JPS6267100A - バソプレシン化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

発明の分野 本発明は、３級結合の６位にペニシラミン（Ｐｅｎ）単
位および１位にメルカプトプロピオン駿（Ｍｐｒ）単位
を有することにより区別される以外／（ツブレシンの構
造と同様の構造を有する新規な環状ペプチドに関する。 該化合物は、バンプレシン受容体部位にて予期せぬ結合
活性を示す。 発明の背景 該バンプレシンまたはオキシトシン構造の合成的修飾は
、得られる化合物の拮抗剤または作用剤活性に非常なり
′ｌＩをおよぼすことか知られている。 しかし、この分野の研究では予測か困熾である：エフ・
エル・スタツセンら、ジャーナル・オブ・ファーマコロ
ジー・アンド・エクスペリメンタルー−１＝ラビユーテ
イツクｘ　（Ｆ、Ｌ、　５ｔａｓｓｅｎ　　ｅｔａｌｌ
Ｊ、　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　　ａｎｄ　　Ｅｘｐ
ｅｒｉｍｅｎｔａｌ　　Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、
且又ユ、５３（１９８２）。 ｘ−、ビー、７ｘリング（Ａ、Ｂ、Ｆｅｒｒｉｎｇ）、
ヨーロッパ特許出願公開第１１２８０９号は、オキント
シ二／拮抗剤として記載されている１位にＭｐｒ単位、
６位にＣｙｓおよびｖＳＰ−拮抗剤末端を有する化合物
を開示している。 米国特許第４５０８６４５号は、５−　Ｐｅｎ単位と共
に１位にＣｙｓまたはＰｅｎのようなアミノ含有単位な
らびにオキシトシン様末端を有する構造な開示している
。かかる化合物は、ｖｌ−バンプレシン拮抗剤活性を有
する。 米国特許第４４９１５７７号は、５−Ｃｙｓ単位構造を
有するバンプレシン拮抗剤の多くの従来技術の開示の代
表例である。 本発明者は、３級の６位に嵩高いペニシラミン単位を有
するバンプレシン様化合物が製造可能であることを見出
した。得られた化合物は、バンプレシン受容体部位にて
予期せぬ結合活性を示す。 本明細書においては、ペプチド、特にバンプレシン化学
の分野で慣用の命名法を用いている。立体配置の特記が
ない場合は、そのアミノ酸単位はＬ体、すなわち、天然
に存在する形態である。一部の構造式では、明確にする
ため、β−メルカプトプロピオン酸（１位）およびペニ
シラミン（６位）単位の硫黄を畜き加えている。 「バンプレシン」または「ＶｓＰＪという語を用いた場
合、他に修飾の記載がなければ、アルギニンパップレシ
ン（ＡＶＰｌ意味ｔ意味式６

【］中および以後の「Ａｌ
ｋＪは、チロシン単位の酸素置換基に結合した置換基の
ような炭素数１〜４の低級アルキルを意味する。このよ
うなアルキル置換基には、メチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、インプロピルまたはブチルが包含される。好ましく
は、Ａｌｋはメチルまたはエチルである。 本明細書で用いたペプチド分野における略号の例は以下
に示すとおりである。Ｍｐｒ、β−メルカプトプロピオ
ンｆｉ　、　ＯＸＴ、オキシトシン；Ｐｒ。 、プロリン；Ｐｅｎ、ペニシラミン；Ｇｌｙ、グリシン
ＨＴｙｒ、　　チｏ　シフ　；　Ｔｙｒ（Ａｌ　ｋ）、
０−アルキルチロシン；Ｐｈｅ、フェニルアラニン；　
Ｐｈｅ（Ａｌｋ入４−アルキルフェニルアラニンＨＶａ
ｌ。 バリン；Ｉｌｅ、インロイシン；ＬＹ”ｓ　　リジン；
Ａｒｇ、アルギニン；　Ａｓｎ、アスパラギン；　Ｔｏ
ｓ１１トシレートｉ　Ｂ）ＪＡ、ベンズヒドリルアミン
；ＤＩＥＡ、ジイソプロピルエチルアミン；４−ＭＣＢ
ｚＩ、４−メチルヘンシル；　ＴＦ　Ａ、　トリフルオ
ロ酢酸ｉ　ＤＣＣ，ジシクロへキシルカルボジイミド；
ＨＯＢＴ、　　ｌ−ヒドロキシベンゾトリアゾール；Ａ
ＣＭ、アセトアミドメチル。 発明の開示 本発明の６−Ｐｅｎ−パップレシン様化合物は式〔式中
