JPH012593A - 赤色色素の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、シソの植物体の組織培養による赤色色素、特
に食品の着色などに用いられるアントシアニン系色素の
製造法に関する。

〔従来の技術〕

食品の着色には合成色素及び天然色素が用いられている
が、合成色素は変異原性、発癌性等の問題があり、安全
性の面から天然色素が見直されている。しかし天然色素
は季節、気候、温度等の自然環境の制約を受けやすいた
め、安定した供給が困難である。そのため組織培養によ
る天然色素の生産が試みられている。組織培養法は、短
時間で目的の色素を生産することができ、工業的規模で
効率的に計画生産することができるという利点がある。

゛シソの植物体の切片を組織培養用固体培地に置床する
と、不定形細胞であるカルスが誘導される。こうして得
られたカルスは、固体培地又は液体培地上で培養を繰り
返すことにより、無限に培養することができるが、通常
は色素を生産しない。またぶどうの組織培養による赤色
色素の製法も知られているが（特開昭５５−１１８３９
２号公報参照）、この方法はシソの植物体にそのまま適
用することができない。

〔問題点の解決と本発明の構成〕

本発明者らは、先にシソの植物体の組織培養において、
波長１９０〜５００　ｎｍの青色光照射下で培養すると
、赤色色素を生成するカルスが得られることを見出した
（特開昭６１−１９５６８８号公報参照）。その後さら
に研究を進メた結果、赤色色素生成カルスな微量のオー
キシン作用物質を含有する培地で培養することにより、
効率よく赤色色素を製造できることを見出して本発明を
完成した。

本発明は、赤ジソの植物体を誘導培養し、得られる赤色
色素生成カルスな低濃度のオーキシン作用物質を含有す
る培地で培養し、培養物から赤色色素を採取することを
特徴とする赤色色素の製造法である。

本発明を実施するに際しては、赤ジソの植物体を培養し
て赤色色素生成カルスな誘導する（誘導培養）。

赤シソの植物体としては、色素含量の多い成熟した葉が
好ましい。赤ジソの植物体は消毒用アルコール、さらし
粉ｒ液等で殺菌し、滅菌水で洗浄したのち小片に切断し
て培地上に置床する。

培地、としては、無機合成寒天培地に微量有機物、炭素
源、植物ホルモン等を添加したものが用いられる。無機
合成寒天培地としては例えばｗｈｉｔｅ培地等があげら
れる。微量有機物としては、ビタミン例えばチアミン、
ピリドキシン、ニコチン酸等、アミノ酸例えばグリシン
、アスパラギン酸等、アルコール例えばイノジット、ソ
ルビット等があげられる。植物ホルモンとしては、オー
キシン作用物質例えば２，４−ジクロルフェノキシ酢酸
（２，４−Ｄ）、β−インドール酢酸（β−ＩＡＡ　）
　、α−ナフタレン酢酸（α−ＮＡＡ　）等、サイトカ
イニン様物質例えばベンジルアデニン（ＢＡ　）、カイ
ネチン等が用いられる。α−ＮＡＡ及びカイネチンが好
ましい。植物ホルモンの濃度は０．１〜１０ｍ９／Ｊ３
が好ましい。

培養温度は２０〜３０℃、好ましくは２４〜２６℃であ
る。培養は波長６００〜９００　ｎｍ又は波長１９０〜
５００　ｎｍの光照射下で行うことが好ましい。培養期
間は１力月程度である。

誘導培養終了後、得られた赤色色素生成カルスな低濃度
のオーキシン作用物質を含む培地で培養する（増殖培養
）。

培地としては、誘導培養と同様のものを用いることがで
きる。オーキシン作用物質としては、α−ＮＡＡ１ソの
塩、エステル、アミドなどの誘導体、２．４−Ｄ、ＩＡ
Ａなどが用いられる。培地中のオーキシン作用物質の濃
度は、例えばα−ＮＡＡでは０．０５〜０．５　ｐｐｍ
である。オーキシン作用物質の濃度がこの範囲外の場合
は、赤色色素の生成量が著しく減少する。

培養期間は６〜５週間、培養温度は２０〜５０℃、好ま
しくは２４〜２６℃である。

なお増殖培養は明所下（好ましくは赤色光又は青色光照
射下）で行ってもよく、暗所で行ってもよい。誘導培養
したカルスかも赤色の濃いカルスを選抜し、このカルス
を継代培養したものを増殖培養に用いると赤色色素の収
量を向上させることができる。継代培養は暗所で行うこ
ノール溶液を用いて色素を抽出したのち、溶媒を除去す
ると赤色色素が得られる。

