JPS6342639B2 - - Google Patents
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- JPS6342639B2 JPS6342639B2 JP55158566A JP15856680A JPS6342639B2 JP S6342639 B2 JPS6342639 B2 JP S6342639B2 JP 55158566 A JP55158566 A JP 55158566A JP 15856680 A JP15856680 A JP 15856680A JP S6342639 B2 JPS6342639 B2 JP S6342639B2
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
- Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
- Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
- Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
本発明は、ヒト副甲状腺ホルモン（ｈ―PTH）
〔１−38〕フラグメントに関する。さらに詳しく
は、本発明は、式 で表わされるペプチドまたはその塩に関する。 上記の新規ペプチド〔〕は副甲状腺ホルモン
活性を有し、しかもこれを抗原として得られる抗
体はｈ−PTHと免疫交又活性を有する。このた
め、本ペプチドはｈ―PTHの抗体調製用ペプチ
ドとしても有用である。 本発明の目的化合物〔〕は、式〔〕で示さ
れるアミノ酸順序に個々のアミノ酸または低級ペ
プチドを縮合して構成せしめ、縮合反応の最終段
階で側鎖の官能基の保護基を脱離することにより
得られる。縮合反応自体はペプチド合成のための
常法手段に従つて、保護基の着脱、縮合反応を繰
り返すことにより行なわれる。即ち、本目的化合
物の原料ならびにすべての中間体の製造において
使用される各種保護基はペプチド合成で既知なも
の、従つて加水分解、酸水解、還元、アミノリシ
スまたはヒドラジノリシスのような既知手段によ
つて容易に脱離することのできる保護基が用いら
れる。このような保護基はペプチド合成化学の分
野の文献ならびに参考書に記載されている。 例えば、アミノ基に使用する保護基としては、
ホルミル基、トリフルオロアセチル基、フタロイ
ル基、ｐ―トルエンスルホニル基、ｏ―ニトロフ
エニルスルフエニル基などのアシル基、ベンジル
オキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）―ブロモベ
ンジルオキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）−クロ
ロベンジルオキシカルボニル基、ｐ―ニトロベン
ジルオキシカルボニル基、ｐ―メトキシベンジル
オキシカルボニル基などのベンジルオキシカルボ
ニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、
ｔ―ブチルオキシカルボニル基、ｔ―アミルオキ
シカルボニル基、ジイソプロピルメチルオキシカ
ルボニル基などの脂肪族オキシカルボニル基、２
―フエニル―イソプロポキシカルボニル基、２―
トリル―イソプロポキシカルボニル基、２―ｐ―
ジフエニル―イソプロポキシカルボニル基などの
アラルキルオキシカルボニル基などがある。また
これらアミノ基をベンゾイルアセトン、アセチル
アセトンなどの１，３―ジケトンと反応させるこ
とによつて得られるエナミンの形成により保護す
ることができる。 カルボキシル基は、アミド形成、ヒドラチド形
成またはエステル化によつて保護される。即ちア
ミド基は３，４―ジメトキシベンジル基、ビス―
（ｐ―メトキシフエニル）メチル基などによつて
置換される。ヒドラチド基はベンジルオキシカル
ボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル
基、トリフルオロアセチル基、ｔ―ブチルオキシ
カルボニル基、トリチル基、２―ｐ―ジフエニル
―イソプロポキシカルボニル基などによつて置換
される。エステル基はメタノール、エタノール、
ｔ―ブタノール、シアノメチルアルコールなどの
アルカノール、ベンジルアルコール、ｐ―ブロモ
ベンジルアルコール、ｐ―クロロベンジルアルコ
ール、２，６―ジクロロベンジルアルコール、ｐ
―メトキシベンジルアルコール、ｐ―ニトロベン
ジルアルコール、ベンズヒドリルアルコール、ベ
ンゾイルメチルアルコール、ｐ―ブロモベンゾイ
ルメチルアルコール、ｐ―クロロベンゾイルメチ
ルアルコールなどのアラルカノール、２，４，６
―トリクロロフエノール、２，４，５―トリクロ
ロフエノール、ペンタクロロフエノール、ｐ―ニ
トロフエノール、２，４―ジニトロフエノールな
どのフエノール、チオフエノール、ｐ―ニトロチ
オフエノールなどのチオフエノールなどによつて
置換される。 前記セリンの水酸基は、例えばエステル化また
はエーテル化によつて保護することができる。こ
のエステル化に適する基としては、例えばアセチ
ル基、ベンゾイル基、ベンジルオキシカルボニル
基、エチルオキシカルボニル基などである。また
エーテル化に適する基としては、例えばベンジル
基、テトラヒドロピラニル基、ｔ―ブチル基であ
る。これらの水酸基の保護には２，２，２―トリ
フルオロ―１―ｔ―ブチルオキシカルボニルアミ
ノエチル基、２，２，２―トリフルオロ―１―ベ
ンジルオサシカルボニルアミノ基も適する。しか
しながら、これらの水酸基を必らずしも保護する
必要はない。 前記アルギニンのグアニジノ基中のアミノ基を
保護するのに使用する基としては、例えばニトロ
基、トシル基、ベンジルオキシカルボニル基、メ
シチレン―２―スルホニル基などであるが、この
グアニジノ基を必ずしも保護する必要はない。 前記ヒスチジンのイミノ基を保護するのに使用
する基としては、例えばベンジル基、トリチル
基、ベンジルオキシカルボニル基、トシル基、
２，２，２―トリフルオロ―１―ｔ―ブチルオキ
シカルボニルアミノエチル基、２，２，２―トリ
フルオロ―１―ベンジルオキシカルボニルアミノ
エチル基などであるが、このイミノ基を必ずしも
保護する必要はない。 前記メチオニンのチオメチル基はメチルスルホ
キシド基にして副反応を防止するのが好ましい
が、必らずしも酸化して保護する必要はない。 本発明においては、α―アミノ基の保護にｔ―
ブチルオキシカルボニル基、ｐ―メトキシベンジ
ルオキシカルボニル基を用い、側鎖のアミノ基の
保護にベンジルオキシカルボニル基を用い、α―
カルボキシル基の保護にメチルエステル基、ベン
ジルエステル基を用い、側鎖のカルボキシル基の
保護にベンジルエステル基を用い、セリンの水酸
基を全く保護する場合には、その保護基にベンジ
ル基を用い、アルギニンのグアニジノ基中のアミ
ノ基の保護にメシチレン―２―スルホニル基を用
いるのが好ましい。 本目的化合物〔〕の合成においては、個々の
アミノ酸もしくは低級ペプチドの縮合は、例えば
保護されたα―アミノ基および活性化末端カルボ
キシル基をもつアミノ酸またはペプチドと遊離α
―アミノ基および保護された末端カルボキシル基
をもつアミノ酸またはペプチドとを反応させる
か、あるいは活性化α―アミノ基および保護され
た末端カルボキシル基をもつアミノ酸またはペプ
チドと遊離の末端カルボキシル基および保護され
たα―アミノ基をもつアミノ酸またはペプチドを
反応させることにより実施することができる。 この場合、カルボキシル基は、例えば酸アジ
ド、酸無水物、酸イミダゾリドまたは活性エステ
ル、例えばシアノメチルエステル、チオフエニル
エステル、ｐ―ニトロチオフエニルエステル、ｐ
―ニトロフエニルエステル、２，４―ジニトロフ
エニルエステル、２，４，５―トリクロロフエニ
ルエステル、２，４，６―トリクロロフエニルエ
ステル、ペンタクロロフエニルエステル、Ｎ―ヒ
ドロキシコハク酸イミドエステル、Ｎ―ヒドロキ
シフタル酸イミドエステルなどに変換することに
よつて活性化することができる。またカルボジイ
ミド、例えばＮ，N′―ジシクロヘキシル―カル
ボジイミド、Ｎ―エチル―N′―３―ジメチルア
ミノプロピル―カルボジイミド、Ｎ，N′―カル
ボニル―ジイミダゾールまたはイソオキゾリウム
塩、例えばウツドワード反応剤などの縮合剤を使
用して反応させることによつて活性化することが
できる。 本発明において好ましい縮合方法は、アジド
法、活性エステル法およびカルボジイミド法であ
る。縮合の各段階ではラセミ化が起らない方法ま
たはラセミ化が最少になる方法を用いるのが望ま
しく、好ましくはアジド法、活性エステル法、ビ
ユンシユ法、〔Z.Naturforsch.，21b，426（1966）〕
またはガイガー法〔Chem.Ber.，103，788
（1970）〕などを用いるのが適する。 縮合順序は式〔〕で示されるアミノ酸順序で
あれば、如何なる順序からも合成し得るが、Ｃ―
末端側から順次アミノ酸またはペプチドを連結さ
せるのが好ましい。 例えば、29〜38番のアミノ酸順序からなるＣ―
末端フラグメントと25〜28番のアミノ酸からなる
ペプチドフラグメントを縮合させるのがよい。こ
のＣ―末端フラグメントとテトラペプチド25−28
を縮合させるにはアジド法によつて行うのが適す
る。得られたＣ―末端フラグメント25−38の前に
22〜24番のアミノ酸順序からなるペプチドフラグ
メントを連結させるのであるが、ガイガー法によ
り行うのが適する。得られたＣ―末端フラグメン
ト22―38の前に順次19〜21番のアミノ酸順序から
なるペプチドフラグメント、16〜18番のアミノ酸
順序からなるペプチドフラグメント、13〜15番の
アミノ酸順序からなるペプチドフラグメント、８
〜12番のアミノ酸順序からなるペプチドフラグメ
ント、４〜７番のアミノ酸順序からなるペプチド
フラグメントおよび１〜３番のアミノ酸順序から
なるペプチドフラグメントを連結させるのが好ま
しい。これらの縮合はアジド法で行うのが適す
る。 前記のＣ―末端フラグメント25−38は、Ｃ―末
端フラグメント29−38にその残りのアミノ酸順序
25−28からなるペプチドフラグメントをアジド法
により連結させるのがよい。Ｃ―末端フラグメン
ト29−38は、ヘキサペプチドフラグメント33−38
にジペプチドフラグメント31−32をアジド法によ
り連結させ、その前に残りのアミノ酸順序に各々
のアミノ酸を活性エステル法により連結させるの
がよい。 上記の縮合反応におけるα―アミノ基の保護
基、例えばｔ―ブチルオキシカルボニル基、ｐ―
メトキシベンジルオキシカルボニル基はトリフル
オロ酢酸で脱離される。α―カルボキシル基の保
護基、例えばメチルエステルはこれを希薄な水酸
化ナトリウム溶液で分解しまたはヒドラチドある
いはトリクロロエトキシカルボニルヒドラチドの
ような保護ヒドラチドに変え、またベンジルエス
テル基は無水弗化水素分解、水素添加分解によつ
て分解し、またはヒドラチドに変えることができ
る。 こうして保護されたα―アミノ基、ξ―アミノ
基、カルボキシル基、側鎖カルボキシル基、グア
ニジノ基および（または）水酸基を有するオクタ
トリアコンタペプチドが得られる。これらの保護
基は、好ましくは酸分解、例えば無水弗化水素ま
たはトリフルオロメタンスルホン酸による方法に
よつて一段階で脱離され、式〔〕の目的化合物
が得られる。メチオニンのメチルスルホキシド基
をチオメチル基に還元する場合には、ジチオスレ
イトール、チオグリコール酸、メルカプトエタノ
ール、エタンジチオールなどによつて行つてもよ
い。 このようにして得られたペプチド〔〕は、ペ
プチドまたは蛋白質を精製する公知の手段によつ
て分離精製することができる。例えば、セフアデ
ツクスＧ−25（商品名、フアルマシア社製、ゲル
過剤、デキストランゲル）、セフアデツクスＧ
−50（商品名、フアルマシア社製、ゲル過剤、
デキストランゲル）、セフアデツクスLH−20（商
品名、フアルマシア社製、ゲル過剤、ヒドロキ
シプロピル化デキストランゲル）などのゲル過
剤を用いるゲル過、カルボキシメチルセルロー
ス、イオン交換樹脂などを用いるカラムクロマト
グラフイー、高速液体クロマトグラフイーなどに
より行うことができる。 本発明のペプチド〔〕は、その方法の条件に
より塩基またはその塩の形で得られる。塩として
は、無機酸塩、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリ
コール酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン
酸などの有機酸との塩である。 本ペプチド〔〕はある種の無機物質または有
機物質を付加して錯体を形成し得る。この錯体と
は添加した時に生成し、ペプチドに持続作用を与
える化合物を意味する。ヒトの腎臓より取り出し
た細胞膜またはヒトの骨細胞を使用して本発明品
〔〕および対象品〔ｈ―PTH（１−34）〕のサイ
クリツクAMP合成能について、Endoclinol.92，
692（1973）の方法により測定した。 その結果を比較すると、腎臓細胞膜を用いた場
合のサイクリツクAMP合成能は、既知のｈ―
PTH（１−34）が2300U／mgに対し、本発明のｈ
―PTH（１−38）は7000U／mgで約３倍の活性を
有する。同様に骨細胞を用いた場合のサイクリツ
クAMP合成能は、既知のｈ―PTH（１−34）が
3000U／mgに対し、本発明のｈ―PTH（１−38）
は9000U／mgで約３倍の活性を示した。 以上の通り、本発明のｈ―PTH（１−38）は公
知のｈ―PTH（１−34）より極めて強い生物活性
を有する。 尚、本明細書中に記載の略記号は次の意味を有
する。 Phe；Ｌ―フエニルアラニン Tyr；Ｌ―チロシン Asn；Ｌ―アスパラギン His；Ｌ―ヒスチジン Met；Ｌ―メチオニン Val；Ｌ―バリン Asp；Ｌ―アスパラギン酸 Gln；Ｌ―グルタミン Leu；Ｌ―ロイシン Lys；Ｌ―リジン Arg；Ｌ―アルギニン Trp；Ｌ―トリプトフアン Glu；Ｌ―グルタミン酸 Ile；Ｌ―イソロイシン Ser；Ｌ―セリン Gly；グリシン Ｚ；ベンジルオキシカルボニル Boc；ｔ―ブトキシカルボニル Ｚ（OMe）；Ｐ―メトキシベンジルオキシカル
ボニル Mts；NG―メシチレン―２―スルホニ
ル OBzl；ベンジルエステル OMe；メチルエステル OTCP；２，４，５―トリクロロフエニル
エステル ONp；Ｐ―ニトロフエニルエステル OSu；Ｎ―ヒドロキシコハク酸イミドエ
ステル NHNHTroc；トリクロロエチルオキシカルボニ
ルヒドラジド NHNH2；ヒドラジド TFMSA；トリフルオロメタンスルホン酸 MSA；メタンスルホン酸 TFA；トリフルオロ酢酸 TosOH；Ｐ―トルエンスルホン酸 HCl；塩化水素 Et3N；トリエチルアミン CHA；シクロヘキシルアミン DCHA；ジシクロヘキシルアミン DCC；NN′―ジシクロヘキシルカルボ
ジイミド HOBT；１―ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル EDTA；エチレンジアミン四酢酸塩 DMF；ジメチルホルムアミド DMSO；ジメチルスルホキシド MeOH；メタノール EtOH；エタノール BuOH；ブタノール CHCl3；クロロホルム THF；テトラヒドロフラン エーテル；ジエチルエーテル TLC；薄層クロマトグラフイー 次に実施例を挙げて本発明の製造例を具体的に
説明する。 尚、これら実施例で使用した薄層クロマトグラ
フイー（TLC）、およびカラムクロマトグラフイ
ーの担体及び溶媒系、アミノ酸分析の条件は次の
通りである。 ＜TLCおよびカラムクロマトグラフイー＞ 担体；シリカゲルＧ 溶媒系； １ CHCl3―MeOH（10：0.5） ２ CHCl3―MeOH―水（８：３：１） ３ CHCl3―MeOH―酢酸（９：１：0.5） ４ BuOH―ピリジン―酢酸―水（４：１：１：
２） ５ BuOH―ピリジン―酢酸―水（４：１：１：
１） ＜アミノ酸分析＞ 加水分解条件； １ 6N―塩酸で110℃、24〜48時間封管中で加熱
する。 ２ 4N―MSA110℃、24〜48時間封管中で加熱
する。 実施例 １ ｈ―PTH（１−38）；Ｈ―Ser―Val―Ser―Glu
―Ile―Gln―Leu―Met―His―Asn―Leu―
Gly―Lys―His―Leu―Asn―Ser―Met―Glu
―Arg―Val―Glu―Trp―Leu―Arg―Lys―
Lys―Leu―Gln―Asp―Val―His―Asn―Phe
―Val―Ala―Leu―Gly―OHの製造 Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu（OBzl）―Ile―Gln
―Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu―Gly―Lys
（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―Met（Ｏ）―Gln
（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）―Trp
―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―
Asp（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala
―Leu―Gly―OBzl148.3mg（0.0254mM）にｍ―
クレゾール0.58ml（5.59mM）を加える。これに
2M―TFMSAと2Mチオアニソール含有TFA溶
液5.59mlを加え０℃で１時間、25℃で１時間撹拌
後、エーテルを加え、生じた沈澱物を分離する。
得られた粉末を水10mlに溶解しアンバーライト
CG―4B樹脂（アセテート型）1.5ｇを加え30分間
撹拌する。樹脂を除去後、溶液に1Nアンモニア
水２mlを加え０℃で30分間撹拌し、酢酸酸性とし
た後、凍結乾燥する。これを水２mlに溶解し、ジ
チオスレイトール0.78ｇ（5.08mM）を加え60℃
で36時間撹拌後、1N酢酸１mlを加え、セフアデ
ツクスＧ―25のカラム（３×95cm）に注入し、
1N酢酸で溶出する。溶出液を５mlづつ分画し、
活性画分（42〜56本目）を集め凍結乾燥して白色
粉末62.8mgを得る。得られた白色粉末60mgを
0.01M酢酸アンモニウム―8M尿素水溶液に溶解
し、カルボキシルメチルセルロースのカラム
（1.8×12cm）に注入し、0.01M酢酸アンモニウム
―8M尿素水溶液（PH5.1）300mlと0.1M酢酸アン
モニウム―8M尿素水溶液（PH5.1）300mlの間で
直線濃度勾配をかけて溶出を行なう。溶出液を５
mlづつ分画し、活性画分（101〜114本目）を集め
透析後、セフアデツクスＧ―25のカラム（３×95
cm）で脱塩を行ない凍結乾燥して白色粉末35mgを
得る。これを水30mlに溶解し、カルボキシメチル
セルロースのカラム（1.8×12cm）に注入し、水
150mlと0.2M酢酸アンモニウム水溶液の間で直線
濃度勾配をかけて溶出を行なう。溶出液を５mlづ
つ分画し、活性画分（37〜45本目）を集め、セフ
アデツクスＧ―25のカラム（３×95cm）で脱塩を
行ない、凍結乾燥して白色粉末12.1mgを得る。こ
の粉末をブタノール―ピリジン―酢酸―0.6M酢
酸アンモニウム水溶液（５：３：0.2：10）で充
填したSephadex Ｇ―50のカラム（1.8×95cm）
にチヤージし、これをできるだけ少量のブタノー
ル―ピリジン―酢酸―0.6M酢酸アンモニウム水
溶液（５：３：0.2：10）の上層で溶出する。溶
出液を３mlづつ分画し、活性画分（６〜10本目）
を集め、減圧濃縮する。これをセフアデツクスＧ
―25のカラム（３×95cm）で脱塩を行ない、凍結
乾燥して白色粉末6.0mgを得る。得られた白色粉
末1.125mgを水25mlに溶解し、コスモシル5C18の
カラム（0.461×15cm）に注入し、溶媒として
0.1Mリン酸を含有する0.1％酢酸―アセトニトリ
ル（73：27）を用い、高速液体クロマトグラフイ
ー分取を行なう、これのメインピークを分取し、
そのままセフアデツクスＧ―25のカラム、1N酢
酸を溶出液として脱塩し、凍結乾燥して、白色粉
末0.8mgを得る。高速液体クロマトグラフイーに
よる分取を３回行ない白色粉末の目的物2.4mgを
得る。 上記の原料は次のようにして製造される。 Ｐ（１―38） Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu
（OBzl）―Ile―Gln―Leu―Met（Ｏ）―His―
Asn―Leu―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―
Ser―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―
Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）
―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔44〕の製造 Ｐ（37−38）Ｚ（OMe）―Leu―Gly―OBzl〔１〕 Ｈ―Gly―OBzl・TosOH42.1ｇをDMF200ml
に溶解し、Et3N18.3mlでPH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Leu―ONp54.6ｇ、Et3N18.3mlを加え
室温で18時間撹拌する。反応後、DMFを減圧下
留去し、残渣を酢酸エチルに溶かす。５％クエン
酸、食塩水、５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残
渣にエーテルを加え結晶を得る。MeOH―エー
テルから再結晶化して目的物42.3ｇ（収率76％）
を得る。 融点；94〜95℃ 〔α〕20 D；−7.8゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf1＝0.53 元素分析〔C24H30O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 65.14 6.83 6.33 測定値 65.40 6.67 6.51 Ｐ（36−38）Ｚ（OMe）−Ala−Leu―Gly―
