JPS63111470A - 血液試料中のプロトポーフイリン亜鉛水準の分析法 - Google Patents
血液試料中のプロトポーフイリン亜鉛水準の分析法Info
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- JPS63111470A JPS63111470A JP62259440A JP25944087A JPS63111470A JP S63111470 A JPS63111470 A JP S63111470A JP 62259440 A JP62259440 A JP 62259440A JP 25944087 A JP25944087 A JP 25944087A JP S63111470 A JPS63111470 A JP S63111470A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
［産業上の利用分５’Ｆ ］
本発明は全血中のプロトボーフィリン亜鈴の分析法に関
し、更に詳細には未処理赤血球中のベモグロビンの酸化
または再酸化を必要とせずにヘマト螢光分析法によって
プロトポーフィリン亜鉛の水準を計測することができる
試薬に関する。
し、更に詳細には未処理赤血球中のベモグロビンの酸化
または再酸化を必要とせずにヘマト螢光分析法によって
プロトポーフィリン亜鉛の水準を計測することができる
試薬に関する。
［従来の技術］
プロトポーフィリン亜鉛の測定は、各種の病気および欠
損症の診断および治療に重要であることが周知である０
例えば、血液中のプロトボーフィリン亜５ａの測定は、
匿界の人口の約２０％が罹っている鉄欠乏症の検出およ
び環境や職業上の危険をもたらす釦中毒のスクリーニン
グに重要である。
損症の診断および治療に重要であることが周知である０
例えば、血液中のプロトボーフィリン亜５ａの測定は、
匿界の人口の約２０％が罹っている鉄欠乏症の検出およ
び環境や職業上の危険をもたらす釦中毒のスクリーニン
グに重要である。
また、プロトポーフィリンの測定は、上記条件下での治
療または処置を監視するのに重要であり、有用である。
療または処置を監視するのに重要であり、有用である。
［発明が解決しようとする問題点］
ｌＯ年間以りもの間、慢性的な鉛暴露または鉄欠乏症の
スクリーニングを行う一般的方法は、全血のプロトボー
フィリン水準を測定することであった。この方法は、大
抵の場合全血の前表面螢光分析法（ｆｒｏｎｔ−ｒ、ｕ
ｒｆａｃａ ｆｌｕｏｒｏｎｅｔｒｙ）を行うように設
計された装置であるヘマト螢光分析機を用いることによ
って行われてきた。しかしながら、測定を行う場６には
、ヘモグロビンが十分に酸化されていなければ、ヘマト
螢光分析機はヘモグロビンのスペクトルのシフトによっ
て著しく低い値を生じる。この問題点を克服するには、
以前にはヘモグロビンが完全に酸化されていることを確
認する必要があり、これは血液標本を撹拌または通気を
行った後、３１！！Ｉ以上連続的に螢光分析機で読取り
をを行うことによって行われてきた。数回の読取値が実
質的に同一であるときには、これはヘモグロビンが完全
に酸化されていることを示唆しており、したがって比較
的精確なプロトボーフィリン亜鉛水準であった。
スクリーニングを行う一般的方法は、全血のプロトボー
フィリン水準を測定することであった。この方法は、大
抵の場合全血の前表面螢光分析法（ｆｒｏｎｔ−ｒ、ｕ
ｒｆａｃａ ｆｌｕｏｒｏｎｅｔｒｙ）を行うように設
計された装置であるヘマト螢光分析機を用いることによ
って行われてきた。しかしながら、測定を行う場６には
、ヘモグロビンが十分に酸化されていなければ、ヘマト
螢光分析機はヘモグロビンのスペクトルのシフトによっ
て著しく低い値を生じる。この問題点を克服するには、
以前にはヘモグロビンが完全に酸化されていることを確
認する必要があり、これは血液標本を撹拌または通気を
行った後、３１！！Ｉ以上連続的に螢光分析機で読取り
をを行うことによって行われてきた。数回の読取値が実
質的に同一であるときには、これはヘモグロビンが完全
に酸化されていることを示唆しており、したがって比較
的精確なプロトボーフィリン亜鉛水準であった。
上記の装置には［４有の誤差の可能性があることは明ら
かである。更に、この酸化法は時間がかかるので、余り
経済的ではない、最後に、保存されたまたは老化した血
液は、通常の方法で完全に酸化することは不可能ではな
いにしても著しく困難になる。
かである。更に、この酸化法は時間がかかるので、余り
経済的ではない、最後に、保存されたまたは老化した血
液は、通常の方法で完全に酸化することは不可能ではな
いにしても著しく困難になる。
本発明のｉｉ？ｆには、ヘマト螢光分析法によってボー
フィリン亜鉛螢光の精確且つ信頼性の高い読取りを行う
方法はなかった０本発明は、ヘモグロビンを試薬と反応
させて酸化されたヘモグロビンとく所望な範囲で）同じ
スペクトルを有する安定な配位生成物を生成させること
によってプロトボーフィリン分析の新規且つ改良された
方法を提供することによって上記欠点を克服するもので
ある。
フィリン亜鉛螢光の精確且つ信頼性の高い読取りを行う
方法はなかった０本発明は、ヘモグロビンを試薬と反応
させて酸化されたヘモグロビンとく所望な範囲で）同じ
スペクトルを有する安定な配位生成物を生成させること
