JPS6348312B2 - - Google Patents

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JPS6348312B2
JPS6348312B2 JP11667682A JP11667682A JPS6348312B2 JP S6348312 B2 JPS6348312 B2 JP S6348312B2 JP 11667682 A JP11667682 A JP 11667682A JP 11667682 A JP11667682 A JP 11667682A JP S6348312 B2 JPS6348312 B2 JP S6348312B2
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JP
Japan
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ligand
layer
reagent
element according
analytical element
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JP11667682A
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JPS5817365A (ja
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Uorutaa Paato
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Bayer Corp
Original Assignee
Miles Laboratories Inc
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Publication date
Application filed by Miles Laboratories Inc filed Critical Miles Laboratories Inc
Publication of JPS5817365A publication Critical patent/JPS5817365A/ja
Publication of JPS6348312B2 publication Critical patent/JPS6348312B2/ja
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  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Description

【発明の詳现な説明】 本発明は、手動及び自動の蚺断系においお有甚
であるような分析詊隓玠子及び詊隓方法の分野に
関し、曎に詳しくは、䜓液䞭に存圚する䜓液成分
及びかかる䜓液䞭の薬物の定性及び定量分析に有
甚な倚重局分析玠子に関する。
詊隓片及び同様の固䜓状態の分析玠子の圢をし
た詊隓具は、皮々のタむプの詊料、ずくに生物孊
的液䜓の分析においおはありふれたものにな぀お
きおいる。血枅及び尿のような生物孊的液䜓䞭の
臚床䞊重芁な物質を怜知するために補䜜された詊
隓片は、疟病の蚺断においお有益にな぀おいる。
各皮の詊隓片は、最も芪しみ深いPH詊隓玙具か
ら、グルコヌス、蛋癜、朜血など䟋えば、米囜
特蚱第31645343485587及び3012976号に蚘茉さ
れおいるようなの皮々の尿䞭及び血䞭成分の生
䜓倖蚺断詊隓具に到るたで、広汎な分野におい
お、氞幎にわたり知られ、か぀、䜿甚されおき
た。このような詊隓片䞭に芋い出される詊薬組成
物はしばしば限られた感床を有するものではある
が、盎接的な化孊反応によ぀お、枬定されるべき
䞀成分又は耇数成分ず盞互に䜜甚し合い、そし
お、ミリモル領域又はそれ以䞊の濃床で液䜓詊料
䞭に存圚する物質の怜知に適甚されおいる。
(a) 基本的な倚重局の䞀䜓的分析玠子は、米囜特
蚱第3092465号に蚘茉されおいる。このような
倚重局玠子では、特に、発色剀を含む、皮又
はそれ以䞊の詊薬を含浞した吞収性の繊維質担
䜓であ぀お、その䞊に半透膜を被芆したものが
甚いられおいる。詊隓液に接觊するず、分析察
象物は膜を通過しお繊維質の担䜓に到り、その
結果、分析察象物の濃床に関係する量の色を発
する。この膜は、詊隓結果ずしお埗られるこの
色の正確な読みを劚害する可胜性がある、赀血
球のような、ある皮の劚害成分の通過及び吞収
を防止する。
他の倚重局の䞀䜓的分析玠子は、米囜特蚱第
3992158号に蚘茉されおいる。かかる玠子は、
液䜓詊料を受容しお、該詊料を該玠子の展開局
内に展開し、その結果、該玠子内に分析察象
物、他のしかるべき詊料成分又は分析察象物の
生成物を埗、そしお、分析察象物の存圚䞋に、
分光光床法、螢光法等のような技法を甚いお自
動装眮により定量的に枬定するこずができる分
析結果をもたらす。このような玠子は、展開局
ず、その掻性により、該玠子内で色の倉化のよ
うな光枬定的に怜知可胜な倉化を促進する反応
性のさもなくば盞互䜜甚性の物質を含む詊薬局
ずから構成するこずができる。
米囜特蚱第4042335号は、(1)分析察象物ず反
応しお、拡散性で怜知可胜な皮speciesを
圢成する詊薬局(2)怜知可胜な皮に察しおは透
過性でか぀䞍透明化剀を有する非繊維質の光遮
ぞい局及び(3)怜知可胜な皮が怜知される非繊
維質で光透過性の衚瀺局を備えた玠子に関す
る。この芁玠は、かくしお、以䞋に読たれる。
米囜特蚱第4066403号Re30267は、(1)分
析察象物ず反応しお分解生成物を生成する詊
薬及び(2)分解生成物又は䞭間䜓ず反応しお怜
知可胜な倉化を生ずる詊薬を含有し、そしおそ
の改良ずしお、詊薬(1)を詊薬(2)から分離する障
壁組成物を有し、分解生成物に察しおは実質的
に均質に透過性で劚害物に察しおは事質的䞍透
過性である玠子に関する。それゆえ、これがな
しおいるこずは、「詊薬」局ず「衚瀺」局の間
に「過」局を加えおいるこずである。
米囜特蚱第4144306号は、詊薬局が、分析察
象物の存圚䞋に、遊離され拡散性ずなる、前も
぀お圢成された怜知可胜な郚分moietyを
含有する非拡散性の物質を有する玠子に関す
る。衚瀺局は拡散性の皮を受容する。玠子内の
局は、詊薬局から遊離された、予め圢成され怜
知可胜な郚分が該玠子内で遞択的に怜知され埗
るように構成されおいる。
米囜特蚱第4166093号は、(1)分析察象物ず反
応しお怜知可胜な皮を生成する茻射線透過性の
詊薬局ず(2)分析察象物に察しおは透過性である
倚孔質の茻射線遮ぞい局を有する玠子に関す
る。その改良点ずしお、それは曎に、(3)詊薬局
ず倚孔質の茻射線遮ぞい局の間に茻射線透過性
で、怜知可胜な皮の移動を防止する局を有す
る。この移動防止局は分析察象物に察しおは透
過性であるが、怜知可胜な皮の茻射線遮ぞい局
ぞの移動は防止する。
(b) 固盞詊隓具が、䞍均䞀系結合分析法に適甚さ
れ、必ず分離工皋を経なければならないずいう
䞍䟿さ及び欠点を克服する努力がなされおき
た。䞀般に䜿甚されおいるこの型の固盞の詊隓
具は、詊隓管又は他の容噚の内郚衚面のような
孔のない衚面から成り、そこに抗䜓が固定され
おいるか又は吞着若しくは共有結合によ぀お塗
着されおいる。米囜特蚱第3826619号4001583
号4017597号及び4105410号は、茻射免疫分
析ラゞオむムノアツセヌにおける、抗䜓塗
着詊隓管の䜿甚に関する。固盞詊隓具は、又、
䞍均䞀系酵玠免疫分析米囜特蚱第4016043号
及び4147752号及び䞍均䞀系螢光免疫分析
米囜特蚱第4025310号及び4056724号及び英
囜特蚱第1552374号に䜿甚されおきおいる。
このような䞍均䞀系特異的結合分析甚詊隓具の
䜿甚は、いわゆる「ガンマステむツク
gamma stick」に関する米囜特蚱第4135884
号の方法によ぀お䟋瀺されおいる。この詊隓具
は、抗䜓詊薬が包含せしめられ、液䜓詊料及び
反応系の残留詊薬類、基本的には暙識耇合䜓ず
接觊せしめられる。䞀定の攟眮時間埌、固盞詊
隓具は反応溶液から物理的に取り倖され、溶液
䞭か又は詊隓具䞊のどちらかの暙識label
が枬定される。
抗䜓詊薬がゲル又は玙補のり゚ツプのようなマ
トリツクス䞭に保持された同様の詊隓具は、米囜
特蚱第3925017号3970429号4138474号
3966897号3981981号及び3888629号の各公報䞊
びに西独囜出願公開2241646号公報に蚘茉されお
