JPS6289623A - 皮膚用医療剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規な微生物トリコスポロン（Ｔｒｉｃｈｏ
ｓｐｏｒｏｎ）カシワヤマ株（微工研菌寄第４８２１号
：以下カシワヤマ株と略柿する）の培養液を常法に従っ
て濾過除閉して１斗られた無菌上澄液、または該上澄液
をさらに常法によって濃縮した濃縮液若しくはその乾燥
物からなる、皮膚用医療剤に関する。

ちなみに本発明に於て使用する「皮膚用医療剤」という
用語は、それが呈する作用・効果の観点から、広く所謂
「化粧品」と呼ばれているものを包含する。すなわち、
培養後の処理により得られた液状物または固状′物を有
効成分とし、これを担体例えば皮Ｊ顕用のクリームまた
は軟膏基材等に含有せしめたものは皮膚用の医療剤とし
て有用なるのみならず、化粧品としても有用なものであ
る。

本発明で使用する新規な微生物トリコスポロンカシワヤ
マ株は酵母に属すると考えられる。しかし、菌の同定に
あたり、たとえば次のような文献、（１）ア　ニュー　
キー　ツウ　ザ　イースト（１９７４）（Ａ　　　ｎｅ
ｗ　　ｋｅｙ　　ｔｏ　　ＴＩＩＥ　　Ｙ［ｉへ５ＴＳ
）（２）ア　ガイド　ツウ　アイデンナイファイングア
ンド　クラスファイング　イースト（１９７９）（Ａ　
　ｇｕｉｄｅ　　ｔｏ　　ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ　　
ａｎｄ　　ｃｌａｓｓｉｆｙｉｎｇｙｅａｓｔｓ） によるときは不完全菌に分類される場合もあり、ゲオト
リカム（Ｇｅｏｔｒｉｃｕｍ）属又はエンドミコプシス
（Ｅｎｄｏｍｙｃｏｐｓｉｓ　）属に属する菌として同
定されることもあり得る。

本発明で使用する新規な微生物は、添付の写真図に示す
通り、ジニズ状に連なる分節胞子と（Ｍ菌糸とを有する
点で特異的なものである。

該微生物の発酵生産物さらに詳しくは培養液の上澄液な
どは、皮膚に対し顕著な医療効果を奏する。なお、前記
医療効果を呈する有効物質の本体は、未だ完全に解明さ
れていない。前記の如く本発明の微生物培養液の無菌上
澄液、その濃縮又は乾燥物は、その単独使用又はそれら
と適宜な担体とを用い皮膚に適用した場合、下記のよう
な有用性（医療的効果）を呈する： （１）発酊液は弱酸性（ｐＨ４，５〜５．５）を呈する
が皮、菌に対し無害であり、特に皮膚脂肪膜の細菌制御
作用をはじめとする皮膚の保護作用を有する。

（２）角層細胞からの過度な角片の剥離を防ぎ、同時に
角層の水分を保持する。その結果健全な皮膚自体の持つ
特性（「うるおい」　「弾力性」）を維持することがで
きる。

（３）　　表皮細胞の脂質代謝をコントロールすること
により、適正な角質生成及び円滑な表皮細胞の増殖と分
化とを促す。

（４）特に脂性皮膚に対しては過度な皮脂分泌を抑え、
脂肪膜の厚化を防ぎ、従って毛１から皮Ｈ表面への皮脂
の拡散を促進するので坐瘉をはじめとする多脂性皮膚症
に対して予防的効果を有する。

（５）網状層の膠原線維を強化し又は膨化させ、その上
層の水分を保持するため、皮膚の正常な硬度及び弾力性
を促す。

（６）血液婚環を改善する。すなわち、皮膚の新陳代謝
を促進し、同時に皮膚老廃物の静脈への連条、排泄を活
発にする。それに伴い、メラニン色素の体外排出も促進
する。

（７）　　光線下の酸化にもとづく皮膚疾患に対し、脂
肪膜抗酸化剤的作用を有し、シミ等のように異常沈着し
ているメラニン色素の褪色を促す。特に赤外線照射、ビ
タミンＥ内服等と併用すると〃り乗的に働き、接触皮膚
炎、シミ、その他日光過敏症による色素異常に対し、単
なる予防にとＸｏまらず治療的効果を有する。

