KR20140141904A

KR20140141904A - 신규한 항암활성을 갖는 사마필린a 유도체 및 이를 함유하는 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20140141904A
Application number: KR1020130063220A
Authority: KR
Inventors: 박형근; 신종헌; 오기봉; 이상국; 홍석창; 하민우; 정명기; 오형찬; 방순호; 김철우
Original assignee: 서울대학교산학협력단
Priority date: 2013-06-03
Filing date: 2013-06-03
Publication date: 2014-12-11

Abstract

본 발명은 암세포 성장억제 효능이 있는 하기 화학식의 신규한 화합물 또는 그의 염에 관한 것이다. 구체적으로 본 발명은 사마필린A 를 선도 물질로 하는 신규한 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 본 발명은 항암 치료에 적용될 수 있을 것으로 기대된다.

Description

신규한 항암활성을 갖는 사마필린A 유도체 및 이를 함유하는 약학적 조성물{New psammapline A derivatives as anticancer agent, and pharamcetuical compositions containing the same}

본 발명은 인간 암세포의 성장억제 효과가 있는 신규한 사마필린A 유도체 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 이를 포함하는 약학적 조성물 등에 관한 것이다.

사마필린A(Psammapline A)는 1987년 3개의 서로 다른 연구 그룹에 의해서 분리 되어 구조가 규명된 해양 천연물로서 브로모티로신 구조를 가진 단량체가 디설파이드 구조로 연결된 중합체 구조를 가지고 있다

(1987) Tetrahedron Lett. 28:3229 / Rodriguez AD et al., (1987) Tetrahedron Lett. 28:4989 / Arabshahi LJ et al., (1987) Org Chem. 52:3584). 사마필린A 는 항균작용(Kim D et al., (1999) Arch Pharm Res. 22:25), 백혈병 세포주 P388의 성장억제작용

(1987) Tetrahedron Lett. 28:3229 / Jung J et al., (1995) J Nat Prod. 58:1722), DNA 토포이소머라제 억제효과(Kim D et al., (1999) Anticancer Res. 19:4085), 히스톤 디아세틸라제 억제효과

(2003) J Org Chem. 38:3688), DNA 기라제 억제효과(Kim D et al., (1999) Arch Pharm Res. 22:25), 파네실 효소 전이제 억제효과(Shin J et al., (2000) Tetrahedron. 56:9071), 루이신 아미노펩티다제 억제효과(Shin J et al., (2000) Tetrahedron. 56:9071), PPAR-감마 활성효과(Mora FD et al., (2006) J Nat Prod. 69:547), 그리고 유방암세포의 성장억제 효과(Mora FD et al., (2006) J Nat Prod. 69:547)가 있는 것으로 보고되어 있다. 최근 서울대학교 약학대학의 신종헌 교수 연구팀은 한반도 남해안에 서식하고 있는 해면동물로부터 사마필린A 를 분리하는데 성공하였고, 사마필린A 의 테트라 메틸화된 유도체가 사마필린A 자체보다 높은 암세포의 성장억제 효과를 나타낸다는 것을 보고하였다. 이는 사마필린A 의 구조변환을 통하여 효능이 우수한 항암제를 개발할 수 있다는 것을 시사한다. 사마필린A 유도체에 대해서는 MRSA항균 효능에 대한 구조활성 연구가 보고되었다(Nicolaou, KC et al., (2001) Chem Eur J. 7:4280 / Nicolaou, KC et al., (2001) Chem Eur J. 7:4296).

본 발명자 등은 항암활성이 있는 물질을 개발하고자, 기존의 사마필린 A를 선도 물질로 하여 구조활성연구를 수행한 결과, 여러 인간 암세포의 성장억제 효과를 나타내는 신규 화합물들을 합성하였다. 따라서, 본 발명의 목적은 암세포주에 성장억제 효능을 나타내는 신규 사마필린 A 유도체를 합성하여 신규 항암제로 제공하는 것이다.

그러나, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.