によってプロトボーフィリン分析の新規且つ改良された
方法を提供することによって上記欠点を克服するもので
ある。
更に詳細には、本発明は、プロトボーフィリン亜鉛を実
際に測定するときに存在するヘモグロビンの形態である
酸化ヘモグロビンまたはオキシヘモグロビンと同じスペ
クトルを有する誘導体形成されたヘモグロビンを生成す
る。ヘマト螢光分析法に用いるためには、誘導体形成反
応が速やかに起こり、しかも赤血球は変化を受けないま
まになっていなければならない。
際に測定するときに存在するヘモグロビンの形態である
酸化ヘモグロビンまたはオキシヘモグロビンと同じスペ
クトルを有する誘導体形成されたヘモグロビンを生成す
る。ヘマト螢光分析法に用いるためには、誘導体形成反
応が速やかに起こり、しかも赤血球は変化を受けないま
まになっていなければならない。
本発明は、シアン化物をベースとした試薬を用いて、こ
の誘導体形成したヘモグロビンを提供する。シアン化物
をベースとした試薬を用いることによって、ヘモグロビ
ンと本質的に同じスペクトル特性を有するシアン化物−
ヘモグロビン誘導体を生じる。
の誘導体形成したヘモグロビンを提供する。シアン化物
をベースとした試薬を用いることによって、ヘモグロビ
ンと本質的に同じスペクトル特性を有するシアン化物−
ヘモグロビン誘導体を生じる。
［問題点を解決するための手段］
本発明は、（ヘマト螢光分析機の利用を考慮しているス
ペクトル範囲内で）オキシヘモグロビンと本質的に同じ
スペクトル特性を有する誘導体形成したヘモグロビンを
形成するための試薬および試薬の１・ξ用法からなって
いる。好ましい試薬は、シアン化物源例えばシアン化物
−ヘモグロビン配位錯体を形成する活性成分として約、
２モル／゛リットルのシアン化カリウムを含有する。こ
の試薬は、より良好な全般的な反応条件を供するための
安定剤としての約、３モル／リットルの量のβ−Ｄ−フ
ルクトフラノシル−α−Ｄ−グル；２ピラノシド（すな
わちスクロース）も含むものである。
ペクトル範囲内で）オキシヘモグロビンと本質的に同じ
スペクトル特性を有する誘導体形成したヘモグロビンを
形成するための試薬および試薬の１・ξ用法からなって
いる。好ましい試薬は、シアン化物源例えばシアン化物
−ヘモグロビン配位錯体を形成する活性成分として約、
２モル／゛リットルのシアン化カリウムを含有する。こ
の試薬は、より良好な全般的な反応条件を供するための
安定剤としての約、３モル／リットルの量のβ−Ｄ−フ
ルクトフラノシル−α−Ｄ−グル；２ピラノシド（すな
わちスクロース）も含むものである。
一つの臨界的なファクターは、試薬中のシアン化物濃度
であり、系の全体的効率に影響を与えるファクターであ
る。第二の臨界的ファクターは。
であり、系の全体的効率に影響を与えるファクターであ
る。第二の臨界的ファクターは。
ｐＨであり、これはヘモグロビンの速やかで定斌的な転
換を行う反応条件を最適にするものである。
換を行う反応条件を最適にするものである。
上記成分および址を用いると、全量が５リットルで処方
される。シアン化カリウムの濃度範囲は、０５〜、３０
モル／リットルであり、β−Ｄ−フルクトフラノシル−
α−Ｄ−グルコピラノシドの範囲は、２〜、４モル／リ
ットルである。総ての化合物は、応用化学会＜ＡＣ３）
試薬級である。系のｐＨは、約１１±、２として、 シアン化物とヘモグロビンとの反応を実質的に瞬間的ｆ
ｔつ完全に行うようにする。
される。シアン化カリウムの濃度範囲は、０５〜、３０
モル／リットルであり、β−Ｄ−フルクトフラノシル−
α−Ｄ−グルコピラノシドの範囲は、２〜、４モル／リ
ットルである。総ての化合物は、応用化学会＜ＡＣ３）
試薬級である。系のｐＨは、約１１±、２として、 シアン化物とヘモグロビンとの反応を実質的に瞬間的ｆ
ｔつ完全に行うようにする。
製造法は、最初にβ−Ｄ−フルクトフラノシル−α−Ｄ
−グルコピラノシドを加えて溶解するまで撹拌し、次に
シアン化カリウムを加えて溶解するまで撹拌する。
−グルコピラノシドを加えて溶解するまで撹拌し、次に
シアン化カリウムを加えて溶解するまで撹拌する。
シアン化カリウムを用いることによってのみならず他の
シアン化物源によってシアン化物イオンを提供すること
も、本発明の精神および範囲内にある。同様に、β−Ｄ
−フルクトフラノシル−α−Ｄ−グルコピラノシド以外
の安定剤を用いることも本発明の精神および範囲内にあ
る。ｆｉｆ＆に、他の可能な配位物質を用いてヘモグロ
ビンを誘導体形成することも本発明の精神および範囲内
にある。
シアン化物源によってシアン化物イオンを提供すること
も、本発明の精神および範囲内にある。同様に、β−Ｄ
−フルクトフラノシル−α−Ｄ−グルコピラノシド以外
の安定剤を用いることも本発明の精神および範囲内にあ
る。ｆｉｆ＆に、他の可能な配位物質を用いてヘモグロ
ビンを誘導体形成することも本発明の精神および範囲内
にある。
本発明の試薬をｉｌｌいる場合には、この試薬の２．３
滴を螢光分析法に従来使用されてきた全血の典型的且つ
標準的サイズの試料（通常は１．２滴）・に加える。
滴を螢光分析法に従来使用されてきた全血の典型的且つ
標準的サイズの試料（通常は１．２滴）・に加える。
Ｌ記の説明は、本発明の詳細な説明である０本発明の精
神および範囲から離脱することなく様々な変更を行うこ
とが可能であり、本発明は特許請求の範囲の記載によっ
てのみ制限されるべきである。
