MD4521C1 - Compuşi antivirali pe bază de imidazolil-dihidroizocromeno-naftoimidazoli condensaţi - Google Patents

Compuşi antivirali pe bază de imidazolil-dihidroizocromeno-naftoimidazoli condensaţi Download PDF

Info

Publication number
MD4521C1
MD4521C1 MDA20150091A MD20150091A MD4521C1 MD 4521 C1 MD4521 C1 MD 4521C1 MD A20150091 A MDA20150091 A MD A20150091A MD 20150091 A MD20150091 A MD 20150091A MD 4521 C1 MD4521 C1 MD 4521C1
Authority
MD
Moldova
Prior art keywords
imidazol
mmol
tert
butyl
naphtho
Prior art date
Application number
MDA20150091A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Other versions
MD20150091A2 (ro
MD4521B1 (ro
Inventor
Элизабет М. Бейкон
Джероми Дж. Коттелл
Эшли Энн Катана
Дэррил Като
Эван С. Крыговский
Джон О. Линк
Джеймс Тейлор
Чинх Вьет Трен
Мартин Тереса Алехандра Трехо
Чжэн-Юй Ян
Шейла Зипфел
Original Assignee
Gilead Pharmasset Llc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47324426&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MD4521(C1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gilead Pharmasset Llc. filed Critical Gilead Pharmasset Llc.
Publication of MD20150091A2 publication Critical patent/MD20150091A2/ro
Publication of MD4521B1 publication Critical patent/MD4521B1/ro
Publication of MD4521C1 publication Critical patent/MD4521C1/ro

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4188—1,3-Diazoles condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. biotin, sorbinil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/7056—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing five-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/06—Tripeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • A61K38/21—Interferons [IFN]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C07F5/02—Boron compounds
    • C07F5/025—Boronic and borinic acid compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)

Abstract

Invenţia se referă la un grup specific de compuşi noi antivirali având un nucleu constituit din imidazolil-dihidroizocromeno-naftoimidazoli condensaţi.În calitate de reprezentanţi tipici selectaţi din această grupă pot servi următorii compuşi:Compuşii revendicaţi pot fi utili pentru tratamentul infecţiilor cu virusul hepatitei C.Revendicări: 1

Description

Invenţia se referă la un grup specific de compuşi noi antivirali având un nucleu constituit din imidazolil-dihidroxiizocromeno- naftoimidazoli condensaţi.
PREMISELE DE CREARE A INVENŢIEI
Hepatita C este recunoscută ca o boală virală cronică a ficatului, care se caracterizează prin boli hepatice. Deşi medicamentele care vizează ficatul sunt utilizate pe scară largă şi si-au demonstrat eficacitatea, toxicitatea şi alte efecte secundare au limitat utilitatea acestora. Inhibitorii virusului hepatitei C (VHC) sunt utili pentru a limita stabilirea şi evoluţia infecţiei cu VHC, precum şi în testele de diagnostic pentru VHC.
Există necesitatea pentru noi agenţi terapeutici ai VHC. În particular, există necesitatea pentru agenţi terapeutici ai VHC care au activitate largă împotriva genotipurilor VHC (de exemplu genotipuri 1a, 1b, 2a, 3a, 4a). Există, de asemenea, necesitatea pentru medicamente care sunt mai puţin sensibile la rezistenţa virală. Mutaţii de rezistenţă la inhibitori au fost descrise pentru VHC NS5A pentru genotipurile 1a şi 1b în [1].
ESENŢA INVENŢIEI
Într-o variantă de realizare invenţia descrie un compus al invenţiei care este un compus cu formula generală (I):
E1a-V1a -C(=O)-P1a -W1a -P1b-C(=O)-V1b-E1b (I)
unde:
W1a reprezintă
şi W1a este opţional substituită cu una sau mai multe grupe selectate independent dintre halo, alchil, haloalchil, sau ciano;
Y5 reprezintă -O-CH2-, sau -CH2-O-; X5 reprezintă -CH2-CH2- sau -CH=CH-;
E1a reprezintă -N(H) (alcoxicarbonil), -N(H) (cicloalchilcarbonil) sau -N(H) (cicloalchiloxicarbonil); sau E1a-V1a luate împreună reprezintă R9a;
E1b reprezintă -N(H) (alcoxicarbonil), -N(H) (cicloalchilcarbonil) sau -N(H) (cicloalchiloxicarbonil); sau E1b-V1b luate împreună reprezintă R9b;
V1a şi V1b sunt fiecare independent selectate dintre:
P1a este selectată dintre:
P1b este selectată dintre:
şi
R9a şi R9b sunt fiecare în mod independent selectate dintre:
sau o sare acceptabilă farmaceutic sau un promedicament ale acestora.
Invenţia descrie, de asemenea, compuşi îmbogăţiţi izotopic care sunt compuşi ai invenţiei care cuprind un izotop îmbogăţit la una sau mai multe poziţii din compus.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus al invenţiei sau o sare acceptabilă farmaceutic sau un promedicament al acestuia şi cel puţin un purtător acceptabil farmaceutic.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o compoziţie farmaceutică pentru utilizare în tratarea hepatitei C (VHC). Într-un exemplu de realizare, compoziţia cuprinde cel puţin un agent terapeutic suplimentar pentru tratarea VHC. Într-o variantă de realizare, agentul terapeutic este selectat dintre ribavirină, un inhibitor al NS3 proteazei, un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei, un inhibitor al alfa 1-glucozidazei, un hepatoprotectant, un inhibitor non-nucleozidic al polimerazei VHC, sau combinaţii ale acestora. Într-un exemplu de realizare, compoziţia mai conţine un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei.
