JPS63122622A - 補体第三成分増強剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は補体第三成分増強剤に関する。補体系とは、血
清中に存在する約２０種類の糖蛋白である補体成分とそ
の調節蛋白および、それに対応する数種類の脱糖蛋白（
補体レセプター）からなる。このうちで補体第三成分（
以下Ｃ３と略記する）は血清中に飛び扱けて大圏に存在
する成分で、Ｃ３の活性化が補体系の主反応である。

即ち、Ｃ３は生体内に侵入した異物や抗原の表面上で活
性化され、以後引続いて起こる反応過程で各種の細胞上
の０３レセプター（ＣＲ１゜ＣＲ２，ＣＲ３，ＣＲ４）
と反応し、生体防衛の基本である異物や抗原の認識（捕
捉）、貧食（清掃）、保持（記憶）作用を発揮する。

本発明はこのＣ３ｆｆｉを増強する薬剤に関するもので
おる。

〈従来の技術〉 従来、Ｃ３の増強効果を持つものとしては、レンチナン
等の多糖体が知られている（Ｎｕｔｒｉ−ｔｉｏｎ　Ｒ
ｅ５ｅａｒｃｈ　　３．　　（１９８３）　、　　７０
５−７１８　）。

しかしポルフィリン系化合物に０３の増強効果を持つも
のがあることは知られていない。

〈発明が解決しようとする問題点〉 悪性腫瘍、老化１重度の低栄養、病原菌感染は、生体の
防衛機能を低下させ、侵入異物の排除や免疫複合体の処
理を障害して疾病の治療を困難にする。従って、これら
の疾病状態における生体防衛機能の増強をうながすこと
は臨床医学上重要な課題である。

これらの疾病状態における生体防衛能の低下状態ににお
いて、液性、細胞性因子はともに低下するが、細胞性免
疫系が低下しても、補体系、特にＣ３は最後まで維持さ
れ、また、疾病状態の改善に伴い、補体系、特にＣ３に
いち早く回復することが、実験的にまた臨床的に証明さ
れている。特に回復期のＣ３の応答は著しく早くしかも
強い反応を示すことから、それらの疾病状態における生
体防衛能の低下状態では、Ｃ３の増強を促すことが生体
の抵抗性を増強する引金になると考えられて来ている（
医学のあゆみ；第１３６巻・第１２号（昭和６１年）、
９０３頁）。

かくして、Ｃ３の増強を促す有用な薬剤を提供すること
は、臨床医学上非常に望ましいことであり、この問題を
解決したのが本発明でおる。

〈問題点を解決するための手段〉 本発明者等は、補体系活性化機構の研究を進めていく中
に、下記一般式（Ｉ） ！Ｎ−Ａ 〔式中、ＥＮはエチレンジアミン残基（−ＮＨ−ＣＨ２
−ＣＨ２−ＮＨ２）を表わし、ＭはＺｎ、Ｑｕから選ば
れる金属イオンを表わし、Ａは医薬品として可能な酸を
表わす。〕で示されている化合物が極めて低濃度で補体
、特に０３Ｍを増強することを発見した。そして更にこ
れら化合物はＣ３ｔｉを増強する結果として、マクロフ
ァージの異物処理能力を増強活性化し、病原菌感染に対
する防衛効果を発現することを見出した。

本発明はこれら発見に基づいて完成されたもので、本発
明は上記一般式（Ｉ）で示される化合物を有効成分とす
るＣ３増強剤である。なあ、（Ｉ）中、Ａの医薬品とし
て可能な酸としては、ＨＣＩ、Ｈ２ＳＯ４，ＨＮＯ３等
！１１酸、　酢酸、クエン酸、酒石酸、プロピオン酸等
の有機酸が挙げられる。

上記一般式（１）で示される化合物は、特開昭５８−９
８１号公報に記載されている水溶性ポリフィリン誘導体
に、水溶液中で銅又は亜鉛の塩化物を作用させることに
より（ｑられる。

