JPS6326086B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は、血清中のプロラクチンの量を減少さ
せる組成物に関するものである。 神経伝達物質であるドパミンおよびノルエピネ
フリンがジヒドロキシフエニルアラニン（ドパ）
から誘導された物質であることは既に公知であ
る。一方、ドパは、アミノ酸であるチロシンの酵
素学的ヒドロキシル化によりノイロン中で生成す
るものである。このプロセスは、酵素であるチロ
シンヒドロキシラーゼの触媒作用のもとで進行す
る。ドパは、酵素であるＬ−アミノ酸デカルボキ
シラーゼ（AAAD）により脱カルボキシル化さ
れてドパミンになる。ノルエピネフリンは、酵素
であるドパミン−β−ヒドロキシラーゼをも含む
ノイロン中でドパミンから生ずる。この一連の反
応において、律速段階はチロシンからドパへの変
換段階である。この理由のために、パーキンソン
病の如きドパミン欠乏性疾病に起因する身体障害
部を有する患者にドパミン投与が行われたことが
あつた。しかしながら都合の悪いことには、ドパ
を投与するとこれは身体全体の細胞に吸収されて
ドパミンに変わり、これによつて、これらの細胞
における正常な代謝プロセスが妨害されるという
不都合な事態が生じるのである。さらにドパは、
神経伝達物質であるセロトニンの正常な人体内蓄
積を妨害し、かつ、Ｓ−アデノシルメチオニン化
合物の脳内存在量を低下させる。これらの不所望
の副作用のために患者にいわゆる「オン−オフ現
象」等が認められることがあり、そして或場合に
は精神病的徴候が認められることさえあり得る。
シナプス中のドパミンおよびノルエピネフリンの
量を増加させる作用を有する他種薬剤の例にはモ
ノアミンオキシダーゼ抑制剤（これは前記の神経
伝達物質の分解を遅延させるものである）および
３該形の抗抑うつ剤（アンチデプレサント）があ
げられる。これらの化合物は抑圧症状を伴う疾病
の治療剤として使用されているが、これらもま
た、シナプス中のドパミンおよびノルエピネフリ
ンの量の増加作用の他に比較的非特異の化学的作
用を有するものであつて、すなわち種々の副作用
を有し、たとえば血圧上昇作用等を有する。しか
してこの血圧上昇は、モノアミンオキシダーゼ抑
制剤を投与した患者が或種の食品を食べたとき等
に起るものである。 神経中のチロシンの量を変えることによりドパ
ミンまたはノルエピネフリンの量を増加または減
少させる試みが以前に行われたが、この試みは成
功しなかつた。なぜならば脳および種々の組織の
中のこれらの化合物の量を変化させることは行わ
れなかつたからである。脳内のドパの濃度は、所
定の実験条件下ではドパミンおよびノルエピネフ
リンの合成速度に比例して変化し、そして脳内の
ドパの濃度は、脳内のチロシンの濃度の増加によ
り増加させることができ、かつ、脳内のドパの濃
度は、脳内のチロシンの濃度を低下させるような
処理によつて低下させることができる（ラツテを
用いた実験）ことを最初に見出した研究者はワー
トマン等である〔「サイエンス」第185巻第183頁
−第184頁（1974年７月12日）」。脳内のチロシン
の量を増加させるための処理方法の１つは、チロ
シンそれ自体を投与することであつた。脳内のチ
ロシンの量を減少させるための処理方法の１つ
は、血漿中のチロシン（プラズマチロシン）の脳
内移行性と競合する性質を有する他種中性アミノ
酸のうち１つ（たとえばロイシン）を投与するこ
とである。この学説が発表される以前には、前記
の律速段階の反応を進行させる酵素であるチロシ
ンヒドロキシラーゼはチロシンにより高度飽和状
態になつているので、脳内のチロシンの量の増加
または減少が、チロシンからドパへの変換反応に
影響を与えることはないであろうと思われていた
のである。一方、上記のワートマン等の論文、ま
たは其後に発表されたギブソンおよびワートマン
の論文〔「Biochem.Pharmacology」第26巻第
1137頁−第1142頁（1977年６月号）〕には、ドパ
蓄積量に関する前記の変化は、脳内のドパミンま
たはノルエピネフリンの量の変化を伴うものであ
ることは全く開示されていない。また、脳内のチ
ロシンの量を変えることにより、シナプスへのド
パミンまたはノルエピネフリンの放出量に影響を
与えることができることも、上記の文献には全く
開示されていない。本発明者の出願せる米国特許
出願第898740号明細書（出願日1978年４月24日）
には、チロシンの投与によりシナプス中のドパミ
ンまたはノルエピネフリンを増加させることがで