Într-un exemplu de realizare, inhibitorul nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei este selectat dintre ribavirină, viramidină, levovirină, o L-nucleozidă sau izatoribină.
Într-un exemplu de realizare este prevăzută o compoziţie farmaceutică care cuprinde un compus aşa cum este descris în acest document şi cel puţin un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei, şi cel puţin un purtător acceptabil farmaceutic. Într-un exemplu de realizare, compoziţia mai cuprinde un interferon, un interferon pegilat, o ribavirină sau combinaţii ale acestora. Într-un exemplu de realizare, compusul este un compus exemplificat în Exemplul PY. Într-un exemplu de realizare inhibitorul nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei este sofosbuvir.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o compoziţie farmaceutică care conţine în continuare un interferon sau un interferon pegilat.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o compoziţie farmaceutică care conţine în continuare un analog nucleozidic.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o compoziţie farmaceutică în care analogul nucleozidic este ales dintre ribavirină, viramidină, levovirină, o L-nucleozidă şi izatoribină, iar interferonul este α-interferon sau α-interferon pegilat.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o metodă de tratare a hepatitei C, metoda dată cuprinzând administrarea la un pacient uman a unei compoziţii farmaceutice care conţine o cantitate eficientă terapeutic a unui compus al invenţiei.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, o metodă de inhibare a VHC, care include administrarea la un mamifer afectat cu o maladie asociată cu activitatea VHC, a unei cantităţi a unui compus al invenţiei, eficiente pentru inhibarea VHC.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, un compus al invenţiei pentru utilizare în terapia medicală (de exemplu, pentru utilizare la inhibarea activităţii VHC sau tratamentul unei maladii asociate cu activitatea VHC), precum şi utilizarea unui compus al invenţiei pentru fabricarea unui medicament util pentru inhibarea VHC sau tratamentul unei maladii asociate cu activitatea VHC la un mamifer.
Prezenta invenţie prevede, de asemenea, procesele sintetice şi produsele intermediare noi, conform invenţiei, care sunt utile pentru prepararea compuşilor invenţiei. Unii dintre compuşii invenţiei sunt utili pentru prepararea altor compuşi ai invenţiei.
Într-un alt aspect invenţia prevede un compus al invenţiei sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia, pentru utilizare în tratamentul profilactic sau terapeutic al hepatitei C sau al tulburărilor asociate cu hepatita C.
Într-un alt aspect invenţia prevede o metodă de inhibare a activităţii VHC într-o probă care include tratarea probei cu un compus al invenţiei.
Compuşii cu formula generală (I) s-au dovedit a poseda activitate utilă împotriva genotipurilor VHC 1. Suplimentar anumiţi compuşi cu formula (I) au potenţă semnificativă faţă de tulpinile rezistente în GT1.
În consecinţă, anumiţi compuşi cu formula (I) posedă proprietăţi farmacologice benefice care îi fac utili pentru satisfacerea necesităţii curente pentru agenţi VHC cu astfel de proprietăţi benefice.
Într-un exemplu de realizare invenţia prevede un compus având proprietăţi inhibitoare sau farmacocinetice îmbunătăţite, inclusiv activitate sporită împotriva dezvoltării rezistenţei virale, biodisponibilitate orală îmbunătăţită, potenţă mai mare (de exemplu, în inhibarea activităţii VHC) sau o perioadă de înjumătăţire extinsă in vivo. Anumiţi compuşi ai invenţiei ar putea avea mai puţine efecte secundare, scheme de dozaj mai puţin complicate, sau ar putea fi activi pe cale orala.
DESCRIEREA DETALIATĂ
Referinţa va fi acum făcută în detaliu la anumite realizări ale invenţiei, exemple ale căreia sunt ilustrate în structurile şi formulele însoţitoare. Pe măsură ce invenţia va fi descrisă în legătură cu exemplele de realizare enumerate, se va înţelege că ele nu intenţionează să limiteze descrierea numai la aceste exemple de realizare. Dimpotrivă, invenţia este destinată să acopere toate alternativele, modificările şi echivalentele, care pot fi incluse în domeniul de aplicare al prezentei invenţii aşa cum sunt definite de exemplele de realizare.
Compuşi
Compuşii invenţiei exclud compuşii cunoscuţi până acum. Cu toate acestea, invenţia descrie utilizarea compuşilor care anterior nu au fost cunoscuţi ca având proprietăţi antivirale pentru scopuri antivirale (de exemplu, pentru a produce un efect antiviral la un animal). În ceea ce priveşte Statele Unite, compuşii sau compoziţiile descrise aici exclud compuşii care sunt anticipaţi conform 35 USC § 102 sau care sunt evidenţi conform 35 USC § 103.
Ori de câte ori un compus descris în prezenta invenţie este substituit cu mai mult de una din aceiaşi grupă desemnată, de exemplu, „R1” sau „A3”, atunci se va înţelege că grupele pot fi identice sau diferite, adică, fiecare grupă este selectată independent.
„Absente” - Unele grupe sunt definite astfel încât să poată fi absente. Când o grupă este absentă ea devine un conector de legătură. Cele două grupe care altfel ar fi conectate la acea grupă absentă sunt conectate între ele printr-o legătură.
Grupele „P” (de exemplu, P1a şi P1b) definite pentru formula (I) au aici o legătură la o grupă -C(=O)- cu formula (I) şi o legătură la o grupă W1a. Este de înţeles că un azot al grupei P este cuplat la grupa -C(=O)- cu formula (I) şi că un carbon al grupei P este cuplat la grupa W1a.