、ＸはＩｌｅ、Ｐｈｅ（Ａｌｋ）、ＴｙｒまりＩ＠ＴＹ
ｒ（ＡＩｋ）のＤまたはＬ異性体；ＡはＰｒｏまたは単
結合；ＢはＡｒｇまたはＬｙｓのＤまたはＬ異性体逼Ｃ
はＡｒｇ。 ＬｙｓまたはＧｌｙのＤまたはＬ％性体または単結合一
およびＹはＯＨまたはＮｂ２を意味する〕またはその医
薬上許容される塩で示される。 式（Ｉ）の化合物の下位群のものとしでは、ＸがＤ−Ｔ
ｙｒ（Ｅｔ）％ＢがＡｒｇおよびＹがＭたである化合物
が挙げられる。 また、本発明には、付加塩、エステル形のプロドラッグ
および腹合体のような式（１）の化合物の遣々の誘導体
も包含される。付加塩は、末端酸基が士士士士 存在する場合、それにおけるＮ）（４、Ｃａ　　−に＋ またはＮａ　　のような医薬上許容されるカチオンとの
塩あるいは該ペプチドの塩基中心（該ＡｒｇまたはＬｙ
ｓ単位におけるようなンにおける医薬上許容される塩の
いずれかであってよい。塩酸塩、臭化水素酸塩および他
の強酸との塩も有用であるが酢酸塩形態が特に有用であ
る。実施例に概要を示した単層法において、該ペプチド
生成物は通常酢酸塩として単層される。該化合物はまた
遊離末端カルボキシル基が存在する場合、内填または双
性イオンを形成する。 プロドラッグとはｉｎ　　ｖｉｖ□　で本発明化合物に
分解する式（Ｉ）で示される化合物の誘導体である。 該エステルプロドラッグ形態は、例えば、式（Ｉ）の酸
の、炭素数１〜８の低級アルキルエステルまたは種々の
ベンジルエステルのような炭素数６〜１２のアラルキル
エステルである。ＹがＯＨである式（Ｉ）の化合物のエ
ステル誘導体は公仰の方法により製造される。式（Ｉ）
の化合物の他の有用な誘導体は当業者にとって明らかで
ある。「複合体」には水和物またはアルコレートのよう
な種々の溶媒和物またはメリーフィールド樹脂のような
担持樹脂を有するものが含まれる。 式（Ｉ）の化合物は、６位のペニシラミン単位および１
位のβ−メルカプトプロピオン酸単位中にそれぞれ存在
する２つのメルカプト基によって本発明の鎖状ペプチド
中間体を理化することによって製造される。該環化反応
は、高希釈において、該ジメルカプタンをジスルフィド
に分子内酸化することか可能な温和な酸化剤の存在下で
起る。 式（［Ｄ； Ｈ （ＩＩ） 〔式中、Ｘ％Ａ％　Ｂ％ＣおよびＹは式（Ｉ）と同意義
である〕 で示される鎖状ペプチドの酸化は、前記のようにして実
施される。例えば、フェリシアン化カリウムまたはフェ
リシアン化ナトリウムなどのアルカリ金属フェリシアン
化塩を過剰に用いる。該鎖状中間体は、約７〜７．５の
中性ｐ■１にて適当な不活性溶媒、好ましくは水性溶媒
に溶解させる。該反応は室温またはそれ以下の温度にて
実質的に終了するまで行なう。メタノールのような低級
アルコールを添加してもよい。鎖状ペプチドジメルカプ
タンおよび酸化剤の濃度は低い方が好ましく、例エバ、
数リットルの水性溶液に０．Ｏ１モルｓ度の酸化剤を用
いて１〜６ｇのジメルカプタンを環化する。 フェリシアン化塩とはソ同等な酸化力を有する他の温和
な酸化剤も環化反応に用いることができる。酸素、ヨウ
素、ショートエタン、過酸化水素または第二銅触媒酸素
を用いることもできる。もちろん、式（［Ｈの出発物質
の構造中に反応を阻害する部位が存在する場合、ある種
の１化方法が不適当であることは当業者に自明である。 鎖状メルカプタン出発物質は、種々のアミノ酸単位また
はメルカプト位に通常の保護基を有していてもよく、有
しこいなくてもよい。前者の場合、保護基は環化ｎ＋こ
除去する。ＡＣＭ−５口保護基の場合、保護基の除去お
よび環化は、両方とも水性メタノール中ヨウ素を用いて
行なうことができる。しかし、通常は、遊離鎖状ペプチ
ドを環化する。 式（１）で示される所望の環状５−　Ｐｅｎペプチドは
、例えば、氷酢酸を用いて水性酸化混合物を酸性化し、
反応混合物をイオン交換クロマトグラフィーカラム、例
