JPS6384478A - 細胞融合チヤンパ - Google Patents
細胞融合チヤンパInfo
- Publication number
- JPS6384478A JPS6384478A JP61228975A JP22897586A JPS6384478A JP S6384478 A JPS6384478 A JP S6384478A JP 61228975 A JP61228975 A JP 61228975A JP 22897586 A JP22897586 A JP 22897586A JP S6384478 A JPS6384478 A JP S6384478A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cells
- electrodes
- chamber
- cell
- fusion chamber
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Electromagnetism (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（イ）産業上の利用分野
本発明は、二種類の細胞を電気刺激を利用して融合させ
る細胞融合チャンバに関する。
る細胞融合チャンバに関する。
呻）従来技術
電気刺激を用いて細胞を融合させる場合、１対の対向し
た電極を有したｍ胞融合チャンバに細胞懸濁液を入れ、
電極間でＡＣ電界を印加する。これにより細胞懸濁液中
に浮遊している細胞同士全密着させ、この状態でＤＣ’
［界を印加して細胞を融合させる。
た電極を有したｍ胞融合チャンバに細胞懸濁液を入れ、
電極間でＡＣ電界を印加する。これにより細胞懸濁液中
に浮遊している細胞同士全密着させ、この状態でＤＣ’
［界を印加して細胞を融合させる。
ｅ１発明が解決しようとする問題点
従来のチャンバで融合した細胞は、チャンバ内にランダ
ムに点在していた。従って、融合細胞をチャンバから取
り出し培養装置に移すニハ、マイクロマニピュレータ等
の細胞取得装置を用いて融合細胞を集める必要がある。
ムに点在していた。従って、融合細胞をチャンバから取
り出し培養装置に移すニハ、マイクロマニピュレータ等
の細胞取得装置を用いて融合細胞を集める必要がある。
しかもこの場合、全ての細胞金拾うには多大な労力と時
間を要し、また、細胞を傷つけないために細心の注意が
必要であった。
間を要し、また、細胞を傷つけないために細心の注意が
必要であった。
このことは、融合細胞の培養を行う上で一つのネックと
なっていた。
なっていた。
に）問題点全解決するための手段
本発明は、互いに対向する一対の電極をチャンバ空間に
対して十分細長くつくることにより電極付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるように構成すると共に、電気力
線の密度勾配の大きいところに隔膜を設置する。
対して十分細長くつくることにより電極付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるように構成すると共に、電気力
線の密度勾配の大きいところに隔膜を設置する。
隔膜としては細胞全付着しやすい七μロース膜または細
胞との親和性を増す加工を施した合成繊維膜で構成する
。
胞との親和性を増す加工を施した合成繊維膜で構成する
。
（ト）作 用
本発明は゛、！気力線の密度勾配が十分発生している電
極間に隔膜が位置し隔膜上に細胞全開き寄せ隔膜上で融
合が起こる。そして融合させた細胞が付着している隔膜
全チャンバから取υ出す。
極間に隔膜が位置し隔膜上に細胞全開き寄せ隔膜上で融
合が起こる。そして融合させた細胞が付着している隔膜
全チャンバから取υ出す。
（へ）実施例
本発明ｔ−実施例に基づいて説明する。第１図（ａ）が
本発明に係るチャンバの概略図、第１図（ｂＪが第１図
（ａ）のＡ−Ａ断面図である。
本発明に係るチャンバの概略図、第１図（ｂＪが第１図
（ａ）のＡ−Ａ断面図である。
融合チャンバＣは電極１と電極２が対応してチャンバ本
体４に設けられており、各々の電極からは接続端子５が
出ている。チャンバ本電極１．２は電極付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるよプにチャンバ空間に対して十
分細長く構成されている。このような電極としてはワイ
ヤ電極が考えられる。そして電極１．２付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるところにａ胞の径よりも小さな
細孔全有し頃 た暑１導の隔膜３，３′を着脱自在に設けてあＣ電界発
生器（内示せず）でＡＣ電界全電極間に加える。ＡＣ電
界が加わると電気力ｆｌｌ！は電極１．２の付近が最大
となるので細胞は峙つ密度の高い方、すなわち電極の方
に引き寄せられる。電極１．２の方に引き寄せられた細
胞は隔膜３．３′があるためにここに付着し。
体４に設けられており、各々の電極からは接続端子５が
出ている。チャンバ本電極１．２は電極付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるよプにチャンバ空間に対して十
分細長く構成されている。このような電極としてはワイ
ヤ電極が考えられる。そして電極１．２付近で電気力線
の密度勾配が大きくなるところにａ胞の径よりも小さな
細孔全有し頃 た暑１導の隔膜３，３′を着脱自在に設けてあＣ電界発