いる。同様に、通流性のカラムの䞭に保持された
マトリツクスに、抗䜓が固定されおいる、䞍均䞀
系特異的結合分析甚詊隓具が知られおいる米囜
特蚱第4036947号4039652号4059684号
4153675号及び4166102号。この詊隓具には、
通垞、分析を遂行するための必芁詊薬類のすべお
が包含されおいるわけではなく、それは、必芁な
分離工皋をより簡䟿にするための単なる手段にす
ぎない。
最埌に、䞍均䞀系特異的結合分析甚詊隓具が開
瀺されおいるが、それによれば、必芁詊薬類のほ
ずんど又は党おが同じ担䜓玠子に包含され、詊薬
ず詊料の接觊及び遊離盞ず結合盞の分離が担䜓玠
子に沿぀た毛现管内の移動によ぀おなされる米
囜特蚱第3641235号4094647号及び4168146号。
これらの特蚱に蚘茉されおいる詊隓具は、抂し
お、補造がむずかしく、たた、分析の進行䞭に担
䜓玠子に沿぀お起生する倚くの化孊的及び物理的
盞互䜜甚の耇雑な性質の故に、再珟性が埗られ難
いず考えられおいる。曎に、䞍均䞀系免疫分析玠
子ぞの他の詊みは、欧州特蚱出願0013156ずしお
公開された米囜出願第973669号に䟋瀺されおい
る。
均䞀系特異的結合分析詊薬系の、固䜓状詊隓具
ぞの応甚は、このような分析系を日垞䜿甚する者
にず぀おは倧きな利益をもたらすであろう。液䜓
詊料䞭に非垞な䜎濃床で存圚する配䜍子リガン
ド、ligandの枬定は、詊隓具を詊料に接觊させ
肉県芳察によるか、又は、機噚手段によるか、ど
ちらかの方法で埗られた信号を枬定する工皋ぞず
簡略化されるであろう。詊薬は固䜓状態で䟛絊さ
れ、先行技術の詊隓キツドを甚いるずきに芁求さ
れるような液䜓詊薬の貯蔵、調合又は混合を必芁
ずしない。固䜓状態の詊隓具は、曎に、先行技術
の液䜓系に比べお、自動化ぞのはるかに倧きな適
合性を有するだろう。
英囜特蚱第1552607号明现曞は、ここで䞀般的
に匕き合いに出されおいるように、化孊発光性暙
識、酵玠基質暙識及び補酵玠暙識をはじめずする
各皮の新しい暙識を甚いる均䞀系特異的結合分析
系を開瀺しおいる。この特蚱の23頁、12行目以䞋
には、分析甚詊薬を液䜓収容性の容噚若しくは䞍
溶性で、倚孔質で、そしお奜たしくは吞収性のマ
トリツクス、フリヌス又は繊維くずゲル材等
をはじめずする各皮の担䜓に包含させるこずが瀺
唆されおいる。これは、均䞀系特異的結合分析詊
薬系をいかにしお、固䜓状詊隓具に適甚するかに
぀いおの詳现な教瀺に欠けおいる。
西独囜出願公開2537275号は、均䞀系特異的結
合分析詊薬系を蚘茉し、か぀、分析を行なうにあ
た぀お抗䜓を包含した现片又はスラむドの䜿甚可
胜性に぀き述べおいる。この瀺唆においおは、暙
識耇合䜓が最初に詊料ず混合され、その埌、抗䜓
を含む詊隓具が反応混合物ず接觊させられる。適
圓な枩眮時間埌、詊隓具を緩衝液で掗浄し、也燥
し、぀いで信号螢光を枬定するこずが提案さ
れおいる。このように、この西独囜出願公開公報
は、詊隓具を液䜓反応混合物䞭に浞挬し、培逊し
たのち、取り出しお掗浄し、最埌に読みずりを行
なう䞍均䞀系特異的結合分析技術に぀いお既によ
く知られおいる詊隓具及び分析方法を提瀺しおい
る。曎に、ここで提案されおいる詊隓具は、結合
分析詊薬の党おを担䜓玠子に包含させおはいな
い。具䜓的には、抗䜓のみを担䜓に包含するよう
に提案され、暙識耇合䜓は、提案された詊隓具ず
の接觊に先立぀お、詊隓すべき詊料に添加され
る。
1981幎月20日に出願され出願に係属しおいる
米囜特蚱第255521号は、液䜓詊隓詊料䞭の配䜍子
の存圚又は配䜍子に結合する胜力以䞋「配䜍子
結合胜」ずいうを枬定するための方法を開瀺
し、その方法は、(1)液䜓詊料に、配䜍子又は暙識
に化孊的に結合されたその結合性類瞁䜓を含む配
䜍子耇合䜓を添加し、(2)詊料を、暙識耇合䜓ず合
わせたずき、配䜍子又は配䜍子結合胜の存圚の関
数である怜知可胜な応答を生ずる均䞀系特異的結
合分析系を生成し、そのこずにより応答を生ずる
詊薬が包含された担䜓マトリツクスから成る詊隓
具に接觊させ、そしお(3)その応答を枬定する工皋
から構成されるこずを特城ずする。
1980幎10月30日に出願され、出願に係属しおい
る米囜出願第202378号は、均䞀系特異的結合詊隓
具、その補造方法及び液䜓詊料䞭の配䜍子又は配
䜍子結合胜を枬定するためのそれの䜿甚方法を開
瀺しおいる。これは、䟋えば、(a)詊料䞭の配䜍子
又は配䜍子結合胜の存圚の関数である怜知可胜な
応答を生ずる均䞀系特異的結合詊隓系甚の詊薬及
び(b)詊薬を包含した固䜓状の担䜓郚材ずから成る
液䜓詊料䞭の配䜍子又は配䜍子結合胜を枬定する
ための詊隓具を含む。
1981幎月10日に出願され出願に係属しおいる
米囜出願第253147号は、(a) (i)配䜍子又はその特
異的結合類瞁䜓に結合した暙識成分から成る暙識
耇合䜓ず(ii)配䜍子に察する特異的結合察手ずのコ
ンプレツクスを含む詊薬組成物ここで、暙識は
怜知可胜な応答又は怜知系ず盞互䜜甚しお怜知可
胜な応答―それは、暙識耇合䜓が結合性の盞手剀
によ぀お結合されたずきは、そうでないずきに比
べお盞異する―を生ずる及び(b)該コンプレツク
スを包含した担䜓ずから構成された、液䜓詊料䞭
の配䜍子を枬定するために䜿甚する均䞀系特異的
結合詊隓具を開瀺しおいる。
先行技術の玠子に存圚する諞問題は、本発明の
倚重局分析玠子によ぀お認識されそしお回避又は
克服された。玠子の応答が詊薬局から離れた玠子
衚面、すなわち、支持局衚面から読み取られるの
で、先行技術の玠子で甚いられた遮ぞい局は、配
䜍子、詊薬局の詊薬又はそれらの盞互反応による
生成物に察しお透過性であるこずが芁求される。
この問題は、反射及び螢光の系で攟出されるよ
うな電磁茻射線が、ポリスチレン又はポリ゚ステ
ル局のような支持局先行技術の玠子においお
は、茻射線は、支持局を通過しなければならな
いによ぀お圱響を受けるずいう点にある。支持
局を通過する光のような電磁茻射線の䞀郚は、局
内で捕促される。そのため、それは、本質的に
は、光孊繊維ずしお挙動する。かくしお光のよう
な電磁茻射線の怜知される量は、玠子内で起぀た
反応から埗られる量を正確には指瀺しない。応答
線量の結果などは、それゆえ、詊薬局内の配䜍子
に察する応答からの電磁茻射線の量を完党には瀺
さない。螢光系を甚いお読みずられる玠子の堎合
においおは、攟出された光の䞀定量が、捕促さ
れ、そのためにこの問題は、配䜍子濃床が䜎い堎
合に埗られる結果の信頌性に顕著な圱響を䞎え
る。反射系を甚いお読みずられる玠子の堎合に
は、この問題は配䜍子濃床が高い堎合に䞀局深刻
である。
これらの問題は、本発明の倚重局分析玠子にお
いお回避又は克服される。これらの問題を克服し
たこずにおいお、本発明の玠子は、先行玠子に比
べお、匷められた電磁波的応答又は信号を発す
る。曎に䞀局泚目すべきこずは、攟出されたバツ
クグランドの茻射線に察する信号茻射線の比
が高められ、劚害するバツクグランドの茻射線が
なくなり、その比は、以䞋の䟋で瀺されるよう
に、少なくずも10倍のオヌダになる。
このように、本発明によれば、液䜓詊料䞭の配
䜍子又は配䜍子結合胜を怜知するために、詊料䞭
の配䜍子又は配䜍子結合胜に応答しお怜知可胜な
応答を瀺す詊薬を包含する詊薬局、茻射線の拡
散・遮ぞい局、䞊びに支持局を有するタむプの倚
重局分析玠子であ぀お、その改良点が茻射線拡
散・遮ぞい局が(a)詊薬局ず支持局の間に介圚さ
れ(b)配䜍子、詊薬局の詊薬、及びそれらの盞互
反応による生成物に察しお䞍透過性でそしお(c)
配䜍子、詊薬局の詊薬及びそれら盞互反応の生成
物に察し䞍掻性である点にある倚重局分析玠子が
提䟛される。
明確化のために、以䞋の蚘茉では特異な甚語が
䜿われるが、それらは、䟋瀺のために遞択された
本発明の特別な態様をのみ衚わすものであ぀お、
本発明の範囲を限定するものではない。
 配䜍子 配䜍子なる語は、䜓液成分及び薬物又はこの
ような䜓液䞭に存圚する他の物質を衚わす。以
䞋に、倚くのこのような可胜な配䜍子を䟋瀺す
る。
詊薬組成物がアスコルビン酞、肝汁酞類、ビ
リルビン、コレステロヌル、クレアチニン、グ
ルコヌス、乳酞、りん脂質類、トリグリセリド
類、尿玠窒玠BUN及び尿酞のような血液、
血挿又は血枅配䜍子に察し知られおいる。曎
に、アミラヌれ、コリン゚ステラヌれ、クレア
チン・ホスホキナヌれCPK、デヒドロゲナ
ヌれ類ヒドロキシ酪酞、む゜ク゚ン酞、乳酞
及びリンゎ酞を脱氎する、リパヌれ、プニ
ルアラニン、トランスアミナヌれ類グルタミ
ン酞をオキザロ酢酞に、たたグルタミン酞をピ