(1) 하기 화학식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

[Ⅰ]

상기 화학식(I)에서,

X는 수소 또는 탄소수가 1 내지 5인 알킬기,

,

1-나프틸, 2-나프틸, 9-안트라세닐기 이고; X가

일 경우 R₁-R₅는 각각 독립적으로 수소원자, 나이트로기, 할로겐원자, 시안기, 히드록시기, 디메틸아미노기, 메틸설포닐아미드기, 트리플루오르메틸기, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 비닐, 아릴기, 페녹시기, 또는 벤족시기 이며, R₃ 와 R₄는 연합하여 5~7원의 환을 형성할 수 있으며,

Y는 수소원자, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 비닐, 아릴기, 알릴기, 페닐,

페녹시, 벤족시기 또는 벤질기 이며, 또한 페녹시기, 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르메틸기 또는 t-부틸기가 치환될 수 있다.

(2) 제 (1)에 있어서,

R₁-R₅의 어느 하나가 페녹시기 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환(aromatic ring)에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르메틸기 또는 t-부틸기가 치환 된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.

(3) 제(1)에 있어서,

또한, 상기 R₃ 와 R₄ 는 연합하여 5~7원의 환을 형성할 수 있는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.

(4) 제(1) 내지 제(3) 중 어느 하나에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암세포 성장억제제.

(5) 제(1) 내지 제(3) 중 어느 하나에 따른 약제학적 유효량의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 항암치료용 약학적 조성물.

(6) 제(5)에 따른 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암질환 치료 방법.

본 발명에 따른 화합물은 암세포의 성장억제 기능을 통해 항암효과가 있을 것으로 기대된다.

본 발명은 항암활성을 갖는 신규한 사마필린 A유도체 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 제공하고자 한다. 구체적으로, 상기 신규한 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 통해 인간 암세포의 성장억제 유도하는 항암제를 제공하고자 한다. 또한 본 발명은 항암활성을 갖는 신규한 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 암치료용 약학적 조성물을 제공한다. 또한 본 발명은 상기 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암질환의 치료 방법을 제공한다.

항암활성을 갖는 신규한 사마필린 A유도체 화합물은 기존의 사마필린 A를 선도 물질로 하는 유도체로써, 하기의 화학식(I)으로 표시할 수 있다.

화학식(I)

상기 화학식(I)에서,

X는 수소 또는 탄소수가 1 내지 5인 알킬기

,

1-나프틸, 2-나프틸, 9-안트라세닐기 이고; X가

일 경우 R₁-R₅는 각각 독립적으로 수소원소, 나이트로기, 할로겐원소, 시안기, 히드록시기, 디메틸아미노기, 메틸설포닐아미드기, 트리플루오르메틸기, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 비닐, 아릴기, 페녹시기, 또는 벤족시기 이며, R₃ 와 R₄는 연합하여 5~7원의 환을 형성할 수 있으며,

Y는 수소원자, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 비닐, 아릴기, 알릴기, 페닐, 페녹시, 벤족시기 또는 벤질기 이며, 또한 페녹시기, 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르메틸기 또는 t-부틸기가 치환 될 수 있다.

R₁-R₅의 어느 하나가 페녹시기, 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환(aromatic ring)에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르

메틸기 또는 t-부틸기가 치환 될 수 있다.

또한, 상기 R₃ 와 R₄ 는 위와 같은 치환기에서 환으로 연결될 수 있다.

또한, 상기 R₂ 내지 R₅ 는 동일한 또는 다른 치환체로 동시에 치환 될 수 있다.

본 발명의 대표적인 사마필린 유도체 화합물들의 화학구조는 하기 표1과 같다

본 발명의 신규한 화합물은 하기의 반응식들에 도시된 방법에 의해 화학적으로 합성될 수 있다. 그러나, 이는 단지 예시를 들기 위한 것으로서, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.

[반응식1]

화학식(I)의 범위에 속하는 화합물의 일반적 합성 방법은 다음과 같다(반응식 1)(Hong S et al., (2012) Tetrhedron Lett. 53:4209). 치환된 아릴알데히드 형태의 기질을 피페리딘과 초산촉매가 존재하는 벤젠 용매 하에서 에틸 아세토아세테이트(2)와 축합하여 알파, 베타-불포화 에틸 아세토아세테이트(3)를 합성한다.

R은 위 화학식(I)에서 수소 또는 탄소수가 1 내지 5인 알킬기나, 1-나프틸, 2-나프틸, 9-안트라세닐기 이고; X가 페닐일 경우 R₁-R₅는 수소원소, 나이트로기, 할로겐원소, 시안기, 히드록시기, 디메틸아미노기, 메틸설포닐아미드기, 트리플루오르메틸기, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 비닐, 아릴기, 페녹시기, 또는 벤족시기 이다.