生器（内示せず）でＡＣ電界全電極間に加える。ＡＣ電
界が加わると電気力ｆｌｌ！は電極１．２の付近が最大
となるので細胞は峙つ密度の高い方、すなわち電極の方
に引き寄せられる。電極１．２の方に引き寄せられた細
胞は隔膜３．３′があるためにここに付着し。
固定される。この時の状態図を第２図に示す。
７が細胞、８が電気力線である。
このようにしてしばら（ＡＣＣ電界発生器ると細胞の上
に細胞が付着しベアリングを起こす０ ベアリングが起きた時点でもＤＣ−ＡＣ切換スイッチ（
図示せず）全Ｄｃパルス発生器（図示せず）の方に切換
えＤＣパルス（例えば植物細胞では１，５ｋＶ／Ｃｍ、
３０μｓ）を印加する。
に細胞が付着しベアリングを起こす０ ベアリングが起きた時点でもＤＣ−ＡＣ切換スイッチ（
図示せず）全Ｄｃパルス発生器（図示せず）の方に切換
えＤＣパルス（例えば植物細胞では１，５ｋＶ／Ｃｍ、
３０μｓ）を印加する。
細胞にＤＣパルスが印加されると隔膜３．３′の上で細
胞同士が融合を引きおこす。
胞同士が融合を引きおこす。
隔膜３．３′上で細胞が融合すると、その隔膜３．３′
をチャンバＣから取り出し、培養装置（図示せず）に移
す。
をチャンバＣから取り出し、培養装置（図示せず）に移
す。
なお１以上の説明では、異種の細胞Ａ種、Ｂ種をともに
懸濁して融合させる方法を述べているが、まずＡｍ胞だ
け全チャンバに入れＡＣ電界を印加し、隔膜にＡｉ胞を
付着させる。
懸濁して融合させる方法を述べているが、まずＡｍ胞だ
け全チャンバに入れＡＣ電界を印加し、隔膜にＡｉ胞を
付着させる。
そして、へ細胞がすべて付着した段階でＢ細胞をチャン
バに入れる。するとＡ細胞の上にＢ細胞が付着すること
となり、この状態でＤ２を印加するとＡとＢ細胞が融合
する こととなりハイプリドーマ（雑種細胞）が効率よく作る
ことができる。
バに入れる。するとＡ細胞の上にＢ細胞が付着すること
となり、この状態でＤ２を印加するとＡとＢ細胞が融合
する こととなりハイプリドーマ（雑種細胞）が効率よく作る
ことができる。
（ハ）効 果
本発明は隔膜上で細胞を融合させているので。
隔膜ごと培養装置に移すことにより、マイクロマニュピ
レータを用いて細胞ヲ一つずつ拾う手間かはふける。
レータを用いて細胞ヲ一つずつ拾う手間かはふける。
また０機械的操作を細胞に対して行わないため細胞金偏
つけず、そのため後での生育の活性が高くなる。
つけず、そのため後での生育の活性が高くなる。
更に、！合しなかった細胞は隔膜を取出した時にチャン
バに残るので取出した全細胞中の融合細胞数の確率が上
がる。
バに残るので取出した全細胞中の融合細胞数の確率が上
がる。
第１図（ａＪが本発明に係るチャンバの概略図、第１図
（ｂ）が第１図（ａ）のイーイ断面図、第２因が本発明
の作用図である。
（ｂ）が第１図（ａ）のイーイ断面図、第２因が本発明
の作用図である。
Claims (2)
- （１）互いに対向する一対の電極を備え、これらの電極
間に収容された細胞懸濁液に電気刺激を与えて細胞を融
合させる細胞融合チャンバにおいて、前記一対の電極を
チャンバ空間に対して十分細長くつくることにより電極
付近で電気力線の密度勾配が大きくなるように構成する
と共に、電気力線の密度勾配の大きいところに隔膜を設
けたことを特徴とする細胞融合チャンバ。 - （２）隔膜が細胞を付着しやすいセルロース膜または細
胞との親和性を増す加工を施した合成繊維膜からなる特
許請求の範囲第１項記載の細胞融合チャンバ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61228975A JPS6384478A (ja) | 1986-09-26 | 1986-09-26 | 細胞融合チヤンパ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61228975A JPS6384478A (ja) | 1986-09-26 | 1986-09-26 | 細胞融合チヤンパ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6384478A true JPS6384478A (ja) | 1988-04-15 |
Family
ID=16884803
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61228975A Pending JPS6384478A (ja) | 1986-09-26 | 1986-09-26 | 細胞融合チヤンパ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6384478A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993002178A1 (en) * | 1991-07-22 | 1993-02-04 | Schmukler Robert E | Apparatus and methods for electroporation and electrofusion |
| WO2002049669A3 (en) * | 2000-12-21 | 2003-07-24 | Medtronic Inc | Electrically responsive promoter system |