OBzl〔２〕 〔１〕5.02ｇにアニソール2.46ml、TFA9.84ml
を加え、残渣をｎ―ヘキサンで３回洗浄し乾燥す
る。これをDMF20mlに溶解し、Et3N1.6mlでPH
７に調節後、Ｚ（OMe）―Ala―ONp4.27ｇ、
Et3N1.6mlを加え室温で20時間撹拌する。反応
後、DMFを減圧下留去し、残渣に５％クエン酸、
エーテルを加え生じた沈澱物を取する。この沈
澱物を５％クエン酸、水、５％重曹水、水の順で
洗浄し、DMF−MeOHから再結晶化して目的物
3.20ｇ（収率81％）を得る。 融点；148〜150℃ 〔α〕20 D；−13.9゜（Ｃ＝0.6、DMF） TLC；Rf1＝0.38 元素分析〔C27H35O7N3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.14 6.87 8.18 測定値 62.87 7.13 7.95 Ｐ（34〜35） Ｚ（OMe）―Phe―Val―OMe
〔３〕 Ｈ―Val―OMe25.15ｇをDMF250mlに溶解し、
Et3N21mlでPH７に調節後、Ｚ（OMe）―Phe―
OH49.40ｇをTHF250mlに溶解して加える。−10
℃に冷却してDCC37.14ｇを加えて３時間、室温
で15時間撹拌する。反応後、沈澱物を除去して、
DMF、THFを減圧下留去し、残渣を酢酸エチル
および５％クエン酸と共にふりまぜる。有機層を
５％クエン酸、５％重曹水、食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮す
る。残渣にエーテルを加え結晶を得る。MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物47.98ｇ（収
率72％）を得る。 融点；132〜133℃ 〔α〕20 D；−8.7゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf1＝0.69 元素分析〔C24H30O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 65.14 6.83 6.33 測定値 65.00 6.98 6.44 Ｐ（34−35）Ｚ（OMe）―Phe―Val―NHNH2
〔４〕 〔３〕44.25ｇをMeOH400mlに溶解しこれにヒ
ドラジン水和物25.04mlを加え、室温で一夜放置
する。析出した結晶をEtOHで取し、DMF―
EtOHから再結晶化して目的物36.59ｇ（収率83
％）を得る。 融点206〜208℃ 〔α〕20 D−8.0゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.52、Rf3＝0.60 元素分析〔C23H30O5N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 62.42 6.83 12.66 測定値 62.16 6.78 12.57 Ｐ（34−38）Ｚ（OMe）―Phe―Val―Ala―
Leu―Gly―OBzl〔５〕 〔２〕3.02ｇにアニソール1.91ml、TFA7.46ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣をｎ―ヘキサンで３回洗浄し乾燥して
油状物を得る。 一方、〔４〕2.87ｇをDMF8mlに溶かし、これ
に、−50℃に冷却下4.78N―HCl／DMF溶液3.26
ml、次いで亜硝酸イソアミル1.03mlを加える。−
20℃で20分間撹拌後、再度−50℃に冷却し、
Et3N3.27mlを加え、これに上記で得られた油状
物をDMF50mlに溶解し、Et3N0.82mlでPH７に調
節した溶液を加える。０〜７℃で２日間撹拌後、
反応液を減圧濃縮し、残渣に５％クエン酸、エー
テルを加える。生じた沈澱を取し、５％クエン
酸、５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF−
MeOHから再結晶化して目的物3.97ｇへ（収率
87.7％）を得る。 融点；249〜250℃ 〔α〕20 D；−20.1゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf1＝0.26、Rf3＝0.82 アミノ酸分析；Val0.92(1)、Phe1.02(1)、
Gly1.00(1)、Ala1(1)、Leu1.03(1) 元素分析〔C41H53O9N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 64.80 7.03 9.22 測定値 64.66 7.06 9.38 Ｐ（33−38）Ｚ（OMe）―Asn―Phe―Val―
Ala―Leu―Gly―OBzl〔６〕 〔５〕3.52ｇにアニソール1.51ml、TFA6.04ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱を
取する。得られた粉末をDMSO10ml、DMF10
mlに溶解し、Et3N0.65mlを加えてPH７に調節後、
これにHOBT0.1ｇ、Ｚ（OMe）―Asn―
ONp1.93ｇおよびEt3N0.65mlを加え室温で２日
間撹拌する。反応液に５％クエン酸、エーテルを
加え沈澱物を取する。５％クエン酸、水、５％
重曹水、水の順で洗浄する。DMSO―MeOHか
ら再結晶化して目的物3.03ｇ（収率74.9％）を得
る。 融点；260〜262℃ 〔α〕20 D；−20.1゜（Ｃ＝1.1、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf4＝０ アミノ酸分析；Asp0.99(1)、Gly0.98(1)、Ala1
(1)、Val0.96(1)、Leu1.01(1)、Phe0.95(1) 元素分析〔C45H59O11N7として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 61.84 6.84 11.22 測定値 61.82 6.82 11.41 Ｐ（31−38）Ｚ（OMe）―Val―Asn―Phe―
Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔７〕 〔６〕2.73ｇにアニソール1.69ml、TFA6.76ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧留去
し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱を取す
る。 Ｚ（OMe）―Val―His―NHNH2 1.50ｇ 4.78N―HCl／DMF 2.82ml 亜硝酸イソアミル 0.60ml DMF ５ml Et3N 2.52ml Ｚ（OMe）―Val―His―NHNH2を前回〔５〕
の方法と同様にして得られたアジド溶液に、上記
で得た粉末をDMSO10ml、DMF10mlに溶解し、
Et3N0.44mlでPH７に調節した溶液を加える。０
〜７℃で２日間撹拌後、反応液を減圧濃縮し、残
渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加える。生じた
沈澱を取し、５％クエン酸、水、５％重曹水、
水の順で洗浄する。DMSO―MeOHから再結晶
化して目的物2.81ｇ（収率81.2％）を得る。 融点；242〜244℃ 〔α〕20 D；21.8゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝０ アミノ酸分析；Val1.93(2)、His1.03(1)、
Asp1.01(1)、Gly0.98(1)、Ala1(1)、Leu1.00(1)、
Phe0.98(1) 元素分析〔C56H75O13N11・H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.61 6.88 13.66 測定値 59.55 6.96 13.59 Ｐ（30−38）Ｚ（OMe）―Asp（OBzl）―Val―
His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―
OBzl〔８〕 〔７〕2.81ｇにアニソール1.64ml、TFA6.56ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱を
取する。得られた粉末をDMSO10ml、DMF10
mlに溶かし、Et3N0.71mlを加え、PH７に調節後、
これにＺ（OMe）―Asp（OBzl）―ONp1.54ｇ、
Et3N0.43mlを加え室温で２日間撹拌する。反応
液を減圧濃縮し残渣に５％クエン酸、酢酸エチル
を加え沈澱物を取する。５％クエン酸、５％重
曹水、水の順で洗浄する。DMSO―MeOHから
再結晶化して目的物2.55ｇ（収率76.5％）を得
る。 融点；250℃以上で分解 〔α〕20 D；−16.4゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf3＝０ アミノ酸分析；Asp2.05(2)、Gly0.98(1)、Ala1
(1)、Val2.01(2)、Leu1.01(1)、Phe0.99(1)、His0.87
(1) 元素分析〔C67H86O16N12・3H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 58.76 6.77 12.27 測定値 58.84 6.68 11.87 Ｐ（29−38）Ｚ（OMe）―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl
〔１−38〕フラグメントに関する。さらに詳しく
は、本発明は、式 で表わされるペプチドまたはその塩に関する。 上記の新規ペプチド〔〕は副甲状腺ホルモン
活性を有し、しかもこれを抗原として得られる抗
体はｈ−PTHと免疫交又活性を有する。このた
め、本ペプチドはｈ―PTHの抗体調製用ペプチ
ドとしても有用である。 本発明の目的化合物〔〕は、式〔〕で示さ
れるアミノ酸順序に個々のアミノ酸または低級ペ
プチドを縮合して構成せしめ、縮合反応の最終段
階で側鎖の官能基の保護基を脱離することにより
得られる。縮合反応自体はペプチド合成のための
常法手段に従つて、保護基の着脱、縮合反応を繰
り返すことにより行なわれる。即ち、本目的化合
物の原料ならびにすべての中間体の製造において
使用される各種保護基はペプチド合成で既知なも
の、従つて加水分解、酸水解、還元、アミノリシ
スまたはヒドラジノリシスのような既知手段によ
つて容易に脱離することのできる保護基が用いら
れる。このような保護基はペプチド合成化学の分
野の文献ならびに参考書に記載されている。 例えば、アミノ基に使用する保護基としては、
ホルミル基、トリフルオロアセチル基、フタロイ
ル基、ｐ―トルエンスルホニル基、ｏ―ニトロフ
エニルスルフエニル基などのアシル基、ベンジル
オキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）―ブロモベ
ンジルオキシカルボニル基、ｏ（またはｐ）−クロ
ロベンジルオキシカルボニル基、ｐ―ニトロベン
ジルオキシカルボニル基、ｐ―メトキシベンジル
オキシカルボニル基などのベンジルオキシカルボ
ニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル基、
ｔ―ブチルオキシカルボニル基、ｔ―アミルオキ
シカルボニル基、ジイソプロピルメチルオキシカ
ルボニル基などの脂肪族オキシカルボニル基、２
―フエニル―イソプロポキシカルボニル基、２―
トリル―イソプロポキシカルボニル基、２―ｐ―
ジフエニル―イソプロポキシカルボニル基などの
アラルキルオキシカルボニル基などがある。また
これらアミノ基をベンゾイルアセトン、アセチル
アセトンなどの１，３―ジケトンと反応させるこ
とによつて得られるエナミンの形成により保護す
ることができる。 カルボキシル基は、アミド形成、ヒドラチド形
成またはエステル化によつて保護される。即ちア
ミド基は３，４―ジメトキシベンジル基、ビス―
（ｐ―メトキシフエニル）メチル基などによつて
置換される。ヒドラチド基はベンジルオキシカル
ボニル基、トリクロロエチルオキシカルボニル
基、トリフルオロアセチル基、ｔ―ブチルオキシ
カルボニル基、トリチル基、２―ｐ―ジフエニル
―イソプロポキシカルボニル基などによつて置換
される。エステル基はメタノール、エタノール、
ｔ―ブタノール、シアノメチルアルコールなどの
アルカノール、ベンジルアルコール、ｐ―ブロモ
ベンジルアルコール、ｐ―クロロベンジルアルコ
ール、２，６―ジクロロベンジルアルコール、ｐ
―メトキシベンジルアルコール、ｐ―ニトロベン
ジルアルコール、ベンズヒドリルアルコール、ベ
ンゾイルメチルアルコール、ｐ―ブロモベンゾイ
ルメチルアルコール、ｐ―クロロベンゾイルメチ
ルアルコールなどのアラルカノール、２，４，６
―トリクロロフエノール、２，４，５―トリクロ
ロフエノール、ペンタクロロフエノール、ｐ―ニ
トロフエノール、２，４―ジニトロフエノールな
どのフエノール、チオフエノール、ｐ―ニトロチ
オフエノールなどのチオフエノールなどによつて
置換される。 前記セリンの水酸基は、例えばエステル化また
はエーテル化によつて保護することができる。こ
のエステル化に適する基としては、例えばアセチ
ル基、ベンゾイル基、ベンジルオキシカルボニル
基、エチルオキシカルボニル基などである。また
エーテル化に適する基としては、例えばベンジル
基、テトラヒドロピラニル基、ｔ―ブチル基であ
る。これらの水酸基の保護には２，２，２―トリ
フルオロ―１―ｔ―ブチルオキシカルボニルアミ
ノエチル基、２，２，２―トリフルオロ―１―ベ
ンジルオサシカルボニルアミノ基も適する。しか
しながら、これらの水酸基を必らずしも保護する
必要はない。 前記アルギニンのグアニジノ基中のアミノ基を
保護するのに使用する基としては、例えばニトロ
基、トシル基、ベンジルオキシカルボニル基、メ
シチレン―２―スルホニル基などであるが、この
グアニジノ基を必ずしも保護する必要はない。 前記ヒスチジンのイミノ基を保護するのに使用
する基としては、例えばベンジル基、トリチル
基、ベンジルオキシカルボニル基、トシル基、
２，２，２―トリフルオロ―１―ｔ―ブチルオキ
シカルボニルアミノエチル基、２，２，２―トリ
フルオロ―１―ベンジルオキシカルボニルアミノ
エチル基などであるが、このイミノ基を必ずしも
保護する必要はない。 前記メチオニンのチオメチル基はメチルスルホ
キシド基にして副反応を防止するのが好ましい
が、必らずしも酸化して保護する必要はない。 本発明においては、α―アミノ基の保護にｔ―
ブチルオキシカルボニル基、ｐ―メトキシベンジ
ルオキシカルボニル基を用い、側鎖のアミノ基の
保護にベンジルオキシカルボニル基を用い、α―
カルボキシル基の保護にメチルエステル基、ベン
ジルエステル基を用い、側鎖のカルボキシル基の
保護にベンジルエステル基を用い、セリンの水酸
基を全く保護する場合には、その保護基にベンジ
ル基を用い、アルギニンのグアニジノ基中のアミ
ノ基の保護にメシチレン―２―スルホニル基を用
いるのが好ましい。 本目的化合物〔〕の合成においては、個々の
アミノ酸もしくは低級ペプチドの縮合は、例えば
保護されたα―アミノ基および活性化末端カルボ
キシル基をもつアミノ酸またはペプチドと遊離α
―アミノ基および保護された末端カルボキシル基
をもつアミノ酸またはペプチドとを反応させる
か、あるいは活性化α―アミノ基および保護され
た末端カルボキシル基をもつアミノ酸またはペプ
チドと遊離の末端カルボキシル基および保護され
たα―アミノ基をもつアミノ酸またはペプチドを
反応させることにより実施することができる。 この場合、カルボキシル基は、例えば酸アジ
ド、酸無水物、酸イミダゾリドまたは活性エステ
ル、例えばシアノメチルエステル、チオフエニル
エステル、ｐ―ニトロチオフエニルエステル、ｐ
―ニトロフエニルエステル、２，４―ジニトロフ
エニルエステル、２，４，５―トリクロロフエニ
ルエステル、２，４，６―トリクロロフエニルエ
ステル、ペンタクロロフエニルエステル、Ｎ―ヒ
ドロキシコハク酸イミドエステル、Ｎ―ヒドロキ
シフタル酸イミドエステルなどに変換することに
よつて活性化することができる。またカルボジイ
ミド、例えばＮ，N′―ジシクロヘキシル―カル
ボジイミド、Ｎ―エチル―N′―３―ジメチルア
ミノプロピル―カルボジイミド、Ｎ，N′―カル
ボニル―ジイミダゾールまたはイソオキゾリウム
塩、例えばウツドワード反応剤などの縮合剤を使
用して反応させることによつて活性化することが
できる。 本発明において好ましい縮合方法は、アジド
法、活性エステル法およびカルボジイミド法であ
る。縮合の各段階ではラセミ化が起らない方法ま
たはラセミ化が最少になる方法を用いるのが望ま
しく、好ましくはアジド法、活性エステル法、ビ
ユンシユ法、〔Z.Naturforsch.，21b，426（1966）〕
またはガイガー法〔Chem.Ber.，103，788
（1970）〕などを用いるのが適する。 縮合順序は式〔〕で示されるアミノ酸順序で
あれば、如何なる順序からも合成し得るが、Ｃ―
末端側から順次アミノ酸またはペプチドを連結さ
せるのが好ましい。 例えば、29〜38番のアミノ酸順序からなるＣ―
末端フラグメントと25〜28番のアミノ酸からなる
ペプチドフラグメントを縮合させるのがよい。こ
のＣ―末端フラグメントとテトラペプチド25−28
を縮合させるにはアジド法によつて行うのが適す
る。得られたＣ―末端フラグメント25−38の前に
22〜24番のアミノ酸順序からなるペプチドフラグ
メントを連結させるのであるが、ガイガー法によ
り行うのが適する。得られたＣ―末端フラグメン
ト22―38の前に順次19〜21番のアミノ酸順序から
なるペプチドフラグメント、16〜18番のアミノ酸
順序からなるペプチドフラグメント、13〜15番の
アミノ酸順序からなるペプチドフラグメント、８
〜12番のアミノ酸順序からなるペプチドフラグメ
ント、４〜７番のアミノ酸順序からなるペプチド
フラグメントおよび１〜３番のアミノ酸順序から
なるペプチドフラグメントを連結させるのが好ま
しい。これらの縮合はアジド法で行うのが適す
る。 前記のＣ―末端フラグメント25−38は、Ｃ―末
端フラグメント29−38にその残りのアミノ酸順序
25−28からなるペプチドフラグメントをアジド法
により連結させるのがよい。Ｃ―末端フラグメン
ト29−38は、ヘキサペプチドフラグメント33−38
にジペプチドフラグメント31−32をアジド法によ
り連結させ、その前に残りのアミノ酸順序に各々
のアミノ酸を活性エステル法により連結させるの
がよい。 上記の縮合反応におけるα―アミノ基の保護
基、例えばｔ―ブチルオキシカルボニル基、ｐ―
メトキシベンジルオキシカルボニル基はトリフル
オロ酢酸で脱離される。α―カルボキシル基の保
護基、例えばメチルエステルはこれを希薄な水酸
化ナトリウム溶液で分解しまたはヒドラチドある
いはトリクロロエトキシカルボニルヒドラチドの
ような保護ヒドラチドに変え、またベンジルエス
テル基は無水弗化水素分解、水素添加分解によつ
て分解し、またはヒドラチドに変えることができ
る。 こうして保護されたα―アミノ基、ξ―アミノ
基、カルボキシル基、側鎖カルボキシル基、グア
ニジノ基および（または）水酸基を有するオクタ
トリアコンタペプチドが得られる。これらの保護
基は、好ましくは酸分解、例えば無水弗化水素ま
たはトリフルオロメタンスルホン酸による方法に
よつて一段階で脱離され、式〔〕の目的化合物
が得られる。メチオニンのメチルスルホキシド基
をチオメチル基に還元する場合には、ジチオスレ
イトール、チオグリコール酸、メルカプトエタノ
ール、エタンジチオールなどによつて行つてもよ
い。 このようにして得られたペプチド〔〕は、ペ
プチドまたは蛋白質を精製する公知の手段によつ
て分離精製することができる。例えば、セフアデ
ツクスＧ−25（商品名、フアルマシア社製、ゲル
過剤、デキストランゲル）、セフアデツクスＧ
−50（商品名、フアルマシア社製、ゲル過剤、
デキストランゲル）、セフアデツクスLH−20（商
品名、フアルマシア社製、ゲル過剤、ヒドロキ
シプロピル化デキストランゲル）などのゲル過
剤を用いるゲル過、カルボキシメチルセルロー
ス、イオン交換樹脂などを用いるカラムクロマト
グラフイー、高速液体クロマトグラフイーなどに
より行うことができる。 本発明のペプチド〔〕は、その方法の条件に
より塩基またはその塩の形で得られる。塩として
は、無機酸塩、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリ
コール酸、コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン
酸などの有機酸との塩である。 本ペプチド〔〕はある種の無機物質または有
機物質を付加して錯体を形成し得る。この錯体と
は添加した時に生成し、ペプチドに持続作用を与
える化合物を意味する。ヒトの腎臓より取り出し
た細胞膜またはヒトの骨細胞を使用して本発明品
〔〕および対象品〔ｈ―PTH（１−34）〕のサイ
クリツクAMP合成能について、Endoclinol.92，
692（1973）の方法により測定した。 その結果を比較すると、腎臓細胞膜を用いた場
合のサイクリツクAMP合成能は、既知のｈ―
PTH（１−34）が2300U／mgに対し、本発明のｈ
―PTH（１−38）は7000U／mgで約３倍の活性を
有する。同様に骨細胞を用いた場合のサイクリツ
クAMP合成能は、既知のｈ―PTH（１−34）が
3000U／mgに対し、本発明のｈ―PTH（１−38）
は9000U／mgで約３倍の活性を示した。 以上の通り、本発明のｈ―PTH（１−38）は公
知のｈ―PTH（１−34）より極めて強い生物活性
を有する。 尚、本明細書中に記載の略記号は次の意味を有
