JPS63148993A

JPS63148993A - デンプン糖の製造法

Info

Publication number: JPS63148993A
Application number: JP61295746A
Authority: JP
Inventors: Hirotake Fukino; 吹野　弘武; Chikashi Izumi; 泉　近; Takeshi Makino; 牧野　毅; Shigechika Narita; 成田　茂義; Kazuo Munechika; 宗近　一雄; Junji Nashimoto; 梨本　順二
Original assignee: Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind
Current assignee: Japanese Res & Dev Assoc Bio Reactor Syst Food Ind
Priority date: 1986-12-13
Filing date: 1986-12-13
Publication date: 1988-06-21
Also published as: JPH0528115B2

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）この発明は、例えば固型分：ｌＯｗ／ｄｌ！ｆ、の高濃
度のデンプン液化液を連続的に効率良く加水分解し、高
収率でグルコースなどのデンプン糖を製造する方法に関
するものである。

（従来の技術）現在、デンプン糖の製造工程は大路次の工程に分けるこ
とかてきる。

（１）デンプン乳の製造工程（２）α−アミラーゼを使用したデンプンの液化工程（３）グルコアミラーゼ、β−アミラーゼ、マルトオリ
ゴ糖生成アミラーゼ、イソアミラーゼ、プルラナーゼ等
を使用したデンプン液化液の糖化工程（４）糖液の精製、濃縮工程（５）タルコースイソメラーゼを使用した糖液の異性化
工程上記５工程のうち（３）の糖化工程を除いて他の工程は
連続法により生産されており、糖化工程のみがバッチ法
で行なわれている。しかもこのバッチ法でクルコースを
製造する場合は糖液のＤＥが９３〜９８、クルコースの
生成量か９１〜９６ｚになるまで糖化な行なうために巨
大なタンク内で４８〜７２時間という長時間を必要とす
る。

一方デンプン糖の製造工程中、糖化工程を連続法にする
ため、従来固定化グルコアミラーゼの製造法及び固定化
グルコアミラーゼによる種々の糖化法か提案されており
、例えば特開昭５：ｌ−８６０８６号、特許１１６２７
６４号、特開昭５５−１４４８９０号、特許１１２０５
３１号、特許１１２０５３２号、特許１１１７０４１号
、特開昭５９−１３０１９３号などが開示されている。

（発明が解決しようとする問題点）しかし、これ等は処理液の濃度が低い上に、固定化グル
コアミラーゼのライフが短く、また生成するグルコース
の純度が低い等の理由によって殆ど実用化に至っていな
い。

僅かに、骨炭にアスペルギルス・ニガー起源のグルコア
ミラーゼをクルタールアルデヒドて架橋固定した固定化
グルコアミラーゼ（ティト　アンド　ライル社開発製品
）か重版されているが、これに高濃度デンプン液化液を
通液して糖化を行なってもグルコースの最高生成量はバ
ッチ糖化法のグルコース生成量（約９１Ｘ以上）には達
しない。

例えば、上記固定化グルコアミラーゼに、固型分３０ｗ
／ｗ％の高濃度デンプン液化液（ＤＥ　１１．８）を空
塔速度（ＳＶ）０．５ｈｒ−’で通液して糖化な行なう
とグルコース生成量は最高８７〜８８％であり、イソマ
ルトースの生成量は約５罵である。

そこで、本願発明者等が固定化グルコアミラーゼへのデ
ンプン液化液の通液条件とグルコース並びにイソマルト
ースの生成量の関係について実験を行なった。その結果
を次に述べる。

固定化グルコアミラーゼに３（Ｈ濃度のクルコース溶液
及び３０％　６度のマルトース溶液を通液すると２糖類
以丑のオリゴ糖が生成する。特に、クルコース２分子か
α−１，６クルコシト結合したイソマルトースの蓄積か
大きい。例えば、３０＄濃度のクルコース溶液を基質と
して低流速（ＳＶ　Ｏ，２４ｈｒ−’）て通液すると約
ｌＯｚのイソマルトースが生成した。

