JPS634540B2

JPS634540B2 -

Info

Publication number: JPS634540B2
Application number: JP55030701A
Authority: JP
Inventors: Mitsuko Asai; Susumu Shinagawa; Satoru Imada
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1980-03-10
Filing date: 1980-03-10
Publication date: 1988-01-29
Also published as: JPS56127381A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明はすぐれた抗菌作用を有する新規なβ―
ラクタム化合物およびその製造法に関する。さら
に詳しくは、本発明の目的物は式（）で示される化合物またはその塩であり、式（）で示される化合物またはその塩を環元反応に付す
ことにより製造することができる。上記還元反応としては、たとえば接触還元反応
が挙げられる。この接触還元反応は通常の方法が
採用でき、触媒としては、たとえば白金線、白金
海綿、白金黒、酸化白金、コロイド白金などの白
金触媒、パラジウム海綿、パラジウム黒、酸化パ
ラジウム、パラジウム硫酸バリウム、パラジウム
炭酸バリウム、パラジウム炭素、パラジウムシリ
カゲル、コロイドパラジウムなどのパラジウム触
媒、還元ニツケル、酸化ニツケル、ラネーニツケ
ル、添原ニツケルなどのニツケル触媒が挙げられ
る。また、使用されうる溶媒としては、原料化合
物（）を溶解する性質の溶媒、たとえば水また
は水とジオキサン、テトラハイドロフラン、ジメ
チルホルムアミド、メタノール、エタノール、プ
ロパノールのような極性有機溶媒との混合液など
が挙げられる。この反応は０〜50℃，１〜２気圧
の水素下で行われるのが好ましい。反応終了後、
本発明の目的物（）は反応混合物から、たとえ
ばろ過により触媒を除去したのち、たとえば
XAD―２樹脂（ローム・アンド・ハース社、米
国）のようなポリスチレン系吸着性樹脂に吸着さ
せ、水又は含水アルコールを溶出溶媒とするカラ
ムクロマトグラフイに付することにより容易に未
反応の原料物質あるいは反応副生成物から分離で
きる。典型的にはXAD―２樹脂から溶出された
留分の検出は254nm UV検出器およびマイクロ
ホボンダパツクC₁₈（ウオーターズ社製、米国）を
用いる高速液体クロマトグラフイーの系に本留分
の一部の試料を注入することによつて実施され
る。化合物（）および（）の塩としては、たと
えばナトリウム、カリウム、リチウムなどのアル
カリ金属塩、マグネシウム、カルシウム、バリウ
ムなどのアルカリ土類金属塩、トリメチルアミ
ン、トリエチルアミン、ピリジンなどの有機アミ
ン塩があげられる。本発明の原料化合物（）は、たとえばストレ
プトミセス・エスピーＣ―19393（FERM―Ｐ
No.4774，IFO 13886，ATCC 31486）を微生物が
利用し得る栄養物を含有する培地で培養すること
により生産され、抗生物質Ｃ―19393S₂と称され
るのである（特願昭54―11560）。実施例で得られた化合物の抗菌スペクトルは第
１表に示すとおりである。

