KR20200035093A - 질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법 - Google Patents

질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20200035093A
KR20200035093A KR1020207005649A KR20207005649A KR20200035093A KR 20200035093 A KR20200035093 A KR 20200035093A KR 1020207005649 A KR1020207005649 A KR 1020207005649A KR 20207005649 A KR20207005649 A KR 20207005649A KR 20200035093 A KR20200035093 A KR 20200035093A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
ser
val
leu
thr
pro
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
KR1020207005649A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102560646B1 (ko
Inventor
차오-시앙 우
Original Assignee
암젠 인크
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 암젠 인크 filed Critical 암젠 인크
Publication of KR20200035093A publication Critical patent/KR20200035093A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102560646B1 publication Critical patent/KR102560646B1/ko
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins
    • G01N33/6848—Methods of protein analysis involving mass spectrometry
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/34—Purifying; Cleaning
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N2001/002—Devices for supplying or distributing samples to an analysing apparatus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/38—Diluting, dispersing or mixing samples
    • G01N2001/385—Diluting, dispersing or mixing samples diluting by adsorbing a fraction of the sample

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

실질적으로 실시간으로 샘플의 분석 수행을 용이하게 하는 시스템 및 방법. 따라서, 종래의 시스템 및 방법에 의해 허용되는 것보다 훨씬 더 신속하게 분석을 수행하고 원하는 결과를 획득할 수 있다.