する。 Phe；Ｌ―フエニルアラニン Tyr；Ｌ―チロシン Asn；Ｌ―アスパラギン His；Ｌ―ヒスチジン Met；Ｌ―メチオニン Val；Ｌ―バリン Asp；Ｌ―アスパラギン酸 Gln；Ｌ―グルタミン Leu；Ｌ―ロイシン Lys；Ｌ―リジン Arg；Ｌ―アルギニン Trp；Ｌ―トリプトフアン Glu；Ｌ―グルタミン酸 Ile；Ｌ―イソロイシン Ser；Ｌ―セリン Gly；グリシン Ｚ；ベンジルオキシカルボニル Boc；ｔ―ブトキシカルボニル Ｚ（OMe）；Ｐ―メトキシベンジルオキシカル
ボニル Mts；NG―メシチレン―２―スルホニ
ル OBzl；ベンジルエステル OMe；メチルエステル OTCP；２，４，５―トリクロロフエニル
エステル ONp；Ｐ―ニトロフエニルエステル OSu；Ｎ―ヒドロキシコハク酸イミドエ
ステル NHNHTroc；トリクロロエチルオキシカルボニ
ルヒドラジド NHNH2；ヒドラジド TFMSA；トリフルオロメタンスルホン酸 MSA；メタンスルホン酸 TFA；トリフルオロ酢酸 TosOH；Ｐ―トルエンスルホン酸 HCl；塩化水素 Et3N；トリエチルアミン CHA；シクロヘキシルアミン DCHA；ジシクロヘキシルアミン DCC；NN′―ジシクロヘキシルカルボ
ジイミド HOBT；１―ヒドロキシベンゾトリアゾー
ル EDTA；エチレンジアミン四酢酸塩 DMF；ジメチルホルムアミド DMSO；ジメチルスルホキシド MeOH；メタノール EtOH；エタノール BuOH；ブタノール CHCl3；クロロホルム THF；テトラヒドロフラン エーテル；ジエチルエーテル TLC；薄層クロマトグラフイー 次に実施例を挙げて本発明の製造例を具体的に
説明する。 尚、これら実施例で使用した薄層クロマトグラ
フイー（TLC）、およびカラムクロマトグラフイ
ーの担体及び溶媒系、アミノ酸分析の条件は次の
通りである。 ＜TLCおよびカラムクロマトグラフイー＞ 担体；シリカゲルＧ 溶媒系； １ CHCl3―MeOH（10：0.5） ２ CHCl3―MeOH―水（８：３：１） ３ CHCl3―MeOH―酢酸（９：１：0.5） ４ BuOH―ピリジン―酢酸―水（４：１：１：
２） ５ BuOH―ピリジン―酢酸―水（４：１：１：
１） ＜アミノ酸分析＞ 加水分解条件； １ 6N―塩酸で110℃、24〜48時間封管中で加熱
する。 ２ 4N―MSA110℃、24〜48時間封管中で加熱
する。 実施例 １ ｈ―PTH（１−38）；Ｈ―Ser―Val―Ser―Glu
―Ile―Gln―Leu―Met―His―Asn―Leu―
Gly―Lys―His―Leu―Asn―Ser―Met―Glu
―Arg―Val―Glu―Trp―Leu―Arg―Lys―
Lys―Leu―Gln―Asp―Val―His―Asn―Phe
―Val―Ala―Leu―Gly―OHの製造 Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu（OBzl）―Ile―Gln
―Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu―Gly―Lys
（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―Met（Ｏ）―Gln
（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）―Trp
―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―
Asp（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala
―Leu―Gly―OBzl148.3mg（0.0254mM）にｍ―
クレゾール0.58ml（5.59mM）を加える。これに
2M―TFMSAと2Mチオアニソール含有TFA溶
液5.59mlを加え０℃で１時間、25℃で１時間撹拌
後、エーテルを加え、生じた沈澱物を分離する。
得られた粉末を水10mlに溶解しアンバーライト
CG―4B樹脂（アセテート型）1.5ｇを加え30分間
撹拌する。樹脂を除去後、溶液に1Nアンモニア
水２mlを加え０℃で30分間撹拌し、酢酸酸性とし
た後、凍結乾燥する。これを水２mlに溶解し、ジ
チオスレイトール0.78ｇ（5.08mM）を加え60℃
で36時間撹拌後、1N酢酸１mlを加え、セフアデ
ツクスＧ―25のカラム（３×95cm）に注入し、
1N酢酸で溶出する。溶出液を５mlづつ分画し、
活性画分（42〜56本目）を集め凍結乾燥して白色
粉末62.8mgを得る。得られた白色粉末60mgを
0.01M酢酸アンモニウム―8M尿素水溶液に溶解
し、カルボキシルメチルセルロースのカラム
（1.8×12cm）に注入し、0.01M酢酸アンモニウム
―8M尿素水溶液（PH5.1）300mlと0.1M酢酸アン
モニウム―8M尿素水溶液（PH5.1）300mlの間で
直線濃度勾配をかけて溶出を行なう。溶出液を５
mlづつ分画し、活性画分（101〜114本目）を集め
透析後、セフアデツクスＧ―25のカラム（３×95
cm）で脱塩を行ない凍結乾燥して白色粉末35mgを
得る。これを水30mlに溶解し、カルボキシメチル
セルロースのカラム（1.8×12cm）に注入し、水
150mlと0.2M酢酸アンモニウム水溶液の間で直線
濃度勾配をかけて溶出を行なう。溶出液を５mlづ
つ分画し、活性画分（37〜45本目）を集め、セフ
アデツクスＧ―25のカラム（３×95cm）で脱塩を
行ない、凍結乾燥して白色粉末12.1mgを得る。こ
の粉末をブタノール―ピリジン―酢酸―0.6M酢
酸アンモニウム水溶液（５：３：0.2：10）で充
填したSephadex Ｇ―50のカラム（1.8×95cm）
にチヤージし、これをできるだけ少量のブタノー
ル―ピリジン―酢酸―0.6M酢酸アンモニウム水
溶液（５：３：0.2：10）の上層で溶出する。溶
出液を３mlづつ分画し、活性画分（６〜10本目）
を集め、減圧濃縮する。これをセフアデツクスＧ
―25のカラム（３×95cm）で脱塩を行ない、凍結
乾燥して白色粉末6.0mgを得る。得られた白色粉
末1.125mgを水25mlに溶解し、コスモシル5C18の
カラム（0.461×15cm）に注入し、溶媒として
0.1Mリン酸を含有する0.1％酢酸―アセトニトリ
ル（73：27）を用い、高速液体クロマトグラフイ
ー分取を行なう、これのメインピークを分取し、
そのままセフアデツクスＧ―25のカラム、1N酢
酸を溶出液として脱塩し、凍結乾燥して、白色粉
末0.8mgを得る。高速液体クロマトグラフイーに
よる分取を３回行ない白色粉末の目的物2.4mgを
得る。 上記の原料は次のようにして製造される。 Ｐ（１―38） Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu
（OBzl）―Ile―Gln―Leu―Met（Ｏ）―His―
Asn―Leu―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―
Ser―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―
Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）
―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔44〕の製造 Ｐ（37−38）Ｚ（OMe）―Leu―Gly―OBzl〔１〕 Ｈ―Gly―OBzl・TosOH42.1ｇをDMF200ml
に溶解し、Et3N18.3mlでPH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Leu―ONp54.6ｇ、Et3N18.3mlを加え
室温で18時間撹拌する。反応後、DMFを減圧下
留去し、残渣を酢酸エチルに溶かす。５％クエン
酸、食塩水、５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残
渣にエーテルを加え結晶を得る。MeOH―エー
テルから再結晶化して目的物42.3ｇ（収率76％）
を得る。 融点；94〜95℃ 〔α〕20 D；−7.8゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf1＝0.53 元素分析〔C24H30O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 65.14 6.83 6.33 測定値 65.40 6.67 6.51 Ｐ（36−38）Ｚ（OMe）−Ala−Leu―Gly―
OBzl〔２〕 〔１〕5.02ｇにアニソール2.46ml、TFA9.84ml
を加え、残渣をｎ―ヘキサンで３回洗浄し乾燥す
る。これをDMF20mlに溶解し、Et3N1.6mlでPH
７に調節後、Ｚ（OMe）―Ala―ONp4.27ｇ、
Et3N1.6mlを加え室温で20時間撹拌する。反応
後、DMFを減圧下留去し、残渣に５％クエン酸、
エーテルを加え生じた沈澱物を取する。この沈
澱物を５％クエン酸、水、５％重曹水、水の順で
洗浄し、DMF−MeOHから再結晶化して目的物
3.20ｇ（収率81％）を得る。 融点；148〜150℃ 〔α〕20 D；−13.9゜（Ｃ＝0.6、DMF） TLC；Rf1＝0.38 元素分析〔C27H35O7N3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.14 6.87 8.18 測定値 62.87 7.13 7.95 Ｐ（34〜35） Ｚ（OMe）―Phe―Val―OMe
〔３〕 Ｈ―Val―OMe25.15ｇをDMF250mlに溶解し、
Et3N21mlでPH７に調節後、Ｚ（OMe）―Phe―
OH49.40ｇをTHF250mlに溶解して加える。−10
℃に冷却してDCC37.14ｇを加えて３時間、室温
で15時間撹拌する。反応後、沈澱物を除去して、
DMF、THFを減圧下留去し、残渣を酢酸エチル
および５％クエン酸と共にふりまぜる。有機層を
５％クエン酸、５％重曹水、食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮す
る。残渣にエーテルを加え結晶を得る。MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物47.98ｇ（収
率72％）を得る。 融点；132〜133℃ 〔α〕20 D；−8.7゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf1＝0.69 元素分析〔C24H30O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 65.14 6.83 6.33 測定値 65.00 6.98 6.44 Ｐ（34−35）Ｚ（OMe）―Phe―Val―NHNH2
〔４〕 〔３〕44.25ｇをMeOH400mlに溶解しこれにヒ
ドラジン水和物25.04mlを加え、室温で一夜放置
する。析出した結晶をEtOHで取し、DMF―
EtOHから再結晶化して目的物36.59ｇ（収率83
％）を得る。 融点206〜208℃ 〔α〕20 D−8.0゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.52、Rf3＝0.60 元素分析〔C23H30O5N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 62.42 6.83 12.66 測定値 62.16 6.78 12.57 Ｐ（34−38）Ｚ（OMe）―Phe―Val―Ala―
Leu―Gly―OBzl〔５〕 〔２〕3.02ｇにアニソール1.91ml、TFA7.46ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣をｎ―ヘキサンで３回洗浄し乾燥して
油状物を得る。 一方、〔４〕2.87ｇをDMF8mlに溶かし、これ
に、−50℃に冷却下4.78N―HCl／DMF溶液3.26
ml、次いで亜硝酸イソアミル1.03mlを加える。−
20℃で20分間撹拌後、再度−50℃に冷却し、
Et3N3.27mlを加え、これに上記で得られた油状
物をDMF50mlに溶解し、Et3N0.82mlでPH７に調
節した溶液を加える。０〜７℃で２日間撹拌後、
反応液を減圧濃縮し、残渣に５％クエン酸、エー
テルを加える。生じた沈澱を取し、５％クエン
酸、５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF−
MeOHから再結晶化して目的物3.97ｇへ（収率
87.7％）を得る。 融点；249〜250℃ 〔α〕20 D；−20.1゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf1＝0.26、Rf3＝0.82 アミノ酸分析；Val0.92(1)、Phe1.02(1)、
Gly1.00(1)、Ala1(1)、Leu1.03(1) 元素分析〔C41H53O9N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 64.80 7.03 9.22 測定値 64.66 7.06 9.38 Ｐ（33−38）Ｚ（OMe）―Asn―Phe―Val―
Ala―Leu―Gly―OBzl〔６〕 〔５〕3.52ｇにアニソール1.51ml、TFA6.04ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱を
取する。得られた粉末をDMSO10ml、DMF10
mlに溶解し、Et3N0.65mlを加えてPH７に調節後、
これにHOBT0.1ｇ、Ｚ（OMe）―Asn―
ONp1.93ｇおよびEt3N0.65mlを加え室温で２日
間撹拌する。反応液に５％クエン酸、エーテルを
加え沈澱物を取する。５％クエン酸、水、５％
重曹水、水の順で洗浄する。DMSO―MeOHか
ら再結晶化して目的物3.03ｇ（収率74.9％）を得
る。 融点；260〜262℃ 〔α〕20 D；−20.1゜（Ｃ＝1.1、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf4＝０ アミノ酸分析；Asp0.99(1)、Gly0.98(1)、Ala1
(1)、Val0.96(1)、Leu1.01(1)、Phe0.95(1) 元素分析〔C45H59O11N7として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 61.84 6.84 11.22 測定値 61.82 6.82 11.41 Ｐ（31−38）Ｚ（OMe）―Val―Asn―Phe―
Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔７〕 〔６〕2.73ｇにアニソール1.69ml、TFA6.76ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧留去
し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱を取す
る。 Ｚ（OMe）―Val―His―NHNH2 1.50ｇ 4.78N―HCl／DMF 2.82ml 亜硝酸イソアミル 0.60ml DMF ５ml Et3N 2.52ml Ｚ（OMe）―Val―His―NHNH2を前回〔５〕
の方法と同様にして得られたアジド溶液に、上記
で得た粉末をDMSO10ml、DMF10mlに溶解し、
Et3N0.44mlでPH７に調節した溶液を加える。０
〜７℃で２日間撹拌後、反応液を減圧濃縮し、残
渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加える。生じた
沈澱を取し、５％クエン酸、水、５％重曹水、
水の順で洗浄する。DMSO―MeOHから再結晶
化して目的物2.81ｇ（収率81.2％）を得る。 融点；242〜244℃ 〔α〕20 D；21.8゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝０ アミノ酸分析；Val1.93(2)、His1.03(1)、
Asp1.01(1)、Gly0.98(1)、Ala1(1)、Leu1.00(1)、
Phe0.98(1) 元素分析〔C56H75O13N11・H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.61 6.88 13.66 測定値 59.55 6.96 13.59 Ｐ（30−38）Ｚ（OMe）―Asp（OBzl）―Val―
His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―
OBzl〔８〕 〔７〕2.81ｇにアニソール1.64ml、TFA6.56ml
を加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留
去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱を
取する。得られた粉末をDMSO10ml、DMF10
mlに溶かし、Et3N0.71mlを加え、PH７に調節後、
これにＺ（OMe）―Asp（OBzl）―ONp1.54ｇ、
Et3N0.43mlを加え室温で２日間撹拌する。反応
液を減圧濃縮し残渣に５％クエン酸、酢酸エチル
を加え沈澱物を取する。５％クエン酸、５％重
曹水、水の順で洗浄する。DMSO―MeOHから
再結晶化して目的物2.55ｇ（収率76.5％）を得
る。 融点；250℃以上で分解 〔α〕20 D；−16.4゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf3＝０ アミノ酸分析；Asp2.05(2)、Gly0.98(1)、Ala1
(1)、Val2.01(2)、Leu1.01(1)、Phe0.99(1)、His0.87
(1) 元素分析〔C67H86O16N12・3H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 58.76 6.77 12.27 測定値 58.84 6.68 11.87 Ｐ（29−38）Ｚ（OMe）―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl
〔９〕
〔８〕2.55にアニソール1.26ml、TFA5.04mlを
加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留去
し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱を取す
る。得られた粉末をDMSO6ml、DMF6mlに溶か
し、Et3N0.54mlを加え、PH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Gln―ONp1.17ｇ、Et3N0.38mlを加え
室温で２日間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残
渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加え沈澱物を
取する。５％クエン酸、水、５％重曹水、水の順
で洗浄する。DMSO―MeOHから再結晶化して
目的物2.76ｇ（収率98.6％）を得る。 融点；248〜249℃ 〔α〕20 D；−24.6゜（Ｃ＝1.1、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf3＝０ アミノ酸分析；Glu1.05(1)、Asp1.95(2)、
Gly0.99(1)、Ala(1)、Val1.98(2)、Leu1.00(1)、
Phe0.99(1)、His0.89(1) 元素分析〔C72H94O18N14・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.53 6.59 13.50 測定値 59.58 6.71 13.20 Ｐ（27−28）Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―Leu―
OMe〔10〕 Ｈ―Leu―OMe2.91ｇをDMF50mlに溶かし、
０℃に冷却してEt3N2.24mlでPH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Lys（Ｚ）―OTCP10ｇをTHF50mlに
溶解した溶液とEt3N2.24mlを加えて室温で20時
間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エ
チルおよび５％クエン酸と共にふりまぜる。有機
層を５％クエン酸、食塩水、５％重曹水、食塩水
の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減
圧濃縮する。残渣にエーテルを加え結晶を得る。
MeOH―エーテルから再結晶化して目的物7.33ｇ
（収率80.1％）を得る。 融点；107〜108℃ 〔α〕20 D；−21.2゜（Ｃ＝0.9、MeOH） TLC；Rf2＝0.73、Rf3＝0.63 元素分析〔C30H41O3N8として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.03 7.23 7.35 測定値 63.18 7.23 7.26 Ｐ（26−28）Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）
―Leu―OMe〔11〕 〔10〕5.72ｇにアニソール2.17ml、TFA8.68ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄し乾燥す
る。これをDMF20mlに溶解し、Et3N1.4mlでPH
７に調節後、Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―OTCP6.24
ｇ、Et3N1.4mlを加え室温で20時間撹拌する。反
応後、DMFを減圧下留去し、残渣に５％クエン
酸、エーテルを加え生じた沈澱物を取する。こ
の沈澱物を５％クエン酸、水、５％重曹水、水の
順で洗浄する。熱MeOH―エーテルから再結晶