きることが開示されている。 神経末端部からのドパミンの放出を妨害する薬
剤、神経末端部におけるドパミンの生成を妨害す
る薬剤、または神経末端部から一旦放出されたド
パミンの活性（すなわち、他の細胞上の、この伝
達物質のためのレセプターを刺激する活性）を無
力化させる薬剤を投与した動物および人体では、
血清中のプロラクチン（脳下垂体ホルモンの１
種）の量が増加することが多い。血清中のプロラ
クチンの量の増加は望ましくないことであると思
われる。なぜならば、このホルモン（すなわちプ
ロラクチン）の血清中力価（titres）の高いこと
が、ホルモン敏感性腫瘍の発生の原因となること
が若干の論文に記載されているからである。ま
た、自然発生的な陰萎やイドロパシツク・ガラク
トレア症（idlopathic galactorrhea）の如き病
気の場合、あるいは微細な脳下垂体腫瘍（プロラ
クトンの生成を促進する薬剤を服用していない患
者に生じたもの）が存在する場合にも、プロラク
チンの量の病的増加が認められる。 本発明は血清中のプロラクチンの量を減少させ
る組成物を提供するものである。本発明に従え
ば、血清中のプロラクチンの量を減少させ、かつ
ドパミン（またはノルエピネフリン）の量を増加
させるために、チロシンまたはそのプレカーサー
（すなわちフエニルアラニン）を単独で、あるい
は他のアミノ酸と一緒に、あるいは種々の医薬と
の混合物の形で投与することができる。同様に、
前記混合物中のトリプトフアン（すなわち、もう
１つの種類のアミノ酸）の存在量（存在比率）を
種々変えることにより、シナプス中へのセロトニ
ン（もう１つの種類の脳神経伝達物質）の放出量
が調節できる。ドパミン放出性ノイロンが活性状
態のものである場合、すなわち該ノイロンがひん
ぱんに興奮するものである場合にのみ、チロシン
および／またはフエニルアラニンの投与後に、シ
ナプス中のドパニンの量が増加する。このこと
は、前記の必須ドパミン放出性ノイロン中におい
て、多量のプロラクチンの存在下に起る。一方、
ノルエピネフリン放出性ノイロンの場合には、こ
れが特に活性の高いものであるか否かということ
とは無関係に、チロシンの投与によつてシナプス
中のノルエピネフリンの量が増加する。いずれの
場合においても、前記投与により血清中のプロラ
クチンの量は減少する。少量投与の場合には、チ
ロシンの代りにフエニルアラニンを使用すること
ができる。 本発明に従えば、患者にチロシンおよび／また
はフエニルアラニンを単独で投与し、あるいは、
血清中のプロラクチンの量を上昇させるという副
作用を有する薬剤１種またはそれ以上と組合わせ
て投与し、これによつて血清中のプロラクチンの
量を減少させるのである。チロシンの投与はま
た、シナプス中のドパミンおよび／またはノルエ
ピネフリンの増加をももたらす。ドパミン放出量
を増加させるためには、患者のドパミン放出性ノ
イロンが比較的高活性のものであることが必要で
あり、すなわち、パーキンソン病の患者の場合の
ようにしばしば興奮するものであることが必要で
ある。しかしながら、ノルエピネリン放出性ノイ
ロンの場合には、これが特に高活性のものか否か
ということとは無関係に、シナプスへのノルエピ
ネフリンの放出量が増加するのである。 血清中のプロラクチンの量を減少させるために
使用される本発明の組成物の組成は、治療すべき
患者の病状に応じて適宜変えることができる。患
者の血清中のプロラクチンの量が、不所望の高い
値に自然になつたものである場合には、チロシン
および／またはフエニルアラニンを単独投与の形
で約５−200mg／Kg、好ましくは10−100mg／Kg
（体重）使用できる。あるいは、或病気の患者を
治療するために使用されるが、血清中のプロラク
チンの量を増加させるという不所望の副作用を有
する薬品に付随させて投与する形で、チロシンお
よび／またはフエニルアラニンを投与することも
可能である。このような不所望の副作用を有する
薬剤の例には次のものがあげられる：血圧降下剤
として投与されるレセルピン、アルドメツト、α
−メチルパラチロシン、クロニジン；トランキラ
イザーとして投与されるハロペリドール、ピモジ
ド；パーキンソン病の治療薬であつて、末梢系に
おけるＬ−ドパの脱カルボキシル反応を妨害する
作用を有するカルビドパの如き薬剤；モノアミン
の代謝作用を変改する薬剤である抗抑うつ剤；プ
ロラクチンの分泌を促進するエストロゲンおよび
その関連化合物。或薬剤に付随させて投与する場
合には、チロシンおよび／またはフエニルアラニ