〔発明の効果〕

本発明方法によれば、シソの植物体の組織培養によって
、赤色色素を安定して効率よ（製造することができる。

実験例１ 成熟したシソ（Ｐｅｒｉｌｌａ　ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ
、、ｖａｒ、、ｃｒｉｓｐａ）植物葉を流水で洗浄し、
７０％エタノールに数十秒間浸漬したのち、滅菌水で充
分に洗浄した。

さらに８チさらし粉Ｆ液に４０分間浸漬したのち滅菌水
で洗浄した。このシソ無菌葉を滅菌したはさみ及びピン
セットを用い、５龍四方の小片に切断した。得られたシ
ソ葉の小片を、α−ナフタレン酢酸（ＮＡＡ　）　０．
１〜１０ｍ９／ｌを含む基本培地上に無菌的に置床した
。基本培地の組成は第１表に示すとおりである。次いで
培養温度２５℃、主波長１９０〜５００　ｎｍの青色光
照射下（ＮＥＣ蛍光ランプＦＬ１０Ｂ）で培養した。約
１週間経過後、葉の切り口周辺からカルスが生成し、６
週間経過後、赤色色素を生産するカルスが形成された。

こうして得られた赤色色素生産カルスのうち、赤色の濃
い部分を滅菌水に懸濁し、この懸濁液的１　ｍｌをシャ
ーレ中の培地に均一に散布して培養した。培地としては
α−ＮＡＡ　１■／ｌを含有する基本培地を用いた。培
養温度２５℃、青色光照射下で３〜５週間ごとに赤色の
濃いカルスを選択して培養を繰り返した。

こうして得られた赤色色素生成カルスな用い、各種濃度
のα−ＮＡＡを含有する培地で増殖培養し、赤色色素の
生成量を調べた。１００ｍ１の三角フラスコに所定濃度
のα−ＮＡＡを含有する培地を加える。培地の組成は第
１表に示すとおりである。この培地に赤色色素生成カル
スな入れ、培に浸漬して色素を抽出し、この抽出液の波
長５２５ｎｍにおける吸光度を測定し、アントシアニン
量をシアニジソ−３，５−ジグルコシドとして計算した
。その結果を第２表に示す。これよりα−ＮＡＡ　Ｏ，
０５〜０．５　ｐｐｍ含有培地で増殖培養すると、きわ
めて多量の赤色色素が生成することが知られる。

第　　１　　表 ｐＨ６，０ 第　　２　　表 培地４０ｍ１７１００ｍｌ 三角フラスコ 実施例１ 実験例１と同様の方法により得られた生産性の良い赤色
色素生産株を、α−ＮＡＡを０．１５　ｐｐｍ含有する
基本培地を用い、培養温度２５℃、青ノール溶液に浸漬
して色素を抽出し、この抽出液を波長５２５　ｎｍにお
ける吸光度を測定し、アントシアニン量をシアニジソ−
３，５−ジグルコシドとして計算した。その結果を第６
表に示す。

第　　６　　表 培地４０畔／１００ｍＪ三角フラスコ 実施例２ 実験例１と同様にして、赤シソ成熟葉から誘導した赤色
色素生産カルスのうち、赤色の濃い部分を滅菌水に懸濁
し、この懇濁液約１　ｍｌをシャーレ中の培地に均一に
散布して培養した。培地としてはα−ＮＡＡ　１　ｍ９
／４３を含有する基本培地を用いた。培養温度２５℃、
暗所下で６〜５週間ごとに赤色の濃いカルスを選抜して
培養を繰り返した。こうして得られた暗所下においても
良く赤色色素を生産する株を、α−ＮＡＡを０．２ｐｐ
ｍ含有する基本培地を用い、培養温度２５°Ｃ１暗所下
で約４週間培養した。

この抽出液を波長５２５　ｎｍにおける吸光度を測定し
、アントシアニン量をシアニジソ−３，５−ジグルコシ
ドとして計算した。その結果を第４表に示す。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 　赤ジソの植物体を誘導培養し、得られる赤色色素生成
   カルスを低濃度のオーキシン作用物質を含有する培地で
   培養し、培養物から赤色色素を採取することを特徴とす
   る赤色色素の製造法。