JPS63313068A - 抗原の測定試薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 Ａ、産業上の利用分野 本発明は、抗原抗体反応を利用した免疫学的測定法に用
いられる抗原の測定試薬に関するしのである。

Ｂ１発明の概要 本発明は免疫学的測定法のうちのサンドイツチ法に用い
られろ測定試薬において、 免疫グロブリンのうちの結晶化部位を切離した残りの抗
原結合部位に標識体を結合して標識抗体を構成すると共
に、標識抗体または固相抗体のうちの少なくとも一方を
モルモットの血清にもとづいて調製することによって、 標識抗体の固相抗体に対する非特異的吸着の量を抑え、
これにより測定感度を向上させ、良好な再現性が得られ
るようにしたちのてある。

Ｃ３従来の技術 抗原抗体反応は、抗原と抗体とが特異的に結合するとい
う特徴と、可成り低い濃度であっても反応が起こるとい
う特徴とを備えており、こうした特徴を利用することに
より抗原や抗体の微量測定が可能である。このような測
定法は免疫学的測定法と呼ばれ、大別して競合法と非競
合法とに分けられる。競合法の代表例としては第１抗体
固相法が挙げられ、また非競合法の代表例としてはサン
ドイツチ法が挙げられる。ここに本発明はサンドイツチ
法を対象としており、以下にサンドイツチ法の具体的内
容及び従来技術の欠点について述へろ。

先ず抗原、例えば癌胎児性抗原（ＣＥＡ）をウサギに定
期的に皮下注射により投入し、このウサギの血清から前
記抗原にもとづいて生じた免疫グロブリンを得、これを
例えばポリスチレンボールよりなる固相に吸着させて固
相抗体を調製する。

一方前記免疫グロブリンに標識体、例えばグルコースオ
キシダーゼ（以下ｒＧＯＤｊという）を結合させて標識
抗体を調製する。ここで人体内の前記抗原の量を調べる
ためには、先ず測定対象となる抗原を固相抗体に接触さ
せろと、抗原は固相抗体に特異的に吸着される。次いで
これに標識抗体を作用させると、標識抗体は抗原に特異
的に吸着される。即ち抗原は固相抗体と標識抗体に挾ま
れた状態になる。次いで標識抗体のＣＯＤの量を測定す
る。この測定は、ＣＯＤにグルコースを作用させて過酸
化水素を発生させ、この過酸化水素にルミノールを作用
させて発光量を調べるいわゆる化学発光法により行われ
、抗原の固相抗体への吸着量はＣＯＤの測定量から間接
的に求まる。

こうした免疫学的測定法に用いられる試薬としては、標
識抗体及び固相抗体をいずれもウサギの血清にもとづい
て調製したウサギ標識抗体−ウサギ固相抗体、あるいは
いずれらヤギの血清にもとづいて調製したヤギ標識抗体
−ヤギ固相抗体等が従来用いられていた。

Ｄ９発明が解決しようとする問題点 ところで、サンドイツチ法の測定原理からすれば、標識
抗体の固相抗体への直接吸着数は０であることか理想で
あるが、実際には標識抗体の一部は同相抗体へ非特異的
に吸着されてしまう。測定感度及び再現性を良くするた
めには、この非特異的な吸着量をできるだけ低く抑える
ことが重要である。

従来の測定試薬について非特異的吸着率をみると、ウサ
ギの場合ではおよそ４．８Ｘｌ（Ｉ’〜３６．８Ｘ１０
−”％、ヤギの場合ではおよそ７．ｌＸｌ０−’〜１６
゜０ＸＩＯ−’％と可成り高い値になっている。なお非
特異的吸着率とは標識抗体の総量に対する非特異的吸着
量の割合である。こうした事情から動物種の組み合わせ
を検討したところ、標識抗体及び固相抗体の少なくとも
一方をモルモットの血清にもとづいて調製した試薬を用
いれば、非特異的吸着率を例えば１．８Ｘ１０−”〜２
．３Ｘ１０−”％程度に抑えられろことが判明した。

しかしながらこの場合でも十分な測定感度を得ることが
できず、信頼性の高い測定を行うためには更に非特異的
吸着率を低く抑えることが要求される。本発明はこうし
た要求に応えるためになされたものであり、その目的は
上記の非特異的吸着率の低い測定試薬を提供することに
ある。