化して目的物6.71ｇ（収率80.5％）を得る。 融点；153〜154℃ 〔α〕20 D；−15.8゜（Ｃ＝1.1、DMF） TLC；Rf1＝0.41 元素分析〔C44H59O11N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.37 7.13 8.40 測定値 63.54 7.21 8.38 Ｐ（25−28）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―OMe〔12〕 〔11〕6.00ｇにアニソール2.33ml、TFA9.33ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
を取し、乾燥して粉末を得る。 一方、Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―OH・
CHA6.71ｇを酢酸エチル20mlおよび1N塩酸8.64
mlと共にふりまぜる。有機層を水20mlで洗浄後、
減圧濃縮する。この残渣をTHF20mlに溶かし、
Et3N1.45mlを加え、−10℃で塩化イソブチロキシ
カルボニル1.36mlを加え５分間撹拌する。これに
上記の粉末をDMF20mlに溶かし、Et3N1.00mlで
PH７に調節した溶液を加え、０℃で４時間撹拌す
る。反応液を減圧濃縮し、残渣に５％クエン酸、
エーテルを加え生じた沈澱を取する。５％クエ
ン酸、５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF―
酢酸エチルから再結晶化して目的物5.78ｇ（収率
68.5％）を得る。 融点；151〜152℃ 〔α〕20 D；−8.9゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.76、Rf3＝0.75 元素分析〔C59H81O14N9Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 60.44 6.96 10.75 測定値 60.48 6.97 10.65 Ｐ（25−28）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―NHNH2〔13〕 〔12〕5.78ｇをMeOH50mlに溶解し、これにヒ
ドラジン水和物1.23mlを加え室温で一夜放置す
る。析出した結晶を取し、EtOHで洗浄する。
MeOH―EtOHから再結晶化して目的物5.25ｇ
（収率91.3％）を得る。 融点；178〜180℃ 〔α〕20 D；−10.1゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析；Leu1(1)、Lys1.94(2)、Arg1.01
(1) 元素分析〔C58H81O13N11Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.42 6.96 13.14 測定値 59.29 7.17 12.87 Ｐ（23−24）Boc−Trp―Leu―OH・DCHA
〔14〕 Boc―Trp―ONp10.65ｇをDMF30mlに溶解す
る。これに０℃で、Ｈ―Leu―OH3.9ｇを水10
ml、DMF30mlおよびEt3N6.95mlに溶かして加
え、室温で一夜撹拌する。溶媒を減圧下留去し、
残渣を５％重曹水、酢酸エチルと共にふりまぜ
る。水層をクエン酸で酸性にし、酢酸エチルを加
えてふりまぜる。有機層を５％クエン酸、水の順
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃
縮する。残渣をMeOHに溶かし、DCHA5.45ｇ
を加える。MeOHを減圧下留去して、エーテル
を加え結晶化する。MeOH―エーテルから再結
晶化して目的物10.15ｇ（収率97.0％）を得る。 融点；192〜195℃ 〔α〕20 D；−22.9゜（Ｃ＝0.6、MeOH） TLC；Rf2＝0.67、Rf3＝0.69 元素分析〔C22H31O5N3・C12H23Nとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 68.19 9.09 9.36 測定値 68.07 9.14 9.27 Ｐ（22−24）Boc−Glu（OBzl）―Trp―Leu―
OH・DCHA〔15〕 〔14〕10.0ｇを酢酸エチル50ml、水50mlに懸濁
し、1N塩酸17.1mlを０℃で加える。析出した塩
を去した後、有機層を食塩水で洗浄して、無水
硫酸ナトリウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下
留去して、油状物を得る。これに２％EDTを含
むアニソール5.57mlとTFA22.28mlを加え、０℃
で窒素ガス下、１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、ｎ―ヘキサンで３度洗浄後、乾燥する。
これをDMF50mlに溶かし、Boc―Glu（OBzl）―
OSu7.43ｇ、Et3N4.79mlを加え、４℃で16時間撹
拌する。DMFを減圧下留去し、残渣を５％アン
モニア水で溶かし、エーテルで洗浄する。水層を
クエン酸で酸性とし、生じた油状物を酢酸エチル
で抽出する。酢酸エチル層を食塩水で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残渣
をMeOHに溶かし、DCHA2.8ml加え、MeOHを
減圧濃縮し、エーテルを加えて結晶化する。
MeOH―エーテルから３度再結晶化して目的物
7.84ｇ（収率57.0％）を得る。 融点；149〜150℃ 〔α〕20 D；−23.1゜（Ｃ＝1.3、MeOH） TLC；Rf2＝0.53、Rf3＝0.71 アミノ酸分析2；Trp0.76(1)、Glu1.12(1)、Leu1
(1) 元素分析〔C34H44O8N4・C12H23Nとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 67.53 8.26 8.56 測定値 67.23 8.28 8.69 Ｐ（20−21）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Val―
NHNHTroc〔16〕 Ｚ（OMe）―Val―NHNHTroc22.79ｇにアニ
ソール10.74ml、TFA42.96mlを加え、０℃１時間
撹拌する。TFAを減圧下留去し、残渣をｎ―ヘ
キサンで３度洗浄し、乾燥して油状物を得る。 一方、Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―OH・
CHA30.0ｇを酢酸エチル150ml、水100mlに懸濁
し、1N塩酸48.41mlを０℃で加える。析出した塩
を去した後、有機層を食塩水で洗浄して、無水
硫酸ナトリウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下
留去して油状物を得る。これをTHF100mlに溶か
し、Et3N81.3mlを加え、−10℃で塩化イソブチロ
キシカルボニル7.53mlを加え５分間撹拌する。こ
れに上記の油状物をDMF50mlに溶かし、
Et3N6.78mlでPH７に調節した溶液を加え、−10℃
で２時間、室温で16時間撹拌する。反応液を減圧
濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび５％クエン酸と
共にふりまぜる。有機層を５％クエン酸、食塩
水、１％アンモニア水、食塩水の順で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。得ら
れた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフイ
ー〔溶出溶媒CHCl3―MeOH（20：0.5）〕により
精製する。酢酸エチル―ｎ―ヘキサンより結晶化
して目的物29.25ｇ（収率74.7％）を得る。 融点；114〜116℃ 〔α〕20 D；−24.6゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.62、Rf3＝0.46 元素分析〔C32H44O9N7SCl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.50 5.48 12.12 測定値 47.24 5.43 11.88 Ｐ（19−21）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―NHNHTroc〔17〕 〔16〕7.30ｇにアニソール３・89ml、
TFA15.57mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFA
を減圧下留去し、残渣にエーテルを加えた後、生
じた沈澱物を取し、乾燥して粉末を得る。これ
をDMF50mlに溶かし、Et3N12.6mlでPH７に調節
して、Boc―Glu（OBzl）―ONp4.13ｇと
Et3N12.6mlを加え、室温で16時間撹拌する。溶
媒を減圧下留去し、残渣に５％クエン酸、エーテ
ルを加え生じた沈澱物を取する。５％クエン
酸、水、５％重曹水、水の順で洗浄し、MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物6.29ｇ（収率
72.5％）を得る。 融点；159〜160℃ 〔α〕20 D；−31.9゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.68、Rf3＝0.74 元素分析〔C40H57O11N8SCl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 49.82 5.96 11.62 測定値 49.85 5.97 11.60 Ｐ（19−21）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―NHNH2〔18〕 〔17〕6.29ｇを酢酸15mlに溶解し、亜鉛末4.25
ｇを加え、室温で８時間撹拌する。酢酸を減圧下
留去し、残渣に５％重曹水を加え生じた沈澱物を
取する。飽和EDTA水溶液、水の順で洗浄す
る。MeOH―エーテルから再結晶化して目的物
2.64ｇ（収率51.3％）を得る。 融点；186〜187℃ 〔α〕20 D；−5.6゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.58、Rf3＝0.55 アミノ酸分析1；Glu1.20(1)、Leu(1)、Arg1.07
(1) 元素分析〔C37H56O9N8S・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 55.69 7.20 14.04 測定値 55.73 7.18 14.17 Ｐ（17−18）Ｚ（OMe）−Ser−Met（Ｏ）−OMe
〔19〕 Ｚ（OMe）―Met（Ｏ）―OMe9.02ｇにアニソ
ール5.71ml、TFA22.84mlを加え、０℃１時間撹
拌する。TFAを減圧下留去し、残渣をｎ―ヘキ
サンで３度洗浄後、乾燥して油状物を得る。 Ｚ（OMe）―Ser―NHNH2 8.95ml 5.55N―HCl／DMF 13.66ml 亜硝酸イソアミル 5.05ml DMF 20ml Et3N 15.92ml Ｚ（Ｏ Me）―Ser―NHNH2を前回〔５〕の
方法と同様にして得られたアジド溶液に、上記で
得た油状物をDMF40mlに溶解し、Et3N3.68mlで
PH７に調節した溶液を加える。４℃で２日間撹拌
する。DMFを減圧下留去し、残渣をｎ―BuOH
に溶解し、５％クエン酸、食塩水、５％重曹水の
順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
濃縮する。得られた油状物をシリカゲルカラムク
ロマトグラフイー〔溶出溶媒CHCl3―MeOH
（10：05）〕により精製する。MeOH―酢酸エチ
ルから結晶化して目的物7.22ｇ（収率63.8％）を
得る。 融点；109〜110℃ 〔α〕20 D；−36.4゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.6、Rf3＝0.25 元素分析；〔C18H26O8N2Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 50.22 6.09 6.51 測定値 50.31 6.05 6.43 Ｐ（16−18）Boc―Asn―Ser―Met（０）―
OMe〔20〕 〔19〕7.20ｇにアニソール3.63ml、TFA14.54
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。得られた粉末をDMF25
mlに溶かし、Et3N2.34mlでPH７に調節した後、
Boc―Asn―Ｏ Np5.91ｇ、Et3N2.34mlを加え、
室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去し、
残渣に酢酸エチルを加えた後、析出した結晶を
取し、５回酢酸エチルで洗浄する。MeOH―酢
酸エチルから再結晶化して目的物6.44ｇ（収率
80.1％）を得る。 融点；181〜182℃ 〔α〕20 D；−49.3゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.46、Rf3＝0.06 元素分析〔C18H32O9N4Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 44.99 6.71 11.66 測定値 45.10 6.83 11.45 Ｐ（16−18）Boc−Asn−Ser−Met（０）―
NHNH2〔21〕 〔20〕5.25ｇをMeOH30mlに溶かし、これにヒ
ドラジン水和物2.73mlを加え、室温で一夜放置す
る。析出した結晶を取し、EtOHで洗浄する。
DMSO―MeOHから再結晶化して目的物4.73ｇ
（収率90.4％）を得る。 融点218〜219℃ 〔α〕20 D−27.0゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝0.06、Rf4＝0.49 アミノ酸分析1；Asp1(1)、Ser0.88(1)、Met＋
Met（０）0.75(1) 元素分析〔C17H32O8N6S・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 41.71 6.79 17.17 測定値 41.64 6.59 17.07 Ｐ（14−15）Ｚ（OMe）―His―Leu―OMe〔22〕 Ｚ（OMe）―His―NHNH2 20.00ｇ 4.78N―HCl／DMF 45.21ml 亜硝酸イソアミル 9.58ml DMF 20ml Ht3N 40.32ml Ｚ（OMe）―His―NHNH2を前回〔５〕の方
法と同様にして得られたアジド溶液に、Ｈ―Leu
―OMe・Hcl9.08ｇをDMF50mlに溶かし、
Et3N7.00mlでPH７に調節した溶液を加えた後、
４℃で20時間撹拌する。DMFを減圧下留去し、
残渣を酢酸エチルおよび５％重曹水と共にふりま
ぜる。有機層を５％重層水、食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮す
る。残渣にエーテルを加えて結晶化し、MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物16.32ｇ（収
率73.1％）を得る。 融点；110〜111℃ 〔α〕20 D；−24.1゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.65、Rf3＝0.17 元素分析〔C22H30O6N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.18 6.77 12.55 測定値 58.93 6.70 12.32 Ｐ（13−15）Boc―Lys（Ｚ）―His―Leu―
OMe〔23〕 〔22〕5.11ｇにアニソール2.49ml、TFA9.96ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。得られた粉末をDMF20
mlに溶かし、Et3N3.19mlを加えPH７に調節後、
Boc−Lys（Ｚ）―OSuを加えて、室温で20時間撹
拌する。DMFを減圧下留去し、残渣を酢酸エチ
ルおよび５％重曹水と共にふりまぜる。有機層を
５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下留去し、
残渣にエーテルを加えて結晶化し、MeOH―エ
ーテルから再結晶化して目的物5.42ｇ（収率73.7
％）を得る。 融点；144〜147℃ 〔α〕20 D；−33.6゜（Ｃ＝0.7、MeOH） TLC；Rf2＝0.65 元素分析〔C32H48O8N6として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.61 7.50 13.04 測定値 59.61 7.45 13.03 Ｐ（13−15）Boc―Lys（Ｚ）―His―Leu―
NHNH2〔24〕 〔23〕2.65ｇをMeOH20mlに溶解し、ヒドラジ
ン水和物1.03mlを加え、室温で２日間放置する。
MeOHを減圧下留去し、残渣に水を加えた後、
生じた沈澱物を取する。MeOH―酢酸エチル
から再結晶化して目的物2.10ｇ（収率79.3％）を
得る。 融点；167〜169℃ 〔α〕20 D；−21.4゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析1；Leu1(1)、Lys0.97(1)、His0.91
(1) 元素分析〔C31H48O7N8として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.74 7.50 17.38 測定値 57.58 7.52 17.38 Ｐ（11−12）Ｚ（OMe）―Leu―Gly―OMe〔25〕 Ｈ―Gly―Ｏ Me・HCl12.56ｇをDMF／50ml
に溶解し、Et3N14mlでPH７に調節した後、Ｚ
（OMe）―Leu―ON41.64ｇ、Et3N14mlを加え
て、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去
し、残渣を酢酸エチルに溶解する。５％クエン
酸、５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残渣にエー
テルを加えて結晶化した後、酢酸エチル―エーテ
ルから再結晶化して目的物28.98ｇ（収率79.1％）
を得る。 融点；78〜79℃ 〔α〕25 D；13.1゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.71 元素分析〔C18H26O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.00 7.15 7.65 測定値 59.17 7.16 7.59 Ｐ（10−12）Ｚ（OMe）―Asn―Leu―Gly―
OMe〔26〕 〔25〕22.36ｇにアニソール13.26ml、
TFA53.04mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFA
を減圧下留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄
後、乾燥する。これをDMF100mlに溶解し、
Et3N8.54mlでPH７に調節した後、Ｚ（OMe）―
Asn―ONp25.46ｇ、Et3N8.54mlを加え、室温で
20時間撹拌する。DMFを減圧不留去し、残渣に
５％クエン酸、酢酸エチルを加えた後、生じた沈
澱を取する。５％クエン酸、５％重曹水、水の
順で洗浄し、DMF―酢酸エチルから再結晶化し
て目的物22.42ｇ（収率76.5％）を得る。 融点；196〜197℃ 〔α〕22 D；−15.4゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.56、Rf3＝0.33 元素分析〔C22H32O8N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.99 6.71 11.66 測定値 55.14 6.86 11.60 Ｐ（９−12）Ｚ（OMe）―His―Asn―Leu―
Gly―OMe〔27〕 〔26〕14.03ｇにアニソール9.52ml、TFA38.08
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後生じた沈澱を
取し、乾燥して粉末を得る。 Ｚ（OMe）―His―NHNH2 11.67ｇ 5.55N―HCl／DMF 22.70ml 亜硝酸イソアミル 5.59ml DMF 20ml Et3N 22.54ml Ｚ（OMe）―His―NHNH2を前回〔５〕の方
法と同様にして得られたアジド溶液に、上記で得
た粉末をDMF70mlに溶解し、Et3N4.09mlでPH７
に調節した溶液を加える。４℃で20時間撹拌す
る。DMFを減圧下留去し、残渣に５％重曹水、
エーテルを加えた後、生じた沈澱を取する。５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―MeOHから
再結晶化して目的物15.13ｇ（収率83.9％）を得
る。 融点；226〜227℃ 〔α〕22 D；−11.1゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.37 元素分析〔C28H32O9N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.45 6.36 15.88 測定値 54.31 6.38 15.73 Ｐ（８−12）Boc―Met（０）―His―Asn―Leu
―Gly―OMe〔28〕 〔27〕10.00ｇにアニソール5.28ml、TFA21.12
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、エーテルを加えた後、生じた沈澱物を