ンの投与量は一般に約５−200mg／Kg、好ましく
は約10−100mg／Kg（体重）である。或場合には
チロシンの代用物としてフエニルアラニンが使用
できる。なぜならばこのアミノ酸すなわちフエニ
ルアラニンは肝蔵でチロシンに変換され、そして
血液流の中に放出されて脳内に入るからである。
しかしながら血漿中のフエニルアラニンの量はチ
ロシンの量の約２倍よりも少ない量であるべきで
ある。なぜならばそれより多量存在する場合には
フエニルアラニンは脳内移行性に関してチロシン
と競合し、チロシンヒドロキシラーゼ酵素の作用
を妨害することがあり得るからである。 チロシンおよび／またはフエニルアラニンは遊
離アミノ酸、エステル、塩、天然または合成重合
体の形で投与でき、または食物の構成成分の形で
投与できる。この投与は、経口投与または非経口
投与（たとえば静脈内投与）の形で行うことがで
きる。 本発明を一層具体的に例示するために、次に実
施例を示す。しかしながら本発明の範囲は決して
これらの実施例に記載の範囲内のみ限定されるも
のではない。 例 この実施例は、脳内でノルエピネフリンが、脳
内のチロシンの量を増加させることにより合成で
きることを例示したものである。 この実施例中の実験データーに示されているよ
うに、脳内のノルエピネフリンの主代謝産物であ
る３−メトキシ−４−ヒドロキシ−フエニルエチ
レングリコール−サルフエート（MOPEG−
SO₄）がラツテの脳内に蓄積するときの蓄積速度
は、脳内のチロシンの量の関数の形で種々変化す
るものである。このことから明らかなように脳内
のチロシンの量は、脳内のノルエピネフリンの合
成量のみならず、このノルエピネフリンのターン
オーバー量および放出量にも影響を与えるもので
ある。 体重150ｇのオスのスプラグー−ドーレイラツ
テ〔チヤールス、リバー、ブリージング、ラボラ
トリーズ（ウイルミングトン、MA）から供給さ
れたものを、つりさげかごに入れて飼育した（１
かご当り６−８匹）。そして飲料水および26％蛋
白質飼料（チヤールス、リバー、ラツト−マウス
−ハムスター、メインテナンス、フオーミユラ−
24RF）を自由に与えた。毎日午前８時から午後
８時まで光線〔300マイクロワツト／cm²；ビター
ライト、ズロウーテスト、コーポレーシヨン（ノ
ース、バーゲン、N.J.）製の電球を使用〕を照射
した。投与実験のために使用されたラツテは１晩
中絶食させ、次いで午前10時に実験用薬剤投与実
験を開始した。ギブソンの論文〔「Biochem.
Pharmacol.」第26巻第1137頁−第1142頁（1977
年）〕に記載の薬剤調製方法に従つてカンテンゲ
ル（水分35ｇ／ml）を用いて種々の組成の薬剤を
調製した。アミノ酸および薬品はすべて腹膜内に
注射した。 脳内ノイロン中のノルエピネフリンの合成量お
よびターンオーバー量を次の測定方法に従つて測
定した。すなわちこの測定方法は、プロベネシド
の投与後に、またはラツテを寒冷環境下に置いた
後に、MOPEG−SO₄の蓄積量を測定することか
らなるものであつた。脳ホモジネート中の
MOPEG−SO₄を、アニオン交換コラム〔フアー
マシア社（ピスカタウエー、N.J.）製の「Ａ−25
−DEAE−セフアデツクス」〕を用いて単離した。
この単離はミークおよびネフの方法〔「Br.J.
Pharmacol.」第45巻第435頁−第441頁（1972
年）〕に従つて行つたが、我々は同一試料におい
てチロシンおよびMOPEG−SO₄の両者が測定で
きるように上記単離方法を改良して用いた。各ホ
モジネート試料（0.15M−ZnSO₄液中に入れたも
の）について、最初にチロシンをワークスおよび
ユーデンフレンドの方法〔「J.Lab.Mad.」第50巻
第733頁−第736頁（1957年）〕に従つて定量した。
次いで、残りのホモジネートに当量の0.15M−水
酸化バリウム液を添加し、再びホモジナイズし
〔ブリンクマン、インストル−メンツ社（N.Y.）
製の「ポリトロン」を用いた〕、遠心、分離操作
を行い、そして上記のメークおよびネフの方法に
従つてMOPEG−SO₄を定量した。脳ホモジネー
ト全体からのMOPEG−SO₄およびチロシンの分
離、回収率はそれぞれ70−75％および85−95％で
あつた。 チロシン〔グランド、アイランド、バイオロジ
カル、コンパニー（ロング、アイランド、N.Y.）
製のもの〕およびプロベネシド〔シグマ、ケミカ
ル、コンパニー（セントルイス、MO）製のも
の〕は水に難容性であるので希NaOH液に溶解
し、得られた各溶液に塩酸を加えて緩衝作用を行