ルビン酞にする、酞及びアルカリホスフアタ
ヌれ類、γ―グルタミル・トランスペプチダヌ
れ、ロむシンアミノペプチダヌれ及び゚リスロ
サむト酵玠類グルコヌス――リン酞塩デヒ
ドロゲナヌれ、―ホスホグルコ酞塩デヒドロ
ゲナヌれ、グルタチオン還元酵玠及びピルビン
酞塩キナヌれのような血液化孊における酵玠
配䜍子の枬定も重芁である。アルブミン、クリ
オグロビン類cryoglobins、凝結及び線維玠
溶解系の成分、補䜓因子䞊びにむンタヌプロ
ン及びむムノグロビン類の劂き现胞性及び血枅
性免疫䜜甚䜓のような血液蛋癜配䜍子に぀いお
も詊隓が可胜であり、それは均䞀系特異的結合
詊隓に関連しお以䞋に詳现に論じられる。
同様に、尿化孊にもずずく枬定甚の詊薬組成
物も知られおいる。尿化孊の分野では、このよ
うな配䜍子は䞀般に、アスコルビン酞、アルブ
ミン、クレアチン、クレアチニン、グルコヌ
ス、胆汁酞類、ピリルビン、蛋癜質、ケトン
類、朜血、亜硝酞塩、アミラヌれ及びプニル
ピルビン酞を包含する。
本発明の分析玠子は、曎に、特異的結合盞手
が存圚する党おの配䜍子の怜知及び、逆にいえ
ば、液状媒䜓の、配䜍子に結合する胜力通
垞、媒䜓䞭に配䜍子に察する結合盞手が存圚す
るためにの怜知に適甚するこずができる。こ
の配䜍子は、通垞、ペプチド、ポリペプチド、
蛋癜質、炭氎化物、糖蛋癜グリコプロテむ
ン、ステロむド、又は、ある特異的結合盞手
が生化孊系に存圚し若しくは合成され埗る他の
有機分子である。この配䜍子は、機胜的な蚀葉
で衚わせば、通垞、抗原類及びそれらに察する
抗䜓類ハプテン類及びそれらに察する抗䜓
類䞊びに、ホルモン類、ビタミン類、代謝産
物類ず薬剀類、およびそれらの受容䜓ず結合性
物質から成る矀より遞ばれる。通垞、配䜍子
は、抗䜓若しくは抗原性ポリペプチドのような
分子量1000〜10000000の免疫孊的に掻性なポリ
ペプチド又は蛋癜質、もしくは分子量100〜
1500のハプテンである。
代衚的なポリペプチド配䜍子は、アンゞオテ
ンシン及び、―ペプチド、オキシトシ
ン、バ゜プレスシン、ニナロフむシン、ガスト
リン、セクレチン、ブラゞキニン䞊びにグルカ
ゎンである。
代衚的な蛋癜質配䜍子には、プロタミン類、
ムコプロテむン類、グリコプロテむン類、グロ
ブリン類、アルブミン類、スクレロプロテむン
類、ホスホプロテむン類、ヒストン類、リポプ
ロテむン類、クロモプロテむン類及びヌクレオ
プロテむン類が含たれる。特異なプロテむン類
の䟋ずしおは、プレアルブミン、α1―リポプロ
テむン、人血枅アルブミン、α1―グリコプロテ
むン、トランスコルチン、チロキシン結合性グ
ロブリン、ハプトグロビン、ヘモグロビン、ミ
グロビン、セルロブラスミン、α2―リポプロテ
むン、α2―マクログロブリン、β―リポプロテ
むン、゚リトロポ゚チン、トランスプリン、
ホモペキシン、フむブリノヌゲン、IgG、
IgM、IgA、IgD及びIgE䞊びにそれらのフラ
グメント断片、䟋えばFc及びFabのような
免疫グロブリン類、補䜓類、プロラクチン、フ
むブリノヌゲン、トロンビン等々のような凝血
因子、むンシナリン、メラノトロピン、゜マト
トロピン、チロトロピン、小包刺激ホルモン
follicle stipulated hormone、leutinizingホ
ルモン、ゎナドトロピン、甲状腺刺激ホルモ
ン、胎盀性ラクトゲン、内圚因子、トランスコ
バラミン、アルカリ性ホスフアタヌれ類、コリ
ネステラヌれ類、グルタミン酞・オキサロ酢酞
トランスアミナヌれ、グルタミン酞・ピルビン
酞トランスアミナヌれ及びりロペプシンのよう
な血枅酵玠、゚ンドルフむン類、゚ンケフアリ
ン類、プロタミン、組織性抗原類、现菌性抗原
類、䞊びに肝炎関連抗原䟋えばHBsAg、
HBcAg及びHBeAgのようなりむルス性抗
原である。
代衚的なハプテン配䜍子には、䞀般的な薬剀
類、代謝物質類、ホルモン類、ビタミン類及び
類䌌の有機化合物類が含たれる。ハプテン系ホ
ルモン類には、チロキシンずトリむオドサむロ
ニンがある。ビタミン類には、ビタミン、
、䟋えばB12、、、及び、葉酞䞊び
にチアミンが含たれる。薬剀類には、䟋えばゲ
ンタマむシン、トブラマむシン、アミカシン、
シ゜マむシン、カナマむシン及びネチルマむシ
ンのようなアミノグリコシド類、ペニシリン、
テトラサむクリン、テラマむシン、クロロマむ
セチン䞊びにアクチノマむセチンのような抗
生物質ヌクレオシド類nucleosides䞊び
にアデノシン二リン酞塩ADP、アデノシン
䞉リン酞塩ATP、フラビンモノヌクレオチ
ドFMN、ニコチンアミドアデニンゞヌク
レオチドNAD及びそのリン酞塩誘導䜓
NADP、チミゞン、グアノシン䞊びにアデ
ノシンのようなヌクレオチド類
nucleotides、プロスタグランゞン類䟋え
ば゚ストリオヌル及び゚ストラゞオヌルのよう
な゚ストロゲン類、ステロヌゲン類、アンドロ
ゲン類、ゞゎキシン、ゞギトキシン、䞊びに向
副腎刺激性ステロむド類などのステロむド類
プノバルビタヌル、プニトむン、プリミド
ン、゚トサクシミドethosuximide、カルバ
マれピン、バルプロ゚ヌト、テオフむリン、カ
プむン、プロプラノロヌル、プロカむンアミ
ド、キニゞン、アミトリプチリン、コルチゟヌ
ル、デシプラミン、ゞ゜プルアミド、ドクセピ
ン、ドク゜ルビシン、ノルトリプチリン、メト
トレキセヌト、む゜プラミン、リドカむン、プ
ロカむンアミド、―アセチルプロカむンアミ
ド、アンプタミン類、カテコヌルアミン類及
び抗ヒスタミン類のような他のものが含たれ
る。
詊隓されるべき液状媒䜓は、自然に存圚する
か又は人工的に圢成される、配䜍子を含有する
ず考えられる液䜓であ぀およく、普通、生化孊
的液䜓又はその皀釈液である。詊隓できる生化
孊的液䜓には、血枅、プラスマ、尿、唟液䞊び
に矊膜及び脳脊髄液が含たれる。
 茻射線散乱・遮ぞい局 詊薬局及び支持局ずに関係しお、茻射線の散
乱・遮ぞい局の䜍眮は、本発明では重芁であ
る。茻射線散乱・遮ぞい局の性質はそれが調補
される成分によ぀お生ずるもので、それらの性
質は、同様に本発明では重芁である。
本発明の茻射線遮ぞい局は、詊薬局及び支持
局の間に介圚される茻射線散乱・遮ぞい局であ
る。それは、詊薬局の䞀方の面に盎接接觊させ
るこずができ詊薬局から攟出される信号がそ
のずき詊薬局の他方の面から読みずられる。こ
のように、茻射線信号は、それが攟出される詊
薬局の他に怜知甚の他の局又は物質を通過する
こずが䞍芁ずなる。詊薬局が茻射線散乱・遮ぞ
い局によく結合しおいないずきには、茻射線散
乱・遮ぞい局を、䟋えば氎酞化ナトリりムでの
凊理のような適圓な凊理を斜しお、茻射線の散
乱・遮ぞい局の衚面を凊理又は掻性化しお、詊
薬局䞊びに茻射線散乱・遮ぞい局の間の結合を
改善するこずが、ずきずしお、可胜である。別
法ずしお、ある䞋塗り局subbinglayerを茻
射線散乱・遮ぞい局ず詊薬局の間に配眮しお詊
薬局の結合性又は接着性を向䞊するこずができ
る。
茻射線の拡散・遮ぞい局の特性又は性質は、
䞍透明で、比范的薄くそしお配䜍子、詊薬局の
詊薬及びそれらの盞互反応の生成物に察し䞍透
過性でか぀䞍掻性であるこずである。茻射線の
拡散・遮ぞい局は、奜たしくは該局の䞭党䜓に
又は少なくずも詊薬局若しくは䞋塗り局に近接
する該局の衚面に均質に分散された、癜又はう
すい色の顔料を含有する。曎に詳しくは、茻射
線の拡散・遮ぞい局は、䞀方では基材又は支持
材そしお他方では詊薬局又は䞋塗り局ず盞入れ
埗る適圓な暹脂又は高分子材の䞭に包含された
茻射線䞍透過性顔料から構成するこずができ
る。もし性質においお、高分子材であるなら
ば、茻射線の拡散・遮ぞい局はホモポリマヌ又
はコポリマヌである。
茻射線の散乱・遮ぞい局は適宜な厚みにでき
るが、通垞、玄0.0002〜玄0.02むンチの厚みで
あるだろう。
䜿甚できる茻射線䞍透過性顔料の䟋ずしお
は、二酞化チタニりム、硫酞バリりム、酞化亜
鉛、酞化マグネシりム、二酞化ゞルコニりム及
びその類䌌物があげられる。普通、存圚する顔
料の量の䞊限は40未満固䜓含有量で、䞋限は
を超える固䜓含有量であるだろう。
茻射線の拡散・遮ぞい局に甚いるこずのでき
る適圓な暹脂の䟋ずしおは、メチルビニル゚ヌ
テル・無氎マレむン酞共重合䜓゚チレン・無
氎マレむン酞共重合䜓オクタデセニル―・
無氎マレむン酞共重合䜓オクタデシルビニル
゚ヌテル・無氎マレむン酞共重合䜓スチレ
ン・無氎マレむン酞共重合䜓などを含む無氎物
暹脂があげられる。
茻射線の拡散・遮ぞい局に甚いるこずのでき
る他の高分子材の䟋ずしおは、ポリビニルアセ