取し、乾燥して粉末を得る。 一方、Boc―Met（０）―OH5.16ｇをTHF30ml
に溶かし、Et3N3.26mlを加え、−10℃で塩化イソ
ブチロキシカルボニル3.06mlを加え５分間撹拌す
る。これに上記の粉末をDMF50mlに溶かし、
Et3N4.57mlでPH７に調節した溶液を加え、０℃
で４時間撹拌する。反応液を過し、液を減圧
濃縮する。残渣にEtoHを加えた後、生じた沈澱
を取する。DMF―EtoHから３度再結晶化して
目的物6.39ｇ（収率56.3％）を得る。 融点；218〜219℃ 〔α〕22 D；−11.4゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.22 元素分析〔C29H48O10N8Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 49.70 6.90 15.99 測定値 49.74 6.80 15.74 Ｐ（８−12）Boc―Met（０）―His―Asn―Leu
―Gly―NHNH2〔29〕 〔28〕5.21ｇをDMF30ml、MeOH20mlに溶解
し、ヒドラジン水和物1.86mlを加え室温で20時間
撹拌する。溶媒を減圧下留去し、EtOHを加えた
後、生じた沈澱物を取する。DMF―MeOHか
ら再結晶化して目的物4.39ｇ（収率84.2％）を得
る。 融点；197〜198℃ 〔α〕18 D；−19.7゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝0.13 アミノ酸分析；Asp1.02(1)、Gly1(1)、Met＋
Met（０）0.82(1)、Leu1.03(1)、His0.98(1) 元素分析〔C28H48O9N10Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.98 6.90 19.99 測定値 47.72 6.84 19.70 Ｐ（６−７）Ｚ（OMe）―Gln―Leu―
NHNHTroc〔30〕 Ｚ（OMe）―Leu―NHNHTroc20.00ｇにアニ
ソール8.96ml、TFA35.84mlを加え、０℃１時間
撹拌する。TFAを減圧下留去し残渣をｎ―ヘキ
サンで洗浄し、乾燥する。これをDMF120mlに溶
解し、Et3N11.52ml、Ｚ（OMe）―Gln―ONpを
加え、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留
去し、残渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加えた
後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―酢酸エチル
から再結晶化して目的物20.70ｇ（収率82.0％）
を得る。 融点；188〜190℃ 〔α〕20 D；−17.1゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.65、Rf3＝0.44 元素分析〔C23H32O8N5Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 45.07 5.26 11.43 測定値 45.52 5.41 11.52 Ｐ（５−７）Ｚ（OMe）―Ile―Gln―Leu―
NHNHTroc〔31〕 〔30〕20.70ｇにアニソール11.00ml、TFA44.0
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄した後、
乾燥する。これをDMF200mlに溶解し、
Et3N9.48ml、Ｚ（OMe）―Ile―ONp14.09ｇを加
え、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去
し、残渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加えた
後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―酢酸エチル
から再結晶化して目的物17.43ｇ（収率79.1％）
を得る。 融点；205〜207℃ 〔α〕20 D；−15.3゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.62、Rf3＝0.32 元素分析〔C29H43O9N6Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.97 5.97 11.58 測定値 48.16 6.17 11.66 Ｐ（４−７）Boc−Glu（OBzl）−Ile―Gln―Leu
―NHNHTroc〔32〕 〔31〕15.0ｇにアニソール8.99ml、TFA35.69
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。これをDMF50mlに溶解
し、Et3N5.80ml、Boc―Glu（OBzl）―OSu8.99
ｇを加え、室温で20時間撹拌する。DMFを減圧
下留去し、残渣に５％クエン酸、エーテルを加え
た後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、
５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF―MeOH
から再結晶化して目的物15.89ｇ（収率87.1％）
を得る。 融点；223〜225℃ 〔α〕18 D；−26.3゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.59、Rf3＝0.49 元素分析〔C37H56O11N7Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 50.43 6.41 11.13 測定値 50.33 6.52 11.63 Ｐ（４―７）Boc―Glu（OBzl）―Ile―Gln―
Leu―NHNH2〔33〕 〔32〕9.0ｇをDMF40mlに溶かし、酢酸6.81ml、
亜鉛末6.67ｇを加え、室温で18時間撹拌する。亜
鉛末を去後、液を減圧濃縮し、残渣に飽和
EDTA溶液を加えた後、重曹を加えてPH７に調
節すると沈澱物が生じる。この沈澱物を飽和
EDTA溶液、水の順で洗浄し、DMF―MeOHか
ら２度再結晶化して目的物5.31ｇ（収率73.7％）
を得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕18 D；−22.3゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析1；Glu2.06(2)、Ile1.01(1)、Leu1(1) 元素分析〔C34H55O9N7として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.85 7.85 13.89 測定値 57.76 8.00 13.64 Ｐ（２−３）Ｚ（OMe）―Val―Ser―OMe〔34〕 Ｈ―Ser―OMe15.56ｇをDMF80mlに溶かし、
Et3N14.0mlでPH７に調節する。この溶液にＺ
（OMe）―Val―OH28.13ｇをTHF140mlに溶か
した溶液を加えた後、―10℃でDCC24.76ｇを加
え３時間、室温で15時間撹拌する。沈澱物を去
後、溶媒を減圧留去し、析出した結晶をEtOHで
取する。THF―EtOHから再結晶化して目的
物22.19ｇ（収率58.0％）を得る。 融点；160〜161℃ 〔α〕20 D；9.9゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.63、Rf3＝0.64 元素分析〔C18H26O7N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.53 6.85 7.33 測定値 56.70 6.96 7.36 Ｐ（１−３）Ｚ―Ser―Val―Ser―OMe〔35〕 〔34〕7.15ｇにアニソール4.06ml、TFA16.24
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄した後、
乾燥して油状物を得る。 Ｚ―Ser―NHNH2 5.68ｇ 5.55N―HCl／DMF 9.70ml 亜硝酸イソアミル 3.58ml DMF 10ml Et3N 11.31ml Ｚ―Ser―NHNH2を前回〔５〕の方法と同様
にして得られたアジド溶液に、上記で得た油状物
をDMF35mlに溶解し、Et3N2.62mlでPH７に調節
した溶液を加える。４℃で２日間撹拌する。沈澱
物を去し、液を減圧濃縮した後、残渣に
EtOHを加える。生じた沈澱物を取しDMF―
MeOHから再結晶化して目的物4.94ｇ（収率60.1
％）を得る。 融点；211〜213℃ 〔α〕20 D；6.4゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.66 元素分析〔C20H29O8N3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.66 6.65 9.56 測定値 54.75 6.52 9.45 Ｐ（１−３）Ｚ―Ser―Val―Ser―NHNH2
〔36〕 〔35〕3.27ｇをDMF20ml、MeOH10mlに溶解
し、ヒドラジン水和物1.86mlを加え一夜放置す
る。析出した結晶をMeOHで取しEtOHで洗浄
後、DMSO―MeOHから再結晶化して目的物
2.65ｇ（収率81.3％）を得る。 融点；240℃ 〔α〕22 D；−3.4゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.44 アミノ酸分析1；Ser1.83(2)、Val1(1) 元素分析〔C19H29O2N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 51.92 6.65 15.94 測定値 51.63 6.65 15.98 Ｐ（25−38）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔37〕
加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下留去
し、残渣にエーテルを加え、生じた沈澱を取す
る。得られた粉末をDMSO6ml、DMF6mlに溶か
し、Et3N0.54mlを加え、PH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Gln―ONp1.17ｇ、Et3N0.38mlを加え
室温で２日間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残
渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加え沈澱物を
取する。５％クエン酸、水、５％重曹水、水の順
で洗浄する。DMSO―MeOHから再結晶化して
目的物2.76ｇ（収率98.6％）を得る。 融点；248〜249℃ 〔α〕20 D；−24.6゜（Ｃ＝1.1、DMSO） TLC；Rf2＝０、Rf3＝０ アミノ酸分析；Glu1.05(1)、Asp1.95(2)、
Gly0.99(1)、Ala(1)、Val1.98(2)、Leu1.00(1)、
Phe0.99(1)、His0.89(1) 元素分析〔C72H94O18N14・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.53 6.59 13.50 測定値 59.58 6.71 13.20 Ｐ（27−28）Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―Leu―
OMe〔10〕 Ｈ―Leu―OMe2.91ｇをDMF50mlに溶かし、
０℃に冷却してEt3N2.24mlでPH７に調節後、Ｚ
（OMe）―Lys（Ｚ）―OTCP10ｇをTHF50mlに
溶解した溶液とEt3N2.24mlを加えて室温で20時
間撹拌する。反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エ
チルおよび５％クエン酸と共にふりまぜる。有機
層を５％クエン酸、食塩水、５％重曹水、食塩水
の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減
圧濃縮する。残渣にエーテルを加え結晶を得る。
MeOH―エーテルから再結晶化して目的物7.33ｇ
（収率80.1％）を得る。 融点；107〜108℃ 〔α〕20 D；−21.2゜（Ｃ＝0.9、MeOH） TLC；Rf2＝0.73、Rf3＝0.63 元素分析〔C30H41O3N8として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.03 7.23 7.35 測定値 63.18 7.23 7.26 Ｐ（26−28）Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）
―Leu―OMe〔11〕 〔10〕5.72ｇにアニソール2.17ml、TFA8.68ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄し乾燥す
る。これをDMF20mlに溶解し、Et3N1.4mlでPH
７に調節後、Ｚ（OMe）―Lys（Ｚ）―OTCP6.24
ｇ、Et3N1.4mlを加え室温で20時間撹拌する。反
応後、DMFを減圧下留去し、残渣に５％クエン
酸、エーテルを加え生じた沈澱物を取する。こ
の沈澱物を５％クエン酸、水、５％重曹水、水の
順で洗浄する。熱MeOH―エーテルから再結晶
化して目的物6.71ｇ（収率80.5％）を得る。 融点；153〜154℃ 〔α〕20 D；−15.8゜（Ｃ＝1.1、DMF） TLC；Rf1＝0.41 元素分析〔C44H59O11N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 63.37 7.13 8.40 測定値 63.54 7.21 8.38 Ｐ（25−28）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―OMe〔12〕 〔11〕6.00ｇにアニソール2.33ml、TFA9.33ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
を取し、乾燥して粉末を得る。 一方、Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―OH・
CHA6.71ｇを酢酸エチル20mlおよび1N塩酸8.64
mlと共にふりまぜる。有機層を水20mlで洗浄後、
減圧濃縮する。この残渣をTHF20mlに溶かし、
Et3N1.45mlを加え、−10℃で塩化イソブチロキシ
カルボニル1.36mlを加え５分間撹拌する。これに
上記の粉末をDMF20mlに溶かし、Et3N1.00mlで
PH７に調節した溶液を加え、０℃で４時間撹拌す
る。反応液を減圧濃縮し、残渣に５％クエン酸、
エーテルを加え生じた沈澱を取する。５％クエ
ン酸、５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF―
酢酸エチルから再結晶化して目的物5.78ｇ（収率
68.5％）を得る。 融点；151〜152℃ 〔α〕20 D；−8.9゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.76、Rf3＝0.75 元素分析〔C59H81O14N9Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 60.44 6.96 10.75 測定値 60.48 6.97 10.65 Ｐ（25−28）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―NHNH2〔13〕 〔12〕5.78ｇをMeOH50mlに溶解し、これにヒ
ドラジン水和物1.23mlを加え室温で一夜放置す
る。析出した結晶を取し、EtOHで洗浄する。
MeOH―EtOHから再結晶化して目的物5.25ｇ
（収率91.3％）を得る。 融点；178〜180℃ 〔α〕20 D；−10.1゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析；Leu1(1)、Lys1.94(2)、Arg1.01
(1) 元素分析〔C58H81O13N11Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.42 6.96 13.14 測定値 59.29 7.17 12.87 Ｐ（23−24）Boc−Trp―Leu―OH・DCHA
〔14〕 Boc―Trp―ONp10.65ｇをDMF30mlに溶解す
る。これに０℃で、Ｈ―Leu―OH3.9ｇを水10
ml、DMF30mlおよびEt3N6.95mlに溶かして加
え、室温で一夜撹拌する。溶媒を減圧下留去し、
残渣を５％重曹水、酢酸エチルと共にふりまぜ
る。水層をクエン酸で酸性にし、酢酸エチルを加
えてふりまぜる。有機層を５％クエン酸、水の順
で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃
縮する。残渣をMeOHに溶かし、DCHA5.45ｇ
を加える。MeOHを減圧下留去して、エーテル
を加え結晶化する。MeOH―エーテルから再結
晶化して目的物10.15ｇ（収率97.0％）を得る。 融点；192〜195℃ 〔α〕20 D；−22.9゜（Ｃ＝0.6、MeOH） TLC；Rf2＝0.67、Rf3＝0.69 元素分析〔C22H31O5N3・C12H23Nとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 68.19 9.09 9.36 測定値 68.07 9.14 9.27 Ｐ（22−24）Boc−Glu（OBzl）―Trp―Leu―
OH・DCHA〔15〕 〔14〕10.0ｇを酢酸エチル50ml、水50mlに懸濁
し、1N塩酸17.1mlを０℃で加える。析出した塩
を去した後、有機層を食塩水で洗浄して、無水
硫酸ナトリウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下
留去して、油状物を得る。これに２％EDTを含
むアニソール5.57mlとTFA22.28mlを加え、０℃
で窒素ガス下、１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、ｎ―ヘキサンで３度洗浄後、乾燥する。
これをDMF50mlに溶かし、Boc―Glu（OBzl）―
OSu7.43ｇ、Et3N4.79mlを加え、４℃で16時間撹
拌する。DMFを減圧下留去し、残渣を５％アン
モニア水で溶かし、エーテルで洗浄する。水層を
クエン酸で酸性とし、生じた油状物を酢酸エチル
で抽出する。酢酸エチル層を食塩水で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残渣
をMeOHに溶かし、DCHA2.8ml加え、MeOHを
減圧濃縮し、エーテルを加えて結晶化する。
MeOH―エーテルから３度再結晶化して目的物
7.84ｇ（収率57.0％）を得る。 融点；149〜150℃ 〔α〕20 D；−23.1゜（Ｃ＝1.3、MeOH） TLC；Rf2＝0.53、Rf3＝0.71 アミノ酸分析2；Trp0.76(1)、Glu1.12(1)、Leu1
(1) 元素分析〔C34H44O8N4・C12H23Nとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 67.53 8.26 8.56 測定値 67.23 8.28 8.69 Ｐ（20−21）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Val―
NHNHTroc〔16〕 Ｚ（OMe）―Val―NHNHTroc22.79ｇにアニ
ソール10.74ml、TFA42.96mlを加え、０℃１時間
撹拌する。TFAを減圧下留去し、残渣をｎ―ヘ
キサンで３度洗浄し、乾燥して油状物を得る。 一方、Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―OH・
CHA30.0ｇを酢酸エチル150ml、水100mlに懸濁
し、1N塩酸48.41mlを０℃で加える。析出した塩
を去した後、有機層を食塩水で洗浄して、無水
硫酸ナトリウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下
留去して油状物を得る。これをTHF100mlに溶か
し、Et3N81.3mlを加え、−10℃で塩化イソブチロ
キシカルボニル7.53mlを加え５分間撹拌する。こ
れに上記の油状物をDMF50mlに溶かし、
Et3N6.78mlでPH７に調節した溶液を加え、−10℃
で２時間、室温で16時間撹拌する。反応液を減圧
濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび５％クエン酸と
共にふりまぜる。有機層を５％クエン酸、食塩
水、１％アンモニア水、食塩水の順で洗浄し、無
水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。得ら
れた油状物をシリカゲルカラムクロマトグラフイ
ー〔溶出溶媒CHCl3―MeOH（20：0.5）〕により
精製する。酢酸エチル―ｎ―ヘキサンより結晶化
して目的物29.25ｇ（収率74.7％）を得る。 融点；114〜116℃ 〔α〕20 D；−24.6゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.62、Rf3＝0.46 元素分析〔C32H44O9N7SCl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.50 5.48 12.12 測定値 47.24 5.43 11.88 Ｐ（19−21）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―NHNHTroc〔17〕 〔16〕7.30ｇにアニソール３・89ml、