화합물 3을 톨루엔 용매하에서 트리부틸틴하이드라이드를 작용시켜 알파위치가 치환된 에틸 아세토아세테이트(4)를 합성한다. 그 후 화합물 4에 에탄올성 에톡사이드 염기 존재하에 부틸니트라이트를 가하여 옥심 화합물 5를 합성한다. 화합물 5를 p-톨루엔설폰산 촉매 존재하에 디히드로피란을 반응시켜 화합물 6을 얻은 후 에탄올 용매하에 1N-KOH 수용액으로 가수분해하여 화합물 7을 합성하였다. 이 후 화합물 7은 디옥산 용매에서 N-히드록시석신이미드와 축합반응하여 화합물 8을 합성한다. 합성된 화합물 8에 트리에틸아민 염기 존재하에 시스타민을 작용시켜 화합물 9를 만들고 이어 1M-HCl 에테르 용액을 산촉매로 이용하는 가수분해 반응을 수행하여 사마필린 A 유도체(10)를 합성한다. 옥심 부분이 치환된 화합물 11의 경우, 화합물 10에 디아조메탄이나 알킬할라이드 등을 염기 조건하에 가하여 합성한다.

본 발명은 항암활성을 갖는 신규한 화학식(I) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 통해 항암제를 제공한다.

또한 본 발명은 항암활성을 갖는 신규한 화학식(I) 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 약제학적으로 허용 가능한 담체, 및 보조제 또는 희석액을 포함하는 항암치료용 약학적 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 약학적 조성물은 암치료에 효과가 있을 것으로 기대된다.

본 발명의 화합물의 약제학적 투여 형태는 이들의 약제학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 다른 약제학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물의 염은 약제학적으로 허용 가능한 염이 바람직하며, 본 발명에 따른 화합물에 무기염기, 유기염기, 무기산, 유기산, 염기성 또는 산성 아미노산을 첨가하는 것과 같은 현재 공지된 방법에 의해서 제조될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함한다. 상기 약제학적으로 허용가능한 담체는 생리식염수, 폴리에틸렌글리콜, 에탄올, 식물성 오일 및 이소프로필미리스테이트 등을 포함할 수 있으며, 이에 한정되지는 않는다.

본 발명의 화합물은 국소 적용을 위해서 연고나 크림으로 제형화 할 수 있고, 일반적인 식염수, 5% 덱스트로스와 같은 수용성 용매 또는 식물성 오일, 합성 지방산 글리세라이드, 고급 지방산 에스테르 또는 프로필렌글리콜과 같은 비수용성 용매에 화합물을 용해시키거나, 현탁시키거나 또는 유화시켜 주사제로 제형화할 수 있다. 본 발명의 제형은 용해제, 등장화제(isotonic agents), 현탁화제, 유화제, 안정화제 및 방부제와 같은 종래의 첨가제를 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직하게는, 본 발명의 화합물을 1일 0.001～100 mg/체중kg으로, 보다 바람직하게는 0.01～30 mg/체중kg으로 투여한다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 여러번 나누어 투여할 수 있다. 약학 조성물에서 본 발명의 화합물은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001～10 중량%, 바람직하게는 0.001～1 중량%의 양으로 존재하여야 한다.

본 발명의 약학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여방법에는 제한이 없으며, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관(intracerbroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

본 발명의 활성 실험예에서는 SM-3, SM-7, SM-18, SM-20화합물이 대장암 및 폐암세포의 성장을 억제시켜 암질환의 치료에 적용될 수 있을 것으로 기대된다. (실시예 25 참조).