Description

질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법
[관련 출원에 대한 상호 참조]
본 출원은 "샘플의 실시간 분석을 수행하기 위한 시스템 및 방법(Systems and Methods for Performing a Real-Time Assay of a Sample)"이라는 명칭으로 2017년 8월 1일 출원된 미국 가특허출원 제62/539,803호의 우선권 이익을 주장하며, 위의 가특허출원의 전체 개시 내용은 본 명세서에 참조로 포함된다.
[기술분야]
본 개시는 일반적으로 분석법, 더욱 구체적으로는 샘플의 실시간 분석을 수행하기 위한 분석법에 관한 것이다.
[서열 목록]
본 출원은 전자적 형식의 서열 목록과 함께 출원 중이다. 서열 목록은 파일명 "51800_Seqlisting.txt"로서 제공되며, 2018년 7월 31일자로 생성되었고 크기는 263,964바이트이다. 서열 목록의 전자적 형식에서의 정보는 그 전체가 본 명세서에 참조로 포함된다.
분석은 일반적으로 분석물, 예컨대 약물, 생화학 물질, 또는 세포의 한 가지 이상의 특성을 정량화하기 위하여 수행된다. 이러한 분석의 예는 다중 특성 방법(multi-attribute method, MAM) 분석으로, 이는 샘플의, 제품 품질 목표 사항(Quality Target Product Profile, QTPP)에 의해 확인된 주요 품질 특성(Critical Quality Attributes, CQA)을 검출하고 정량화할 수 있다(Development of a quantitative mass spectrometry multi-attribute method for characterization, quality control testing and disposition of biologics. Rogers RS, Nightlinger NS, Livingston B, Campbell P, Bailey R, Balland A. MAbs. 2015; 7(5): 881-90). MAM 분석은 예를 들어, 거대 분자 방출 검사(Large Molecule Release Testing, LMRT) 실험실에서 수행되는 수동으로 작동되는 공정이다. MAM은 다음의 세 단계를 포함하는, 액체 크로마토그래피(LC) - 질량 분광분석법(MS) 기반의 펩티드 매핑 방법이다: (1) 샘플 준비(예컨대 폴리펩티드 변성, 환원, 알킬화, 및 소화); (2) LC에 의한 소화된 폴리펩티드의 분리 및 MS에 의한 검출; 및 (3) 목표로 한 CQA에 대한 데이터 분석 및 기준 표준물질과 비교하여 새로운 신호(즉, 피크)의 검출.
CQA는 특정 값 또는 범위 값 내에 존재하는 화학적, 물리적, 또는 생물학적 특성이다. 예를 들어, 거대 폴리펩티드 치료 분자의 경우, 아미노산(폴리펩티드의 빌딩 블록)의 물리적 특성 및 변경은 제조 중 및 제조 후뿐만 아니라, 약물 개발 중에도 모니터링되는 중요한 CQA이다. 전체 또는 부분 폴리펩티드의 피크 크기와 피크 형상의 변화를 추적하는 통상적인 분석법과 달리, MAM은 아미노산 수준에서 특정 CQA를 검출한다.
그러나 MAM은 개발, 제조, 및 (예컨대, 안정성을 평가하는) 저장하는 동안 폴리펩티드 치료 분자의 CQA의 평가에 있어서 중요한 발전이지만, 분석은 비용을 증가시키고 개발 및 약물 방출을 지연시키는 시간인 샘플 준비에서 최종 분석에 이르기까지 7일 내지 10일을 소요할 수 있다. 예를 들어, 폴리펩티드 치료제는 관습적으로 표적 폴리펩티드를 발현하는 배양된 세포에 의해 생산된다. 이러한 생산 시스템은 CQA의 MAM 분석을 기다리는 동안 용이하게 "유지"되지 않으므로, 시간, 재료 및 인력 낭비와 같은 사양을 충족하지 않는 CQA의 표적 폴리펩티드를 생산하는 세포를 초래한다. 나아가, 7일 내지 10일의 지연은 약물을 개발하는 동안, 예를 들어, 배양 조건을 최적화할 때, 누적되어, 중요하고 새로운 폴리펩티드 약제를 환자에게 전달하는 것을 방해한다. 따라서, MAM을 사용하여 CQA 분석을 용이하게 하기 위하여 효율적이고 더 신속한 방법이 필요하다.
본 개시의 일 양태는 실시간 분석을 수행하는 방법을 제공한다. 방법은 다음 단계를 포함한다: (a) 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일(holding coil)을 통해 폴리펩티드 결합 컬럼으로 이동시키는 단계; (b) 샘플의 폴리펩티드를 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합시켜, 샘플의 폴리펩티드를 샘플의 나머지로부터 분리하는 단계; (c) 제1 지지 코일을 통해, 완충제 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼으로 이동시켜, 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류의 제2 지지 코일을 통해, 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 폴리펩티드를 용리시키고, 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 제2 지지 코일로 이동시키는 단계; (d) 용리/폴리펩티드 혼합물을 제2 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시키는 단계; (e) 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드를 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성된 폴리펩티드를 생성하는 단계; (f) (e) 후에 제1 지지 코일을 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계; (g) 변성된 폴리펩티드를 환원 시약과 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성 및 환원된 폴리펩티드를 생성하는 단계; (h) (g) 후에 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계; (i) 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화 시약과 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화하는 단계; (j) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일을 통해 반응 챔버로부터 단백질 가수분해 완충제로 평형화된 탈염 컬럼으로 이동시키는 단계; (k) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 탈염 컬럼에 적용하여, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 환원 시약 및 알킬화 시약으로부터 분리하여 탈염된 폴리펩티드를 생성하는 단계; (l) 탈염된 폴리펩티드를 탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시키는 단계; (m) 제3 폴리펩티드 컬럼에서 탈염된 폴리펩티드를 소화시켜, 소화된 폴리펩티드를 생성하는 단계; 및 (n) 소화된 폴리펩티드를 소화된 폴리펩티드 분석을 위한 분석 장치로 이동시키는 단계.
본 개시의 또 다른 양태는 다중 포트 밸브, 다중 포트 밸브 상류의 제1 지지 코일, 다중 포트 밸브의 제1 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제1 포트 하류의 폴리펩티드 결합 컬럼, 폴리펩티드 결합 컬럼에 유동적으로 연결된, 폴리펩티드 결합 컬럼 하류의 제2 지지 코일, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트 하류의 반응 챔버, 다중 포트 밸브의 제4 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제4 포트 하류의 탈염 컬럼, 및 탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼을 포함하는 폐쇄 시스템을 이용하는, 실시간 분석을 수행하는 방법을 제공한다. 방법은 다음 단계를 포함한다: (a) 폐쇄 시스템에 통신으로 연결된 제어기를 통해 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일로 이동시키는 단계; (b) 제어기를 통해, 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼에 연결되는 제1 위치로 다중 포트 밸브를 위치시켜, 샘플이 제1 컬럼으로 흘러 샘플의 폴리펩티드가 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합하는 단계; (c) 다중 포트 밸브가 제1 위치에 있을 때, 제어기를 통해, 용리 완충액 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼을 통해 제2 지지 코일로 이동시켜, 용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키는 단계; (d) 제어기를 통해, 제2 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제2 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키는 단계; (e) 다중 포트 밸브가 제2 위치에 있을 때, 제어기를 통해, 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 반응 챔버로 이동시켜, 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드가 변성되는 단계; (f) 제어기를 통해, 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제3 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키는 단계; (g) (f) 후에, 제어기를 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 제어기를 통해 환원 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성된 폴리펩티드를 환원시키는 단계; (h) (g) 후에, 제어기를 통해 술프하이드릴 기를 알킬화하는 알킬화 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 제어기를 통해 알킬화제를 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화하는 단계; (i) 제어기를 통해 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제3 포트를 통해 반응 챔버로부터 제1 지지 코일로 이동시키는 단계; (j) 제어기를 통해 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제4 포트를 통해 탈염 컬럼으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키고, 다중 포트 밸브가 제4 위치에 있을 때, 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일로부터 탈염 컬럼으로 이동시켜, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 탈염 컬럼에 적용되어, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 환원 시약 및 알킬화 시약으로부터 분리하여, 탈염된 폴리펩티드를 생성하는 단계; (k) 제어기를 통해 탈염된 폴리펩티드를 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시켜, 탈염된 폴리펩티드가 소화되는 단계; 및 (l) 제어기를 통해 소화된 폴리펩티드를 분석 장치로 전달하여, 소화된 폴리펩티드가 분석되는 단계.
본 개시의 또 다른 양태는 온라인, 실시간 분석을 수행하기 위한 폐쇄 시스템을 제공한다. 시스템은 다음을 포함한다: 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 수용하도록 유동적으로 배열된 제1 지지 코일; 제1 지지 코일에 유동적으로 연결되고 제1 지지 코일 하류에 위치된 다중 포트 밸브; 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 샘플을 수용하도록 배열된 폴리펩티드 결합 컬럼으로, 샘플로부터 폴리펩티드를 결합하도록 구성된 폴리펩티드 결합 컬럼; 용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼으로부터 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키도록, 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류에 위치된 제2 지지 코일에 용리 완충액을 공급하도록 배열된 완충제 공급원; 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼으로부터 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 혼합물을 수용하도록, 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류에 배열된 반응 챔버로서, 혼합물의 폴리펩티드는 반응 챔버에서 변성되고, 반응 챔버는 제1 지지 코일 및 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 수용하도록 배열되며, 환원 시약은 변성된 폴리펩티드를 환원시키고, 반응 챔버는 제1 지지 코일 및 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 수용하도록 추가 배열되며, 알킬화 시약은 변성 및 환원된 폴리펩티드를 반응 챔버에서 알킬화하는 것인, 반응 챔버; 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 반응 챔버로부터 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 및 알킬화 시약을 수용하도록 배열된 탈염 컬럼으로, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약으로부터 분리하도록 구성된 탈염 컬럼; 및 탈염 컬럼으로부터 분리된 폴리펩티드를 수득하도록 제2 폴리펩티드 컬럼에 유동적으로 연결되고 제2 폴리펩티드 컬럼 하류에 배열된 단백질 가수분해 효소 컬럼으로, 탈염된 폴리펩티드를 소화하도록 구성된 단백질 가수분해 효소 컬럼.
본 개시의 또 다른 양태는 실시간 분석을 수행하기 위한 폐쇄 시스템을 제공한다. 시스템은 다중 포트 밸브; 다중 포트 밸브 상류의 제1 지지 코일; 다중 포트 밸브의 제1 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제1 포트 하류의 폴리펩티드 결합 컬럼; 폴리펩티드 결합 컬럼에 유동적으로 연결된, 폴리펩티드 결합 컬럼 하류의 제2 지지 코일; 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트 하류의 반응 챔버; 다중 포트 밸브의 제4 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제4 포트 하류의 탈염 컬럼; 탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼; 및 다중 포트 밸브에 통신으로 연결된 제어기를 포함한다. 제어기는 메모리, 프로세서, 및 메모리에 저장되고 프로세서에 의해 실행 가능한 로직을 포함하여 다음을 수행한다: (a) 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일로 이동시킨다; (b) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼에 연결되는 제1 위치로 다중 포트 밸브를 위치시켜, 샘플이 제1 컬럼으로 흘러 샘플의 폴리펩티드가 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합하게 한다; (c) 다중 포트 밸브가 제1 위치에 있을 때 용리 완충액 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼을 통해 제2 지지 코일로 이동시켜, 용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키게 한다; (d) 제2 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제2 위치로 다중 포트 밸브를 이동시킨다; (e) 다중 포트 밸브가 제2 위치에 있을 때 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 반응 챔버로 이동시켜, 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드가 변성되게 한다; (f) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제3 위치로 다중 포트 밸브를 이동시킨다; (g) (f) 후에, 이황화 결합을 절단하는 환원 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 환원 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성된 폴리펩티드를 환원시킨다; (h) (g) 후에, 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 알킬화제를 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화한다; (i) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제3 포트를 통해 반응 챔버로부터 제1 지지 코일로 이동시킨다; (j) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제4 포트를 통해 탈염 컬럼으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키고, 다중 포트 밸브가 제4 위치에 있을 때, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일로부터 탈염 컬럼으로 이동시켜, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 탈염되게 한다; (k) 탈염된 폴리펩티드를 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시켜, 탈염된 폴리펩티드가 소화되게 한다; (l) 소화된 폴리펩티드를 글리칸 분석 장치로 전달하여, 소화된 폴리펩티드가 분리 및 정량화되게 한다.
도 1은 본 개시의 교시에 따라 조립된 온라인, 실시간 분석을 수행하기 위한 시스템의 개략도이다.
도 2는 도 1에 도시된 시스템의 제어기의 개략도이다.
도 3a와 도 3b는 40일의 생산 운행을 하는 동안 도 1의 시스템의 효율성을 모니터링하는 연구의 결과를 도시한 그래프이다.
도 3c는 8일의 기간 동안 도 3b의 결과의 스냅 사진을 도시한 그래프이다.
본 개시는 CQA의 모니터링 및 제어를 실시간으로 가능하게 하는 실시간 분석 및 방법을 제공하여, 원하는 최종 폴리펩티드 생성물이 생산될 수 있다. 개시된 분석 및 방법은 7일 내지 10일의 전형적인, 수동 조작되는, 오프라인 측정 결과 대신 수 시간(예컨대, 2시간 내지 3시간) 이내에 결과를 이용할 수 있도록 MAM 결과 회송 시간을 촉진할 수 있다. 따라서, 개시된 분석 및 방법은 대략 54배 내지 120배로 회송 시간을 개선한다. 이러한 "신속한(on-the-fly)"(실시간) 결과는 예를 들어, 생산 변수를 조정하여 적절한 CQA를 갖는 생성물을 효율적으로(온라인으로) 제조할 수 있게 한다.
도 1은 본 개시의 교시에 따라 조립된 시스템(100)의 개략도를 도시한 것이다. 실험실(예컨대, 거대 분자 방출 검사 실험실)에 위치될 수 있는 시스템(100)은 아래에서 더욱 상세히 기술되는 바와 같이, 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플의 분석을 자동으로 또는 실질적으로 자동으로 수행하기 위한 폐쇄 시스템이다. 시스템(100)을 사용하여 이 공정을 자동화(또는 실질적으로 자동화)함으로써, 분석이 실시간으로(또는 실질적으로 실시간으로) 수행될 수 있어, 종래의 공지된, 수동 조작되는 MAM 분석에 의해 전형적으로 요구되는 7일 내지 10일에 비해 상당한 개선인 수 시간(예컨대, 2시간 내지 3시간) 내에 전체 공정이 수행될 수 있고, 원하는 결과가 획득될 수 있다. 나아가, 시스템(100)을 이용하는 공정의 폐쇄 속성은 멸균 조건을 유지한다.
이 버전에서, 폴리펩티드는 아래에서 추가로 논의되는 치료적 폴리펩티드일 수 있다.
도 1에 도시된 시스템(100)은 일반적으로 다중 포트 밸브(104), 제1 지지 코일(108), 제1 컬럼(112), 제2 지지 코일(116), 반응 챔버(120), 제2 컬럼(124), 제3 컬럼(128), 및 제어기(132)를 포함한다. 도 1에 도시된 버전에서, 시스템(100)은 용기(136), 펌프(140), 제1 폐기물 챔버(144), 제2 폐기물 챔버(148), 제3 폐기물 챔버(152), 및 폴리펩티드를 분석하는 분석 장치(156)도 포함한다. 그러나 다른 버전에서는, 시스템(100)은 이러한 구성요소 중 1종 이상을 포함하지 않을 수 있다. 예로서, 시스템(100)은 용기(136) 및/또는 분석 장치(156)를 포함하지 않을 수 있다. 여하튼, 아래에서 더욱 상세히 기술되는 바와 같이, 원하는 경우 시스템(100)의 구성요소들 사이에서 유체 연통을 용이하게 하기 위하여 일반적으로 통상적인 배관 설비는 시스템(100)의 각 구성요소들 사이에서 연장된다. 다중 포트 밸브(104)는 일반적으로 시스템(100)의 다양한 구성요소들 사이에서 유체 연통을 제어하도록 구성된다. 이 버전에서, 다중 포트 밸브(104)는 12개의 위성 포트와 중앙 공유 포트 밸브이다. 즉, 다중 포트 밸브(104)는 중앙 포트(160) 및, 중앙 포트(160)에 선택적 유동적으로 연결되는 12개의 위성 포트(164~175)를 갖는다. 다중 포트 밸브(104)는 각각 중앙 포트(160)를 12개의 상이한 위성 포트(164~175)와 유동적으로 연결하는 12개의 상이한 위치 사이에서 이동 가능하다(이들 일부는 도 1의 시스템(100)의 작동에서 사용되지 않는다). 다른 버전에서, 다중 포트 밸브(104)는 정도의 차는 있어도 위성 포트를 포함할 수 있거나, 상이한 유형의 밸브일 수 있거나, 또는 (각각 하나 이상의 포트를 갖는) 1개 이상의 상이한 밸브로 교체될 수 있다. 예로서, 다중 포트 밸브(104)는 제어기(132)에 개별적으로 연결되며 제어기(132)에 의해 제어되는 복수 개의 단일 포트 밸브로 교체될 수 있으며, 단일 포트 밸브 각각은 위성 포트(164~175) 중 하나를 효과적으로 교체한다.
용기(136)는 일반적으로 분석되는 폴리펩티드를 함유하는 생성물을 수용 또는 저장하도록 구성된다. 이 버전의 용기(136)는 생성물을 수용 또는 저장하는 생물반응기 형태를 취한다. 그러나 다른 버전에서, 용기(136)는 그 대신 세포 배양 용기, 예컨대, 플라스크, 플레이트 등의 형태를 취할 수 있다. 용기(136)는 배관 설비의 도관(180)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(164)에 유동적으로 연결되어, 원하는 경우 밸브(104)가 용기(136)로부터 용기(136)에 함유된 생성물의 샘플을 수득할 수 있다.
제1 지지 코일(108)은 밸브(104)의 상류에 위치되며, 배관 설비의 도관(184)을 통해 밸브(104)의 중앙 포트(160)에 유동적으로 연결된다. 따라서, 제1 지지 코일(108)은, 밸브(104)가 중앙 포트(160)가 위성 포트(164)에 유동적으로 연결되는 제1 위치에 있을 때 밸브(104)를 통해 용기(136)로부터의 생성물의 샘플을 수용하도록 배열된다.
제1 컬럼(112)은 밸브(104)의 하류에 위치되며 배관 설비의 도관(188)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(165)에 유동적으로 연결된다. 따라서, 제1 컬럼(112)은 밸브(104)가 중앙 포트(160)가 위성 포트(165)에 유동적으로 연결되는 제2 위치에 있을 때 밸브(104)를 통해 제1 지지 코일(108)로부터 샘플을 수용하도록 배열된다. 제1 컬럼(112)이 샘플을 수용할 때, 제1 컬럼(112)은 샘플이 그 사이를 흐를 때 샘플로부터 폴리펩티드를 결합하도록 구성된다. 이러한 방식으로, 제1 컬럼(112)은 샘플의 나머지로부터 샘플의 폴리펩티드를 분리하고, 샘플의 나머지는 제2 지지 코일(116)을 통해 제1 폐기물 챔버(144)로 전달될 수 있다.
본 명세서에서 폴리펩티드 결합 컬럼으로도 지칭될 수 있는 제1 컬럼(112)은 단백질 A 컬럼, 단백질 G 컬럼, 단백질 A/G 컬럼, 단백질 L 컬럼, 아미노산 컬럼, 아비딘 컬럼, 스트렙타비딘 컬럼, 탄수화물 결합 컬럼, 탄수화물 컬럼, 글루타티온 컬럼, 헤파린 컬럼, 소수성 상호작용 컬럼, 면역친화도 컬럼, 뉴클레오티드/보조효소 컬럼, 특별 컬럼, 및 고정화된 금속 친화도 크로마토그래피(IMAC) 컬럼으로 구성된 군으로부터 선택된다. 예를 들어, 서브클래스 1, 2, 또는 4의 인간 IgG, IgM, IgA, 또는 IgE(그리고 인간 VH3 패밀리의 인간 Fc 부분 및/또는 Fab 영역을 포함하는)인 폴리펩티드의 경우, 단백질 A 컬럼이 유용하다. 단백질 G 컬럼은 서브클래스 1 내지 4의 인간 IgG를 정제하는 데 사용될 수 있다. 또한, 재조합 융합 단백질 A/G 컬럼은 이 융합 단백질이 단백질 A 및 단백질 G 결합 자리를 제공하므로 이러한 클래스의 인간 항체 전부를 정제하는 데 사용될 수 있다. 따라서, 단백질 A/G 융합 단백질은 인간 IgG, IgA, IgE, 및 IgM을 정제하는 데 사용될 수 있다. 나아가, 단백질 L 컬럼은 표적 항체가 적절한 카파(κ) 서브타입 경쇄(즉, VκI, VκIII 및 VκIV 서브타입)을 가진다면 인간 IgG, IgM, IgA, IgE 및 IgD를 정제하는 데 사용될 수 있다. 또한, 단백질 L 컬럼은 단백질 L이 항체의 가변(V) 쇄와 결합하므로 또한 적절한 κ 쇄 서브타입을 갖는 Fab 및 scFv 단편을 정제하는 데 사용될 수 있다.
펌프(140)는 제1 지지 코일(108)의 상류에 위치되고 배관 설비의 도관(192)을 통해 제1 지지 코일(108)에 유동적으로 연결된다. 이 버전에서 펌프(140)는 제1 완충제 공급원(196)과 제2 완충제 공급원(200) 둘 다에 유동적으로 연결되는 시린지 펌프의 형태를 취한다. 이 버전에서, 제1 완충제 공급원(196)은 용리 완충액(204)(예컨대 단백질 A에 결합된 항체의 경우 산성 완충제; 또는 단백질 G에 결합된 항체의 경우, 강산성(pH 3 이하) 완충제; 당업자는 결합된 항체에 적절한 용리 완충제를 최적화하고 선택할 수 있다)을 펌프(140)(및, 궁극적으로, 제1 지지 코일(108))에 공급할 수 있는 용리 완충제 공급원이고, 제2 완충제 공급원(200)은 변성 시약(208)을 펌프(140)(및, 궁극적으로, 제1 지지 코일(108))에 공급할 수 있는 (4차, 3차, 또는 2차 폴리펩티드 구조를 방해하는 변성제를 함유하는) 변성 완충제 공급원이다. 다른 버전에서, 펌프(140)는 상이한 유형의 펌프일 수 있고/있거나 상이한 펌프(140)가 각각의 완충제 공급원(196, 200)을 위하여 사용될 수 있다.
일부 버전에서, 변성 시약은 변성 세제 또는 카오트로프일 수 있거나 변성 세제 또는 카오트로프를 포함할 수 있다. 변성 시약이 변성 세제이거나 변성 세제를 포함하는 버전에서, 변성 세제는 바람직하게는 황산도데실 나트륨(SDS), 콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨, 글리코콜산 나트륨, 타우로콜산 나트륨, 타우로데옥시콜산 나트륨, N-라우로일사르코신, 황산도데실 리튬, 브롬화 헥사데실트리메틸 암모늄(CTAB) 및 브롬화 트리메틸(테트라데실) 암모늄(TTAB)으로 구성된 군으로부터 선택된다. 더욱 바람직하게는, 변성 세제는 SDS이다. 변성 세제가 카오트로프이거나 카오트로프를 포함하는 버전에서, 카오트로프는 바람직하게는 요소, n-부탄올, 에탄올, 염화 구아니디늄, 과염소산 리튬, 아세트산 리튬, 염화 마그네슘, 페놀, 2-프로판올, 및 티오우레아로 구성된 군으로부터 선택된다. 대안적으로 또는 추가적으로, 변성 시약은 변성 시약이 반응 챔버(120)로 전달될 때 반응 챔버(120)에서 온도가 유지되지 않는 경우 사전 결정된 온도(예컨대, 약 22℃ 내지 약 120℃에 도달하기에 적합한 온도를 갖는 가열된 유체일 수 있거나 가열된 유체를 포함할 수 있다.
밸브(212)는 펌프(140)와 제1 및 제2 완충제 공급원(196, 200) 사이에 위치되어 펌프(140)를 한 번에 완충제 공급원(196, 200) 중 하나에만 선택적으로 유동적으로 연결한다. 더욱 구체적으로, 밸브(212)는 펌프(140)가 제1 완충제 공급원(196)에 유동적으로 연결되고 펌프(140)가 제2 완충제 공급원(200)으로부터 유동적으로 분리되는 제1 위치와 펌프(140)가 제2 완충제 공급원(200)에 유동적으로 연결되고 펌프(140)가 제1 완충제 공급원(196)으로부터 유동적으로 분리되는 제2 위치 사이에서 이동 가능하다. 즉, 펌프(140)는 밸브(212)의 위치에 따라 선택적으로 제1 완충제 공급원(196) 또는 제2 완충제 공급원(200)에 유동적으로 연결된다.
위에 언급된 바와 같이, 이 버전에서 펌프(140)는 시린지 펌프이다. 시린지 펌프(140)는 일반적으로 완충제 공급원(196, 200) 중 하나로부터 완충제를 수득하고 그 완충제를 제1 지지 코일(108)로 배출하도록 구성된다. 밸브(212)가 제1 위치에 있을 때, 펌프(140)는 제1 완충제 공급원(196)으로부터 용리 완충액(204)을 수득할 수 있고(즉, 빨아들일 수 있고), 원하는 경우, 그 용리 완충액(204)을 제1 지지 코일(108)로 배출(예컨대, 방출)할 수 있다. 역으로, 밸브(212)가 제2 위치에 있을 때, 펌프(140)는 제2 완충제 공급원(200)으로부터 변성 시약(208)을 수득할 수 있고(즉, 빨아들일 수 있고), 원하는 경우, 그 변성 시약(208)을 제1 지지 코일(108)로 배출(예컨대, 방출)할 수 있다.
제2 지지 코일(116)은 밸브(104), 제1 지지 코일(108), 및 제1 컬럼(112)의 하류에 위치된다. 제2 지지 코일(116)은 배관 설비의 도관(216, 220)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(166)에 선택적으로 유동적으로 연결된다. 또한, 제2 지지 코일(116)은 도관(220)과 도관(224)을 통해 제1 컬럼(112)에 선택적으로 유동적으로 연결된다. 삼방향 밸브(228)는 아래에서 더욱 상세하게 기술되는 바와 같이, 원하는 유체 흐름을 생성하기 위하여 도관(216, 220, 224) 사이에 배열되어 선택적인 연결을 용이하게 한다.
따라서, 제2 지지 코일(116)은 밸브(104)를 통해 제1 지지 코일(108)로부터 용리 완충액(204)을 수용하도록 배열되고, 제1 컬럼(112)을 통해 펌프(140)가 위에 기술된 방식으로 용리 완충액(204)을 배출할 때, 밸브(104)는 중앙 포트(160)가 위성 포트(165)에 유동적으로 연결되는 제2 위치에 있다. 용리 완충액(204)이 제1 컬럼(112)을 통과함에 따라, 용리 완충액(204)은 제1 컬럼(112)에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시킨다. 삼방향 밸브(228)는 도관(220, 224)을 연결하여 제1 컬럼(112)을 제2 지지 코일(116)과 유동적으로 연결하도록 작동하여, 용리 완충액(204)과 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물이 도관(220, 224)을 통해 제1 컬럼(112)으로부터 제2 지지 코일(116)로 흐른다.
반응 챔버(120)는 밸브(104)와 제1 컬럼(112)의 하류에 위치되며 배관 설비의 도관(232)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(167)에 유동적으로 연결된다. 이 버전에서, 펌프(140)를 사용하여 변성 시약(208)을 제1 지지 코일(108)로 배출하고, 중앙 포트(160)가 밸브(167)의 위성 포트(167)에 유동적으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브(104)를 이동시킴으로써, 변성 시약(208)이 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 용이하게 이동시킴으로써, 반응 챔버(120)는 제2 완충제 공급원(200)으로부터 완전하지 않다면 부분적으로 변성 시약(208)으로 사전 충전된다(즉, 시스템(100)의 작동 전에 충전된다). 그러나 다른 버전에서, 반응 챔버(120)는 시스템(100)의 작동 중에(예컨대, 제2 지지 코일(116)이 용리 완충액(204)을 수용한 후에) 부분적으로 또는 완전히 변성 시약(208)으로 충전될 수 있거나, 또 다른 완충제 공급원으로부터 및/또는 다른 방식으로 부분적으로 또는 완전히 변성 시약으로 충전될 수 있거나, 또는 반응 챔버(120)는 전혀 충전되지 않을 수 있는데, 이 경우 반응 챔버(120)에 연결된 가열 요소(236)에 의해 열이 반응 챔버(120)에 가해질 수 있다.
용리/폴리펩티드 혼합물이 제2 지지 코일(116)에 도달한 후, 용리/폴리펩티드 혼합물은 반응 챔버(120)로 이동된다. 이 버전에서, 반응 챔버(120)는 제2 지지 코일(116)로부터 용리/폴리펩티드 혼합물을 간접적으로 수용한다. 더욱 구체적으로, 삼방향 밸브(228)가 작동하여 도관(216, 224)을 연결하고, 도관(216, 224)을 통해 용리/폴리펩티드 혼합물이 제2 지지 코일(116)로부터 다중 포트 밸브(104)의 위성 포트(166)로 이동되고, 밸브(104)는 중앙 포트(160)가 위성 포트(166)에 유동적으로 연결되는 제3 방향으로 이동되어 혼합물이 제1 지지 코일(108)로 이동하고, 밸브(104)는 중앙 포트(160)가 밸브(104)의 위성 포트(167)에 유동적으로 연결되는 제4 위치로 이동되어 혼합물이 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동한다. 다른 버전에서, 반응 챔버(120)는 제2 지지 코일(116)로부터 용리/폴리펩티드 혼합물을 직접적으로 수용할 수 있거나 1개 이상의 상이한 구성요소를 이용하여 및/또는 상이한 순서로 제2 지지 코일(116)로부터 혼합물을 간접적으로 수용할 수 있다.
여하튼, 용리/폴리펩티드 혼합물이 반응 챔버(120)에 도달하면, 혼합물의 폴리펩티드는 반응 챔버(120)에서 인큐베이션되어, 폴리펩티드를 반응 챔버(120)에서 변성시킨다. 예를 들어, 반응 챔버(120)가 변성 시약으로 적어도 부분적으로 충전될 때, 혼합물의 폴리펩티드는 반응 챔버(120)에 도달하여 변성 시약과 반응하자마자 변성을 거치게 될 것이다. 일부 사례에서, 반응 챔버(120)는 동시에 또는 항상 반응 챔버(120)에 연결된(예컨대, 반응 챔버(120)에 바로 인접하여 위치된, 반응 챔버(120)를 둘러싼) 가열 요소(236)에 의해 가열되어 변성 공정의 촉진을 도울 수 있다. 즉, 가열 요소(236)는 열, 바람직하게는 약 22℃ 내지 약 120℃ 온도를 갖는 열, 더욱 바람직하게는 약 40℃ 온도를 갖는 열을 반응 챔버(120)에 가하여 변성을 장려할 수 있다. 가열 요소(236)는 예를 들어, 가열 블록, 가열 코일, 인덕션 히터, 열 펌프, 카트리지 히터, 전기 저항 와이어, 가열된 유체, 또는 반응 챔버(120)의 하나 이상의 부분을 가열하기에 적합한 다른 요소의 형태를 취할 수 있다. 여하튼, 가열 요소(236)로부터 반응 챔버(120)에 열을 가함으로써, 변성 공정은 촉진될 수 있다. 그러나 다른 사례에서, 반응 챔버(120)는 변성 시약으로 충전되지 않을 수 있고, 변성 공정은 가열 요소(236)로부터 열을 가하는 것에 의해서만 촉진될 수 있다.
혼합물의 폴리펩티드의 변성 후, 반응 챔버(120)는 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 수용하여 변성된 폴리펩티드를 환원시키도록 구성된다. 환원 시약은 디티오트레이톨(DTT), 글루타티온, β-메르캅토에탄올(β-ME), 및 트리스(2-카르복시에틸)포스핀(TCEP)으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있고, 일반적으로 냉각 용기(240)에 의해 공급되며, 냉각 용기(240)는 4℃ 온도를 갖는 냉각기의 형태를 취할 수 있다. 이 버전에서, 냉각 용기(240)는 밸브(104)의 하류에 위치되며 환원 시약을 함유하는 제1 챔버(242)를 갖고 배관 설비의 도관(244)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(168)에 유동적으로 연결된다. 밸브(104)가 중앙 포트(160)가 밸브(104)의 위성 포트(168)에 유동적으로 연결되는 제5 위치에 있을 때 제1 챔버(242)는 환원 시약을 제1 지지 코일(108)에 공급하며, 그 후, 밸브(104)가 (중앙 포트(160)가 위성 포트(167)에 유동적으로 연결되는) 제4 위치에 있을 때(또는 제4 위치로 돌아갈 때) 환원 시약은 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동된다. 따라서, 이 버전에서, 환원 시약은 제1 지지 코일(108)을 통해 반응 챔버(120)로 간접적으로 공급된다. 그러나 다른 버전에서, 제1 챔버(242)는 환원 시약을 반응 챔버(120)로 직접적으로(즉, 환원 시약을 제1 지지 코일(108)로 이동시키지 않고) 공급할 수 있다.
변성된 폴리펩티드가 환원된 후, 반응 챔버(120)는 반응 챔버(120)의 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화제를 수용하여, 반응 챔버(120)의 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화하도록 구성된다. 알킬화제는 바람직하게는 인돌-3-아세트산(IAA)과 같은 알킬화 시약이지만, 다른 알킬화제가 이용될 수 있다. 이 버전에서, 냉각 용기(240)는 알킬화제를 함유하는 제2 챔버(248)를 갖고 배관 설비의 도관(252)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(169)에 유동적으로 연결된다. 밸브(104)가 중앙 포트(160)가 밸브(104)의 위성 포트(169)에 유동적으로 연결되는 제6 위치에 있을 때 제2 챔버(248)는 알킬화제를 제1 지지 코일(108)에 공급하며, 그 후, 밸브(104)가 제4 위치에 있을 때(또는 제4 위치로 돌아갈 때) 알킬화제는 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동된다. 따라서, 이 버전에서, 알킬화제는 제1 지지 코일(108)을 통해 반응 챔버(120)로 간접적으로 공급된다. 그러나 다른 버전에서, 제2 챔버(248)는 알킬화제를 반응 챔버(120)로 직접적으로(즉, 알킬화제를 제1 지지 코일(108)로 이동시키지 않고) 공급할 수 있고/있거나 알킬화제가 상이한 냉각 용기(예컨대, 냉각 용기(240)과 분리된 냉각 용기)로부터 공급될 수 있다.
이 버전에서, 시스템(100)은 반응 챔버(120)에 유동적으로 연결되고 반응 챔버(120)의 하류에 위치된 제1 평상시 개방 밸브(256)를 더 포함한다. 평상시 개방 밸브(256)는 반응 챔버(120)의 배출구(264)에 유동적으로 연결된 유입 포트(260), 제2 폐기물 챔버(148)에 유동적으로 연결된 제1 배출 포트(268), 및 대기에 유동적으로 연결된 제2 배출 포트(272)를 갖는다. 평상시 개방 밸브(256)는 평상시에 시스템(100)이 작동 중에 있을 때, 더욱 구체적으로는, 반응 챔버(120)가 용리/폴리펩티드 혼합물, 환원 시약, 알킬화제, 및, 일부 사례에서, 변성 시약을 수용하고 이들로 충전될 때, 개방 위치, 또는 제1 위치로 밸브(256)를 작동한다. 이 개방 위치에서, 유입 포트(260)는 제1 배출 포트(268)에 유동적으로 연결되고, 유입 포트(260)는 제2 배출 포트(272)로부터 유동적으로 분리되어, 반응 챔버(120)가 이의 고정된 부피 이상으로 충전될 때, 임의의 초과 내용물이 제2 폐기물 챔버(148)로 유도된다. 그러나 평상시 개방 밸브(256)는, 예를 들어, 반응 챔버(120)가 위에 기술된 내용물을 더 이상 수용하지 않고, 반응 챔버(120)를 세척할 시간일 때, 개방 위치로부터 폐쇄 위치 또는 제2 위치로 (예컨대, 밸브(256)에 전류를 가함으로써) 이동 가능하다. 이 폐쇄 위치에서, 유입 포트(260)는 제2 배출 포트(272)에 유동적으로 연결되고, 유입 포트(260)는 제1 배출 포트(268)로부터 유동적으로 분리되어, 반응 챔버(120)의 배출구(264)가 대기에 노출된다. 결국, 공기가 반응 챔버(120)로 흐를 수 있어, 반응 챔버(120)로부터 내용물의 제거를 촉진할 수 있다.
본 명세서에서 탈염 컬럼(124)으로도 지칭되는 제2 컬럼(124)은 바람직하게는 밸브(104)의 하류에 위치되며 배관 설비의 도관(276)을 통해 밸브(104)의 위성 포트(170)에 유동적으로 연결되는 크기 배제 크로마토그래피 컬럼의 형태를 취한다. 따라서, 제2 컬럼(124)은 반응 챔버(120)로부터 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)을 수용하도록 배열된다. 이 버전에서, 제2 컬럼(124)은 반응 챔버(120)로부터 이들 물질을 간접적으로 수용한다. 더욱 구체적으로, 이들 물질은 밸브(104)가 (중앙 포트(160)가 위성 포트(167)에 유동적으로 연결되는) 제4 위치에 있을 때(또는 제4 위치로 이동될 때) 밸브(104)를 통해 반응 챔버(120)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동되며, 밸브(104)가 중앙 포트(160)가 위성 포트(170)에 유동적으로 연결되는 제7 위치로 이동되어 물질이 제1 지지 코일(108)로부터 제2 컬럼(124)으로 이동한다. 다른 버전에서, 제2 컬럼(124)은 반응 챔버(120)로부터 이들 물질을 직접적으로 수용할 수 있거나 1개 이상의 상이한 구성요소를 이용하여 및/또는 상이한 순서로 이들 물질을 간접적으로 수용할 수 있다.
여하튼, 제2 컬럼(124)이 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)을 수용할 때, 제2 컬럼(124)은 궁극적으로 제3 폐기물 챔버(152)로 이동되는 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)으로부터 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 분리하도록 구성된다. 따라서, 제2 컬럼(124)은 본 명세서에서 탈염 컬럼(124)으로 지칭될 수 있다. 동시에, 제2 컬럼(124)은 폴리펩티드를 제3 컬럼(128)이 아래에서 기술되는 기능을 수행할 수 있게 하는 원하는 완충제 조건으로 완충제 교환하도록 구성된다.
이 버전에서, 시스템(100)은 제2 컬럼(124) 및 제3 컬럼(128)에 유동적으로 연결되고 제2 컬럼(124)과 제3 컬럼(128) 사이에 위치되는 제2 평상시 개방 밸브(280)를 더 포함한다. 평상시 개방 밸브(280)는 제2 컬럼(124)의 배출구(288)에 유동적으로 연결된 유입 포트(284), 제3 폐기물 챔버(152)에 유동적으로 연결된 제1 배출 포트(292), 및 제3 컬럼(128)에 유동적으로 연결된 제2 배출 포트(296)를 갖는다. 평상시 개방 밸브(280)는 평상시에 시스템(100)이 작동 중에 있을 때 개방 위치 또는 제1 위치로 작동한다. 이 개방 위치에서, 유입 포트(284)는 제1 배출 포트(292)에 유동적으로 연결되고, 유입 포트(284)는 제2 배출 포트(296)로부터 유동적으로 분리되어, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약이 제3 폐기물 챔버(152)로 유도된다. 그러나 평상시 개방 밸브(280)는, 탈염된 폴리펩티드를 제2 컬럼(124)으로부터 제2 컬럼(124)의 하류에 위치된 제3 컬럼(128)으로 이동시키는 것이 바람직할 때 개방 위치로부터 폐쇄 위치 또는 제2 위치로 (예컨대, 밸브(280)에 전류를 가함으로써) 이동 가능하다. 이 폐쇄 위치에서, 유입 포트(284)는 제2 배출 포트(296)에 유동적으로 연결되고, 유입 포트(284)는 제1 배출 포트(292)로부터 유동적으로 분리되어, 제2 컬럼(124)이 제3 컬럼(128)에 유동적으로 연결되어, 탈염된 폴리펩티드가 제2 컬럼(124)으로부터 제3 컬럼(128)으로 전달될 수 있다. 이 버전에서, 제3 컬럼(128)은 단백질 가수분해 효소(예컨대, 트립신, 키모트립신, 엘라스타제, 써몰리신, 펩신, 글루타밀 엔도펩티다제, 네프릴리신, Lys-C 프로테아제, 및 스태필로코커스 아우레우스 V8 프로테아제로 구성된 군으로부터 선택된 엔도펩티다제)를 포함하여, 제3 컬럼(128)은 본 명세서에서 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 지칭될 수 있다. 여하튼, 제3 컬럼(128)은 제2 컬럼(124)으로부터 수득된 탈염된 폴리펩티드를 소화시킨다.
폴리펩티드가 제3 컬럼(128)에서 소화된 후, 소화된 폴리펩티드는 분석 장치(156)로 이동될 수 있으며, 분석 장치(156)는 예를 들어, 액체 크로마토그래피 장치, 고성능 액체 크로마토그래피 장치, 초고성능 액체 크로마토그래피 장치, 질량 분광분석법 장치, 글리칸 분석 장치, 또 다른 분석 장치, 또는 이의 조합의 형태를 취할 수 있다. 이 버전에서, 분석 장치(156)는 제3 컬럼(128)의 하류에 위치되고 배관 설비의 도관(298)을 통해 제3 컬럼(128)에 유동적으로 연결된다. 따라서, 이 버전에서, 소화된 폴리펩티드는 분석을 위하여(예컨대, 정량화 및 분리를 위하여) 분석 장치(156)로 자동으로 이동될 수 있다. 그러나 다른 버전에서, 분석 장치(156)는 시스템(100)의 일부가 아니며(예컨대, 제3 컬럼(128)에 유동적으로 연결되지 않음), 이 경우 소화된 폴리펩티드는 상이한 방식으로(예컨대, 수동으로) 분석 장치(156)로 이동될 수 있다.
위에서 간략하게 언급된 바와 같이, 시스템(100)은 또한 제어기(132)를 포함하며, 이 버전에서 제어기(132)는 시스템(100)의 다양한 구성요소에 통신으로 연결되거나 결합되어 시스템(100)의 다양한 구성요소로 신호(예컨대, 제어 신호, 데이터)를 전송하고 시스템(100)의 다양한 구성신호로부터 신호(예컨대, 데이터)를 수신함으로써 시스템(100)의 위에 기술된 작동을 모니터링하고 촉진하거나 유도한다. 제어기(132)는 (예컨대, 시스템(100)과 동일한 환경에서) 시스템(100)의 다른 구성요소에 바로 인접하여 위치될 수 있거나 시스템(100)의 다른 구성요소로부터 멀리 위치될 수 있다. 도시된 바와 같이, 제어기(132)는 통신 네트워크(300)를 통해 다중 포트 밸브(104)에, 통신 네트워크(328)를 통해 펌프(140)에, 통신 네트워크(332)를 통해 분석 장치(156)에, 통신 네트워크(340)를 통해 가열 요소(236)에, 통신 네트워크(344)를 통해 제1 평상시 개방 밸브(256)에, 그리고 통신 네트워크(348)를 통해 제2 평상시 개방 밸브(280)에 통신으로 연결되거나 결합된다. 다른 버전에서, 제어기(132)는 정도의 차는 있어도 시스템(100)의 구성요소, 예컨대, 제1 지지 코일(108), 제1 컬럼(112), 제2 지지 코일(116), 반응 챔버(120), 제2 컬럼(124), 제3 컬럼(128), 용기(136), 삼방향 밸브(228), 및/또는 냉각 용기(240)에 통신으로 연결되거나 결합될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 어구 "통신으로 연결된" 및 "결합된"은 직접 연결되거나 결합된, 또는 하나 이상의 중간 구성요소를 통해 간접적으로 연결되거나 결합된 것을 의미하는 것으로 정의된다. 이러한 중간 구성요소는 하드웨어 및/또는 소프트웨어 기반의 구성요소를 포함할 수 있다. 네트워크(300~348)는 무선 네트워크, 유선 네트워크, 또는 유선 및 무선 네트워크의 조합(예컨대, 휴대전화 네트워크 및/또는 802.11x 호환 네트워크)일 수 있으며, 공개 접속 가능한 네트워크, 예컨대, 인터넷, 개인 네트워크, 또는 이의 조합을 포함할 수 있음이 인정된다. 네트워크(300~348)의 유형 및 구성은 구현 의존적이며, 현재 이용 가능하거나 나중에 개발되는, 제어기(132)와 시스템(100)의 구성요소 사이에서 기술된 통신을 촉진하는 임의의 유형의 통신 네트워크가 사용될 수 있다.
도 2에 나타난 바와 같이, 제어기(132)는 프로세서(352), 메모리(356), 통신 인터페이스(360), 및 컴퓨팅 로직(364)을 포함한다. 프로세서(352)는 일반 프로세서, 디지털 신호 프로세서, 응용 주문형 집적 회로(ASIC), 필드 프로그램 가능 게이트 어레이, 그래픽 프로세싱 유닛, 아날로그 회로, 디지털 회로, 또는 임의의 기타 공지된 또는 나중에 개발되는 프로세서일 수 있다. 프로세서(352)는 메모리(356)의 명령에 따라 작동한다. 메모리(356)는 휘발성 메모리 또는 비휘발성 메모리일 수 있다. 메모리(356)는 읽기 전용 메모리(ROM), 랜덤 액세스 메모리(RAM), 플래시 메모리, 전자적 소거 가능 프로그램 읽기 전용 메모리(EEPROM), 또는 기타 유형의 메모리 중 1종 이상을 포함할 수 있다. 메모리(356)는 광학적, 자기적(하드 드라이브), 또는 임의의 기타 형태의 데이터 저장 장치를 포함할 수 있다.
통신 인터페이스(360)는 네트워크(300~348)를 통해 제어기(132)와 냉장 시스템(100)의 구성요소 사이의 전자적 통신을 가능하게 하거나 촉진하기 위하여 제공된다. 통신 인터페이스(360)는 예를 들어, 1개 이상의 범용 직렬 버스(USB) 포트, 1개 이상의 이더넷 포트, 및/또는 1개 이상의 다른 포트 또는 인터페이스일 수 있거나 이를 포함할 수 있다. 전자적 통신은 예로서 USB, RS-232, RS-485, WiFi, 블루투스를 포함하는 임의의 공지된 통신 프로토콜 및/또는 임의의 기타 적합한 통신 프로토콜을 통해 일어날 수 있다.