TFA15.57mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFA
を減圧下留去し、残渣にエーテルを加えた後、生
じた沈澱物を取し、乾燥して粉末を得る。これ
をDMF50mlに溶かし、Et3N12.6mlでPH７に調節
して、Boc―Glu（OBzl）―ONp4.13ｇと
Et3N12.6mlを加え、室温で16時間撹拌する。溶
媒を減圧下留去し、残渣に５％クエン酸、エーテ
ルを加え生じた沈澱物を取する。５％クエン
酸、水、５％重曹水、水の順で洗浄し、MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物6.29ｇ（収率
72.5％）を得る。 融点；159〜160℃ 〔α〕20 D；−31.9゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.68、Rf3＝0.74 元素分析〔C40H57O11N8SCl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 49.82 5.96 11.62 測定値 49.85 5.97 11.60 Ｐ（19−21）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―NHNH2〔18〕 〔17〕6.29ｇを酢酸15mlに溶解し、亜鉛末4.25
ｇを加え、室温で８時間撹拌する。酢酸を減圧下
留去し、残渣に５％重曹水を加え生じた沈澱物を
取する。飽和EDTA水溶液、水の順で洗浄す
る。MeOH―エーテルから再結晶化して目的物
2.64ｇ（収率51.3％）を得る。 融点；186〜187℃ 〔α〕20 D；−5.6゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.58、Rf3＝0.55 アミノ酸分析1；Glu1.20(1)、Leu(1)、Arg1.07
(1) 元素分析〔C37H56O9N8S・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 55.69 7.20 14.04 測定値 55.73 7.18 14.17 Ｐ（17−18）Ｚ（OMe）−Ser−Met（Ｏ）−OMe
〔19〕 Ｚ（OMe）―Met（Ｏ）―OMe9.02ｇにアニソ
ール5.71ml、TFA22.84mlを加え、０℃１時間撹
拌する。TFAを減圧下留去し、残渣をｎ―ヘキ
サンで３度洗浄後、乾燥して油状物を得る。 Ｚ（OMe）―Ser―NHNH2 8.95ml 5.55N―HCl／DMF 13.66ml 亜硝酸イソアミル 5.05ml DMF 20ml Et3N 15.92ml Ｚ（Ｏ Me）―Ser―NHNH2を前回〔５〕の
方法と同様にして得られたアジド溶液に、上記で
得た油状物をDMF40mlに溶解し、Et3N3.68mlで
PH７に調節した溶液を加える。４℃で２日間撹拌
する。DMFを減圧下留去し、残渣をｎ―BuOH
に溶解し、５％クエン酸、食塩水、５％重曹水の
順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧
濃縮する。得られた油状物をシリカゲルカラムク
ロマトグラフイー〔溶出溶媒CHCl3―MeOH
（10：05）〕により精製する。MeOH―酢酸エチ
ルから結晶化して目的物7.22ｇ（収率63.8％）を
得る。 融点；109〜110℃ 〔α〕20 D；−36.4゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.6、Rf3＝0.25 元素分析；〔C18H26O8N2Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 50.22 6.09 6.51 測定値 50.31 6.05 6.43 Ｐ（16−18）Boc―Asn―Ser―Met（０）―
OMe〔20〕 〔19〕7.20ｇにアニソール3.63ml、TFA14.54
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。得られた粉末をDMF25
mlに溶かし、Et3N2.34mlでPH７に調節した後、
Boc―Asn―Ｏ Np5.91ｇ、Et3N2.34mlを加え、
室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去し、
残渣に酢酸エチルを加えた後、析出した結晶を
取し、５回酢酸エチルで洗浄する。MeOH―酢
酸エチルから再結晶化して目的物6.44ｇ（収率
80.1％）を得る。 融点；181〜182℃ 〔α〕20 D；−49.3゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.46、Rf3＝0.06 元素分析〔C18H32O9N4Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 44.99 6.71 11.66 測定値 45.10 6.83 11.45 Ｐ（16−18）Boc−Asn−Ser−Met（０）―
NHNH2〔21〕 〔20〕5.25ｇをMeOH30mlに溶かし、これにヒ
ドラジン水和物2.73mlを加え、室温で一夜放置す
る。析出した結晶を取し、EtOHで洗浄する。
DMSO―MeOHから再結晶化して目的物4.73ｇ
（収率90.4％）を得る。 融点218〜219℃ 〔α〕20 D−27.0゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝0.06、Rf4＝0.49 アミノ酸分析1；Asp1(1)、Ser0.88(1)、Met＋
Met（０）0.75(1) 元素分析〔C17H32O8N6S・1/2H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 41.71 6.79 17.17 測定値 41.64 6.59 17.07 Ｐ（14−15）Ｚ（OMe）―His―Leu―OMe〔22〕 Ｚ（OMe）―His―NHNH2 20.00ｇ 4.78N―HCl／DMF 45.21ml 亜硝酸イソアミル 9.58ml DMF 20ml Ht3N 40.32ml Ｚ（OMe）―His―NHNH2を前回〔５〕の方
法と同様にして得られたアジド溶液に、Ｈ―Leu
―OMe・Hcl9.08ｇをDMF50mlに溶かし、
Et3N7.00mlでPH７に調節した溶液を加えた後、
４℃で20時間撹拌する。DMFを減圧下留去し、
残渣を酢酸エチルおよび５％重曹水と共にふりま
ぜる。有機層を５％重層水、食塩水の順で洗浄
し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮す
る。残渣にエーテルを加えて結晶化し、MeOH
―エーテルから再結晶化して目的物16.32ｇ（収
率73.1％）を得る。 融点；110〜111℃ 〔α〕20 D；−24.1゜（Ｃ＝1.1、MeOH） TLC；Rf2＝0.65、Rf3＝0.17 元素分析〔C22H30O6N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.18 6.77 12.55 測定値 58.93 6.70 12.32 Ｐ（13−15）Boc―Lys（Ｚ）―His―Leu―
OMe〔23〕 〔22〕5.11ｇにアニソール2.49ml、TFA9.96ml
を加え、０℃で１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。得られた粉末をDMF20
mlに溶かし、Et3N3.19mlを加えPH７に調節後、
Boc−Lys（Ｚ）―OSuを加えて、室温で20時間撹
拌する。DMFを減圧下留去し、残渣を酢酸エチ
ルおよび５％重曹水と共にふりまぜる。有機層を
５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、無水硫酸ナト
リウムで乾燥する。酢酸エチルを減圧下留去し、
残渣にエーテルを加えて結晶化し、MeOH―エ
ーテルから再結晶化して目的物5.42ｇ（収率73.7
％）を得る。 融点；144〜147℃ 〔α〕20 D；−33.6゜（Ｃ＝0.7、MeOH） TLC；Rf2＝0.65 元素分析〔C32H48O8N6として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.61 7.50 13.04 測定値 59.61 7.45 13.03 Ｐ（13−15）Boc―Lys（Ｚ）―His―Leu―
NHNH2〔24〕 〔23〕2.65ｇをMeOH20mlに溶解し、ヒドラジ
ン水和物1.03mlを加え、室温で２日間放置する。
MeOHを減圧下留去し、残渣に水を加えた後、
生じた沈澱物を取する。MeOH―酢酸エチル
から再結晶化して目的物2.10ｇ（収率79.3％）を
得る。 融点；167〜169℃ 〔α〕20 D；−21.4゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析1；Leu1(1)、Lys0.97(1)、His0.91
(1) 元素分析〔C31H48O7N8として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.74 7.50 17.38 測定値 57.58 7.52 17.38 Ｐ（11−12）Ｚ（OMe）―Leu―Gly―OMe〔25〕 Ｈ―Gly―Ｏ Me・HCl12.56ｇをDMF／50ml
に溶解し、Et3N14mlでPH７に調節した後、Ｚ
（OMe）―Leu―ON41.64ｇ、Et3N14mlを加え
て、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去
し、残渣を酢酸エチルに溶解する。５％クエン
酸、５％重曹水、食塩水の順で洗浄し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。残渣にエー
テルを加えて結晶化した後、酢酸エチル―エーテ
ルから再結晶化して目的物28.98ｇ（収率79.1％）
を得る。 融点；78〜79℃ 〔α〕25 D；13.1゜（Ｃ＝0.7、DMF） TLC；Rf2＝0.71 元素分析〔C18H26O6N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.00 7.15 7.65 測定値 59.17 7.16 7.59 Ｐ（10−12）Ｚ（OMe）―Asn―Leu―Gly―
OMe〔26〕 〔25〕22.36ｇにアニソール13.26ml、
TFA53.04mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFA
を減圧下留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄
後、乾燥する。これをDMF100mlに溶解し、
Et3N8.54mlでPH７に調節した後、Ｚ（OMe）―
Asn―ONp25.46ｇ、Et3N8.54mlを加え、室温で
20時間撹拌する。DMFを減圧不留去し、残渣に
５％クエン酸、酢酸エチルを加えた後、生じた沈
澱を取する。５％クエン酸、５％重曹水、水の
順で洗浄し、DMF―酢酸エチルから再結晶化し
て目的物22.42ｇ（収率76.5％）を得る。 融点；196〜197℃ 〔α〕22 D；−15.4゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.56、Rf3＝0.33 元素分析〔C22H32O8N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.99 6.71 11.66 測定値 55.14 6.86 11.60 Ｐ（９−12）Ｚ（OMe）―His―Asn―Leu―
Gly―OMe〔27〕 〔26〕14.03ｇにアニソール9.52ml、TFA38.08
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後生じた沈澱を
取し、乾燥して粉末を得る。 Ｚ（OMe）―His―NHNH2 11.67ｇ 5.55N―HCl／DMF 22.70ml 亜硝酸イソアミル 5.59ml DMF 20ml Et3N 22.54ml Ｚ（OMe）―His―NHNH2を前回〔５〕の方
法と同様にして得られたアジド溶液に、上記で得
た粉末をDMF70mlに溶解し、Et3N4.09mlでPH７
に調節した溶液を加える。４℃で20時間撹拌す
る。DMFを減圧下留去し、残渣に５％重曹水、
エーテルを加えた後、生じた沈澱を取する。５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―MeOHから
再結晶化して目的物15.13ｇ（収率83.9％）を得
る。 融点；226〜227℃ 〔α〕22 D；−11.1゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.37 元素分析〔C28H32O9N4として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.45 6.36 15.88 測定値 54.31 6.38 15.73 Ｐ（８−12）Boc―Met（０）―His―Asn―Leu
―Gly―OMe〔28〕 〔27〕10.00ｇにアニソール5.28ml、TFA21.12
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、エーテルを加えた後、生じた沈澱物を
取し、乾燥して粉末を得る。 一方、Boc―Met（０）―OH5.16ｇをTHF30ml
に溶かし、Et3N3.26mlを加え、−10℃で塩化イソ
ブチロキシカルボニル3.06mlを加え５分間撹拌す
る。これに上記の粉末をDMF50mlに溶かし、
Et3N4.57mlでPH７に調節した溶液を加え、０℃
で４時間撹拌する。反応液を過し、液を減圧
濃縮する。残渣にEtoHを加えた後、生じた沈澱
を取する。DMF―EtoHから３度再結晶化して
目的物6.39ｇ（収率56.3％）を得る。 融点；218〜219℃ 〔α〕22 D；−11.4゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.22 元素分析〔C29H48O10N8Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 49.70 6.90 15.99 測定値 49.74 6.80 15.74 Ｐ（８−12）Boc―Met（０）―His―Asn―Leu
―Gly―NHNH2〔29〕 〔28〕5.21ｇをDMF30ml、MeOH20mlに溶解
し、ヒドラジン水和物1.86mlを加え室温で20時間
撹拌する。溶媒を減圧下留去し、EtOHを加えた
後、生じた沈澱物を取する。DMF―MeOHか
ら再結晶化して目的物4.39ｇ（収率84.2％）を得
る。 融点；197〜198℃ 〔α〕18 D；−19.7゜（Ｃ＝1.0、DMSO） TLC；Rf2＝0.13 アミノ酸分析；Asp1.02(1)、Gly1(1)、Met＋
Met（０）0.82(1)、Leu1.03(1)、His0.98(1) 元素分析〔C28H48O9N10Sとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.98 6.90 19.99 測定値 47.72 6.84 19.70 Ｐ（６−７）Ｚ（OMe）―Gln―Leu―
NHNHTroc〔30〕 Ｚ（OMe）―Leu―NHNHTroc20.00ｇにアニ
ソール8.96ml、TFA35.84mlを加え、０℃１時間
撹拌する。TFAを減圧下留去し残渣をｎ―ヘキ
サンで洗浄し、乾燥する。これをDMF120mlに溶
解し、Et3N11.52ml、Ｚ（OMe）―Gln―ONpを
加え、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留
去し、残渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加えた
後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―酢酸エチル
から再結晶化して目的物20.70ｇ（収率82.0％）
を得る。 融点；188〜190℃ 〔α〕20 D；−17.1゜（Ｃ＝1.0、DMF） TLC；Rf2＝0.65、Rf3＝0.44 元素分析〔C23H32O8N5Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 45.07 5.26 11.43 測定値 45.52 5.41 11.52 Ｐ（５−７）Ｚ（OMe）―Ile―Gln―Leu―
NHNHTroc〔31〕 〔30〕20.70ｇにアニソール11.00ml、TFA44.0
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄した後、
乾燥する。これをDMF200mlに溶解し、
Et3N9.48ml、Ｚ（OMe）―Ile―ONp14.09ｇを加
え、室温で18時間撹拌する。DMFを減圧下留去
し、残渣に５％クエン酸、酢酸エチルを加えた
後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、５
％重曹水、水の順で洗浄し、DMF―酢酸エチル
から再結晶化して目的物17.43ｇ（収率79.1％）
を得る。 融点；205〜207℃ 〔α〕20 D；−15.3゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.62、Rf3＝0.32 元素分析〔C29H43O9N6Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 47.97 5.97 11.58 測定値 48.16 6.17 11.66 Ｐ（４−７）Boc−Glu（OBzl）−Ile―Gln―Leu
―NHNHTroc〔32〕 〔31〕15.0ｇにアニソール8.99ml、TFA35.69
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣にエーテルを加えた後、生じた沈澱
物を取し、乾燥する。これをDMF50mlに溶解
し、Et3N5.80ml、Boc―Glu（OBzl）―OSu8.99
ｇを加え、室温で20時間撹拌する。DMFを減圧
下留去し、残渣に５％クエン酸、エーテルを加え
た後、生じた沈澱物を取する。５％クエン酸、
５％重曹水、水の順で洗浄する。DMF―MeOH
から再結晶化して目的物15.89ｇ（収率87.1％）
を得る。 融点；223〜225℃ 〔α〕18 D；−26.3゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.59、Rf3＝0.49 元素分析〔C37H56O11N7Cl3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 50.43 6.41 11.13 測定値 50.33 6.52 11.63 Ｐ（４―７）Boc―Glu（OBzl）―Ile―Gln―
Leu―NHNH2〔33〕 〔32〕9.0ｇをDMF40mlに溶かし、酢酸6.81ml、
亜鉛末6.67ｇを加え、室温で18時間撹拌する。亜
鉛末を去後、液を減圧濃縮し、残渣に飽和
EDTA溶液を加えた後、重曹を加えてPH７に調
節すると沈澱物が生じる。この沈澱物を飽和
EDTA溶液、水の順で洗浄し、DMF―MeOHか
ら２度再結晶化して目的物5.31ｇ（収率73.7％）
を得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕18 D；−22.3゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.48 アミノ酸分析1；Glu2.06(2)、Ile1.01(1)、Leu1(1) 元素分析〔C34H55O9N7として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.85 7.85 13.89 測定値 57.76 8.00 13.64 Ｐ（２−３）Ｚ（OMe）―Val―Ser―OMe〔34〕 Ｈ―Ser―OMe15.56ｇをDMF80mlに溶かし、
Et3N14.0mlでPH７に調節する。この溶液にＺ
（OMe）―Val―OH28.13ｇをTHF140mlに溶か
した溶液を加えた後、―10℃でDCC24.76ｇを加
え３時間、室温で15時間撹拌する。沈澱物を去
後、溶媒を減圧留去し、析出した結晶をEtOHで
取する。THF―EtOHから再結晶化して目的
物22.19ｇ（収率58.0％）を得る。 融点；160〜161℃ 〔α〕20 D；9.9゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.63、Rf3＝0.64 元素分析〔C18H26O7N2として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.53 6.85 7.33 測定値 56.70 6.96 7.36 Ｐ（１−３）Ｚ―Ser―Val―Ser―OMe〔35〕 〔34〕7.15ｇにアニソール4.06ml、TFA16.24
mlを加え、０℃１時間撹拌する。TFAを減圧下
留去し、残渣をｎ―ヘキサンで３度洗浄した後、
乾燥して油状物を得る。 Ｚ―Ser―NHNH2 5.68ｇ 5.55N―HCl／DMF 9.70ml 亜硝酸イソアミル 3.58ml DMF 10ml Et3N 11.31ml Ｚ―Ser―NHNH2を前回〔５〕の方法と同様
にして得られたアジド溶液に、上記で得た油状物
をDMF35mlに溶解し、Et3N2.62mlでPH７に調節
した溶液を加える。４℃で２日間撹拌する。沈澱
物を去し、液を減圧濃縮した後、残渣に
EtOHを加える。生じた沈澱物を取しDMF―
