JPS6317842B2

JPS6317842B2 -

Info

Publication number: JPS6317842B2
Application number: JP7657379A
Authority: JP
Inventors: Hideki Jinno; Toshiaki Tsutsui; Yoshikuni Tamao
Original assignee: Mitsubishi Chemical Industries Ltd
Current assignee: Mitsubishi Chemical Corp
Priority date: 1979-06-18
Filing date: 1979-06-18
Publication date: 1988-04-15
Also published as: JPS56803A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は植物性多糖類硫酸エステルの製造法に
関するものである。詳しくは、植物性ゴム質から
得られる植物性多糖類の新規な硫酸エステルの製
造法に関するものである。ヘパリン、コンドロイチン硫酸等の動物性ムコ
多糖は多糖の硫酸エステルであるが、糖残基にグ
ルコサミンをもち、またカルボキシル基も有する
などたいへんに複雑な構造である。このため、ヘ
パリン、コンドロイチン硫酸等は血液凝固阻止作
用および抗脂血作用等の生理活性を示す医薬品等
として広い用途を有しているにも拘わらず、その
製造は依然として動物の肺や腸粘膜からの抽出に
頼らざるを得ず、その供給が限られているといつ
た欠点がある。一方、植物がゴム質として分泌するものも、多
くは多糖類であり、現在知られているだけでも数
十種類にものぼる。その構造として、多くはＤ−
グルクロン酸またはＤ−ガラクツロン酸および他
の中性糖残基が結合した一種のポリウロナイドで
あり、動物性ムコ多糖よりも単純な構造で、その
入手も容易である。これらの事情に鑑み、本発明者等は血液凝固作
用を有する新らたな化合物を得るべく鋭意研究し
たところ、植物ゴム質から得られる植物性多糖類
を硫酸エステル化して得られる植物性多糖類硫酸
エステルがその目的に好適なことを見出し、本発
明に到達した。以下に本発明を詳細に説明する。植物性ゴム質は良く知られた物質で、植物の茎
や果実が傷を受けた場合、または自然のままで分
泌されて凝固し、傷口を保護するもので、その主
成分は多糖類である。植物性ゴム質としては、アラビアゴム、トラガ
カントゴム、メスキートゴム、ダムソンゴム、サ
クラゴム、セイヨウスモモゴム、アーモンドゴ
ム、モモゴム、レモンゴム、ブドウゴム、コラゴ
ム、ガツテイゴム、カラヤゴム、カーヤゴム、ミ
ルゴム等が知られており、これらの植物性ゴムの
中ではアラビアゴムおよびトラガカントゴムが入
手しやすい点等で有利である。これらの植物性ゴムの中には、それぞれの種類
に対応する植物性多糖類が含まれており、例えば
アラビアゴム中にはアラビン（アラビン酸）、ト
ラガカントゴム中にはトラガカント（トラガカン
ト酸）がある。これらの植物性多糖類は、それぞ
れ周知の方法によつて植物性ゴムから分離・精製
することができる。アラビンは、Ｄ−グルクロン酸13.8％、Ｄ−ガ
ラクトース36.8％、Ｌ−アラビノース30.3％およ
びＬ−ラムノース11.4％等により構成され、それ
らの結合様式や構造の一部は知られている。また、トラガカントはＤ−ガラクツロン酸43
％、Ｄ−キシロース40％およびその他Ｌ−フコー
スを含む複合多糖類である。これらの植物性多糖類の硫酸エステル化は、常
法によつて行うことができる。植物性多糖類は、硫酸エステル化の前に微粉化
しておくことが好ましい。微粉化しておけば、次
の工程の反応速度が上り、好ましい結果を与え