えば、弱酸性アクリル叫脂カラムに付し酸で溶出するか
、またはエピクロルヒドリンでデキストランを架橋する
ことによって調製したビーズ状ゲル上でゲルー過するこ
とによって都合よく単離される。通常、酢酸塩が本方法
によって単離される。 遊離または保護形態の式（２）で示される鎖状ペプチド
中間体は、エム・マニングら、ジャーナル・オブ・メデ
ィシナル・ケミストリー（Ｍ、Ｍａｎｎｉｎｇｅｔ　ａ
ｌ、、　Ｊ、Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｍ、）　、２５　＊４６
（１９８２）に記１１されているようなペプチド固相合
成法を用いて都合よく調製される。市販のベンズヒドリ
ルアミン担体樹脂（ＢＨＲ）を用いて、例えばｃ（ｙ）
がＧｌγ（ＮＨ３，）またはへ■１２（アミド）である
式ＣＩ）で示されるアミド末端生成物を調製する。クロ
ロメチル担体樹脂（ＣＭＲ）を用いて、例えばｃ（ｙ）
がＧｌ　ｙ　（（Ｍｌ）またはＯＨ（酸）である式（１
，１で示される酸化合物を調製する。溶液合成法または
酵素的合成法を用いることもできる。 式（■）で示される鎖状ペプチドのペプチド鎖は、Ｃ−
末端から始まって、１位の該Ｍｐｒまで段階的につない
でいく。各単位は後記のようにペプチド分腎において公
知の方法で適宜保護する。一連の段階的反応は、各中間
体ペプチドの単離なせずにベックマン９９０−８ペプチ
ド合成器中で都合よく行なわれる。全合成方法の詳細は
後記実施例に示す。 帽脂担挿鎖に連続的に添加される種々のアミノ酸は公知
の方法で保護される。例えば、Ｂｏｃ保護基はアミン基
、特にアミノ酸のα−位のアミノ基ニ用いラレ、エチル
カルバモイル、アダマンチル、【−ブチル、アセトアミ
ドメチル、トリチルまたは所望により置換されたベンジ
ルはプロピオン酸およびＰｅｎ単位のメルカプト基に用
いられ、ニトロ、カルボベンゾキシ、メチレン−２−ス
ルホニルまたはトシルはアルギニン単位に用いらし、エ
チルオキシカルボニルまたは所望多こより置換されたカ
ルボベンゾキシ（Ｚ）はＴｙｒまたはＬｙｓ単位に用い
られる。保護基は最も好都合には容易に除去されるもの
であるべきで、例えば、ｔｅｒｔ　、−ブチルオキシカ
ルボニル（Ｂｏｃ）基については酸処理１’ｆｌいＪベ
ンジル基またはカルボベンゾキシ基についてはナトリウ
ム−液体アンモニアまたは１シ正接触水素添加を用いて
除去する。 保護した鎖状ペプチド中間体は、例えば、水相溶性溶媒
中アンモニアを用いて担体開腹マトリックスから分湛し
、ついでナトリウム−液体アンモニア、？：用いるなど
して処理して保護％を除去する。 この方法により鎖状ペプチドジメルカプタン（Ｅｌ）の
アミド誘導体が得られる。 より好都合には、アニソールなどの適当なカルボニウム
イオンスカベンジャーを用いて無水弗化水素で樹脂に担
持されたペプチドヲ処理することにより２段階を１つに
して、式（ＩＩ）のＭｐｒ　−Ｐｅｎペプチド中間体が
１■率よく得られる。 本発明の化合物は■、−ｖ２パップレシン拮抗剤活性を
有する。バンプレシンは主として腎臓における抗利尿作
用機序に寄与することが知られている。これらの化合物
の作用が天然の抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）作用と拮抗す
ると、尿細管の末端部分の浸透性が増大するため水分が
排泄される。この作用機構はある種の腎臓の上皮細胞の
細胞膜上にあるバンプレシン受容体（■２−受容体）で
起こる。 不適切な抗利尿ホルモン分泌症候群（Ｓ　Ｉ　ＡＤＨ）
　ｇたは好ましくない水腫症状に罹病しているいずれも
の患者が本質的にｖ２−拮抗剤活性を有する化合物の対
象である。このような化合物の対象となる臨床的症状の
例としては、高血圧症、肝硬変、うつ血性心不全または
重傷もしくは重病により生じた外傷があげられる。 本発明のもう１つの対象である＠２群のバンプレシン受