로직(364)은 일반적으로 메모리(356)에 저장된 컴퓨터 판독 가능한 명령으로 구현된 1개 이상의 제어 루틴 및/또는 1개 이상의 서브루틴을 포함한다. 제어 루틴 및/또는 서브루틴은 PID(비례 적분 미분), 퍼지 로직, 비선형, 또는 임의의 기타 적합한 유형의 제어를 수행할 수 있다. 프로세서(352)는 로직(364)을 실행하여 일반적으로 시스템(100)의 작동과 관련된 조치를 수행한다.
일반적으로 말하면, 로직(364)은 실행될 때 프로세서(352)가 시스템(100)의 구성요소, 특히 다중 포트 밸브(104), 펌프(140), 가열 요소(236), 제1 및 제2 평상시 개방 밸브(256, 280), 및 분석 장치(156)를 제어하게 하여 시스템(100)이 본 명세서에 논의된 바람직한 방식으로 작동한다. 더욱 구체적으로, 로직(364)은 실행될 때 프로세서(352)가 (i) 다중 포트 밸브(104)를 본 명세서에 기술된 임의의 위치로 또는 임의의 위치 사이로 이동시켜 위에 기술된 바와 같은 시스템(100)의 다양한 구성요소를 유동적으로 결합시키고, (ii) 펌프(140)를 제어하게 하고(예컨대, 펌프(140)가 용리 완충액(204) 또는 변성 시약(208)을 수득하고 배출하게 하고), (iii) 가열 요소(236)(시스템(100)에 이용될 때)를 제어하여 선택적으로 반응 챔버(120)(및 이의 내용물)에 열을 가하게 하고, (iv) 제1 평상시 개방 밸브(256)를 제어하게 하고, (v) 제2 평상시 개방 밸브(280)를 제어하게 하고, (vi) 분석 장치(156)를 제어하게 하고, 다른 원하는 기능을 수행하게 한다.
예를 들어, 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플의 실시간 분석을 수행하는 것이 바람직할 때, 로직(364)은 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 밸브(104)를 위에 기술된 제1 위치로 위치시키고, 용기(136)으로부터의 생성물의 샘플을 도관(180), 포트(164), 포트(160)를 통해 제1 지지 코일(108)로 이동시키고, 밸브(104)를 위에 기술된 제2 위치로 위치시키고, 제1 지지 코일(108)로부터 샘플을 도관(184), 포트(160, 164), 및 도관(188)을 통해 폴리펩티드 결합 컬럼(112)으로, 그리고 폴리펩티드 결합 컬럼(112) 사이로 이동시킨다. 결국, 샘플의 실질적으로 모든 폴리펩티드는 컬럼(112)에 결합하여, 샘플의 폴리펩티드가 샘플의 나머지로부터 분리되며, 샘플의 나머지는 도관(220, 224) 및 제2 지지 코일(116)을 통해 제1 폐기물 챔버(144)로 전달된다.
로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 펌프(140)가 제1 완충제 공급원(196)으로부터 용리 완충액(204)을 수득하게 하고 도관(192)을 통해 용리 완충액(204)을 제1 지지 코일(108)로 배출하게 한다. 일부 사례에서, 펌프(140)는 (펌프(140)를 제1 완충제 공급원(196)과 유동적으로 연결하기 위하여) 제2 위치로부터 제1 위치로 이동될 필요가 있을 수 있으나, 다른 사례에서, 펌프(140)는 이미 제1 위치에 있을 수 있다. 여하튼, 로직(364)은 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 도관(184), 포트(160, 165), 및 도관(188, 220, 및 224)을 통해 용리 완충액(204)을 제1 지지 코일(108)로부터 제1 컬럼(112)으로 그리고 제1 컬럼(112) 사이로 그리고 제2 지지 코일(116)로 이동시킨다. 이러한 방식으로, 용리 완충액(204)은 제1 컬럼(112)에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키고, 용리 완충액(204)과 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물은 제1 컬럼(112)으로부터 제2 지지 코일(116)로 흐른다.
로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 밸브(104)를 위에 기술된 제3 위치로 이동시키고, 용리/폴리펩티드 혼합물을 도관(224, 216), 포트(166, 160) 및 도관(184)을 통해 제2 지지 코일(116)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동시키고, 밸브(104)를 위에 기술된 제4 위치로 이동시키고, 용리/폴리펩티드 혼합물을 도관(184), 포트(160, 167), 및 도관(232)을 통해 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동시킨다. 결국, 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드는 반응 챔버(120)에서 변성 시약(208)과 함께 및/또는 가열 요소(236)에 의해 가열되어 폴리펩티드를 변성시키는 열의 존재 하에 인큐베이션된다.
로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 밸브(104)를 위에 기술된 제5 위치로 이동시키고, 환원 시약을 도관(244), 포트(168, 160) 및 도관(184)을 통해 냉각 용기(240)의 제1 챔버(242)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동시키고, 밸브(104)를 다시 제4 위치로 이동시키고, 환원 시약을 도관(184), 포트(160, 167), 및 도관(232)을 통해 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동시킨다. 반응 챔버(120)에 도달하자마자, 환원시약은 이황화 결합 가교를 절단하여, 반응 챔버(120)의 변성된 폴리펩티드를 환원시킨다.
로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 밸브(104)를 위에 기술된 제6 위치로 이동시키고, 알킬화제를 도관(252), 포트(169, 160) 및 도관(184)을 통해 냉각 용기(240)의 제2 챔버(248)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동시키고, 밸브(104)를 다시 제4 위치로 이동시키고, 알킬화제를 도관(184), 포트(160, 167), 및 도관(232)을 통해 제1 지지 코일(108)로부터 반응 챔버(120)로 이동시킨다. 반응 챔버(120)에 도달하자마자, 알킬화제는 반응 챔버(120)의 술프하이드릴을 알킬화하여, 반응 챔버(120)의 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화한다.
로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 밸브(104)를 제4 위치로(이미 그곳에 있지 않은 경우) 이동시키고, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)을 도관(232), 포트(167, 160), 및 도관(184)을 통해 반응 챔버(120)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동시키고, 밸브(104)를 위에 기술된 제7 위치로 이동시키고, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)을 도관(184), 포트(160, 170), 및 도관(276)을 통해 제1 지지 코일(108)로부터 탈염 컬럼(124)으로 이동시킨다. 결국, 탈염 컬럼(124)은 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약으로부터 분리시키고, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약은 제3 폐기물 챔버(152)로 전달되거나 이동된다.
변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액(204), 알킬화제, 환원 시약, 및 변성 시약(사용될 경우)이 반응 챔버(120)로부터 제1 지지 코일(108)로 이동된 후 어느 시점에, 로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 평상시 개방 밸브(256)를, 챔버(120)의 배출구(264)가 제2 폐기물 챔버(148)에 유동적으로 연결되어 반응 챔버(120)에 맞지 않는(이의 고정된 부피를 초과하여 충전된 결과) 내용물을 제2 폐기물 챔버(148)로 유도하는 개방된, 제1 위치로부터, 배출구(264)가 대기로 유동적으로 연결되어, 공기가 반응 챔버(120)로 흐를 수 있어서, 반응 챔버(120)로부터 내용물 제거를 촉진할 수 있는 폐쇄된, 제2 위치로 이동시킨다. 평상시 개방 밸브(256)는 반응 챔버(120)가 비워진 후 즉시 개방된, 제1 위치로 돌아갈 수 있거나, 나중 시점에 개방된, 제1 위치로 돌아갈 수 있다.
탈염 컬럼(124)이 다른 물질로부터 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 분리한 후, 로직(364)은 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 평상시 개방 밸브(280)를, 밸브(280)의 유입 포트가 제3 폐기물 챔버(152)에 유동적으로 연결되는 개방된, 제1 위치로부터, 밸브(280)의 유입 포트가 단백질 가수분해 효소 컬럼(128)에 유동적으로 연결되는 폐쇄된, 제2 위치로 이동시킨다. 결국, 로직(364)은 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 탈염된(또는 분리된) 폴리펩티드를 탈염 컬럼(124)으로부터 단백질 가수분해 효소 컬럼(128)으로 이동시키며, 단백질 가수분해 효소 컬럼(128)은 탈염된 폴리펩티드를 소화시킨다.
폴리펩티드가 소화된 후, 로직(364)은, 적어도 이 버전에서, 추가로 프로세서(352)에 의해 실행 가능하여 소화된 폴리펩티드를 단백질 가수분해 효소 컬럼(128)으로부터 폴리펩티드의 분석을 위하여 분석 장치(156)로 이동시키고, 분석 장치(156)가 원하는 분석을 수행하게 한다. 예로서, 로직(364)은, 프로세서(352)에 의해 실행될 때, 분석 장치(156)가 폴리펩티드를 분리하고 정량화하게 할 수 있다.
다른 버전에서, 로직(364)은, 프로세서(352)에 의해 실행될 때, 추가의, 더 적은, 및/또는 상이한 기능이 수행되게 할 수 있다. 예로서, 로직(364)은, 프로세서(352)에 의해 실행될 때, 소화된 폴리펩티드를 컬럼(128)으로부터 분석 장치(156)로 이동시키지 않을 수 있거나 분석 장치(156)가 원하는 분석을 수행하게 하지 않을 수 있다. 나아가, 다른 버전에서, 로직(364)은 본 명세서에 기술된 것과 상이한 순서로 프로세서(352)에 의해 실행될 수 있다. 마지막으로, 시스템(100)은 (동일한 생성물로부터의 및/또는 상이한 생성물로부터의) 복수의 샘플의 실시간 분석을 수행하는 데 사용될 수 있으므로, 로직(364)은 임의의 상이한 횟수로 프로세서(352)에 의해 실행될 수 있음이 인정된다.
도 3a 내지 도 3c는 이중특이적 T 세포 결합제(Bispecific T-cell Engager, BiTE®) 분자를 함유하는 생성물의 샘플을 제조하는 데 있어서 시스템(100)의 효율성을 모니터링하기 위하여 설계된 온라인 및 실시간 MAM 분석 연구의 결과를 도시한 것이다. 특히, 연구는 40일의 생산 운행을 하는 동안 시스템(100)의 효율성을 모니터링하였다. 연구는 모니터링 및 CQA 데이터, 예컨대, 도 3a에 도시된 2개의 탈아미드화 자리 DS1과 DS2 및 단편화 빈도(FF)에 대한 면적 백분율, 및 40일의 생산 운행의 제6일의, 도 3b 및 도 3c에 도시된, 네 개의 기준 펩티드 RP1, RP2, RP3, 및 RP4에 대한 (이온 카운트 개수로 표현된) MS 피크 높이의 수집을 개시하였다. 도 3a에 도시된 바와 같이, 시스템(100)은 40일의 생산 운행의 전체 지속기간에 걸쳐 본 명세서에 논의된 의도했던 기능을 훌륭하게 그리고 효과적으로 수행하였으며, 도 3b와 도 3c에 도시된 바와 같이, 제6일과 제40일 사이에 수집된 CQA 데이터는 실질적으로 일관되었다. 즉, 시간 경과에 따른 생성물 품질의 유의미한 변화가 없었고, 생성물 품질은 실제로 제32일 이후에 증가되어, 자동으로 샘플을 제조하는 데 있어서 시스템(100)의 강건성을 증명하였다. 사실, 도 3c에 도시된 바와 같이, 그 기간 동안 RP1, RP2, RP3, 및 RP4에 대해 수집된 CQA 데이터는 전형적인 수동적 MAM 분석을 수행하는 동안 수득된 CQA 데이터보다 우수하였다.
치료적 폴리펩티드
다음 중 1종 이상에 결합하는 것을 포함하는 단백질이 개시된 장치 및 방법에 유용할 수 있다. 이들은 CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD30, 및 CD34를 포함하며, 수용체 결합을 방해하는 것들을 포함하는 CD 단백질을 포함한다. HER2, HER3, HER4, 및 EGF 수용체를 포함하는 HER 수용체 패밀리 단백질. 세포 부착 분자, 예를 들면, LFA-I, MoI, pl50, 95, VLA-4, ICAM-I, VCAM, 및 알파 v/베타 3 인테그린. 혈관 내피 성장 인자("VEGF"), 성장 호르몬, 갑상선 자극 호르몬, 여포 자극 호르몬, 황체형성 호르몬, 성장 호르몬 방출 인자, 부갑상선 호르몬, 뮬레리안 억제 물질, 인간 대식세포 염증성 단백질(MIP-I -알파), 에리트로포이에틴(EPO), 신경 성장 인자, 예컨대 NGF-베타, 혈소판 유래 성장 인자(PDGF), 예를 들면, aFGF 및 bFGF를 포함하는 섬유모세포 성장 인자, 표피 성장 인자(EGF), 다른 것 중에서도, TGF-α와 TGF-βl, TGF-β2, TGF-β3, TGF-β4, 또는 TGF-β5를 포함하는 TGF-β를 포함하는 형질전환 성장 인자(TGF), 인슐린 유사 성장 인자-I 및 -II(IGF-I 및 IGF-II), des(l-3)-IGF-I(뇌 IGF-I), 및 골유도성 인자와 같은 성장 인자. 인슐린, 인슐린 A-쇄, 인슐린 B-쇄, 프로인슐린, 및 인슐린 유사 성장 인자 결합 단백질을 포함하는 인슐린 및 인슐린 관련 단백질. 응고 및 응고 관련 단백질, 예컨대, 다른 것 중에서도, 인자 VIII, 조직 인자, 폰 빌레브란트 인자, 단백질 C, 알파-1-항트립신, 플라스미노겐 활성제, 예컨대 우로키나제 및 조직 플라스미노겐 활성제("t-PA"), 봄바진, 트롬빈, 및 트롬보포이에틴; (vii) 알부민, IgE, 및 혈액형 항원을 포함하나 이에 한정되지 않는 다른 혈액 및 혈청 단백질. 다른 것 중에서도, 다음을 포함하는 콜로니 자극 인자 및 이의 수용체: M-CSF, GM-CSF, 및 G-CSF, 및 이의 수용체, 예컨대 CSF-1 수용체(c-fms). 예를 들면, flk2/flt3 수용체, 비만(OB) 수용체, LDL 수용체, 성장 호르몬 수용체, 트롬보포이에틴 수용체("TPO-R", "c-mpl"), 글루카곤 수용체, 인터류킨 수용체, 인터페론 수용체, T-세포 수용체, 줄기세포 인자 수용체, 예컨대 c-Kit, 및 기타 수용체를 포함하는 수용체 및 수용체 관련 단백질. 예를 들면, OX40 수용체에 대한 리간드인 OX40L을 포함하는 수용체 리간드. 골 유래성 신경영양 인자(BDNF) 및 뉴로트로핀-3, -4, -5, 또는 -6(NT-3, NT-4, NT-5, 또는 NT-6)을 포함하는 신경영양 인자. 릴락신 A-쇄, 릴락신 B-쇄, 및 프로릴락신; 예를 들면, 인터페론-α, -β, 및 -γ, 및 이들의 수용체를 포함하는 인터페론 및 인터페론 수용체. IL-I 내지 IL-33 및 IL-I 수용체 내지 IL-33 수용체, 예컨대 다른 것 중에서도 IL-8 수용체를 포함하는 인터류킨 및 인터류킨 수용체. AIDS 외피 바이러스 항원을 포함하는 바이러스 항원. 지질단백질, 칼시토닌, 글루카곤, 심방나트륨 이뇨 인자, 폐 계면활성제, 종양 괴사 인자-알파 및 -베타, 엔케팔리나제, RANTES(regulated on activation normally T-cell expressed and secreted), 마우스 성선자극호르몬 관련 펩티드, DNAse, 인히빈, 및 액티빈. 인테그린, 단백질 A 또는 D, 류마티스성 인자, 면역독소, 골 형태형성 단백질(BMP), 초과산화물 디스뮤타제, 표면 막 단백질, 붕괴 촉진 인자(DAF), AIDS 외피, 수송 단백질, 귀소(homing) 수용체, 아드레신, 조절 단백질, 이뮤노어드헤신(immunoadhesin), 항체. 미오스타틴, TALL-I을 포함하는 TALL 단백질, 아밀로이드-베타 단백질을 포함하나 이에 한정되지 않는 아밀로이드 단백질, 흉선 기질상 림포포이에틴("TSLP"), RANK 리간드("OPGL"), c-kit, TNF 수용체 1형을 포함하는 TNF 수용체, TRAIL-R2, 안지오포이에틴, 및 임의의 전술한 것의 생물학적 활성 단편 또는 유사체 또는 변이체.
예시적인 폴리펩티드 및 항체는 액티바제®(알테플라제); 알리로쿠맙; 아라네스프®(다베포에틴-알파), 에포젠®(에포에틴 알파, 또는 에리트로포이에틴); 아보넥스®(인터페론 β-Ia); 벡사르®(토시투모맙); 베타세론®(인터페론-β); 보코시주맙(L1L3으로 지정된 항-PCSK9 단클론 항체, US8080243 참고); 캄파스®(알렘투주맙); 디네포®(에포에틴 델타); 벨케이드®(보르테조밉); MLN0002(항-α4β7 mAb); MLN1202(항-CCR2 케모카인 수용체 mAb); 엔브렐®(에타네르셉트); 에프렉스®(에포에틴 알파); 에르비툭스®(세툭시맙); 에볼로쿠맙; 제노트로핀®(소마트로핀); 헤르셉틴®(트라스투주맙); 휴마트로페®(주사용 소마트로핀[rDNA 기원]); 휴미라®(아달리무맙); 인퍼겐®(인터페론 알파콘-1); 나트레코®(네시리타이드); 키네렛®(아나킨라), 류킨®(사가모스팀); 림포시드®(에프라투주맙); 벤리스타TM(벨리무맙); 메탈라제®(테넥테플라제); 밀세라®(메톡시 폴리에틸렌 글리콜-에포에틴 베타); 밀로타그®(젬투주맙 오조가마이신); 랍티바®(에팔리주맙); 심지아®(세르톨리주맙 페골); 솔리리스TM(에쿨리주맙); 펙셀리주맙(항-C5 보체); MEDI-524(누맥스®); 루센티스®(라니바이주맙); 에드레콜로맙(,파노렉스®); 트라비오®(레르델리무맙); 테라심 hR3(니모투주맙); 옴니타그(페르투주맙, 2C4); 오시뎀®(IDM-I); 오바렉스®(B43.13); 누비온®(비실리주맙); 칸투주맙 메르탄신(huC242-DMl); 네오레콜몬®(에포에틴 베타); 뉴메가®(오프렐베킨); 뉴라스타®(페길화 필가스트림, 페길화 G-CSF, 페길화 hu-Met-G-CSF); 뉴포겐®(필그라스팀); 오르토클론 OKT3®(무로모납-CD3), 프로크리트®(에포에틴 알파); 레미케이드®(인플릭시맙), 레오프로®(압식시맙), 악템라®(항-IL6 수용체 mAb), 아바스틴®(베바시주맙), 휴맥스-CD4(자놀리무맙), 리툭산®(리툭시맙); 타르세바®(에를로티닙); 로페론-A®-(인터페론 알파-2a); 시뮬렉트®(바실릭시맙); 스텔라라TM(우스테키누맙); 프렉시지®(루미라콕십); 시나기스®(팔리비주맙); 146B7-CHO(항-IL15 항체, US7153507 참고), 타이사브리®(나탈리주맙); 발로팀®(MDX-1303, 항-B. 안트라시스 보호성 항원 mAb); 에이비스락스TM; 벡티빅스®(파니투무맙); 솔에어®(오말리주맙), ETI211(항-MRSA mAb), IL-I 트랩(IL-I 수용체 구성요소(유형 I 수용체 및 수용체 보조 단백질)의 세포 외 도메인 및 인간 IgGl의 Fc 부분), VEGF 트랩(IgGl Fc에 융합된 VEGFRl의 Ig 도메인), 제나팍스®(다클리주맙); 제나팍스®(다클리주맙), 제발린®(이브리투모맙 티욱세탄), 제티아(에제티마이브), 아타시셉트(TACI-Ig), 항-α4β7 mAb(베돌리주맙); 갈릭시맙(항-CD80 단클론 항체), 항-CD23 mAb(루밀릭시맙); BR2-Fc(huBR3 / huFc 융합 단백질, 가용성 BAFF 길항제); 심포니TM(골리무맙); 마파투무맙(인간 항-TRAIL 수용체-1 mAb); 오크렐리주맙(항-CD20 인간 mAb); 휴맥스-EGFR(잘루투무맙); M200(볼록식시맙, 항-α5β1 인테그린 mAb); MDX-010(이필리무맙, 항-CTLA-4 mAb 및 VEGFR-I(IMC-18F1); 항-BR3 mAb; 항-C. 디피실레 독소 A 및 독소 B C mAb MDX-066(CDA-I) 및 MDX-1388); 항-CD22 dsFv-PE38 접합체(CAT-3888 및 CAT-8015); 항-CD25 mAb(휴맥스-TAC); 항-TSLP 항체; 항-TSLP 수용체 항체(US8101182); A5로 지정된 항-TSLP 항체(US7982016);(항-CD3 mAb(NI-0401); 아데카투무맙(MT201, 항-EpCAM-CD326 mAb); MDX-060, SGN-30, SGN-35(항-CD30 mAb); MDX-1333(항-IFNAR); 휴맥스 CD38(항-CD38 mAb); 항-CD40L mAb; 항-크립토(Cripto) mAb; 항-CTGF 특발성 폐 섬유증 제I상 피브로겐(FG-3019); 항-CTLA4 mAb; 항-에오탁신l mAb(CAT-213); 항-FGF8 mAb; 항-강글리오사이드 GD2 mAb; 항-스클레로스틴 항체(US8715663 또는 US7592429 참고) Ab-5로 지정된 항-스클레로스틴 항체(US8715663 또는 US7592429); 항-강글리오사이드 GM2 mAb; 항-GDF-8 인간 mAb(MYO-029); 항-GM-CSF 수용체 mAb(CAM-3001); 항-HepC mAb(휴맥스 HepC); MEDI-545, MDX-1103(항-IFNα mAb); 항-IGFIR mAb; 항-IGF-IR mAb(휴맥스-인플람); 항-IL12/IL23p40 mAb(브리아키누맙); 항-IL-23p19 mAb(LY2525623); 항-IL13 mAb(CAT-354); 항-IL-17 mAb(AIN457); 항-IL2Ra mAb(휴맥스-TAC); 항-IL5 수용체 mAb; 항-인테그린 수용체 mAb(MDX-Ol8, CNTO 95); 항-IPIO 궤양성 대장염 mAb(MDX- 1100); 항-LLY 항체; BMS-66513; 항-만노스 수용체/hCGβ mAb(MDX-1307); 항-메소텔린 dsFv-PE38 접합체(CAT-5001); 항-PDlmAb(MDX-1 106(ONO- 4538)); 항-PDGFRα 항체(IMC-3G3); 항-TGFβ mAb(GC-1008); 항-TRAIL 수용체-2 인간 mAb(HGS-ETR2); 항-TWEAK mAb; 항-VEGFR/Flt-1 mAb; 항- ZP3 mAb(휴맥스-ZP3); 및 서열번호 8 및 서열번호 6의 서열을 포함하는 아밀로이드-베타 단클론 항체(US7906625)를 포함한다.
방법 및 약학적 제형에 적합한 항체의 예는 표 1에 제시된 항체를 포함한다. 적합한 항체의 다른 예는 인플릭시맙, 베바시주맙, 세툭시맙, 라니비주맙, 팔리비주맙, 아바고보맙, 압식시맙, 악톡수맙, 아달리무맙, 아펠리모맙, 아푸투주맙, 알라시주맙, 알라시주맙 페골, ald518, 알렘투주맙, 알리로쿠맙, 알투모맙, 아마툭시맙, 아나투모맙 마페나톡스, 안루킨주맙, 아폴리주맙, 아르시투모맙, 아젤리주맙, 알티누맙, 아틀리주맙, 아토로리미우맙, 토실리주맙, 바피뉴주맙, 바실릭시맙, 바비툭시맙, 벡투모맙, 벨리무맙, 벤랄리주맙, 베르틸리무맙, 베실레소맙, 베바시주맙, 베즐로톡수맙, 비시로맙, 비바투주맙, 비바투주맙 메르탄신, 블리나투모맙, 블로소주맙, 브렌툭시맙 베도틴, 브리아키누맙, 브로달루맙, 카나키누맙, 칸투주맙 메르탄신, 칸투주맙 메르탄신, 카플라시주맙, 카프로맙 펜데타이드, 카르루맙, 카투막소맙, cc49, 세델리주맙, 세르톨리주맙 페골, 세툭시맙, 시타투주맙 보가톡스, 식수투무맙, 클라자키주맙, 클레놀릭시맙, 클리바투주맙 테트라세탄, 코나투무맙, 크레네주맙, cr6261, 다세투주맙, 다클리주맙, 달로투주맙, 다라투무맙, 뎀시주맙, 데노수맙, 데투모맙, 도르리모맙 아리톡스, 드로지투맙, 둘리고투맙, 두필루맙, 에크로멕시맙, 에쿨리주맙, 에도바코맙, 에드레콜로맙, 에팔리주맙, 에푼구맙, 엘로투주맙, 엘실리모맙, 에나바투주맙, 엔리모맙 페골, 에노키주맙, 에노티쿠맙, 엔시툭시맙, 에피투모맙 시툭세탄, 에프라투주맙, 에레누맙, 에를리주맙, 에르투막소맙, 에타라시주맙, 에트롤리주맙, 에볼로쿠맙, 엑스비비루맙, 파놀레소맙, 파랄리모맙, 팔레투주맙, 파시누맙, fbta05, 펠비주맙, 페자키누맙, 피클라투주맙, 피기투무맙, 플란보투맙, 폰톨리주맙, 포랄루맙, 포라비루맙, 프레솔리무맙, 풀라누맙, 푸툭시맙, 갈릭시맙, 가니투맙, 간테네루맙, 가빌리모맙, 젬투주맙 오조가미신, 게보키주맙, 기렌툭시맙, 글렘바투무맙 베도틴, 골리무맙, 고밀릭시맙, gs6624, 이발리주맙, 이브리투모맙 티우세탄, 이크루쿠맙, 이고보맙, 임시로맙, 임가투주맙, 인클라쿠맙, 인다툭시맙 라브탄신, 인플릭시맙, 인테투무맙, 이놀리모맙, 이노투주맙 오조가미신, 이필리무맙, 이라투무맙, 이톨리주맙, 익세키주맙, 켈릭시맙, 라베투주맙, 레브리키주맙, 레말레소맙, 레르델리무맙, 렉사투무맙, 리비비루맙, 리겔리주맙, 린투주맙, 리릴루맙, 로르보투주맙 메르탄신, 루카투무맙, 루밀릭시맙, 마파투무맙, 마슬리모맙, 마브릴리무맙, 마투주맙, 메폴리주맙, 메텔리무맙, 밀라투주맙, 민레투모맙, 미투모맙, 모가물리주맙, 모롤리무맙, 모타비주맙, 목세투모맙 파수도톡스, 무로모납-cd3, 나콜로맙 타페나톡스, 나밀루맙, 나프투모맙 에스타페나톡스, 나르나투맙, 나탈리주맙, 네바쿠맙, 네시투무맙, 네렐리모맙, 네스바쿠맙, 니모투주맙, 니볼루맙, 노페투모맙 메르펜탄, 오카라투주맙, 오크렐리주맙, 오둘리모맙, 오파투무맙, 올라라투맙, 올로키주맙, 오말리주맙, 오나르투주맙, 오포르투주맙 모나톡스, 오레고보맙, 오르티쿠맙, 오텔릭시주맙, 옥셀루맙, 오자네주맙, 오조랄리주맙, 파기박시맙, 팔리비주맙, 파니투무맙, 파노바쿠맙, 파르사투주맙, 파스콜리주맙, 파테클리주맙, 파트리투맙, 펨투모맙, 페라키주맙, 페르투주맙, 펙셀리주맙, 피딜리주맙, 핀투모맙, 플라쿨루맙, 포네주맙, 프릴릭시맙, 프리투무맙, PRO 140, 퀼리주맙, 라코투모맙, 라드레투맙, 라피비루맙, 라무시루맙, 라니비주맙, 락시바쿠맙, 레가비루맙, 레슬리주맙, 릴로투무맙, 리툭시맙, 로바투무맙, 롤레두맙, 로모소주맙, 론탈리주맙, 로벨리주맙, 루플리주맙, 사말리주맙, 사릴루맙, 사투모맙 펜데타이드, 세쿠키누맙, 세비루맙, 시브로투주맙, 시팔리무맙, 실툭시맙, 심투주맙, 시플리주맙, 시루쿠맙, 솔라네주맙, 솔리토맙, 소넵시주맙, 손투주맙, 스타물루맙, 술레소맙, 수비주맙, 타발루맙, 타카투주맙 테트라세탄, 타도시주맙, 탈리주맙, 타네주맙, 타플리투모맙 팝톡스, 테피바주맙, 텔리모맙 아리톡스, 테나투모맙, 테피바주맙, 테넬릭시맙, 테플리주맙, 테프로투무맙, 테제펠루맙, TGN1412, 트레멜리무맙, 티실리무맙, 틸드라키주맙, 티가투주맙, TNX-650, 토실리주맙, 토랄리주맙, 토시투모맙, 트랄로키누맙, 트라스투주맙, TRBS07, 트레갈리주맙, 투코투주맙 셀모류킨, 투비루맙, 유블리툭시맙, 유렐루맙, 유르톡사주맙, 유스테키누맙, 바팔릭시맙, 바텔리주맙, 베돌리주맙, 벨투주맙, 베팔리모맙, 베센쿠맙, 비실리주맙, 볼로식시맙, 보르세투주맙 마포도틴, 보투무맙, 잘루투무맙, 자놀리무맙, 자툭시맙, 지랄리무맙, 졸리모맙 아리톡스를 포함한다.
항체는 또한 아달리무맙, 베바시주맙, 블리나투모맙, 세툭시맙, 코나투무맙, 데노수맙, 에쿨리주맙, 에레누맙, 에볼로쿠맙, 인플릭시맙, 나탈리주맙, 파니투무맙, 릴로투무맙, 리툭시맙, 로모소주맙, 테제펠루맙, 및 트라스투주맙, 및 표 1로부터 선택된 항체들을 포함한다.
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
전술한 설명을 기반으로, 본 명세서에 기술된 장치, 시스템, 및 방법은 실질적으로 실시간 샘플 분석의 수행을 촉진함이 인정되어야 한다. 따라서, 종래의 공정에 의해 허용되는 것보다 훨씬 더 신속하게 분석을 수행하고 원하는 결과를 획득할 수 있다.
또한, 본 명세서에 기술된 장치, 시스템, 및 방법은 시스템(100)을 이용하여 온라인으로 실시간 분석을 준비하는 공정이 용이하게 모니터링되게 하며, 이는 결국 위험을 완화하고 생성물의 생산 운행을 연장시킬 수 있음이 인정되어야 한다. 특히, 이 공정은 예컨대, 제어기(132)와 같은 제어기를 이용하여 및/또는 시스템(100)의 작동자에 의해 수동으로, 시스템(100)의 조건이 최적인지, 즉, 이들이 사전 결정된 성능 역치를 만족하는지를 결정함으로써 모니터링될 수 있다. 도 3b와 도 3c에 도시된 바와 같이, 예를 들어, 4개의 기준 펩티드 RP1, RP2, RP3, 및 RP4에 대하여 이온 카운트 개수로 표시된 MS 피크 높이를 획득할 수 있고, 시스템(100)의 조건이 최적인지(및 최적의 조건)를 결정하기 위한 방법 정성화를 하는 동안 이러한 기준 펩티드에 대한 역사적 값과 비교할 수 있어, 생산 운행을 시작, 계속, 또는 연장할 수 있다. 그러나 시스템(100)의 조건이 최적이 아니라고 결정될 때, 폐쇄 시스템의 조건이 최적이 될 때까지 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정할 수 있다. 조정될 수 있는 세포 배양 구성요소의 예는 다음을 포함하나, 이에 한정되지 않는다: pH, 압력, 온도, 배지 흐름(예컨대, 배지 유속, 배지 공급 속도), 배지 내용물(아미노산, 영양분, 당, 완충제 포함), 기체 발생 전략(예컨대, 산소와 이산화탄소의 혼합, 기체 속도), 교반(예컨대, 교반 속도), 첨가제(예컨대, 금속 첨가제, 당 첨가제), 첨가제(예컨대, 거품억제) 공급 속도, 및 관류 속도. 일부 사례에서, 폐쇄 시스템의 조건이 최적이 되도록 하나의 세포 배양 구성요소만 조정될 필요가 있을 수 있고, 다른 사례에서는 복수의 세포 배양 구성요소가 조정될 필요가 있을 수 있다. 대안적으로, 조건이 최적이 아니라고 결정될 때, 또는 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정한 후에도 시스템(100)의 조건이 최적이 아닐 때, 제어기 및/또는 시스템(100)의 작동자가 시스템(100)을 정지할 수 있다.
이러한 방식으로, 본 명세서에 기술된 장치, 시스템, 및 방법은 또한 조건이 최적이 아닐 때 또는 그렇지 않으면 시스템(100)의 작동을 계속하는 것이 바람직하지 않을 때 시스템(100)의 계속된 작동과 관련된 위험을 완화한다. 특히, 현재의 시스템(100)의 작동과 관련된 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터, 예컨대, pH, 온도, 산소 용해, 세포 생존능, 세포 밀도, 역가, 응집, 투입량 변화, 글리코실화 등을 결정(예컨대, 계산 또는 획득)하고, 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터가 (제어기(132)와 같은 제어기에 의해 시스템(100)의 작동 전에 결정된 및/또는 시스템(100)의 작동자로부터의 입력에 반응하는) 사전 결정된 위험 역치를 만족하는지를 결정한 다음, 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하는지를 기반으로 시스템(100)의 작동을 계속, 중단, 또는 조정할지를 결정함으로써 위험이 완화될 수 있다. 사전 결정된 위험 역치는 예를 들어, (1) 이용 가능한 공정 파라미터 데이터 및 생성물 품질 데이터를 적용하여 시스템(100) 또는 일부 다른 유사한 시스템의 이전의 작동과 관련된 평균 역사적 다변량(MV) 데이터를 계산한 다음, (2) 계산된 평균 역사적 MV 데이터를 역치로 확립하는 것을 고려함으로써 결정될 수 있다(역치는 계산된 평균 역사적 MV 데이터 그 자체 또는 일부 값 또는 계산된 평균 역사적 MV 데이터를 기초로 한 값의 세트일 수 있다). 한 예에서, 사전 결정된 위험 역치는 계산된 평균 역사적 MV 데이터로부터의 허용 가능한 편차(예컨대, 3개의 표준 편차)를 나타낼 수 있다. 대안적으로 또는 추가적으로, 사전 결정된 위험 역치는 시스템(100)의 작동자로부터의 입력을 기초로 하여 결정될 수 있다. 일부 사례에서, 현재의 시스템(100) 작동과 관련된 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하지 않을 때(예컨대, 초과할 때) 시스템(100)은 정지될 수 있다. 그러나 다른 사례에서, 현재의 시스템(100) 작동과 관련된 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하지 않을 때(예컨대, 초과할 때) 또는 공정 파라미터 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하나, 이에 가까울 때에도 시스템(100)은 조정될 수 있다.
나아가, 출원인은 본 명세서에 기술된 장치, 시스템, 및 방법이 또한 시스템(100)을 사용하는 생산 운행이 연장될 수 있게 함을 발견하였다. 종래의 공정은 전형적으로 기껏해야 32일 내지 40일의 생산 운행을 허용한다. 그러나 출원인은 본 명세서에 기술된 장치, 시스템, 및 방법이 100의 개체군 배가가 아닌 경우 50 내지 80, 즉, 100일의 생산 운행이 아닌 경우 대략 50 내지 80을 허용함을 발견하였다. 따라서, 생성물이 품질 목표를 만족하고 위험이 완화됨을 확인하기 위하여 모든 시스템(100)의 작동이 모니터링되는 동안, 더 많은 생성물이 수득될 수 있다.
최선의 방식 또는 본 개시를 수행하기 위하여 발명자들에게 공지된 방식을 포함한 본 개시의 바람직한 구현예는 본 명세서에 기술되어 있다. 다수의 예가 본 명세서에 제시되고 기술되어 있지만, 당업자는 다양한 구현예의 세부 사항이 상호 배타적일 필요가 없음을 쉽게 이해할 것이다. 대신, 당업자는 본 명세서의 교시를 읽으면 하나의 구현예의 하나 이상의 특징을 나머지 구현예의 하나 이상의 특징과 조합할 수 있을 것이다. 나아가, 설명된 구현예는 오로지 예시적인 것으로, 본 개시의 범위를 제한하는 것으로 취급되어서는 안 된다는 점 또한 이해되어야 한다. 본 명세서에 달리 지시되지 않는 한 또는 그렇지 않으면 문맥에 의해 명백히 모순되지 않는 한, 본 명세서에 기술된 모든 방법은 임의의 적합한 순서로 수행될 수 있다. 본 명세서에 제공된 일체의 예, 또는 예시적인 언어(예컨대, "~와 같은")의 사용은 그저 본 개시의 예시적인 구현예(들)의 양태를 더 잘 설명하고자 한 것이며, 본 개시의 범위에 제한을 두지 않는다. 명세서에서 어떠한 언어도 본 개시의 실시에 필수적인 것으로서 임의의 청구되지 않은 요소를 지시하는 것으로 해석되어서는 안 된다.
SEQUENCE LISTING <110> AMGEN INC. Wu, Chao-Hsiang <120> SYSTEMS AND METHODS FOR PERFORMING A REAL-TIME ASSAY OF A SAMPLE <130> 32263/51800 <150> 62/539,803 <151> 2017-08-01 <160> 86 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 239 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Arg Leu Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp Val Pro 1 5 10 15 Gly Ser Ser Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro 20 25 30 Val Thr Leu Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gln Gln Arg 50 55 60 Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Ile Ser Asn Arg Phe 65 70 75 80 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Thr 100 105 110 Cys Met Gln Val Thr Gln Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg 115 120 125 Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 130 135 140 Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 145 150 155 160 Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 165 170 175 Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp 180 185 190 Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys 195 200 205 Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln 210 215 220 Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 2 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Met Asp Thr Leu Cys Tyr Thr Leu Leu Leu Leu Thr Thr Pro Ser Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Val Leu Leu Lys 20 25 30 Pro Thr Glu Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu 35 40 45 Ser Asn Ala Arg Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Leu Glu Trp Leu Ala His Ile Phe Ser Asn Asp Glu Lys Ser Tyr 65 70 75 80 Ile Thr Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 85 90 95 Ser Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 100 105 110 Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Ile Pro Leu Arg Ser Pro Gly Ala Phe Asp 115 120 125 Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 145 150 155 160 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 210 215 220 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro 225 230 235 240 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 245 250 255 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 305 310 315 320 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 3 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Asp Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Ser Tyr Phe Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Asp Arg Ser Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 4 <211> 463 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ser Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Lys Trp Leu Asp Gly Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 225 230 235 240 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 5 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Met Ala Trp Ala Leu Leu Leu Leu Thr Leu Leu Thr Gln Asp Thr Gly 1 5 10 15 Ser Trp Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Ser Gly Thr 20 25 30 Pro Gly Gln Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile 35 40 45 Gly Ser Asn Tyr Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro 50 55 60 Lys Leu Leu Ile Leu Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Gly Leu Arg Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp 100 105 110 Asp Ser Leu Ser Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val 115 120 125 Leu Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser 130 135 140 Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser 145 150 155 160 Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser 165 170 175 Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn 180 185 190 Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp 195 200 205 Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr 210 215 220 Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 235 <210> 6 <211> 479 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Leu Val Lys Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Asn Ala Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Gly Arg Ile Lys Ser Lys Thr Asp Gly Gly 65 70 75 80 Thr Thr Asp Tyr Thr Ala Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 85 90 95 Asp Asp Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ala 100 105 110 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Thr Asp Arg Thr Gly Tyr Ser 115 120 125 Ile Ser Trp Ser Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly 130 135 140 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 145 150 155 160 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 165 170 175 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 180 185 190 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 195 200 205 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 210 215 220 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 225 230 235 240 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 245 250 255 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 260 265 270 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 275 280 285 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 290 295 300 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 305 310 315 320 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 325 330 335 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 340 345 350 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 355 360 365 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 370 375 380 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 385 390 395 400 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 405 410 415 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 420 425 430 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 435 440 445 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 450 455 460 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 7 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 7 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Arg Gly Arg Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Ser Ser Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 8 <211> 467 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala Ile Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Gly Ile Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val Ile Met Ser Trp Phe 115 120 125 Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser 145 150 155 160 Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys 210 215 220 Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu 225 230 235 240 Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 9 <211> 242 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 9 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Leu Leu Asn Ser Val Asp Gly Ser Thr Asn Leu Asp Trp Tyr 50 55 60 Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Thr Leu Ser 65 70 75 80 Tyr Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly 85 90 95 Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly 100 105 110 Val Tyr Tyr Cys Met Gln Arg Ile Glu Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly 115 120 125 Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe 130 135 140 Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val 145 150 155 160 Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp 165 170 175 Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr 180 185 190 Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr 195 200 205 Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val 210 215 220 Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly 225 230 235 240 Glu Cys <210> 10 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 10 Met Glu Leu Gly Leu Cys Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Ser Ile Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Arg Tyr Tyr Gly Asp Thr Pro Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 210 215 220 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys 225 230 235 240 Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 11 <211> 233 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 11 Met Ser Pro Ser Gln Leu Ile Gly Phe Leu Leu Leu Trp Val Pro Ala 1 5 10 15 Ser Arg Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Phe Gln Ser Val 20 25 30 Thr Pro Lys Glu Lys Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile 35 40 45 Gly Ser Ser Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gln Ser Pro Lys 50 55 60 Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Gln Ser Phe Ser Gly Val Pro Ser Arg 65 70 75 80 Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asn Ser 85 90 95 Leu Glu Ala Glu Asp Ala Ala Ala Tyr Tyr Cys His Gln Ser Ser Ser 100 105 110 Leu Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr 115 120 125 Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu 130 135 140 Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro 145 150 155 160 Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly 165 170 175 Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr 180 185 190 Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His 195 200 205 Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val 210 215 220 Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 12 <211> 463 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Val Cys Ala Glu Val Gln Leu Met Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe 35 40 45 Ser Phe His Trp Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Ile Ile His Pro Gly Ala Ser Asp Thr Arg Tyr Ser 65 70 75 80 Pro Ser Phe Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Asn Ser Asn Ser 85 90 95 Ala Thr Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Gln Arg Glu Leu Asp Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 225 230 235 240 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 13 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser 35 40 45 Gln Asp Ile Asn Lys Tyr Val Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Trp Leu Gln Pro Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110 Tyr Asp Asn Leu Leu Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 14 <211> 467 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 14 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Arg Tyr Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Gln Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr 65 70 75 80 Ala Thr His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg 85 90 95 Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 100 105 110 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Thr Glu Gly Leu Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 15 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 15 Met Asp Met Arg Val Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Cys 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Ser Asn Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Ser Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Tyr Asp Ser Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 16 <211> 466 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Met Glu Leu Gly Leu Asn Trp Val Phe Leu Val Ala Ile Leu Glu Gly 1 5 10 15 Val His Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Tyr Ile Lys Gln Asp Gly Asn Glu Lys Tyr Tyr Val 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Ile Leu Trp Phe Gly Asp Leu Pro Thr 115 120 125 Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu 145 150 155 160 Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn 210 215 220 Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg 225 230 235 240 Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465 <210> 17 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 17 Met Asp Met Arg Leu Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp 1 5 10 15 Val Pro Gly Ser Ser Gly Asp Val Leu Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Leu Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu 50 55 60 Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly 115 120 125 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 130 135 140 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 165 170 175 Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220 His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240 Cys <210> 18 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Met Asp Thr Leu Cys Ser Thr Leu Leu Leu Leu Thr Ile Pro Ser Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys 20 25 30 Pro Thr Gln Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu 35 40 45 Arg Thr Ser Gly Met Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Leu Glu Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Ser Tyr 65 70 75 80 Asn Pro Ser Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys 85 90 95 Asn Gln Val Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala 100 105 110 Thr Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Asn Tyr Tyr Tyr Asp Asp Tyr Phe Ala 115 120 125 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly 145 150 155 160 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 210 215 220 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro 225 230 235 240 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 245 250 255 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn 305 310 315 320 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 19 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 19 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Ser Tyr Phe Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Thr Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Val 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Asp Arg Ser Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 20 <211> 463 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Ala Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Gly Tyr Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Ser Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Arg Trp Leu Asp Ala Phe Asp Ile Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 225 230 235 240 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 21 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Gly Tyr Leu Thr Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Asn Ser Leu Ser Arg Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 22 <211> 474 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 22 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys 65 70 75 80 Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Lys 85 90 95 Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Gly Gly Ile Ala Ala Ala Gly 115 120 125 Leu Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val 130 135 140 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 145 150 155 160 Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 165 170 175 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 180 185 190 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 195 200 205 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe 210 215 220 Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr 225 230 235 240 Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro 245 250 255 Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 260 265 270 Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 275 280 285 Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp 290 295 300 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 305 310 315 320 Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val 325 330 335 His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 340 345 350 Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly 355 360 365 Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 370 375 380 Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 385 390 395 400 Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 405 410 415 Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 420 425 430 Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 435 440 445 Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 450 455 460 Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 23 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 23 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Ser Ser Glu Leu Thr Gln Asp Pro Thr Val 20 25 30 Ser Val Ala Leu Gly Gln Thr Val Lys Ile Thr Cys Gln Gly Asp Ser 35 40 45 Leu Arg Ser Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Val Leu Val Phe Tyr Gly Lys Asn Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile 85 90 95 Thr Gly Ala Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Asn Ser Arg 100 105 110 Asp Ser Ser Val Tyr His Leu Val Leu Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr 115 120 125 Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro 130 135 140 Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile 145 150 155 160 Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly 165 170 175 Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser 180 185 190 Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln 195 200 205 Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser 210 215 220 Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 235 <210> 24 <211> 478 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu 20 25 30 Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly 35 40 45 Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr 65 70 75 80 Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr 85 90 95 Ser Ile Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Gln Met Ser Ile Ile Met Leu 115 120 125 Arg Gly Val Phe Pro Pro Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln 130 135 140 Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 145 150 155 160 Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 165 170 175 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 180 185 190 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 195 200 205 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 210 215 220 Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys 225 230 235 240 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val 245 250 255 Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe 260 265 270 Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro 275 280 285 Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val 290 295 300 Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr 305 310 315 320 Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val 325 330 335 Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 340 345 350 Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser 355 360 365 Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro 370 375 380 Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val 385 390 395 400 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 405 410 415 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp 420 425 430 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 435 440 445 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 450 455 460 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 25 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 25 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80 Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly 115 120 125 Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 130 135 140 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 165 170 175 Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220 His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240 Cys <210> 26 <211> 475 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys 65 70 75 80 Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 85 90 95 Ala Arg Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Val Leu Met Val Tyr Asp 115 120 125 Ile Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 130 135 140 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 145 150 155 160 Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 165 170 175 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 180 185 190 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 195 200 205 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn 210 215 220 Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 225 230 235 240 Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 260 265 270 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 275 280 285 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 290 295 300 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 305 310 315 320 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 325 330 335 Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 340 345 350 Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys 355 360 365 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 370 375 380 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 385 390 395 400 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 415 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 420 425 430 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 435 440 445 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 450 455 460 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 27 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 27 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80 Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95 His Leu Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Met Gln Thr Leu Gln Thr Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly 115 120 125 Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 130 135 140 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 165 170 175 Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220 His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240 Cys <210> 28 <211> 475 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Trp Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Ser Ile Lys Gln Asp Gly Ser Glu Lys 65 70 75 80 Tyr Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Ala Ile Ser Arg Asp Asn 85 90 95 Ala Lys Asn Ser Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Val Leu Met Val Tyr Asp 115 120 125 Ile Asp Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 130 135 140 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 145 150 155 160 Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 165 170 175 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 180 185 190 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 195 200 205 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn 210 215 220 Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 225 230 235 240 Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 260 265 270 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 275 280 285 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 290 295 300 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 305 310 315 320 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 325 330 335 Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 340 345 350 Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys 355 360 365 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 370 375 380 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 385 390 395 400 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 415 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 420 425 430 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 435 440 445 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 450 455 460 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 29 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 29 Met Thr Cys Ser Pro Leu Leu Leu Thr Leu Leu Ile His Cys Thr Gly 1 5 10 15 Ser Trp Ala Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala 20 25 30 Pro Gly Gln Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile 35 40 45 Gly Asn Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro 50 55 60 Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Thr Thr Leu Gly Ile Thr 85 90 95 Gly Leu Gln Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp 100 105 110 Ser Arg Leu Ser Ala Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val 115 120 125 Leu Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser 130 135 140 Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser 145 150 155 160 Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser 165 170 175 Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn 180 185 190 Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp 195 200 205 Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr 210 215 220 Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 235 <210> 30 <211> 475 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Phe Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Phe Asp Gly Ser Ile Lys Tyr Ser Val 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Phe Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Leu Asn Tyr Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr 115 120 125 Tyr His Tyr Lys Tyr Tyr Gly Met Ala Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 130 135 140 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 145 150 155 160 Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 165 170 175 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 180 185 190 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 195 200 205 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn 210 215 220 Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 225 230 235 240 Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro 245 250 255 Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 260 265 270 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 275 280 285 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 290 295 300 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 305 310 315 320 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 325 330 335 Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 340 345 350 Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys 355 360 365 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 370 375 380 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 385 390 395 400 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 405 410 415 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 420 425 430 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 435 440 445 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 450 455 460 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 475 <210> 31 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser 20 25 30 Val Ser Pro Gly Gln Thr Ala Thr Ile Thr Cys Ser Gly Asp Lys Leu 35 40 45 Gly Glu Arg Tyr Ala Ser Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser Pro 50 55 60 Val Leu Val Ile Tyr Gln Asp Ile Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Gly Thr Gln Ala Met Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Ala Trp Tyr 100 105 110 Ser Ser Thr Asn Val Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 115 120 125 Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser 130 135 140 Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro 165 170 175 Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn 180 185 190 Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys 195 200 205 Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val 210 215 220 Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 <210> 32 <211> 466 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 32 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Ala Glu Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Gln Glu Gly Ile Ala Pro Asp Ala Phe Asp 115 120 125 Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu 145 150 155 160 Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn 210 215 220 Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg 225 230 235 240 Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465 <210> 33 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 33 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Gly Arg Ala Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu 20 25 30 Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val 35 40 45 Ser Ser Ser Tyr Leu Ala Trp His Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly 100 105 110 Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 34 <211> 463 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 34 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Gly Arg Ala Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Thr Tyr Val Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Ser Ile Ser Gly Ser Gly Leu Gly Ser Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Glu Ala His Arg Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 225 230 235 240 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 35 <211> 239 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 35 Met Arg Leu Leu Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp Val Pro 1 5 10 15 Gly Ser Ser Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Ser Pro 20 25 30 Val Thr Leu Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Val His Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Leu Gln Gln Arg 50 55 60 Pro Gly Gln Pro Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Lys Phe Asn Arg Phe 65 70 75 80 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ala Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr 100 105 110 Cys Met Gln Ala Thr Gln Ile Pro Leu Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys 115 120 125 Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 130 135 140 Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 145 150 155 160 Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 165 170 175 Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp 180 185 190 Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys 195 200 205 Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln 210 215 220 Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 36 <211> 472 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 36 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Phe Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Tyr Val Trp Gly Ser Tyr Arg 115 120 125 Arg Asn Ser Asp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val 130 135 140 Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys 145 150 155 160 Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys 165 170 175 Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu 180 185 190 Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu 195 200 205 Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr 210 215 220 Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val 225 230 235 240 Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro 245 250 255 Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 305 310 315 320 Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly 340 345 350 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 37 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 37 Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Asp Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Arg Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ile 100 105 110 Asn Trp Pro Pro Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 38 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 38 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile 35 40 45 Ser Ile Tyr Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Val Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro 65 70 75 80 Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln 85 90 95 Phe Ser Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Tyr Asp Phe Trp Ser Gly Tyr Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 210 215 220 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys 225 230 235 240 Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 39 <211> 240 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 39 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala 20 25 30 Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Ile Leu Tyr Ser Ser Ser Asn Glu Asn Phe Leu Thr Trp Tyr Gln Gln 50 55 60 Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg 65 70 75 80 Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 85 90 95 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Gln Gln Tyr Phe Ser Val Phe Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr 115 120 125 Arg Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe 130 135 140 Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys 145 150 155 160 Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val 165 170 175 Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln 180 185 190 Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser 195 200 205 Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His 210 215 220 Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 240 <210> 40 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 40 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Gly Tyr Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Ser Ala 65 70 75 80 Gln Lys Phe Arg Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Gly Tyr Ser Tyr Gly Tyr Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 210 215 220 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys 225 230 235 240 Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 41 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 41 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Val