În grupa W1a este prezentă o grupă Y5. Când acea grupă Y5 este definită ca o grupă -O-CH2- sau o grupă -CH2-O-, aceste grupe Y5 au o direcţionalitate. Grupa Y5 este cuplată la grupa W1a în aceeaşi direcţionalitate de la stânga la dreapta în care fiecare este extrasă. Prin urmare, de exemplu, atunci când Y5 reprezintă o grupă -O-CH2-, structura direct următoare este destinată:
De exemplu, atunci când Y5 reprezintă o grupă -CH2-O-, structura direct următoare este destinată:
În structura I, grupa W1a are o directionalitate de la stânga la dreapta aşa cum este descris în I şi W1a aşa cum sunt extrase.
E1a-V1a -C(=O)-P1a -W1a -P1b-C(=O)-V1b-E1b (I)
Unde:
W1a reprezintă
De exemplu, grupa P1a este cuplată la grupa imidazol a W1a, iar grupa P1b este ccuplată la sistemul inelar pentaciclic al W1a.
„Alchil” reprezintă o hidrocarbură C1-C18 care conţine atomi de carbon terţiari sau ciclici, secundari, normali. Exemple sunt metil (Me, -CH3), etil (Et, -CH2CH3), 1-propil (n-Pr, n-propil, -CH2CH2CH3), 2-propil (i-Pr, i-propil, -CH(CH3)2), 1-butil (n-Bu, n-butil, -CH2CH2CH2CH3), 2-metil-1-propil (i-Bu, i-butil, -CH2(CH3)2), 2-butil (s-Bu, s-butil, -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propil (t-Bu, t-butil, -C(CH3)3), 1-pentil (n-pentil, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentil (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentil (-CH(CH2CH3)2), 2-metil-2-butil (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butil (-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-metil-1-butil (-CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-1-butil (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-hexil (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-hexil (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-hexil (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentil (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentil (-CH(CH3)CH2(CH3)2), 3-metil-3-pentil (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentil (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butil (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butil (-CH(CH3)C(CH3)3, şi ciclopropilmetil
„Alchenil” reprezintă o hidrocarbură C2-C18 care conţine atomi de carbon terţiari sau ciclici, secundari, normali cu cel puţin un centru de nesaturare, adică o legătură carbon-carbon, sp2 dublă. Exemplele includ, dar nu sunt limitate la, etilenă sau vinil (-CH=CH2), alil (-CH2CH=CH2), ciclopentenil (-C5H7), şi 5-hexenil (-CH2 CH2CH2CH2CH=CH2).
„Alchinil” reprezintă o hidrocarbură C2-C18 care conţine atomi de carbon terţiari sau ciclici, secundari, normali cu cel puţin un centru de nesaturare, adică o legătură carbon-carbon, sp triplă. Exemplele includ, dar nu sunt limitate la, grupele acetilen (-C≡CH) şi propargil (-CH2C≡CH).
„Alchilena” se referă la o catenă saturată, lineară sau ramificată sau un radical hidrocarbonic ciclic cu 1-18 atomi de carbon, şi având două centre radicale monovalente obţinute prin îndepărtarea a doi atomi de hidrogen de la aceleaşi sau doi atomi de carbon diferiţi ai unui alcan parental. Radicalii alchilenici tipici includ, dar nu sunt limitaţi la, metilen (-CH2-) 1,2-etil (-CH2CH2), 1,3-propil (-CH2CH2CH2), 1,4-butil (-CH2CH2CH2CH2) etc.
„Alchenilena” se referă la o catenă nesaturată, ramificată sau liniară sau un radical hidrocarbonict ciclic cu 2-18 atomi de carbon, şi având două centre radicale monovalente obţinute prin îndepărtarea a doi atomi de hidrogen de la aceleaşi sau doi atomi de carbon diferiţi ale unei alchene parentale. Radicalii alchenilenici tipici includ, dar nu sunt limitaţi la, 1,2-etilenă (-CH=CH-).
„Alchinilenă” se referă la o catenă nesaturată, ramificată sau liniară sau un radical hidrocarbonic ciclic cu 2-18 atomi de carbon, şi având două centre radicale monovalente obţinute prin îndepărtarea a doi atomi de hidrogen de la aceleaşi sau doi atomi de carbon diferiţi ale unei alchine parentale. Radicalii alchinilenici tipici includ, dar nu sunt limitaţi la, acetilenă (-C≡C-), propargil(-CH2C≡C-), şi 4-pentinil (-CH2CH2CH2C≡CH).
Termenul „alcoxi” sau „alchiloxi”, aşa cum este utilizat aici, se referă la o grupă alchil ataşată la fragmentul molecular iniţial printr-un atom de oxigen.
Termenul „alcoxicarbonil”, aşa cum este utilizat aici, se referă la o grupă alcoxi ataşată la fragmentul molecular iniţial printr-o grupă carbonil.
Termenul „cicloalchil”, aşa cum este utilizat aici, se referă la un sistem inelar hidrocarbonic saturat monociclic având de la trei la şapte atomi de carbon şi zero heteroatomi. Exemplele reprezentative de grupe cicloalchil includ, dar nu sunt limitate la, ciclopropil, ciclopentil şi ciclohexil. Grupele cicloalchil ale prezentei invenţii sunt opţional substituite cu unul, doi, trei, patru sau cinci substituenţi selectaţi independent dintre alcoxi, alchil, aril, ciano, halo, haloalcoxi, haloalchil, heterociclil, hidroxi, hidroxialchil, nitro şi -NRxRy, în care arilul şi heterociclilul sunt în continuare opţional substituiţi cu unul, doi sau trei substituenţi selectaţi independent dintre alcoxi, alchil, ciano, halo, haloalcoxi, haloalchil, hidroxi şi nitro.