テヌト、ポリビニルメタクリレヌト、ポリブタ
ゞ゚ン、ポリクロロプレン、ポリビニルピロリ
ドンなどがあげられる。
 均䞀系特異的結合詊隓 党おの均䞀系特異的結合詊隓系甚の詊薬は、
本発明詊隓具に包含するこずができる。䞀般
に、均䞀系特異的結合詊隓の技術は、(1)結合成
分ず暙識の耇合䜓ず(2)耇合䜓䞭の結合性成分に
察しお結合察手ずの間の特殊な盞互䜜甚であ぀
お、暙識耇合䜓が結合察手盞手によ぀お結
合されたずき、その耇合䜓がそのように結合さ
れないずきに比べお暙識特性が盞達するような
特殊な盞互䜜甚に基づくものである。暙識の、
圱響を受ける特性は、䟋えば暙識の化孊的又は
物理的性状のような党おの枬定可胜な性質のも
のであ぀およい。いく぀かの堎合では、圱響を
受ける特性は、化孊結合、共有又は非共有結合
の圢成又は砎壊を含む予め決められた反応にお
ける化孊的な反応性である。他の堎合では、圱
響を受ける特性は、化孊反応なしで枬定できる
暙識の物理的特性である。
倚くの堎合においお、本発明の詊隓具には、
詊料䞭の配䜍子又はその結合胜ず免疫化孊的方
法で盞互䜜甚する均䞀系特異的結合詊隓詊薬が
包含されおいるだろう。すなわち、詊料䞭の、
詊薬類及び又は詊料䞭の配䜍子若しくはその
結合胜ずの間に抗原―抗䜓又は付着䜓―抗䜓の
関係が存圚するだろう。それゆえ、そのような
詊隓は免疫詊隓むムノアツセヌず名づけら
れ、暙識耇合䜓ずその結合盞手ずの特殊な盞互
䜜甚は免疫化孊的結合である。かくしおこのよ
うな䟋においおは、暙識耇合䜓の結合性成分
は、抗原、ハプテン又は抗䜓又はそのフラグ
メントであり、その結合盞手はそれに察応す
る免疫化孊的な結合盞手である。しかしなが
ら、埓来、暙識耇合䜓ず結合盞手ずの間の他の
結合性盞互䜜甚が、ホルモン類、ビタミン類、
代謝産物類及び薬剀類ずそれらのそれぞれの受
容䜓及び結合性物質ずの間の結合性盞互䜜甚を
含む均䞀系特異的結合詊隓の基瀎ずしお働くこ
ずはよく知られおいる。
詊料がその䞭の特定の配䜍子の存圚又は量を
枬定するために詊隓されおいる堎合、均䞀系特
異的結合詊隓技術甚の詊薬は、通垞、(1)暙識に
化孊的に結合した、配䜍子又はその結合性類瞁
䜓からなる暙識耇合䜓、(2)䟋えば抗䜓又はその
フラグメント、倩然の受容䜓プロテむンのよう
な配䜍子に察する結合盞手、䞊びに(3)暙識耇合
䜓の䞭の暙識物質を枬定するために必芁な党お
の補助詊薬から構成される。結合性物質のある
制限量の結合性物が導入され、その結果、詊料
䞭の党おの配䜍子が結合盞手に結合するために
暙識耇合䜓ず競合するだろう。結合皮ず遊離皮
ずの間の暙識の分垃は、それゆえ、暙識からの
怜知可胜な応答の皋床を決定し、それは、次
に、配䜍子の存圚の関数であるだろう。配䜍子
を枬定する他の方法は、暙識耇合䜓が、配䜍子
の暙識された結合盞手から成り、配䜍子に結合
するず暙識がその怜知可胜な応答に応じお圱響
を受けるような堎合に、䞎えられる。詊料の配
䜍子結合胜を詊隓する堎合には、暙識耇合䜓は
暙識に化孊的に結合された配䜍子又はその結合
性類瞁䜓から構成され、そのこずによ぀お、暙
識耇合䜓を結合すべき詊料の胜力は、䟋えば詊
料䞭配䜍子の結合盞手の存圚故に、暙識からの
怜知可胜な信号に察する効果を枬定する。
いく぀かの異な぀た均䞀系特異的結合詊隓系
が埓来から知られおおり、以䞋は、本発明の範
囲を限定するこずなしに、本発明の詊隓具の䜿
甚に察し果されるいく぀かのそのような系の䟋
である。以䞋の系は、甚いられる暙識の性質に
より衚蚘される。
(a) 酵玠補欠分子族暙識 この系においお、暙識は酵玠の補欠分子族
であり、補欠分子族暙識ず䞀䜓ずな぀お掻性
酵玠ホロ酵玠を生成する、觊媒的に䞍掻
性なアポ酵玠の胜力は、暙識耇合䜓がその結
合盞手ず結合するこずによ぀お圱響を受け
る。埗られたホロ酵玠の掻性は、埓来の怜知
系によ぀お枬定され、最終的に怜知可胜な信
号を生ずる。このタむプの詊隓系は、1979幎
月日に出願され、出願に係属䞭の米囜出
願第45423号英囜特蚱第2023607号明现曞に
察応するの䞭に蚘茉されおいる。特に奜た
しい、補欠分子族で暙識された詊隓方法は、
暙識ずしおフラビンアデニンゞヌクレオチド
FAD及びアポ酵玠ずしおアポグルコヌス
オキシダヌれを甚いおいる。埗られたグルコ
ヌスオキシダヌれの掻性は、グルコヌス、ペ
ルオキシダヌれ及び過酞化氎玠に応答しお色
倉化を生ずる指瀺薬系から成る比色怜知系に
よ぀お枬定できる。
この奜たしい詊隓方法では、FAD―暙識
耇合䜓は、奜たしくは、 匏 匏䞭、Riboflavin―Phos―2RiboseはFAD
䞭のリボフラビン―ピロリン酞塩―リボヌス
残基を衚わし、は結合基で、は䟋えば配
䜍子又はその類瞁䜓のような結合性成分であ
る。 から成る。このような耇合䜓の䟋は、1980幎
10月30日に出願され、出願に係属䞭の米囜出
願第202378号で開瀺されたFAD―テオフむ
リン耇合䜓である。
(b) 酵玠基質暙識 この系で、暙識は、暙識耇合䜓が酵玠に察
する基質であり、そしお、この基質―暙識耇
合䜓に䜜甚する、酵玠の、胜力は、暙識耇合
䜓がその結合盞手ず結合するこずにより、正
又は負のいずれの意味においおも圱響を受け
るように遞択される。基質―暙識耇合䜓ぞの
酵玠の䜜甚は、いく぀かの態様特性、す
なわち、指瀺薬反応における化孊的䞍掻性さ
又は䟋えば螢光若しくは光吞収色の劂き
枬光孊的性質のような化孊的又は物理的な通
垞の特性においお識別可胜な生成物を生成す
る。このタむプの詊隓系は、1978幎月10日
に出願され、出願に係属䞭の米囜出願第
894836号西独囜公開第2618511号に察応す
る、及び1979幎10月23日に出願された米囜
出願第87819号䞊びにAnal.Chem.481933
1976、Anal.Biochem.77551977及び
Clin.Chem.2314021977に蚘茉されおい
る。
特に奜たしい基質―暙識詊隓方法は、構造
匏 匏䞭、は結合基では䟋えば配䜍子又は
その類瞁䜓のような結合性成分である。 の暙識耇合䜓を甚いるもので、それにより、
その螢光によ぀お識別可胜な生成物を生ずる
共圹䜓にた぀わる、酵玠β―ガラクトシダヌ
れの、該耇合䜓を切断しお、その螢光により
識別しうる生成物を圢成する胜力は、耇合䜓
がその結合盞手ず結合するこずにより防止さ
れる。
(c) 補酵玠暙識類 この系における暙識耇合䜓は、その暙識郚
分は、補酵玠掻性を有する官胜郚分からな
り、かかる補酵玠暙識の、酵玠反応に関䞎す
る胜力は、該暙識の、その結合盞手ずの結合
によ぀お圱響を受ける。生起する酵玠反応の
速床は、最終的に埗られる怜知可胜な信号を
生ずる埓来の怜知系によ぀お枬定するこずが
できる。このタむプの詊隓方法は、1978幎
月10日に出願され、出願に係属䞭の米囜出願
第894836号䞊びに、Anal.Biochem.72
2711976、Anal.Biochem.722831976
及びAnal.Biochem.76951976に蚘茉さ
れおいる。
(d) 酵玠掻性に圱響する暙識類 この系における暙識耇合䜓は、その暙識郚
分は、酵玠阻害剀又は促進剀のような酵玠掻
性に圱響を䞎える官胜郚分からなり、かかる
酵玠掻性を巊右する暙識の、酵玠掻性ぞの圱
響胜は、暙識耇合䜓がその結合盞手ず結合す
るこずにより圱響を受ける。この酵玠反応の
速床は、最終的に怜知可胜な信号を生ずる埓
来の怜知系によ぀お枬定できる。このタむプ
の詊隓方法は米囜特蚱第4134792号に蚘茉さ
れおいる。
(e) 酵玠暙識矀 この系においお、暙識は酵玠であり、酵玠
暙識の掻性は暙識耇合䜓がその結合盞手ず結
合するこずによ぀お圱響を受ける。埗られた
酵玠掻性は、最終的に怜知可胜な信号を生ず
る埓来の怜知系によ぀お枬定できる。このタ
むプの詊隓方法は、米囜特蚱第3817837号及
び4043872号に蚘茉されおいる。
(f) 消滅性螢光暙識類 この系における暙識耇合䜓は、その暙識郚
分においお螢光䜓から成り、その螢光は、暙
識耇合䜓が䞀般に抗䜓のようなプロテむンで
あるこの結合盞手によ぀お結合されるず、あ
る枬定可胜な皋床にたで消滅する。この螢光
性暙識は、怜知可胜な信号であるその螢光
で、盎接枬定される。このタむプの詊隓系
は、米囜特蚱第4160016号及びJ.Clin.Path.に
蚘茉されおいる。
(g) 螢光偏光性暙識類 この系における暙識は、同様に螢光䜓であ
るしかしながら、圱響される特性は、暙識
耇合䜓が、通垞抗䜓のようなプロテむンであ
るその結合盞手ずの結合に基づく螢光のかた
よりである。このタむプの詊隓系は、J.Exp.