Gln Pro Glu Asp Phe Val Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110 His Asn Ser Asn Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 42 <211> 473 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 42 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Met Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Asp Tyr Val 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Arg Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Lys Asp His Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr 115 120 125 Asn Tyr Tyr Tyr Gly Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 130 135 140 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 145 150 155 160 Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 165 170 175 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 180 185 190 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 195 200 205 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly 210 215 220 Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 225 230 235 240 Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys 245 250 255 Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 260 265 270 Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 275 280 285 Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 290 295 300 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 305 310 315 320 Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His 325 330 335 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 340 345 350 Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln 355 360 365 Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met 370 375 380 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 385 390 395 400 Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 405 410 415 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 420 425 430 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 435 440 445 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 450 455 460 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 43 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 43 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Tyr 35 40 45 Ile Ser Asn Thr Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ala Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Gly Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Thr Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 44 <211> 463 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Arg Phe Arg Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Pro Tyr Asp Trp Thr Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys 225 230 235 240 Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val 245 250 255 Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr 260 265 270 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 275 280 285 Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 290 295 300 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser 305 310 315 320 Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 325 330 335 Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile 340 345 350 Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro 355 360 365 Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu 370 375 380 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 385 390 395 400 Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser 405 410 415 Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 420 425 430 Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 435 440 445 His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 45 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Ser Asn Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Thr 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Ala Asn Ser Phe Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 46 <211> 469 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Thr Glu 20 25 30 Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Met Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly 35 40 45 Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly Ile Ile Asn Pro Ser Gly Asp Ser Thr 65 70 75 80 Ser Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr 85 90 95 Ser Thr Asn Thr Val Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Val Glu Val Arg Gly Ile Ser 115 120 125 His Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala 130 135 140 Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser 145 150 155 160 Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe 165 170 175 Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly 180 185 190 Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu 195 200 205 Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr 210 215 220 Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr 225 230 235 240 Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro 245 250 255 Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr 260 265 270 Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 275 280 285 Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 290 295 300 Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser 305 310 315 320 Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu 325 330 335 Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala 340 345 350 Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro 355 360 365 Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln 370 375 380 Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala 385 390 395 400 Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 405 410 415 Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 420 425 430 Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser 435 440 445 Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser 450 455 460 Leu Ser Pro Gly Lys 465 <210> 47 <211> 238 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala 20 25 30 Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val 35 40 45 Leu Tyr Ser Ala Asn His Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys 50 55 60 Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu 65 70 75 80 Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr 100 105 110 Cys His Gln Tyr Leu Ser Ser Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val 115 120 125 Gln Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro 130 135 140 Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu 145 150 155 160 Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn 165 170 175 Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser 180 185 190 Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala 195 200 205 Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly 210 215 220 Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 48 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 48 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Trp Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asn Pro Arg Asn Asp Tyr Thr Glu Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Asn Phe Lys Asp Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Asn 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Phe 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Asp Ile Thr Thr Phe Tyr Trp Gly Gln Gly 115 120 125 Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 130 135 140 Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu 145 150 155 160 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 165 170 175 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 180 185 190 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 195 200 205 Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro 210 215 220 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys 225 230 235 240 Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 49 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Arg Ser 100 105 110 Gly Gly Ser Ser Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 50 <211> 466 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Val Cys Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Asn Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Leu Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser 65 70 75 80 Pro Ser Phe Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met 100 105 110 Tyr Tyr Cys Gly Ser Gly Ser Tyr Phe Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg 115 120 125 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val 130 135 140 Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala 145 150 155 160 Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser 165 170 175 Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 180 185 190 Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro 195 200 205 Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys 210 215 220 Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp 225 230 235 240 Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465 <210> 51 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 51 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Leu Leu His Ser His Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80 Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Met Gln Gly Thr His Trp Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly 115 120 125 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 130 135 140 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 165 170 175 Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220 His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240 Cys <210> 52 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 52 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Gly Ser Thr Ile 65 70 75 80 Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 85 90 95 Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Leu Leu Asp Tyr Asp Leu Leu 115 120 125 Thr Gly Tyr Gly Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 53 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 53 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Gly 35 40 45 Ile Ser Arg Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Ser Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe 100 105 110 Gly Ser Ser Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 54 <211> 471 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 54 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Gln Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Ile 35 40 45 Ser Ser Gly Asp Tyr Phe Trp Ser Trp Ile Arg Gln Leu Pro Gly Lys 50 55 60 Gly Leu Glu Trp Ile Gly His Ile His Asn Ser Gly Thr Thr Tyr Tyr 65 70 75 80 Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Thr Ser Lys 85 90 95 Lys Gln Phe Ser Leu Arg Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala 100 105 110 Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Arg Gly Gly Asp Tyr Tyr Tyr Gly Met 115 120 125 Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 145 150 155 160 Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys 210 215 220 Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu 225 230 235 240 Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 260 265 270 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 275 280 285 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 290 295 300 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 305 310 315 320 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 325 330 335 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 340 345 350 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 355 360 365 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys 370 375 380 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 385 390 395 400 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 405 410 415 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 420 425 430 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 435 440 445 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 450 455 460 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 55 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 55 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Ser Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser 35 40 45 Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys Gln His 100 105 110 Phe Asp His Leu Pro Leu Ala Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 56 <211> 464 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 56 Met Lys His Leu Trp Phe Phe Leu Leu Leu Val Ala Ala Pro Arg Trp 1 5 10 15 Val Leu Ser Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser Val 35 40 45 Ser Ser Gly Asp Tyr Tyr Trp Thr Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Lys 50 55 60 Gly Leu Glu Trp Ile Gly His Ile Tyr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr 65 70 75 80 Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys 85 90 95 Thr Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala 100 105 110 Ile Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Arg Val Thr Gly Ala Phe Asp Ile Trp 115 120 125 Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro 130 135 140 Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr 145 150 155 160 Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr 165 170 175 Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro 180 185 190 Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr 195 200 205 Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp 210 215 220 His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys 225 230 235 240 Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser 245 250 255 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 260 265 270 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 275 280 285 Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 290 295 300 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val 305 310 315 320 Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 325 330 335 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr 340 345 350 Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu 355 360 365 Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys 370 375 380 Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser 385 390 395 400 Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp 405 410 415 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 420 425 430 Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 435 440 445 Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 57 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 57 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Ala Ser Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Asn Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr 100 105 110 Asp His Ser Ala Gly Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 58 <211> 460 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 58 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Val Ala Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Arg Asn Ala Met Phe Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Gly Ile Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp 65 70 75 80 Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 85 90 95 Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gln Gly Thr 115 120 125 Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 130 135 140 Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly 145 150 155 160 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 165 170 175 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 180 185 190 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 195 200 205 Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser 210 215 220 Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 225 230 235 240 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 245 250 255 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 260 265 270 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 275 280 285 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 290 295 300 Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr 305 310 315 320 Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 325 330 335 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr 340 345 350 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 355 360 365 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 370 375 380 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 385 390 395 400 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser 405 410 415 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 420 425 430 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 435 440 445 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 59 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 59 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser 20 25 30 Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala 50 55 60 Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr Gly Ile Pro 65 70 75 80 Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile 85 90 95 Ser Arg Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Arg Tyr 100 105 110 Gly Ser Ser His Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Ser Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 60 <211> 467 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 60 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Ala Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Val Cys Ala Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Val Ser Gly Tyr Phe Phe 35 40 45 Thr Thr Tyr Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Tyr Met Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser 65 70 75 80 Pro Ser Phe Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Gly Asn Trp Asn Cys Phe Asp Tyr Trp Gly 115 120 125 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser 130 135 140 Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala 145 150 155 160 Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val 165 170 175 Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala 180 185 190 Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val 195 200 205 Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His 210 215 220 Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys 225 230 235 240 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 61 <211> 241 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 61 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser 20 25 30 Leu Pro Val Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser 35 40 45 Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Tyr Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu 50 55 60 Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn 65 70 75 80 Arg Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 85 90 95 Asp Phe Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Met Gln Gly Thr His Trp Pro Leu Thr Phe Gly Gln Gly 115 120 125 Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile 130 135 140 Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val 145 150 155 160 Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys 165 170 175 Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu 180 185 190 Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu 195 200 205 Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr 210 215 220 His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu 225 230 235 240 Cys <210> 62 <211> 471 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 62 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly 20 25 30 Leu Val Lys Pro Ser Gly Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Ser Gly 35 40 45 Gly Ser Ile Ser Ser Ser Asn Trp Trp Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro 50 55 60 Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Gly Glu Ile Tyr His Ser Gly Ser Thr 65 70 75 80 Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Lys 85 90 95 Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Trp Thr Gly Arg Thr Asp Ala Phe 115 120 125 Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser 145 150 155 160 Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys 210 215 220 Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu 225 230 235 240 Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 260 265 270 Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 275 280 285 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 290 295 300 Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr 305 310 315 320 Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp 325 330 335 Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 340 345 350 Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg 355 360 365 Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 370 375 380 Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 385 390 395 400 Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 405 410 415 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 420 425 430 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser 435 440 445 Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser 450 455 460 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 63 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 63 Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Pro Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Val Pro Ala 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp 100 105 110 Asn Trp Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 64 <211> 461 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 64 Met Glu Trp Thr Trp Arg Val Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Arg Tyr Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Ser Thr Tyr Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Leu Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Arg Gln Leu Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly 115 120 125 Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe 130 135 140 Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu 145 150 155 160 Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp 165 170 175 Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu 180 185 190 Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser 195 200 205 Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro 210 215 220 Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu 225 230 235 240 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu 245 250 255 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu 260 265 270 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln 275 280 285 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 290 295 300 Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu 305 310 315 320 Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 325 330 335 Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys 340 345 350 Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 355 360 365 Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 370 375 380 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln 385 390 395 400 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly 405 410 415 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln 420 425 430 Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 435 440 445 His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 65 <211> 239 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 65 Met Arg Leu Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Met Leu Trp Ile Pro 1 5 10 15 Gly Ser Ser Ala Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser 20 25 30 Val Thr Pro Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Gly Gln Ser 35 40 45 Leu Leu His Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Tyr Trp Tyr Leu Gln Lys 50 55 60 Pro Gly Gln Pro Pro Gln Phe Leu Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Phe 65 70 75 80 Ser Arg Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Leu Arg Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Ile Tyr Tyr 100 105 110 Cys Met Gln Ser Ile Gln Leu Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Gln 115 120 125 Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 130 135 140 Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 145 150 155 160 Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 165 170 175 Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp 180 185 190 Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys 195 200 205 Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln 210 215 220 Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 66 <211> 459 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 66 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Gly Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Asn Asp Lys Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Leu Arg Val Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu 115 120 125 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 130 135 140 Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 145 150 155 160 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 165 170 175 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 180 185 190 Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn 195 200 205 Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 210 215 220 Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro 225 230 235 240 Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 245 250 255 Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 260 265 270 Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn 275 280 285 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 