MeOHから再結晶化して目的物4.94ｇ（収率60.1
％）を得る。 融点；211〜213℃ 〔α〕20 D；6.4゜（Ｃ＝0.9、DMF） TLC；Rf2＝0.66 元素分析〔C20H29O8N3として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 54.66 6.65 9.56 測定値 54.75 6.52 9.45 Ｐ（１−３）Ｚ―Ser―Val―Ser―NHNH2
〔36〕 〔35〕3.27ｇをDMF20ml、MeOH10mlに溶解
し、ヒドラジン水和物1.86mlを加え一夜放置す
る。析出した結晶をMeOHで取しEtOHで洗浄
後、DMSO―MeOHから再結晶化して目的物
2.65ｇ（収率81.3％）を得る。 融点；240℃ 〔α〕22 D；−3.4゜（Ｃ＝0.6、DMSO） TLC；Rf2＝0.44 アミノ酸分析1；Ser1.83(2)、Val1(1) 元素分析〔C19H29O2N5として〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 51.92 6.65 15.94 測定値 51.63 6.65 15.98 Ｐ（25−38）Ｚ（OMe）―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔37〕
〔９〕2.76ｇにアニソール1.65mlとTFA6.60ml
を加え、−10℃60分撹拌する。反応終了後、減圧
下でTFAを留去し、残渣にエーテルを加え、得
られた粉末を分離し、減圧乾燥する。 〔13〕 2.69ｇ 4.78NHCl／DMF 1.16ml 亜硝酸イソアミル 0.38ml DMF 10ml Et3N 0.31ml 〔13〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、得られた乾燥粉末をDMF、
DMSO各５mlに溶解し、Et3N0.54mlを加えた溶
液を加え、４℃で48時間撹拌する。沈澱が析出し
た反応溶液に酢酸を数滴加えて中和する。溶媒を
減圧留去し、残渣に酢酸エチル、５％クエン酸水
を加え、粉末を得る。この粉末を５％クエン酸
水、５％重曹水、水の順に懸濁洗浄した後、
DMSO―MeOHで再結晶を行い、3.50ｇを得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕20 D；−15.9゜（Ｃ＝0.6、DMSO）TLC；
Rf45＝０ 元素分析〔C121H163O28N23S1.5H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.39 6.84 13.17 測定値 59.29 6.83 13.23 アミノ酸分析1；Leu1.92(2)、Lys2.00(2)、
Arg1.04(1)、Asp2.03(2)、Glu1.11(1)、Gly0.99(1)、
Ala1.00(1)、Val1.82(2)、Phe0.95(1)、His0.90(1)、 Ｐ（22−38）Boc―Glu（OBzl）―Trp―Leu―
Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln
―Asp（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val
―Ala―Leu―Gly―OBzl〔38〕 〔37〕3.50ｇにアニソール1.58mlとTFA6.32ml
を加え、０℃で60分撹拌する。反応終了後、減圧
下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加え洗浄
して、油状物質を得る。これにエーテルと５％重
曹水を加えて粉末を得る。この粉末を５％重曹
水、水の順で懸濁洗浄した後、減圧乾燥する。 〔15〕2.33ｇに酢酸エチル10mlと0.2N塩酸水10
mlを加えふりまぜる。有機層を分離し、水洗した
後無水芒硝で乾燥し、乾燥剤を除き、酢酸エチル
をを留去し、得た残渣にDMSO、DMF各10mlを
加えて溶解する。これに先に得られた乾燥粉末と
HOBT0.54ｇを加え溶解させた後DCC0.72ｇを加
え、４℃で72時間撹拌する。沈澱が析出した反応
溶液を減圧濃縮し、得られた油状残渣に５％クエ
ン酸水とエーテルを加えて粉末を得る。この粉末
を５％クエン酸水、５％重曹水、水の順に懸濁洗
浄した後、DMSOに溶解し一夜放置する。不溶
物を除去した後、DMSO―MeOHで再結晶を行
い、2.85ｇ（収率68.5％）を得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕20 D；−19.8゜（Ｃ＝0.8、DMSO） TLC；Rf23＝０ アミノ酸分析2；Glu1.98(2)、Leu2.84(3)、
Trp0.74(1)、Asp1.97(2)、Gly1.02(1)、Ala1.00(1)、
Val1.67(2)、Phe0.93(1)、Lys2.00(2)、His0.78(1)、
Arg1.02 元素分析〔C146H197O32N27S・7H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 58.43 6.83 12.61 測定値 58.44 7.09 12.58 Ｐ（19−38）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―
Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）
―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―
Gly―OBzl〔39〕 〔38〕2.81ｇに２％EDT含有アニソール2.13ml
とTFA8.52mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加えて
油状物を得る。これにエーテルを加えて、得られ
た粉末を減圧乾燥する。 〔18〕 1.54ｇ 5.55NHCl／DMF 0.85ml 亜硝酸イソアミル 0.31ml Et3N 0.66ml DMF 3.0ml Et3N 0.27ml 〔18〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF、DMSO各10ml溶液に溶解し、Et3NO、27
mlを加えた溶液を加え、４℃で48時間撹拌する。
反応液に酢酸数滴を加え、中和した後、減圧濃縮
する。得られた残渣に、５％クエン酸水、酢酸エ
チルを加え、粉末を得る。この粉末を５％クエン
酸水、５％重曹水、水の順で懸濁洗浄した後、
DMSO―MeOHで再結晶を行い、3.01ｇを得る。 融点；165〜168℃ 〔α〕20 D；25.3゜（Ｃ＝0.4、DMF） TLC；Rf2＝０ アミノ酸分析；Glu2.97(3)、Val2.79(3)、
Arg1.89(2)、Asp1.94(2)、Gly1.00(1)、Ala1.00(1)、
Leu2.96(3)、Phe1.00(1)、Lys1.92(2)、His1.02(1)、
Trp0（測定せず）(1) 元素分析〔C178H241O39N33S2・11H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.32 7.11 12.40 測定値 56.98 6.65 12.92 Ｐ（16−38）Boc―Asn―Ser―Met（Ｏ）―Glu
（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）―
Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）
―Leu―Gln―Asp（OBzl）―Val―His―Asn
―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔40〕 〔39〕2.95ｇに２％EDT含有アニソール2.27ml
とTFA9.08mlを加え、−10℃で60分窒素気流下で
撹拌する。減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え油状物質を得る。これにエーテルを加
え、得られた粉末を減圧乾燥する。 〔21〕 0.80ｇ 5.55NHCl／DMF 0.72ml 亜硝酸イソアミル 0.27ml Et3N 0.56ml DMF 3.00ml Et3N 0.28ml 〔21〕を前回〔５〕の方法と同様にして得られ
た溶液に、先に得られた乾燥粉末をDMF、
DMSO各５mlに溶解し、Et3N0.23mlを加えた溶
液を投入し、４℃で48時間撹拌する。反応液を酢
酸で中和した後、減圧濃縮して得られた油状残渣
にエーテルと５％クエン酸水を加えて粉末を得
る。この粉末を５％クエン酸水、５％重曹水、水
の順に懸濁洗浄した後、DMSO―酢酸エチルで
再結晶する。これを３回に分けて、DMSOに溶
かして、セフアデツクスLH―60のカラム（６×
150cm、DMSO）に注入し、DMSOで溶出する。
溶出液を15mlづつ分画し、主要溶出部分（95本〜
116本）を集め、DMSOを留去して酢酸エチルを
加えて結晶化する。他の二つの部分も同様に処理
して、合計2.40ｇを得る。 融点；160〜161℃ 〔α〕20 D；−9.9゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.45 アミノ酸分析2；Asp2.91(3)、Ser0.81(1)、
Met0.11、Met（０）0.61(1)、Glu3.12(3)、Gly
(3)、Gly1.01(1)、Ala1(1)、Val2.85(3)、Leu3.02
(3)、Phe0.99(1)、Lys2.01(2)、His0.93(1)、
Arg2.03(2) 元素分析〔C190H261O45N37S3・10H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.21 6.98 12.77 測定値 56.18 6.65 13.27 Ｐ（13−38）Boc−Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn
―Ser―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）
―Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）
―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp
（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala
―Leu―Gly―OBzl〔41〕 〔40〕2.37ｇに２％EDT含有アニソール1.33ml
とTFA5.32mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加えて
得た油状物質に、エーテルを加え、得られた沈澱
を乾燥する。 〔24〕 0.79ｇ 5.55NHCl／DMF 0.79ml 亜硝酸イソアミル 0.19ml Et3N 0.61ml DMF 2.0ml Et3N 0.20ml 〔24〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF、15mlに溶解し、Et3N0.17mlを加えた溶液
を加え、４℃で24時間撹拌する。反応液を酢酸で
中和後、減圧濃縮する。得られた油状残渣に５％
クエン酸水とエーテルを加えて、粘性沈澱を得
る。これを５％重曹水で３回、さらに水の順に懸
濁洗浄して粉末を得る。これをDMF−酢酸エチ
ルで５回再沈澱を行い、2.22ｇを得る。 融点；149〜151℃ 〔α〕20 D；1.3゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.59 アミノ酸分析1；Leu4.18(4)、His1.87(2)、
Lys3.48(3)、Asp2.91(3)、Ser0.79(1)、Glu3.11
(3)、Gly1.08(1)、Ala1(1)、Val2.91(3)、Met0.82
(1)、Phe0.96(1)、Trp0（測定せず）(1)、Arg1.61
(2) 元素分析〔C216H297O50N43S3・6H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.65 6.92 13.38 測定値 57.35 6.86 13.69 Ｐ（８−38）Boc―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu
―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―
Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val―
Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔42〕 〔41〕1.57ｇに２％EDT含有アニソール1.17ml
とTFA4.68mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去した残渣にヘキサンを加え、
油状物を得る。これにエーテルを加えて、得られ
た粉末を減圧乾燥する。 〔29〕 0.50ml 5.55NHCl／DMF 0.46ml 亜硝酸イソアミル 0.12ml Et3N 0.36ml DMF 5.0ml Et3N 0.12ml 〔29〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF15mlに溶解し、Et3N0.15mlを加えた溶液を
加え、４℃で48時間撹拌する。この反応液にさら
に同量の〔29〕から得られたアジド溶液を加え、
18時間撹拌する。この反応液を酢酸で中和後、減
圧濃縮して得られた油状残渣に３％酢酸水とエー
テルを加え、粉末とする。この粉末を３％酢酸
水、水、５％重曹水、水の順に懸濁洗浄した後、
DMF―酢酸エチルで３回再沈澱を行い、さらに
シリカゲルのカラム（２×14cm）に適用し、溶媒
系(2)で溶出し、Rf2＝0.46の部分を集め、濃縮し、
酢酸エチルを加え、沈澱872mgを得る。 融点；158〜160℃ 〔α〕18 D；−20.8゜（Ｃ＝0.2、DMSO） TLC；Rf2＝0.46 アミノ酸分析1；Asp3.87(4)、Gly1.94(2)、Met
＋Met（０）1.27(2)、Leu4.67(5)、His2.16(3)、
Ser0.62(1)、Glu3.16(3)、Ala1(1)、Val3.08(3)、
Phe0.97(1)、Lys2.84(3)、Arg1.91(2)、Trp0（測定
せず）(1) 元素分析〔C239H333O37N51S4・3H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.24 6.81 14.25 測定値 57.07 6.96 14.41 Ｐ（４−38）Boc―Glu（OBzl）―Ile―Gln―
Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu―Gly―Lys
（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―Met（Ｏ）―
Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）
―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys
（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―Val―His―
Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔43〕 〔42〕0.54ｇに２％EDT含有アニソール0.48ml
とTFA1.92mlを加え、−10℃で60分撹拌する。反
応終了後、減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え油状物質を得る。これにエーテルを加
え、得た粉末を減圧乾燥する。 〔33〕 0.31ｇ 5.55NHCl／DMF 0.19ml 亜硝酸イソアミル 0.07ml Et3N 0.15ml DMF 1.0ml Et3N 74μl 〔33〕0.31ｇを前回〔５〕の方法と同様にして
得られたアジド溶液を得る。先に得られた乾燥粉
末をDMF3mlに溶解し、Et3N61μlを加えて得た
溶液をアジド溶液に加え４℃で20時間撹拌する。
さらに〔33〕0.31ｇを使い、同様にして得たアジ
ド溶液を追加し、４℃で20時間撹拌する。反応液
を酢酸で中和し、減圧濃縮して得た油状残渣に３
％酢酸水とエーテルを加えて、冷却し、粉末を得
る。これを３％酢酸水、５％重曹水、水の順に懸
濁洗浄した後、DMF―酢酸エチルで２回再沈澱
する。得られた沈澱の半量を、セフアデツクス
LH―60のカラム（3.4×140cm、DMF）に注入
し、DMFで溶出する。溶出液を８mlづつ分画し、
主要溶出部分（58本〜70本）を集め、濃縮し、酢
酸エチルを加えて沈澱を得る。残つた半量の沈澱
も同様に処理して、合計440mgを得る。 融点；155〜157℃ 〔α〕20 D；−30.4゜（Ｃ＝0.1，DMF） TLC；Rf2＝0.52 アミノ酸分析１；Glu5.61(5)、Ile1.22(1)、
Leu6.00(6)、Asp3.60(4)、Ser0.72(1)、Gly1.91(2)、
Ala1(1)、Val2.92(3)、Met＋Met（０）1.22(2)、
Phe0.99(1)、Trp0（測定せず）（０）、Lys3.00(3)、
His2.84(3)、Arg2.02(2) 元素分析〔C268H376O64N56S4・6H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.04 6.93 13.90 測定値 56.79 7.19 14.39 Ｐ（１−38）Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu（OBzl）
―Ile―Gln―Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―
Leu―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser
―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val
―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔44〕 〔43〕420mgに２％EDT含有アニソール0.41ml
とTFA1.64mlを加え、−10℃で60分撹拌する。反
応終了後、減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え、油状物質を得る。これにエーテルを
加え、得られた粉末を減圧乾燥する。 〔36〕 133mg 5.55NHCl／DMF 130μl 亜硝酸イソアミル 48.5μl Et3N 102μl DMF １ml Et3N 51μl 〔36〕133mgを前回〔５〕の方法と同様にして、
アジド溶液を得る。先に得られた乾燥粉末を、
DMF5mlに溶解し、Et3N42.5μlを加えて得た溶液
をアジド溶液に加え、４℃で18時間撹拌する。さ
らに〔36〕133mgを使い、同様にして得たアジド
溶液を反応液に加え、４℃で36時間撹拌する。反
応液を酢酸で中和し、減圧濃縮して得られた油状
残渣に５％酢酸水とエーテルを加え、粘性沈澱を
得る。これを５％酢酸水、５％重曹水、水の順に
懸濁洗浄して得た粉末をDMF―酢酸エチルで２
度再結晶し、460mgを得る。この半量をDMFに溶
解し、セフアデツクスLH−60のカラム（３×
140cm、DMF）に注入し、DMFで溶出する。溶
出液を８mlづつ分画し、主要溶出部分（47本〜58
本）を集め、濃縮し、酢酸エチルを加えて、粉末
を得る。残つた半量も同様に処理して、合計375
mgを得る。さらにこの粉末を６分割し、１つの部
分を５％水含有DMFに溶解し、同溶媒で調整し
たセフアシールＳ―200のカラム（２×144cm）に
注入し、同溶媒で溶出する。溶出液を５mlづつ分
画し、主要溶出部分（71本〜81本）を集め、濃縮
し、酢酸エチルを加えて、粉末を得る。残つた５
つの部分も、同様に処理して合わせて208.3mgを
得る。 融点；159〜160℃ 〔α〕18 D；−17.9゜（Ｃ＝0.2、DMSO） TLC；Rf2＝0.59 アミノ酸分析；Asp3.84(4)、Ser3.18(3)、
Glu5.38(5)、Gly2.22(2)、Ala1(1)、Val4.61(4)、
Met＋Met（０）1.21(2)、Ile1.11(1)、Leu5.76(6)、
Phe1.07(1)、Trp0（測定せず）(1)、Lys3.05(3)、
His2.73(3)、Arg1.91(2) 元素分析〔C282H393O69N59S4・7H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.75 6.87 13.85 測定値 56.55 6.54 13.72
を加え、−10℃60分撹拌する。反応終了後、減圧
下でTFAを留去し、残渣にエーテルを加え、得
られた粉末を分離し、減圧乾燥する。 〔13〕 2.69ｇ 4.78NHCl／DMF 1.16ml 亜硝酸イソアミル 0.38ml DMF 10ml Et3N 0.31ml 〔13〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、得られた乾燥粉末をDMF、
DMSO各５mlに溶解し、Et3N0.54mlを加えた溶
液を加え、４℃で48時間撹拌する。沈澱が析出し
た反応溶液に酢酸を数滴加えて中和する。溶媒を
減圧留去し、残渣に酢酸エチル、５％クエン酸水
を加え、粉末を得る。この粉末を５％クエン酸
水、５％重曹水、水の順に懸濁洗浄した後、
DMSO―MeOHで再結晶を行い、3.50ｇを得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕20 D；−15.9゜（Ｃ＝0.6、DMSO）TLC；