これに対して３０＄　５度のマルトース溶液を基質とし
て固定化グルコアミラーゼに通液した場合、加水分解さ
れて生成するグルコースの量はＳｖＯ，２４ｈｒ−’　
で８９％、ＳＶ　Ｏ，５ｈｒ−’Ｔ９４．：１％、ＳＶ
　１．０ｈｒ−’以上の流速で通液すると９５％　１！
丘のクルコース生成量てあった。一方、イソマルトース
の蓄積はＳｖＯ，２４ｈｒ−’て８．７鬼、ＳＶ　０．
５ｈｒ−’て４．ＯＸ、ＳＶｌ、７４ｈｒ−’て２，７
ｚあった。デンプン液化液を基質として固定化グルコア
ミラーゼに通液してもグルコースの生成量は最高８７〜
８８％であったが、このようにマルトースまで加水分解
された基質を使用してＳＶ　１．Ｏｈｒ”以上の流速で
通液すると、９５％以上のクルコース生成量が得られ、
イソマルトースの蓄積も少ない。

なお、上記固定化グルコアミラーゼはグルコース、マル
トース何れを基質とする場合においてもイソマルトース
の生成量に変化がないことから転移活性によるイソマル
トースの生成は非常に少ないと推定される。

以上の実験結果から本願発明者等は、Ｌ述の２糖類以上
のオリゴ糖の生成はグルコアミラーゼの適合成作用によ
るものであり、しかもこのグルコアミラーゼの適合成作
用がグルコースの生成量を抑制していることを見出した
。

即ち、通常のデンプン液化液ては、グルコース重合度に
バラツキがあり、そのため重合度の大きいものが加水分
解されるＳｖに合せて通液が行なわれているか、この結
果重合度の小さいものはこの通液時間中にグルコースと
なり、更にこのタルコースは適合成を起し、イソマルト
ースを生成する結果となる。

そこで、以上の実験結果よりグルコアミラーゼの適合成
作用を抑え、グルコースの生成量を９２を以上に高める
ためには、通常のデンプン液化液を何らかの処理て低分
子化すると同時に、グルコースの重合度をできるだけ一
定の重合度（６２〜Ｇ８程度）に揃えた後、固定化グル
コアミラーゼに５ｖＯ１５〜３．０ｈｒ−、’程度で通
液する必要があることを見出したものである。

（問題点を解決するための手段）この発明は、以上の知見を基に完成したものてあり、そ
の要旨はマルトオリゴ糖生成アミラーゼをデンプン液化
液に作用させてデンプン液イし液中の糖組成をグルコー
ス重合度２〜８の範囲に揃えた後、該デンプン液化液を
固定化グルコアミラーゼに空塔速度（ｓｖ）ｏ、ｓ〜３
．０ｈｒ−’の流速で通液し、糖化してデンプン糖を製
造するものである。

この発明に使用されるマルトオリゴ糖生成アミラーゼと
してはマルトトリオース生成アミラーゼ、マルトテトラ
オース生成アミラーゼ、マルトペンタオース生成アミラ
ーゼ、マルトヘキサオース生成アミラーゼ等を使用する
ことがてきる。

このうちバチルス・スフチリスフ０株（微工研条寄６８
４号）の生産するマルトトリオース生成アミラーゼ（北
海道勧業社製）及びシュードモナス・ストッツェリの生
産するマルトテトラオース生成アミラーゼか効率良くデ
ンプン液化液を加水分解し、各々対応するオリゴ糖の収
率が高く、同時に未分解の高重合度オリゴ糖（デキスト
リン）か非常に少ないことか判明した。

例えば、　ＤＥ５〜２０のコーンスターチ液化液（Ｂｘ
３０）にｐＨ５〜７．５．４５〜６５℃て上述のマルト
トリオース生成アミラーゼの０．５〜２．Ｏｕ／ｇ基質
を添加して２０時間糖化したところ、得られた糖液の糖
組成は次の通りであった。

Ｇ、：３．５、Ｇ、：２８．０１Ｇ３：４８．４、ｃ、
≦ｚｏ、ｔ　ｍ同様にして上述のマルトテトラオース生
成アミラーゼで糖化したところ、得られた糖液の糖組成
は次の通りであった。