本発明で使用するトリコスポロン　力シワヤマ株は、従
来民間療法で用いられているある種の健康飲料を分離源
として得られた新規な菌株である。

この飲料は、−地方において５０有余年にわたって伝承
されてきた乳酸菌飲料の一種であり、乳酸菌及び数種の
酵母よりなる混合系の発酵生産物である。この飲料につ
いては、また皮膚塗付時に効果があるという知見が一部
あった。そこで皮膚に対する有効性の実証という観点か
ら、この混合系発酵生産物を構成する個々の菌群の特性
を鋭意研究した結果、カンワヤマ株の産するある種の未
知成分が、特に皮膚に対して有効な作用を示すことを併
せ見出した。

本発明のカシワヤマ株は、高濃度乳酸酸性で長期保存し
、耐酸性及び乳酸の強い酸化的分解能を１５　ｉ４した
ときにのみ、ある種の有効成分を産出する。即ち、本発
明のカシワヤマ株は、前述の乳酸菌飲料から該株の純粋
化を、３回く又はそれ以上〉繰返すことによりスクリー
ニングを行った後、更に高濃度乳酸含有ホエー培地（乳
酸２．５〜３．Ｏｗ／Ｖ％、ｐＨ３，０〜３．３　）に
て２５℃で４８時間振とう培養を行ない、乳酸脱水素酵
素活性又は乳酸の酸化的分解能を指標として、再度、菌
株の選択を行った結果創製されたものである。

このようにして得られたカシワヤマ株は、同居又は類似
の標準画に比較して、その皮膚有効性において著しい臨
床的な差異を有するものである。

本発明で使用するカシワヤマ株の菌学的性質は次の通り
である： 囚形態学的諸特性 （１）形態及び大きさく麦芽汁、ＭＹ液体培地）２５℃
、３日後に（３−４μ）Ｘ（３−２０μ）の矩形（ｒｅ
ｃｔａｎｇｕｌａｒ）乃至は卵形（ｏｖａｌ　）の細胞
であり、５日以降においては不規則な形状を呈し、やが
て菌糸状となる。

（２）偽菌糸形成（バレイショ抽出液寒天培地における
スライド培養） 偽菌糸状（ｐｓｅｕｄｏｈｙｐｈａｌ　ｏｒ　ｐｓｅｕ
ｄｏｍｙｃｅｌｉａｌ）を呈する。ジグザグ状の特徴的
な分節胞子（ａｒｔｈｒｏｓｐｏｒｅ）を有するが、分
生子柄は持たない。

（３）子のう胞子　　　有せず （４）射出胞子　　　　有せず ＩＢＩ培養培養学的性 特性）寒天斜面培地上のコロニー（麦芽汁及びＭＹ寒天
培地〉 無光沢（ｄｕｌｌ　）　、白色（ｗｈｉｔｅ）、羽状（
ｈａｉｒｙ）、粗造（ｒｏｕｇｈ　）表面で、極めてな
めめらか（ｓｏｆｔ）である。隆起せず平坦で周辺は毛
様状（ｃｉｌｉａｔｅ）を呈する。

（２）液体培地における皮膜（麦芽汁及びＭＹ液体培地
） 白色（ｗｈｉｔｅ）、羽状（ｈａｉｒｙ）、しわ状でか
たい皮膜を形成する （３）培地中の栄養源から芳香を形成する（４）生育好
適ｐＨ４，０〜６．０、生育好適温度２０〜３０℃ ｔｅｌ生理生理学的性 特性）糖類発酵性 グルコース、ガラクトース、ンユクロース、ラクトース
、トレハロース、ラフィノース、イヌリンのすべてに対
し非発酵性。