290 295 300 Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 305 310 315 320 Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 325 330 335 Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys 340 345 350 Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu 355 360 365 Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 370 375 380 Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu 385 390 395 400 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 405 410 415 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly 420 425 430 Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 435 440 445 Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 <210> 67 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 67 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Asp Ile Ser Ser Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ser Thr Ser Arg Leu Asn Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Asp Ile Lys His Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 115 120 125 Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu 130 135 140 Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln 165 170 175 Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser 180 185 190 Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu 195 200 205 Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser 210 215 220 Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 68 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 68 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Thr Asp Tyr Ile Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Asp Thr Glu Tyr Asn 65 70 75 80 Glu Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ser Ile Tyr Tyr Tyr Asp Ala Pro Phe Ala Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 210 215 220 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys 225 230 235 240 Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 69 <211> 233 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 69 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Gly Arg Ala Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala 20 25 30 Pro Gly Gln Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Leu Gly Ser 35 40 45 Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu 50 55 60 Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Trp Ile Pro Glu Arg Phe 65 70 75 80 Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Gly 85 90 95 Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser 100 105 110 Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly 115 120 125 Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu 130 135 140 Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe 145 150 155 160 Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val 165 170 175 Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys 180 185 190 Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser 195 200 205 His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu 210 215 220 Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 <210> 70 <211> 467 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 70 Met Gly Ser Thr Ala Ile Leu Gly Leu Leu Leu Ala Val Leu Gln Gly 1 5 10 15 Gly Arg Ala Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Arg Thr Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys His Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Asn Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Pro Gln Trp Glu Leu Val His Glu Ala Phe 115 120 125 Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser 145 150 155 160 Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys 210 215 220 Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu 225 230 235 240 Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 71 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 71 Met Gly Val Pro Thr His Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Ile Thr 1 5 10 15 His Ala Ile Cys Asp Ile Arg Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser 20 25 30 Ala Ser Leu Gly Glu Thr Val Asn Ile Glu Cys Leu Ala Ser Glu Asp 35 40 45 Ile Tyr Ser Asp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro 50 55 60 Gln Leu Leu Ile Tyr Asn Ala Asn Ser Leu Gln Asn Gly Val Pro Ser 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile Asn 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asn 100 105 110 Asn Tyr Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg 115 120 125 Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Thr Glu Gln 130 135 140 Leu Ala Thr Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Leu Met Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Asp Ile Ser Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Thr Glu Arg Arg 165 170 175 Asp Gly Val Leu Asp Ser Val Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Ser Leu Thr Lys Ala Asp Tyr Glu Ser 195 200 205 His Asn Leu Tyr Thr Cys Glu Val Val His Lys Thr Ser Ser Ser Pro 210 215 220 Val Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys 225 230 <210> 72 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 72 Met Asp Ile Arg Leu Ser Leu Ala Phe Leu Val Leu Phe Ile Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Ala Asn Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Asp Tyr Ala Met Ala Trp Val Arg Gln Ser Pro Lys Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Thr Ile Ile Tyr Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Arg 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Thr 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Leu Gly Ile Ala Thr Asp Tyr Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Val Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Glu Thr Thr Ala 130 135 140 Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Thr Ala Leu Lys Ser Asn Ser 145 150 155 160 Met Val Thr Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly Ala Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Gly Leu Tyr Thr Leu Thr Ser Ser Val Thr 195 200 205 Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala 210 215 220 His Pro Ala Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asn 225 230 235 240 Cys Gly Gly Asp Cys Lys Pro Cys Ile Cys Thr Gly Ser Glu Val Ser 245 250 255 Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr 260 265 270 Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Gln Asp Asp 275 280 285 Pro Glu Val His Phe Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr 290 295 300 Ala Gln Thr Arg Pro Pro Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser 305 310 315 320 Val Ser Glu Leu Pro Ile Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Arg Thr 325 330 335 Phe Arg Cys Lys Val Thr Ser Ala Ala Phe Pro Ser Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Pro Glu Gly Arg Thr Gln Val Pro His Val Tyr Thr 355 360 365 Met Ser Pro Thr Lys Glu Glu Met Thr Gln Asn Glu Val Ser Ile Thr 370 375 380 Cys Met Val Lys Gly Phe Tyr Pro Pro Asp Ile Tyr Val Glu Trp Gln 385 390 395 400 Met Asn Gly Gln Pro Gln Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Pro Pro Thr Met 405 410 415 Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Asn Val Lys Lys 420 425 430 Glu Lys Trp Gln Gln Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu 435 440 445 Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 73 <211> 237 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 73 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Glu Ser Ala Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val 20 25 30 Ser Gly Ser Pro Gly Gln Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser 35 40 45 Ser Asp Val Gly Gly Tyr Asn Ser Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro 50 55 60 Gly Lys Ala Pro Lys Leu Met Ile Tyr Glu Val Ser Asn Arg Pro Ser 65 70 75 80 Gly Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser 85 90 95 Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 100 105 110 Asn Ser Tyr Thr Ser Thr Ser Met Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 115 120 125 Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro 130 135 140 Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu 145 150 155 160 Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp 165 170 175 Ser Ser Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln 180 185 190 Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu 195 200 205 Gln Trp Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly 210 215 220 Ser Thr Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 235 <210> 74 <211> 460 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 74 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Leu 35 40 45 Thr Ser Tyr Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Val Ser Phe Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Leu Gln Gly Arg Gly Thr Met Thr Thr Asp Pro Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr 115 120 125 Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro 130 135 140 Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly 145 150 155 160 Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn 165 170 175 Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln 180 185 190 Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser 195 200 205 Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser 210 215 220 Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys 225 230 235 240 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 245 250 255 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 260 265 270 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 275 280 285 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 290 295 300 Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr 305 310 315 320 Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 325 330 335 Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr 340 345 350 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 355 360 365 Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 370 375 380 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 385 390 395 400 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser 405 410 415 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 420 425 430 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 435 440 445 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 75 <211> 234 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 75 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser 20 25 30 Val Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Val Ser Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro 50 55 60 Arg Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ala Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala 65 70 75 80 Arg Val Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser 85 90 95 Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn 100 105 110 Asn Trp Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 115 120 125 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 130 135 140 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 145 150 155 160 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 165 170 175 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 180 185 190 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 195 200 205 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 210 215 220 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 <210> 76 <211> 472 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 76 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly 20 25 30 Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 35 40 45 Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Glu Gly Leu Glu Trp Val Ala Ala Ile Trp Phe Asp Ala Ser Asp Lys 65 70 75 80 Tyr Tyr Ala Asp Ala Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn 85 90 95 Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Asp Gln Ala Ile Phe Gly Val Val 115 120 125 Pro Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 130 135 140 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr 145 150 155 160 Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 165 170 175 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 180 185 190 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 195 200 205 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile 210 215 220 Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val 225 230 235 240 Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 245 250 255 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 260 265 270 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 275 280 285 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 290 295 300 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Cys Glu Glu Gln 305 310 315 320 Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Cys Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 325 330 335 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 340 345 350 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 355 360 365 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr 370 375 380 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 385 390 395 400 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 405 410 415 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 420 425 430 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 435 440 445 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 450 455 460 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 77 <211> 231 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 77 Met Ala Trp Ile Pro Leu Phe Leu Gly Val Leu Ala Tyr Cys Thr Gly 1 5 10 15 Ser Val Ala Ser Tyr Glu Val Thr Gln Ala Pro Ser Val Ser Val Ser 20 25 30 Pro Gly Gln Thr Ala Ser Ile Thr Cys Ser Gly Asp Lys Leu Gly Asp 35 40 45 Lys Tyr Ala Cys Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu 50 55 60 Val Ile Tyr Gln Asp Ser Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe 65 70 75 80 Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Thr 85 90 95 Gln Ala Met Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Trp Asp Ser Ser 100 105 110 Thr Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro 115 120 125 Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu 130 135 140 Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro 145 150 155 160 Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Ser Ser Pro Val Lys Ala 165 170 175 Gly Val Glu Thr Thr Thr Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala 180 185 190 Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg 195 200 205 Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr 210 215 220 Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 <210> 78 <211> 467 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 78 Met Asp Trp Thr Trp Ser Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Gly Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Ile Pro Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Ser Ala 65 70 75 80 Gln Lys Leu Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Phe Cys Ala Arg Asp Arg Asp Tyr Gly Val Asn Tyr Asp Ala Phe 115 120 125 Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr 130 135 140 Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser 145 150 155 160 Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu 165 170 175 Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His 180 185 190 Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser 195 200 205 Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys 210 215 220 Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu 225 230 235 240 Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala 245 250 255 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 260 265 270 Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 275 280 285 Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 290 295 300 His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe 305 310 315 320 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly 325 330 335 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile 340 345 350 Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val 355 360 365 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser 370 375 380 Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu 385 390 395 400 Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 405 410 415 Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 420 425 430 Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 435 440 445 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser 450 455 460 Pro Gly Lys 465 <210> 79 <211> 235 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 79 Met Ala Trp Ala Pro Leu Leu Leu Thr Leu Leu Ala His Cys Thr Gly 1 5 10 15 Ser Trp Ala Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser 20 25 30 Pro Gly Lys Thr Val Ala Ile Ser Cys Thr Arg Asn Ser Gly Ser Ile 35 40 45 Ala Ser Asn Ser Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ser Pro 50 55 60 Thr Thr Val Ile Phe Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp 65 70 75 80 Arg Phe Ser Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Gly Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser 100 105 110 Tyr Asp Ser Asn Asn Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val 115 120 125 Leu Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser 130 135 140 Ser Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser 145 150 155 160 Asp Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser 165 170 175 Pro Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn 180 185 190 Asn Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp 195 200 205 Lys Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr 210 215 220 Val Glu Lys Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser 225 230 235 <210> 80 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 80 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala Leu Leu Arg Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Val Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Gly Tyr Asp Tyr Gly Glu Asp Tyr Tyr Tyr 115 120 125 Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 81 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 81 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu Leu Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Gly Asp Thr Leu Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 82 <211> 468 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 82 Met Asp Trp Thr Trp Arg Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Ala Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Asp Tyr Asn Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Glu Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Ala Gly Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Tyr Asp Asp Ile Tyr Asp Asp Trp Tyr 115 120 125 Phe Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser 130 135 140 Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr 145 150 155 160 Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro 165 170 175 Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val 180 185 190 His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser 195 200 205 Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr 210 215 220 Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val 225 230 235 240 Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val 245 250 255 Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 260 265 270 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285 His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 290 295 300 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr 305 310 315 320 Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn 325 330 335 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro 340 345 350 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 355 360 365 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val 370 375 380 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 385 390 395 400 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 405 410 415 Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 420 425 430 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 435 440 445 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 450 455 460 Ser Pro Gly Lys 465 <210> 83 <211> 240 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 83 Met Val Leu Gln Thr Gln Val Phe Ile Ser Leu Leu Leu Trp Ile Ser 1 5 10 15 Gly Ala Tyr Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala 20 25 30 Val Ser Leu Gly Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Val Leu Asp Ser Ser Asp Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 50 55 60 Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Asn Arg 65 70 75 80 Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 85 90 95 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Asp Pro Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr 115 120 125 Lys Val Asp Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe 130 135 140 Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys 145 150 155 160 Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val 165 170 175 Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln 180 185 190 Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser 195 200 205 Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His 210 215 220 Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 240 <210> 84 <211> 465 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 84 Met Asp Trp Thr Trp Ser Ile Leu Phe Leu Val Ala Ala Pro Thr Gly 1 5 10 15 Ala His Ser Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Ser Tyr Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Met Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala 65 70 75 80 Gln Lys Leu Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Glu Ser Trp Phe Gly Glu Val Phe Phe Asp Tyr 115 120 125 Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 130 135 140 Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser 145 150 155 160 Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val 165 170 175 Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe 180 185 190 Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val 195 200 205 Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 210 215 220 Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys 225 230 235 240 Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 245 250 255 Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser 260 265 270 Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 275 280 285 Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 290 295 300 Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 305 310 315 320 Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 325 330 335 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys 340 345 350 Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr 355 360 365 Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr 370 375 380 Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu 385 390 395 400 Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu 405 410 415 Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 420 425 430 Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 435 440 445 Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 450 455 460 Lys 465 <210> 85 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 85 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Val Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Ser Ser Trp Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Asn Tyr Tyr Cys Gln Gln 100 105 110 Ala Asn Ser Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 86 <211> 466 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 86 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Leu Arg Gly Ala Arg Cys Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu 20 25 30 Val Lys Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Val Ser Gly 35 40 45 Tyr Thr Leu Ser Asp Leu Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly 50 55 60 Lys Gly Leu Glu Trp Met Gly Gly Phe Asp Pro Gln Asp Gly Glu Thr 65 70 75 80 Ile Tyr Ala Gln Lys Phe Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Glu Asp Thr 85 90 95 Ser Thr Asp Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp 100 105 110 Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Gly Ser Ser Ser Ser Trp Phe Asp 115 120 125 Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu 145 150 155 160 Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn 210 215 220 Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg 225 230 235 240 Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly 245 250 255 Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile 260 265 270 Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu 275 280 285 Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 290 295 300 Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg 305 310 315 320 Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys 325 330 335 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu 340 345 350 Lys Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr 355 360 365 Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu 370 375 380 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp 385 390 395 400 Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met 405 410 415 Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp 420 425 430 Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His 435 440 445 Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro 450 455 460 Gly Lys 465