例えば下記式（ＩＩ） 甲Ｎ−Ａ Ｎ−Ａ 〔式中、Ａは医薬品として可能な酸を表わす。〕で示さ
れるメチルピロフェオフォルバイトエチレンジアミン付
加体１．０（ＩＩを５Ｑｍ、ｌ！の蒸溜水に溶解し、塩
化亜鉛の１０％水溶液５ｍＪ２を加えた後、遮光下、室
温で３時間撹拌を行なう。反応終了を高速液体クロマト
グラフィー（１−Ｉ　Ｐ　Ｌ　Ｃ）分析で確認後、反応
液を多孔性樹脂ｒＨＰ−５０」　（三菱化成工業■製商
品名）　１００　＋ｎｌ）のカラムに通液し、蒸溜水で
過剰の塩化亜鉛を洗浄し、メタノールを溶離溶媒として
、吸着した一般式（Ｉ）においてＭがＺｎ、ＡがＨＣｌ
１−９る化合物（以下、ＰＰ−Ｚｎｎ塩基塩いう）を溶
出させる。溶出液からメタノールを減圧蒸留して暗緑色
の粉末（ｐｐ−ｚｎｉａ塩）　　１．０５０（収率１０
５％）を得た。

又、上記メチルピロフェオフォルバイトエチレンジアミ
ン付加体３．５ｇを３５０ｍΩの蒸溜水に溶解し、塩化
第二銅の１０％水溶液１０ｍＮを加えた後、遮光下、空
温で１．５時間撹拌を行なう。

反応終了をＨＰＬＣ分析で確認後、反応液を多孔性樹脂
ｒＨＰ−５０」　２００ｍＮのカラムに通液し、蒸溜水
で過剰の塩化第二銅を洗浄し、メタノールを溶離溶媒と
して、吸着した一般式ＣＩ）においてＭがＣｕ、ＡがＨ
ＣＩでおる化合物（以下、ｐｐ−ｃｕ塩酸塩という）を
溶出させる。溶出液からメタノールを減圧蒸留して暗緑
色の粉末（ＰＰ−Ｃｕ塩酸塩＞　　３．６（Ｊ　　（収
率１０３％）を得た。

ここで、一般式（Ｉ）で示される化合物がＣ３の増強効
果、その結果としてマクロファージの活性効果、病原菌
感染防衛効果のあることを実験例を挙げて説明する。

実験例１　　Ｃ３の増強効果 ＳＤ系ラット（♂）を４週令より標準飼料で６週間飼育
した後、ＰＰ−Ｚｎｎ塩基塩びＰＰ−Ｃｕ＠酸塩を以下
の方法で腹腔内に１回投与を行なった。

第１表 投与後、０，１，２，３，５，７．１００日目継続的に
尾静脈より採血し、血清中のＣ３を５ＲＩＤ法（Ｉｍｍ
ｕｎｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　：　２．　２３５゜（１９
６５）　）により測定を行なった。

結果は第１図及び第２図に示す如くである。

第１図はｐｐ−ｃｕ塩酸塩投与ラット血清中のＣ３の経
時変化を示す図であり、第１図から、０、６ｍＭに９．
０．２ｍｇ／　Ｋ（Ｊ投与群共に著明な増強が見られる
。そして投与後１日目に対照に比し、危険率５％以下で
有意（以下、ｐ＜０．０５と表わす）、危険率１％以下
で有意（以下、Ｐく０、０１と表わす）の増強を示し、
特に０．６ｍ（］／ＫＱ群では１日、２日目（Ｐ＜　０
．０５　＞　、３日。

５日目（ｐ＜　０．０１　）の有意の増強がみられた。

また０、　６ｍ！１１／　Ｋｇ投与では１日目より５日
目まで増強を維持することが可能であった。

第２図はＰＰ−Ｚｎ塩酸塩投与ラット血清中のＣ３の経
時変化を示す図であり、投与後２日目には０．６ｍＭＫ
ｇ（Ｐ＜　０．０１　＞、０．２ｍＣｌ／　Ｋｇ（ｐ＜
　０．０５　）投与群は有意なＣ３の上昇を示し、０．
６ｍＭにｇは３日目（ｐ＜　０．０１　）　、７日目（
Ｐ＜　０．０１　＞まで増強が維持された。

尚、図中、本は危険率５％以下、参＊は危険率１％以下
で対照に対し有意差を持つことを意味している。

実験例２　低栄養状態におけるＣ３増強効果ＳＤ系ラッ
ト（♂）を４退会より低蛋白飼料で６週間飼育し、栄養
状態を確認しながら低栄養ラットを作り、ｐｐ−ｃｕ塩
酸塩、ＰＰ−Ｚｎ塩酸塩を以下の方法で腹腔内に１回投
与を行なった。