（２）ａ類資化性（同化性） Ｄ−グルコース（Ｄ−Ｇ　Ｉｕｃｏｓｅ）　　　　　＋
Ｄ−ガラクトース（Ｄ−Ｇａｌａｃｔｏｓｅ）　　　　
＋麦　　　芽　　　糖　　（Ｍａｌｔｏｓｅ）　　　　
　　　　−ラフィノース　　（Ｒａｆｆｉｎｏｓｅ）　
　　　　−シヨ　　　　　　　　糖　　　　（Ｓｕｃｒ
ｏｓｅ）　　　　　　　　　　　　　　　　−乳　　　
　　　　　糖　　（Ｌａｃｔｏｓｅ）　　　　　　　　
　−乳酸ナトリウム　（Ｎａ　Ｌａｃｔａｔｅ）　　　
　＋Ｄ−キシロース（Ｄ−Ｘｙｌｏｓｅ）　　　　　−
”エ　リ　ト　リ　ッ　ト　　　　　（計ｙｔｈｒｉｔ
ｏｌ）　　　　　　　　−Ｄ−７ンニツト　（Ｄ−Ｍａ
ｎｎｉｔｏｌ）　　　　　＋Ｌ　−７／Ｌ／ボース（Ｌ
−５ｏｒｂｏｓｅ）　　　　　＋イノシフト　　　（Ｉ
ｎｏｓｉｔｏｌ）　　　　　−トレハロース　　（Ｔｒ
ｅｈａｒｏｓｅ）　　　　　−Ｄ−７ラビ／　−ス（Ｄ
−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ）　　　　−Ｌ−アラビノース（
Ｌ−Ａｒａｂｉｎｏｓｅ）　　　　−コハク酸ナトリウ
ム（Ｎａ　５ｕｃｃｉｎａｔｅ）　　＋クエン酸ナトリ
ウム（Ｎａ　Ｃ１ｔｒａｔｅ）　　　−１−酢酸ナトリ
ウム　（Ｎａ　Ａｃｅｔａｔｅ）　　　　＋イ　　　　
ヌ　　　　リ　　　　ン　　　（ｌｎｕｌｉｎ）　　　
　　　　　　　　　　　　−可溶性デンゾ７　　（Ｓｏ
ｌｕｂｌｅ　５ｔａｒｃｈ）　　−エタノール　　　（
Ｂｔｈａｎｏｌ）　　　　　　＋グリセリン　　　（Ｇ
ｌｙｃｅｒｏｌ）　　　　　＋セｏ　ヒｔ　−ス（Ｃｅ
ｌｌｏｂｉｏｓｅ）　　　　−（注）　十　資化性を有
する −　資化性を有しない （３）硝酸塩の資化性　　　　　　　　　資化せず（４
）亜硝酸塩の資化性　　　　　　　　資化せず（５）エ
チルアミンハイドロ クロライドの資化性　　　　　　　資化せず（７）デン
プン様頌似物質の生成　　　　生成せず（８）色　　素
　　　　　　　　　　　　生成せず（９）エステル生成
　　　　　　　　　　生成するαＯリドマスミルク反応
　　　　　　　非凝固Ｉｌｌビタミン要求性　　　　　
　　　　要求せず（１２）食塩耐性　　限界濃度　６〜
８　　　（ｗ／ｖ　）％（１３）最適温度　　　　　　
　　　　　　２５℃（１４）最適　ｐＨ５，０ ＋１５１尿素分解性　　　　　　　　　　　分解せず＋
＋７１３７℃での生育　　　　　　　　′　生育せず（
１８）シクロへキシミド耐性　　　　　　耐性あり［Ｉ
ＥＩ油脂分解性　　　　　　　　　　　分解する（Ｄ＋
その他の菌学的特性 （１）芳香生産性 カシワヤマ株は、中性香気成分の産主において著しい特
性を持っている。その中性香気成分のガスクロマトグラ
フ分析によれば、エタノール、酢酸エチル、イソプロピ
ルアルコール、イソ酢酸プロピル、イソブチルアルコー
ル、イソ酢酸ブチル、イソアミルアルコール、イソ酢酸
アミルを主成分とする、いわゆるリンゴ呑である。

又、カシワヤマ株は従来芳香生産性が認められている酵
母に比較して、高級アルコールの生産のみならず、その
エステル化率の高いことが特徴である。

これら中性香気成分の生産における最適条件は、下記の
通りである： ａ）　初発１１１４．０〜５．０及び発酵中の低ｐ＋＋
の維持 ｂ）　培地中の総窒素量；　４００〜５００ｍｇ／β　
； ＠機窒素源としては、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニ
ウム、塩化アンモニウム：有機窒ＲｉＦＲとしては酵母
エキス、カザミノ酸、ペプトンが適している。更に、ロ
イシン、イソロイシン、バリン、フェニルアラニン等の
アミノ酸添加効果が顕著である。