Claims (77)

  1. 실시간 분석을 수행하는 방법으로, 다음 단계를 포함하는 방법:
    (a) 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일(holding coil)을 통해 폴리펩티드 결합 컬럼으로 이동시키는 단계;
    (b) 샘플의 폴리펩티드를 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합시켜, 샘플의 폴리펩티드를 샘플의 나머지로부터 분리하는 단계;
    (c) 제1 지지 코일을 통해, 완충제 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼으로 이동시켜, 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류의 제2 지지 코일을 통해, 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 폴리펩티드를 용리시키고, 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 제2 지지 코일로 이동시키는 단계;
    (d) 용리/폴리펩티드 혼합물을 제2 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시키는 단계;
    (e) 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드를 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성된 폴리펩티드를 생성하는 단계;
    (f) (e) 후에 제1 지지 코일을 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계;
    (g) 변성된 폴리펩티드를 환원 시약과 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성 및 환원된 폴리펩티드를 생성하는 단계;
    (h) (g) 후에 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계;
    (i) 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화 시약과 반응 챔버에서 인큐베이션하여 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화하는 단계;
    (j) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일을 통해 반응 챔버로부터 단백질 가수분해 완충제로 평형화된 탈염 컬럼으로 이동시키는 단계;
    (k) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 탈염 컬럼에 적용하여, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 환원 시약 및 알킬화 시약으로부터 분리하여 탈염된 폴리펩티드를 생성하는 단계;
    (l) 탈염된 폴리펩티드를 탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시키는 단계;
    (m) 제3 폴리펩티드 컬럼에서 탈염된 폴리펩티드를 소화시켜, 소화된 폴리펩티드를 생성하는 단계; 및
    (n) 소화된 폴리펩티드를 소화된 폴리펩티드 분석을 위한 분석 장치로 이동시키는 단계.
  2. 제1항에 있어서, (a), (c), (d), (f), (h), (i), (l), 및 (n) 중 하나 이상은 자동으로 수행되는 것인, 방법.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, (a)부터 (n)까지 폐쇄 시스템에서 수행되는 것인, 방법.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, (a)는 제1 지지 코일과 폴리펩티드 결합 컬럼이 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 유동적으로 연결되는 제1 위치로 다중 포트 밸브를 위치시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  5. 제4항에 있어서, (d)는 제2 지지 코일과 반응 챔버가 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 유동적으로 연결되는 제2 위치로 다중 포트 밸브를 위치시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  6. 제5항에 있어서, (f)와 (h) 각각은 제1 지지 코일과 반응 챔버가 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 유동적으로 연결되는 제3 위치로 다중 포트 밸브를 위치시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  7. 제6항에 있어서, (j)는 다음 단계를 포함하는 것인, 방법:
    변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버로부터 탈염 컬럼으로 이동시키는 단계; 및
    제1 지지 코일과 탈염 컬럼이 다중 포트 밸브의 제4 포트를 통해 유동적으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브를 위치시키는 단계.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, (d) 전 또는 (d) 중에, 반응 챔버에 유동적으로 연결되고 반응 챔버 하류에 위치된 제1 밸브를, 제1 밸브가 반응 챔버의 부피를 초과하는 제1 지지 코일로부터 받은 내용물을 폐기물 챔버로 유도하는 제1 위치로 이동시키는 단계를 더 포함하는, 방법.
  9. 제8항에 있어서, (i) 후에, 제1 밸브를 제1 위치로부터 제1 밸브가 공기를 반응 챔버로 유도하는 제2 위치로 이동시키는 단계를 더 포함하는, 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, (k) 후 및 (l) 전에, (o) 탈염 컬럼 및 단백질 가수분해 효소 컬럼에 유동적으로 연결되고 탈염 컬럼과 단백질 가수분해 효소 컬럼 사이에 위치된 제2 밸브를, 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 폐기물 챔버로 유도하는 제1 위치로부터, 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 유도하는 제2 위치로 이동시키는 단계를 더 포함하는, 방법.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, (a)는 폴리펩티드를 함유하는 용기로부터의 생성물의 샘플을 제1 지지 코일을 통해 폴리펩티드 결합 컬럼으로 이동시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, (d) 전에, 반응 챔버를 변성 시약으로 적어도 부분적으로 충전하는 단계를 더 포함하며, (e)는 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드를 반응 챔버의 변성 시약과 인큐베이션하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  13. 제12항에 있어서, 반응 챔버를 변성 시약으로 적어도 부분적으로 충전하는 단계는 제1 지지 코일을 통해 변성 완충제 공급원으로부터 변성 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 챔버에 열을 가하는 단계를 더 포함하는, 방법.
  15. 제12항에 있어서, (j)는 제1 지지 코일을 통해 반응 챔버로부터 변성 시약을 탈염 컬럼으로 이동시키는 단계를 더 포함하며, (k)는 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 변성 시약으로부터 더 분리하는 것인, 방법.
  16. 다중 포트 밸브, 다중 포트 밸브 상류의 제1 지지 코일, 다중 포트 밸브의 제1 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제1 포트 하류의 폴리펩티드 결합 컬럼, 폴리펩티드 결합 컬럼에 유동적으로 연결된, 폴리펩티드 결합 컬럼 하류의 제2 지지 코일, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트 하류의 반응 챔버, 다중 포트 밸브의 제4 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제4 포트 하류의 탈염 컬럼, 및 탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼을 포함하는 폐쇄 시스템을 이용하는 실시간 분석을 수행하는 방법으로, 다음 단계를 포함하는 방법:
    (a) 폐쇄 시스템에 통신으로 연결된 제어기를 통해 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일로 이동시키는 단계;
    (b) 제어기를 통해, 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼에 연결되는 제1 위치로 다중 포트 밸브를 위치시켜, 샘플이 제1 컬럼으로 흘러 샘플의 폴리펩티드가 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합하는 단계;
    (c) 다중 포트 밸브가 제1 위치에 있을 때, 제어기를 통해, 용리 완충액 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼을 통해 제2 지지 코일로 이동시켜, 용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키는 단계;
    (d) 제어기를 통해, 제2 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제2 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키는 단계;
    (e) 다중 포트 밸브가 제2 위치에 있을 때, 제어기를 통해, 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 반응 챔버로 이동시켜, 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드가 변성되는 단계;
    (f) 제어기를 통해, 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제3 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키는 단계;
    (g) (f) 후에, 제어기를 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 제어기를 통해 환원 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성된 폴리펩티드를 환원시키는 단계;
    (h) (g) 후에, 제어기를 통해 술프하이드릴 기를 알킬화하는 알킬화 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 제어기를 통해 알킬화제를 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화하는 단계;
    (i) 제어기를 통해 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제3 포트를 통해 반응 챔버로부터 제1 지지 코일로 이동시키는 단계;
    (j) 제어기를 통해 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제4 포트를 통해 탈염 컬럼으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키고, 다중 포트 밸브가 제4 위치에 있을 때, 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일로부터 탈염 컬럼으로 이동시켜, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 탈염 컬럼에 적용되어, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 환원 시약 및 알킬화 시약으로부터 분리하여, 탈염된 폴리펩티드를 생성하는 단계;
    (k) 제어기를 통해 탈염된 폴리펩티드를 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시켜, 탈염된 폴리펩티드가 소화되는 단계; 및
    (l) 제어기를 통해 소화된 폴리펩티드를 분석 장치로 전달하여, 소화된 폴리펩티드가 분석되는 단계.
  17. 제16항에 있어서, (a)는 제어기를 통해 폴리펩티드를 함유하는 용기로부터 샘플을 제1 지지 코일로 이동시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  18. 제16항 또는 제17항에 있어서, (k)는 소화된 폴리펩티드를 액체 크로마토그래피 장치, 고성능 액체 크로마토그래피 장치, 초고성능 액체 크로마토그래피 장치, 질량 분광분석법 장치, 및 글리칸 분석 장치, 또는 이의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 분석 장치로 전달하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  19. 제16항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, (e) 전에, 제어기를 통해 다중 포트 밸브를 제3 위치로 이동시키고, 제어기를 통해 변성 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계를 더 포함하는, 방법.
  20. 제19항에 있어서, 변성 시약을 반응 챔버로 이동시키는 단계는, 제어기를 통해 변성 시약을 펌프를 통해 변성 완충제 공급원으로부터 제1 지지 코일로 이동시키고, 제어기를 통해 변성 시약을 제1 지지 코일로부터 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버로 이동시키는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  21. 제19항 또는 제20항에 있어서, (i)는 변성 시약을 반응 챔버로부터 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로 이동시키는 단계를 더 포함하고, (j)는 변성 시약을 제1 지지 코일로부터 탈염 컬럼으로 이동시키는 단계를 더 포함하고, 이에 의해 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 탈염 컬럼에 적용될 때, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 변성 시약으로부터 더 분리되는 것인, 방법.
  22. 온라인, 실시간 분석을 수행하기 위한 폐쇄 시스템으로, 다음을 포함하는 시스템:
    폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 수용하도록 유동적으로 배열된 제1 지지 코일;
    제1 지지 코일에 유동적으로 연결되고 제1 지지 코일 하류에 위치된 다중 포트 밸브;
    다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 샘플을 수용하도록 배열된 폴리펩티드 결합 컬럼으로, 샘플로부터 폴리펩티드를 결합하도록 구성된 폴리펩티드 결합 컬럼,
    용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼으로부터 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키도록, 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류에 위치된 제2 지지 코일에 용리 완충액을 공급하도록 배열된 완충제 공급원;
    다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼으로부터 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 혼합물을 수용하도록, 다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 폴리펩티드 결합 컬럼의 하류에 배열된 반응 챔버로서, 혼합물의 폴리펩티드는 반응 챔버에서 변성되고, 반응 챔버는 제1 지지 코일 및 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 이황화 결합 가교를 절단하는 환원 시약을 수용하도록 배열되며, 환원 시약은 변성된 폴리펩티드를 환원시키고, 반응 챔버는 제1 지지 코일 및 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 수용하도록 추가 배열되며, 알킬화 시약은 변성 및 환원된 폴리펩티드를 반응 챔버에서 알킬화하는 것인, 반응 챔버;
    다중 포트 밸브에 유동적으로 연결되고 반응 챔버로부터 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 및 알킬화 시약을 수용하도록 배열된 탈염 컬럼으로, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약으로부터 분리하도록 구성된 탈염 컬럼; 및
    탈염 컬럼으로부터 분리된 폴리펩티드를 수득하도록 제2 폴리펩티드 컬럼에 유동적으로 연결되고 제2 폴리펩티드 컬럼 하류에 배열된 단백질 가수분해 효소 컬럼으로, 탈염된 폴리펩티드를 소화하도록 구성된 단백질 가수분해 효소 컬럼.
  23. 제22항에 있어서, 폴리펩티드를 함유하는 생성물을 생산하도록 구성된 생물반응기를 더 포함하며, 제1 지지 코일은 생물반응기에 유동적으로 연결되는 것인, 시스템.
  24. 제22항 또는 제23항에 있어서, 다중 포트 밸브는 12 위성 포트와 중앙 공유 포트 밸브를 포함하는 것인, 시스템.
  25. 제22항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 폴리펩티드 결합 컬럼은 단백질 A 컬럼, 단백질 G 컬럼, 단백질 A/G 컬럼, 단백질 L 컬럼, 아미노산 컬럼, 아비딘 컬럼, 스트렙타비딘 컬럼, 탄수화물 결합 컬럼, 탄수화물 컬럼, 글루타티온 컬럼, 헤파린 컬럼, 소수성 상호작용 컬럼, 면역친화도 컬럼, 뉴클레오티드/보조효소 컬럼, 특별 컬럼, 및 고정화된 금속 친화도 크로마토그래피(IMAC) 컬럼으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  26. 제22항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 생물반응기로부터 제1 지지 코일로 생성물의 샘플을 펌핑하도록 구성된 펌프를 더 포함하는, 시스템.
  27. 제22항 내지 제26항 중 어느 한 항에 있어서, 환원 시약은 디티오트레이톨(DTT), 글루타티온, β-메르캅토에탄올(β-ME), 및 트리스(2-카복시에틸)포스핀(TCEP)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  28. 제22항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 알킬화 시약은 인돌-3-아세트산(IAA)인 것인, 시스템.
  29. 제22항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 탈염 컬럼은 크기 배제 크로마토그래피 컬럼인 것인, 시스템.
  30. 제22항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 단백질 가수분해 효소 컬럼은 단백질 가수분해 효소를 포함하고, 단백질 가수분해 효소는 엔도펩티다제인 것인, 시스템.
  31. 제30항에 있어서, 엔도펩티다제는 트립신, 키모트립신, 엘라스타제, 써몰리신, 펩신, 글루타밀 엔도펩티다제, 네프릴리신, Lys-C 프로테아제, 및 스태필로코커스 아우레우스 V8 프로테아제로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  32. 제22항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 챔버는 변성 시약으로 적어도 부분적으로 사전 충전되는 것인, 시스템.
  33. 제32항에 있어서, 제1 지지 코일을 통해 변성 완충제 공급원으로부터 반응 챔버로 변성 시약을 펌핑하도록 구성된 펌프를 더 포함하는, 시스템.
  34. 제32항 또는 제33항에 있어서, 변성 시약은 변성 세제 또는 카오트로프를 포함하는 것인, 시스템.
  35. 제34항에 있어서, 카오트로프는 요소, n-부탄올, 에탄올, 염화 구아니디늄, 과염소산 리튬, 아세트산 리튬, 염화 마그네슘, 페놀, 2-프로판올, 및 티오우레아로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  36. 제34항에 있어서, 변성 세제는 황산도데실 나트륨(SDS), 콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨, 글리코콜산 나트륨, 타우로콜산 나트륨, 타우로데옥시콜산 나트륨, N-라우로일사르코신, 황산도데실 리튬, 브롬화 헥사데실트리메틸 암모늄(CTAB) 및 브롬화 트리메틸(테트라데실) 암모늄(TTAB)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  37. 제36항에 있어서, 변성 세제는 SDS인 것인, 시스템.
  38. 제32항에 있어서, 변성 시약은 가열된 유체를 포함하는 것인, 시스템.
  39. 제22항 내지 제38항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 챔버에 바로 인접하여 위치된 가열 요소를 더 포함하며, 가열 요소는 반응 챔버에 열을 가하도록 구성된 것인, 시스템.
  40. 제39항에 있어서, 열은 약 22℃에서 약 120℃ 사이의 온도를 갖는 것인, 시스템.
  41. 제40항에 있어서, 열은 약 40℃ 온도를 갖는 것인, 시스템.
  42. 제22항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 챔버에 유동적으로 연결되고 반응 챔버 하류에 위치된 제1 밸브를 더 포함하며, 제1 밸브는, 제1 밸브가 반응 챔버의 부피를 초과하는 제1 지지 코일로부터 받은 내용물을 폐기물로 유도하는 제1 위치 및 제1 밸브가 공기를 반응 챔버로 유도하는 제2 위치에서 작동 가능한 것인, 시스템.
  43. 제42항에 있어서, 제1 밸브의 위치를 제어하기 위하여 제1 밸브에 통신으로 연결된 제어기를 더 포함하며, 제어기는 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 변성 시약, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 반응 챔버로부터 탈염 컬럼으로 이동시키기 전에 제1 밸브를 제1 위치로부터 제2 위치로 이동시키는 것인, 시스템.
  44. 제22항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, 탈염 컬럼 및 단백질 가수분해 효소 컬럼에 유동적으로 연결되고 탈염 컬럼과 단백질 가수분해 효소 컬럼 사이에 위치된 제2 밸브를 더 포함하며, 제2 밸브는, 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 폐기물로 유도하는 제1 위치 및 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 유도하는 제2 위치에서 작동 가능한 것인, 시스템.
  45. 제44항에 있어서, 제2 밸브의 위치를 제어하기 위하여 제2 밸브에 통신으로 연결된 제어기를 더 포함하며, 제어기는 탈염 컬럼이 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드를 용리 완충액, 변성 시약, 환원 시약, 및 알킬화 시약으로부터 분리한 후에 제2 밸브를 제1 위치로부터 제2 위치로 이동시키는 것인, 시스템.
  46. 제22항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 반응 챔버에 통신으로 연결된 제어기를 더 포함하며, 제어기는 반응 챔버를 대략 섭씨 40도의 온도로 유지하도록 구성된 것인, 시스템.
  47. 제22항 내지 제41항 중 어느 한 항에 있어서, 다중 포트 밸브에 통신으로 연결된 제어기를 더 포함하며, 제어기는 다중 포트 밸브의 제1, 제2, 제3, 및 제4 포트를 선택적으로 개방하고 폐쇄하도록 구성된 것인, 시스템.
  48. 실시간 분석을 수행하기 위한 폐쇄 시스템으로, 다음을 포함하는 시스템:
    다중 포트 밸브;
    다중 포트 밸브 상류의 제1 지지 코일;
    다중 포트 밸브의 제1 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제1 포트 하류의 폴리펩티드 결합 컬럼;
    폴리펩티드 결합 컬럼에 유동적으로 연결된, 폴리펩티드 결합 컬럼 하류의 제2 지지 코일;
    다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제2 및 제3 포트 하류의 반응 챔버;
    다중 포트 밸브의 제4 포트에 유동적으로 연결된, 다중 포트 밸브의 제4 포트 하류의 탈염 컬럼;
    탈염 컬럼 하류의 단백질 가수분해 효소 컬럼; 및
    다중 포트 밸브에 통신으로 연결되며 메모리, 프로세서, 및 메모리에 저장되고 프로세서에 의해 실행 가능한 로직을 포함하여 다음을 수행하는 제어기:
    (a) 폴리펩티드를 함유하는 생성물의 샘플을 제1 지지 코일로 이동시킨다;
    (b) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제1 포트를 통해 폴리펩티드 결합 컬럼에 연결되는 제1 위치로 다중 포트 밸브를 위치시켜, 샘플이 제1 컬럼으로 흘러 샘플의 폴리펩티드가 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합하게 한다;
    (c) 다중 포트 밸브가 제1 위치에 있을 때 용리 완충액 공급원으로부터 용리 완충액을 폴리펩티드 결합 컬럼을 통해 제2 지지 코일로 이동시켜, 용리 완충액이 폴리펩티드 결합 컬럼에 결합된 실질적으로 모든 폴리펩티드를 용리시키게 한다;
    (d) 제2 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제2 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제2 위치로 다중 포트 밸브를 이동시킨다;
    (e) 다중 포트 밸브가 제2 위치에 있을 때 용리 완충액 및 용리된 폴리펩티드를 포함하는 용리/폴리펩티드 혼합물을 반응 챔버로 이동시켜, 용리/폴리펩티드 혼합물의 폴리펩티드가 변성되게 한다;
    (f) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 반응 챔버에 연결되는 제3 위치로 다중 포트 밸브를 이동시킨다;
    (g) (f) 후에, 이황화 결합을 절단하는 환원 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 환원 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성된 폴리펩티드를 환원시킨다;
    (h) (g) 후에, 술프하이드릴을 알킬화하는 알킬화 시약을 제1 지지 코일로 이동시키고, 알킬화제를 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시켜, 변성 및 환원된 폴리펩티드를 알킬화한다;
    (i) 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제3 포트를 통해 반응 챔버로부터 제1 지지 코일로 이동시킨다;
    (j) 제1 지지 코일이 다중 포트 밸브의 제4 포트를 통해 탈염 컬럼으로 연결되는 제4 위치로 다중 포트 밸브를 이동시키고, 다중 포트 밸브가 제4 위치에 있을 때, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드, 용리 완충액, 환원 시약, 및 알킬화 시약을 제1 지지 코일로부터 탈염 컬럼으로 이동시켜, 변성, 환원, 및 알킬화된 폴리펩티드가 탈염되게 한다;
    (k) 탈염된 폴리펩티드를 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 이동시켜, 탈염된 폴리펩티드가 소화되게 한다;
    (l) 소화된 폴리펩티드를 글리칸 분석 장치로 전달하여, 소화된 폴리펩티드가 분리 및 정량화되게 한다.
  49. 제48항에 있어서, 폴리펩티드 결합 컬럼은 단백질 A 컬럼, 단백질 G 컬럼, 단백질 A/G 컬럼, 단백질 L 컬럼, 아미노산 컬럼, 아비딘 컬럼, 스트렙타비딘 컬럼, 탄수화물 결합 컬럼, 탄수화물 컬럼, 글루타티온 컬럼, 헤파린 컬럼, 소수성 상호작용 컬럼, 면역친화도 컬럼, 뉴클레오티드/보조효소 컬럼, 특별 컬럼, 및 고정화된 금속 친화도 크로마토그래피(IMAC) 컬럼으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  50. 제48항 또는 제49항에 있어서, 생성물을 함유하는 생물반응기로부터 제1 지지 코일로 생성물의 샘플을 펌핑하도록 구성된 펌프를 더 포함하는, 시스템.
  51. 제48항 내지 제50항 중 어느 한 항에 있어서, 환원 시약은 디티오트레이톨(DTT), 글루타티온, β-메르캅토에탄올(β-ME), 및 트리스(2-카복시에틸)포스핀(TCEP)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  52. 제48항에 있어서, 알킬화 시약은 인돌-3-아세트산(IAA)인 것인, 시스템.
  53. 제48항에 있어서, 탈염 컬럼은 크기 배제 크로마토그래피 컬럼인 것인, 시스템.
  54. 제48항에 있어서, 단백질 가수분해 효소 컬럼은 단백질 가수분해 효소를 포함하고, 단백질 가수분해 효소는 엔도프로테아제인 것인, 시스템.
  55. 제54항에 있어서, 엔도프로테아제는 트립신, 키모트립신, 엘라스타제, 써몰리신, 펩신, 글루타밀 엔도펩티다제, 네프릴리신, Lys-C 프로테아제, 및 스태필로코커스 아우레우스 V8 프로테아제로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  56. 제48항에 있어서, (e) 전에, 로직은 프로세서에 의해 실행 가능하여 다중 포트 밸브를 제3 위치로 이동시키고, 변성 시약을 반응 챔버로 이동시키는 것인, 시스템.
  57. 제56항에 있어서, 로직은 프로세서에 의해 실행 가능하여 변성 시약을 제1 지지 코일 상류에 배열된 펌프를 통해 변성 완충제 공급원으로부터 제1 지지 코일로 이동시키고, 변성 시약을 다중 포트 밸브의 제3 포트를 통해 제1 지지 코일로부터 반응 챔버로 이동시키는 것인, 시스템.
  58. 제56항 또는 제57항에 있어서, 변성 시약은 변성 세제 또는 카오트로프를 포함하는 것인, 시스템.
  59. 제58항에 있어서, 카오트로프는 요소, n-부탄올, 에탄올, 염화 구아니디늄, 과염소산 리튬, 아세트산 리튬, 염화 마그네슘, 페놀, 2-프로판올, 및 티오우레아로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  60. 제58항에 있어서, 변성 세제는 황산도데실 나트륨(SDS), 콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨, 글리코콜산 나트륨, 타우로콜산 나트륨, 타우로데옥시콜산 나트륨, N-라우로일사르코신, 황산도데실 리튬, 브롬화 헥사데실트리메틸 암모늄(CTAB) 및 브롬화 트리메틸(테트라데실) 암모늄(TTAB)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 시스템.
  61. 제60항에 있어서, 변성 세제는 SDS인 것인, 시스템.
  62. 제57항 또는 제58항에 있어서, 변성 시약은 열을 포함하는 것인, 시스템.
  63. 제56항 내지 제62항 중 어느 한 항에 있어서, (e) 전에 또는 (e) 중에, 로직은 프로세서에 의해 실행 가능하여 반응 챔버에 열을 가하는 것인, 시스템.
  64. 제62항 또는 제63항에 있어서, 열은 약 22℃에서 약 120℃까지의 온도를 갖는 것인, 시스템.
  65. 제64항에 있어서, 열은 약 40℃ 온도를 갖는 것인, 시스템.
  66. 제48항에 있어서, 반응 챔버에 유동적으로 연결되고 반응 챔버 하류에 위치된 제1 밸브를 더 포함하며, 제1 밸브는, 제1 밸브가 반응 챔버의 부피를 초과하는 제1 지지 코일로부터 받은 내용물을 폐기물 챔버로 유도하는 제1 위치 및 제1 밸브가 공기를 반응 챔버로 유도하는 제2 위치에서 작동 가능하며, 제어기는 제1 밸브의 위치를 제어하기 위하여 제1 밸브에 통신으로 연결되고, 제어기는 (h) 후에 제1 밸브를 제1 위치로부터 제2 위치로 이동시키는 것인, 시스템.
  67. 제48항에 있어서, 탈염 컬럼 및 단백질 가수분해 효소 컬럼에 유동적으로 연결되고 탈염 컬럼과 단백질 가수분해 효소 컬럼 사이에 위치된 제2 밸브를 더 포함하며, 제2 밸브는, 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 폐기물 챔버로 유도하는 제1 위치 및 제2 밸브가 탈염 컬럼으로부터 받은 내용물을 단백질 가수분해 효소 컬럼으로 유도하는 제2 위치에서 작동 가능하며, 제어기는 제2 밸브의 위치를 제어하기 위하여 제2 밸브에 통신으로 연결되고, 제어기는 (j) 후에 제2 밸브를 제1 위치로부터 제2 위치로 이동시키는 것인, 시스템.
  68. 제48항에 있어서, 제어기는 반응 챔버에 통신으로 연결되며, 제어기는 반응 챔버를 대략 40℃ 온도로 유지하도록 구성된 것인, 시스템.
  69. 생성물의 폴리펩티드는 치료적 폴리펩티드인 것인, 제1항 내지 제21항의 방법 또는 제22항 내지 제68항의 시스템.
  70. 제69항에 있어서, 치료적 폴리펩티드는 항체 또는 이의 항원-결합 단편, 항체 또는 항체 단편의 유도체, 및 융합 폴리펩티드로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 방법 또는 시스템.
  71. 제70항에 있어서, 항체는 다음으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 방법 또는 시스템: 인플릭시맙, 베바시주맙, 라니비주맙, 세툭시맙, 라니비주맙, 팔리비주맙, 아바고보맙, 압식시맙, 악톡수맙, 아달리무맙, 아펠리모맙, 아푸투주맙, 알라시주맙, 알라시주맙 페골, ald518, 알렘투주맙, 알리로쿠맙, 알렘투주맙, 알투모맙, 아마툭시맙, 아나투모맙 마페나톡스, 안루킨주맙, 아폴리주맙, 아르시투모맙, 아젤리주맙, 알티누맙, 아틀리주맙, 아토로리미우맙, 토실리주맙, 바피뉴주맙, 바실릭시맙, 바비툭시맙, 벡투모맙, 벨리무맙, 벤랄리주맙, 베르틸리무맙, 베실레소맙, 베바시주맙, 베즐로톡수맙, 비시로맙, 비바투주맙, 비바투주맙 메르탄신, 블리나투모맙, 블로소주맙, 브렌툭시맙 베도틴, 브리아키누맙, 브로달루맙, 카나키누맙, 칸투주맙 메르탄신, 칸투주맙 메르탄신, 카플라시주맙, 카프로맙 펜데타이드, 카르루맙, 카투막소맙, cc49, 세델리주맙, 세르톨리주맙 페골, 세툭시맙, 시타투주맙 보가톡스, 식수투무맙, 클라자키주맙, 클레놀릭시맙, 클리바투주맙 테트라세탄, 코나투무맙, 크레네주맙, cr6261, 다세투주맙, 다클리주맙, 달로투주맙, 다라투무맙, 뎀시주맙, 데노수맙, 데투모맙, 도르리모맙 아리톡스, 드로지투맙, 둘리고투맙, 두필루맙, 에크로멕시맙, 에쿨리주맙, 에도바코맙, 에드레콜로맙, 에팔리주맙, 에푼구맙, 엘로투주맙, 엘실리모맙, 에나바투주맙, 엔리모맙 페골, 에노키주맙, 에노키주맙, 에노티쿠맙, 에노티쿠맙, 엔시툭시맙, 에피투모맙 시툭세탄, 에프라투주맙, 에를리주맙, 에르투막소맙, 에타라시주맙, 에트롤리주맙, 엑스비비루맙, 엑스비비루맙, 파놀레소맙, 파랄리모맙, 팔레투주맙, 파시누맙, fbta05, 펠비주맙, 페자키누맙, 피클라투주맙, 피기투무맙, 플란보투맙, 폰톨리주맙, 포랄루맙, 포라비루맙, 프레솔리무맙, 풀라누맙, 푸툭시맙, 갈릭시맙, 가니투맙, 간테네루맙, 가빌리모맙, 젬투주맙 오조가미신, 게보키주맙, 기렌툭시맙, 글렘바투무맙 베도틴, 골리무맙, 고밀릭시맙, gs6624, 이발리주맙, 이브리투모맙 티우세탄, 이크루쿠맙, 이고보맙, 임시로맙, 임가투주맙, 인클라쿠맙, 인다툭시맙 라브탄신, 인플릭시맙, 인테투무맙, 이놀리모맙, 이노투주맙 오조가미신, 이필리무맙, 이라투무맙, 이톨리주맙, 익세키주맙, 켈릭시맙, 라베투주맙, 레브리키주맙, 레말레소맙, 레르델리무맙, 렉사투무맙, 리비비루맙, 리겔리주맙, 린투주맙, 리릴루맙, 로르보투주맙 메르탄신, 루카투무맙, 루밀릭시맙, 마파투무맙, 마슬리모맙, 마브릴리무맙, 마투주맙, 메폴리주맙, 메텔리무맙, 밀라투주맙, 민레투모맙, 미투모맙, 모가물리주맙, 모롤리무맙, 모타비주맙, 목세투모맙 파수도톡스, 무로모납-cd3, 나콜로맙 타페나톡스, 나밀루맙, 나프투모맙 에스타페나톡스, 나르나투맙, 나탈리주맙, 네바쿠맙, 네시투무맙, 네렐리모맙, 네스바쿠맙, 니모투주맙, 니볼루맙, 노페투모맙 메르펜탄, 오카라투주맙, 오크렐리주맙, 오둘리모맙, 오파투무맙, 올라라투맙, 올로키주맙, 오말리주맙, 오나르투주맙, 오포르투주맙 모나톡스, 오레고보맙, 오르티쿠맙, 오텔릭시주맙, 옥셀루맙, 오자네주맙, 오조랄리주맙, 파기박시맙, 팔리비주맙, 파니투무맙, 파노바쿠맙, 파르사투주맙, 파스콜리주맙, 파테클리주맙, 파트리투맙, 펨투모맙, 페라키주맙, 페르투주맙, 펙셀리주맙, 피딜리주맙, 핀투모맙, 플라쿨루맙, 포네주맙, 프릴릭시맙, 프리투무맙, PRO 140, 퀼리주맙, 라코투모맙, 라드레투맙, 라피비루맙, 라무시루맙, 라니비주맙, 락시바쿠맙, 레가비루맙, 레슬리주맙, 릴로투무맙, 리툭시맙, 로바투무맙, 롤레두맙, 로모소주맙, 론탈리주맙, 로벨리주맙, 루플리주맙, 사말리주맙, 사릴루맙, 사투모맙 펜데타이드, 세쿠키누맙, 세비루맙, 시브로투주맙, 시팔리무맙, 실툭시맙, 심투주맙, 시플리주맙, 시루쿠맙, 솔라네주맙, 솔리토맙, 소넵시주맙, 손투주맙, 스타물루맙, 술레소맙, 수비주맙, 타발루맙, 타카투주맙 테트라세탄, 타도시주맙, 탈리주맙, 타네주맙, 타플리투모맙 팝톡스, 테피바주맙, 텔리모맙 아리톡스, 테나투모맙, 테피바주맙, 텔리모맙 아리톡스, 테나투모맙, 테넬릭시맙, 테플리주맙, 테프로투무맙, 테제펠루맙, TGN1412, 트레멜리무맙, 티실리무맙, 틸드라키주맙, 티가투주맙, TNX-650, 토실리주맙, 토랄리주맙, 토시투모맙, 트랄로키누맙, 트라스투주맙, TRBS07, 트레갈리주맙, 트레멜리무맙, 투코투주맙 셀모류킨, 투비루맙, 유블리툭시맙, 유렐루맙, 유르톡사주맙, 유스테키누맙, 바팔릭시맙, 바텔리주맙, 베돌리주맙, 벨투주맙, 베팔리모맙, 베센쿠맙, 비실리주맙, 볼로식시맙, 보르세투주맙 마포도틴, 보투무맙, 잘루투무맙, 자놀리무맙, 자툭시맙, 지랄리무맙, 졸리모맙 아리톡스 및 표 1에 제시된 항체들.
  72. 제70항에 있어서, 치료적 폴리펩티드는 당단백질, CD 폴리펩티드, HER 수용체 폴리펩티드, 세포 부착 폴리펩티드, 성장 인자 폴리펩티드, 인슐린 폴리펩티드, 인슐린 관련 폴리펩티드, 응고 폴리펩티드, 응고 관련 폴리펩티드, 알부민, IgE, 혈액형 항원, 콜로니 자극 인자, 수용체, 신경영양 인자, 인터페론, 인터류킨, 바이러스 항원, 지질단백질, 칼시토닌, 글루카곤, 심방나트륨 이뇨인자, 폐 계면활성제, 종양 괴사 인자-알파 및 -베타, 엔케팔리나제, 마우스 성선자극호르몬 관련 펩티드, DNAse, 인히빈, 액티빈, 인테그린, 단백질 A, 단백질 D, 류마티스성 인자, 면역독소, 골 형태형성 단백질, 초과산화물 디스뮤타제, 표면 막 폴리펩티드, 붕괴 촉진 인자, AIDS 외피, 수송 폴리펩티드, 귀소(homing) 수용체, 아드레신, 조절 폴리펩티드, 이뮤노어드헤신, 미오스타틴, TALL 폴리펩티드, 아밀로이드 폴리펩티드, 흉선 기질상 림포포이에틴, RANK 리간드, c-kit 폴리펩티드, TNF 수용체, 및 안지오포이에틴, 및 이의 생물학적 활성 단편, 유사체 또는 변이체로 구성된 군으로부터 선택된 폴리펩티드인 것인, 방법 또는 시스템.
  73. 제22항 또는 제48항의 폐쇄 시스템에 의해 수행되는 온라인, 실시간 분석을 모니터링하는 방법으로, 다음 단계를 포함하는 방법:
    폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족하는지를 결정하는 단계; 및
    폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족하지 않는다고 결정될 때, 폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족할 때까지 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정하는 단계.
  74. 제73항에 있어서, 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정하는 단계는 pH, 압력, 온도, 배지 흐름, 배지 내용물, 기체 발생 전략, 교반, 첨가제 함량, 첨가제 공급 속도, 또는 관류 속도 중 하나 이상을 조정하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  75. 제22항 또는 제48항의 폐쇄 시스템을 이용한 생산 운행을 연장하는 방법으로, 다음 단계를 포함하는 방법:
    폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족하는지를 결정하는 단계; 및
    폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족하지 않는다고 결정될 때, 폐쇄 시스템의 조건이 사전 결정된 성능 역치를 만족할 때까지 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정하는 단계.
  76. 제75항에 있어서, 적어도 하나의 세포 배양 구성요소를 조정하는 단계는 pH, 압력, 온도, 배지 흐름, 배지 함량, 기체 발생 전략, 교반, 첨가제 함량, 첨가제 공급 속도, 또는 관류 속도 중 하나 이상을 조정하는 단계를 포함하는 것인, 방법.
  77. 위험을 완화하는 방법으로서, 다음 단계를 포함하는 방법:
    제22항 또는 제48항의 폐쇄 시스템의 작동과 관련된 공정 및 생성물 품질 데이터를 결정하는 단계;
    공정 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하는지를 결정하는 단계; 및
    공정 및 생성물 품질 데이터가 사전 결정된 위험 역치를 만족하는지를 기반으로 폐쇄 시스템의 작동을 계속, 조정, 또는 중단할지를 결정하는 단계.
KR1020207005649A 2017-08-01 2018-08-01 질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법 Active KR102560646B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762539803P 2017-08-01 2017-08-01
US62/539,803 2017-08-01
PCT/US2018/044887 WO2019028187A1 (en) 2017-08-01 2018-08-01 SYSTEMS AND METHODS FOR REAL-TIME PREPARATION OF A POLYPEPTIDE SAMPLE FOR MASS SPECTROMETRY ANALYSIS