Ｅ２問題点を解決するための手段 本発明では、先ず抗原を投入した例えばモルモットの血
清から免疫グロブリン（以下ｒ　Ｉ　ｇＧｊという）を
得る。このＩｇＧは第１図に示すように結晶化部位（以
下ｒＦｃＪという）に２つの抗原結合部（以下ｒ　Ｆ　
ａ　ｂ　’ｊという）が結合してなるしのである。ここ
にＦｃは抗原との結合力がなく、低温て結晶化セる性質
をらった部位てあり、Ｆ　ａ　ｂ　’は、抗原が特５′
ｌ！的吸着されろ部分を先端部に備えた部位である。そ
してＩｇＧを一点鎖線で示すように切断゛４゛ろことに
よりＦｃを取り除いてＰａｂ’を得、このＦ　ａ　ｂ　
’に例えばＣＯＤ　（グルコースオキンダーゼ）を結合
したものを標識抗体として用いろ。また固相抗体として
は、抗原を投入した例えばモルモットの血清から得られ
たＩｇＧを固相に吸着したしのを用いろ。そして標識抗
体及び固相抗体における動物種については、少なくとも
一方にモルモットを用いる。

Ｆ、実施例 （１）実施例１ 抗原であるα−フェトプロティン（以下ＦＡＩ”Ｐｊと
いう）をモルモットに定期的に皮下注射し、このモルモ
ットの血清にもとづいて調製したＩｇＧからＰｃを切断
してＦａｂ’を得、このＦａｂ’にＧＯＤを結合したも
のを標識抗体として用いると共に、前記１ｇＧをポリス
チレンボールに吸着したものを固相抗体として用いろ。

なおＡＦＰは肝癌の診断に用いられている。

以下に実施例１の調製法について説明する。

（ａ）ＩｇＧの調製 モルモットの血清２１を採取してこれに飽和硫安２ｍＱ
を一滴ずつ滴下し、温度４℃で２〜３時間ゆっくりと撹
拌する。これにより得られた自局状の反応液を遠沈管に
入れて３０００ｒｐｍの回転数て１５分間遠心分離し、
次いで上澄液を捨てて、沈澱物にＱ、ＯＯ５ｍｏＱ／Ｑ
のＥＤＴＡを含む０．１ｍｏ（１／（ｌのリン酸緩衝ｔ
Ｌ（ｐＩ（６，０）２ｘσを加えて溶解する。その後溶
解した液を、前記混合液で平衡化した商品名セファクリ
ル３００のカラム（ＩＸ９０ｃｍ、ファルマシア製）に
６　ｍ（１／　ｈｏｕｒの速度で通して溶出させ、試験
管に１１ずつ分取する。続いて分取した液体のうちのＩ
ｇＧの吸光度に相当する吸光度２Ｂ０ｎｘの部分を集め
て、ＩｇＧを得る。

（ｂ）Ｆａｂ’の調製 上記の（ａ）で調製したＩｇＧを、０．０５ｔｏ１７／
ｆ２の塩化ナトリウムを含む０　、０７　ｍｏＱ／Ｑの
酢酸緩衝液（ｐＨ４，０）によって温度４℃で１８時間
透析し、得られたＩｇＧにＩｇＧ・ペプシンの重量比が
１００＋３となるようにペブノン溶液を０．１　斑Ｑ加
え、温度３７℃の恒温槽内にてＸ８時時間分させる。そ
の後この溶液を、０　、　ｌ　、ｗｏＯ，／　ｌ）。

のリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）で平衡化した商品名セフ
ァクリル２００のカラム（ｌ　Ｘ　９０　ｃｍ、　’７
アルマシア製）に６ｍ（／ｈｏｕｒの速度で通して溶出
させ、溶出液を試験管にＩＲＱずつ分取する。

続いて分取した液体のうちのＦ（ａｂ’）２の吸光度に
相当する吸光度２８０ｎｘの部分を集めてＦ（ａｂ’）
ｔを得る。このＦ（ａｂ’）ｔとは２個のＦａｂ’の結
合体である。更に得られたＦ　（ａｂ　’）　２に０　
、１　ｒｔｔｏＱ／　（ｌメルカプトエチルアミンを０
，０５ｘＱ加えて温度３７℃で９０分間反応させ、Ｆ　
ａ　ｂ　’同士の結合を切断する。しかる後にこの反応
液を商品名セファデックスＧ２５のカラム（ｌＸ３０ｃ
ｍ、ファルマシア製）に６ｍＱ、／ｈｏｕｒの速度で通
すことに上り脱塩処理を行い、その溶出液を試験管に１
ｍＱずつ分取することによりＦａｂ’の濃縮液が得られ
る。