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 하기 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

[ 실시예 ]

실시예 1. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3- phenylpropanamide ) ( SM -1) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-1을 얻었다. (총수율: 21%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.26-7.09(m, 10H), 3.90(s, 4H), 3.49(t, J = 6.6Hz, 4H), 2.77(t, J = 6.78Hz, 4H) ppm

실시예 2. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(p-tolyl)propanamide) ( SM -2) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-메틸벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-2을 얻었다. (총수율: 24%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.06(dd, J ₁ = 36.35Hz, J ₂ = 8.04Hz, 8H), 3.85(s, 4H), 3.47(t, J = 6.57Hz, 4H), 2.76(t, J = 6.78Hz, 4H), 2.23(s, 6H) ppm

실시예 3. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4-( tert - butyl ) phenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -3) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-tert-부틸벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-3을 얻었다. (총수율: 28%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.25~7.15(m, 8H), 3.86(s, 4H), 3.47(t, J = 6.6Hz, 4H), 2.76(t, J = 6.96Hz, 4H), 1.25(s, 18H) ppm

실시예 4. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4- fluorophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -4) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-불소벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-4을 얻었다. (총수율: 12%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.29~7.24(m, 4H), 6.96~6.88(m, 4H), 3.87(s, 4H), 3.50(t, J = 6.6Hz, 4H), 2.79(t, J = 6.96Hz, 4H) ppm

실시예 5. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4- chlorophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -5) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-클로로벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-5을 얻었다. (총수율: 27%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.23~7.15(m, 8H), 3.87(s, 4H), 3.49(s, 4H), 2.75(s, 4H),ppm

실시예 6. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4- bromophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -6) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-브로모벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-6을 얻었다. (총수율: 15%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.37~7.33(m, 4H), 7.20~7.16(m, 4H), 3.86(s, 4H), 3.50(t, J = 6.75Hz, 4H), 2.78(t, J = 6.96Hz, 4H) ppm

실시예 7. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(3,4- dichlorophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -7) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 3,4-디클로로벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-7을 얻었다. (총수율: 22%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.40(d, J = 2.01Hz, 2H), 7.35~7.32(m, 2H), 7.21~7.16(m, 2H), 3.87(s, 4H), 3.51(t, J = 6.78Hz, 4H), 2.80(t, J = 6.75Hz, 4H) ppm

실시예 8. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(3,5- dichlorophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -8) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 3,5-디클로로벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-8을 얻었다. (총수율: 19%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.17~7.08(m, 6H), 3.78(s, 4H), 3.43(t, J = 6.78Hz, 4H), 2.73(t, J = 6.78Hz, 4H) ppm

실시예 9. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(2,3,5-trichlorophenyl)propanamide) ( SM -9) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 2,3,5-트리클로로벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-9을 얻었다. (총수율: 20%).

¹H-NMR(400MHz, CD₃OD): δ = 7.42(d, J = 2.44Hz, 2H), 7.05(d, J = 2.36Hz, 2H), 4.01(s, 4H), 3.55(t, J = 6.64Hz, 4H), 2.85(t, J = 6.72Hz, 4H) ppm

실시예 10. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(4-nitrophenyl)propanamide) ( SM -10) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-니트로벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-10을 얻었다. (총수율: 24%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 8.10~8.06(m, 4H), 7.51~7.44(m, 4H), 4.01(s, 4H), 3.51(t, J = 6.6Hz, 4H), 2.81(t, J = 6.78Hz, 4H) ppm

실시예 11. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(4-methoxyphenyl)propanamide) ( SM -11) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-메톡시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-11을 얻었다. (총수율: 24%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.19~7.14(m, 4H), 6.77~6.73(m, 4H), 3.82(s, 4H), 3.70(s, 6H), 3.48(t, J = 6.75Hz, 4H), 2.76(t, J = 6.75Hz, 4H) ppm

실시예 12. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4- ethoxyphenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -12) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-에톡시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-12을 얻었다. (총수율: 21%).

¹H-NMR(300MHz, DMSO-d⁶): δ = 11.79(s, 2H), 8.04(t, J = 5.7Hz, 2H), 6.95(dd, J ₁ = 94.95Hz, J ₂ = 8.4Hz, 8H), 3.94(q, J = 7.2Hz, 4H), 3.73(s, 4H), 3.41(q, J = 6.6Hz, 4H), 2.81(t, J = 7.2Hz, 4H) ppm

실시예 13. ((2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(4-propoxyphenyl)propanamide) ( SM -13) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-프로폭시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-13을 얻었다. (총수율: 20%).