Termenul „cicloalchilcarbonil”, aşa cum este utilizat aici, se referă la o grupă cicloalchil ataşată la fragmentul molecular iniţial printr-o grupă carbonil.
Termenul „cicloalchiloxi”, aşa cum este utilizat aici, se referă la o grupă cicloalchil ataşată la fragmentul molecular iniţial printr-un atom de oxigen.
Termenul „cicloalchiloxicarbonil”, aşa cum este utilizat aici, se referă la o grupă cicloalchiloxi ataşată la fragmentul molecular iniţial printr-o grupă carbonil.
Prin „aril” se înţelege un radical hidrocarbonic aromatic monovalent cu 6-20 atomi de carbon obţinuţi prin îndepărtarea unui atom de hidrogen de la un singur atom de carbon al unui sistem inelar aromatic paternal. Grupele aril tipice includ, dar nu sunt limitate la, radicalii derivaţi din benzen, benzen substituit, naftalină, antracen, bifenil şi alţii asemenea.
„Arilalchil” se referă la un radical alchil aciclic, în care unul dintre atomii de hidrogen legaţi la un atom de carbon, de obicei, un atom de carbon terminal sau sp3, este înlocuit cu un radical arilic. Grupele arilalchil tipice includ, dar nu sunt limitate la, benzil, 2-feniletan-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, naftobenzil, 2-naftofeniletan-1-il şi alele asemenea. Grupa arilalchil cuprinde de la 6 la 20 atomi de carbon, de exemplu, fragmentul alchilic, incluzând grupele alcanil, alchenil sau alchinil, al grupei arilalchil conţine de la 1 la 6 atomi de carbon şi fragmentul arilic conţine de la 5 la 14 atomi de carbon.
„Alchil substituit”, „aril substituit” şi „arilalchil substituit” înseamnă alchil, aril şi, respectiv, arilalchil, în care unul sau mai mulţi atomi de hidrogen sunt fiecare independent înlocuiţi cu un substituent non-hidrogen. Substituenţii tipici includ, dar nu sunt limitaţi la: halo (de exemplu, F, CI, Br, I), -R, -OR, -SR, -NR2, -CF3, -CCl3, -OCF3, -CN, -NO2, -N(R)C(=O)R ,-C(=O)R, -OC(=O)R, -C(O)OR, -C(=O)NRR, -S(=O)R, -S(=O)2OR, -S(=O)2R, -OS(=O)2OR, -S(=O)2NRR, şi fiecare R este independent -H, alchil, aril, arilalchil sau heterociclu. Grupele alchilen, alchenilen şi alchinilen pot fi, de asemenea, similar substituite.
Termenul „opţional substituit” cu referire la un anumit fragment al compusului cu formula I, (de exemplu, o grupă aril substituită opţional) se referă la un fragment având 0, 1, 2 sau mai mulţi substituenţi.
Simbolul „-----„ într-o structură inelară înseamnă că o legătură este o legătură simplă sau dublă. Într-un exemplu nelimitativ, pot fi sau .
Termenul „haloalchil”, aşa cum este utilizat aici, include o grupă alchil substituită cu unul sau mai mulţi halogeni (de exemplu, F, CI, Br sau I). Exemplele reprezentative de haloalchil includ trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil şi 2,2,2-trifluoro-1-(trifluorometil)etil.
„Heterociclul” sau „heterociclilul”, aşa cum este utilizat aici, include prin exemplu, dar fără limitare aceste heterocicluri descrise în [2],[3],[4]. Într-un exemplu de realizare specific, „heterociclul” include un „carbociclu”, aşa cum este definit aici, în care unul sau mai mulţi (de exemplu, 1, 2, 3 sau 4) atomi de carbon au fost înlocuiţi cu un heteroatom (de exemplu, O, N sau S). Termenul „heterociclu” include, de asemenea, „heteroaril”, care este un heterociclu, în care cel puţin unul din nucleele heterociclice este aromatic.
Exemplele de heterocicluri includ prin exemplu, dar fără limitare, piridil, dihidropiridil, tetrahidropiridil (piperidil), tiazolil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrotiofenil sulf oxidat, pirimidinil, furanil, tienil, pirolil, pirazolil, imidazolil, tetrazolil, benzofuranil, tiianaftalenil, indolil, indolenil, chinolinil, izochinolinil, benzimidazolil, piperidinil, 4-piperidonil, pirolidinil, 2-pirrolidonil, pirolinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrochinolinil, tetrahidroisochinolinil, decahidrochinolinil, octahidroisochinolinil, azocinil, triazinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 2H, 6H-1,5,2-ditiazinil, tienil, tiantrenil, piranil, izobenzofuranil, chromenil, xantenil, fenoxatinil, 2H-pirolil, izotiazolil, izoxazolil, pirazinil, indolizinil, izoindolil, 3H-indolil, 1 H-indazolil, purinil, 4H-chinolizinil, ftalazinil, naftiridinil, chinoxalinil, chinazolinil, cinolinil, pteridinil, 4H-carbazolil, carbazolil, β-carbolinil, fenantridinil, acridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiazinil, furazanil, fenoxazinil, isochromanil, cromanil, imidazolidinil, imidazolinil, pirazolidinil, pirazolinil, piperazinil, indolinil, izoindolinil, chinuclidinil, morfolinil, oxazolidinil, benzotriazolil, benzisoxazolil, oxindolil, benzoxazolinil, isatinoil şi bis-tetrahidrofuranil:
Prin exemplu, dar fără limitare, heterociclurile legate prin carbon sunt legate la poziţia 2, 3, 4, 5 sau 6 a unei piridine, poziţia 3, 4, 5 sau 6 a uneii piridazine, poziţia 2, 4, 5 sau 6 a unei pirimidine, poziţia 2, 3, 5 sau 6 a unei pirazine, poziţia 2, 3, 4 sau 5 a unui furan, tetrahidrofuran, tiofuran, tiofen, pirol sau tetrahidropirol, poziţia 2, 4 sau 5 al unui oxazol, imidazol sau tiazol, poziţia 3, 4 sau 5 al unui izoxazol, pirazol sau izotiazol, poziţia 2 sau 3 al unei aziridine, poziţia 2, 3 sau 4 a unei azetidine, poziţia 2, 3, 4, 5, 6, 7 sau 8 a unei chinoline sau poziţia 1, 3, 4, 5, 6, 7 sau 8 a unei izochinoline. Mai precis, heterociclurile legate prin carbon includ 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil, 5-piridil, 6-piridil, 3-piridazinil, 4-piridazinil, 5-piridazinil, 6-piridazinil, 2-pirimidinil, 4 - pirimidinil, 5-pirimidinil, 6-pirimidinil, 2-pirazinil, 3-pirazinil, 5-pirazinil, 6-pirazinil, 2-tiazolil, 4-tiazolil sau 5-tiazolil.