Rf45＝０ 元素分析〔C121H163O28N23S1.5H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 59.39 6.84 13.17 測定値 59.29 6.83 13.23 アミノ酸分析1；Leu1.92(2)、Lys2.00(2)、
Arg1.04(1)、Asp2.03(2)、Glu1.11(1)、Gly0.99(1)、
Ala1.00(1)、Val1.82(2)、Phe0.95(1)、His0.90(1)、 Ｐ（22−38）Boc―Glu（OBzl）―Trp―Leu―
Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln
―Asp（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val
―Ala―Leu―Gly―OBzl〔38〕 〔37〕3.50ｇにアニソール1.58mlとTFA6.32ml
を加え、０℃で60分撹拌する。反応終了後、減圧
下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加え洗浄
して、油状物質を得る。これにエーテルと５％重
曹水を加えて粉末を得る。この粉末を５％重曹
水、水の順で懸濁洗浄した後、減圧乾燥する。 〔15〕2.33ｇに酢酸エチル10mlと0.2N塩酸水10
mlを加えふりまぜる。有機層を分離し、水洗した
後無水芒硝で乾燥し、乾燥剤を除き、酢酸エチル
をを留去し、得た残渣にDMSO、DMF各10mlを
加えて溶解する。これに先に得られた乾燥粉末と
HOBT0.54ｇを加え溶解させた後DCC0.72ｇを加
え、４℃で72時間撹拌する。沈澱が析出した反応
溶液を減圧濃縮し、得られた油状残渣に５％クエ
ン酸水とエーテルを加えて粉末を得る。この粉末
を５％クエン酸水、５％重曹水、水の順に懸濁洗
浄した後、DMSOに溶解し一夜放置する。不溶
物を除去した後、DMSO―MeOHで再結晶を行
い、2.85ｇ（収率68.5％）を得る。 融点；260℃以上で分解 〔α〕20 D；−19.8゜（Ｃ＝0.8、DMSO） TLC；Rf23＝０ アミノ酸分析2；Glu1.98(2)、Leu2.84(3)、
Trp0.74(1)、Asp1.97(2)、Gly1.02(1)、Ala1.00(1)、
Val1.67(2)、Phe0.93(1)、Lys2.00(2)、His0.78(1)、
Arg1.02 元素分析〔C146H197O32N27S・7H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 58.43 6.83 12.61 測定値 58.44 7.09 12.58 Ｐ（19−38）Boc―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―
Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―
Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）
―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―
Gly―OBzl〔39〕 〔38〕2.81ｇに２％EDT含有アニソール2.13ml
とTFA8.52mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加えて
油状物を得る。これにエーテルを加えて、得られ
た粉末を減圧乾燥する。 〔18〕 1.54ｇ 5.55NHCl／DMF 0.85ml 亜硝酸イソアミル 0.31ml Et3N 0.66ml DMF 3.0ml Et3N 0.27ml 〔18〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF、DMSO各10ml溶液に溶解し、Et3NO、27
mlを加えた溶液を加え、４℃で48時間撹拌する。
反応液に酢酸数滴を加え、中和した後、減圧濃縮
する。得られた残渣に、５％クエン酸水、酢酸エ
チルを加え、粉末を得る。この粉末を５％クエン
酸水、５％重曹水、水の順で懸濁洗浄した後、
DMSO―MeOHで再結晶を行い、3.01ｇを得る。 融点；165〜168℃ 〔α〕20 D；25.3゜（Ｃ＝0.4、DMF） TLC；Rf2＝０ アミノ酸分析；Glu2.97(3)、Val2.79(3)、
Arg1.89(2)、Asp1.94(2)、Gly1.00(1)、Ala1.00(1)、
Leu2.96(3)、Phe1.00(1)、Lys1.92(2)、His1.02(1)、
Trp0（測定せず）(1) 元素分析〔C178H241O39N33S2・11H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.32 7.11 12.40 測定値 56.98 6.65 12.92 Ｐ（16−38）Boc―Asn―Ser―Met（Ｏ）―Glu
（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）―
Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）
―Leu―Gln―Asp（OBzl）―Val―His―Asn
―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔40〕 〔39〕2.95ｇに２％EDT含有アニソール2.27ml
とTFA9.08mlを加え、−10℃で60分窒素気流下で
撹拌する。減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え油状物質を得る。これにエーテルを加
え、得られた粉末を減圧乾燥する。 〔21〕 0.80ｇ 5.55NHCl／DMF 0.72ml 亜硝酸イソアミル 0.27ml Et3N 0.56ml DMF 3.00ml Et3N 0.28ml 〔21〕を前回〔５〕の方法と同様にして得られ
た溶液に、先に得られた乾燥粉末をDMF、
DMSO各５mlに溶解し、Et3N0.23mlを加えた溶
液を投入し、４℃で48時間撹拌する。反応液を酢
酸で中和した後、減圧濃縮して得られた油状残渣
にエーテルと５％クエン酸水を加えて粉末を得
る。この粉末を５％クエン酸水、５％重曹水、水
の順に懸濁洗浄した後、DMSO―酢酸エチルで
再結晶する。これを３回に分けて、DMSOに溶
かして、セフアデツクスLH―60のカラム（６×
150cm、DMSO）に注入し、DMSOで溶出する。
溶出液を15mlづつ分画し、主要溶出部分（95本〜
116本）を集め、DMSOを留去して酢酸エチルを
加えて結晶化する。他の二つの部分も同様に処理
して、合計2.40ｇを得る。 融点；160〜161℃ 〔α〕20 D；−9.9゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.45 アミノ酸分析2；Asp2.91(3)、Ser0.81(1)、
Met0.11、Met（０）0.61(1)、Glu3.12(3)、Gly
(3)、Gly1.01(1)、Ala1(1)、Val2.85(3)、Leu3.02
(3)、Phe0.99(1)、Lys2.01(2)、His0.93(1)、
Arg2.03(2) 元素分析〔C190H261O45N37S3・10H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.21 6.98 12.77 測定値 56.18 6.65 13.27 Ｐ（13−38）Boc−Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn
―Ser―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）
―Val―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）
―Lys（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp
（OBzl）―Val―His―Asn―Phe―Val―Ala
―Leu―Gly―OBzl〔41〕 〔40〕2.37ｇに２％EDT含有アニソール1.33ml
とTFA5.32mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去し、残渣にヘキサンを加えて
得た油状物質に、エーテルを加え、得られた沈澱
を乾燥する。 〔24〕 0.79ｇ 5.55NHCl／DMF 0.79ml 亜硝酸イソアミル 0.19ml Et3N 0.61ml DMF 2.0ml Et3N 0.20ml 〔24〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF、15mlに溶解し、Et3N0.17mlを加えた溶液
を加え、４℃で24時間撹拌する。反応液を酢酸で
中和後、減圧濃縮する。得られた油状残渣に５％
クエン酸水とエーテルを加えて、粘性沈澱を得
る。これを５％重曹水で３回、さらに水の順に懸
濁洗浄して粉末を得る。これをDMF−酢酸エチ
ルで５回再沈澱を行い、2.22ｇを得る。 融点；149〜151℃ 〔α〕20 D；1.3゜（Ｃ＝0.8、DMF） TLC；Rf2＝0.59 アミノ酸分析1；Leu4.18(4)、His1.87(2)、
Lys3.48(3)、Asp2.91(3)、Ser0.79(1)、Glu3.11
(3)、Gly1.08(1)、Ala1(1)、Val2.91(3)、Met0.82
(1)、Phe0.96(1)、Trp0（測定せず）(1)、Arg1.61
(2) 元素分析〔C216H297O50N43S3・6H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.65 6.92 13.38 測定値 57.35 6.86 13.69 Ｐ（８−38）Boc―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu
―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―
Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val―
Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔42〕 〔41〕1.57ｇに２％EDT含有アニソール1.17ml
とTFA4.68mlを加え、−10℃で60分撹拌する。減
圧下でTFAを留去した残渣にヘキサンを加え、
油状物を得る。これにエーテルを加えて、得られ
た粉末を減圧乾燥する。 〔29〕 0.50ml 5.55NHCl／DMF 0.46ml 亜硝酸イソアミル 0.12ml Et3N 0.36ml DMF 5.0ml Et3N 0.12ml 〔29〕を前回〔５〕の方法と同様にして、得ら
れたアジド溶液に、先に得られた乾燥粉末を
DMF15mlに溶解し、Et3N0.15mlを加えた溶液を
加え、４℃で48時間撹拌する。この反応液にさら
に同量の〔29〕から得られたアジド溶液を加え、
18時間撹拌する。この反応液を酢酸で中和後、減
圧濃縮して得られた油状残渣に３％酢酸水とエー
テルを加え、粉末とする。この粉末を３％酢酸
水、水、５％重曹水、水の順に懸濁洗浄した後、
DMF―酢酸エチルで３回再沈澱を行い、さらに
シリカゲルのカラム（２×14cm）に適用し、溶媒
系(2)で溶出し、Rf2＝0.46の部分を集め、濃縮し、
酢酸エチルを加え、沈澱872mgを得る。 融点；158〜160℃ 〔α〕18 D；−20.8゜（Ｃ＝0.2、DMSO） TLC；Rf2＝0.46 アミノ酸分析1；Asp3.87(4)、Gly1.94(2)、Met
＋Met（０）1.27(2)、Leu4.67(5)、His2.16(3)、
Ser0.62(1)、Glu3.16(3)、Ala1(1)、Val3.08(3)、
Phe0.97(1)、Lys2.84(3)、Arg1.91(2)、Trp0（測定
せず）(1) 元素分析〔C239H333O37N51S4・3H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.24 6.81 14.25 測定値 57.07 6.96 14.41 Ｐ（４−38）Boc―Glu（OBzl）―Ile―Gln―
Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―Leu―Gly―Lys
（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser―Met（Ｏ）―
Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val―Glu（OBzl）
―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys（Ｚ）―Lys
（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―Val―His―
Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly―OBzl〔43〕 〔42〕0.54ｇに２％EDT含有アニソール0.48ml
とTFA1.92mlを加え、−10℃で60分撹拌する。反
応終了後、減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え油状物質を得る。これにエーテルを加
え、得た粉末を減圧乾燥する。 〔33〕 0.31ｇ 5.55NHCl／DMF 0.19ml 亜硝酸イソアミル 0.07ml Et3N 0.15ml DMF 1.0ml Et3N 74μl 〔33〕0.31ｇを前回〔５〕の方法と同様にして
得られたアジド溶液を得る。先に得られた乾燥粉
末をDMF3mlに溶解し、Et3N61μlを加えて得た
溶液をアジド溶液に加え４℃で20時間撹拌する。
さらに〔33〕0.31ｇを使い、同様にして得たアジ
ド溶液を追加し、４℃で20時間撹拌する。反応液
を酢酸で中和し、減圧濃縮して得た油状残渣に３
％酢酸水とエーテルを加えて、冷却し、粉末を得
る。これを３％酢酸水、５％重曹水、水の順に懸
濁洗浄した後、DMF―酢酸エチルで２回再沈澱
する。得られた沈澱の半量を、セフアデツクス
LH―60のカラム（3.4×140cm、DMF）に注入
し、DMFで溶出する。溶出液を８mlづつ分画し、
主要溶出部分（58本〜70本）を集め、濃縮し、酢
酸エチルを加えて沈澱を得る。残つた半量の沈澱
も同様に処理して、合計440mgを得る。 融点；155〜157℃ 〔α〕20 D；−30.4゜（Ｃ＝0.1，DMF） TLC；Rf2＝0.52 アミノ酸分析１；Glu5.61(5)、Ile1.22(1)、
Leu6.00(6)、Asp3.60(4)、Ser0.72(1)、Gly1.91(2)、
Ala1(1)、Val2.92(3)、Met＋Met（０）1.22(2)、
Phe0.99(1)、Trp0（測定せず）（０）、Lys3.00(3)、
His2.84(3)、Arg2.02(2) 元素分析〔C268H376O64N56S4・6H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 57.04 6.93 13.90 測定値 56.79 7.19 14.39 Ｐ（１−38）Ｚ―Ser―Val―Ser―Glu（OBzl）
―Ile―Gln―Leu―Met（Ｏ）―His―Asn―
Leu―Gly―Lys（Ｚ）―His―Leu―Asn―Ser
―Met（Ｏ）―Glu（OBzl）―Arg（Mts）―Val
―Glu（OBzl）―Trp―Leu―Arg（Mts）―Lys
（Ｚ）―Lys（Ｚ）―Leu―Gln―Asp（OBzl）―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OBzl〔44〕 〔43〕420mgに２％EDT含有アニソール0.41ml
とTFA1.64mlを加え、−10℃で60分撹拌する。反
応終了後、減圧下でTFAを留去し、残渣にヘキ
サンを加え、油状物質を得る。これにエーテルを
加え、得られた粉末を減圧乾燥する。 〔36〕 133mg 5.55NHCl／DMF 130μl 亜硝酸イソアミル 48.5μl Et3N 102μl DMF １ml Et3N 51μl 〔36〕133mgを前回〔５〕の方法と同様にして、
アジド溶液を得る。先に得られた乾燥粉末を、
DMF5mlに溶解し、Et3N42.5μlを加えて得た溶液
をアジド溶液に加え、４℃で18時間撹拌する。さ
らに〔36〕133mgを使い、同様にして得たアジド
溶液を反応液に加え、４℃で36時間撹拌する。反
応液を酢酸で中和し、減圧濃縮して得られた油状
残渣に５％酢酸水とエーテルを加え、粘性沈澱を
得る。これを５％酢酸水、５％重曹水、水の順に
懸濁洗浄して得た粉末をDMF―酢酸エチルで２
度再結晶し、460mgを得る。この半量をDMFに溶
解し、セフアデツクスLH−60のカラム（３×
140cm、DMF）に注入し、DMFで溶出する。溶
出液を８mlづつ分画し、主要溶出部分（47本〜58
本）を集め、濃縮し、酢酸エチルを加えて、粉末
を得る。残つた半量も同様に処理して、合計375
mgを得る。さらにこの粉末を６分割し、１つの部
分を５％水含有DMFに溶解し、同溶媒で調整し
たセフアシールＳ―200のカラム（２×144cm）に
注入し、同溶媒で溶出する。溶出液を５mlづつ分
画し、主要溶出部分（71本〜81本）を集め、濃縮
し、酢酸エチルを加えて、粉末を得る。残つた５
つの部分も、同様に処理して合わせて208.3mgを
得る。 融点；159〜160℃ 〔α〕18 D；−17.9゜（Ｃ＝0.2、DMSO） TLC；Rf2＝0.59 アミノ酸分析；Asp3.84(4)、Ser3.18(3)、
Glu5.38(5)、Gly2.22(2)、Ala1(1)、Val4.61(4)、
Met＋Met（０）1.21(2)、Ile1.11(1)、Leu5.76(6)、
Phe1.07(1)、Trp0（測定せず）(1)、Lys3.05(3)、
His2.73(3)、Arg1.91(2) 元素分析〔C282H393O69N59S4・7H2Oとして〕 Ｃ％ Ｈ％ Ｎ％ 計算値 56.75 6.87 13.85 測定値 56.55 6.54 13.72
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 式 Ｈ―Ser―Val―Ser―Glu―Ile―Gln―Leu―Met
―His―Asn―Leu―Gly―Lys―His―Leu―
Asn―Ser―Met―Glu―Arg―Val―Glu―Trp
―Leu―Arg―Lys―Lys―Leu―Gln―Asp―
Val―His―Asn―Phe―Val―Ala―Leu―Gly
―OH で表わされるペプチドまたはその塩。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55158566A JPS5781448A (en) | 1980-11-11 | 1980-11-11 | Human parathyroid hormone (1-38) fragment |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP55158566A JPS5781448A (en) | 1980-11-11 | 1980-11-11 | Human parathyroid hormone (1-38) fragment |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5781448A JPS5781448A (en) | 1982-05-21 |
| JPS6342639B2 true JPS6342639B2 (ja) | 1988-08-24 |
Family
ID=15674490
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP55158566A Granted JPS5781448A (en) | 1980-11-11 | 1980-11-11 | Human parathyroid hormone (1-38) fragment |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5781448A (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3243358A1 (de) * | 1982-11-24 | 1984-05-24 | Rolf Dieter Prof.Dr. 3004 Isernhagen Hesch | Synthetisches humanes (1-38) parathormon-fragment, verfahren zu seiner herstellung und die verwendung zur behandlung der osteoporose |
| JPH0672880B2 (ja) * | 1985-10-09 | 1994-09-14 | ヤマサ醤油株式会社 | イムノアッセイ用試薬 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2363281A1 (de) * | 1972-12-21 | 1974-06-27 | Us Health | Peptid und verfahren zu seiner herstellung |
-
1980
- 1980-11-11 JP JP55158566A patent/JPS5781448A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5781448A (en) | 1982-05-21 |
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