LU82623A1 - Procede pour la preparation de matieres biocompatibles par l'immobilisation superficielle de l'apyrase,et articles fabriques obtenus par ce procede - Google Patents

Procede pour la preparation de matieres biocompatibles par l'immobilisation superficielle de l'apyrase,et articles fabriques obtenus par ce procede Download PDF

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Description

% 4
Procédé pour la préparation de matières biocompatibles par l'immobilisation superficielle de l'apyrase, et articles fabriqués obtenus par ce procédé.
5
La présente invention concerne un procédé pour la préparation de matières polymères et non-polymères biocompatibles par immobilisation de l'apyrase sur leur surface, l'apyrase étant une enzyme capable de catalyser la conversion de l'adénosine diphosphate (ADP) en adënosine monophosphate (AMP), puis la conversion de ce dernier en adénosine. L'invention concerne également les articles fabriqués obtenus par ledit procédé.
La possibilité de conférer des propriétés biocompatibles à divers types de matières est d'une importance pratique énorme 15 à l'heure actuelle. Sous ce rapport, il existe des matières qui à cause de leurs bonnes propriétés mécaniques, d'usinage et de résistance, et de l'absence de toxicité, trouvent une application immédiate dans la construction de prothèses de durée moyenne ou longue pour des implantations, ou dans la construction d'éléments de machines auxiliaires utilisées dans la circulation extra-corporelle, telles que les appareils de dialyse rénale ou les coeur et poumon artificiels.
Pour cette application, les matières qui pourraient être utilisées se trouvent dans une gamme très étendue allant des 25 - polymères cellulosiques,poüyamidiques aliphatiques ou aromatiques,polyesters, polycarbonates, polyuréthanes et PVC jusqu'à des alliages métalliques spéciaux. Malheureusement, l'utilisation de ces matières est fortement limitée par leur biocompatibilité ^ généralement faible. Cela est dû au fait que dès qu'une matière étrangère est insérée dans la circulation sanguine, elle donne naissance immédiatement à la formation de thrombi par suite du déclenchement d'un processus extrêmement compliqué.
On suppose qu'il y a d'abord une adhérence des plaquettes du sang à la surface de la matière, avec comme conséquence l'élimination de l'ADP et.de la sérotonine des plaquettes, ce qui ensuite provoque l'agglomération des plaquettes. L'ag- / glomération des plaquettes est elle-même un stade fondamental » 2 C'est dû au fait qu'elle donne naissance à l'élimination des phospholipides qui sont essentiels dans le processus de coagulation du sang, en provoquant la conversion du fibrinogène en fibrine.
5 Le rôle de l'ADP en tant qu'inducteur de l'agglomération des plaquettes, et par conséquent en tant que déclencheur du processus de formation des thrombi est largement connu. Voir par exemple le travail fondamental de A. Gaarder et A. Hellem dans Nature 192, 531 (1961). On voit par conséquent que 1 ' im-10 mobilisation d'une enzyme telle que l'apyrase, capable de convertir en AMP et en adénosine l'ADP produit par l'adhérence des plaquettes à la surface de la matière mise en contact avec le sang, peut empêcher l'agglomération ultérieure des plaquettes, bloquant ainsi la formation des thrombi. Sous ce rapport 15 les auteurs de la présente invention ont découvert, et cela forme l'objet de la présente invention, que l'immobilisation de l'apyrase sur la surface des matières thrombogènes donne à ces dernières des propriétés biocompatibles satisfaisantes.
Ces propriétés sont indépendantes du système utilisé pour 20 immobiliser l'enzyme. Cette immobilisation peut être faite par adsorption et réticulation ultérieure sur la surface des matières polymères, ou même sur des surfaces métalliques, par exemple sur la surface des aiguilles utilisées pour les connexions artères-veines dans la circulation extracorporelle. 25 Par ailleurs, l'apyrase peut être liée d'une manière cova-