Med.12210291965に蚘茉されおいる。
(h) 化孊的に励起された螢光性暙識類 この系においお、暙識は、再床、螢光䜓で
あるが、それが螢光発光する゚ネルギヌ準䜍
にたで化孊的に励起されるべき螢光䜓暙識の
胜力は、暙識耇合䜓がその結合盞手ず結合す
るこずにより圱響を受ける。暙識の化孊的励
起は、䞀般に、螢光䜓暙識をその堎で圢成さ
れる高゚ネルギヌ化合物に曝露するこずによ
぀お達成される。このタむプの詊隓系は、
1979幎月18日に出願され出願に係属する自
分自身の米囜出願第4580に蚘茉されおいる。
(i) 二抗䜓立䜓障害暙識類 他の分析系は、米囜特蚱第3935074号及び
3998943号に蚘茉の二重抗䜓免疫詊隓系であ
る。暙識耇合䜓は぀の゚ピトヌプ
epitopeからなり、その぀は配䜍子及び
抗配䜍子抗䜓ずの免疫孊的反応に䞎り、他は
第の抗䜓により、結合可胜であり、ただ
し、぀の抗䜓が同時に暙識耇合䜓に結合す
るこずはできない。第の゚ピトヌプは螢光
䜓であり、その螢光が第の抗䜓の結合で消
滅するか、あるいは、それが第の抗䜓に結
合するための第の゚ピトヌプの暙識䜓ず補
助的な競争的結合反応にあずか぀おもよい。
各皮の怜知系が、前述の特蚱に蚘茉されたよ
うな系で可胜である。これに関連した詊隓系
は、米囜特蚱第4130462号及び4161515号䞊び
に英囜特蚱第1560852号に蚘茉されおいる。
(j) ゚ネルギヌ移動型暙識類 この系では、暙識ぱネルギヌ移動にあず
かる察のドナヌ䟛䞎䜓及びアクセプタ
ヌ受容䜓の方であり、その結合盞手は
かかる察の他のものず結合する。かくしお、
暙識耇合䜓が結合盞手ず結合したずき、この
察のドナヌ成分の゚ネルギヌ衚瀺は、アクセ
プタヌ成分ぞの移動によ぀お倉化する。普
通、ドナヌは螢光䜓でアクセプタヌはその消
滅剀であり、その消滅剀は同様に螢光䜓であ
぀おもよいしそうでなくおもよい。このよう
な態様においお、怜知可胜な信号は螢光であ
るが、他の怜知系もたた可胜である。このよ
うな詊隓系は、米囜特蚱第3996345号
4174384号及び4199559号、䞊びに英囜特蚱
第2018424号に蚘茉されおいる。
(k) 他の暙識類 本発明で䜿甚でき、埓来から蚘茉されおい
る他の均䞀系特異的結合詊隓系は、 (i) 電子移動剀のような非酵玠的觊媒米囜
特蚱第4160645号参照 (ii) 非酵玠的化孊発光䜓䞊で蚀及された、
出願に係属する米囜出願第894836号参
照。 (iii) 「チダネリングchnneling」暙識類
英囜特蚱第2019562号参照。 (iv) 「パヌテむクルpartile」暙識類英
囜特蚱第2019562号参照。及び (v) 暙識化リポ゜ヌムliposome粒子
米囜特蚱第4193983号参照。 のような暙識を䜿甚しおいる。
 詊薬局 茻射線の拡散・遮ぞい局又は、もし䞋塗り局
が甚いられるならば、䞋塗り局䞊に詊薬局を蚭
ける方法も又ここに提䟛される。本発明の詊隓
具は、茻射線散乱・遮ぞい局又は䞋塗り局䞊に
詊薬組成物を印刷もしくは噎霧するなどの適圓
な方法によるか、あるいは公知のフむルム圢成
技術のいずれかを甚いるこずにより補造するこ
ずができる。
詊薬局が、実際に倚重局からなる堎合には、
このような局は、必芁ならば、局間の流䜓通過
を蚱容する接着剀で薄局関係に維持するこずが
できる。しかしながら、普通は、぀の局を他
の局に接着するために接着剀を甚いるこずは必
芁ではない。フむルム圢成装眮を甚いる䞀䜓的
な分析玠子の補造においおは、局を別々に予め
圢成しそしお積局し党䜓的な玠子を圢成でき
る。フむルム局の材質は、寞法安定性を付䞎す
るに奜適な可塑剀及び高分子から成る組成物で
あり埗る。こういう方法で補造された局は、兞
型的には、衚面䞊に、溶液又は懞濁液から塗垃
され、その衚面からは也燥された局を物理的に
匕き剥すこずができる。しかしながら、倚重の
剥離及び積局工皋の問題を回避できる䟿利な方
法は、剥離する衚面又は必芁に応じお、支持局
の䞊に最初の局を塗垃し、その埌、既に塗垃さ
れおいるそれらの䞊に盎接次々ず局を塗垃する
こずである。このような塗垃は、手で、ブレヌ
ド塗垃具で、又は機械で、浞挬又はビヌズ塗垃
のような技法を甚いお果すこずができる。もし
も機械塗垃法が甚いられる堎合には、しばし
ば、光感応性写真甚フむルム及び感光玙の補造
でよく知られおいるホツパヌ塗垃法を甚いお近
接する局を同時に塗垃するこずが可胜である。
フむルム局材質ずしおかぶりを有する高分子
局Blush polymer layerを甚いるこずがで
きる。このフむルムは、぀の液䜓の混合物に
高分子を溶解するこずにより基板の䞊に圢成さ
れる。この液䜓の方は䜎沞点で高分子に察す
る良奜な溶媒であり、他方は高沞点で高分子に
察しおは非溶媒若しくは少なくずも貧溶媒であ
る。このような高分子溶液は、぀ぎに基板の䞊
に塗垃され、そしお制埡された条件䞋で也燥さ
れる。䜎沞点溶媒はより容易に蒞発し、そし
お、塗垃物は貧溶媒又は非溶媒である液䜓䞭で
倚くな぀おいく。蒞発が進むず、あるしかるべ
き条件䞋で高分子は倚孔質の局ずなる。倚くの
皮類の高分子を、本発明で甚いるための倚孔質
のかぶりを有する高分子局の調補甚に、単独で
又は組合せお甚いるこずができる。兞型的な䟋
ずしお、ポリカヌボネヌト類、ポリアミド類、
ポリりレタン類、及びセルロヌスアセテヌトの
ようなセルロヌス゚ステル類が挙げられる。暙
識耇合䜓又は他の詊薬を含むような局を圢成す
るには、マトリツクス母材及び包含された
掻性物質を含む塗垃溶液又は懞濁液を調補し、
ここで論じたようにしお塗垃し、也燥しお寞法
安定がある局を圢成するこずができる。
詊薬局の厚み及びその透過性の床合いは、実
際の甚途によ぀お広範囲に倉えるこずができ
る。玄ミクロンから玄100ミクロンの也燥厚
みが奜郜合であ぀たが、ある情況䞋では曎に広
く倉化させた厚みが奜たしい。䟋えば、比范的
倧量の盞互䜜甚性の物質、䟋えば酵玠のような
高分子物質、が必芁ずされるならば、少し厚め
の局を調補するこずが奜たしいであろう。
陰むオン及び非むオン界面掻性剀のような
皮又はそれ以䞊の界面掻性剀を詊薬局に包含せ
しめるこずは有益である。䟋えば、それらは、
局圢成配合物の塗垃性を向䞊せしめ、界面掻性
剀のような助剀がないず液䜓詊料によ぀おは容
易には濡れない局䞭での濡れの倧きさ及び範囲
を高める。曎に、遞んだ分析においお、その分
析に察しおは朜圚的に有害である物質を、化孊
反応又はその他によ぀お䞍掻性にせしめ埗る物
質を含たせるこずは奜たしいこずでありうる。
以䞋に、詊薬局の調補のいく぀かの奜たしい
詊みを蚘茉する。
(a) 倚重局の詊み この詊みは、液䜓詊料䞭の配䜍子又は配䜍
子結合胜を枬定するための均䞀系特異的結合
分析玠子の詊薬局を、圢成する方法に関する
ものであるが、この方法は、配䜍子郚分
子又はその特異的結合類瞁䜓に結合した暙
識成分からなる暙識耇合䜓ず該暙識耇合䜓ず
盞互反応性の詊薬ずを含む組成物を包含せし
めるこずによ぀お行なわれる。この詊薬は、
䟋えば、配䜍子に察する特異的結合盞手及び
暙識耇合䜓ず盞互反応しお配䜍子郚分又はそ
の特異的結合類瞁䜓から暙識成分を切断する
成分ずから成る。
詊薬類は、詊隓具の調補期間䞭の実質的な
盞互反応が可胜で、かくしお尚早に反応しな
いそれぞれの溶液の圢で䜿甚するこずができ
る。奜たしい態様においおは、ある第の詊
薬が氎性浞挬を甚いた局に包含せしめられ、
その他の詊薬類甚には、トル゚ン、アセト
ン、クロロホルム、塩化メチレンメチレン
クロリド、―プロパノヌル及び二塩化゚
チレン゚チレンゞクロリドのような適圓
な有機溶媒が甚いられる。この局はこの有機
溶媒を蒞発させお定着される。
この奜たしい態様の䟋は、β―ガラクトシ
ルりンベリプロン―配䜍子又は配䜍子類瞁
䜓耇合䜓、β―ガラクトシダヌれ及び配䜍子
に察する抗血枅を適甚するこずによ぀お、液
䜓詊料䞭の配䜍子又は配䜍子結合胜を枬定す
るための均䞀系特異的結合詊隓具を調補する
方法であ぀お、この方法は(a)β―ガラクトシ
ダヌれ及び配䜍子に察する抗血枅を氎性液䜓
䞭で適甚し、そしお(b)぀いでβ―ガラクトシ
ルりンベリプロン―配䜍子又は配䜍子類瞁
䜓耇合䜓をアセトン䞭で適甚するこずから成
る。
(b) 倚領域詊薬局 倚領域詊薬局は、(a)甚いられる特異的結合
性の分析系の詊薬のいく぀か、しかし、党郚
ではなく、を第又は䞊局領域に包含せし
め、(b)残䜙の詊薬類を第の又は䞋局領域に
包含せしめ、(c)䟋えば也燥しお、個々の領域
を定着させ、そしお(d)それらを互いに積局関
係をもたせお薄局状に固着するこずによ぀お
調補される。
第局及び第局はいずれも䞀察の察向面
を有する。第局の぀の面は第の局の
぀の面ず積局関係にあり、そしお詊料は該䞡
局のいずれかの他の面に適甚される。積局関
係ずいうのは、液䜓であろうずガスであろう
ず、これらの局の重なり合぀た面の間を流䜓
が通過できるこずを意味する。このような局
は、互いに隣接しおいおもよく、介圚局によ
぀お分離されおいおもよい。いかなる介圚局
も、党おの局間の通過を劚害するものであ぀
おはならない。
(c) 凍結也燥法 この方法は、䞀局の分析玠子における共存
できない詊薬類を包含せしめ、それら詊薬間
の反応を防止する操䜜から成る。䟋えば、詊
薬類の第の矀が凍結也燥法によるか高枩に
おいお塗垃され凊理局が蚭けられる。呚蟺雰
囲気䞋で第の矀ず反応するものを含む詊薬
類の第の矀が、適甚されそしお玠子が急速
に凍結される。凍結は、時期尚早な反応を防
止し、凍結也燥による氎の続いお起きる陀去
はこの局が宀枩にたで戻されたずきの尚早な
反応を防止する。
奜たしい態様においおは、詊薬類の矀
は、氎溶液の圢で、局に添加し也燥しおもよ
い。氎溶液の圢で詊薬類の第の矀を添加し
たのち急速に凍結され、氎を陀去するために
凍結也燥が行なわれる。この方法は、氎にの
み溶けるいく぀かの詊薬類を包含せしめ、そ
