JPS62257379A - 細胞融合チヤンバ - Google Patents
細胞融合チヤンバInfo
- Publication number
- JPS62257379A JPS62257379A JP9898986A JP9898986A JPS62257379A JP S62257379 A JPS62257379 A JP S62257379A JP 9898986 A JP9898986 A JP 9898986A JP 9898986 A JP9898986 A JP 9898986A JP S62257379 A JPS62257379 A JP S62257379A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrode
- chamber body
- chamber
- cell fusion
- lid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
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- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
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- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は細胞どおしを電気的に融合させる細胞融合装置
において、細胞を融合させる特殊空間を提供する細胞融
合チャンバに関するものである。
において、細胞を融合させる特殊空間を提供する細胞融
合チャンバに関するものである。
（従来の技術）
細胞融合チャンバの一例として、第３図に示されるもの
が提案されている。
が提案されている。
２はチャンバ本体であり、皿状に形成されている。チャ
ンバ本体２の上部開口には蓋４が気密を保って被せられ
るようになっている。チャンバ本体２内で底板２ａ上に
は一対の電極６，８が互いに対向して組み立てられてお
り、これらの一対の電極６，８の間には細胞を懸濁した
細胞懸濁液１０が収容されるようになっている。電極６
，８にはそれぞれリード線１２．１４が設けられており
、これらのリード線１２，１．４はチャンバ本体２の側
壁２ｂを通して外部に取り出されている。
ンバ本体２の上部開口には蓋４が気密を保って被せられ
るようになっている。チャンバ本体２内で底板２ａ上に
は一対の電極６，８が互いに対向して組み立てられてお
り、これらの一対の電極６，８の間には細胞を懸濁した
細胞懸濁液１０が収容されるようになっている。電極６
，８にはそれぞれリード線１２．１４が設けられており
、これらのリード線１２，１．４はチャンバ本体２の側
壁２ｂを通して外部に取り出されている。
細胞融合の操作は顕微鏡で＊察しながら行なわれること
が多い。そのため蓋４の上方から光を照射し、細胞懸濁
液１０、チャンバ本体２の底板２ａから下方のレンズ系
１６を経て倒立顕微鏡で観察される。そのため、チャン
バ本体２と蓋４は透明な材質のものが使用される。
が多い。そのため蓋４の上方から光を照射し、細胞懸濁
液１０、チャンバ本体２の底板２ａから下方のレンズ系
１６を経て倒立顕微鏡で観察される。そのため、チャン
バ本体２と蓋４は透明な材質のものが使用される。
従来は、チャンバ本体２及び蓋４として１例えばポリカ
ーボネイトのような透明樹脂が使用されていた。
ーボネイトのような透明樹脂が使用されていた。
（発明が解決しようとする問題点）
従来の細胞融合チャンバでは、電極６，８がチャンバ本
体２の底面に直線接着して組み立てられているため、そ
の底面２ａが透明で、かつ、平坦な表面をもつようにチ
ャンバ本体２を特別に加工する必要があった。したがっ
て、従来の細胞融合チャンバは高価になる欠点をもって
いる。
体２の底面に直線接着して組み立てられているため、そ
の底面２ａが透明で、かつ、平坦な表面をもつようにチ
ャンバ本体２を特別に加工する必要があった。したがっ
て、従来の細胞融合チャンバは高価になる欠点をもって
いる。
また、一対の電極６，８はその間隔が均一でなければな
らないため、チャンバ本体２の底面２ａ上に電極６，８