A
j lente aux groupes fonctionnels présents sur la surface des r ! matières dont la biocompatibilité doit être augmentée.Il est possible en effet, si nécessaire, d'activer la matière au ? préalable afin de libérer sur sa surface les groupes réactifs 30 qui peuvent être utilisés pour immobiliser l'apyrase.
Par exemple, l'enzyme peut être fixée d'une façon covalente ! aux groupes amino (ou carboxyle) des polyamides aliphatiques ou aromatiquesayant subi une hydrolyse superficielle ménagée.
De la même façon, les groupes carboxyle des polyesters 35 hydrolyses en surface peuvent être utilisés.
> La présente invention est illustrée par les exemples des- criptifs et non limitatifs ci-après.
W' 3
Exemple 1
On prépare des anneaux en "Nylon" 6 (longueur 9 mm, diamètre intérieur 4 mm, diamètre extérieur 5 mm) en prenant soin pendant leur usinage à ce que les bords soient chanfreinés 5 et arrondis.
Une gorge profonde de 0,25 mm est réalisée le long du milieu de l'extérieur de l'anneau sur toute sa circonférence.
»
Les anneaux sont hydrolysés dans HCl 3,5 N à 37°C pendant 1 heure.
Pour s'assurer que l'hydrolyse superficielle du "Nylon" a „ été réalisée, on effectue un essai colorimétrique qui consiste à immerger les anneaux, lavés à l'eau, dans une solution contenant 0,1 % (poids/volume) d'acide trinitrobenzène-sulfonique dans du tétraborate saturé.
15
Après environ 1 heure, la formation d'une couleur orangee sur la surface du "Nylon" confirme que l'hydrolyse a bien eu lieu. A ce moment, les anneaux sont immergés dans une solution d'aldéhyde glutarique à 2,5%, et maintenus immergés pendant 3,5 heures à 4°C. Les anneaux sont ensuite lavés 20 rapidement dans l'eau glacée et immergés dans une solution tampon de phosphate 0,01 M contenant 8 mg/ml d'apyrase (activité spécifique 3,4 Ul/mg en utilisant l'ADP comme substrat). On laisse la réaction s'effectuer à 4°C pendant un jour et une nuit. Une fois la réaction terminée, les anneaux 25 sont lavés dans l'eau distillée, et on examine l'activité enzymatique. Un anneau est immergé dans 50 ml d'une solution tampon TRIS HCl 0,1 M de pli 7,4, contenant 0,25 mg/ml d'ADP et 0,5 mg/ml de CaC^.
Le mélange est maintenu sous agitation à 25°C. Des échantil-30 Ions de 1 ml sont prélevés toutes les trente minutes et sont analysés afin de déterminer les phosphates minéraux selon le procédé de Piske et Subbarrow (C.H. Fiske; Y. Subbarow; J.
Biol. Chem. 66, 375 (1925). Une activité enzymatique de 4,5 ^umoles de phosphates minéraux éliminés en 1 heure est mesurée 35 sur les anneaux.
J· Les anneaux de "Nylon" avec l'apyrase liée d'une manière covalente aux groupes amino superficiels sont soumis à un ^— essai de biocomoatibilité "in vivo" en les insérant dans la 4 veine fémorale de chiens de taille moyenne.
. L'insertion est faite, sous anesthésie générale, et quand l'anneau a été inséré dans ]a veine, il est fixé au moyen d'un fil de soie. La plaie est suturée et des antibiotiques 5 sont administrés aux animaux.
Un anneau de "Nylon" non traité similaire est inséré à titre de comparaison selon le même procédé. e Après une période d'insertion de 15 jours, les anneaux sont extraits et examinés.
10 L'anneau avec apyrase est trouvé perméable tandis que l'anneau de référence est complètement bouché par des thrombi.
Une mesure faite sur 1'anneau avec apyrase extrait du chien montre environ 4 yumoles de phosphates minéraux éliminés en 1 heure.
15
Exemple 2
On prépare des anneaux de "Nylon" 6 similaires à ceux i décrits dans l'exemple 1 et on les immerge dans une solution IS tampon de phosphate 0,01 M de pH 7 contenant 8 mg/ml d'apyrase.
Après 4 heures, on ajoute un volume double d'une solution 20 d'aldéhyde glutarique à 2,5 % dans une solution tampon de phosphate 0,01 M de pH 7.