Prin exemplu, dar fără limitare, heterociclurile legate prin azot sunt legate între ele la poziţia 1 a unei aziridine, azetidine, a unui pirol, a unei pirolidine, 2-piroline, 3-piroline, a unui imidazol, a unei imidazolidine, 2-imidazoline, 3-imidazoline, a unui pirazol, a unei pirazoline, 2-pirazoline, 3-pirazoline, piperidine, piperazine, a unui indol, a unei indoline, a unui 1H-indazol, poziţia 2 a unui izoindol sau a unei isoindoline, poziţia 4 a unei morfoline şi poziţia 9 a unui carbazol sau a unei β-Carboline. Şi mai precis, heterociclurile legate prin azot includ 1-aziridil, 1-azetedil, 1-pirolil, 1-imidazolil, 1-pirazolil şi 1-piperidinil.
„Carbociclul” se referă la un ciclu saturat, nesaturat sau aromatic având până la aproximativ 25 atomi de carbon. În mod tipic, un carbociclu are aproximativ de la 3 până la 7 atomi de carbon ca un monociclu, aproximativ de la 7 până la 12 atomi de carbon, ca o bicicletă, şi până la aproximativ 25 atomi de carbon ca un policiclu. Carbociclurile monociclice au de obicei de la 3 până la 6 atomi inelari, şi mai precis 5 sau 6 atomi inelari. Carbociclurile biciclice au de obicei de la 7 până la 12 atomi inelari, de exemplu, aranjaţi ca un sistem biciclic [4,5], [5,5], [5,6] sau [6,6], sau 9 sau 10 atomi inelari aranjaţi ca un sistem biciclic [5,6] sau [6,6]. Termenul de carbociclu include „cicloalchil”, care este un carbociclu saturat sau nesaturat. Exemplele de carbocicluri monociclice includ ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil, 1-ciclopent-1-enil, 1-ciclopent-2-enil, 1-ciclopent-3-enil, ciclohexil, 1-ciclohex-1-enil, 1-ciclohex-2-enil, 1-ciclohex-3-enil, fenil, spiril şi naftil.
Termenul „amino”, aşa cum este utilizat aici, se referă la -NH2.
Termenul „chiral” se referă la moleculele care au proprietatea de non-superimpozabilitate a structurii-oglindă, în timp ce termenul „achiral” se referă la moleculele care sunt superpozabile pe structura-oglindă a acestora.
Termenul „stereoizomeri” se referă la compuşii care au constituţie chimică identică, dar diferă în ceea ce priveşte aranjarea atomilor sau grupelor în spaţiu.
„Diastereomerul” se referă la un stereoizomer cu două sau mai multe centre de chiralitate şi ale căror molecule nu sunt imagini în oglindă ale unei alteia. Diastereomerii au proprietăţi fizice diferite, de exemplu, puncte de topire, puncte de fierbere, proprietăţi spectrale şi reactivităţi. Amestecurile de diastereomeri se pot separa prin proceduri analitice de înaltă rezoluţie, cum ar fi electroforeza şi cromatografia.
„Enantiomerii” se referă la doi stereoizomeri ai unui compus, care sunt imagini în oglindă non-superimpozabile ale unei alteia.
Termenul „tratament” sau „tratare”, în măsura în care se referă la o boală sau o afecţiune include prevenirea apariţiei bolii sau afecţiunii, inhibarea bolii sau afecţiunii, eliminarea bolii sau afecţiunii şi/sau atenuarea unei sau mai multor simptome ale bolii sau afecţiunii.
Definiţiile şi convenţiile stereochimice folosite în prezentul document se conformă în general în sursele [5] şi [6]. Există mulţi compuşi organici în forme optic active, adică, ei au capacitatea de a roti densitatea luminii plan polarizate. La descrierea unui compus optic activ, prefixele (D şi L) sau (R şi S) sunt utilizate pentru a indica configuraţia absolută a moleculei în jurul centrului(elor) său(sale) chiral(e). Prefixele d şi l sau (+) şi (-) sunt folosite pentru a desemna semnul de rotaţie a luminii plan polarizate de către compus, cu (-) sau 1 cu sensul că compusul este levogir. Un compus prefixat cu (+) sau d este dextrogir. Pentru o anumită structură chimică, aceşti stereoizomeri sunt identici cu excepţia faptului că ei sunt imagini în oglindă ale unui altuia. Un stereoizomer specific poate fi, de asemenea, menţionat ca un enantiomer, iar un amestec de astfel de izomeri este adeseori numit un amestec de enantiomeri. Un amestec 50:50 de enantiomeri este menţionat ca un amestec racemic sau un racemat, care poate avea loc în cazul în care nu a existat nici o stereoselecţie sau stereospecificitate într-o reacţie chimică sau un proces chimic. Termenii „amestec racemic” şi „racemat” se referă la un amestec echimolar de două specii enantiomerice, lipsit de activitate optică. Invenţia include toţi stereoizomerii compuşilor descrişi aici.