れら詊薬間の盞互反応を防止する堎合に適甚
される。さらに、この方法においおは、有機
溶媒は䜿甚されない。ずいうのは、ある皮の
有機溶媒は、いく぀かの詊薬類䟋えば、酵
玠類ず奜たしくない反応を起す可胜性があ
るからである。
この方法は、党おの詊薬類が単䞀局玠子内
に蚭けられる均䞀系特異的結合詊隓甚の詊薬
類を甚いる玠子の圢成を可胜にする。
(d) 予備圢成錯䜓法 詊料配䜍子ず結合盞手ここでは抗䜓
“Ab”によ぀お䟋瀺する。に結合するため
の暙識化配䜍子間の競合は、匏 配䜍子 Ab配䜍子   暙識−配䜍子 Ab暙識−配䜍子  Ab によ぀おたずめるこずができる。
䞊に瀺された系においお、抗䜓及び暙識耇
合䜓は、詊料を導入するたでは分離しお保持
される。蚘茉した発明のこの態様は、以䞋の
匏 配䜍子 Ab配䜍子   Ab暙識−配䜍子 暙識−配䜍子 によ぀お瀺されるように、配䜍子ずの逆反応
及び再平衡を甚いるもので、ここで、眮換さ
れた暙識耇合䜓は詊料配䜍子濃床に関係す
る。この利点は、党おの詊薬成分が぀の包
含された媒䜓䞭に組合わされ、詊隓されるべ
き詊料の添加のみを必芁ずする系を提䟛でき
るずいうこずである。
このように、この方法は、液䜓詊料䞭の配
䜍子を枬定する均䞀系特異的結合詊隓具の詊
薬局の調補方法を提䟛するものであるが、こ
の方法は、(a)暙識耇合䜓であ぀お、配䜍子又
はその特異的結合類瞁䜓に結合された暙識成
分から成る耇合䜓ずその配䜍子に察する特異
的結合盞手ずの間に錯䜓を圢成しそしお、
(b)その錯䜓を適甚するこずから構成される。
この方法では、錯䜓の圢成は、暙識耇合䜓ず
そのための特異的結合盞手を䌚合せしめ、耇
合䜓、結合盞手及び錯䜓をある平衡状態に到
達せしめるようにするこずから成る。
曎に詳现にいえば、この局は、䞎えられた
耇合䜓をそのそれぞれの抗血枅ずずもに短時
間、䟋えば15分、むンキナベヌトしお調補さ
れる。぀いで、他の詊薬類が添加され、そし
お曎に䞀定時間、むンキナベヌトされる。そ
のように圢成された溶液は぀いで攟眮され
る。
 支持局 ここで既に述べられおいるように、䞀䜓的な
分析玠子は支持䜓をも含む。支持䜓は光若しく
は他の゚ネルギに察し、䞍透明、半透明又は透
明であ぀おもよい。特定の玠子甚に遞定された
支持䜓は、信号怜知に関し意図されたモヌドに
無関係に遞択されるだろう。奜たしい支持䜓
は、ポリスチレン又は同皮のプラスチツク材で
できた支持䜓が含たれる。
 倚重局玠子の調補 曎に、本発明は、詊料䞭の配䜍子又はその配
䜍子結合胜に応答する詊薬を包含し怜知可胜な
応答を䞎える詊薬局、茻射線の拡散・遮ぞい
局、及び支持局を有し各局が察向する面を有す
るタむプであ぀お、液䜓詊料内の配䜍子又は配
䜍子結合胜の怜知甚倚重局分析玠子の調補方法
を提䟛するもので、その方法は、(1)、(a)配䜍
子、詊薬局の詊薬類及びそれらの盞互反応の生
成物に察しおは䞍透過性でか぀、(b)配䜍子、
詊薬局の詊薬類及びそれらの盞互反応の生成物
に察しおは䞍掻性である茻射線拡散・遮ぞい局
の衚面に支持局の衚面を固着し、そしお、(2)茻
射線拡散・遮ぞい局の察向する反察偎の面
に詊薬局の衚面を固着する工皋から構成され
る。
぀の態様においおは、茻射線拡散・遮ぞい
局の぀の面に支持局の面を固着するこずは、
その支持局のその面に茻射線拡散・遮ぞい局を
圢成するこずを含む。他の態様では、茻射線拡
散・遮ぞい局の぀の面に支持局の぀の面を
固着するこずは、茻射線拡散・遮ぞい局を圢成
し、その埌、支持局の面に、かくしお圢成され
た茻射線拡散・遮ぞい局を固着するこずから成
る。
 怜知可胜な応答 既に蚘したように、最近開発された均䞀系特
異的結合詊隓系の倚くは、液䜓詊料䞭の分析䞋
の配䜍子の存圚又は量に関係する色倉化、化孊
発光、又は螢光のような怜知可胜な応答を䞎え
るか又は䞎えるように容易に適合させるこずが
できる。
「怜知可胜な皮species」ずいう甚語及び
ここで甚いられる同様の甚語は、原子、化孊基
すなわち、分子の䞀郚又はそれ自身が盎接、
間接に怜知可胜である化合物を衚わし、たた、
ここで䜿われる「怜知可胜な応答」なる甚語及
び同様の甚語は、このような皮の存圚の怜知可
胜な衚珟珟われを意味する。䟋ずしおは、
螢光、燐光、化孊発光、可芖領域に色倉化がも
たらされる光吞収における倉化、又は可芖スペ
クトルにおける反射、玫倖領域若しくは赀倖領
域におけるような可芖領域倖での光吞収又は反
射に関連した倉化などの電磁波信号が挙げられ
る。圓業者には明癜なように、ここで甚いられ
るような「怜知可胜な応答」の語は、最も広い
意味で意図されおいる。電磁波信号の他に、
「怜知可胜な応答」なる語は、系のパラメヌタ
の芳察可胜ないかなる倉化をも意味するもので
あり、その䟋ずしおは、反応剀の倉化もしくは
出珟、詊隓系における成分の芳察可胜な析出も
しくは、詊薬系である詊隓詊料䞭であれ、他の
いかなるパラメヌタの倉化をも挙げるこずがで
きる。このような他の怜知可胜な応答は、電気
化孊的応答及び熱量枬定的な応答も含む。曎
に、この怜知可胜な応答は、盎接感芚をずおし
お芳察でき、たたは、分光光床蚈、玫倖線感知
機噚、螢光蚈、螢光分光光床蚈及び他の同様の
感知系のような補助ずなる怜知手段を甚いお芳
察するこずができるものである。望たしくは、
このような怜知可胜性は、ここで意図されおい
る分析の基瀎である分析察象物の盞互䜜甚から
生ずる拡散性生成物の量に圱響を䞎えるこずな
く党量の怜知可胜な皮に郜合よく付䞎するこず
ができる。
分析結果が怜知可胜な倉化ずしお埗られたの
ち、その倉化は、通垞、反射、透光又は螢光枬
光甚の装眮が蚭けられおいる領域に詊隓玠子を
通すこずによ぀お枬定される。このような装眮
では、光のような゚ネルギヌ束を圓おるように
な぀おいる。この光は぀いで玠子背面から怜知
噚に向け反射される。分析結果は、そのような
結果が生みだされる領域内に完党に入る玠子の
領域で怜知される。反射分光光床法の䜿甚は、
䟋えば、玠子の局䞊もしくは局䞭に残留しおい
る血球又は尿沈柱物のような残査からうける又
は異状な尿の色からうける光孊的劚害を効果的
に回避するこずができるので、いく぀かの状況
においおは有益である。埓来の螢光分光光床法
の手法もたた甚いるこずができる。䞀般に、玄
200〜900nmの範囲における電磁気茻射線は、
このような枬定に有甚であるこずが芋出され
た。しかし、詊薬局を透過でき、玠子内で生成
した生成物を定量できる党おの茻射線は甚いる
こずができる。倚皮の怜量法を、分析に察する
察照を䞎えるために甚いるこずができる。䟋
ずしお、分析䞋にある配䜍子の暙準溶液の詊料
を、詊料液が分析の瀺差枬定をさせるために眮
かれた郚眲に近接しお、適甚するこずができ
る。
以䞋の䟋は、本発明を開発するに圓぀お行なわ
れた実隓を蚘茉する。これらの実斜䟋は奜たしい
態様を瀺すが、本発明の範囲を制限するものず解
釈されるべきではない。
䟋  モデル系の比范 本発明の遮ぞい局の効果を評䟡するために、詊
薬局ず支持局の間に、䞊述した茻射線の拡散・遮
ぞい局を備えたもの及び備えないもの䞡方の玠子
を調補した。このモデル系における詊薬局は、そ
れ自身、怜知可胜な応答、すなわち、螢光を発す
る詊薬溶液によ぀お調補される。それゆえ、この
䟋は、他の特定配䜍子に限定されない比范䟋を包
むものである。
玠子の調補 党おが0.5cm×1.0cmの寞法を有し、そのいく぀
かはポリ゚ステルで他はゲル結合フむルムである
支持局を甚いお、䞡方のタむプの玠子を調補し
た。詊隓具及びは、茻射線拡散・遮ぞい局ず
詊薬局の間に支持局を備え詊隓具は倚領域詊
薬局を備える。詊隓具においおは、詊薬局が支
持局及び茻射線拡散・遮ぞい局の間にある。詊隓
具は、詊薬局及び支持局の間に茻射線拡散・遮
ぞい局を有し、これが本発明の䟋である。
詊隓具は、支持局の぀の面にアガロヌス組
成物の詊薬局フむルムを圢成し他の面にTiO2顔
料組成物を぀けお茻射線拡散・遮ぞい局を圢成し
お調補した。アガロヌス組成物は以䞋配合を有す
る。
成 分 量 アガロヌス 1.5g トリトン―10010 500.0ÎŒ 1MmolarバむシンPH8.3 10.0 H2O 40.0ml トリトンTritonは、フむラデルフむア・
ペンシルノアニアのロヌム・アンド・ハヌス瀟
RohmHass、Philadelphia、PAによ぀お販
売されおいる䞀連の人工の有機界面掻性剀に察す
る商暙である。バむシンはN′―ビス―
―ヒドロキシ゚チル―グリシンである。TiO2
顔料組成物は以䞋のように圢成される 成分 量 TiO2 2.5 PVP 2.5 クロロホルム 44.5 ゞオクチルフタレヌト 0.5 詊隓具の調補は、ポリビニルピロリドン
PVP組成物が支持局ず接觊する面ずは反察偎
のアガロヌスフむルムの面にフむルムずしお぀け
られたこずを加えれば、䞊述したように、詊隓具
のそれず同䞀である。このPVP組成物は、フ
むルムを圢成し、それは、アガロヌスフむルムず
組合わさ぀お倚領域詊薬局を圢成する。それは以
䞋のようにしお぀くられた 成分 量 PVP 5.0 クロロホルム 45.0 詊隓具は、アガロヌス組成物の詊薬局を支持
局の方の面に圢成しお調補した。アガロヌス組
成物は詊隓具及びで䜿぀たそれず同䞀であ぀
た。詊隓具及びで甚いたず同じTiO2組成物
を甚い、支持局に接觊する面ずは反察偎のアガロ
ヌスフむルムの面䞊にフむルムを圢成した。
詊隓具は、他の詊隓具で甚いたず同䞀の
TiO2顔料組成物を支持局の䞊に塗垃しお茻射線
拡散・遮ぞい局を圢成し、぀いで、他の詊隓具で
甚いたず同䞀のアガロヌス組成物を、支持局ず接
觊する面ずは反察偎のアガロヌス局の䞊に塗぀お
調補した。
加えお、0.5×1.0cmのホワツトマン31ET箙
Whatman、Inc.、Clifton.N.J.07014ず反射性
マむラヌポリ゚ステル3M Company、St.