Ｇ、：２．９、Ｇ２：１０．２、Ｇ＝：１４．３、Ｇ、
：４６．０．Ｇ、：１５．３、Ｇ６≦１１．３　（＄）デンプン液化液に、マルトオリゴ糖生成アミラーゼを作
用させて糖液中のクルコース重合度を揃える方法として
は（ａ）マルトオリゴ糖生成アミラーゼを一定条件てデ
ンプン液化液に作用させる方法（バッチ法）（ｂ）デン
プン液化液にマルトオリゴ糖生成アミラーゼを加え、加
水分解を行なわせなから該デンプン液化液を限外濾過膜
（ＵＦ膜）処理を行ない、生成した低分子オリゴ糖を限
外濾過膜から系外に取り出す方法（セミパッチ法又は半
連続法）（Ｃ）固定化したマルトオリゴ糖生成アミラー
ゼを使用する、所謂バイオリアクターによる方法（ｄ）
上記（Ｃ）と（ｂ）を併用した方法等がある。

このうち（ａ）の方法はマルトオリゴ糖生成アミラーゼ
を多く使用し、しかも加水分解に長時間を要するところ
から従来の方法に比べて工業上のメリットはあまりない
。

（ｂ）の方法はマルトオリゴ糖生成アミラーゼをリサイ
クルして使用できること、及び連続してＵＦ膜処理がで
きること等工業上のメリットは大きいか、低分子オリゴ
糖と高分子オリゴ糖を効率良く分画できる膜（例えば、
Ｇ？とＧ６を分画）か製造し難いなどの問題かある。

（Ｃ）の方法はマルトオリゴ糖生成アミラーゼを固定化
する技術が確立しており、現在のところ連続法の最も有
力な手段である。なお、本願発明者等の研究によればこ
の方法でデンプン液化液を処理するには、デンプン液化
液の６６以下、のオリゴ糖の含有率を８０％以上にする
ことが好ましく、このための酵素及び処理条件の選択が
必要である。

（ｄ）の方法は前述のように使用する膜の問題が解決さ
れれば、工業上最良の方法である。

なお、デンプン液化液に、マルトオリゴ糖生成アミラー
ゼを作用させる温度条件、ｐＨ条件等については使用す
るマルトオリゴ糖生成アミラーゼの種類、処理時間等に
よって定められるか、一般にはＰＨ４，０〜７．５、温
度４０〜６５℃等の条件て行なう。

この発明に使用するグルコアミラーゼとしては、リゾプ
ス属、アスペルギルス属、ムコール属、ピリカラリア属
等のカビ起源のもの、エンドマイセス属、トリコデルマ
属、す・ンカロミセス属等の酵母起源のもの及び各種細
菌起源のものが知られているが、このうちリゾプス・デ
レマー（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ　ｄｅｌｅｍａｒ）及びアス
ペルギルス・ニガー　（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉ
ｇｅｒ）起源のグルコアミラーゼか好適であった。特に
、固定化した場合にリゾプス・デレマー起源のグルコア
ミラーゼ（商品名：スミチーム　新日本化学社製）は、
作用最適温度が５０℃程度とニガー起源のグルコアミラ
ーゼ（商品名：　ＡＭＧノボ社製）の５８℃より低いが
、適合成作用が弱く、イソマルトースの蓄積が１ｚ以上
少ないことか明らかとなつた。しかし１作用温度が低い
ために、加水分解速度が遅くなり、したがフて空塔速度
を小さくする必要がある。

一方、グルコアミラーゼ、マルトオリゴ糖生成アミラー
ゼを固定化する担体は、食品製造に使用して安全である
こと、安価であること（再使用できること）、吸着固定
てきること等の観点から選択される。

この結果、弱酸性多孔質樹脂、弱酸性カチオン樹脂、多
孔質キトサン、天然キチン、骨炭、カチオン化デンプン
等が使用可能であるが、このうち特に効果があるのは骨
炭、キチン、又は天然高分子キチンを脱アセチル化して
製造した多孔質キトサンであることが判明した。

なお、骨炭の場合、非常に効率良くグルコアミラーゼ及
びマルトオリゴ糖生成アミラーゼを吸着するが、高濃度
基質の通液によって徐々に脱離するために吸着後、ゲル
タールアルデヒドて架橋固定化する必要がある。また、
固定化酵素の活性が非常に高いため、酵素の寿命は長い
が、反面イソマルトースの蓄積が多く、更に担体か再刊
用てきない等の欠点がある。

多孔質キトサンのうち、特開昭６１−４０３３７号、特
開昭６１−７６５０４号に開示されたもの（商品名：キ
トパール　富士紡績社製）かｐＨ安定性、耐薬品性、耐
熱性に優れている。