第２表 投与後、２，４．６日目に採血し、実験例１に記載した
と同法により血清中の０３を測定した。

結果は第３図に示す如くである。図中、本は危険率５％
以下、＊＊は危険率１％以下で対照に対し有意差を持つ
ことを意味している。

そしてｐｐ−ｃｕ塩酸塩は２日目に有意（Ｐ＜　０．０
５　）の増強を認めたが、その後は低下し、ＰＰ−Ｚｎ
塩酸塩では４日日ニＰ＜　０．０５　、６日目にｐ＜　
０．０１の増強を示し、６日目まで増強を維持した。

Ｕ皿ユ　低栄養状態におけるマクロファージの活性効果 本実験は、ＰＰ−Ｃｕ塩酸塩、ＰＰ−Ｚｎ塩酸塩による
Ｃ３増強と、マクロファージの異物処理能の関連を調べ
たもので、おる。

実験例２に記載した低栄養ラット５匹にＰＰ−ＣＬＪ塩
酸塩、ＰＰ−Ｚｎ塩酸塩の０．６ｍ（１／にｇを２日毎
、１０回腹腔内投与を行ない、その後腹腔よりマクロフ
ァージを採取し、ラテックスビーズ（マクロファージ貧
食用ポリスチレン製微粒子）をＣＯ２インキュベーショ
ン下で貧食させた。そして観察には腹腔より採取したマ
クロファージ数、血清中の０３、マクロファージ当りの
ラテックスビーズの貧食数を用いた（Ｉｍｍｕｎｏｃｏ
ｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ　；２４．　　（４）、　　３６
３−３７４　　（１９８３）　）。なお、対照には、上
記化合物を投与しない低栄養ラット５匹を用いた。

その結果を第３表に示す。

第３表に示す結果から、ＰＰ−Ｃｕ塩酸塩においては、
最終時の０３値は１１９％に増強されており、投与期間
中４回目以降から増強は継続してみられた。マクロファ
ージ数は３３±４．９から１５８±１３．４と著しく増
加（Ｐ＜　０．００１＞　シている。マクロファージ当
りの食ビーズ数も２．４±０．３１から５．８±０．２
５　　（Ｐ＜　０．００１）と著しく増加し、活性化さ
れていることが観察された。

また、ＰＰ−Ｚｎ塩酸塩でも、Ｃ３は１３６％に増強さ
れ、マクロファージ数は８７±５．８（ｐ＜　０．００
１）　ト、ＰＰ−ＣＵ塩酸塩程ではないが有意に上昇し
た。１マクロファージ当りの食ビーズ数も６．６±０．
２８　　（Ｐ＜　０．００１＞を示し、マクロファージ
の食菌能を増強していることは明らかである。

これにより、上記化合物がＣ３の増強を刺激し、ひいて
はマクロファージの活性化をもたらすことを示している
ことがわかる。

１、叢４　　ＰＰ−ＺｎのＣ３の増強と感染防御効果 実験例２に記載した低栄養ラット７匹に０１２ｍ１ｌＪ
／ＫｇのＰＰ−Ｚｎ塩酸塩を２日毎に１Ｑ回腹腔内投与
を行ない、Ｃ３の増強維持を確認後、スタフィロコッカ
ス・アウレウス（５ｔａｌ）ｈｙｌｏ　−ＣＯＣＣｔＪ
Ｓ　ａｕｒｅｔｌｓ）　　２２６株を腹腔内に投与（８
Ｘ１０８ｃｅｌｌ／ｒａｔ　）　Ｌ／テ感染さセ、１週
間の死亡状況を観察した。なお、対照には低栄養ラット
５匹にＰＰ−Ｚｎ塩酸塩未投与のもの用いた。

感染ラットの１週間の死亡状況は第４図に示す通りであ
り、投与群では８０％生存率を示したが、無投与群では
２０％の生存率に過ぎなかった。

上記の実験例で示されるように、−ＱＱ式（Ｉ）で示さ
れる化合物は生体防衛能の低下した低栄養状態において
、補体系、特にＣ３ｆｆｉの増強、マクロファージの増
加、活性化を促し、微生物感染に対し強い抵抗性を示し
た。これらの事実から、Ｃ３の増強が他の免疫因子の引
金になることは明らかで、Ｃ３の増強を生体防衛能の一
つの指標とすることができる。よって、一般式ＣＩ）で
示される化合物は、補体第三成分増強剤として有用でお
り、ガン末期、感染症等の消耗性疾患、すい炎、腎炎等
の慢性炎症性疾患の治療に効果が期待できる。