Ｃ）　炭素源の選択：グルコース、ガラクトース、エタ
ノール、グリセロール等が適している。Ｐ！濃度は５％
、 ｄ）　菌接種率　１〜２％ ｅ）　培養は２５〜３０℃、静置培養 ２）有機酸生成 グルコースよりギ酸、プロピオン酸、ｎ　−醋酸、コハ
ク酸及びクエン酸を生成する。

次に本発明のトリコスポロン　力シワヤマ株と、公知種
との相違点を列挙すれば、以下の通りである。

囚　形態学的にはコロニーの性状、菌糸や、分節胞子の
形態などから、トリコスポロン　ペニシレイタム（現在
、ゲオトリカム　ペニシレイクム）に酷似しているが、 ■分生子柄が不明瞭である、 ■グルコース、ガラクトースの発酵性を全く有しない、 ■Ｄ−マンニトール、クエン酸を資化する、■酢酸エチ
ル、イソプロピルアルコール、イソ酢酸プロピル、イソ
ブチルアルコール、イソ酢酸ブチル、イソアミルアルコ
ール、イソ酢酸アミルなどの高級アルコール及びそのエ
ステルを主成分とする、中性香気成分を生成する、 という点において相違する。

旧）　同様に、ゲオトリカム　キャンディダムとも形態
学的によく類似しているが、 ■グルコースの発酵性を全く有しない、■アルブチン（
Ａｒｂｕｔｉｎ、　１ｌｙｄｒｏｑｕｉｎｏｎｅ−β−
〇−Ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ）の分解能を有す
る、■ＤＬ−乳酸、コハク酸の資化性が強い、などの点
で公知種と異なる。

［Ｃ］　　さらにエンドミコプシス　オペテンシス（現
在、ツエンデラ　オペテンシス）とは、■アルブチン分
解能を有する、 ■ビタミン要求性を有しない、 ■Ｄ−−１−シロース、Ｄ−マンニトール、クエン酸を
資化する、 ■出芽形態が異なり、子のう胞子を形成しない、その池
形態学的に異なる、 などの点で、相違する。

カシワヤマ株を使用して新規な皮膚用医療剤を製造する
には、慣用の酵母培養培地を用い得る。

好適な一例として次の組成の培地、即ちグルコース０．
３％（Ｗ／Ｖ）、スキムミルク０，５％（Ｗ／Ｖ）、イ
ーストエキス０．０５％（Ｗ／Ｖ）を含有するｐＨ４，
０〜６．０の固形または液体培地を用い、それを、２０
〜３０℃で約２４時間振盪又は静置培養したものを種菌
とし、同培地で２０〜３０℃で３〜７日間静置又は振盪
培養する。

同培養液は、ついで常法により例えばメンブランフィル
タ−にて濾過除菌し、無菌上澄液を濃縮しく例えば減圧
濃縮し）、好適には２〜２５倍濃縮液とする。

当該濃縮液は、さらに常法により殺菌工程を経たのち常
温又は冷蔵保存する。

本発明で製造される無菌上澄液の一例；よ、第１表に示
される通りの諸性質を有していた。

第　　１　　表 カシワヤマ株による培養上澄液の無菌ろ過精製物は、少
量のアミノ酸、糖質、鮨質を含む。さらに総窒素として
０．０　Ｏ５〜０．０１５％、総リンとして０．　ＯＯ
４〜０．０１４％を含む。

■、性　　状　　無色〜微黄色の透明な液で、わずかに
特異な芳香を有する。

２、確認試験　　■水晶２０ｍ１を水浴上で約５−にな
るまで蒸発させ、この液にニン ヒドリン試液１ｒｒｉを加えて３０ 分間加熱するとき、液は紫色を 呈する。

■■と同様に蒸発させた液に硝酸 ５１Ｔｈｉ！を加え、２０分間煮沸する。

冷機１０％水酸化ナトリウム溶 液で中和したのち、モリブデン 酸アンモニウム試液２１Ｔｌｌ！を加え、加熱するとき
、液は黄色を呈す る。冷機、この液に１０％水酸化 ナトリウム溶液を追加するとき、 液は無色になる。

