄ―マン
ニトール、１％グリコーズ、0.1％K2HPO40.05％
MgSO4、0.05％KClおよび0.01％FeSO4なる組成
を有しPHを7.2に調節した。培養液120mlを１リツ
トルエルレンマイヤー・フラスコに入れ、それに
菌株SS51の傾斜寒天培養物（実施例１に従つて
製造されたもの）を接種した場合、28℃にて７日
間回転振とう機上で培養した後に0.072MIU／ml
を含む培養物液および0.054MIU／mlを含む菌糸
体抽出物（実施例20に従つて製造されたもの）が
得られた。 実施例 44 ねずみおよび人間におけるグリコシド―加水分
解酵素阻害剤の作用を示すための実験的方法 炭水化分摂取後の餌食性過血糖症および過イン
シユリン症を発生させるために、ねずみ（ｎ＝
６）に１Kg当り2.5の澱粉もしくは麦芽糖もしく
はシユクローズを溶液もしくは懸濁液として経口
的に投与した（比較動物）。６つの他のねずみ郡
に上記の炭水化物の一つのほかに指示投与量のグ
リコシド―加水分解酵素阻害剤を経口的に投与し
た。眼窩後部静脈叢（retro―orbital venous
plexus）からの血液中の血糖値を炭水化物投与
後短い時間間隔にてオート・アナライザー
（Auto―Analyzer）〔テクニコン（Technicon）
、ホフマン（Hoffman）に従う：J.biol.
Chem.120巻51頁（1937年）〕を用いて測定した。 人間に食餌性過血糖症を発生させるために、50
ｇ澱粉／vpを水性懸濁液として経口的に投与し
た。指先からの毛細血管の血液中の血糖値を実験
開始の直前および開始後短い時間間隔にて上記の
方法により測定した。更に一つの実験において、
活性物質を澱粉懸濁液に加えた。 ６匹のねずみ郡の血清中のインシユリンを炭水
化物投与後短い時間間隔で測定し、その際該ねず
みの一群には2.5ｇ澱粉／Kgを経口的に投与し
（比較）そして他の一群には更にグリコシド―加
水分解酵素阻害剤を与えた。 ヘイルスおよびランドル（Hales and
Randle）〔Biochem.J.88巻137頁（1963年）〕の二
重抗体法に基く、放射線免疫法により血清中のイ
ンシユリンの測定を行つた。 ねずみの胃腸管中の澱粉の測定を300mg澱粉／
ねずみの経口投与後短い時間間隔にて行つた。こ
の目的のために、動物を殺した後消化管の個々の
部分を調製し且つ洗浄し、そしてその中に含まれ
る未消化澱粉を酸加水分解後のグルコーズとして
測定した。
【表】
【表】
〓〓 〓〓 〓 〓
〓 〓 〓
〓〓 〓〓 〓 〓
〓 〓 〓
AIU／mg
〓 〓 〓
〓〓 〓〓 〓 〓
〓 〓 〓
AIU／mg
【表】
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〓 〓〓〓
〓 〓 〓 〓 〓 〓〓〓
〓〓〓
AIU／Kg
〓 〓 〓
〓 〓〓〓
〓 〓 〓 〓 〓 〓〓〓
〓〓〓
AIU／Kg
〓 〓 〓
Claims (1)
- １ アクチノプラナ科（Actinoplanaceae）に属
するグリコシド―加水分解酵素阻害剤生産菌を培
養し、そして得られた培養物からグリコシド―加
水分解酵素阻害剤を抽出することを特徴とするグ
リコシド―加水分解酵素阻害剤の製造方法。
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2064092A DE2064092C2 (de) | 1970-12-28 | 1970-12-28 | Inhibitoren für Glykosidhydrolasen aus Actinomyceten |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS57150395A JPS57150395A (en) | 1982-09-17 |
| JPS6216638B2 true JPS6216638B2 (ja) | 1987-04-14 |
Family
ID=5792372
Family Applications (3)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10558571A Pending JPS5734996B1 (ja) | 1970-12-28 | 1971-12-27 | |
| JP56189856A Granted JPS57150395A (en) | 1970-12-28 | 1981-11-26 | Production of inhibitor for glycoside hydrolyzing enzyme |
| JP56189857A Granted JPS57150396A (en) | 1970-12-28 | 1981-11-26 | Production of inhibitor for glycoside hydrolyzing enzyme |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10558571A Pending JPS5734996B1 (ja) | 1970-12-28 | 1971-12-27 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP56189857A Granted JPS57150396A (en) | 1970-12-28 | 1981-11-26 | Production of inhibitor for glycoside hydrolyzing enzyme |
Country Status (28)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3876766A (ja) |
| JP (3) | JPS5734996B1 (ja) |
| KR (1) | KR780000248B1 (ja) |
| AR (1) | AR193370A1 (ja) |
| AT (1) | AT330122B (ja) |
| AU (1) | AU461521B2 (ja) |
| BE (1) | BE777387A (ja) |
| BG (3) | BG25654A3 (ja) |
| CA (1) | CA979833A (ja) |
| CH (1) | CH594051A5 (ja) |
| CS (1) | CS167961B2 (ja) |
| DD (1) | DD99395A5 (ja) |
| DE (1) | DE2064092C2 (ja) |
| DK (1) | DK139533C (ja) |
| ES (1) | ES398358A1 (ja) |
| FI (1) | FI49774C (ja) |
| FR (1) | FR2120073B1 (ja) |
| GB (1) | GB1374751A (ja) |
| IE (1) | IE35920B1 (ja) |
| IL (1) | IL38441A (ja) |
| LU (1) | LU64319A1 (ja) |
| NL (1) | NL175199C (ja) |
