JPS63156865A - 赤色色素の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明Ｑ″！、！、シソ体の組織培養による赤色色素、
特に食品の着色などに用いられるアントシアニン系色素
の生産方法に関する。

〔従来の技術〕

食品の着色には合成色素及び天然色素が用いられている
が、合成色素は変異原性、発癌性等の問題があり、安全
性の面から天然色素が見直されている。しかし天然色素
は季節、気候、温度等の自°然環境の制約を受けやすい
ため、安定した供給が困難である。そのため組織培養に
よる天然色素の生産が試みられている。組織培養法は、
短時間で目的の色素を生産することができ、工業的規模
で効率・的に計画生産することができるという利点があ
る。弁中中シソへ植物体の切片を組織培養用固体培地に
置床すると、不定形細胞であるカルスが誘導される。こ
うして得られたカルスは、固体培地又は液体培地上で培
養を繰り返すことにより、無限に培養することができる
が、通常は色素を生産しない。またぶどうの組織培養に
よる赤色色素の製法も知られているが（特開昭５５−１
１８’３９２号公報参照）、この方法はシ抱植物体にそ
のまま適用することができない。

〔問題点の解決と本発明の構成〕

本発明者らは、先にシソの植物体の組織培養において、
波長１９０〜５００　ｎｍの青色光照射下で培養すると
、色素を生産するカルスが得られることを見出した（特
開昭６１−１９５６８８号公報参照）。その後さらに研
究を進めた結果、波長６００〜９００　ｎｍの赤色光照
射下に培養しても、色素を生産するカルスが得られるこ
とを見出した。

本発明はこの知見に基づくもので、赤ジソの植物体を波
長６００〜９００　ｎｍの光照射下に組織培養し、得ら
れる赤色色素生成カルスを培養したのち培養物から赤色
色素を採取することを特徴とする赤色色素の製造法であ
る。

本発明を実施するに際しては、赤シソの植物体を波長６
００〜９００　ｎｍの光照射下に培養する（誘導培養）
。

赤シソの植物体としては、色素含量の多い成熟した葉が
好ましい。赤シソの植物体は消毒用アルコール、さらし
粉溶液等で殺菌し、滅菌水で洗浄したのち小片に切断し
て培地に置床する。

培地としては無機合成寒天培地に微量有機物、炭素源、
植物ホルモン等を添加したものが用いられる。無機合成
寒天培地としては例えばＷｈｉｔｅ培地、Ｍｕｒａｓｈ
ｉｇｅ　−ＳｋＯＯｇ培地、Ｌｉｎｓｍａｉｅｒ　−３
ｋｏｏｇ培地等があげられる。微量有機物としては、ビ
タミン例えばチアミン、ピリドキシン、ニコチン酸等、
アミノ酸例えばグリシン、アスパラギン酸等、アルコー
ル例えばイノジット、ソルビット等力あげられる。植物
ホルモンとしては、オーキシン作用物質例えば２，４−
ジクロロフェノキシ酢酸（２，４−Ｄ）、β−インドー
ル酢酸（β−ＩＡＡ）、α−ナフタレン酢酸（α−ＮＡ
Ａ）等、サイトカイニン様物質例えばベンジルアデニン
（ＢＡ　）、カイネチン等が用いられる。α−ＮＡＡ及
びカイネチンが好ましい。植物ホルモンの濃度は０．１
〜ＩＤｍ９／／が好ましい。

波長６００〜９００　ｎｍの光を照射するための光源と
しては、例えば市販の赤色螢光灯が用いられる。培養温
度は２０〜３０’Ｃ１好ましくは２４〜２６℃であり、
培養期間は１力月程度である。

誘導培養終了後、得られた赤色色素生成カルスを採取し
て再度培養する（増殖培養）。

増殖培養は誘導体培養と同じ培地を用い、同様の培養温
度で行うことができる。培養期間は６〜５週間である。

なお増殖培養は赤色光照射下に行ってもよく、暗所で行
ってもよい。誘導培養したカルスから赤色の濃いカルス
を選抜し、このカルスを継代培養したものを増殖培養に
用いると、赤色色素の収量を向上させることができる。