¹H-NMR(300MHz, DMSO-d⁶): δ = 11.78(s, 2H), 8.04(t, J = 5.7Hz, 2H), 6.95(dd, J ₁ = 93.3Hz, J ₂ = 8.4Hz, 8H), 3.85(t, J = 6.6Hz, 4H), 3.73(s, 4H), 3.41(q, J = 6.6Hz, 4H), 2.81(t, J = 7.2Hz, 4H), 1.68(sextet, J = 6.6Hz, 4H), 0.94(t, J = 7.5Hz, 6H) ppm

실시예 14. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4- butoxyphenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -14) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-부톡시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-14을 얻었다. (총수율: 24%).

¹H-NMR(300MHz, DMSO-d⁶): δ = 11.78(s, 2H), 8.04(t, J = 5.7Hz, 2H), 6.95(dd, J ₁ = 93Hz, J ₂ = 8.4Hz, 8H), 3.89(t, J = 6.6Hz, 4H), 3.73(s, 4H), 3.41(q, J = 6.6Hz, 4H), 2.81(t, J = 7.2Hz, 4H), 1.65(quintet, J = 6.3Hz, 4H), 1.40(sextet, J = 7.5Hz, 4H), 0.91(t, J = 7.8Hz, 6H) ppm

실시예 15. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4-( cyclopentyloxy ) phenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -15) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-시클로펜톡시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-15을 얻었다. (총수율: 22%).

¹H-NMR(300MHz, DMSO-d⁶): δ = 11.78(s, 2H), 8.04(t, J = 5.7Hz, 2H), 6.92(dd, J ₁ = 99.15Hz, J ₂ = 8.4Hz, 8H), 4.72(t, J = 6Hz, 4H), 3.72(s, 4H), 3.41(q, J = 6.6Hz, 4H), 2.81(t, J = 7.2Hz, 4H), 1.88~1.82(m, 4H), 1.67~1.50(m, 12H) ppm

실시예 16. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(4-phenoxyphenyl)propanamide) ( SM -17) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-페녹시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-16을 얻었다. (총수율: 16%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 7.31~7.22(m, 8H), 7.07~7.01(m, 2H), 6.92~6.88(m, 4H), 6.84~6.80(m, 4H), 3.88(s, 4H), 3.51(t, J = 6.57Hz, 4H), 2.80(t, J = 6.75Hz, 4H) ppm

실시예 17. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4-( benzyloxy ) phenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -18) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-벤족시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-17을 얻었다. (총수율: 20%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃COCD₃): δ = 10.97(s, 2H), 7.55(t, J = 5.7Hz, 2H), 7.42~7.17(m, 14H), 6.86~6.81(m, 4H), 5.01(s, 4H), 3.81(s, 4H), 3.51(q, J = 6.6Hz, 4H), 2.82(t, J = 6.9Hz, 4H) ppm

실시예 18. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4-( benzyloxy )-3- chlorophenyl )-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -19) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 3-클로로-4-벤족시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-18을 얻었다. (총수율: 16%).

¹H-NMR(300MHz, CDCl₃): δ = 10.14(s, 2H), 7.30~7.01(m, 14H), 6.72~6.65(m, 2H), 4.89(s, 4H), 3.75(s, 4H), 3.42(s, 4H), 2.57(s, 4H) ppm

실시예 19. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(naphthalen-2-yl)propanamide) ( SM -20) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 2-나프틸알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-19을 얻었다. (총수율: 32%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD) : δ = 7.73-7.67(m, 8H), 7.42-7.30(m, 6H), 4.07(s, 4H), 3.41(q, J = 6.39Hz, 4H), 2.70(t, J = 6.78Hz, 4H) ppm

실시예 20 (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-( hydroxyimino )-3-(naphthalen-1-yl)propanamide) ( SM -21) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 1-나프틸알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-20을 얻었다. (총수율: 28%).

¹H-NMR(300MHz, CD₃OD): δ = 8.08(d, J = 8.04Hz, 2H), 7.69(d, J = 7.68Hz, 2H), 7.56(dd, J ₁ = 7.32Hz, J ₂ = 1.83Hz, 2H), 7.40~7.29(m, 4H), 7.23~7.15(m, 4H), 4.24(s, 4H), 3.30(t, J = 6.78Hz, 4H), 2.57(t, J = 6.78Hz, 4H) ppm

실시예 21. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(anthracen-9-yl)-2-(hydroxyimino)propanamide) ( SM -22) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 9-안트라세닐알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-21을 얻었다. (총수율: 23%).