る。硫酸エステル化は、通常、植物性多糖類をクロ
ロスルホン酸と反応させることにより行われる。硫酸エステル化をクロロスルホン酸で行う場合
には、植物性多糖類をピリジン等の三級アミンに
懸濁させ、次いでクロロスルホン酸を加えればよ
い。三級アミンの量は、植物性多糖類に対し通常５
〜10倍（重量）量である。三級アミンの量が少な
すぎると反応が急激に進みクロロスルホン酸によ
り植物性多糖類の分解をきたし、また三級アミン
の量が多すぎてもクロロスルホン酸と三級アミン
の複合物が溶媒量に対して少なすぎるために反応
の進行が遅く目的とする多糖の硫酸エステル化物
が生成しにくいため好ましくない。クロロスルホン酸の量は、植物性多糖類に対し
通常１〜２倍（重量）である。クロロスルホン酸
の量が少なすぎると多糖硫酸エステルの生成が十
分に進行せず、またクロロスルホン酸の量が多す
ぎても反応物及び生成物の分解を伴なうので何れ
も好ましくない。クロロスルホン酸を、植物性多糖類の三級アミ
ン懸濁液に添加する際の温度は、通常−10〜10℃
である。この温度が低すぎると反応が十分に進行
せず硫酸エステル化が進みにくいし、また温度が
高すぎるとクロロスルホン酸による多糖の分解が
おこるので何れも好ましくない。クロロスルホン酸の添加が終了した後は反応温
度を上げ、通常60〜100℃とする。この温度が低
すぎるとクロロスルホン酸と三級アミンとの複合
体の反応性が悪く、また温度が高すぎると溶媒の
沸点近くになり反応操作に支障をきたすので何れ
も好ましくない。反応中は激しく撹拌しておくことが好ましい。反応時間は、種々の反応条件により相違するの
で、生成物の生理活性等を測定しながら、適宜決
定すればよい。こうして生成した植物性多糖類の硫酸エステル
は、常法により後処理し、精製・単離することが
できる。すなわち、例えばゲルロ過やイオン交換
樹脂処理を適宜組み合わせて用いることにより植
物性多糖類の硫酸エステルを単離し、アルカリで
中和して濃縮し、アルコールを加えれば植物性多
糖類の硫酸エステルのアルカリ金属塩が得られ
る。生成する植物性多糖類の硫酸エステル中の硫酸
エステル化の程度は、原料の植物性多糖類中の水
酸基に対する生成物中のスルホン基の比として、
通常0.3〜１、好ましくは0.33〜0.67である。硫酸
エステル化の程度が前記の範囲であれば抗血液凝
固作用が高いので好ましい。生成した植物性多糖類の硫酸エステルは、抗血
液凝固作用、抗脂血作用を有し、医薬品として使
用しうる。抗血液凝固剤等としての使用法は、従
来周知のヘパリン等と同様である。以下に実施例を挙げて、本発明を更に詳細に説
明するが、本発明はその要旨を超えない限り以下
の実施例により限定を受けるものではない。実施例１市販アラビン2.0ｇを、ピリジン（20ml）中に
懸濁させる。懸濁液を−10℃に冷却し、激しく撹拌する。撹
拌下クロロスルフオン酸（6.8ｇ）を徐々に30分
間で滴下し、温度を０℃に保つ。反応混合物を室
温に放置し、次に80℃に加熱する。３時間後、反
応を終了し、室温にまで温度をもどす。反応混合物に20mlの水を加え、水溶液とする。
これを、あらかじめ調整しておいたセルロースゲ
ル〔フアルマシアフアインケミカルズ社商標セフ
アデツクス（Sephadex）〕G25、360mlのカラム
を通し、水溶媒で溶出して各フラクシヨンに分け
る。抗スロンビン活性度を測定し、活性部を集め
る。活性部分を減圧濃縮し、濃縮液（20ml）をさ
きに調整しておいた強酸性イオン交換樹脂カラム
（三菱化成工業社登録商標“ダイヤイオン”SK
＃１、Ｈ型）を通し、水溶出液のうち酸性部分を
集め、脱色炭処理を行い、脱色された溶液を水酸
化ナトリウムで中和して、目的とする多糖類硫酸
エステル塩を得る。中和液に20倍量のメタノール