■５ｍｌ！をとり、インドール１０ｍｇおよび塩酸２１
Ｔ１１！を加え、よく振り混ぜたのち、１０分間加熱す ると、液は赤色を呈する。

３、物性値　　　■比　重（ｄ　　　）：Ｌ、０００〜
１、　Ｏ１５ ■屈折率（ｎ　　　）　　・１．３３０〜１、３４０ ■　ｐＨ（２５°）：４．５〜５．５ ・１蒸発残留吻　０５〜２０％ 本発明で製造される無菌上澄液の濃縮物（２倍濃縮物）
の−例は、第２表に示される通りの分析値を有していた
。

得られる無菌上澄液は、濃縮せずにそのまま皮膚用医療
剤に供し得る。しかしながら前記のように濃縮すること
が保存及びその他の点で有利である。またａ縮度２５倍
以上のａ厚物、あるいは乾坦物も使用可能である。さら
にこれらをクリーム、軟膏基材及びその他の担体と混合
して用いることもできる。

前記の無菌４倍濃縮物について分析を行った結果の一例
では、各種アミノ酸及びビタミン類の含有されているこ
とが判明した。しかしながら、これらの分析は、一般的
項目を対象としているだけであるから、分析値の通りに
各秤成分を配合しても、本発明の皮膚用医療剤を製造し
得ない。即ち皮膚用医療剤の有効物は、分析項目外の未
知成分によるものと推測される。

前記の無菌濃縮物（４倍濃縮物）は、鶏胚テストによる
毒性試験の結果、無害であることが証明され、又２倍濃
縮物での人体パッチテスト及び人体連続皮膚刺激試験に
よって皮膚に対し無害であること、及び家兎の眼刺激試
験により無刺激性であることが証−明された。更に抗菌
テストにより抗生物質を含有していないことも判明した
。

更に皮膚医療効果として、シミ、肌荒れ、小シワ、接触
外皮１ｉｆｔ炎、ヤケド（熱傷）に対する治療効果のあ
ることが判明した。

以下実施例により本発明の皮膚用医療剤及び化粧料につ
いてさらに具体的に説明する。

参考例１ 純水８００１中に、 グルコース　　　　　２．４Ｊ スキムミルク　　　　４．０ｋｇ イースト・エキス　　０．４ｋｇ を含む培地（ｐＨ５，０）を、ｉｌｌ容通気攪拌発酵タ
ンク中で、常法により滅菌後、これに同組成培地１０１
で約３０時間２８℃小型通気攪拌発酵タンクにて前培養
したものを種培養液として接種し、約７０時間２８℃に
て通気攪拌培養をおこなった。

発酵終了後、培養液を内外食品工機株式会社製、ＭＰ２
９３−１６型濾過機（フィルター：東洋濾紙ＧＬ−９０
，０，５μ）及び、同社製のＭＰ２９３−４型濾過機（
メンプランフィルター：東洋濾紙ＴＭ−２，０，４５μ
）にて、固型粒子、更には、菌体を除去した。得られた
濾過液を、逆浸透膜法（バイオエンジニアリング社製、
Ｒ○−ＴＩＯ型逆浸透膜装置）にて、４００Ａに濃縮し
２倍濃縮物を（尋だ。

前述の方法を繰返し、たゾし２００１に濃縮し４倍濃縮
物を辱だ。

得られたこれらの濃縮液は、プレート式熱交換機（岩井
機械工業株式会社製）にて殺菌後、ガラス容器に無菌充
填し、冷蔵（５℃）して保存した。

得られたこれらの濃縮液の殺菌処理物から凍結乾繰によ
って得られた粉末製品を、無菌軟膏基材と混合して皮膚
用医療材を製造した。

また前記濃縮液からクリーム状の化粧料を製造した。

これらは皮膚用医療剤ならびに化粧料として、夫々優れ
た効果を示した。この点につき、以下さらに実施例によ
り詳細に説明する。

実施例１ 人体パッチテスト ２倍濃縮物の約０．２ｇを、４　ｃｍ平方のパッチ絆に
塗布し、これを年令２３〜４４才の５０名の婦人（何等
かの皮膚症状をもち皮膚科専門病院に通院中の患者）の
左上腕内側及び背部傍を椎部に貼付した。４８時間後に
貼付絆を除去した。除去後３０分において判定した結果
、左上腕内側及び背部傍を椎部の各部において、陽性を
示した例は全くなかった。