| NO (1) | NO135873C (ja) |
| PL (1) | PL82900B1 (ja) |
| RO (3) | RO63065A (ja) |
| SE (1) | SE398357B (ja) |
| SU (1) | SU454750A3 (ja) |
| ZA (1) | ZA718677B (ja) |
Families Citing this family (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2209832C3 (de) * | 1972-03-01 | 1979-03-29 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Herstellung von Saccharaseinhibitoren |
| DE2209834C3 (de) * | 1972-03-01 | 1978-04-20 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Herstellung von Saccharase-Inhibitoren |
| DE2209833C3 (de) * | 1972-03-01 | 1978-06-01 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Herstellung eines Amylaseinhibitors |
| US4062950A (en) * | 1973-09-22 | 1977-12-13 | Bayer Aktiengesellschaft | Amino sugar derivatives |
| US4010258A (en) * | 1974-03-15 | 1977-03-01 | Ajinomoto Co., Inc. | Microbial amylase inhibitor and preparation thereof with the use of streptomyces diasticus var. amylostaticus |
| US4065557A (en) * | 1974-03-21 | 1977-12-27 | Bayer Aktiengesellschaft | Amino sugars and their use in improving the meat:fat ratio in animals |
| US4065562A (en) * | 1975-12-29 | 1977-12-27 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Method and composition for reducing blood glucose levels |
| FR2338707A1 (fr) * | 1976-01-22 | 1977-08-19 | Rhone Poulenc Ind | Nouvel inhibiteur de glyco-hydrolases et sa preparation par culture d'un streptomyces |
| DE2658563A1 (de) * | 1976-12-23 | 1978-06-29 | Bayer Ag | Inhibitoren fuer glykosid-hydrolasen aus bacillen |
| DE2701890C2 (de) * | 1977-01-19 | 1983-08-04 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Peptielischer Glycosidhydrolase-Inhibitor aus einem Streptomyceten und seine Verwendung |
| DE2719912C3 (de) * | 1977-05-04 | 1979-12-06 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Verfahren zur Isolierung von 0- |4,6-Dideoxy-4- [JJl S-O,4,6/5)-4,5,6-trihydroxy-3-hydroxymethyl-2cyclohexen-1-yl] -amino] - a -D-glucopyranosyl} -(I Pfeil nach rechts 4)-0- a D-glucopyranosyl-(l Pfeil nach rechts 4)-D-glucopyranose aus Kulturbrühen |
| GB2016497A (en) * | 1978-02-10 | 1979-09-26 | Taisho Pharmaceutical Co Ltd | Microbiological production of amylase inhibitor |
| CA1121290A (en) * | 1978-02-14 | 1982-04-06 | Yasuji Suhara | Amino sugar derivatives |
| JPS62160696A (ja) * | 1986-01-07 | 1987-07-16 | シャープ株式会社 | 電子式自動点滅器 |
| ES2056801T3 (es) * | 1986-08-13 | 1994-10-16 | Hoechst Ag | Oxirano-seudooligosacaridos, procedimiento para su preparacion, su utilizacion y preparados farmaceuticos. |
| US5464828A (en) * | 1988-03-02 | 1995-11-07 | Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. | Aqueous suspension of sucralfate |
| DE19507214A1 (de) * | 1995-03-02 | 1996-10-31 | Bayer Ag | Acarbose-Biosynthesegene aus Actinoplanes sp., Verfahren zu ihrer Isolierung sowie ihre Verwendung |
| EP0796915A3 (de) * | 1996-03-22 | 1999-04-14 | Bayer Ag | Verfahren zur Herstellung sowie zur Verwendung von Acarviosyl-Transferase bei der Umwandlung von Acarbose-Homologen in Acarbose, zur Herstellung von Acarbose-Homologen |
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