JPS62265976A - 多槽型細胞融合チヤンバ - Google Patents
多槽型細胞融合チヤンバInfo
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- JPS62265976A JPS62265976A JP10917986A JP10917986A JPS62265976A JP S62265976 A JPS62265976 A JP S62265976A JP 10917986 A JP10917986 A JP 10917986A JP 10917986 A JP10917986 A JP 10917986A JP S62265976 A JPS62265976 A JP S62265976A
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- JP
- Japan
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- cell fusion
- electrodes
- electrode
- chamber
- fusion chamber
- Prior art date
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- Pending
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-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（ｆｉ業上の利用分野）
本発明は等間隔で対向する一対の電極の間に、細胞を１
懸濁した細胞！（！濁液を収容し、電極間に電圧を印加
することにより電気刺激を利用して細胞どおしを融合さ
せる細胞融合装置における、細胞融合チャンバに関する
ものである。
懸濁した細胞！（！濁液を収容し、電極間に電圧を印加
することにより電気刺激を利用して細胞どおしを融合さ
せる細胞融合装置における、細胞融合チャンバに関する
ものである。
（従来の技術）
細胞融合チャンバでは、雑菌の侵入を防止することがで
きるように気密構造となったチャンバ容器内に細胞融合
槽が設けられ、細胞融合槽には一対の対向電極が備えら
れている。その一対の電極間の間隙部に細胞懸濁液が収
容され、電極間に所定の電圧が印加されるようになって
いる。
きるように気密構造となったチャンバ容器内に細胞融合
槽が設けられ、細胞融合槽には一対の対向電極が備えら
れている。その一対の電極間の間隙部に細胞懸濁液が収
容され、電極間に所定の電圧が印加されるようになって
いる。
また、細胞融合操作を顕微鏡下で観察しながら行なうこ
とができるように、チャンバ容器の底面と蓋は透明材料
で構成されているのが普通である。
とができるように、チャンバ容器の底面と蓋は透明材料
で構成されているのが普通である。
従来の細胞融合チャンバではチャンバ容器内には１個の
細胞融合槽が設けられている。
細胞融合槽が設けられている。
（９！明が解決しようとする問題点）
細胞融合槽の電極の間隔は細胞懸濁液に印加する電場の
強さを決める一要素であり、細胞の融合性を決定するも
のである。
強さを決める一要素であり、細胞の融合性を決定するも
のである。
しかしながら、従来の細胞融合チャンバでは１個の細胞
融合槽しか設けられていないので、その電極間の間隔も
１種類に固定されている。したがって、複数の条件で細
胞融合を行なおうとした場合、電極間の間隔の異なる複
数個の細胞融合チャンバを用意し、保管しておかなけれ
ばならないという不便さがある。
融合槽しか設けられていないので、その電極間の間隔も
１種類に固定されている。したがって、複数の条件で細
胞融合を行なおうとした場合、電極間の間隔の異なる複
数個の細胞融合チャンバを用意し、保管しておかなけれ
ばならないという不便さがある。
また、従来の細胞融合チャンバでは細胞融合槽が１個で
あるため、１度の細胞融合操作で融合させることのでき