もしくはエタノール等のアルコールを加え、生成
物の沈澱を得る。沈澱をロ過により採取し、さらにアルコール、
エーテルによつて洗浄し、加熱乾燥を行い、粉砕
をして、目的とするアラビン硫酸エステル塩を得
る。収量 65％、元素分析 C15.94％ H2.62％
灰分 35.83％赤外吸収スペクトル図を第１図に示した。実施例２市販トラガカント酸2.0ｇを乳鉢中でよく、粉
砕し、粉末をピリジン（40ml）中に懸濁させ、激
しく撹拌する。懸濁液を−10℃に冷却し、滴下ロートにてクロ
ロスルホン酸（6.3ｇ）を30分間で滴下する。こ
の時、温度は０℃以下に保ち、激しく撹拌を続け
る。滴下終了後、反応液を室温にもどし、さらに
100℃に加熱して５時間反応させる。反応終了後40mlの水を加えて水溶液とし、さら
に800mlのエチルアルコールを加えて反応混合物
の沈澱を得る。沈澱物をロ過によつて集め、20mlの水に溶解す
る。あらかじめ実施例１と同様なセルロースゲル
のカラム（径3.0cm、長さ37cm）を調整しておき、
反応物の混合液をカラムに通し、さらに水にて溶
出させ、各フラクシヨンを10mlずつとる。各フラ
クシヨンに対して抗スロビン活性部分だけとり、
さらに減圧濃縮し、全量を20mlとする。この水溶
液20mlを、イオン交換樹脂（三菱化成工業社登録
商標“ダイヤイオン”SK＃１、Ｈ型）カラム
（径3.5cm、長さ20cm）に通して水で溶出し、酸性
溶出部分をとる。酸性溶液を水酸化ナトリウムで
中和し、中和溶液を減圧濃縮し、全量を20mlと
し、活性炭処理をする。濃縮液中に20倍量のエタ
ノール、もしくはメタノールを加えてトラガカン
ト酸の硫酸エステル塩を析出させる。ロ過によりこの生成物をとり、さらにメタノー
ル、エーテルで生成物を洗浄し、加熱乾燥後、乳
鉢で粉砕してトラガカント酸硫酸エステル塩を得
る。収量 63.5％元素分析Ｃ：10.56％ H2.27
％灰分 45.85％赤外吸収スペクトル図を第２図に示した。以上のごとく得られた、植物性多糖類硫酸エス
テルの生理活性は、次に示すごとくである。すなわち、ヘパリン様活性をしらべるため、牛
プラズマとスロンビンによる血液凝固反応系にお
いて、上で得られた多糖誘導体を検討した。抗ス
ロンビン作用および全血凝固時間に対する効果抗
スロンビン作用を調べるために牛クエン酸血漿
0.1mlに試料水溶液0.1mlを加えて、37℃に30秒間
保温した後、持田製薬社製スロンビン溶液0.1ml
を添加して37℃に保温し、フイブリン糸が析出す
るまでの時間を凝固時間として測定した。試料無
添加での凝固時間を20秒とし、凝固時間を40秒に
するに要する試料濃度をI₅₀として求めた。全血凝固時間を測定するために、試料の生理食
塩水溶液0.01〜0.02mlにウサギ新鮮血を１ml加え
て、リー・ホワイト（Lee−White）法により凝
固時間を測定した。結果を次表にした。

【表】

【表】なお、実施例１および２において、水酸化ナト
リウムで中和する代りに水酸化バリウムで中和し
ても同様な結果が得られた。

【図面の簡単な説明】

第１図および第２図は、実施例１および２の生
成物の赤外吸収スペクトル図である。

Claims

【特許請求の範囲】１植物ゴム質から得られる植物性多糖類を硫酸
エステル化することを特徴とする植物性多糖類硫
酸エステルの製造法。２特許請求の範囲第１項記載の硫酸エステルの
製造法において、硫酸エステル化を、植物性多糖
類とクロロスルホン酸を反応させることにより行
うことを特徴とする方法。３特許請求の範囲第１項または第２項に記載の
硫酸エステルの製造法において、植物性多糖類が
アラビンであることを特徴とする方法。４特許請求の範囲第１項または第２項に記載の
硫酸エステルの製造法において、植物性多糖類が
トラガカントであることを特徴とする方法。