On laisse le mélange agir à 4°C perdant un jour et une nuit. Les anneaux sont ensuite lavés et soumis à l'essai pour l’activité enzymatique selon le procédé décrit dans l'exemple 25 1.
%
On trouve une activité enzymatique d'environ 2 jumoles de phosphates minéraux éliminés en une heure par un seul anneau.
L'essai de biocompatibilité "in vivo" est effectuée en insérant des anneaux avec apyrase et des anneaux de référence | 30 j dans la veine fémorale des chiens de taille moyenne.
Le procédé suivi pour cet essai est celui indiqué dans l'exemple 1. Après une période d'insertion de 15 jours, les anneaux sont extraits. L'anneau avec apyrase est trouvé perméable et l'activité enzymatique mesurée est équivalente 35 à environ 2 ^umoles de phosphates minéraux éliminés en une heure. i L'anneau de "Nylon" de référence est par contre complètement bouché. .
♦ 5
Exemple 3
On prépare des anneaux de polyéthylëne-téréphtalate similaires à ceux décrits dans l'exemple 1. Les anneaux sont hydrolyses dans NaOH 1 M à 50°C pendant 5 heures. Les anneaux 5 sont ensuite lavés et immergés dans 50 ml d'une solution contenant 8 mg/ml d'apyrase et 10 mg/ml de N-éthyl-N1(3-dimé-thylaminopropylcarbodiimide) dans un tampon de phosphate 0,1 <· M à pH 6,8. La réaction est effectuée à 4°C pendant une nuit.
De cette façon, l'apyrase est liée au support par la formation 10 d'une liaison amido entre les groupes ^ -aminolysine et l'enzyme et les groupes carboxyle du polyester hydrolyse en surface. L'examen de l'activité enzymatique sur les anneaux, effectué comme indiqué dans l'exemple 1, donne approximativement 4 yjmoles de phosphates minéraux éliminés en 1 heure par anneau. 15 L'essai de biocompatibilité "in vivo" est effectué en insérant les anneaux de polyester avec apyrase et les anneaux non traités dans la veine fémorale des chiens d'expérience. Le procédé décrit dans l'exemple 1 est suivi. Après 15 jours d'insertion, les anneaux sont extraits. L'anneau de référence 20 est complètement bouché tandis que l'anneau avec apyrase est perméable avec seulement quelques thrombi sporadiques.
L'examen de l'activité enzymatique sur l'anneau après l'insertion "in vivo" donne environ 3 yrmoles de phosphates minéraux éliminées en une heure.
25 » Exemple 4
On prépare des anneaux de polyéthylène-tëréphtalate similaires à ceux décrits dans l'exemple 1. L'apyrase est réticulée sur ces anneaux suivant le procédé indiqué dans l'exemple 2. Après immobilisation, on trouve canono activité enzymatique par anneau environ 3 ^umoles de phosphates minéraux éliminées en une heure. L'essai de biocompatibilité "in vivo" sur les chiens, effectué selon le procédé décrit dans l'exemple 1, donne des. résultats positifs pour les anneaux avec apyrase réticulée, qui sont trouvés être perméables et presque complètement 35 exempts de thrombi, tandis que les anneaux de référence sont complètement bouchés. L'activité enzymatique résiduelle des
H
yT anneaux est d'environ 2,5 yjmoles de phosphates minéraux » t i éliminées en une heure.
I Exemple 5
On prépare des anneaux en acier C 50 similaires à ceux décrits dans l'exemple 1. L'apyrase est fixée sur quelques-uns d'entre eux par réticulation avec l'aldéhyde glutarique par le procédé décrit dans l'exemple 1. L'activité immobilisée ! sur chaque groupe est mesurée et se trouve être d'environ i « | 1,5 ^umole de phosphates minéraux éliminée en 1 heure. Les | essais de biocompatibilité "in vivo" sont effectués sur des ! * 10 ! chiens d'expérience comme décrit précédemment.
. Après 15 jours d'insertion, les anneaux sont extraits et examinés. Tandis que les anneaux de référence se révèlent être complètement bouchés, les anneaux avec apyrase réticulée sont trouvés ouverts et avec seulement quelques thrombi à l'intérieur.
L'activité résiduelle des anneaux traités avec apyrase, après insertion, est de 0,9 ^umole de phosphates minéraux éliminée par heure.
ί 1 J-- /

