JPS6251426B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は口臭検出剤に関し、詳しくは口臭の原
因たる唾液中の―SH基を含有する物質に作用し
て変色する物質を含有する口臭検出剤に関する。 一般に口臭は、内臓疾患による特殊なものを除
き、口腔内蛋白質の腐敗によつて産生される不快
臭を有する分子から構成されていると考えられて
いる。即ち口腔内には、食品蛋白質、剥離上皮、
滲出液中の血球成分、歯周組織の細胞等種々の蛋
白成分が存在する。これらの蛋白質は、口腔内細
菌に由来する蛋白分解酵素の作用により種々のア
ミノ酸に分解され、さらに脱炭酸酵素や脱アミノ
酵素の作用によりアミンやアンモニアに分解され
る。また含硫アミノ酸からは硫化水素やメチルメ
ルカプタンが産生される。 近年、特に口臭と硫化物との関係が注目されて
おり、硫黄化合物を選択的かつ高感度で検出する
炎光光度検出器（以下FPDと略称する）を用い
た口腔内揮発性硫化物（以下VSCと略称する）
の分析から、口臭とVSCとの間の密接な関係が
多数報告されている。即ち、官能評価により口臭
を有すると判定される被検者の口腔内気体から、
高濃度のVSCが検出され、その閾濃度や嫌悪性
などからメチルメルカプタンが口臭の強さと最も
密接な相関を示すことが確認されている。 またこれらVSCの発生機序についても検討が
加えられており、VSCの産生は、全唾液中の白
血球や剥離上皮細胞などの細胞成分の崩壊によつ
てジスルフイドが遊離し、さらにチオールに還元
され、しかる後、VSCが産生されると考えられ
ている。 一方、口臭の検出・評価法としては、人の嗅覚
による官能評価法やFPDによりVSC量を測定す
るガスクロマトグラフ法が従来から行なわれてい
る。臨床においては主に官能評価法が行なわれて
おり、事実、人の嗅覚は如何なる分析機器よりも
その検知能力においてすぐれていると言われ、に
おいの相乗・相殺作用や嫌悪性を加味した総合的
判断が可能である。 しかしながら嗅覚は疲労しやすい上に個人によ
りその鋭敏度に大きな差があること、また口腔以
外の因子（例えば食事等）により影響を受けやす
いなどの欠点が見られることから、嗅覚による方
法では、口臭の強さを客観的定量的に評価するこ
とは困難であり、また口臭を有するものはそれと
同じ口臭を評価できないという欠点がある。また
FPDによるガスクロマトグラフ法では客観的評
価が可能であるが、特殊な分析機器を必要とする
こと、唾液を用いる場合にはインキユベート（一
定期間保温すること）する必要があり時間がかか
ること、実験操作が煩雑である等の問題がある。
従つて現在のところは簡便でかつ客観的な口臭の
評価方法はないと言える。 本発明者らは、かかる現状において、簡便かつ
客観的に口臭を検出・評価できる方法を開発すべ
く鋭意研究を行つた結果、唾液中のVSCまた
は（および）その前駆体であるチオール類を測定
すると、その測定の結果は官能評価あるいはガス
クロマトグラフ法で測定される口臭と極めてよい
相関性を示すこと、当該VSCおよびチオール
類は、次式（）、 で表わされる５，5′―ジチオビス（２―ニトロ安
息香酸）（以下DTNBと略称する）を検出剤とし
て使用し、その変化をみることによつて測定でき
ることを見出し、本発明を完成した。 すなわち、本発明はDTNBを含有する口臭検出
剤を提供するものである。 本発明の原理は、次の反応式に従い、DTNB
が、アルカリ性溶液中で―SH基を有する化合物
と容易に交換反応を起こし変色することを利用し
たものである。 本反応の結果生成するチオニトロフエノレート
アニオン（）は、412nmに極大吸収を持ち、黄
色を呈する。 本発明の口臭検出剤は常法によりDTNBを水又
は水溶性有機溶媒（メタノール、エタノール等）
と水の混合溶液に溶解させることにより調製され
る。 得られた口臭検出剤は、緩衝液等を使用してそ
のPHを中性〜弱アルカリ性（PH7.0〜9.0）、好ま
しくはPH7.5〜8.0にして置くのが良く、またその