【表】ム
(Salmonella typhimurium）

【表】注）培地：肉汁寒天
本発明によつて得られる化合物（）は上記の
抗菌スペクトルから明らかなように、グラム陽性
菌およびグラム陰性菌に対して抗菌力を示す。し
たがつて、化合物（）は哺乳動物（例、マウ
ス、ラツト、イヌ、人）および家蓄（例、ニワト
リ、アヒル）の細菌感染症の治療に用いることが
できる。化合物（）をたとえば大腸菌感染症の治療薬
として用いるには、たとえば化合物（）を生理
的食塩水に溶解して注射剤として非経口的に皮下
または筋肉内に0.1〜200mg／Kg／日、好ましくは
１〜50mg／Kg／日投与する。また経口剤として、
化合物（）を乳糖と混合してカプセル剤とし、
化合物（）として１〜500mg／Kg／日好ましく
は５〜200mg／Kg／日投与する。また、本発明によつて得られる化合物（）
は、殺菌剤として用いることができる。たとえば
化合物（）を0.01〜1.0W／Ｖ％の濃度で蒸留
水に溶解した液剤、またはワセリン、ラノリンを
基剤とし、１ｇあたり化合物（）を0.5〜50mg、
好ましくは２〜20mg含有する軟膏剤として、上記
の動物の手、足、眼、耳などの殺菌・消毒に用い
ることができる。化合物（）は、ベータ・ラクタマーゼ阻害作
用を示し、ベータ・ラクタマーゼ産生能に起因す
るペニシリン系またはセフアロスポリン系薬剤耐
性菌に対するアンピシリンやセフオチアムに対す
る感受性を著しく増強する。したがつて化合物
（）をペニシリン系またはセフアロスポリン系
薬剤と組合わせることにより、哺乳動物（例、マ
ウス、ラツト、イヌ、人）および家禽（例、ニワ
トリ、アヒル）の細菌、とくにベータ・ラクタム
抗生物質耐性菌による感染症の治療に用いること
ができる。化合物（）を他のベータ・ラクタム系薬剤と
組合わせて、たとえばベータ・ラクタム抗生物質
耐性の大腸菌による感染症の治療に用いるには、
たとえば同量の化合物（）およびアンピシリン
を生理的食塩水に溶解して注射剤として非経口的
に皮下または筋肉内に0.1〜20mg／Kg／日，好ま
しくは0.5〜５mg／Kg／日投与する。また経口剤
として、化合物（）とセフアレキシンを同量含
むカプセル剤として１〜200mg／Kg／日、好まし
くは５〜100mg／Kg／日投与する。殺菌剤としては、たとえば化合物（）0.1〜
10W／Ｖ％濃度およびベンジルペニシリン0.1〜
1.0W／Ｖ％濃度を含む水溶液を液剤として、ま
たはワセリン、ラノリンを基剤とし、１ｇあたり
化合物（）を５〜20mgおよびベンジルペニシリ
ンを５〜20mg含有する軟膏剤として上記の動物の
手、足、眼、耳などの殺菌、消毒に用いることが
できる。化合物（）はまた新しい医薬品の合成中間体
としても極めて有望な化合物である。本発明の化
合物の水溶液は中性領域のPHで安定である。次に参考例および実施例をもつてさらに詳細に
本発明の内容を説明するが、これによつて本発明
が限定されるものではない。参考例におけるパー
セントは、特にことわりのないかぎり重量／容量
％を示す。参考例ストレプトミセス・エスピーＣ―19393
（FERM―Ｐ No.4774，IFO 13886，ATCC
31486）を１容三角フラスコ内に分注した200ml
のＴ培地※上で生育させ、胞子を着生させる。つ
いで胞子を減菌水に生菌数が1.2×10⁸／mlになる
ように懸濁する。胞子懸濁液を減菌水で10倍希釈
し、その１mlを200ml容三角フラスコ内のシード
培地40mlに接種し、28℃で２日間回転式振盪培養
機上で培養し、その培養液を２容坂口振盪フラ
スコ内のシード培地500mlに接種し、28℃で２日
間往復振盪培養機上で培養し培養液を50容ステ
ンレス・スチール製醗酵槽内のアクトコール15ml
を含むシード培地30に移植し、28℃で通気量30
／分、撹拌280回転／分で３日間培養した。つ
いで培養液を２m³容醗酵槽内の主培地1.2m³に移
植し、30℃で通気量840／分、撹拌180回転／分で
５日間培養した。なおシード培地は１あたりブ
ドウ糖20ｇ、可溶性デンプン30※２％オートミー
ル、２％トマトペースト、0.2％ボブリル（英国
ボブリル社製造）、および２％寒天よりなるPH7.0
の培地、ｇ、生大豆粉10ｇ、コーン・スチープ・
リカート10ｇ、ポリペプトン（大五栄養化学社製
造）５ｇ、食塩３ｇ、沈降性炭酸カルシウム５ｇ
を含み、そのPHは減菌前7.0に調節した。また主
培地は１あたりブドウ糖30ｇ、可溶性デンプン
30ｇ、脱脂大豆粉15ｇ、棉実粉15ｇ、リン酸２水
素カリウム0.25ｇ、リン酸１水素カリウム0.6ｇ、
塩化コバルト0.002ｇ、アクトコール0.5ｇを含