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20200035093A true KR20200035093A (ko) 2020-04-01
KR102560646B1 KR102560646B1 (ko) 2023-07-27

Family

ID=63350600

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020207005649A Active KR102560646B1 (ko) 2017-08-01 2018-08-01 질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법

Country Status (15)

Country Link
US (2) US12104995B2 (ko)
EP (1) EP3662287B1 (ko)
JP (1) JP7237022B2 (ko)
KR (1) KR102560646B1 (ko)
CN (1) CN110869768B (ko)
AU (1) AU2018309027B2 (ko)
BR (1) BR112020001885A2 (ko)
CL (1) CL2020000248A1 (ko)
EA (1) EA202090399A1 (ko)
ES (1) ES2978396T3 (ko)
IL (1) IL271499B2 (ko)
MA (1) MA49757A (ko)
SG (1) SG11202000727SA (ko)
WO (1) WO2019028187A1 (ko)
ZA (1) ZA202001218B (ko)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2020001171A (es) 2017-08-01 2020-03-12 Amgen Inc Sistemas y metodos para realizar un ensayo de glicanos en tiempo real de una muestra.
ES2978396T3 (es) 2017-08-01 2024-09-11 Amgen Inc Sistemas y métodos para la preparación en tiempo real de una muestra de polipéptidos para el análisis por espectrometría de masas
JP7483731B2 (ja) * 2019-02-14 2024-05-15 アムジエン・インコーポレーテツド 試料の調製及びその試料のリアルタイムアッセイの実施のためのシステム及び方法
FR3096459B1 (fr) * 2019-05-20 2024-03-08 Ct Hospitalier Universitaire Montpellier Procédé de préparation d’un échantillon peptidique
US20230242655A1 (en) 2019-12-03 2023-08-03 Evotec International Gmbh Interferon-associated antigen binding proteins and uses thereof
CN115552215A (zh) 2020-05-08 2022-12-30 沃特世科技公司 用于热辅助酶消化的方法
US12411064B2 (en) 2020-05-08 2025-09-09 Waters Technologies Corporation Methods for heat-assisted enzyme digestion
EP4326766A1 (en) * 2021-04-23 2024-02-28 Amgen Inc. Anti-tslp antibody compositions and uses thereof
KR20230175245A (ko) * 2021-04-23 2023-12-29 암젠 인크 변형된 항-tslp 항체
WO2023164672A2 (en) * 2022-02-24 2023-08-31 Venn Biosciences Corporation Sample preparation for glycoproteomic analysis that includes diagnosis of disease
US12110324B2 (en) 2022-07-22 2024-10-08 Flagship Pioneering Innovations Vi, Llc Antigen binding molecules targeting thymic stromal lymphopoietin (TSLP)
EP4673750A2 (en) * 2023-03-01 2026-01-07 Wisconsin Alumni Research Foundation High throughput infusion peptide mapping
US20260015427A1 (en) 2024-06-25 2026-01-15 Kiniksa Pharmaceuticals, Gmbh Formulations of anti-interleukin 1 receptor 1 antibodies

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1194816A (ja) * 1997-09-22 1999-04-09 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 高速液体クロマトグラフ分析装置
US20040009567A1 (en) * 2001-12-28 2004-01-15 Mds Proteomics Inc. Enzyme/chemical reactor based protein processing method for proteomics analysis by mass spectrometry
KR20170042610A (ko) * 2014-08-19 2017-04-19 엘리멘탈 사이언티픽, 인코포레이티드 시린지 전달을 포함하는 질량분석기용 초청정 오토샘플러

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2120327A1 (en) * 1991-09-30 1993-04-15 Noubar B. Afeyan Protein chromatography system
CA2146177C (en) * 1995-04-03 2000-09-05 Adrian P. Wade Intelligent flow analysis network
JP3737516B2 (ja) * 1995-06-26 2006-01-18 パーセプティブ バイオシステムズ，インコーポレーテッド 高速自動化連続流、多次元分子選別および分析
EP1300679A3 (en) * 1995-06-26 2004-04-14 Perseptive Biosystems, Inc. Molecular selection and analysis
US20080153711A1 (en) * 2000-02-08 2008-06-26 Regents Of The University Of Michigan Protein microarray system
US6887429B1 (en) * 2001-01-26 2005-05-03 Global Fia Apparatus and method for automated medical diagnostic tests
RS51829B (sr) 2001-08-23 2012-02-29 Genmab A/S. Ljudska antitela specifična za interleukin 15 (il-15)
US20040053356A1 (en) 2001-12-28 2004-03-18 Mds Proteomics Inc. Enzyme/chemical reactor based protein processing method for proteomics analysis by mass spectrometry
AU2003220188A1 (en) * 2002-03-11 2003-09-29 President And Fellows Of Harvard College Detection and quantification of modified proteins
US20040009597A1 (en) 2002-07-03 2004-01-15 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of PTPRK expression
WO2004063719A2 (en) * 2003-01-13 2004-07-29 The Regents Of The University Of Michigan Method to form a protein microarray system
TW200508936A (en) * 2003-03-12 2005-03-01 Bionova Corp The establishment of proteome structure profile databases and their uses
WO2005000226A2 (en) * 2003-06-06 2005-01-06 Diversa Corporation Mixed bed multi-dimensional chromatography systems and methods of making and using them
US7906625B2 (en) 2005-01-24 2011-03-15 Amgen Inc. Humanized anti-amyloid antibody
US8003108B2 (en) 2005-05-03 2011-08-23 Amgen Inc. Sclerostin epitopes
US7592429B2 (en) 2005-05-03 2009-09-22 Ucb Sa Sclerostin-binding antibody
CN102027012A (zh) 2007-06-20 2011-04-20 Irm责任有限公司 用于治疗变应性疾病的方法和组合物
AU2008291358A1 (en) 2007-08-31 2009-03-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Glycosylation profile analysis
US7982016B2 (en) 2007-09-10 2011-07-19 Amgen Inc. Antigen binding proteins capable of binding thymic stromal lymphopoietin
TWI516501B (zh) 2008-09-12 2016-01-11 禮納特神經系統科學公司 Ｐｃｓｋ９拮抗劑類
MX2012003538A (es) 2009-10-09 2012-08-03 Symphogen As Cuantificacion multiple de proteinas recombinantes individuales en una mezcla mediante peptidos distintivos y espectrometria de masas.
US9453845B2 (en) * 2010-02-01 2016-09-27 Cell Signaling Technology, Inc. Mass spectroscopy analysis of mutant polypeptides in biological samples
WO2011116028A1 (en) * 2010-03-15 2011-09-22 Anderson Forschung Group, Inc. Improved mass spectrometric assays for peptides
WO2012037407A1 (en) 2010-09-17 2012-03-22 Prozyme, Inc. Isolation and deglycosylation of glycoproteins
US20140030732A1 (en) 2012-07-25 2014-01-30 Agilent Technologies, Inc. Microfluidic hplc-chip for glycopeptide analysis with integrated hilic enrichment
US9322014B1 (en) * 2012-11-28 2016-04-26 Sandia Corporation Multiplexed microfluidic approach for nucleic acid enrichment
US9927399B2 (en) * 2013-11-12 2018-03-27 Nichiei Industry Co., Ltd. Capillary device for separation and analysis, microfluidic chip for separation and analysis, analysis method for proteins or peptides, electrophoresis instrument, and microfluidic chip electrophoresis instrument for separation and analysis
US10280206B2 (en) * 2014-12-31 2019-05-07 Dh Technologies Development Pte. Ltd. Methods for protein and peptide reduction
ES2978396T3 (es) 2017-08-01 2024-09-11 Amgen Inc Sistemas y métodos para la preparación en tiempo real de una muestra de polipéptidos para el análisis por espectrometría de masas
JP7483731B2 (ja) 2019-02-14 2024-05-15 アムジエン・インコーポレーテツド 試料の調製及びその試料のリアルタイムアッセイの実施のためのシステム及び方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH1194816A (ja) * 1997-09-22 1999-04-09 Mitsubishi Heavy Ind Ltd 高速液体クロマトグラフ分析装置
US20040009567A1 (en) * 2001-12-28 2004-01-15 Mds Proteomics Inc. Enzyme/chemical reactor based protein processing method for proteomics analysis by mass spectrometry
KR20170042610A (ko) * 2014-08-19 2017-04-19 엘리멘탈 사이언티픽, 인코포레이티드 시린지 전달을 포함하는 질량분석기용 초청정 오토샘플러

Also Published As

Publication number Publication date
IL271499B2 (en) 2024-12-01
JP7237022B2 (ja) 2023-03-10
CA3071676A1 (en) 2019-02-07
IL271499B1 (en) 2024-08-01
JP2020530103A (ja) 2020-10-15
IL271499A (en) 2020-02-27
ES2978396T3 (es) 2024-09-11
MA49757A (fr) 2020-06-10
ZA202001218B (en) 2025-04-30
AU2018309027A1 (en) 2020-01-16
EP3662287B1 (en) 2024-02-28
US20200355582A1 (en) 2020-11-12
CN110869768B (zh) 2023-11-21
CL2020000248A1 (es) 2020-08-14
EA202090399A1 (ru) 2020-05-20
SG11202000727SA (en) 2020-02-27
US12104995B2 (en) 2024-10-01
US20240402058A1 (en) 2024-12-05
EP3662287A1 (en) 2020-06-10
WO2019028187A1 (en) 2019-02-07
KR102560646B1 (ko) 2023-07-27
AU2018309027B2 (en) 2025-06-26
CN110869768A (zh) 2020-03-06
BR112020001885A2 (pt) 2020-08-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102560646B1 (ko) 질량 분광분석법으로의 분석을 위한 폴리펩티드 샘플의 실시간 제조를 위한 시스템 및 방법
JP7741240B2 (ja) 試料の調製及びその試料のリアルタイムアッセイの実施のためのシステム及び方法
KR102577670B1 (ko) 샘플의 실시간 글리칸 분석을 수행하기 위한 시스템 및 방법
CA3071676C (en) Systems and methods for real time preparation of a polypeptide sample for analysis with mass spectrometry
CA3071636C (en) Systems and methods for performing a real-time glycan assay of a sample
EA043377B1 (ru) Системы и способы для подготовки в режиме реального времени образца полипептида для анализа с помощью масс-спектрометрии
HK40015209B (zh) 实时制备用於质谱分析的多肽样品的系统和方法
HK40015208B (zh) 用於对样品进行实时聚醣测定的系统和方法

Legal Events

Date Code Title Description
PA0105 International application

Patent event date: 20200226

Patent event code: PA01051R01D

Comment text: International Patent Application

PG1501 Laying open of application
A201 Request for examination
PA0201 Request for examination

Patent event code: PA02012R01D

Patent event date: 20210730

Comment text: Request for Examination of Application

E902 Notification of reason for refusal
PE0902 Notice of grounds for rejection

Comment text: Notification of reason for refusal

Patent event date: 20221128

Patent event code: PE09021S01D

E701 Decision to grant or registration of patent right
PE0701 Decision of registration

Patent event code: PE07011S01D

Comment text: Decision to Grant Registration

Patent event date: 20230503

GRNT Written decision to grant
PR0701 Registration of establishment

Comment text: Registration of Establishment

Patent event date: 20230724

Patent event code: PR07011E01D

PR1002 Payment of registration fee

Payment date: 20230725

End annual number: 3

Start annual number: 1

PG1601 Publication of registration