容体は、血管の平滑筋組織Ｇこ影響をおよぼす受容体で
ある。バンプレシンは１．Ｇ臆面管系の昇圧効果を生ぜ
しめるこれらのエフェクターの天然刺激物である。これ
らの受容体は本明細書において■□−受容体と総称する
。 したがって、本発明の化合物は、主に、そのような治療
の必要な患者に内用投与、特に非経口投与または吸入投
与することにより該患者のバンプレシン受容体部位にお
ける結合のために用いられる。選択した非毒性かつ有効
量の化合物乞好ましくは医薬担体と組み合せる。投与量
イ九は、７０に９の患者につき０．２５〜５０μｇ／Ｉ
ｃｙ、好ましくは３〜１５μｇ／ｋｇの範聞から選択さ
れた非毒性有効ｌの活性成分を含有する。該投与単位は
１日につき１〜５回投与するか継続的静脈点滴で投与す
る。 式（Ｉ）で示される活性成分を含有する本発明の医薬組
成物は、標準的液体担体に溶解または懸濁させた前記の
投与単位ｌからなることを特徴とする。このような担体
として等侵食塩水がある。該組成物は、通常、静脈内、
皮下または筋肉内投与など非経口注入に適したアンプル
または復円ｌバイアルで使用する。吸入用組成物は同様
であるが、通常、針通投与アプリケーターまたは吸入器
に入れて投与される。粉砕した粉末組成物は油状製剤、
ゲル、等張製剤用緩衝剤、エマルジョンまたはエアロゾ
ルととも用いることができる。 本発明の化合物のブタおよびラット肝臓組織における結
合活性ならびに水欠乏症ラットの拮抗剤活性は、文献〔
エフ・スタツセンら、ジャーナルーオブ・ファーマコロ
ジー・アンド・エクスペリメンタル・セラビューティッ
クス（Ｆ、５ｔ４ｓｓｅｎｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｐｈ
ａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ
ａｌＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）　、　２２３　＋　５
０（１９８２）　］に記載されている試験方法を用いて
得られたつぎの結果によって表わされる。 化合ｖｙＪＡ　、　Ｍｐｒ−Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅリ−Ｐｈｅ
−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｐｅｎ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−αγ（■
化合物Ｂ　、　Ｍｐｒ−Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）−Ｐｈｅ−
Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（Ｎ
％）これらのデータから明らかなように、本発明の代表
的化合物Ａは臨界的な６位を除けば全ての単位が同一で
ある化合物Ｂより約５０倍活性である。 化合物Ｂは、大部分のバンプレシン作用剤または拮抗剤
同族体と同様をここの位置にシスティン単位を有する。 本発明の化合物Ａの構造は、橋頭ペニシラミン単位およ
び１位のβ−メルカプトプロピオン酸により区別される
。 実施例 つぎに実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。 実施例Ｉ Ｂｏｃ−Ｌ−（Ｓ−ｐ−メチルベンジル）ペニシラミン
ノ Ｌ−ペニシラミン５．０　ｇ　（３３，６ミリモル）′
？：水酸化ナトリウム１．３　ｇ　（３３，６ミリモル
、１当量）含有水５ｍｌに溶解する。これにｔｅｒｔ、
−ブタノ−・ル１０ｇ／を加える。ジーｔｅｒｔ、−ブ
チルカーボネート８．０ｆ（３７ミリモル、１．１当覆
）を３０分かけて滴下する。室温で６時間反応させる。 濁つた反応混合物を水５０ｇ／で希釈し、ヘキサン５０