を精度よく組み立てることは容易な作業ではない。
らないため、チャンバ本体２の底面２ａ上に電極６，８
を精度よく組み立てることは容易な作業ではない。
本発明は、組立てが容易で、製造価格が安く、また、取
扱いも容易な細胞融合チャンバを堤供することを目的と
するものである。
扱いも容易な細胞融合チャンバを堤供することを目的と
するものである。
（問題点を解決するための手段）
一実施例を示す第１図を参照して説明すると、本発明の
細胞融合チャンバでは、透明材料にてなる皿状のチャン
バ本体（２０）の上部開口に透明材料にてなる蓋（３６
）が気密を保って被せられてチャンバ容器が構成され、
チャンバ本体（２０）内には透明ガラス板（２２）ｌに
接着剤により接着されて組み立てられた電極（２４，２
６）が収容されており、蓋（３６）を貫通して電極（２
４゜２６）に接続される端子（３８，４４）が気密を保
って取りつけられている。
細胞融合チャンバでは、透明材料にてなる皿状のチャン
バ本体（２０）の上部開口に透明材料にてなる蓋（３６
）が気密を保って被せられてチャンバ容器が構成され、
チャンバ本体（２０）内には透明ガラス板（２２）ｌに
接着剤により接着されて組み立てられた電極（２４，２
６）が収容されており、蓋（３６）を貫通して電極（２
４゜２６）に接続される端子（３８，４４）が気密を保
って取りつけられている。
（実施例）
第１図は本発明の一実施例を表わし、第２図はチャンバ
本体内に電極組立て体を収納した状態を示す平面図であ
る。
本体内に電極組立て体を収納した状態を示す平面図であ
る。
２０はチャンバ本体であり、このチャンバ本体２０とし
ては市販のガラス製又は樹脂性のシャーレの底容器を使
用することができる。
ては市販のガラス製又は樹脂性のシャーレの底容器を使
用することができる。
チャンバ本体２０内には透明ガラス製の底板２２が置か
れ、底板２２上には円盤の周囲がリング状に隆起した内
電極２４と、内電極２４の外側に内電極２４と同心円状
に配置されたリング状の外電極２６とが設けられている
。内電極２４と外電極２６は共に底板２２上に接着剤に
より接着されて固定されている。
れ、底板２２上には円盤の周囲がリング状に隆起した内
電極２４と、内電極２４の外側に内電極２４と同心円状
に配置されたリング状の外電極２６とが設けられている
。内電極２４と外電極２６は共に底板２２上に接着剤に
より接着されて固定されている。
内電極２４と外電極２６の間の間隙部は、細胞を懸濁し
た細胞懸濁液２８を収容する部分となっている。
た細胞懸濁液２８を収容する部分となっている。
内電極２４の中心方向にはドーナツ状の四部３０が形成
されている。この四部３０は細胞！！！濁液２８の蒸発
を防ぐために、細胞懸濁液２８と同質の液、例えば水を
入れる液溜めである。内電極２４と電気的に接続してい
る中心部には電極端子３８を取りつけるためのねじ穴３
２が設けられ、外電極２６には電極端子４４を取りつけ
るためのねじ穴３４が設けられている。
されている。この四部３０は細胞！！！濁液２８の蒸発
を防ぐために、細胞懸濁液２８と同質の液、例えば水を
入れる液溜めである。内電極２４と電気的に接続してい
る中心部には電極端子３８を取りつけるためのねじ穴３
２が設けられ、外電極２６には電極端子４４を取りつけ
るためのねじ穴３４が設けられている。
底板２２と電極２４．２６の間を接着する接着剤として
は、チャンバ全体をオートクレーブで加熱し水蒸気で滅
菌するときにも変質しないものであり、また、加熱した
ときに各部の温度膨張率の差によっても接着剥れが生じ
ないものであり、かつ、生物に対して無害で無毒である
ことが必要である。このような接着剤としては、例えば
ダウ・コーニング社のシリコン系接着剤り、Ｃ，５ＩＬ
ＡＳＴＩＣ７３９ＢＬＡＣＫなどを使用することができ
る。
は、チャンバ全体をオートクレーブで加熱し水蒸気で滅
菌するときにも変質しないものであり、また、加熱した
ときに各部の温度膨張率の差によっても接着剥れが生じ
ないものであり、かつ、生物に対して無害で無毒である
ことが必要である。このような接着剤としては、例えば
ダウ・コーニング社のシリコン系接着剤り、Ｃ，５ＩＬ
ＡＳＴＩＣ７３９ＢＬＡＣＫなどを使用することができ
る。
チャンバ本体２０の上部開口には透明ガラス製又は透明