| JP2007296510A (ja) * | 2006-04-03 | 2007-11-15 | Tosoh Corp | 微粒子操作装置及び微粒子操作方法 |
-
1986
- 1986-09-26 JP JP61228975A patent/JPS6384478A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1993002178A1 (en) * | 1991-07-22 | 1993-02-04 | Schmukler Robert E | Apparatus and methods for electroporation and electrofusion |
| WO2002049669A3 (en) * | 2000-12-21 | 2003-07-24 | Medtronic Inc | Electrically responsive promoter system |
| JP2007296510A (ja) * | 2006-04-03 | 2007-11-15 | Tosoh Corp | 微粒子操作装置及び微粒子操作方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sebastian et al. | Tissue engineering with electric fields: Immobilization of mammalian cells in multilayer aggregates using dielectrophoresis | |
| US6916656B2 (en) | Non-linear amplitude dielectrophoresis waveform for cell fusion | |
| DK0858689T3 (da) | System til udligning af ladningsniveauet i batterier | |
| US6221665B1 (en) | Electrofusion chamber | |
| Zimmermann et al. | Fusion of Avena sativa mesophyll cell protoplasts by electrical breakdown | |
| Juang et al. | Increased spontaneous transmitter release from presynaptic nerve terminal by methylmercuric chloride | |
| JPS6384478A (ja) | 細胞融合チヤンパ | |
| Vienken et al. | Electrofusion of myeloma cells on the single cell level: Fusion under sterile conditions without proteolytic enzyme treatment | |
| WO2017030272A1 (ko) | 진동을 이용한 전지셀 제조용 가스 트랩 제거 장치 | |
| US4971910A (en) | Magnetic device for the fusion of cells | |
| Saunders et al. | Behavior and viability of tobacco protoplasts in response to electrofusion parameters | |
| JPS6384477A (ja) | 細胞融合チヤンパ | |
| FI871829A7 (fi) | Nestemäisen soluviljelyväliaineen kalvosuodatusmenetelmä, jossa käytetään varattuja partikkeleita | |
| JPS6384491A (ja) | 細胞融合方法 | |
| Cartledge et al. | Subcellular fractionation of particles containing acid hydrolases from Saccharomyces carlsbergensis | |
| NO871734D0 (no) | Fremgangsmaate til immobilisering av forankringsavhengige celler. | |
| JPS63230070A (ja) | 細胞融合チヤンバ | |
| JP2006197872A (ja) | 電気穿孔法および電気穿孔用キュベット | |
| JPS63214185A (ja) | 接着性細胞の電気融合方法 | |
| SU1324292A1 (ru) | Способ получени соматических гибридных клеток животных | |
| JPS623788A (ja) | 細胞融合の改良法 | |
| JPS63209577A (ja) | 細胞融合チヤンバ | |
| JPH04190781A (ja) | 細胞電気処理チャンバー | |
| Cheong et al. | Influences of electrode geometry and field strength on the fusion and subsequent development of mouse two-cell embryos | |
| JPS60251876A (ja) | 細胞融合装置 |