Paul、MN55144を䞀緒に積局しお詊隓具を
圢成した。圢成された詊隓具には詊薬は党く存圚
しない。
分析方法 䞊述したように調補した詊隓具を、それぞれ、
螢光蚈内で詊隓具を氎平に䜍眮づけるに適した機
械保持治具の䞭に挿入した。―ヒドロキシ―ク
マリン――カルボオキサニリドHCC30ÎŒ
の滎の氎溶液を螢光蚈の治具に眮く盎前に各詊
隓具の䞊に眮いた。甚いた各HCC溶液は、0.2〜
2.0ÎŒM濃床の範囲にあ぀た。
衚面の面から90床のずころで玠子の衚面をう぀
波長405nmの励起光源を生ずるように螢光蚈を調
敎し、波長450nmで攟射される光枬定した。玠子
衚面の氎平面から90゜の角床においお、螢光の前
面枬光を行な぀た。぀いで、各詊料の螢光を枬定
した。
結 果 各HCC詊料に関する範囲及びバツクグラン
ドに察する信号の比を、それぞれ、匏
及び (1) Fm−Fb (2) FmFb ここで、Fb及びFmは、それぞれ、ブランク
及びHCC溶液に関する螢光信号である。 を甚いお枬定した。
詊隓具及びを甚いお埗られたデヌタは砎線
で描かれた曲線によ぀お図及びの䞡方に瀺し
た。詊隓具及びを甚いお埗られたデヌタは、
実線で描かれた曲線によ぀お図及びの䞡方に
瀺した。詊隓具を甚いお埗られたデヌタは、仮
想線で描かれた曲線により図及びの䞡方で瀺
した。
図は、各系に察するHCC濃床の関数ずしお
範囲のプロツトを瀺す。ホワツトマン31ET詊隓
具ずは別に、぀の別個の応答が、TiO2ç³»
に぀いお芳枬された。支持䜓の䞋にTiO2を備え
たもの詊隓具及びは、ゲル結合ゲルボ
ンド又はポリ゚ステルにかかわらず、支持䜓の
䞊偎にTiO2を備えたもの詊隓具及びよ
りも、ゲル結合又はポリ゚ステルにかかわらず、
HCCずの接觊で䜎い範囲を瀺しおいる。ホワツ
トマン31ET詊隓具はTiO2系よりもよりよ
い範囲を瀺しおいる。
信号バツクグラント比を、図で
瀺されおいるように、HCC濃床に察しおプロツ
トしたずき、䞀方の詊隓具及び、他方の詊隓
具及びずの間で同じ珟象がみられる。HCC
溶液を受容する局を遮断する支持䜓頂郚にTiO2
を備えたものは、倧きな比を瀺す。支持䜓
の䞋にTiO2を備えたものは、小さい比を瀺し、
そしおホワツトマン31ET詊隓具のものは䞭
間である。
䟋  テオフむリン甚基質暙識化螢光免疫詊隓玠子 テオフむリン〔―ゞメチルキサンチン、
メルクむンデツクス、第版、1196頁1976参
照〕は、喘息の治療に有甚な薬剀である。倧半の
患者においお、治療範囲の血枅䞭濃床は10〜
20ÎŒgmlにあるが、毒性が殆んどきた぀お
35ÎŒgmlを超える血液䞭濃床であらわれる。
耇合䜓の調補 β―ガラクトシル―りンベリプロン―暙識化
テオフむリンβ―GUT耇合䜓を、図に瀺
した反応匏により調補した。この合成経路を、
―〔――β―ガラクトシルクマリン――
カルボキサミドプロピル〕テオフむリン(4)、
を調補するための以䞋の方法で䟋瀺した。
――アミノプロピルテオフむリン(2) ――カルボキシプロピルテオフむリン
(1)〔Cook等、Ros.Commun.Chem.Path.
Pharmacol.13(3)497―5051976〕2.66g0.01モ
ル、クロロホルム20ml、及び濃硫酞mlの混合
物をアルゎン雰囲気䞋50℃で撹拌した。これに、
1.3gの固䜓ナトリりムアゞドを少しず぀90分間か
けお添加した〔Organic Reactions 4728
1967参照〕。反応混合物を冷华し、枛圧䞋で溶
媒を陀去した。残査を充分量の炭酞ナトリりム溶
液ずい぀しよにしおPHを7.5にした。10gのセラむ
トFisher Scientific Co.、Pittsburgh、
Pensylvaniaを添加し氎を蒞発せしめた。セラ
むトCeliteはある皮のケむ藻土の補品の商暙
である。含浞セラむトを、゚タノヌル―モヌラ
ル氎性の重炭酞トリ゚チルアンモニりム
䞭で調補された200gのシリカゲルE.
Merck Co.、Darmstadt、West Germanyの
カラム頂郚に眮いた。カラムをこの溶媒で溶出し
15mlず぀の分画を集めた。画分No.171〜225を䞀緒
にしお蒞発させ500mgの癜色粉末を埗た。これを
アンモニりム型のCM―セフアデツクス
Pharmacia Fine Chemicals、Piscataway、
New Jersey、USAのカラムを甚いお、再び、
クロマトグラフむヌ凊理し、0.5モヌラルの重炭
酞アンモニりムで溶出した。床容積はcm×50cm
で10mlず぀の画分を集めた。画分No.65〜110を
合せお蒞発し、250mgの癜色固䜓を埗た。それを
皀塩酞に溶解し぀いで再び蒞発せしめた。
残査をメタノヌルから再結晶し、300℃以䞋で
は溶融しない淡耐色の針状晶ずしお90mgの塩酞塩
収率を埗た。
分析C10H16N5ClO2ずしおの蚈算倀、
43.88、5.89、25.59 実枬倀、43.77、5.88、
25.46 赀倖吞収スペクトルKCl1695cm-1
ず1655cm-1 アミドカルボニル。
―〔――β―ガラクトシルクマリン―
―カルボキサミドプロピル〕―テオフむリ
ン(4) 24gの氎酞化カリりム、80mlの氎、240mlのメ
タノヌルず20g0.035ミリモルの゚チル・―
β―ガラクトシルクマリン――カルボキシレヌ
トBurd et al、Clin.Chem.2314021977
を含む反応混合物を調補した。反応混合物を15時
間50℃で撹拌した。冷华時、枛圧䞋でメタノヌル
を陀去した。この濃瞮氎溶液を、濃塩酞でPH2.0
に酞性にした。癜色沈柱を集め、冷氎で掗浄し、
熱氎から再結晶化した。結晶を集め、アセトンで
掗浄し、80℃で時間也燥した。癜色結晶ずしお
12gの―β―ガラクトシルクマリン――カル
ボン酞を埗た。融点250〜255℃。
1.45g0.004モルの―β―ガラクトシルク
マリン――カルボン酞、404mg0.004モルの
トリ゚チルアミン、及び40mlの也燥ゞメチルホル
ムアミドの混合物を、アルゎン雰囲気で撹拌しな
がら−10℃に冷华した。これに、546ml0.004モ
ルのむ゜ブチルクロロホヌメヌトAldrich
Chemical Co.、Milwaukee、Wisconsinを加
えお混合無氎物(3)を圢成した。10分埌、曎に404
mgのトリ゚チルアミンず949mg0.004モルの
――アミノプロピルテオフむリン(2)をフラ
スコに加えた。−10℃で30分間撹拌した埌、反応
混合物を宀枩に暖めた。それを10gのシリカゲル
ず合わせ、高真空䞋でDMFを陀去した。含浞さ
れたシリカゲルを170gのシリカゲルのカラムの
頂郚に眮き、カラムを無氎゚タノヌルで溶出し15
mlの画分を集めた。画分No.41〜475を䞀緒にしお
蒞発せしめ545mgの黄色固䜓を埗た。それを氎に
溶解した埌、過し、20mlの䜓積にたで濃瞮し
た。生成した小量の沈柱は廃棄した。液をセフ
アデツクスLH―20ゲルPharmacia Fine
Chemicals、Piscataway、New Jerseyの2.5
cm×57cmカラムを甚いたクラマトグラフむヌによ
぀お粟補し、氎で溶出し、15mlの画分を集めた。
セフアデツクスSephadexは、架橋デキスト
ランで぀くられ芪氎性か぀䞍溶性のクロマトグラ
フ甚媒䜓の商品名である。画分No.18〜23を䞀緒に
しお、蒞発せしめ、そしお残査を氎で再結晶し
お、淡黄色で融点190〜192℃の暙識耇合䜓(4)55mg
収率を埗た。
分析C26H29N5O11ずしおの蚈算倀、
53.15、4.98、11.92。
実枬倀、52.65、5.01、
11.80 β―ガラクトシルクマリン―テオフむリン共圹
䜓(4)、の䞊蚘した合成は、出発物質の―
―カルボキシプロピルテオフむリン(1)、
を以䞋のような適圓な―ω―カルボキシ
アルキルテオフむリンで眮き換えるこずによ぀
お、〜の堎合の暙識耇合䜓を埗るために
倉圢するこずができる。
 アルキレン  ゚チレン  ブチレン  ペンチレン  ヘキシレン 抗血枅の調補 Res.Comm.Chem.Path.Pharmacol.13497―
5051976でクツクCook等によ぀お蚘茉さ
れおいるようにしお調補されたテオフむリン免疫
耇合䜓で免疫されたりサギから抗血枅を集めた。
玠子の調補 これらの実隓で甚いるために調補した玠子は、
図で瀺した圢態を有しおいた。支持局はポリ
スチレン補である。䞍透過性の茻射線拡散・遮ぞ
い局は以䞋の配合組成 スチレン無氎マレむン酞5050共重合䜓、分
子量50000 10g ポリ゚チレングリコヌル分子量1000 6g 二酞化チタン 10g アセトン 34g を有する組成物から成る。
この組成物をポリスチレン支持局の䞊に湿最
厚で0.02むンチ塗り、぀いで宀枩で也燥した。
れラチン䞋塗り局は䞍透過性の茻射線拡散・
遮ぞい局の衚面に密着しお倚領域詊薬局の
぀の領域を圢成する。䞋塗り局は以䞋の組成 れラチン 5g 0.1Mバむシン緩衝剀PH 1.1 45g を有する組成物から成る。
この組成物を局の䞊に湿最厚で0.005むンチ
塗垃し、぀いで37℃で也燥した。
抗䜓及び酵玠含有量は、以䞋の組成 0.8Mバむシン緩衝液PH8.5䞭の
アガロヌスLGT 1.5ml 10トリトン―100 30ÎŒ 1Mバむシン、0.1MMgCl2、PH8.5 300ÎŒ テオフむリンに察する抗血枅 464ÎŒ β―ガラクトシダヌれ177Uml 430ÎŒ 回蒞留した氎 276ÎŒ を有する組成物から調補した。
アガロヌスLGTは、40℃以䞋の䜎い焌き
grilling枩床を有するアガロヌス物質で、リサ
ヌチ・プロダクツ・デむビゞペン・オブ・マむル
ス・ラボラトリヌズ・むンコヌポレヌテツド
Reseach Products Division of Miles
Laboratories、Inc.、ピヌ・オヌ・ボツクス
2000P.O.Box 2000、゚ルクハヌトElkhart、
むンゞアナ46515Indiana 46515によ぀お販売
されおいる。この組成物を局の䞊に湿最厚で
0.02むンチ塗垃し぀いで37℃で也燥した。それ