つぎに、一般式（Ｉ）で示される化合物の急性毒性につ
いてラットで試験した結果をＬＤ５゜（ｍＭＫｇ）で示
すと、第４表の通りである。

これより、この化合物の安全性は極めて高いといえる。

次に、一般式〔工〕で示される化合物は、製剤に用いら
れる適当な溶剤、補助剤、増量剤。

担体などを用い、製剤製造の常法にしたがって、液剤、
注射剤、顆粒剤２錠剤、カプセル剤などにすることがで
き、これら製剤は形態に応じた方法で投与されることが
できる。例えば錠剤。

液剤、顆粒剤及びカプセル剤の場合は経口投与が採用で
き、注射剤の場合は筋肉、皮内、皮下もしくは腹腔内投
与ができる。

そして一般式（Ｉ）で示される化合物の有効投与旦は使
用目的、症状等により適宜選択されるが、通常、有効成
分伍は、１日当り０．２〜’ｌＯｍ（ＩＩ／Ｋｆｊ程度
の範囲でおるのが適当と認められる。

〈発明の効果〉 本発明によれば、低濃度でＣ３の増強を促進し、マクロ
ファージの異物処理能力を増強活性化し、病原菌感染に
対する防衛効果をもたらす、Ｃ３増強剤を提供すること
ができる。

〈実施例〉 次に本発明の一般式ＣＩ）で示される化合物を実際に使
用する際の製剤形についての実施例を示す。

害Ｊ［倒」−注射剤 ｐｐ−ｚｎ＠酸塩ｉ、ｏｇと塩化ナトリウム９．０にｌ
を注射用蒸溜水に溶解し、全員を１ぶとする。

この液をガラスロートにて吸引濾過後２ｍＮの褐色アン
プルに充填、溶閉して１００℃、３０分間の加熱滅菌を
行なって注射剤を得た。

火思■ユ　カプセル剤 ＰＰ−ＣＬＪ塩酸塩１０ｇに乳糖１８５Ｑ、精１９ルク
５ｇを加えて混合し、これを硬質ゼラチンカプセルに２
００ｍｇずつ充填してカプセル剤を１詳だ。

Ｘ血■ユ　錠剤 ＰＰ−Ｚｎ酢酸塩１０！Ｉｌニ乳糖１４９ｇ、結５１ｔ
ルロース３２ｇ１リン酸カリウム７（Ｉｔ、カカオバタ
ー２ｇを加えてよく混合し、これを打錠機で打錠して直
径８ｍｍ、重！　２００ｍｇの錠剤を得た。

Ｘ厘■Ａ　顆粒剤 ｐｐ−ｃｕ酢酸塩１０ｇに乳糖１７０ｇ、ポリヒニルピ
ロリドン１２ｇ、水素添加油８ｇを加えてよく混合し、
押出し造粒機で造粒する。これを１４メツシユの篩で整
粒し、顆粒剤を得た。

【図面の簡単な説明】

第１図はＰＰ−ＣＬＪ塩酸塩投与ラット血清中の０３１
度の経時変化を示す図であり、第２図はＰＰ−Ｚｎ塩酸
塩投与ラット血清中のＣ３Ｉ度の経時変化を示す図であ
り、第３図は低栄養状態におけるｐｐ−ｃｕ塩酸塩、Ｐ
Ｐ−Ｚｎ塩酸塩投与ラット血清中のＣ３′ＩＭ度の経時
変化を示す図であり、第４図はスタフィロコッカス・ア
ウレウス感染後の１週間のＰＰ−Ｚｎ＠酸塩投与の低栄
養ラットの生存状況を示す図でおる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記一般式〔 I 〕 ▲数式、化学式、表等があります▼・・・・・・〔 I
   〕 〔式中、ＥＮはエチレンジアミン残基 （−ＮＨ−ＣＨ＿２−ＣＨ＿２−ＮＨ＿２）を表わし、
   ＭはＺｎ、Ｃｕから選ばれる金属イ オンを表わし、Ａは医薬品として可能な酸 を表わす。〕 で示される化合物を有効成分とする補体第三成分増強剤
   。