「キトパール」にはキトサンをジカルボン酸又はジアル
デヒドで架橋した後、スペーサーとしてジイソシアネー
ト化した脂肪族の官能基を導入した多孔質ビーズ（＃：
ｌ０００タイプ）と芳香族の官能基を導入した多孔質ビ
ーズ（＄　３５００タイプ）があり、グルコアミラーゼ
、マルトオリゴ糖生成アミラーゼは何れのタイプのもの
にも良く吸着される。

また、この場合「キトパール」としては粒径０．１〜３
．０＋＊＋ｓ、孔径３．ＯＪＬｍ以下、比表面績１５〜
２：ｌＯｒｓ２／ｇであるか、この値に限定されるもの
でない。　グルコアミラーゼ及びマルトオリゴ糖生成ア
ミラーゼを「キトパール」に固定化する方法は従来法に
従って緩衝液中で両者を接触させるたけて簡単に吸着固
定化させることができる。

その−例を示すと、ｐＨ４，０〜８．０の各種緩衝液（
０，００１〜０．２モル濃度）で十分に平衡化した「キ
トパールＪｉｇに対して５０〜５０００単位のアミラー
ゼを１〜２０１の前記緩衝液に溶解して添加し、十分混
合して室温で０．５〜２４時間静置するか、０．５〜３
時間攪拌処理した後、濾過し、固型分より酵素の脱離が
なくなるまで緩衝液で洗浄する。この結果、得られた固
定化酵素は使用した酵素蛋白の９０％以上か吸着され、
固定化酵素の活性は固定化担体湿重量１ｇ当す４０〜２
０００単位であった。　一方、固定化グルコアミラーゼ
には前述のようにマルトオリゴ糖生成アミラーゼて処理
したデンプン液化液をＳＶ　Ｏ，５ｈｒ−’　〜３．０
ｈｒ−’の流速で通液して糖化な行なう。

この場合、グルコースの重合度が８以上のものテ４：ｋ
ｓＶ　０．５ｈｒ−’以下にすル必要かあルカ、ＳＶ　
Ｏ，５ｈｒ−’以下では逆合成によりイソマルトースの
生成量が増加する。また、ＳＶ　３．Ｏｈｒ”’以上で
は未分解のオリゴ糖が残存し、グルコースの生成量が９
０ｚ以下となる。

また、固定化グルコアミラーゼにデンプン液化液を通液
する場合の温度条件はグルコアミラーゼの最適温度付近
で行なうことが好ましく、アスペルギルス・ニガー起源
のグルコアミラーゼを使用する場合には５５〜６０’Ｃ
、リゾプス・デレマー起源のグルコアミラーゼを使用す
る場合には４０〜５２℃程度で行なう。更に、ｐＨ条件
はグルコアミラーゼの最適ｐＨ付近で行なうことが好ま
しく、例えばＰＨ４，０〜７．０程度で行なう。

（発明の効果）以上要するに、この発明によればマルトオリゴ糖生成ア
ミラーゼをデンプン液化液に作用させてデンプン液化液
の糖組成のグルコース重合度をできるたけ一定に揃えた
後、該デンプン液化液を固定化グルコアミラーゼに空塔
速度（ｓｖ）　ｏ、ｓ〜３．０ｈｒ−’の流速て通液し
、糖化することによって例えば９２％以上の生成量でグ
ルコースを製造することかできる。

したがって、グルコアミラーゼ等の酵素を使用する糖化
工程をバッチ法によって行なってきた従来法に比べてこ
の発明の方法に従えば、設備投資の軽減、エネルギー費
の低減、ランニングコストの低減等が可能となり、更に
デンプン糖の製造を連続的に行なうことかできることに
よりデンプン糖製造工程中における雑菌等の繁殖を防ぐ
ことかできる。

（実施例）以下、この発明の実施例を示す。

デンプン液化液の調整（１）コーンスターチの液化液の調整コーンスターチ１１．４にｇ（絶乾固型分１０．０Ｋｇ
）を水２０立に懸濁し、塩化カルシウム８．０ｇ（０，
０８ｚ対コーンスターチ）を添加後、ｌＮ−ＮａＯＨて
ｐＨ７，０に調整し、液化酵素（商品名：ターマミル６
０Ｌ、バチルス・リケニホルミス起源、ノボ社製）を。