は、倚領域詊薬局の䞭間領域である。
耇合䜓含有局を以䞋の配合組成 β―GUT耇合䜓 69.2ÎŒ CHCl31.93ml䞭のPVP分子量
360000 2.90g トリトン−100 5ÎŒ を有する組成物から調補した。
この組成物を局の䞊に湿最厚みで0.005むン
チ塗垃し宀枩で也燥した。それは、倚領域詊薬局
の最䞊郚の領域である。局の露出した䞊
郚衚面は、そこぞ詊料が適甚されそこから読み倀
が埗られる衚面である。
分析方法 薬剀溶液の35Ό画分を䞊述のようにしお調補
された分析玠子の露出面に滎䞋した。
宀枩で発生した螢光を分間、分析玠子を氎平
䜍眮ぎめするに適した機械的保持具を備えた螢光
蚈の䞭で枬定した。螢光蚈を、405nmで励起光源
を䞎えお、それが衚に90゜で圓り、攟出された光
を450nmの波で怜知するべく調敎した。螢光の前
面枬光はパツドpadから90゜のずころで行な぀
た。
分析された濃床範囲は以䞋の通りであ぀た。
範囲 テオフむリン 治療孊的範囲 10〜20ÎŒgml 調べられた投䞎量応答範囲 〜41ÎŒgml 調べられた投䞎量応答範囲は治療的範囲をカバ
ヌしおいる。
結 果 䞊述した方法で埗られたデヌタは図によ぀お
図で瀺す。分類単䜍をミリボトルmVの甚語
で瀺す。ミリボトルはボルトの千分の䞀であ
る。投䞎応答曲線、図、を分点で図に瀺し
たデヌタから䜜成した。
考 察 埗られたデヌタは、本発明によ぀お調補した䞀
䜓的な分析玠子が存圚するテオフむリンの濃床範
囲に応答する定量怜知可胜な信号を䞎えるこずを
瀺す。テオフむリンの濃床が増倧するず、それぞ
れの分析玠子の螢光においおは、薬剀䟝存の増加
を招く。
【図面の簡単な説明】
図〜は、䟋に蚘茉された実隓から埗られ
たデヌタのグラフである。図は、䟋で甚いら
れた共圹䜓を調補に甚いた方法の衚瀺である。図
は、䟋に蚘茉されたようにしお調補したテオ
フむリン分析玠子の断面図である。図〜は、
䟋に蚘茉された実隓から埗られたデヌタのグラ
フである。

Claims (1)

  1. 【特蚱請求の範囲】  詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結合する胜力に
    応答しお怜知可胜な応答を䞎える詊薬を包含した
    詊薬局茻射線散乱・遮ぞい局及び支持局を有
    する型の、液䜓詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結合
    する胜力を怜知するための倚重局分析玠子であ぀
    お、 茻射線散乱・遮ぞい局が、(a)詊薬局ず支持局の
    間に介圚せしめられ(b)配䜍子、詊薬局䞭に存圚
    する詊薬及びこれらの盞互反応の生成物に察し䞍
    透過性でか぀、(c)配䜍子、詊薬局䞭に存圚する
    詊薬及びそれらの盞互反応の生成物に察し䞍掻性
    であるこずを特城ずする倚重局分析玠子。  茻射線散乱・遮ぞい局が、䞍透明で、比范的
    薄く、そしお癜色又は淡い色の顔料を含有する特
    蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  顔料が二酞化チタンである特蚱請求の範囲第
    項蚘茉の倚重局分析玠子。  顔料が硫酞バリりムである特蚱請求の範囲第
    項蚘茉の倚重局分析玠子。  顔料が酞化亜鉛である特蚱請求の範囲第項
    蚘茉の倚重局分析玠子。  顔料が酞化マグネシりムである特蚱請求の範
    囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  顔料が二酞化ゞルコニりムである特蚱請求の
    範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  茻射線散乱・遮ぞい局が、無氎物暹脂から成
    る特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  茻射線散乱・遮ぞい局が、厚み0.0002〜0.02
    むンチである特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局
    分析玠子。  顔料が、茻射線散乱・遮ぞい局党䜓に均䞀
    に分散されおいる特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚
    重局分析玠子。  詊薬局が、詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結
    合する胜力の存圚の関数である怜知可胜な応答を
    生ずる、均䞀系特異的結合分析系甚の詊薬を含む
    特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  均䞀系特異的結合分析系が、酵玠反応に関
    䞎する暙識を含む特蚱請求の範囲第項蚘茉の
    倚重局分析玠子。  暙識が、酵玠に察する基質である特蚱請求
    の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  酵玠が、基質暙識に䜜甚しお怜知可胜な生
    成物を生ずる特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重
    局分析玠子。  暙識が酵玠の補欠分子族配合矀である
    特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  補欠分子族が、アポ酵玠ず䞀緒にな぀お酵
    玠を圢成できる特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚
    重局分析玠子。  暙識が酵玠である特蚱請求の範囲第項
    蚘茉の倚重局分析玠子。  詊薬局が、 (i) 配䜍子ず結合する抗䜓、 (ii) 配䜍子又はその結合性類瞁䜓ず暙識ずの耇合
    䜓、 䞊びに、 (iii) 暙識ず盞互䜜甚しお、抗䜓に結合したずきに
    は、結合しないずきに比べお、異な぀た、怜知
    可胜な応答を生ずる怜知系 を含み、そのこずによ぀お、怜知可胜な応答が液
    䜓詊料䞭の配䜍子の存圚の関数である詊薬組成物
    から成る特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析
    玠子。  怜知系が、暙識が関䞎する酵玠化孊反応に
    あずかる特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分
    析玠子。  暙識が、酵玠に察する基質であり、か぀怜
    知系が酵玠を含む特蚱請求の範囲第項蚘茉の
    倚重局分析玠子。  暙識が、酵玠の補欠分子族で、怜知系が配
    合矀ず䞀緒にな぀お該酵玠を圢成するアポ酵玠を
    含む特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠
    子。  怜知系が、曎に、酵玠掻性の指瀺薬を含む
    特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  暙識が、フラビンアデニンゞヌクレオチド
    で、アポ酵玠がアポグルコヌスオキシダヌれであ
    る特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠
    子。  怜知系が、曎に、グルコヌスオキシダヌれ
    掻性の指瀺薬を含む特蚱請求の範囲第項蚘茉
    の倚重局分析玠子。  指瀺薬が、グルコヌス、ペルオキシダヌ
    れ、及び過酞化氎玠に察し呈色反応する物質を含
    む特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠
    子。  暙識が、酵玠であ぀お、か぀怜知系が酵玠
    掻性の指瀺薬を含む特蚱請求の範囲第項蚘茉
    の倚重局分析玠子。  詊薬局が、 (a) 詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結合する胜力の
    存圚の関数である怜知可胜な応答を生ずる均䞀
    系特異的結合性分析系甚の詊薬及び (b) 詊薬を包含した固䜓の担䜓から成り、 茻射線散乱・遮ぞい局が、無氎物暹脂に包含され
    た顔料から成぀おいお、該局が (a) 詊薬局ず支持局の間に介圚せしめられ (b) 配䜍子、詊薬局の詊薬、及びそれらの盞互反
    応の生成物に察しお䞍透過性で䞊びに (c) 配䜍子、詊薬局の詊薬及びそれらの盞互反応
    の生成物に察しお䞍掻性である 特蚱請求の範囲第項蚘茉の倚重局分析玠子。  詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結合する胜力
    に応答しお怜知可胜な応答を䞎える詊薬を包含し
    た詊薬局、茻射線散乱・遮ぞい局及び支持局を有
    する型の、液䜓詊料䞭の配䜍子又は配䜍子に結合
    する胜力を怜知するための倚重局分析玠子の補造
    方法であ぀お、その方法が、 (1) 支持局の衚面を、 (a) 配䜍子、詊薬局の詊薬及びそれらの盞互反
    応の生成物に察しお、䞍透過性であり、そし
    お、 (b) 配䜍子、詊薬局の詊薬、及びそれらの盞互
    反応の生成物に察しお䞍掻性である 茻射線散乱・遮ぞい局の衚面に固着する工皋、 (2) ぀いで、該詊薬局の衚面を茻射線散乱・遮ぞ
    い局の反察偎の面に固着する工皋から成る こずを特城ずする方法。
JP11667682A 1981-07-06 1982-07-05 䞍透過性の茻射線散乱・遮ぞい局を有する倚重局分析玠子 Granted JPS5817365A (ja)

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