¹H-NMR(300MHz, pyridine-d⁵): δ = 14.41(s, 2H), 8.98(d, J = 8.79Hz, 4H), 8.82(t, J = 5.67Hz, 2H), 8.42(s, 2H), 8.01(d, J = 8.4Hz, 4H), 7.60~7.53(m, 4H), 7.46~7.41(m, 4H), 5.34(s, 4H), 3.36(q, J = 6.24Hz, 4H), 2.50(t, J = 6.39Hz, 4H) ppm

실시예 22. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (3-(4-( benzyloxy ) phenyl )-2-(methoxyimino)propanamide) ( SM -23) 제조방법

상기 반응식 1의 방법에 따라 4-벤족시벤즈알데히드를 출발물질로 사용하여 SM-17을 얻은 후, 톨루엔-에탄올(5:2) 용매하에 과량의 디아조메탄을 작용시켜 SM-22을 얻었다. (총수율: 12%).

¹H-NMR(300MHz, CDCl₃): δ = 7.34~7.20(m, 10H), 7.13(d, J = 8.58Hz, 4H), 6.98(t, J = 5.85Hz, 2H), 6.78(d, J = 8.61Hz, 4H), 4.92(s, 4H), 3.90(s, 6H), 3.76(s, 4H), 3.52(q, J = 6.21Hz, 4H), 2.71(t, J = 6.39Hz, 4H) ppm

실시예 23. (2E,2'E)-N, N' -( disulfanediylbis ( ethane -2,1- diyl )) bis (2-(methoxyimino)-3-(4-methoxyphenyl)propanamide) ( SM -24) 제조방법

상기 실시예 1과 같은 방법으로 4-메톡시벤질아민을 출발물질로 사용하여 SM-11을 얻은 후, 톨루엔-에탄올(5:2) 용매하에 과량의 디아조메탄을 작용시켜 SM-23를 얻었다. (총수율: 8%).

¹H-NMR(300MHz, CDCl₃): δ = 7.19(d, J = 8.61Hz, 4H), 7.04(t, J = 6.06Hz, 2H), 6.79~6.74(m, 4H), 6.72~6.65(m, 2H), 3.96(s, 6H), 3.82(s, 4H), 3.73(s, 6H), 3.58(q, J = 6.21Hz, 4H), 2.78(t, J = 6.42Hz, 4H) ppm

실시예 25. 사마필린 A 유도체 화합물의 시험관 내에서 사람 폐암와 대장암 세포주에 대한 성장 억제 효능 측정

상기 실시예 1-24에서 얻은 시료의 시험관 내에서의 사람 폐암 및 대장암 세포주에 대한 성장 억제 효능을 확인하기 위하여 문헌에 기재된 방법을 응용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다. (Lee SK et al (2008)Chem Biol Interact 115:215-28). 사람 폐암 세포주 A549와 대장암 세포주HCT116은 미국 세포주 은행 (ATCC, Manassas, VA, USA)에서 분양 받았다.

A549, HCT116 세포는 열에 의해 불활성화된 10% 소태아혈청 (Fetal Bovine Serum, FBS, 100 units/mL 페니실린 (penicillin), 100 μg/mL 스트렙토마이신 (streptomycin)과 250 ng/mL 암포테리신 비 (amphotericin B)가 포함되어 있는 로즈웰 파크 메모리얼 연구소 배지 1640 (Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 배지 (medium) 1640, RPMI 1640)을 이용하여 37°C, 5% CO₂조건에서 1 주일에 1 ~ 2회 계대 배양하였다. 모든 세포는 액체질소로부터 녹인 다음 3회 이상 계대를 거치고 나서 실험에 이용하였다.

상기 실시예 1과 2에서 수득한 화합물들의 세포 성장에 미치는 영향을 술포로다민 B (sulforhodamine B: SRB)법으로 측정하였다 (Lee et al (1998) Chemico-Biol Interact 115:215-228).