ゴで３回抽出し、固体硫酸水素ナトリウムでｐＨ３の酸
性にし、酢酸エチル５０ゴで３回抽出する。 合した酢酸エチル抽出液を硫酸ナトリウムで乾燥し、つ
いで蒸発乾固し、Ｂｏｃ−Ｌ−ペニシラミン８．０ｆ（
９６％）を得る。ｎｍｒ　（ＣＤＣｌ！３）　：　１．
４５ｐｐｍおよび１．５７　ｐｐｍ（重なったｓ、ｔ−
ブチルおよびベータージメチルプロトン）、４．３２ｐ
Ｐ（ｂｒ、ｄ、アルファプロトン）。 Ｂｏｃ　−Ｌ−ペニシラミン８．０ｆ（３２ミリ七）の
を氷−塩浴で冷却した液体アンモニア１００ｇ／に溶解
する。これに青色が持続するまでリチウムワイヤーの小
片ヲ加える。エチルエーテル５ｍｌに溶解したｐ−メチ
ルベンジルブロマイド５．９ｇＭ（３２ミリモル、１当
量）を該アンモニア混合液に１５分かけて滴下する。反
応混合物を室温まで昇温する。アンモニアを乾燥窒素気
流で除去する。 残渣を水に溶解し、ヘキサン５０＋ｌで３回抽出し、固
体硫酸水素ナトリウムでｐＨ３の酸性にし、酢酸エチル
５０ｇ／で３回抽出する。合した酢酸エチル抽出液を硫
酸ナトリウムで乾燥し、蒸発乾固して油状の表記生成物
１０．１ｇ（８９％）を潟る。ｒｍｒ（ＣＤＣｇ３）　
’　１．５９　ＰＰｍ（３，１５Ｈ％ｔ　−）＋ル＋ヘ
ータジメチル〕、２．１３　ｐｐｍ　（ｓ、　３　Ｈ。 メチル基）、３．５９　ＰＰｍ　（１，２Ｈ、メチレン
）、７、　ＯＯｐｐｍ（ｄｄ　、　４　Ｈ、芳香族環〕
。 実施例２ 鎖状ペプチド−ＢＨＡｗ脂出発物質の固相合成表記樹脂
に担持されたペプチドの固相合成のたりニ、例えば、Ｂ
ｏｃ　−Ｇｌｙ　Ｂ）ｉＡ　樹脂（！１４脂１．００ゴ
１モル／ｇ）などの木端単位−樹脂物質を出発物質とし
て用いる。該有脂物質は塩化メチレンまたはジメチルホ
ルムアミド中、Ｂｏｃ−アミノ酸−（要すればＴｏｓ）
３ミリモルとベンズヒドリルアミン樹脂１．０ミリモル
を２時間反応させることによって製造する。遊離塩基の
該ベンズヒドリルアミン樹脂を塩化メチレン中で一夜膨
潤させる。それを塩化メチレン中７％ジイソプロピルエ
チルアミン（ＤＩＲＡ）にて１回洗浄し、ついで塩化メ
チレンで１分間の洗浄を６回行ない、最後に予め乾燥さ
せたジメチルホルムアミドで１分間の洗浄を２回行なう
。Ｂｏｃ−アミノ酸の該樹脂への導入は１−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール（）ｔＯＢＴ）３ミリモル、および
ジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）３ミリモル
を用いて振盪機で２回行なった。導入後、定常的にニン
ヒドリン定量試験およびアミノ酸分析を行ない樹脂への
導入率を測定する。 適当に保護したアミノ酸をベックマンペプチド合成器９
９０−８または振盪機を用いて、Ｂｏｃ−アミノ酸−樹
脂に順次カップリングさせる。Ｂｏｃ−ＡｓｎおよびＭ
ｐｒ　（４−１！１ｅＢｚ　ｌ　）ｆ除く各カップリン
グに採用した手順は次のとおりである。 ｌ）塩化メチレンで洗浄する（３回、１分間〕。 ２）５０％トリフルオロ酢酸の塩化メチレン中溶液で予
備洗浄する（１回、１分間）。 ３）５０％トリフルオロ酢酸の塩化メチレン中溶液で脱
保護する（２０分間）。 ４）塩化メチレンで洗浄する（３回、１分間）。 ５〕７％ＤＩＥＡの塩化メチレン中溶液で予備洗浄する
（１回、１分間）。 ６〕　７％ＤＩＲＡの塩化メチレン中溶液で中和する（
１回、１０分間）。 ７）塩化メチレンで洗浄する（３回、１分間）。 ８）アミノ酸３ミリモルを塩化メチレン中で保護し、つ
いで０．３ＭのＤＣＣの塩化メチレン中溶液ｘＯｇｌ（
３ミリモル）′？：添加し、２時間カップリングする。 ９ン塩化メチレンで洗浄する（３回、１分間）。 １０）　　エタノール／塩化メチレン（ｌ：１）で洗浄
する（３回、１分間）。 １１）　　塩化メチレンで洗浄する（３回、１分間）。 Ａｓｎ基をカップリングする場合、０．３Ｍの１−ヒド
ロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）］Ｏｗ！（３ミ
リモル）のジメチルホルムアミド中溶液を用いる。４−
ジメチルアミンピリジン（ＤＡＰ）３ミリモルを用いて
Ｍｐｒ（４−、ＭｅＢｚ＋）を該ペプチド樹脂にカップ
リングさせる場合にも、乾燥ジメチルホルムアミドを溶
媒として用いる。各カップリング反応の終了はニンヒド
リン試験でモニ粗製ペプチドのうち１００１１ｆを分配
クロマトグラフ（−（ｎ　−ＢｕＯＨ／ＨＯＡｃ／Ｈ２
０、４：　１　：５〕で精製し、ついでデキストラン−
エピクロルヒドリンゲル（セファデックスＧ−１５）（
１％ＨＯＡｃ）で沖過し、精製ペプチド１２．８１１ｇ
を得る。 ｔｌｃおよびｈｐｌｃにて均一、ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ
＋ １１０９６（＋Ｈ）、アミノ酸分析：アスパラギン酸１
．００．プロリン０．５７．グリシン１．１２゜千ロジ
ン０．８８．フェニル了ラニン０，９５．アルギニン１
．０９．バリン＋ペニシラミン１．７７、ペプチド含１
１７３．４％。 実施例４ 保護したペプチド中間体樹脂、　Ｍｐｒ（４−ＭｅＢリ
−Ｔｙ　ｒ　（Ｍｅ　）−Ｐｈ　ｅ−Ｖａ　Ｉ　−Ａｓ
　ｎ−Ｐ　ｅｎ（４−ＭｅＢｚ　）−Ａｒ　ｇ（Ｔｏ　
ｓ　）−ＢＨＡ　＠脂１．８５Ｊｒ（ベックマンペプチ
ド合成器を用いてアミン／樹脂１．０ミリモル／ｇ／ア
ミン／桐脂（窒素分析）から得られる）と無水フッ化水
Ｘ　３０　ｚｌｆ：アニソール３．０　ｍｌの存在下０
℃にて５０分間反応させる。真空下で蒸発乾固させた後
、残渣を無水ジエチルエーテルで処理する。該粗ペプチ
ドをジメチルホルムアミド９０１１および３３慢酢酸９
０ｇ／で抽出し、予めｐＨ４，５に調整した脱気した水
３．５４にとる。ジスルフヒトリルオクタベプチド希薄
水溶液ｇｏ、０１Ｍフェリシアン化カリウム溶液を用い
、ｐＨ７，１２で着色が３０分間持続するまで環化を行
なう。酸化反応終了後、該溶液のｐＨを米酢ｉ！！を用
いて４．５に調整する。 この溶液を弱酸性アクリル樹脂〔パイオーレックス−７
０〕カラム（２，５ｘｌＯα）にゆっくり通す。該カラ
ムをピリジン−酢酸塩緩衝液（ピリジン／酢酸／水、３
（１４：６６）で溶出する。ついでゼリジン酢酸塩溶液
を真空下で蒸留して除去する。残渣を５％酢酸から凍結
乾燥して表記ペプチドを得、前記と同様にして頂裂する
。 実施例５ Ｍｐ　ｒ　−Ｄ−Ｔｙ　ｒ　（Ｅリ−Ｐｈｅ　−Ｖａｌ
−Ａｓｎ−Ｐｅｎ−Ａｒｇ−Ａｒｇ（ＮＨ２ン保護した
ペプチド樹脂、Ｍｐｒ（４−ＭｅＢｚ　＋　）−昏丁γ
ｒ（Ｅリ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｐｅｎ（４−Ｍｅ
　Ｂｚ　＋　）　−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）−ＢＨＡ　　樹脂２．ＯＡ’（アミン／明脂１．０ミ
リモル／ｇから得られる）と無水フッ化水素３０ｍ１を
アニソール３．０　ｗｅの存在下Ｏ℃にて５０分間反応
させる。真空下で蒸発乾固させた後、残渣′ｆｒ：無水
ジエチルエーテルで処理する。該粗ペプチドをジメチル
ホルムアミド７５ｒｚｌおよび３３％酢酸７５ｍ１で抽
出し、予めｐＨ４，５に調整した脱気した水３．５Ｃ中
にとる。ジスルフヒドリル直鎖ペプチド希薄水溶液’＆
０．０１Ｍフェリシアン化カリウム溶液を用いてｐＨ７
，１２で着色が３０分間持続するまで酸化的環化な行な
う。酸化反応終了後、氷酢酸？用いて溶液のｐＨを４．
５に調整する。この溶液を弱酸性アクリル樹脂（バイオ
−レックス７０）カラム（２，５ｘ　Ｉ　ＱｃＭ）にゆ
っくり通す。カラムをピリジン−酢酸塩緩衝液（ピリジ
ン／酢酸／水、３０：４１６）で溶出する。ピリジン−
酢酸塩溶液を真空下で除去する。残渣を１０％酢酸から