つてPH7.4に対し、既知容量の食塩水を加えた。
これによつて、注射液として適当な微細懸濁液
（フアイン、サスペンジヨン）が得られた。 寒冷環境に暴露されたときに生ずるストレスに
関する実験では、脳内のチロシンの量を増加させ
るために、チロシンそれ自体の代りに、一層溶け
易いエチルエステルの形のチロシンを試験動物に
投与した。実験データーの解析は、変数一元解析
法または二元解析法に従つて行つた。 プロベネシドの投与により脳内のMOPEG−
SO₄の量が、123nｇ／ｇ（希釈剤のみを注射した
対照動物）から175nｇ／ｇ〔プロベネシド投与
動物〕に増加した（Ｐ＜0.001；第１表）チロシ
ンのみの投与は脳内のMOPEG−SO₄に全く影響
を与えなかつたが、このアミノ酸を用いて前処理
を行つた場合には、プロベネシドによるMOPEG
−SO₄の量の増加度が一層大きくなり、すなわ
ち、175nｇ／Kg（プロベネシドの単独投与を行
つたラツテの場合）から203nｇ／ｇに増加した
（Ｐ＜0.01；第表）。

【表】 注：これらの３つの実験の各々において、４−
６匹のラツテを１グループにして、各グループの
ラツテに、所定の投与量のチロシン（脳内のドパ
の合成を促進することが知られている薬剤；100
mg／Kg、i.p.）もしくはその希釈剤のみを注射し、
そして30分後にプロベネシド（400mg／Kg、i.p.）
またはその希釈剤のみを注射した。この第２回目
の注射を行つてから60分後に試験動物を殺し、そ
の脳全体について分析を行つてチロシンおよび
MOPEG−SO₄の量を測定した。チロシンの投与
により脳内のチロシンの量は著しく増加した（Ｐ
±0.001）。一方、プロベネシドは脳内のチロシン
を変性するものでもなく、また、外来チロシンへ
のそのレスポンスを変改させるものでもなかつ
た。プロベネシドは脳内のMOPEG−SO₄の量を
著しく増加させ（Ｐ±0.001）、そしてチロシンの
前処理により、このレスポンスが著しく増大した
（Ｐ±0.01）。これらの実験データーは、変数二元
解析法により解析した。これらの値は「±SEN」
で表わされる。 ラツテを寒冷環境（４℃）下に飼育した場合に
はノルエピネフリンのターンオーバー量が増加
し、そしてこれによつて、脳内のノイロン中のノ
ルエピネフリン自体およびその代謝産物
（MOPEG−SO₄）の両者の生成が促進された。
ラツテを寒冷環境下に飼育して次のことを調べ
た。すなわち、脳内のチロシンの量を変える処理
は、寒冷ストレスを受けたラツテ（プロベネシド
を投与しなかつたラツテ）の脳内のMOPEG−
SO₄蓄積速度に影響を与えるものであるかどうか
調べた（第１図）。 寒冷環境下に１時間置くと脳内のMOPEG−
SO₄の量が約40％増加した（すなわちこの量は
80nｇ／ｇから11nｇ／ｇに増加した；Ｐ＜
0.001）。アミノ酸または食塩水のいずれかを投与
した試験動物では、脳内のチロシンの量は大体同
じであり、かつこれはMOPEG−SO₄の量に密接
に関連するものであつた。（ｒ＝77；Ｐ＜0.05；
第１図）。チロシン投与による前処理により脳内
のチロシンの量が約80％増加し〔すなわち、
13.3μｇ／ｇ（食塩水を注射した動物の場合）か
ら24.6μｇ／ｇに増加した；Ｐ＜0.01〕、MOPEG
−SO₄の量は約70％増加した（すなわち、114n
ｇ／ｇから193nｇ／ｇに増加した；Ｐ＜0.01）。
この実験ではバリンの投与による前処理も行つた
が、この場合には脳内のチロシンまたはMOPEG
−SO₄の量は実質的に無変化であつた（すなわち
この２つの量はそれぞれ14.3μｇ／ｇおよび117n
ｇ／ｇであつた）。しかしながら、他のグループ
に対する実験の結果（第１図）から明らかなよう
に、脳内のチロシンおよびMOPEG−SO₄の量
は、試験動物自体とも密接に関連するものであつ
た。 第１図記載の相関関係は次の実験で得られたも
のであつた。複数のグループのラツテの各々の腹
膜内にバリン（200mg／Kg）、または、脳内吸収性
に関してチロシンと競合する性質を有するアミノ
酸（８）、またはチロシン（エチルエステルの形
のチロシン125mg／Kg）、または食塩水を注射し
た。30分後にこのラツテをシングルケージ（か
ご）に入れて寒冷環境（４℃）下に置いた。１時
間後に試験動物を全部殺し、その血液全部につい
て分析を行つてチロシンおよびMOPEG−SO₄の
量を測定した。対照動物には食塩を注射し、シン
グルケージに入れて室温（22℃）において90分間
保つた。グラフ中の各点は１つの脳の中に存在す