Promedicamente
Termenul „promedicament”, aşa cum este utilizat aici, se referă la orice compus care atunci când este administrat la un sistem biologic generează un compus al invenţiei care inhibă activitatea VHC („compusul inhibitor activ”). Compusul poate fi format din promedicament ca urmare a: (i) reacţiei(ţiilor) chimice spontane, (ii) reacţiei(ţiilor) chimice catalizate cu enzime, (iii) fotolizei şi/sau (iv) reacţiei(ţiilor) chimice metabolice.
„Fragmentul promedicamentului” se referă la o grupă funcţională labil care se separă de la compusul inhibitor activ în timpul metabolismului, ]n mod sistemic, in interiorul unei celule, prin hidroliză, clivaj enzimatic sau prin alt procedeu [7] [8]. Enzimele care sunt capabile de un mecanism de activare enzimatică cu compuşii promedicamentului descrişi în invenţie includ, dar nu sunt limitate la, amidaze, esteraze, enzime microbiene, fosfolipaze, cholinesteraze şi fosfaze. Fragmentele promedicamentului pot contribui la sporirea solubilităţii, absorbţiei şi lipofilicităţii pentru a optimiza livrarea medicamentelor, biodisponibilitatea şi eficacitatea. O fracţie a promedicamentului poate include un metabolit activ sau medicamentul in sine.
Fragmentele exemplare ale promedicamentului includ esteri aciloximetilici hidrolitic sensibili sau labili - CH2OC(=O)R99 şi aciloximetilcarbonaţi - CH2OC(=O)OR99 unde R99 este o grupă alchil C1-C6, alchil substituit C1-C6, aril C6-C20 sau aril substituit C6-C20. Esterul aciloxialchilic a fost folosit mai întâi ca o strategie a promedicamentului pentru acizii carboxilici şi apoi aplicat la fosfaţi şi fosfonaţi de către Farquhar şi alţii [9], şi de asemenea, brevetele [10], [11], [12], [13]. Ulterior, esterul aciloxialchilic a fost folosit pentru a furniza acizi fosfonici prin membranele celulare şi a spori biodisponibilitatea orală. O variantă apropiată de esterul aciloxialchilic, esterul alcoxicarboniloxialchilic (carbonat), poate spoi, de asemenea, biodisponibilitatea orală ca un fragment al promedicamentului în compuşii combinaţiilor descrişi în prezenta invenţie. Un ester aciloximetilic exemplar este pivaloiloximetoxi, (POM) - CH2OC(=O)C(CH3)3. Un fragment exemplar al promedicamentului aciloximetilcarbonat este pivaloiloximetilcarbonatul (POC) - CH2OC(=O)OC(CH3)3.
Esterii arilici ai grupelor fosfor, în special esterii fenilici, sunt raportaţi ca sporind biodisponibilitatea orală [14].. Au fost, de asemenea, descrişi esterii fenilici care conţin un ester carboxilic în poziţia orto faţă de fosfat[15]. Esterii benzilici sunt raportaţi ca generând acizi fosfonici iniţiali. În unele cazuri, substituenţii în poziţia orto- sau para- pot accelera hidroliza. Analogii benzilici cu un fenol acilat sau un fenol alchilat pot genera compusul fenolic prin acţiunea enzimelor, de exemplu, esteraze, oxidaze etc., care la rândul său este supus la clivarea legăturii benzilice C-O pentru a genera acid fosforic şi un intermediar al metidelor chinonelor. Exemple ale acestei clase de promedicamente sunt descrise de Mitchell şi alţii[16], [17]. Alte promedicamente benzilice au fost descrise, care conţin o grupă conţinând ester carboxilic ataşat la metilenul benzilic [17]. Promedicamentele care conţin tio sunt raportate ca fiind utile pentru livrarea intracelulară a medicamentelor fosfonate. Aceşti proesteri conţin o grupă etiltio în care grupa tiol este fie esterificată printr-o grupă acil sau combinată cu o altă grupă tiol pentru a forma o disulfură. Deesterificarea sau reducerea disulfurii generează tiointermediarul liber care se descompune ulterior până la acidul fosforic şi episulfid [18], [19].
Grupe protectoare
În contextul prezentei invenţii, grupele protectoare includ fragmente ale promedicamentului şi grupe protectoare chimice.
„Grupa protectoare” se referă la un fragment al unui compus care maschează sau modifică proprietăţile unei grupe funcţionale sau proprietăţile compusului în ansamblu. Grupele protectoare chimice şi strategiile de protecţie/deprotecţie sunt bine cunoscute în domeniul tehnicii. A se vedea, de exemplu,[20]. Grupele protectoare sunt adeseori utilizate pentru a masca reactivitatea anumitor grupe funcţionale, pentru a spori eficienţa reacţiilor chimice dorite, de exemplu, facerea şi ruperea legăturilor chimice într-un mod ordonat şi planificat. Protecţia grupărilor funcţionale ale unui compus modifică alte proprietăţi fizice afară de reactivitatea grupării funcţionale protejate, cum ar fi polaritatea, lipofilicitatea (hidrofobicitatea) şi alte proprietăţi care pot fi măsurate prin instrumente analitice comune. Intermediarii protejaţi chimic pot fi înşişi biologic activi sau inactivi.