（ｃ）マレイミドＣＯＤの調製 ０、「わ１２＃のリン酸緩衝液を０．３村ずつ入れた試
験管を４本用意し、各々にＣＯＤを約３ｑずつ入れ、更
にサクシニミジル−４−マレイミドブヂレイト（ＧＭＢ
Ｓ）を、ＣＯＤとＣＭＢＳのモル比が１：５０となるよ
うに添加する。こうして得られた溶液を、０　、１　ｔ
ｔｔｏＱ／　１２のリン酸緩衝液で平衡化した商品名セ
ファデックスＧ２５のカラム（ｌＸ９０ｃｍ、ファルマ
シア製）にｌ　２ｉ１２／ｈ　ｏ　ｕ　ｒの速度で通し
て脱塩処理し、その溶出液を試験管にｌ肩Ｑずつ分取し
てマレイミドＣＯＤを得る。

（ｄ）標識抗体の調製 上記の（ｃ）で得たマレイミドＣＯＤと上記の（ｂ）で
得たＦａｂ’とを等モルずつ混和して、温度３０℃で１
時間静置後、温度４℃で１晩放置する。そしてこの溶液
を、０　、００５　ｍｏＱ／ＱのＥＤＴＡを含むＯ、ｌ
　ｍｏＱ／Ｑのリン酸緩衝液（ｐＨ６，５）で平衡化し
た商品名セファクリル３００のカラム（ｌＸ９０ｃｍ、
ファルマシア製）に６ｍＱ／　ｈ　ｏ　ｕ　ｒの速度で
通して溶出させ、その溶出液を試験管に１ｊＩＱずつ分
取してＦａｂ’にＣＯＤが結合した標識抗体を得ろ。そ
してこの標識抗体に０．１％のＮ　ａ　Ｎ３、Ｏ、１％
のウシ血清アルブミン（ＵＳＡ）となるように添加し、
温度４℃で保存する。

（ｅ）固相抗体の調製 モルモットの血清にもとづいて、上記の（ａ）における
調製と同様にしてＩｇＧを得、０．ｌｒｘｇ／ｒｎＱの
ＩｇＧを含む０．１＋ｏ０．／Ｑのリン酸緩衝液（ｐＨ
７，５）に固相となる直径６，５ｕのポリスチレンボー
ル（以下ｒＰＢｊという）を浸漬して温度４℃で１晩静
置した。その後ポリスチレンボールをＯ、ｌ　次ｏＱ／
　Ｑのリン酸緩衝液（ｐＨ７，５）で３回洗浄し、０　
、１　ｔｔｔｏＱ／　ＱのＮａＣ，（２，０，１％ｌ３
ＳＡ及び０．１％ＮａＮ３を含む０．０１　尻ｏＱ／Ｑ
リン酸緩衝液（ｐｉ（７，０）で３回洗浄した後、ＰＢ
を当該混合液に浸漬して温度４℃で保存する。

こうしてＩｇＧによりコーティングされたＰＢ。

即ち同相抗体が得られる。

（２）実施例２ 同相抗体をウサギの血清にもとづいて調製した他は実施
例１と全く同様にして標識抗体−固相抗体の組み合わせ
を得た。

（３）実施例３ 固相抗体をヤギの血清にもとづいて調製した他は実施例
１と全く同様にして標識抗体−固相抗体の組み合わせを
得た。

（４）実施例４ 標識抗体をウサギの血清にもとづいて調製した他は実施
例１と全く同様にして標識抗体−固相抗体の組み合わせ
を得た。

（５）実施例５ 標識抗体をヤギの血清にもとづいて調製した他は実施例
１と全く同様にして標識抗体−固相抗体の組み合わせを
得た。

（６）実施例６〜ｌＯ 実施例１〜５について抗原としてＡＦＰの代わりにＣＥ
Ａを用いた標識抗体−固相抗体の組み合わせを夫々実施
例６〜１０とする。なお、ＣＥＡは大腸癌の診断に用い
られている。