る細胞の数にも限界があり、大量処理を行なうには適し
ていない。
あるため、１度の細胞融合操作で融合させることのでき
る細胞の数にも限界があり、大量処理を行なうには適し
ていない。
本発明は１個の細胞融合チャンバで複数種類の条件での
細胞融合操作を行なったり、又は１度の操作で大量の細
胞融合処理を行なうことのできる細胞融合チャンバを提
供することを目的とするものである。
細胞融合操作を行なったり、又は１度の操作で大量の細
胞融合処理を行なうことのできる細胞融合チャンバを提
供することを目的とするものである。
（問題点を解決するための手段）
本発明の細胞融合チャンバでは、等間隔で対向する一対
の電極を含み、その一対の電極の間隙部に！ａＩ７２Ｊ
懸濁液を収容するｉｓ胞融合槽を同一容器内に複数個形
成する。
の電極を含み、その一対の電極の間隙部に！ａＩ７２Ｊ
懸濁液を収容するｉｓ胞融合槽を同一容器内に複数個形
成する。
（実施例）
第１図は一実施例を表わす断面図、第２図は同実施例の
主として電極を示す平面図である。
主として電極を示す平面図である。
円筒状のチャンバ側壁２の底部に透明ガラス板にてなる
底板４が接着剤６により接着されてチャンバ本体７が形
成されている。接着剤６及び、後述の電極１４−１〜１
４−５と底板４との間を接着する接着剤としては、チャ
ンバ全体をオートクレーブで加熱し水蒸気で滅菌すると
きにも変質しないものであり、また、加熱したときに各
部の温度膨張率の差によっても接着列れが生じないもの
であり、かつ、生物に対して無害で無毒であることが必
要である。このような接着剤としては、例えばダウ・コ
ーニング社のシリコン系接着剤り、乙５ＩＬＡＳＴＩＣ
７３９ＢＬＡＣＫなどを使用することができる。
底板４が接着剤６により接着されてチャンバ本体７が形
成されている。接着剤６及び、後述の電極１４−１〜１
４−５と底板４との間を接着する接着剤としては、チャ
ンバ全体をオートクレーブで加熱し水蒸気で滅菌すると
きにも変質しないものであり、また、加熱したときに各
部の温度膨張率の差によっても接着列れが生じないもの
であり、かつ、生物に対して無害で無毒であることが必
要である。このような接着剤としては、例えばダウ・コ
ーニング社のシリコン系接着剤り、乙５ＩＬＡＳＴＩＣ
７３９ＢＬＡＣＫなどを使用することができる。
チャンバ側壁２の上端面には溝８が形成され、この溝８
には○リング１０が嵌め込まれている。
には○リング１０が嵌め込まれている。
チャンバ側壁２の上端開口には透明ガラス板にてなるＭ
１２が被せられ、０リング１０を介してチャンバ本体７
と蓋１２が気密を保って封止されるようになっている。
１２が被せられ、０リング１０を介してチャンバ本体７
と蓋１２が気密を保って封止されるようになっている。
底板４上には円盤の周囲がリング状に隆起した電極１４
−１と、そのリング状電極１４−１と同心円のリング状
電極１４−２〜１４−５が接着剤により接着されている
。電極１４−１〜１４−５の断面形状は、下部の側面が
垂直であり、上部は中心方向に向って傾斜している。電
極１４−１〜１４−２の間、１４−２〜１４−３の間、
１４−３と１４〜４の間及び１４−４と１４−５の間は
細胞懸濁液が収容される空間となり、それぞれの間隔は
０．５ ＋ １ ＋ ２ ＋ ４ ｒｎ ｍとなって
いる。電極１４−１〜１４−５と底［４により細胞融合
槽を構成している。電極１４−２〜１４−４は隣接する
２個の細胞融合槽の電極を兼ねている。
−１と、そのリング状電極１４−１と同心円のリング状
電極１４−２〜１４−５が接着剤により接着されている
。電極１４−１〜１４−５の断面形状は、下部の側面が
垂直であり、上部は中心方向に向って傾斜している。電
極１４−１〜１４−２の間、１４−２〜１４−３の間、
１４−３と１４〜４の間及び１４−４と１４−５の間は
細胞懸濁液が収容される空間となり、それぞれの間隔は
０．５ ＋ １ ＋ ２ ＋ ４ ｒｎ ｍとなって
いる。電極１４−１〜１４−５と底［４により細胞融合
槽を構成している。電極１４−２〜１４−４は隣接する