神および範囲から離脱することなく様々な変更を行うこ
とが可能であり、本発明は特許請求の範囲の記載によっ
てのみ制限されるべきである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １、血液試料をヘマト螢光分析に付すことによつて血液
試料中のプロトポーフィリン亜鉛水準を分析する方法に
おいて、 血液試料に試薬を加えて、酸化されたヘモグロビンと本
質的に同じスペクトル特性を有する改質された血液試料
を供することからなる改良法。 ２、試薬を加える工程がシアン化物を加えることを包含
する、特許請求の範囲第１項記載の方法。 ３、試薬を加える工程が安定剤を加えることを包含する
、特許請求の範囲第１項記載の方法。 ４、試薬が本質的にシアン化物イオン源と安定剤とから
なる、ヘマト螢光分析法に使用する試薬。 ５、シアン化物イオンがｐＨを調整するシアン化カリウ
ムである、特許請求の範囲第４項記載の試薬。 ６、シアン化物の安定剤に対するモル比が約２：３であ
る、特許請求の範囲第４項記載の試薬。 ７、安定剤がβ−Ｄ−フルクトフラノシル−α−Ｄ−グ
ルコピラノシドである、特許請求の範囲第４項記載の試
薬。 ８、変性を行う前は所定のスペクトル特性を示す血液試
料を変性させことによる螢光分析法による分析法であっ
て、 血液試料を誘導体形成させて、非変性血液試料と本質的
に同じスペクトル特性を有するものとすることからなる
、改良法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/921,519 US4725555A (en) | 1986-10-22 | 1986-10-22 | Zinc protoporphyrin test system |
| US921519 | 1992-07-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63111470A true JPS63111470A (ja) | 1988-05-16 |
Family
ID=25445552
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62259440A Pending JPS63111470A (ja) | 1986-10-22 | 1987-10-14 | 血液試料中のプロトポーフイリン亜鉛水準の分析法 |
Country Status (3)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4725555A (ja) |
| EP (1) | EP0268376A3 (ja) |
| JP (1) | JPS63111470A (ja) |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3663175A (en) * | 1970-10-05 | 1972-05-16 | Bio Dynamics Inc | Method of determining hemoglobin in blood |
| US3874852A (en) * | 1974-07-05 | 1975-04-01 | Coulter Diagnostics Inc | Reagent and method for determining leukocytes and hemoglobin in the blood |
| US3973129A (en) * | 1975-01-10 | 1976-08-03 | Bell Telephone Laboratories, Incorporated | Fluorimetric apparatus and method for analysis of body fluid |
| US4055768A (en) * | 1976-09-07 | 1977-10-25 | Bromberg Nathan S | Light measuring apparatus |
| US4178917A (en) * | 1979-01-03 | 1979-12-18 | Shapiro Howard M | Method and system for non-invasive detection of zinc protoporphyrin in erythrocytes |
-
1986
- 1986-10-22 US US06/921,519 patent/US4725555A/en not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-10-14 JP JP62259440A patent/JPS63111470A/ja active Pending
- 1987-10-16 EP EP87309158A patent/EP0268376A3/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0268376A3 (en) | 1990-07-11 |
| US4725555A (en) | 1988-02-16 |
| EP0268376A2 (en) | 1988-05-25 |
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