JPS6336B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はタラタンニン含有培地中でペニシリウ
ム クリソゲナムを培養し（以下この工程を第１
工程と云う）、ついでその培養物を37〜60℃で温
置する（以下この工程を第２工程と云う）ことを
特徴する没食子酸の新規改良製法に関する。 ペニシリウム クリソゲナムを培養して没食子
酸を製造することは特公昭47−41550号公報に記
載されている。この方法はタラタンニン含有培地
中でペニシリウム クリソゲナムを培養してタン
ナーゼを蓄績せしめ、このタンナーゼの作用によ
りタラタンニンを没食子酸とキナ酸とに分解して
没食子酸を単離することからなる没食子酸の製造
法である。しかしこの従来法では、タラタンニン
を完全に分解するには長時間要し、また培地の高
温滅菌時にタラ粉末中の高分子物質が溶出して高
粘度を呈し、この培地にペニシリウム クリソゲ
ナムを培養した場合増殖した菌体と高分子物質と
で泥状となり、その為に菌体の分離あるいは没食
子酸の精製等の後処理に支障をきたし、この方法
は没食子酸の工業的製法として満足すべきもので
はなかつた。 そこで本発明者らは更に工業的に有利な没食子
酸の製法を確立すべく種々検討した結果、ペニシ
リウム クリソゲナムの培養条件とタンナーゼの
最適作用条件とが異なることに注目し、両条件を
合理的に組み合わせることにより簡便でしかも効
率よく没食子酸を製造できるとの知見を得、本発
明を完成した。 第１工程の目的はタラタンニン含有固体培地に
ペニシリウム クリソゲナムを培養してタンナー
ゼを蓄績せしめながらタラタンニンを分解するこ
とにあり、第２工程の目的は未分解タラタンニン
および／または後に説明する追加タラタンニンの
分解を完結せしめることにある。 第１工程はタラタンニンを担体とを混合し、こ
れに硫酸マグネシウム、リン酸塩、尿素、塩化ア
ンモニウム、硫安の如き塩類の溶液を、含水率が
40〜60％となるように散布し、滅菌した後ペニシ
リウム クリソゲナムの種こうじを加えて固体培
養することにより行なえる。タラタンニンは、タ
ラ（Caesalpina Spinosa）の粉末あるいはその
抽出物の形で用いてもよい。担体としては、ケイ
ソウ土やパーライトの如きケイ酸塩類、もみが
ら、おがくずまたはこれらの混合物がその例とし
て挙げられる。担体の使用量は、担体およびタラ
タンニンの種類等で異なるが、滅菌中あるいは培
養中に粘結や団粒化が生じない程度用いられる。
例えば、タラタンニンとしてタラ粉末を用いる場
合には、通常タラ粉末の25〜100％重量の担体が
用いられる。ペニシリウム クリソゲナムとして
は、例えば、微工研に寄託されているWH−３株
（寄託番号第499号）が好ましく用いられる。第１
工程の培養は、第１表に示すようなペニシリウム
クリソゲナムの生育最適条件下、すなわち５〜
37℃、なかんずく約30℃において、通常24時間前
後行なうのが好ましい。

【表】

【表】 第２工程は、第１工程の培養物を37〜50℃で温
置することにより行なわれる。第２工程は、タン
ナーゼの活性が最も強く発揮され、しかも効率よ
く利用される条件下で行なうべきである。その為
に例えば、タンナーゼの至適PHおよび温度で温置
するとか、あるいは温置の前にタラタンニンを追
加補充してタンナーゼの利用率を高めるとか、が
行なわれる。なお、タンナーゼの活性は第２表お
よび第３表に示すように、37〜50℃、特に40〜45
℃で、PH５〜８、なかんずくPH6.5〜7.5において
最も強く発揮される。

【表】

【表】

【表】 以上の説明から明らかなように、本発明の最も
好ましい実施の態様はタラタンニン含有固体培地
中でペニシリウム クリソゲナムWH−３株を約
30℃で24時間前後培養し、その培養物にタラタン
ニンを追加補充しPH6.5〜7.5で、40〜45℃におい
て温置することである。 かくして生成する没食子酸は、第２工程の反応
物を熱水で抽出し、更に再結晶することにより単
離できる。熱水抽出は、第２工程をカラム中で行
ない、ついでこれに熱水を通して行なうのが工業
上有利である。 次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明す
る。なお、各実施例における収率はタラ粉末また
はその抽出物中のタラタンニンからの没食子酸の
収量から算出した。 実施例 １ 300mlのビーカに7.8ｇのタラタンニンを含有す
るタラ粉末20ｇ、パーライト５ｇ、もみがら10ｇ
をとり、これに尿素0.8、燐酸一カリウム0.24ｇ、
燐酸二カリウム0.24ｇ、硫酸マグネシウム0.04ｇ
を含有する溶液15mlを加えてよく混和した後100
℃で30分間滅菌する。冷後2.8％水酸化ナトリウ
ム水溶液20mlを散布し、別に５日間、タラ粉末を
加えたふすまに培養して得られたペニシリウム
クリソゲナムWH−３株の種こうじ１ｇを加え、
よく混合して30℃で24時間培養し６ｇ（収率77.2
％）の没食子酸を含む培養物を得る。ついでこの
培養物を45℃で24時間温置し6.7ｇ（収率85.3％）
の没食子酸を含む反応物67ｇを得る。 実施例 ２ 実施例１と同様にして得た培養物20ｇに0.1N
−NaOH溶液を加えて径20mmのカラムに充填す
る。これを45℃で24時間温置して2.3ｇ（収率
96.3％）の没食子酸を含む反応物を得る。カラム
に３倍量の熱水を通し（流速SV＝１）、2.2ｇ
（収率93％）の没食子酸を含む抽出液を得る。な
お抽出濃度は最高5.8％であつた。 実施例 ３ 第１工程の培養および第２工程の温置の条件を
種々変化させた場合の没食子酸の収率をみ、次の
結果を得た。

【表】 実施例 ４ 実施例１と同様にして得た没食子酸1.0ｇを含
有する培養物に、タラ粉末の抽出して得たタラタ
ンニンの種々量（変量０〜5.2ｇ）を添加し、PH
6.5、45℃、40時間温置して次表の結果を得た。

【表】 添加区収量−対照区収量
＊ 増加率(％)＝

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ タラタンニン含有固体培地中でペニシリウム
   クリソゲナムを培養し、ついでその培養物を37〜
   50℃で温置することを特徴とする没食子酸の製
   法。 ２ ペニシリウム クリソゲナムがWH−３株で
   ある特許請求の範囲第１項記載の製法。 ３ 培養温度が５〜37℃である特許請求の範囲第
   １または２項記載の製法。 ４ 温置をPH５〜８において行なう特許請求の範
   囲第１項記載の製法。 ５ タラタンニンを更に加えた後温置する特許請
   求の範囲第１または４項記載の製法。 ６ タラタンニンとしてタラ粉末またはその抽出
   物を用いる特許請求の範囲第１または５項記載の
   製法。 ７ タラ粉末またはその抽出物含有培地中でペニ
   シリウム クリソゲナムWH−３株を約30℃で24
   時間前後培養し、その培養物にタラ粉末またはそ
   の抽出物を加えPH6.5〜7.5で40〜45℃で温置する
   特許請求の範囲第１〜６項の内のいずれか一項記
   載の製法。