るチロシンおよびMOPEG−SO₄の量を表わす。
これらのデーターは、若干の実験結果を集計して
算出されたものであつた。室温において飼育され
た試験動物の脳内のチロシンおよびMOPEG−
SO₄の量はそれぞれ14.6μｇおよび80nｇ／ｇであ
つた。第１図のグラフにおいて、各符号は次の意
味を有する：黒丸……バリンで前処理された動物
における測定値；白丸……食塩水で前処理された
動物における測定値；白い四角……チロシンで前
処理された動物における測定値。 脳内のチロシンの量の生理学的バラツキもま
た、ノルエピネフリンの合成量およびターンオー
バー量（これは、MOPEG−SO₄の量の測定によ
り測定できる）に影響を与えるものであるかどう
かをみるために、次の実験を行つた。すなわち、
寒冷環境下に置いた試験動物における上記の代謝
産物の蓄積量を調べる操作を、チロシンの量を高
める思われる単純飼料（single meal）を食べさ
せた後に行つた。 １晩中絶食させた試験動物に無蛋白飼料（カゼ
イン０％）または40％カゼイン飼料を午前10時か
ら午前11時までの時間にわたつて与え、次いで試
験動物を寒冷環境（４℃）下に１時間保ち、次い
でこれを殺し、その脳を分析してチロシンおよび
MOPEG−SO₄の量を測定した。絶食させた対照
動物は、この２時間にわたつて室温（22℃）にお
いて保つた。 絶食させたラツテを寒冷環境下に保つことによ
り、その脳内のMOPEG−SO₄の蓄積を促進で
き、その量は123nｇ（22℃において保たれた絶
食対象動物）から163nｇに増加した（Ｐ＜0.05）。
この処理は脳内のチロシンの量には全く影響を与
えなかつた（10.1μｇ／ｇ対10.5μｇ／ｇ）。寒冷
環境下に置かれた動物のうちで、０％カゼイン飼
料または40％カゼイン飼料を投与した動物では、
脳内のMOPEG−SO₄の蓄積量が40−50％増加し
た（第表；Ｐ＜0.01）。０％カゼイン飼料を投
与した動物では脳内のチロシンの量が40％増加し
（Ｐ＜0.01）、一方、40％カゼイン飼料を食べた動
物では脳内のチロシンの量が77％増加した（Ｐ＜
0.01）。 無蛋白質飼料の投与が脳内のチロシンの量の増
加をもたらさなかつた場合には、脳内のMOPEG
−SO₄の量もまた増加しなかつた（第表）。こ
の実験において、蛋白質を投与した動物では脳内
のチロシンの量が約50％増加し（すなわち、
13.4μｇ／ｇから19.5μｇ／ｇに増加した；Ｐ＜
0.01）、かつこれに並行して脳内のMOPEG−SO₄
の量も増加した。 これらの実験データーから明らかなように、プ
ロベネシドで前処理するかまたは寒冷環境下に置
いたラツテでは、脳内のチロシンの量を増加させ
る処理を行うことにより、脳内のノルエピネフリ
ンの代謝産物であるMOPEG−SO₄の蓄積量を増
加させることができたのである。このような処理
は薬理学的処理（すなわち、チロシンの腹膜内注
射）または生理学的処理（すなわち、高蛋白質飼
料の投与）であつてよい。これらの処理は、脳内
のチロシン濃度に関して、その基質（サブストレ
ートのためのチロシンヒドロキシラーゼの高Km
性に匹敵する効果を与えるものである。この酵素
は、基質について制限条件があるという欠点を有
する。なぜならば、この酵素が活性化されたとき
に、その活性が、そのコフアクターに対する親和
性を選択的に高めるからである。 MOPEG−SO₄はラツテの脳内におけるノルエ
ピネフリンの主代謝産物であつて、これは、プロ
ベネシドに敏感なメカニズムにより脳外に運び出
される。プロベネシドの投与後にはMOPEG−
SO₄はラツテの脳内に、少なくとも60分間にわた
つて、時間に直線的に比例した量的割合で蓄積す
る。この時間の間は脳内のノルエピネフリンの量
は不変状態のまま保たれているから、MOPEG−
SO₄の蓄積率（蓄積量）は、ノルエピネフリンの
合成率を示す有用な指標として役立つものであ
る。この蓄積率は、ストレスを与えずにプロベネ
シド処理を行つたラツテの場合には、寒冷環境下
に置かれたラツテの場合よりも明らかに低かつた
（第表および第）。しかしながら、ラツテをこ
の２つの環境のうちのいずれの環境のもとで置い
た場合でも、上記の蓄積率は脳内のチロシンの量
に左右される値である。

【表】 ゼイン）

【表】 注：４−６匹のラツテを１グループとし、複数
のグループのラツテを１晩中飼料を与えず、次い
で試験飼料のうちの１つを午前10時に与えた。午
前11時から、この試験動物を４℃の寒冷環境の室
に１時間入れた。正午にこの試験動物を殺し、そ