継代培養は暗所で行うこともできる。

増殖培養終了後、抽出溶媒として０．１％メタノール塩
酸を用いて色素を抽出したのち溶媒を除去すると赤色色
素が得られる。

〔発明の効果〕

本発明方法によれば、シソの植物体の組織培養によって
、赤色色素を製造することができる。

また本発明方法により誘導される赤色色素生成カルスを
暗所で培養しても色素生産能を有しているため、光照射
を行うことなく増殖培養できるので、経済的に有利に工
業的生産を行うことができる。

実施例１ 成熟したシソ（Ｐｅｒｉｌｌａ　ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ
、ｖａｒ。

ｃｒｉｓｐａ　）植物葉を流水で洗浄し、７０％エタノ
ールに数十秒間浸漬したのち、滅菌水で充分に洗浄した
。さらに８％さらし粉Ｐ液に４０分間浸漬したのち滅菌
水で洗浄した。このシソ無菌葉を滅菌したはさみ及びピ
ンセットを用い、５　ｍｍの四方の小片に切断した。得
られたシソ葉の小片を、α−ナフタレン酢酸（ＮＡＡ）
０．１〜１０ｒｎ９／ｌ及びカイネチン２ｍ９／ｌを含
む基本培地上に無菌的に置床した。基本培地の組成は第
１表に示すとおりである。次いで培養温度２５℃、主波
長６００〜７００ｎｍの赤色光下（ＮＥＣ螢光ランプＦ
Ｌ１０ＰＫ使用）で培養した。同様にして主波長６５０
〜７００　ｎｍの昼光色光下（ＮＥＣ螢光ランプＦＬ　
１　［１ＳＤＬ使用）及び主波長６５０〜５００　ｎｍ
の青色光下（ＮＥＣ螢光ランプＦＬ１０Ｂ使用）で培養
した。約１週間経過後、葉の切り口局辺からカルスが生
成し、６週間経過後赤色色素の生産の有無を確認した（
誘導直後）。

培養１力月後、赤色色素を生産したものにおいてはその
カルスを、また赤色色素を生産しないものについては任
意のカルスを、カイネチン２ｍｇ／ｌ及びα−ＮＡＡ　
Ｉ　Ｔｎ９　／　１２を加えた基本培地上に無菌的に移
植し、培養温度２５℃でカルス誘導培養の場合と同じ波
長の光照射下に培養した（継代−伏目）。誘導カルス及
び継代−伏目カルスの色素生産の有無を第２表に示す。

なお実験は６回行った。

また継代−伏目のカルスを０．１％メタノール塩酸に浸
漬して色素を抽出し、この抽出液の波長５２５　ｎｍに
おける吸光度を測定し、アントシアニン量をシアニン−
６，５−ジグルコシドとして計算した。その結果を第６
表に示す。

第　　１　　表 ｐＨ６，０ 第　　２　　表 一：色素未生成 ＋：色素生成 ＋１−：非常に色素生成 第　　３　　表 培地４０ｍ１／フラスコ 実施例２ 波長６００〜９００　ｎｍの赤色光を照射し、その他は
実施例１と同様にして４週間培養を行った。培養終了後
、得られた赤色色素生産カルスのうち、赤色の濃い部分
を滅菌水に懸濁し、この懸濁成約１ｙｎｌをシャーレ中
の培地に均一に散布して培養した。培地としてはα−Ｎ
ＡＡ１ｍ９／ｌ及びカイネチン２ｍ９／ｌを含有する基
本培光 地を用いた。培養温度２５℃、赤色Ａ照射下及び暗所で
３〜５週間ごとに赤色の濃いカルスを選抜して培養を繰
り返し、継代入伏目のカルスについて色素含量を測定し
た。その結果を第４表に示す。

第　　４　　表 出願人　株式会社ポッカコーポレーション代理人　弁理
士　小　林　正　雄 外１名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、赤ジソの植物体を波長６００〜９００ｎｍの光照射
   下に組織培養し、得られる赤色色素生成カルスを培養し
   たのち培養物から赤色色素を採取することを特徴とする
   赤色色素の製造法。 ２、誘導培養した赤色色素生成カルスを、暗所下で選抜
   、増殖させることを特徴とする、特許請求の範囲第１項
   に記載の方法。