Ｇ、比較例 （１）比較例１ 抗原としてのＡＦＰをモルモットに定期的に皮下注射し
、このモルモットの血清にもとづいて得たＩｇＧにＣＯ
Ｄを結合したものを標識抗体として用いろと共に、固相
抗体としては実施例１と同様のものを用いた。

ここで標識抗体の調製について説明ずろと、上記の（、
ａ）項にて得られたＩｇＧを０．Ｏ０５ｍｏＱ／ＱＥＤ
ＴＡを含む０．１尻ｏＱ／Ｑのリン酸緩衝液（ｐＨ６，
０）２ｘＣに加え、この液とＳ−アセチルメルカプトこ
はく酸とを、Ｓ−アセチルメルカプトこはく酸とＩｇＧ
とがモル比で３００　＋　１となるようにＤ　Ｍ　Ｆ　
（Ｎ　−ｄｉｘｅｔｙｌｒｏｒｉａｍｉｄｅ）に添加し
て溶解し、室温で３０分間撹拌する。次いでこの溶液を
０　、１　＊ｏＱ／（ｌのトリス−塩酸（ｐ）（７，０
）０　、１　ｘ（１，０、１ｘｏＱ／　ＱのＥＤＴＡ　
（ｐＨ７，０）０．０’２ｘＱ及びｌ肩ｏＱ／Ｑのヒド
ロキシアミン水溶液（ｐＨ７，０）０，１ｘＣの混合液
に添加して温度３０℃で４分間反応させ、その後この反
応液を、０．００５ｘｏｆ２／ｆ２ＥＤＴＡ含む０　、
１　ｊＩｏ（１／　ｆ２のリン酸緩衝液（ｐＨ６，０）
で平衡化した商品名セファデックスＧ２５のカラム（Ｉ
Ｘ３０ｃｍ、ファルマシア製）に１２ｘｉ２／ｈｏｕｒ
の速度で通すことに上り脱塩処理を行い、溶出液を試験
管に１ＭＱずつ分取することによりＳＨ基の結合したＩ
ｇＧを得、これを集めて水冷中のコロジオンバックで濃
縮する。こうして得られたＳＨ−１ｘＣと上記の（ｃ）
項で得られたマレイミドＣＯＤとを等モル混合し、上記
の（ｄ）項で述べた調製法と同様にしてＳｌｌ−ＩｇＧ
にマレイミドＣＯＤが結合した標識抗体を得る。

（２）比較例２ 標識抗体−固相抗体の動物種の組み合わせをウサギ−ウ
サギとした他は実施例１と全く同様にして標識抗体−固
相抗体の組み合わせを得た。

（３）比較例３ 標識抗体−固相抗体の動物種の組み合わせをヤギ−ヤギ
とした他は実施例１と全く同様にして標識抗体−固相抗
体の組み合わ仕を得た。

（４）比較例４〜６ 比較例１〜３について抗原としてＡＦＰの代わ４りにＣ
ＥＡを用いた標識抗体−固相抗体の組み合わせを夫々比
較例４〜６とする。

以上のようにして得られた実施例及び比較例の各側にお
ける標識抗体−固相抗体の組、み合わせを表１に示す。

表　　１ ０、比較試験 （１）非特異的吸着 実施例１−１０及び比較例１〜６を、標識抗体の固相抗
体に対する非特異的吸着について比較した。操作手順は
次のとおりである。

先ず標識抗体を０　、１１１ｏ（１／　（ｌのＮａＣｌ
２液、０．１％のｌ３ＳＡ及び０．１％のＮ　ａ　Ｎ　
３を含む０．Ｏ１肩ｏＱ／Ｑリン酸緩衝液（ｐＨ７，０
）Ｃ以下この混合液をｒ　ＡｌｊＬｊという）で１００
倍に希釈した液をＯ、ｌ　ｘＱ採取し、これにＡ液を０
．２ｘσ加えた溶液に固相抗体を浸漬して、室温で１晩
静置する。