の脳全体を分析してチロシンおよびMOPEG−
SO₄の量を測定した。実験では、試験動物は無
蛋白質飼料または40％蛋白質飼料をそれぞれ9.7
ｇまたは10.5ｇ消費し、実験におけるこれらの
飼料の消費量はそれぞれ6.2ｇまたは8.0ｇであつ
た。このデータは、±SEMの平均値として算出さ
れたものであつた。 例 この実施例は、脳内のチロシンの量を増加させ
ることにより脳内のドパミン放出量が増加できる
ことを例示したものである。 このチロシンの存在量の多少がカテコールアミ
ン神経伝達物質のシナプス内放出量に影響を与え
るものであるかどうかをみるために、試験動物の
脳内におけるドパミン代謝産物であるホモバニリ
ン酸（HVA）の蓄積量に及ぼすチロシン投与の
影響を調べた。この実験は、プロベネシド（脳脊
髄液からの有機酸の逸出を防止する化合物；スペ
クターおよびローレンゾー、1974年）またはハロ
ペリドール（中枢ドパミナージンクレセプターを
閉塞する作用を有する医薬；ウンガーステツト
等、1969年）で前処理された試験動物を用いて行
つた。脳内のチロシンの量を増加させることによ
り、ハロペリドール処理動物では脳内のHVA蓄
積が促進されたが、プロベネシド処理動物では該
HVA蓄積は促進されなかつた。 体重150−200ｇのオスのスプラグー−ドウレー
ラツテ〔チヤール、リバー、ブリージング、ラボ
ラトリーズ（ウイルミングトン、MA）から供給
されたもの〕に午前９時から午後９時までの間、
光線照射を行い〔「ビタライト」；ズロウーテス
ト、コンパニー（ノース、バーゲン、N.J.）製の
もの〕、そして「ビツグ、レツド、ラツト、チヤ
ウ」（チヤールス、リバー、ブリージング、ラボ
ラトリー製の飼料〕および水を自由に与えた。薬
品は腹膜内に２ml／Kg（体重）の注射量（容積）
で注射した。ハロペリドールとして、可溶性ハロ
ペリドール製剤〔マツクネイル、ラボラホリーズ
（ラ、ジヨラ、CA）製の「ハルドール」〕を投与
した。チロシンおよびプロベネシド〔シグマ、ケ
ミカル、コンパニー（セントルイス、MO）製の
もの〕は1N−NaOHに溶解し、そして、PH10.0
に調節した。対象動物には、所定の希釈剤のみを
投与した。チロシン（100mg／Kg）またはその希
釈物を注射してから20分後に、この動物にハロペ
リドール（２mg／Kg）またはプロベネシド（200
mg／Kg）を投与した。70分後にこの動物を首部切
断により殺した。脳を速やかに除去し、線状体
（ストリアタ）を切開して取出し（グロウインス
キーおよびイバーソンの方法、1966年）、ドライ
アイスで凍結させ、次いでHVAを定量した。残
りの脳のホモジネートを用いてチロシンを定量し
た（ワーカーおよびユーデンフレンドの方法、
1957年）。前記の残存脳ホモジネート試料中のチ
ロシンの濃度が前記線状体のホモジネート中のチ
ロシンの濃度と同様な値であるかどうかを確認す
るために、各グループからの６匹の処理動物（こ
のうちの若干の動物は、チロシンおよび／または
ハロペリドールを投与したものであつた）につい
て比較したところ、チロシン濃度の実質的な差異
は全く見出されなかつた。 チロシンヒドロキシラーゼの活性は、ウエイマ
イア等の方法（1971年）の変法に従つて調べた。
すなわち、線状体をその10倍量（容積単位）の
0.05M−トリスアセテート緩衝液（PH6.0）の中
でホモジナイズした。この緩衝液は「トリトン−
Ｘ−100」〔ハーレコ社（フイラデルフイア、
PA）〕を0.2％含むものであつた。かくして得ら
れたホモジネートに遠心分離操作を10000ｇにお
いて10分間行つた。その上澄液を集めて定量分析
を行つた（コイルの方法、1972年）。この場合の
定量用媒質の全容積は110μであり、そしてそ
の中に次のものが含まれていた。：上澄流体50μ
；DMPH₄（すなわち２−アミノ−４−ヒドロ
キシ−６，７−ジメチル−５，６，７，８−テト
ラヒドロプテリジンハイドロクロライド）〔カル
バイオケム社（サンジエゴ、CA）製のもの〕
65nmol；ピリドキサルホスフエート29ナノモ
ル；２−メルカプトエタノール４ナノモル；カタ
ラーゼ240ユニツト；ホスフエート緩衝液（PH
6.2）0.01ミリモル；ブタの腎臓から調製された
芳香族Ｌ−アミノ酸デカルボキシラーゼ（コイ
ル、1972年）10μ．試料は37℃において２分間
プレインキユベートした。 最終濃度0.1ｍＭの定量用媒質にＬ−１− ¹⁴C
−チロシン（比活性度0.90μCi／ｍmol）10μを
添加し、そしてこの試料を37℃において30分間イ