자세하게는 본 발명에 이용된 사람의 폐암 및 대장암 세포주를 10% FBS, 1% PSF 등을 함유한 RPMI 배지에서 계대 배양하였으며 96-웰 플레이트의 각 웰에 10% DMSO에 녹아있는 시료 10 ㎕와 상기 세포현탁액 190 ㎕ (5 x 10⁴ cells/ml) 넣고 3일간 배양하였다. 적어도 16 웰에 상기 세포현탁액 190 ㎕를 넣고 30분간 배양하여 실험 전의 음성대조 (zero-day control)로 사용하였다. 배양한 세포를 10% TCA (trichloroacetic acid)로 고정시킨 후 SRB 용액으로 염색하고, 10 mM 트리스 베이스 (Tris-base)로 염색액을 용해시킨 다음 515 nm에서 흡광도를 측정하였다. 10% DMSO에서 배양한 경우를 대조군으로 하여 각 시험 물질처리에 따른 세포 생존율을 하기 수학식 1을 이용하여 측정하였다.

[수학식 1]

% 생존율 = (OD(sample) - OD(0-day))/ (OD(10% DMSO) - OD(0-day)) X 100

시료를 처리하지 않은 대조군을 100%로 하였을 때 시료 처리군의 값을 대조군에 대한 백분율로 나타내었으며, 각 시험물질 처리는 이중 혹은 삼중 시험의 평균값 ± SEM으로 구하였다. IC₅₀ 값은 50% 생존율에 대한 시험 물질의 농도이다. 실시예 1과 2에서 수득한 화합물들의 폐암 및 대장암 세포주에 미치는 영향을 표 2 에 나타내었다.

본 실험 결과, 표 2에서 나타난 바와 같이, 사마필린A유도체 화합물들 중 SM-3, SM-7, SM-12, SM-17, SM-18, SM-19은 사마필린 A자체 보다 2-3배의 암세포 성장억제 활성을 보였고, 특히 대조 화합물 엘립티신 (Ellipticine) 과 동등한 억제활성을 나타내는 것으로 관찰되었다.

화합물	A549-LC₅₀ (mM)	HCT166-LC₅₀ (mM)
Ellipticine	2.38	0.91
사마필린A	4.56	6.54
SM-1	6.55	6.22
SM-2	6.09	5.63
SM-3	1.78	1.67
SM-4	3.50	3.78
SM-5	2.58	2.03
SM-6	5.89	7.24
SM-7	1.60	1.46
SM-8	2.28	2.11
SM-9	5.09	4.24
SM-10	2.66	1.80
SM-11	2.81	4.39
SM-12	1.37	1.61
SM-13	13.48	15.54
SM-14	41.13	23.75
SM-15	1.40	5.34
SM-16	>100	20.35
SM-17	1.12	1.57
SM-18	1.63	1.07
SM-19	1.20	1.30
SM-20	>100	>100
SM-21	>100	>100
SM-22	>100	>100
SM-23	>100	>100

Claims

하기 화학식(I)으로 표시되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염:

[Ⅰ]
상기 화학식(I)에서,
X는 수소 또는 탄소수가 1 내지 5인 알킬기,
,
1-나프틸, 2-나프틸, 9-안트라세닐기 이고; X가

일 경우 R₁-R₅는 각각 독립적으로 수소원자, 나이트로기, 할로겐원자, 시안기, 히드록시기, 디메틸아미노기, 메틸설포닐아미드기, 트리플루오르메틸기, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 비닐, 아릴기, 페녹시기, 또는 벤족시기 이며, R₃ 와 R₄는 연합하여 5~7원의 환을 형성할 수 있으며,
Y는 수소원자, 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 비닐, 아릴기, 알릴기, 페닐,
페녹시, 벤족시기 또는 벤질기 이며, 또한 페녹시기, 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르메틸기 또는 t-부틸기가 치환될 수 있다.
제1항에 있어서,
R₁-R₅의 어느 하나가 페녹시기 또는 벤족시기일 경우, 방향족 환(aromatic ring)에 탄소수가 1 내지 3인 알킬기, 탄소수가 1 내지 3인 알콕시기, 할로겐원소, 트리플루오르메틸기 또는 t-부틸기가 치환 된 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항에 있어서,
또한, 상기 R₃ 와 R₄ 는 연합하여 5~7원의 환을 형성할 수 있는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 암세포 성장억제제.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 약제학적 유효량의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 항암치료용 약학적 조성물.
제5항에 따른 약학적 조성물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는 암질환 치료 방법.