人体連続皮Ｉｉ！ｒ刺激試験 ２倍濃縮物の約５ｍｌを１Ｑｃｕｔの滅菌ガーゼに含ま
せ年令２３〜４５才の４５名の婦人（このうち３５名は
何らかの皮膚症状をもつ皮膚科専門病院の外来患者、１
０名は該病院の女子従業員）の右顔面頬部に１５分間塗
布した。この塗布処理を４０日間連続して行った。その
結果、被験者全員について無反応であり、紅斑等の異状
を呈した例は皆無であった。

兎眼ｉｌｌ激試験 あらかじめ眼に異常がないことの確認された白色種家兎
３頭の右眼について２倍濃縮液を、左眼について空試験
液をそれぞれ０．１ｎｔｆ！ずつ点眼し、点眼直後、３
．６．２４．４８及び７２時間後に両眼をスリットラン
プ使用下で検査した。その結果、いずれの観察時におい
ても両眼の角膜、虹彩及び結膜に充血及びその他の異常
が認められなかった。

シミの治療試験 肝疾患の患者、婦人科系の患者、妊娠者を除外し、顔面
皮膚にシミを有し、皮膚科専門病院に通院中の婦人６２
１名に対し、顔面洗浄後オゾンと蒸気による毛孔の開口
を行い、本発明品（無菌上澄液の２倍濃縮液）を、ガー
ゼにしませたものを、シミ生成部位に密着させ、その上
からサランラップをかぶせた。ついで赤外線照射を１５
〜２０分間行い核晶の皮膚への浸透を行った。この処理
を１迎１回、３力月にわたって継続した。

その結果、症状の非常に改善されたもの３６３名（５８
，４％）、少しく改善されたちの１２２名（１９，８％
）、改善の認められないもの１３３名（２１，４％）、
悪化したちの１名（０，０１％）、その他（別の原因に
よる接触外皮Ｉ３炎と認められる）２名（０，０３％）
であった。このように非常に改善されたものと、少しく
改善されたものの合計は、約８０％に達し、非常に改善
されたちの３６３名のうち約６０％についてはシミが全
く消失していた。

肌荒れ、小シワの治療試験 本発明品（２倍濃縮物）を、皮膚科専門病院に通院中の
２５才以上の婦人患者の肌荒れ、小シワの治療に試用し
た。

通常、婦人は３０才以上になると肌荒れ、小シワを気に
する。特に３５〜４０才において最も肌荒れ、小シワを
気にし、３０〜３５才がそれに続き、４０才以上につい
ては大差がないので気にしなくなる傾向がある。

そこで被検婦人２５〜３０才１５０名、３０〜３５才２
１８名、３５〜４０才２４８名、４０〜４５才１７２名
、４５才以上１７４名、合計９６２名に対し顔面皮膚の
洗浄の後に、オゾンと蒸気により毛孔の開口を行い、つ
いで本発明品（無菌上澄液の２倍濃縮物）をガーゼに含
ませたものを、顔面に密着させてかぶせ、その上をサラ
ンラップで蔽い、赤外線を１５〜２０分間照射し核晶を
皮ｊ；°１へ滲透させるという方法を試みた。

−回の治療処理で肌荒れが非常に改善されたちの６９８
名（７３％）、同じく一回の治療処理で少しく改善され
たちの１５６名（１６％）、変化のなかったちの７２名
（７％）、悪化したもの無し、その池３６名（４％）と
いう結果が得られた。

肌荒れが進むと小シワになり易いものであることから、
肌荒れ治療に有効である本発明品は小シワの予防を達成
する化粧品として有用なものであることが判明した。

接触外皮Ｉ；°１炎の治療試験 Ａ社のアイシャドウからＢ社のアイシャドウに使用を変
更した次の日から、顔面両側の眼瞼部に発赤と掻痒とを
起し接触性皮膚炎と診断された２１才の女子に対し、皮
膚科専門医により、本発明品（２倍濃縮物）をガーゼに
含ませたものを患部に貼付した。