その後固相抗体を取出してＡ液により３回洗浄し、新し
い試験管に移し変えろ。次いでこの試験管に０　、５　
ｔｘｏＱ／Ｑのグルコースを含む０　、０１　ｎｏ（１
／Ｑの酢酸緩衝液（ｐ　■■５　、１）を０　、３　ｙ
（ｌ添加して温度３７℃で２時間静置する。しかる後に
この溶液の０．１Ｊ！＋２をサンプリングし、２　ｘ　
ｌ　Ｏ−７ｘｏＱ／Ｑのルミノールを含む０．２ｍｏｆ
２／（２の炭酸緩衝液（ｐ　Ｉ（９、８）との混合液を
０．！５ｍＱ加え、更に６　Ｘ　Ｉ　Ｏ−”屑ｏ（１／
Ｑのフェリシアン化カリ水溶液０　、５　ｙ、（ｌを添
加して１５秒待った後３０秒間の発光量を積算する。こ
の発光量は固相抗体に非特異的吸着された標識抗体の量
Ｘ１に対応する。一方標識抗体の総ｆｆ１ｘｚは予め判
っているので、非特異的吸着率は（ｘ　ｌ／　Ｘ　２）
Ｘ　ｌｏ　ｏとして算出される。こうして得られた実験
結果を表２に示す。

表　　２ 表２から判るように標識抗体としてＦａｂ’を用いると
共に標識抗体または固相抗体のうちの少なくとも一方を
モルモットの血清にもとづいて得た場合（実施例１−１
０）には、標識抗体としてＩｇＧを用いかつ例えば標識
抗体−固相抗体の動物種の組み合わせをモルモット−モ
ルモットとした場合（比較例１，４）に比較して非特異
的吸着率が昔しく小さい。また標識抗体としてＰａｂ’
を用いても、標識抗体及び固相抗体の動物種の組み合わ
せがウサギ−ウサギ（比較例２．５）、ヤギ−ヤギ（比
較例３，６）である場合には、非特異的吸着率はモルモ
ット由来１ｇｃ−モルモット由来１ｇＧの組み合わせと
同程度である。従って標識抗体としてＦａｂ’を用いた
ことのみならず、動物種の組み合わせも非特異的吸着に
大きな影響を及ぼすと考えられる。

（２）抗原の測定範囲及び検出限界 実施例１〜１０及び比較例１〜６を、抗原の測定範囲及
び検出限界について比較した。検出限界はＦ検定（ｎ＝
ｌｏ）にもとづいて測定した。操作手順は次のとおりで
ある。なお抗原かＣＥＡの場合についても全く同様であ
る。

抗原Ａ　ＦＰにもとづいて得られた固相抗体を、上記の
Ａ液で希釈したＡＦＰの標桑液０．「ｌにＡ液０．２１
を添加した溶液中に浸漬し、室温で６時間静置する。そ
の後固相抗体を取り出してＡ液により３回洗浄し、抗原
ＡＦＰにらとづいて得られた標識抗体をＡ液で最適希釈
倍率に希釈した溶液０　、　Ｉ　Ｊｌ（！とＡ液０．２
ｘＱとの混合液に、洗浄後の固相抗体を浸漬して室温で
１晩静置する。そして固相抗体をＡ液で３回洗浄してか
ら新しい試験管に移し変え、この試験管に０．５ＲＱ／
Ｑのグルコースを含む０．Ｏ１肩ｏＯ，ＩＱの酢酸緩衝
液（ｐＨｓ、ｔ）０．３ｍＱ添加して温度３７°Ｃで２
時間静置する。

しかる後にこの溶液の０　、１　ｍＱ、をサンプリング
し、２ｘ　１０−７ｍｏＱ／　Ｑのルミノールを含む０
　、２　ｔｎｏＱ／Ｑの炭酸緩衝液（ｐ　Ｈ９、８）を
０　、５　ｍＱ、加え、更に６　ｘ　ｌ　０−３ｙｔｏ
Ｑ／Ｑ、のフェリシアン化カリ水溶液０　、５　ｍＱを
添加して１５秒待った後３０秒間の発光量を積算する。

この発光量は固相抗体に捉えられたＡＦＰに吸着された
標識抗体の量、即ちＡＦＰの量に対応する。

こうして得られた測定範囲の結果を表３に示し、検出限
界の結果を表４に示す。

表　　３ 表４ 表３１表４から判るように標識抗体としてＦａｂ’を用
いると共に標識抗体または固相抗体のうちの少なくとも
一方をモルモットの血清にもとづいて得た場合には、標
識抗体としてＩｇＧを用いた場合、あるいは標識抗体と
してＦａｂ’を用いかつ動物種の組み合わせがウサギ−
ウサギ、ヤギ−ヤギである場合に比較して非特異的吸着
率が小さいことから測定範囲及び検出限界のいずれにつ
いても改善される。