２個の細胞融合槽の電極を兼ねている。
電極１４−１の中心側には細胞＠濁液の蒸発防止用の凹
部の液溜め１６が形成され、電極１４−１の中心にはね
じ穴１８が設けられている。
部の液溜め１６が形成され、電極１４−１の中心にはね
じ穴１８が設けられている。
蓋１２の中央には孔２０があけられ、周辺部には孔２２
．２４が設けられている。
．２４が設けられている。
中心のねじ穴１８には中心棒２６がねじ込まれている。
中心棒２６の先端部にもねじが形成されており、この先
端部のねじ部分はＭ１２の中央の孔２０から突出してい
る。中心棒２６と蓋１２の裏面の間にはパツキン２８を
介在させ、蓋１２の表面との間にパツキン３０を介在さ
せてハンドル３２を中心棒２６の先端のねじに締めつけ
ることにより、中心棒２６と蓋１２の気密を保ちつつ。
端部のねじ部分はＭ１２の中央の孔２０から突出してい
る。中心棒２６と蓋１２の裏面の間にはパツキン２８を
介在させ、蓋１２の表面との間にパツキン３０を介在さ
せてハンドル３２を中心棒２６の先端のねじに締めつけ
ることにより、中心棒２６と蓋１２の気密を保ちつつ。
蓋１２をチャンバ本体７の側壁２の上端面に押しつける
。
。
蓋１２の周辺部の一方の孔２２には＋側端子３４が通さ
れ、パツキン３６．３８を介して気密を保って取りつけ
られている。チャンバ本体内には端子３４の下部には支
持棒４０が設けられ１ＭＩ２の内側にも支持棒４２が設
けられている。両支持捧４０，４２の下端部には縦方向
に延びる長孔があけられ、それらの長孔にはピンにより
集電子４４が支持されている。集電子４４には電極１４
−２．１４−４と接触する突起が設けられている。
れ、パツキン３６．３８を介して気密を保って取りつけ
られている。チャンバ本体内には端子３４の下部には支
持棒４０が設けられ１ＭＩ２の内側にも支持棒４２が設
けられている。両支持捧４０，４２の下端部には縦方向
に延びる長孔があけられ、それらの長孔にはピンにより
集電子４４が支持されている。集電子４４には電極１４
−２．１４−４と接触する突起が設けられている。
集電子４４は支持棒４０，４２にそれぞれ設けられたば
ね４６．４８により下方に押しつけられていることによ
り、集電子４４を介して端子３４と電極１４−２．１４
−４とが電気的に接続している。
ね４６．４８により下方に押しつけられていることによ
り、集電子４４を介して端子３４と電極１４−２．１４
−４とが電気的に接続している。
蓋１２の周辺部の他方の孔２４には一側端子５０が通さ
れ、パツキン５２．５４を介して気密を保って取りつけ
られている。チャンバ本体７内には端子５０の下部に支
持棒５６が設けられ、蓋１２の内側にも支持棒５８が設
けられている。両支持棒５６，５８の下端部には縦方向
に延びる長孔があけられ、それらの長孔にはピンにより
集電子６０が支持されている。集電子６０には電極１４
−１．１４−３．１４−５と接触する突起が設けられて
いる。集電子６０は支持棒５６，５８にそれぞれ設けら
れたばね６２．６４により下方に押しつけられているこ
とにより、集電子６０を介して端子５０と電極１４−１
．１４−３．１４−５とが電気的に接続している。
れ、パツキン５２．５４を介して気密を保って取りつけ
られている。チャンバ本体７内には端子５０の下部に支
持棒５６が設けられ、蓋１２の内側にも支持棒５８が設
けられている。両支持棒５６，５８の下端部には縦方向
に延びる長孔があけられ、それらの長孔にはピンにより
集電子６０が支持されている。集電子６０には電極１４
−１．１４−３．１４−５と接触する突起が設けられて
いる。集電子６０は支持棒５６，５８にそれぞれ設けら
れたばね６２．６４により下方に押しつけられているこ
とにより、集電子６０を介して端子５０と電極１４−１
．１４−３．１４−５とが電気的に接続している。
次に本実施例の動作について説明する。
細胞懸濁液を供給電源の容量に見合った１個の細胞融合
槽にいれ、液溜め１６に水を入れる。チャンバ本体７の
上に蓋１２を被せ、ハンドル３２で締めつける。これに
より細胞懸濁液を収容したチャンバ本体７が気密を保っ