Claims (6)

1. Procédé pour la préparation de matières biocompatibles caractérisé par le fait qu'il consiste à immobiliser sur des supports en polymère ou en métal un agent biologique approprié capable d'éliminer l'ADP dans le sang.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le « ‘ fait que l'agent biologique est l'enzyme apyrase.
* 3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé par le - 10 fait que l'agent biologique est immobilise sur le support par * un procédé d'adsorption et de réticulation.
4. Procédé selon la revendication lf caractérisé par le fait que l'agent biologique est immobilisé sur le support par la formation d’une liaison covalente entre l'agent biologique 1 b et les groupes fonctionnels existant sur le support.
5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 ä 4, caractérisé par le fait que le support polymère est choisi parmi les polyamides aliphatiques et aromatiques, les 20 polyesters et les polymères cellulosiques et analogues, qui ont subi une hydrolyse ménagée.
6. Articles prothétiques, sondes, tubes, aiguilles, membranes, prothèses diverses et organes artificiels en général, biocompatibles, préparés selon le procédé décrit 2 5 r dans l'une quelconque des revendications 1 a 5. s _
LU82623A 1979-08-01 1980-07-14 Procede pour la preparation de matieres biocompatibles par l'immobilisation superficielle de l'apyrase,et articles fabriques obtenus par ce procede LU82623A1 (fr)

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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1983004180A1 (fr) * 1982-05-31 1983-12-08 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Pepsine immobilisee pour l'extraction du complexe immun du sang et procede d'extraction du complexe immun du sang utilisant la pepsine immobilisee
IT1208326B (it) * 1984-03-16 1989-06-12 Sorin Biomedica Spa Protesi valvolare cardiaca provvista di lembi valvolari di tessuto biologico
US4838888A (en) * 1987-04-17 1989-06-13 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Calcification mitigation of implantable bioprostheses
EP0595863A1 (fr) * 1991-07-11 1994-05-11 British Technology Group Ltd Materiaux pour implants
US5674725A (en) * 1991-07-11 1997-10-07 British Technology Group Limited Implant materials having a phosphatase and an organophosphorus compound for in vivo mineralization of bone
US5378601A (en) * 1992-07-24 1995-01-03 Montefiore Medical Center Method of preserving platelets with apyrase and an antioxidant
US5782931A (en) * 1996-07-30 1998-07-21 Baxter International Inc. Methods for mitigating calcification and improving durability in glutaraldehyde-fixed bioprostheses and articles manufactured by such methods
US20030232390A1 (en) * 2002-03-15 2003-12-18 Universal Bio Research Co., Ltd. Carrier for fixing material containing amino group
US8628953B2 (en) * 2007-11-29 2014-01-14 Hitachi Plant Technologies, Ltd. Capturing carrier, capturing device, analysis system using the same, and method for capturing and testing microorganisms

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3865915A (en) * 1969-09-15 1975-02-11 Ici Ltd Injection moulding of complex shaped laminar articles
US3705084A (en) * 1970-03-18 1972-12-05 Monsanto Co Macroporous enzyme reactor
US3826678A (en) * 1972-06-06 1974-07-30 Atomic Energy Commission Method for preparation of biocompatible and biofunctional materials and product thereof
US4273873A (en) * 1977-10-25 1981-06-16 Unitika Ltd. Preparation of antithrombogenic polymeric materials

Also Published As

Publication number Publication date
CH645920A5 (it) 1984-10-31
FR2462475B1 (fr) 1985-04-12
NO159607C (no) 1989-01-18
NL190694B (nl) 1994-02-01
IT7924838A0 (it) 1979-08-01
IT1122388B (it) 1986-04-23
DK157887C (da) 1990-07-23
NL8004068A (nl) 1981-02-03
GB2055848B (en) 1983-07-20
NL190694C (nl) 1994-07-01
AU6004980A (en) 1981-02-05
GB2055848A (en) 1981-03-11
ES8106230A1 (es) 1981-08-01
SE448820B (sv) 1987-03-23
BE884301A (fr) 1981-01-14
AU536483B2 (en) 1984-05-10
IE49853B1 (en) 1985-12-25
DE3026805C2 (fr) 1987-07-16
JPS6410228B2 (fr) 1989-02-21
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US4396716A (en) 1983-08-02
FR2462475A1 (fr) 1981-02-13
FI75737B (fi) 1988-04-29
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AT387906B (de) 1989-04-10
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CA1148466A (fr) 1983-06-21
DE3026805A1 (de) 1981-02-05

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