み、そのPHは減菌前7.0に調節した。培地はすべ
て120℃で20分間蒸気減菌した。上記のようにして得られた培養液にハイフロス
ーパーセルを加え、過して液1230を得た。
液をPH6.3に調整後、活性炭100を充填したカ
ラムを通過させた。水300で抗生物質を溶出し
た。溶出液をダウエツクス１×２（C1^-型、２）
のカラム中を通過させ、水６で洗浄後、５％食
塩水32で溶出した。溶出液をPH５に調整後、活
性炭４を充填したカラムを通過させた。水12
で洗浄後、８％イソブタノール水７および８％
イソーブタノール―Ｎ／20アンモニア水12で抗
生物質を溶出した。溶出液を減圧下に150mlまで
濃縮後、これにメタノール1350mlを加え、生じた
沈殿物を去した。液を200mlになるまで濃縮
後、DEAE―セフアデツクスA25（CI^-型）300ml
を充填したカラムを通過させ、0.1Mおよび0.2M
―食塩水（各900ml）でカラムを洗浄後、0.4M―
食塩水1500mlで抗生物質を溶出した。溶出液をPH
５に調整後、活性炭500mlを充填したカラムを通
過させ、水1.5で洗つた後、８％イソ―ブタノ
ール―Ｎ／20アンモニア水2.5で溶出した。溶
出液を濃縮、乾固、アセトンを加えると、微黄色
粉末2.4ｇが得られた。得られた粉末を少量の水
に溶かし、アンバーライトXAD―（100―200
メツシユ）1.2を充填したカラムを通過させ、
水で溶出、分画した。抗菌性区分を集めて濃縮
し、濃縮液をQAE―セフアデツクスA25（CI^-型）
200mlを充填したカラムを通過させ、0.1M―食塩
水600mlでカラムを洗浄後、0.2M―食塩水1.2
で溶出した。溶出液をPH５に調整後、活性炭600
mlを充填したカラムを通過させ、水1.8で洗浄
後、８％イソ―ブタノール―Ｎ／20アンモニア水
３で溶出した。溶出液を濃縮、乾固、アセトン
を加えると粉末1.07ｇが得られた。得られた粉末
のうち620mgを少量の水にとかし、アンバーライ
トXAD―（100―200メツシユ）360mlを充填し
たカラムを通過させ、水で溶出、分画した。抗菌
性の認められた分画をそれぞれ先に述べた液体ク
ロマトグラフイーの分析に付し、単一ピークを示
す部分を集めて、濃縮、乾固、アセトンを加え、
抗性物質Ｃ―19393S₂ジナトリウム塩の白色粉末
136mgを得た。この粉末の比旋光度は〔α〕²² _D−
152゜±15°（Ｃ＝0.5、水）であつた。実施例抗性物質Ｃ―19393S₂ジナトリウム塩の粗粉末
（30％純度、60mg）を10％メタノール水（20ml）
にとかし、この溶液を予め30分間水素を通じてお
いた10％メタノール水（10ml）と10％パラジウム
―炭素（20mg）との混合物に加えた。次いでその
混合物に室温で３時間、１気圧で水素を通じて還
元した後触媒をろ去し、ろ液を真空で濃縮し容積
を２mlとした。この溶液をXAD―２（100〜200メ
ツシユ）のカラム（50ml）に流し、目的化合物
（）を吸着させ、つづいて水で溶出した。45ml
から150mlまでの目的化合物（）を含有する溶
出画分を集め、凍結乾燥して〔5R，6R〕―３―
〔(E)―２―アセトアミドエテニルチオ〕―６―
〔１―（ヒドロキシスルホニルオキシ）―１―メ
チルエチル〕―７―オキソ―１―アザビシクロ
〔３，２，０〕ヘプト―２―エン―２―カルボン
酸ジナトリウムの粉末7.3mgを得た。・UV：λmax（H₂O）228および309nm ・IR：ν：max（KBr）1760，1620，1240，1050
cm^-1 ・薄層クロマトグラフイー〔セルロースｆ（東京
化成社製）〕：R_f＝0.65 （溶媒系：プロパノール：水＝４：１）・高速液体クロマトグラフイー（ウオーターズ社
製）：Rt＝4.4分〔マイクロボンダパツクC18／
14％メタノール−0.02M―リン酸緩衝液（PH
6.3），２ml／min／cm（200PSi）〕、但し同一条
件で原料化合物（）のRtは2.2分であつた。 NMR；δ（100MHZ，D₂O，TMs）：1.63（3H，
Ｓ，C₈−CH₃ ）、1.70（3H，Ｓ，C₈−CH₃ ）、2.10
（3H，Ｓ，COCH₃ ）、3.05（1H，dd，ｊ＝10，
19，C₄−Ｈ）、3.82（1H，dd，10.5，19 C₄−Ｈ）、
3.88（1H，ｄ，Ｊ＝６，C₆−Ｈ），4.20（1H，ｍ，
C₅−Ｈ），6.10（1H，ｄ，Ｊ＝14，Ｎ−CH＝），
7.20（1H，ｄ，Ｓ−CH＝）

Claims

【特許請求の範囲】１式で示される化合物およびその塩。 (2) 式で示される化合物またはその塩を還元反応に付す
ことを特徴とする式で示される化合物またはその塩の製造法。