凍結乾燥して表記ペプチドの粗生成物を得、前記と同様
にしてｆｌをする。 実施例６ 酸末端生成物（式（Ｉ）、　ＹはＯＨ？：意味する）の
一般的合成法 Ｂｏｃ−ＡＡ−メリーフィールド胸脂は、公四のセシウ
ム塩性を用いてＢｏｃ　−Ａ　Ａをメリーフィールド樹
脂にカップリングすることによって調製され、合成用出
発物質として用いられるＢｏｃ−ＡＡ−ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ
４−樹脂が得られる。合成は次の実験法を用いてベック
マン９９０−８ペプチド合成器にて実施する。それぞれ
のアミノ酸３当Ｉｌヲ適当な溶媒に溶解しく例えば、Ｓ
−４−ＭｅＢｚｌ−Ｐｅｎ　　、　Ｖａｌ、Ｐｈｅ　　
およびＳ−４−ＭｅＢｚｌ−ＭｐｒのＢｏｃ−誘導体は
塩化メチレン、ＡＳｎ　　はジメチルホルムアミド、　
Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）またはＢｒＺ−Ｄ−Ｔｙｒは塩化メ
チレン／ジメチルホルムアミド（１：１））、１．０当
看のジメチルアミノピリジンを触媒として用いるＳ−４
−ＭｅＢｚ　１−Ｍｐｒ　　のカップリング以外は当モ
ル量のジシクロへキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）およ
び】−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を用
いてカップリングする。カップリングの程度はそれぞれ
等量のサンプル’＆ニンヒドリン定置分析により調べ、
要すればカップリングを繰り返す。トリフルオロ酢！／
塩化メチレン（１：　１）を用いてＢｏｃ　　基を除去
し、洗浄後、５％ジイソプロピルエチルアミン／塩化メ
チレンを用いて遊離アミンを生成させる。該ペプチドの
配列は５　＋　４−ＭｅＢｚ　１−Ｍｐｒのカップリン
グ前に固相シークエネーターを用いて調べ、その均一性
を確認する。最終カップリング投銭ペプチドを乾燥する
とペプチド−樹脂が得られる。 無水液体フッ化水素（ＨＦ）２５ｇ／中１．ｘｇｃＯ９
５ミリモル）の該ペプチド市月旨を３肩ｌのアニソール
とともに０℃（氷浴）にて６０分間撹拌する。 ついで減圧下Ｏ℃にてフッ出水Ｘ？除去する。残渣をエ
チルエーテルで洗浄し、ジメチルホルムアミド、２０％
酢酸および０．３Ｎアンモニアを用いて該ペプチドを、
＠出する。 沖液を脱気した水２ｇに加え、濃アンモニアにてｐｌｌ
を７，１に調整する。ついで淡黄色が持続す６までフェ
リシアン化カリウムの０．０１Ｍ溶液（約４１ｍ１）を
攪拌下に滴下する。 ついで得られた溶液なＣ−１８シラン被覆シリカゲル充
填フラツシユカラム（５０１Ｘ］５（”ｆｆ）に通す。 ついてカラムを３５０ａｒ／の水で洗浄し、アセトニト
リル／水（０，２５％トリフルオロ酢酸）（１＋１）５
００ｍｌで２０ｘｔ１画分中に溶出する。 生成物含有画分（ＴＬＣ）を合わせて濃縮する。 残渣を１酢酸に溶解し、水で希釈して凍結乾燥して該酸
ペプチドを得る。 この方法を用いて次のペプチドを調製する。 実施例７ 非経口投与単位組成物 実施例３の環状ペプチドの滅菌乾燥粉末５０μｇ夕含有
する非経口投与用注射剤調製物は以下のようをこして製
造する。該ペプチドアミド１０μｇをマンニトール２０
〜の水溶液１　ｍｌに溶解する。該溶液を滅菌条件下で
７濾過して２ｍｌのアンプルに入れ凍結乾燥する。、該
粉末を高血圧症またはショックを虫っていて抗−Ａ　Ｄ
　Ｉ−１作用機竿な許容し得る患者に対して６肉円また
は静脈内投与いずれかを行なう前に復元させる。必要に
応じて１日につき１〜５回注射を繰り返すか、または継
続的に静脈内点滴７行なう。本発明の他のＧ　−Ｐｅｎ
ペプチドも同様にして製造し、使用する。 経鼻膣投与単位組成物 実施例３の生成物のような本発明の５−　Ｐｅｎペプチ
ドの微粉末３０＃ヲベンジルアルコール７５ダおよび市