その際、ステロイド製剤及び消炎剤又は抗ヒスタミン剤
等を使用せず、本発明品のみを使用した。

すなわち患者に本発明品約２０ｍ１を与え、家庭におい
ても朝り二回約３０分間ずつ塗布又は貼布させた。４８
時間後に掻痒は消失し、９６時間後に発赤はほとんど消
失し、１週間後に発赤は全く認められなかった。

熱傷の治療試験 囚　左前腕外（ｔｔ！１部に手掌大の発赤腫張と一品小
水痘形成を見た熱湯による熱傷■度の４７オの婦人が熱
湯による受傷の約１時間後に皮膚科専門医を訪れた。こ
れに対し直ちに水道水（流水）で患部を冷却した後、本
発明品（２倍濃縮物）をガーゼに含ませたものを患部に
載せ、その上を油紙で覆い包帯を施した。２４時間後に
患部に発赤腫張の残存を認めたが小水痘は消え、疼痛が
無くなった。

ｔＢ）　　熱湯により右足背部に鶏卵大の発赤腫・張を
起した熱傷■度の３０才の男子に対し、同様の処置を雅
した。その結果、２４時間後に一部に発赤の残存はあっ
たが腫張は無くなり、疼痛も無くなった。

実施例２　クリーム状化粧料の調製 ステアリン酸１ｇ１ミツロウ７ｇ１自己乳化型モノステ
アリン酸−グリセリン４ｇ、流動パラフィン３０ｇ１ラ
ノリン０．１ｇ５Ｍ製水４０ｇの基材に対し、４倍濃縮
液１ｇの割合になるように添加し、常法により混練し、
クリーム状化粧料を得た。これを通常の小型瓶に分注、
充填し、販売用とした。

実施例３　皮膚用医療剤の調製 ステアリン酸１ｇ、ミツロウ７ｇ、自己乳化型モノステ
アリン酸−グリセリン４ｇ１流勅パラフイン３０ｇ１う
／リン０．１　ｇ、精製水４０ｇの基材に対し、４倍濃
縮液１ｇの割合になるように添加し、更に塩酸ピリドキ
シン、ガンマ−オリザノール、アラントイン、ＤＬ−ア
ルファトコフェロール（ビタミンＥ）、ミンクオイルの
適量を添加し、皮膚用医療剤を得た。

【図面の簡単な説明】

添付の写真図は、本発明のトリコスポロン　カシワヤマ
株の、ハレイショ抽、出液寒天培地におけるスライド培
養（２５℃、３日後）時の形体を示すものでしる。 第１図は好気的条件下での分節胞子の、菌糸細胞からの
着生状態を示す顕微鏡写真である（×７５）。該分節胞
子は、分生子柄上に着生せず、菌糸細胞の隔壁部位から
、側杖（ｌａｔｅｒａｌ）に派生し連鎖している。 第２図は、分節胞子の拡大顕微鏡写真図である（Ｘ３０
０）。 第３図は、橡気的条件下での細胞とその出芽形態を示す
顕微鏡写真図である（Ｘ３００）。 ・、１フ１［ス： 嬉、°図 第′惇図

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. （１）トリコスポロン　カシワヤマ株（微工研菌寄第４
   ８２１号）を、ｐＨ４．０〜６．０、温度２０〜３０℃
   において培地上または培地中で培養し、得られた培養液
   から皮膚に対し医療効果を有する物質をうることを特徴
   とする皮膚用医療剤の製造法。
2. （２）培地がグルコース、スキムミルク、イーストエキ
   スからなることを特徴とする特許請求の範囲（１）記載
   の皮膚用医療剤の製造法。
3. （３）培養を好気的条件下で行なうことを特徴とする特
   許請求の範囲（２）記載の皮膚用医療剤の製造法。
4. （４）皮膚に対し医療効果を有する物質をうる手段が、
   培養液をろ過除菌し、得られた無菌上澄液を採取するこ
   とからなる特許請求の範囲（１）記載の皮膚用医療剤の
   製造法。
5. （５）無菌上澄液より水分を蒸散し、濃縮液もしくはそ
   の乾燥物をうることからなる特許請求の範囲（４）記載
   の皮膚用医療剤の製造法。