DTNBの濃度には特に制限はないが、１〜
10mM／とするのが適当である。 次に、本発明の口臭検出剤を使用し、口臭を測
定する方法の一例を挙げ説明する。 まず口臭検出剤と唾液とを直接には接触しない
が、唾液から発生する気体は口臭検出剤に接触す
るようにした密封容器（例えば第５図に示すよう
なコンウエイ皿等）に入れ、一定時間約37℃でイ
ンキユベート（保温）する。次いで口臭検出剤の
変色を肉眼で観察するか（定性検出）、または吸
光光度計を用いて定量し（定量検出）、口臭を検
出、測定する。本測定方法は、インキユベートに
より、唾液中に含まれる硫化水素やメチルメルカ
プタン等の―SH基を有する揮発性硫化物が密封
容器内に揮散してDTNBと反応し変色することを
利用するものである。 本発明によれば、個人差の大きな官能評価に頼
ることなく、またFPDのような特殊な機器を使
用する必要もないので、極めて操作が簡便であ
り、一度に多数の試料を分析できる。一方でガス
クロマトグラフ法のように硫化水素とメチルメル
カプタン等を別々に検出することはできないが、
生化学的研究を目的とするものでなく、口臭の有
無を検出するには何ら支障はない。 以下に実施例をもつて本発明を説明するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。 実施例 １ ＜検量線の作製＞ 第５図に示すコンウエイ皿（Conway dish、紫
田科学器械工業株式会社製微量検測器）の中央２
にDTNBの4mMを含む50ｍＭリン酸カリウム緩
衝液（PH7.5）溶液１mlを添加し、外側３にメチ
ルメルカプタン（ベンゼン溶液）１〜４μｇを添
加した後ふた１で密閉し、室温で30分間放置し
た。放置後DTNB溶液の波長412nmにおける吸光
度を測定して検量線を作製したところ、第１図に
示す通りの直線性の良好なものが得られた。 ＜ヒト唾液の評価＞ メチルメルカプタン溶液の代りに人の唾液を用
い、コンウエイ皿の外側３に一定量の全唾液（唾
液そのまま）を添加し、37℃で一定時間インキユ
ベートした後、室温に戻し、DTNB溶液の波長
412nmの吸光度を測定した。第２図は、人の唾液
500μからのVSCの経時的産生を調べたもので
ある。この場合には、VSC量は30時間まで経時
的に増加していた。この結果から、一般に人の唾
液中のVSCを検出する場合には、20時間前後が
適当と考えられる。 ＜官能評価法と本発明との相関＞ 本発明が口臭の検出剤として有効であることを
確認するため、被検者15人の起床時の唾液と呼気
を採取し、それぞれ本発明を用いる方法と下記基
準による官能評価法で評価し、その相関を検討し
た。結果は第３図に示す通りで、相関係数γ＝
0.6423（ｎ＝15）で有意の（危険率２％未満）相
関を示した。このことは、本発明品が口臭検出剤
として十分有用であることを示している。

【表】

【表】 ＜ガスクロマトグラフ法と本発明との相関＞ 従来よりVSCの検出に用いられているFPDを
使用してメチルメルカプタン量を測定するガスク
ロマトグラフ法と本発明との相関を、被検者15人
の唾液を採取してそれぞれ評価した。結果は第４
図に示す通りで、相関係数0.7528（ｎ＝15）で有
意（危険率１％未満）の相関が得られた。このこ
とは、本発明が口臭の検出においては、ガスクロ
マトグラフ法と同等に客観的であることを示して
いる。

【図面の簡単な説明】

第１図は検量線である。第２図はヒト唾液から
のVSC産生の経時変化を示す。第３図は官能評
価法と本発明との相関を示す。第４図はガスクロ
マトグラフ法と本発明との相関を示す。第５図は
実施例で使用したコンウエイ皿の断面説明図を示
す。 １……ふた、２……中央、３……外側、４……
仕切り。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式（） で表わされる５，5′―ジチオビス（２―ニトロ安
   息香酸）を含有する口臭検出剤。 ２ 溶液状である特許請求の範囲第１項記載の口
   臭検出剤。