て封止され、雑菌の侵入を防止するとともに、細胞液の
蒸発が防止される。
槽にいれ、液溜め１６に水を入れる。チャンバ本体７の
上に蓋１２を被せ、ハンドル３２で締めつける。これに
より細胞懸濁液を収容したチャンバ本体７が気密を保っ
て封止され、雑菌の侵入を防止するとともに、細胞液の
蒸発が防止される。
端子３４．５０にそれぞれリード線を接続し、顕微鏡に
載せてにｌ察しながら、融合用の通電を行なう。
載せてにｌ察しながら、融合用の通電を行なう。
本実施例では同一の細胞融合チャンバに電極間隔の異な
る複数の細胞融合槽が設けられているので、最適な電場
強度で細胞融合操作を行なうことができる。
る複数の細胞融合槽が設けられているので、最適な電場
強度で細胞融合操作を行なうことができる。
第１図及び第２図の実施例で全ての細胞融合槽の電極間
隔を等しくすることもできる。そして、複数の細胞融合
槽に細胞意濁液を収容して細胞融合操作を行なうことに
より、一度の操作で大量の処理を行なうことができるよ
うになる。
隔を等しくすることもできる。そして、複数の細胞融合
槽に細胞意濁液を収容して細胞融合操作を行なうことに
より、一度の操作で大量の処理を行なうことができるよ
うになる。
また、上記実施例では電極面に突起を設けることなく、
上方から集電子４４．６０を押しつけることにより、端
子との電気的接続を行なうようにしたので、電極構造が
簡単になり、融合終了後の懸濁液の回収や電極間隙部の
清掃が容易になる。
上方から集電子４４．６０を押しつけることにより、端
子との電気的接続を行なうようにしたので、電極構造が
簡単になり、融合終了後の懸濁液の回収や電極間隙部の
清掃が容易になる。
電極間隙部の清掃を怠ると雑菌が残ることになる。
また、上記実施例では蓋１２と底板４に透明ガラス板を
使用しており、また、細胞融合槽には観察の妨げとなる
ものは殆んどないので、細胞融合過程の顕微鏡観察が容
易になる。
使用しており、また、細胞融合槽には観察の妨げとなる
ものは殆んどないので、細胞融合過程の顕微鏡観察が容
易になる。
第３図はチャンバ本体と蓋で閉じられる容器に収容され
る電極が平行平板電極である場合の例を示している。
る電極が平行平板電極である場合の例を示している。
２ａはチャンバ本体であり、内部底面上に平行平板電極
７０−１．７０−２．７０−３．７０−４が設けられて
いる。電極７０−１と７０−３が接続され、電極７０−
２と７０−４が接続されている。各電極７０−１〜７０
−４の間には絶縁物７２−１〜７２−４が設けられ、電
極７０−１〜７０−４と絶縁物７２−１〜７２−４で囲
まれる空間に細胞懸濁液が収容される。電極７０−１〜
７０−４と絶縁物７２−１〜７２−４で細胞融合槽を構
成している。
７０−１．７０−２．７０−３．７０−４が設けられて
いる。電極７０−１と７０−３が接続され、電極７０−
２と７０−４が接続されている。各電極７０−１〜７０
−４の間には絶縁物７２−１〜７２−４が設けられ、電
極７０−１〜７０−４と絶縁物７２−１〜７２−４で囲
まれる空間に細胞懸濁液が収容される。電極７０−１〜
７０−４と絶縁物７２−１〜７２−４で細胞融合槽を構
成している。
電極７０−１と７０−３は＋側端子７４に接続され、電
極７０−２と７０−４は一側端子７６に接続されている
。端子７４及び端子７６はチャンバ本体の側壁２ａに貫
通して気密を保って取りつけられている。
極７０−２と７０−４は一側端子７６に接続されている
。端子７４及び端子７６はチャンバ本体の側壁２ａに貫
通して気密を保って取りつけられている。
各細胞融合槽の電極間隔は互いに異なっていてもよく、
等しくてもよい。
等しくてもよい。
（Ｊ１！明の効果）
本発明の細胞融合チャンバは同一の容器内に複数の細胞
融合槽を備えているので、それぞれの細胞融合槽の電極
間隔を異ならせた場合には電場強度を最適化するのが容
易で−あり、また、それぞれの細胞融合槽の電極間隔を
等しくした場合には一度の操作で大量の処理を行なうこ
とができるようになる。
融合槽を備えているので、それぞれの細胞融合槽の電極