樹脂製の蓋３６が被せられている。蓋３６の中央と、外
電極２６の上方位置には、電極端＝４− 子３８．４４を通すための孔が開けられている。
樹脂製の蓋３６が被せられている。蓋３６の中央と、外
電極２６の上方位置には、電極端＝４− 子３８．４４を通すための孔が開けられている。
中央の孔には内電極２４用の電極端子３８が通され、そ
の電極端子３８は内電極２４のリングの中心のねじ穴３
２にねじ込まれて固定されている。
の電極端子３８は内電極２４のリングの中心のねじ穴３
２にねじ込まれて固定されている。
電極端子３８はパツキン４０を介してハンドル４２によ
り締めつけられることにより、電極端子３８と蓋３６の
間の隙間が気密を保って封止されている。また、外電極
２６の上方位置の孔には外電極２６用の電極端子４４が
通され、この電極端子４４は外電極２６のねじ穴３４に
ねじ込まれることによって固定され、電極端子４４と蓋
３６の孔の隙間はパツキン４６を介してハンドル４８を
締つけることにより封止されて気密を保っている。
り締めつけられることにより、電極端子３８と蓋３６の
間の隙間が気密を保って封止されている。また、外電極
２６の上方位置の孔には外電極２６用の電極端子４４が
通され、この電極端子４４は外電極２６のねじ穴３４に
ねじ込まれることによって固定され、電極端子４４と蓋
３６の孔の隙間はパツキン４６を介してハンドル４８を
締つけることにより封止されて気密を保っている。
チャンバ本体２０及び蓋３６としては透明ガラス製のも
の又は透明樹脂製のもののいずれのものも使用すること
ができる。樹脂製のものを使用する場合には、オートク
レーブで例えば１２１℃に加熱処理したときにも変形又
は変質しないような耐熱性のあるものを使用する必要が
ある。
の又は透明樹脂製のもののいずれのものも使用すること
ができる。樹脂製のものを使用する場合には、オートク
レーブで例えば１２１℃に加熱処理したときにも変形又
は変質しないような耐熱性のあるものを使用する必要が
ある。
次に、本実施例の細胞融合チャンバを組み立てる手順に
ついて説明する。
ついて説明する。
電極２４、電極２６を底板２２の上に接着して組み立て
ておく。チャンバ本体２０内に電極２４゜２６を接着し
た電極組立て体を入れ、電極端子３８をねじ穴３２にね
じ込み、電極端子４４をねじ穴３４にねじ込む。細胞懸
濁液２８と液溜め３０の水等はこの状態のときに滴下し
て入れておく。
ておく。チャンバ本体２０内に電極２４゜２６を接着し
た電極組立て体を入れ、電極端子３８をねじ穴３２にね
じ込み、電極端子４４をねじ穴３４にねじ込む。細胞懸
濁液２８と液溜め３０の水等はこの状態のときに滴下し
て入れておく。
次に、蓋３６を被せ、電極端子３８にパツキン４０を１
通し、電極端子４４にパツキン４６を通してそれぞれの
電極端子３８．４４にハンドル４２゜４６をそれぞれね
しにより締めっける。これにより、細胞融合チャンバが
形成されたことになる。
通し、電極端子４４にパツキン４６を通してそれぞれの
電極端子３８．４４にハンドル４２゜４６をそれぞれね
しにより締めっける。これにより、細胞融合チャンバが
形成されたことになる。
この細胞融合チャンバを顕微鏡のステージに置き、電極
端子３８と電極端子４４にそれぞれリード線を接続し、
電圧を印加しながら細胞融合の様子を顕微鏡によりｋｌ
ｌ察する。
端子３８と電極端子４４にそれぞれリード線を接続し、
電圧を印加しながら細胞融合の様子を顕微鏡によりｋｌ
ｌ察する。
（発明の効果）
本発明によれば、チャンバ本体２０は単に電極組立て体
を収容するだけであり、チャンバ本体２０の底面に電極
を接着することはない。したかって、チャンバ本体２０
として市販のガラスシャーレや樹脂製シャーレを使用す
ることができ、安価な細胞融合チャンバを組み立てるこ
とができる。
を収容するだけであり、チャンバ本体２０の底面に電極
を接着することはない。したかって、チャンバ本体２０
として市販のガラスシャーレや樹脂製シャーレを使用す
ることができ、安価な細胞融合チャンバを組み立てるこ
とができる。
また、電極端子３８．４４も蓋３６に孔を開け、その蓋
の孔を通して上方から取りつける形式になっているので
、内電極２４及び外電極２６の形状が単純になり、細胞
懸濁液や薬品類が付着しにくい形状となって電極の掃除