Compuşii protejaţi pot manifesta, de asemenea, proprietăţi modificate şi, în unele cazuri, optimizate in vitro şi in vivo, cum ar fi trecerea prin membranele celulare şi rezistenţa la degradarea enzimatică sau sechestrare. În acest rol, compuşii protejaţi cu efecte terapeutice destinate pot fi menţionaţi ca promedicamente. O altă funcţie a unei grupe protectoare este de a converti medicamentul parental într-un promedicament, prin care medicamentul parental este eliberat la conversia promedicamentului in vivo. Deoarece promedicamentele active pot fi absorbite mai eficient decât medicamentul parental, promedicamentele pot poseda o potenţă mai mare in vivo decât medicamentul parental. Grupele protectoare sunt evacuate fie in vitro, în cazul intermediarilor chimici, sau in vivo, în cazul promedicamentelor. În privinţa intermediarilor chimici, nu este deosebit de important ca produsele rezultate după deprotecţie, de exemplu, alcoolurile, să fie acceptabile fiziologic, deşi, în general, este de dorit mai mult în cazul în care produsele sunt inofensive farmacologic.
Grupele protectoare sunt disponibile, cunoscute şi utilizate în comun, şi sunt utilizate opţional pentru a preveni reacţiile secundare cu gruparea protejată în timpul procedurilor sintetice, adică procedeelor sau metodelor de preparare a compuşilor invenţiei. Pentru majoritatea, decizia conform căreia se grupează pentru a proteja, atunci când este necesar de făcut acest lucru, şi natura grupei protectoare chimice „GP” vor fi dependente de chimia reacţiei care urmează a fi protejată împotriva (de exemplu, condiţiilor acide, bazice, oxidative, reductive sau altor condiţii) şi direcţia dorită a sintezei. GP nu trebuie să fie, şi în general nu sunt, identice, dacă compusul este substituit cu GP multiple. În general, GP vor fi utilizate pentru a proteja grupele funcţionale, cum ar fi grupele carboxil, hidroxil, tio sau amino şi pentru a preveni astfel reacţiile adverse sau pentru a facilita altfel eficienţă sintetică. Ordinea de deprotejare pentru obţinerea grupelor deprotejate libere depinde de direcţia dorită a sintezei şi de condiţiile reacţiei care urmează să se ciocnească, şi pot să apară în orice ordine aşa cum este determinată de artizan.
Diferite grupe funcţionale ale compuşilor invenţiei pot fi protejate. De exemplu, grupele protectoare pentru grupele -OH (fie hidroxil, acid carboxilic, acid fosfonic sau alte funcţii) includ „grupe care formează eteri- sau esteri-„. Grupele care formează eteri- sau esteri- sunt capabile să funcţioneze ca grupe protectoare chimice în schemele sintetice prevăzute în acest document. Cu toate acestea, unele grupe hidroxil şi tio protectoare nu sunt nici grupe care formează eteri-, nici grupe care formează esteri-, după cum va fi înţeles de către specialiştii în domeniu, şi sunt incluse cu amidele, descrise mai jos.
Un număr foarte mare de grupe hidroxil protectoare şi grupe care formează amide şi reacţiile de scindare chimice corespunzătoare sunt descrise în [21]. A se vedea, de asemenea [22], inclusă aici prin referinţă în întregime. În particular [23], [24], [25], [26], [27]. Pentru grupele protectoare pentru acidul carboxilic, acidul fosfonic, acidul sulfonic, fosfonat şi alte grupe protectoare pentru acizi vezi Greene, aşa cum este descris mai jos.
Prin exemplu, dar fără limitare, variabilele descrise aici pot fi substituenţi recursivi în anumite exemple de realizare. Tipic, fiecare dintre acestea poate avea loc în mod independent de 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1 sau 0 ori într-o anumită variantă de realizare. Mai precis, fiecare dintre acestea poate avea loc în mod independent de 12 sau mai puţine ori într-o anumită variantă. Ori de câte ori un compus descris în prezentul document este substituit cu mai mult de unul din aceeaşi grupă desemnată, de exemplu, „R1” sau „R3”, atunci se va înţelege că grupele pot fi identice sau diferite, de exemplu, fiecare grupă este aleasă independent. Liniile ondulate indică site-ul legăturilor covalente la grupele, fragmentele adiacente sau atomi.
Într-un exemplu de realizare a invenţiei, compusul este într-o formă izolată şi purificată. In general, termenul de „izolat şi purificat” înseamnă că compusul este în mod substanţial liber de materiale biologice (de exemplu, sânge, ţesuturi, celule etc.). Într-o realizare specifică a invenţiei, termenul înseamnă că compusul sau conjugatul, conform invenţiei, este cu cel puţin aproximativ 50% în greutate fără materiale biologice; într-un alt exemplu de realizare specific, termenul înseamnă că compusul sau conjugatul conform invenţiei este cu cel puţin aproximativ 75% în greutate fără materiale biologice; într-un alt exemplu de realizare specific, termenul înseamnă că compusul sau conjugatul conform invenţiei este cu cel puţin circa 90% în greutate fără materiale biologice; într-un alt exemplu de realizare specific, termenul înseamnă că compusul sau conjugatul conform invenţiei este cu cel puţin circa 98% în greutate fără materiale biologice. Şi într-o altă variantă de realizare, termenul înseamnă că compusul sau conjugatul conform invenţiei este cu cel puţin circa 99% în greutate fără materiale biologice.. Într-o altă variantă de realizare specifică, invenţia prevede un compus sau conjugat care a fost preparat sintetic (de exemplu, ex vivo).