間隔を異ならせた場合には電場強度を最適化するのが容
易で−あり、また、それぞれの細胞融合槽の電極間隔を
等しくした場合には一度の操作で大量の処理を行なうこ
とができるようになる。
第１図は一実施例を示す断面図、第２図は同実施例の主
として電極を表わす平面図である。なお、第１図は第２
図のＸ−Ｙ線位置での切断状態を表わしている。第３図
は他の実施例における主として電極を示す平面図である
。 ７・・・・・・チャンバ本体、 １４−１〜１４−４．７０−１〜７０−４・・・・・・
電極。
として電極を表わす平面図である。なお、第１図は第２
図のＸ−Ｙ線位置での切断状態を表わしている。第３図
は他の実施例における主として電極を示す平面図である
。 ７・・・・・・チャンバ本体、 １４−１〜１４−４．７０−１〜７０−４・・・・・・
電極。
Claims (6)
- （１）等間隔で対向する一対の電極を含み、その一対の
電極の間隙部に細胞懸濁液を収容する細胞融合槽を同一
容器内に複数個形成してなる多槽型細胞融合チャンバ。 - （２）隣接する細胞融合槽では、一個の電極が両細胞融
合槽で共通に使用される特許請求の範囲第１項に記載の
多槽型細胞融合チャンバ。 - （３）前記各細胞融合槽の間隙部の間隔が互いに異なっ
ている特許請求の範囲第１項又は第２項に記載の多槽型
細胞融合チャンバ。 - （４）前記各細胞融合槽の間隙部の間隔が互いに等しい
特許請求の範囲第１項又は第２項に記載の多槽型細胞融
合チャンバ。 - （５）前記電極は全て同心円のリング状である特許請求
の範囲第１項又は第２項に記載の多槽型細胞融合チャン
バ。 - （６）前記電極は平行平板電極である特許請求の範囲第
１項又は第２項に記載の多槽型細胞融合チャンバ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10917986A JPS62265976A (ja) | 1986-05-12 | 1986-05-12 | 多槽型細胞融合チヤンバ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10917986A JPS62265976A (ja) | 1986-05-12 | 1986-05-12 | 多槽型細胞融合チヤンバ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62265976A true JPS62265976A (ja) | 1987-11-18 |
Family
ID=14503657
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10917986A Pending JPS62265976A (ja) | 1986-05-12 | 1986-05-12 | 多槽型細胞融合チヤンバ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62265976A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004094587A1 (ja) * | 2003-04-22 | 2004-11-04 | Riken | 細胞刺激装置及び細胞刺激方法 |
-
1986
- 1986-05-12 JP JP10917986A patent/JPS62265976A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004094587A1 (ja) * | 2003-04-22 | 2004-11-04 | Riken | 細胞刺激装置及び細胞刺激方法 |
| JP2004344003A (ja) * | 2003-04-22 | 2004-12-09 | Institute Of Physical & Chemical Research | 細胞刺激装置及び細胞刺激方法 |
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