８．０ｍｌ　　（０，０８ｗ／胃２対コーンスターチ）
を加え、小型連続糊化装置（ジェットクツカー）て１ｆ
Ｌ／＋ｉｎの流速で１０５℃に瞬間的に加熱後、１０５
°Ｃに１５分間滞留できる糊化リテンション管を通し、
常圧下に放出する。その後９５〜９８°Ｃで１２０分間
滞留する液化リテンション管を通し、連続的に糊化、液
化を完了する。更に、Ｉ　Ｎ−ＨＣｌでｐＨ２，５〜３
．０に調整し、９０°Ｃで１０分間保持し、α−アミラ
ーゼを失活させ、　ｌＮ−ＮａＯＨでｐＨ４，５にした
後、６０℃以上で濾過し凝集物を除去し、澄明な液化液
を得た。

得られた液化液のＤＥは１１．８てあった。

（２）馬鈴薯デンプンの液化液の調整馬鈴薯デンプンの酵素液化デキストリンは、商品名ｒＮ
ｓＤＪ　　（日本資糧工業社製）、商品名「アミコール
」　（日澱化学社製）か市販されているが、この実施例
てはＮ　Ｓ　Ｄ　（ＤＥ　１３．２）を所定の濃度に溶
解して使用した。

実施例１先に得たＤＥ１１．８のコーンスターチ液化液の濃度を
Ｂｘ　３０に調整し、ｐｉ（７，０、温度５５℃とした
後、バチルス・ズブチルスＴＬＩ株（微工研条寄６８４
号）より得たマルトトリオース生成アミラーゼ（北海道
糖果社製）を基質固型分１ｇ当り４０ｕ添加し、２０時
間、５５℃に保った。得られた糖化液の糖組成を高速液
体クロマトクラフィーで分析した結果、単糖類（Ｇ、−
グルコース）４％、２ａ類（Ｇ２−マルトース、イソマ
ルトース）２１ｚ、　３糖類（Ｇ３−マルトトリオース
）４８ｚ、４糖類以上のオリゴ糖（Ｇ４≦）２７ｚであ
った。

この糖化液をｐＨ４，５にｉｉ！整後、ティト　アント
ライル社製の固定化グルコアミラーゼを充填しタカラム
（（り　１５ｓｍＸ　３００ｍ＋＊）ニ５５℃〜５８℃
テＳｖ１．６ｈｒ−’で通液したところグルコースの生
＃を量は９３％であり、その他の糖組成は表１の通って
あった。

対照例１ＤＥ　１１．８のコーンスターチ液化液を濃度Ｂｘ　３
０、ｐＨ４，５に調整した後、ティト　アンド　ライル
社製の固定化グルコアミラーゼを充填したカラム（Φ１
５ｍｍＸ　３００ｍ５）に５５℃〜５８℃でｓｖを変化
させて通液したところＳＶ　Ｏ，５ｈｒ−’の時、グル
コース化ｒ＆ｔか最高の８８．５％で、その他の糖組成
が表１の通ってあった。

表１　糖組成（％）ｃ、　　　Ｇ２”　　Ｇ２”　　Ｇ３Ｇ、≦実施例１　
９３．０　２．３　　２．１　　１．４　１．２対照例
１　８８．５　３．８　　４．９　　０．８　１．９な
お、表１中、に２Ｉ１１　＝マルトースＧ２＋１２　＝
イソマルトース実施例２馬鈴薯デンプンの酵素液化デキストリン（商品名：　Ｎ
ＳＤ、ＤＥ　１３．３、日本資糧工業社製）を水に溶解
して用いた他は、実施例１と同様の操作により糖化を行
なったところグルコース生成量は９３．２ｔであった。

対照例２対照例１の基質をＮＳＤにした他は、対照例１と同様の
操作によって糖化したところグルコースの生成量は、８
８．０Ｘてあった。

実施例３キトサンビーズ（商品名コキトパール３０１０　　富士
紡績社製）５０ｇ（ｗｅｔ　７０ｍ１）にグルコアミラ
ーゼ（商品名：　Ａ　Ｍ　Ｇ　（３００ＡＧＬＩ／信ｌ
）アスペルギルス・ニガー起源、ノボ社製）　５０ｇ（
酵素蛋白として５．４ｇ含有）を加え、室温で２時間攪
拌処理後、吸引濾過し、ｌ００１の水でビーズを洗浄、
洗液に酵素蛋白の溶出かなくなるまて洗浄、濾過を繰返
して行なった。