（３）再現性 上記の（２）にて求めた比較例２の検出限界における同
時再現性及び日差再現性を実施例１〜５と比較例１〜３
とについて調べると共に、比較例６の検出限界における
同時再現性及び日差再現性を実施例６〜１０と比較例４
〜６とについて調べた。ここで同時再現性とは連続して
測定した場合の再現性であり、また日差再現性とは測定
日が異なる場合の再現性である。再現性については平均
値上標準偏差と変動係数とにより評価した。実施例１〜
５と比較例１〜３との再現性試験については抗原として
ＡＦＰを用い、また実施例６〜ｌＯと比較例４〜６との
再現性試験については抗原としてＣＥＡを用いた。結果
を夫々表５１表６に示す。

表　　５ 表　　６ 表５９表６から判るように同時再現性及び日差再現性の
いずれについてら、標識抗体としてＦ　ａ　ｂ　’を用
いるとＪ（に標識抗体または同相抗体におけろ動物種の
少なくとも一方にモルモットを用いた組み合わせの方が
ウサギ由来Ｆａｂ’−ウサギ由来Ｉ　ｇＧＴＪｔびヤギ
由来Ｆａｂ’−ヤギ由来ＩｇＧのいずれの組み合わせよ
りも良好である。

以上の実施例では抗原としてＡＦＰまたはＣＥＡを用い
ているが、他の抗原、例えばヒト胎盤性ゴナドトロピン
、インシュリン、ＩｇＥ、α１−ミクログロプリン等を
用いても同様の結果を得た。

更に本発明では、Ｆ　ａ　ｂ　’に結合する標識体とし
てＣＯＤの代わりに他の酵素、例えば西洋ワサビペルオ
キシダーゼ、β−Ｄ−ガラクトシターゼ。

グルコース−６−リン酸脱水素酵素、アルカリホスファ
ターゼ等を用いてもよい。また標識体としては、酵素を
用いる代わりに蛍光物質（ｒｌｕｏｒｅｓ−ｃｅｉｎｉ
ｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅＳｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ
ｒｈｏｄａｍｉｎｅｉｓｏ−ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ等
）、化学発光物質（ａｍｉｎｏｅｔｈｙｌｅｔ−ｈｙｌ
ｉｓｏｌｕｍｉｎｏｌｌａｍｉｎｏｂｕｔｙｌｅｔｈｙ
ｌｉｓｏｌｕｍｉｎｏｌ。

ａｍｉｎｏｐｅｎｔｙｌｅｔｈｙｌｉｓｏｌｕｍｉｎｏ
ｌＳａｍｉｎｏｈｅｘｙｌｅｔｈｙｌ−ｉｓｏｌｕｍｉ
ｎｏｌ等）、あるいは放射性同位元素（３Ｈ２＋４０．
３２ｐ、　１ｆｆ５　　、１３１１等）を用いてもよい
。

■１発明の効果 以上のように本発明によれば、ＩｇＧのうちのＰｃを切
離した残りのＰａｂ’に標識体を結合したちのを標識抗
体として用いると共に、標識流０と固相抗体とにおける
動物種の組み合わせも非ｒ。

異的吸着に大きな影響を与えることに着眼して、標識抗
体または固相抗体におけろ動物種のうちの少なくとも一
方にモルモットを用いているため、実施例及び比較例の
比較試験結果から判るように、標識抗体の固相抗体に対
ずろ非特異的吸着率を低く抑えることができ、これによ
って抗体の測定範囲の拡大、検出限界の向上を図ること
ができ、良好な再現性を得ることができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は免疫グロブリンを示す構造図である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 抗原を投入した動物の血清から得られた免疫グロブリン
   を固相に吸着させて固相抗体を調製し、この固相抗体に
   前記抗原を特異的に吸着させ、更に前記免疫グロブリン
   に標識体を結合してなる標識抗体を、前記固相抗体に吸
   着されている抗原に特異的に吸着させ、前記標識体の量
   を調べることによって間接的に前記抗原の吸着量を求め
   る免疫学的測定方法に用いる抗原の測定試薬において、
   前記免疫グロブリンのうちの結晶化部位を切離した残り
   の抗原結合部位に標識体を結合して標識抗体を構成し、 標識抗体または固相抗体のうちの少なくとも一方をモル
   モットの血清にもとづいて調製したことを特徴とする抗
   原の測定試薬。