ンキユベートすることにより反応を開始させた。
この定量を10％トリクロロ酢酸0.5mlの添加によ
り停止した。この酸性化媒質を其後に２時間とん
とうして ¹⁴CO₂を回収した。この ¹⁴CO₂は、
NCS−組織溶解剤0.2ml中に置かれた紙片（折
り重ねたもの）にトラツプさせた。前記溶解剤は
アマーシヤム／サール（アーリングトン、ハイ
ツ、IL）製のものであつた。次いでこの紙片
を、アクアゾル10mlを含むシンチレーシヨンバイ
アル〔ニユー、イングランド、ニユクリア社（ボ
ストン、MA）製のもの〕に移してその放射能を
測定した。ブランク（空試験）では、沸騰上澄液
またはモノヨードチロシン（0.2ｍＭ）を含む完
全定量混合物を使用した。両方の方法において、
同様な結果が得られた。 チロシン投与により、ハロペリドール処理ラツ
テの線状体内のHVA蓄積量が著しく増加した
（59％増加；Ｐ＜0.001）（第２図）。しかしなが
ら、プロベネシド処理動物の場合には、脳内のチ
ロシンの量を当量値まで増大させた場合でさえ、
HVA蓄積量は変化しなかつた（第２図）。ハロ
ペリドールを投与したラツテでは、線状体内の
HVAの濃度と脳内のチロシンの濃度との間に密
接な相関関係が認められた（ｒ＝0.70；Ｐ＜
0.01）（第２図）。一方、プロベネシドを投与した
動物では、このような相関関係は全く認められな
かつた。 プロベネシドを投与したラツテでは脳内のチロ
シンの量を変化させることによりHVAを蓄積す
ること（および、これによつてドパミンを生成さ
せること）はできないが、このことから、この場
合にはレセプター伝達型フイードバツク機構が作
動して、そのために線状体内のドパミンレセプタ
ーの活性化機構がドパミン合成抑制機構と結びつ
くために、HVAの蓄積およびドパミンの生成は
行われないのであると思われる。 すなわち、この場合にはチロシン投与により、
プロベネシド投与動物の線状体の合成量および放
出量が最初のうちは増大するが、其後にドパミン
レセプターの活性が増大し、このフイードバツク
作用によりドパミンの生成量が減少し、このドパ
ミン生成量の低下がHAVの生成量の低下を招く
のであると思われる。一方、ハロペリゾール処理
動物では上記のフイードバツク機構（ただし、こ
の機構は推定機構である）が作動せず、そのため
にチロシンの量がドパミンの合成量に影響を与
え、この影響は絶えず続き、ドパミンの放出が促
進された後でさえ上記の影響が絶えず続くのであ
ると思われる。 プロベネシド処理ラツテでは、チロシンヒドロ
キシラーゼの動力学的性質（kinetic properties）
のフードバツク型変化があつたために、チロシン
投与が線状体内のHVAの蓄積をもたらさないの
であるという仮説の真偽を確認するために、我々
は、我々の実験グループの各々から提供された動
物脳試料について、チロシンおよびそのプテリン
−コフアクターに対する前記酵素の親和性を調べ
た。試験管試験では、チロシンの前期（prior）
投与は、DMPH₄のチロシンに対するチロシンヒ
ドロキシラーゼのKmsは影響を与えなかつた。
既述の如く（ジブコビツク等、1974年；ジブコビ
ツクおよびグイドツチ、1974年）、ハロペリドー
ルの投与はDMPH₄に対する該酵素のKmの低下
をもたらしたのである。（第表）。 第２図は、ハロペリドールまたはプロベネシド
を投与したラツテの線状体中のHVA蓄積量に及
ぼすチロシン投与の影響を具体的に示したもので
ある。ラツテにチロシン（100mg／Kg）またはそ
の希釈剤を投与し、その20分後にハロペリドール
（２mg／Kg）またはプロベネシド（200mg／Kg）を
投与し、第２回目の注射を行つてから70分後にこ
のラツテを殺し、分析操作を行い、その結果を第
２図のグラフに示した。第２図には、ハロペリド
ールを投与した試験動物のデーターは白丸で示
し、ハロペリドールとチロシンとの両者を投与し
た試験動物のデーターは黒丸で示した。ハロペリ
ドールを投与したすべての試験動物では、線状体
内のHVAの量と脳内のチロシンの量との間に密
接な相関関係が認められた（ｒ＝0.70；Ｐ＜
0.01）。これとは対照的に、プロベネシドのみを
投与した試験動物（ｎ＝17）の線状体内のHVA
の量は、プロベネシドとチロシンとの両者を投与
した試験動物（ｎ＝11）におけるHVAの量と大
体同じであつた。各グループにおける脳内のチロ
シン濃度および線状体中のHVA濃度はそれぞれ
次の通りであつた：プロベネシド投与グループ