得られたキトバール＠　３０１０吸着固定化クルコアミ
ラーゼは、１．９１ｇの酵素蛋白がキトパールに吸着さ
れた　（３８，１１１１ｇ／ｇ−キトバール）　。

この固定化グルコアミラーゼをΦ１５ｉｍｘ　３００＋
ｅｍのカラムに充填し、基質として実施例１．２と同様
の操作により得たマルトオリゴ糖生成アミラーゼ処理液
をＳＶ　１．７ｈｒ−’で通液糖化したところ、グルコ
ースの生成量は各々９３．１＄、９３．５％であった。

対照例３基質としてＤＥ　１１．８のコーンスターチ液化液及び
ＮＳＤ溶液を、実施例３と同様にキトパール３０１Ｏ固
定化グルコアミラーゼに通液した。ところ。

グルコース生成量は各々８９．９Ｎ、＋３９．［ｌ＄で
あワた。

実施例４キトバール３５１０５０ｇ（ｗｅｔ　７０ｍ１）に担体
１ｇ当り４０ｕ相当量のマルトトリオース生成アミラー
ゼを加え、２時間振凰して吸着固定し、固定化マルトト
リオース生成アミラーゼを得た。

この固定化酵素をΦ１５ｍ！ＩＸ　３００ｍｍのカラム
に充填し、ＤＥｌ　１．８のコーンスターチ液化液及び
ＤＥｌ３．３のＮＳＤ溶液をＳＶ　０．２５ｈｒ−’で
通液したところ、実施例１て得た糖組成とほぼ同じ組成
のマルトトリオース生成アミラーゼ処理の糖液を得た。

この軸液をキトバール３５１０に固定化したグルコアミ
ラーゼ（商品名：スミチーム（：１Ｏ００ｕ／ｇ）リゾ
プス・デレマー起源、新日本化学社製）を充填したカラ
ム（Φ１５ｍｍＸ　：１００ｍｍ　）に通液したところ
、ＳＶ　Ｏ，５ｈｒ−’で、グルコース生成量は各々９
３．２２．９３．７＄てあった。

対照例４キトバール３５１０に固定化したグルコアミラーゼを充
填したカラム（Φ１５ｍｍｘ　］［１１０ｍｍ）に、Ｄ
ＥＩｌ、８のコーンスターチ液化液及びＮＳＤ溶液をＳ
Ｖ　Ｏ，５ｈｒ−’て通液したところ５クルコース生成
量は各々９０．５＄、９０．１％であった。

Claims

【特許請求の範囲】

（１）マルトオリゴ糖生成アミラーゼをデンプン液化液
に作用させてデンプン液化液中の糖組成をグルコース重
合度２〜８の範囲に揃えた後、該デンプン液化液を固定
化グルコアミラーゼに空塔速度（ＳＶ）０．５〜３．０
ｈｒ＾−＾１の流速で通液し、糖化することを特徴とす
るデンプン糖の製造法。
（２）マルトオリゴ糖生成アミラーゼがバチルス（Ｂａ
ｃｉｌｌｕｓ）属起源のマルトトリオース生成アミラー
ゼ及びシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属起
源のマルトテトラオース生成アミラーゼである特許請求
の範囲第１項記載の方法。
（３）グルコアミラーゼがアスペルギルス（Ａｓｐｅｒ
ｇｉｌｌｕｓ）属、リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）属の
生産するグルコアミラーゼである特許請求の範囲第１項
記載の方法。
（４）マルトオリゴ糖生成アミラーゼとして固定化マル
トトリオース生成アミラーゼを使用する特許請求の範囲
第１項記載の方法。
（５）固定化グルコアミラーゼ乃至固定化マルトオリゴ
糖生成アミラーゼの固定化担体が多孔質キトサン、骨炭
、弱酸性カチオン樹脂、フェノール系樹脂の１種又は２
種以上である特許請求の範囲第１項乃至第４項の方法。
（６）デンプンが馬鈴薯デンプン、コーンスターチの１
種又は２種以上である特許請求の範囲第１項記載の方法
。