が容易になる利点もある。
の孔を通して上方から取りつける形式になっているので
、内電極２４及び外電極２６の形状が単純になり、細胞
懸濁液や薬品類が付着しにくい形状となって電極の掃除
が容易になる利点もある。
第１図は本発明の一実施例を示す断面図、第２図は同実
施例におけるチャンバ本体に電極を収容した状態を示す
平面図である。なお、第１図は第２図におけるＸ−Ｙ線
での切断状態を示している。 第３図は従来の細胞融合チャンバを示す断面図である。 ２０・・・・・・チャンバ本体、 ２２・・・・・・底板、 ２４．２６・・・・・・電極、 ３６・・・・・・蓋、 ３８．４４・・・・・・電極端子。
施例におけるチャンバ本体に電極を収容した状態を示す
平面図である。なお、第１図は第２図におけるＸ−Ｙ線
での切断状態を示している。 第３図は従来の細胞融合チャンバを示す断面図である。 ２０・・・・・・チャンバ本体、 ２２・・・・・・底板、 ２４．２６・・・・・・電極、 ３６・・・・・・蓋、 ３８．４４・・・・・・電極端子。
Claims (1)
- （１）透明材料にてなる皿状のチャンバ本体の上部開口
に透明材料にてなる蓋が気密を保って被せられてチャン
バ容器が構成され、前記チャンバ本体内には透明ガラス
板上に接着剤により接着されて組み立てられた電極が収
容されており、前記蓋を貫通して前記電極に接続される
端子が気密を保って取りつけられている細胞融合チャン
バ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9898986A JPS62257379A (ja) | 1986-04-28 | 1986-04-28 | 細胞融合チヤンバ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9898986A JPS62257379A (ja) | 1986-04-28 | 1986-04-28 | 細胞融合チヤンバ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62257379A true JPS62257379A (ja) | 1987-11-09 |
Family
ID=14234404
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9898986A Pending JPS62257379A (ja) | 1986-04-28 | 1986-04-28 | 細胞融合チヤンバ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS62257379A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007520994A (ja) * | 2003-12-01 | 2007-08-02 | ウォルターズ、リチャード，イー． | 細胞融合用の不平等電界チャンバ |
-
1986
- 1986-04-28 JP JP9898986A patent/JPS62257379A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007520994A (ja) * | 2003-12-01 | 2007-08-02 | ウォルターズ、リチャード，イー． | 細胞融合用の不平等電界チャンバ |
| EP1702065A4 (en) * | 2003-12-01 | 2009-04-29 | Richard E Walters | NON-UNIFORM ELECTRIC FIELD CHAMBER FOR CELL FUSION |
| JP4768441B2 (ja) * | 2003-12-01 | 2011-09-07 | セレクティス ソシエテ アノニム | 細胞融合用の不平等電界チャンバ |
| EP3088516A1 (en) * | 2003-12-01 | 2016-11-02 | Cellectis | Non-uniform electric field chamber for cell fusion |
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