17.65±1.33μｇ／ｇおよび1.30±0.10μｇ／ｇ；プ
ロベネシド＋チロシン投与グループ44.06±3.91μ
ｇ／ｇおよび1.31±0.11μｇ／ｇ；ハロペリドー
ル投与グループ17.03±0.97μｇ／ｇおよび2.00±
0.10μｇ／ｇ；ハロペリドール＋チロシン投与グ
ループ36.02±2.50μｇ／ｇおよび3.19±0.20μｇ／
ｇ。

【表】 第表記載のデーターは、次の実験の結果を示
したものである。すなわちチロシンヒドロキシラ
ーゼの活性を調べるために線状体試料の定量を、
チロシン濃度を0.125−1.0ｍＭとしてそして
DMPH₄濃度を0.1−0.5ｍＭとして行つたのであ
る。ハロペリドールをチロシンと一緒に、または
一緒にせずに投与した試験動物の場合には、プロ
ベネシドを投与した試験動物の場合よりも、
DMPH₄に対するチロシンヒドロキシラーゼの
Kmの値が著しく低かつた（Ｐ＜0.001；本研究者
のｔ−テスト）。 さらに、これらのデーターは次の仮説の正当性
を支持するものである。すなわち、チロシンヒド
ロキシラーゼは常に生体中でそのアミノ酸基質で
飽和され得るものでは限らず、換言すれば、（ハ
ロペリドールによる）ドーパミン−レセプターの
閉塞（遮断）の結果として、ドパミンを通常の場
合よりも一層多く合成するような脳を有する動物
では、チロシンヒドロキシラーゼは常に生体中の
そのアミノ酸基質で飽和され得るものとは限らな
いという仮説は正当であると思われる。さらにま
た、前記のデータから次のことも容易に理解され
得るであろう。すなわち、（チロシン投与により）
前記酵素の飽和度を一層高めることにより、ド
パ、カテコールアミン神経伝達物質およびドパミ
ンの生成量のみならず該伝達物質の放出量もまた
一層増大できるのである。チロシンによりドパミ
ンの合成および放出を制御することにより次の病
気が治療でき、すなわち、ハルペリドール投与後
のパーキンソン病の如き、ドパミナージツクノイ
ロンの興奮がしばしば起る病気が治療できるので
ある。 例 この実施例は、動物の血清中のプロラクチンの
量を減少させるためには、チロシンの投与が有利
であることを例示したものである。 複数のグループのオスのラツテ（１グループは
４匹からなる）にレセルピンを腹膜内に４日間に
わたつて投与した。投与量は2.5mg／Kg／日であ
つて、１日分の投与量を２等分して、２回に分け
て投与した。５日目の朝はレセルピンを投与せず
にその代りに、全体の半分の試験動物にチロシン
（200mg／Kg）を投与し、残りの半分にはベヒクル
（食塩水）のみを投与し、２時間後に殺した。血
清を集めて、放射線を用いる免疫学的定量法によ
りプロラクチンを定量した。得られた実験データ
ーを次表に示す。

【表】 上表中のデーターは、平均値±標準誤差の形で
表わしたものである。 ＊Ｐ＜0.005（ベヒクルのレベルと比較した値）。 上記の実験結果から明らかなように、チロシン
の投与により血清中のプロラクチンの量が減少す
るのである。かように、人体において血清中のプ
ロラクチンの量が多い場合には、このアミノ酸の
投与により、該プロラクチンの量を具合よく減少
させることができる。この治療法はドパを用いる
治療法よりも一層望ましいものである。なぜなら
ば、ドパは体内のすべての細胞においてドパミン
に変換されるものであるために、多くの副作用を
有するからである。これに対しチロシンは、この
伝達物質（すなわちチロシン）を通常生成する細
胞（これは体内および脳内に存在する）の中でし
かドパミンに変換されないので、チロシンは実質
的な副作用は全く有しない。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例記載の実験の結果を示したグ
ラフである。第２図は実施例記載の実験の結果
を示したグラフである。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 血清中のプロラクチンの量を低下させる組成
   物において、チロシン、フエニルアラニン、また
   はチロシンとフエニルアラニンとの混合物を約５
   −200mg／Kg（体重）含むアミノ酸製剤を含有す
   ることを特徴とする組成物。 ２ 特許請求の範囲第１項記載の組成物におい
   て、 (イ) 血清中のプロラクチンの量を増加させる薬剤
   と、 (ロ) チロシン、フエニルアラニン、またはチロシ
   ンとフエニルアラニンとの混合物を約５−200
   mg／Kg（体重）含有する中性アミノ酸製剤 とを含有することを特徴とする組成物。