販の高級脂肪酸の半合成グリセリドの混合物などの懸濁
剤１．３９５ｆの混合物中に懸濁させる。該懸濁液は計
量バルブを有する１０ｚｌエアロゾル容器に入れ、エア
ロゾル噴射剤を充填する。この内容物は１００単位投与
量からなり、１日につき１〜６回水種咀者に鼻腔同投与
する。

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. （１）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ＸはＩｌｅ、Ｐｈｅ（Ａｌｋ）、Ｔｙｒまたは
   Ｔｙｒ（Ａｌｋ）のＤまたはＬ異性体；ＡはＰｒｏまた
   は単結合；ＢはＡｒｇまたはＬｙｓのＤまたはＬ異性体
   ；ＣはＡｒｇ、ＬｙｓまたはＧｌｙのＤまたはＬ異性体
   または単結合；およびＹはＯＨまたはＮＨ＿２を意味す
   る〕で示されるポリペプチド化合物またはその医薬上許
   容される塩もしくはエステルプロドラッグ。
2. （２）ＹがＮＨ＿２である前記第（１）項の化合物。
3. （３）ＸがＤ−Ｔｙｒ−（Ｅｔ）である前記第（１）項
   の化合物。
4. （４）ＸがＴｙｒまたはＴｙｒ（Ａｌｋ）のＤ異性体で
   ある前記第（１）項の化合物。
5. （５）ＢおよびＣがＡｒｇならびにＹがＮＨ＿２である
   前記第（１）項の化合物。
6. （６）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される前記第（１）項の化合物。
7. （７）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される前記第（１）項の化合物。
8. （８）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ で示される前記第（１）項の化合物。
9. （９）医薬に用いられる前記第（１）〜（８）項のいず
   れかの化合物。
10. （１０）抗高血圧症に用いられる前記第（１）〜（８）
    項のいずれかの化合物。
11. （１１）バソプレシン拮抗剤に用いられる前記第（１）
    〜（８）項のいずれかの化合物。
12. （１２）前記第（１）〜（８）項の化合物および医薬上
    許容される担体からなることを特徴とする医薬組成物。
13. （１３）要すれば好適に保護された式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｘ、Ａ、Ｂ、ＣおよびＹは後記と同意義である
    〕 で示される鎖状ペプチド化合物を環化し、ついで適宜の
    順序で、（ａ）いずれの保護基も除去し、（ｂ）該Ｐｒ
    ｏ（ＯＨ）化合物が存在する場合、酸保護形またはアミ
    ド形のいずれかの後記Ｂと反応させ、（ｃ）その医薬上
    許容される塩もしくはプロドラッグまたはＢがＯＨであ
    る場合そのエステルを形成することを特徴とする式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、ＸはＩｌｅ、Ｐｈｅ（Ａｌｋ）、Ｔｙｒまたは
    Ｔｙｒ（Ａｌｋ）のＤまたはＬ異性体；ＡはＰｒｏまた
    は単結合；ＢはＡｒｇまたはＬｙｓのＤまたはＬ異性体
    ；ＣはＡｒｇ、ＬｙｓまたはＧｌｙのＤまたはＬ異性体
    または単結合；およびＹはＯＨまたはＮＨ＿２を意味す
    る〕で示される化合物またはその医薬上許容される塩も
    しくはエステルプロドラッグの製造法。
14. （１４）酸化的環化からなることを特徴とする前記第（
    １３）項の製造法。
15. （１５）アルカリ金属フェリシアン化塩の存在下に実施
    される前記第（１４）項の製造法。
16. （１６）該アルカリ金属フェリシアン化塩がフェリシア
    ン化カリウムまたはフェリシアン化ナトリウムである前
    記第（１５）項の製造法。