Stereoizomeri
Compuşii conform invenţiei pot avea centre chirale, de exemplu, atomi de carbon sau fosfor chirali. Compuşii conform invenţiei includ astfel amestecurile racemice ale tuturor stereoizomerilor, inclusiv enantiomerilor, diastereoizomerilor şi atropizomerilor. În plus, compuşii conform invenţiei includ izomeri optici îmbogăţiţi sau rezolvaţi la oricare sau toţi atomii asimetrici, chirali. Cu alte cuvinte, centrele chirale aparente din descrieri sunt prezentate ca izomeri chirali sau amestecuri racemice. Atât amestecurile racemice, cât şi amestecurile diastereomerice, precum şi izomerii optici individuali izolaţi sau sintetizaţi, substanţial liberi de structurile enantiomerice sau diastereomerice, sunt toate în domeniul de aplicare al invenţiei. Amestecurile racemice sunt separate în izomerii lor individuali substanţial optic puri prin metode bine cunoscute, cum ar fi, de exemplu, separarea sărurilor diastereomerice formate cu adjuvanţi optic activi, de exemplu, acizi sau baze, urmată de conversia înapoi la substanţele optic active. În majoritatea cazurilor, izomerul optic dorit este sintetizat prin intermediul reacţiilor stereospecifice, începând cu stereoizomerul corespunzător al materialului iniţial dorit.
Compuşii, conform invenţiei, pot exista, de asemenea, ca izomeri tautomeri în anumite cazuri. Deşi numai un tautomer poate fi descris, toate aceste forme sunt contemplate în domeniul de aplicare al invenţiei. De exemplu, tautomerii en-aminelor pot exista pentru purină, pirimidină, imidazol, guanidină, amidină, iar sistemele tetrazolice şi toate formele lor tautomere posibile sunt incluse în domeniul de aplicare a invenţiei.
Săruri şi hidraţi
Exemple de săruri fiziologic sau farmaceutic acceptabile ale compuşilor invenţiei includ săruri derivate de la o bază adecvată, cum ar fi un metal alcalin (de exemplu, sodiu), un metal alcalino-pământos (de exemplu, magneziu), amoniu şi NX4 + (unde X reprezintă o grupă alchil C1-C4). Sărurile fiziologic acceptabile ale unui atom de hidrogen sau a unei grupe amino, includ săruri ale acizilor carboxilici organici, cum ar fi acidul acetic, benzoic, lactic, fumaric, tartric, maleic, malonic, malic, izetionic, lactobionic şi succinic; acizii sulfonici organici, cum ar fi acidul metansulfonic, etansulfonic, benzensulfonic şi p-toluensulfonic; şi acizii anorganici, cum ar fi acidul clorhidric, sulfuric, fosforic şi sulfamic. Sărurile fiziologic acceptabile ale unui compus cu o grupă hidroxi includ anionul compusului menţionat în asociere cu un cation adecvat, cum ar fi Na+ şi NX4 + (în care X este ales independent dintre H sau o grupă alchil C1-C4).
Pentru uz terapeutic, sărurile de ingrediente active ale compuşilor conform invenţiei vor fi de obicei acceptabile fiziologic, adică ele vor fi săruri derivate de la un acid sau o bază acceptabile fiziologic. Cu toate acestea, sărurile acizilor sau bazelor care nu sunt acceptabile fiziologic pot, de asemenea, fi utilizate, de exemplu, la prepararea sau purificarea unui compus acceptabil fiziologic. Toate sărurile, care sunt sau nu derivate de la un acid sau o bază acceptabile fiziologic, sunt incluse în domeniul de aplicare a prezentei invenţii.
Sărurile metalice de obicei se prepară prin reacţia hidroxidului de metal cu un compus din această invenţie. Exemple de săruri metalice, care sunt astfel preparate, sunt sărurile care conţin Li+, Na+ şi K+. O sare de metal mai puţin solubilă poate fi precipitată din soluţia unei sări mai solubile prin adăugarea compusului metalic adecvat.
În plus, sărurile pot fi formate de la adiţia acidă a anumitor acizi organici şi anorganici, de exemplu, HCI, HBr, H2SO4, H3PO4 sau acizi sulfonici organici, la centrele de bază, de obicei aminele, sau la grupele acide. În fine, se înţelege că compoziţiile descrise aici includ compuşii prezentei invenţii în forma lor neionizată, precum amfoterică, şi combinaţiile cu cantităţi stoichiometrice de apă ca şi în hidraţi.
De asemenea, incluse în domeniul de aplicare a acestei invenţii sunt sărurile compuşilor parentali cu unul sau mai mulţi aminoacizi. Oricare dintre aminoacizii naturali sau nenaturali sunt adecvaţi, în special aminoacizii care apar natural depistaţi ca componente proteice, deşi aminoacidul este de obicei unul care poartă o catenă laterală cu o grupă bazică sau acidă, de exemplu, lizină, arginină sau acid glutamic, sau o grupă neutră, cum ar fi glicina, serina, treonina, alanină, izoleucină sau leucină.
Metode de inhibare a VHC
Un alt aspect al invenţiei se referă la metodele de inhibare a activităţii VHC cuprinzând etapa de tratare a unei probe suspectate a conţine VHC cu un compus sau o compoziţie din prezenta invenţie.
Compuşii conform invenţiei pot acţiona ca inhibitori ai VHC, ca intermediari pentru astfel de inhibitori sau au alte utilităţi cum este descris mai jos. Inhibitorii se vor lega în general la porţiuni pe suprafaţa sau într-o cavitate a ficatului. Compuşii care se leagă în ficat se pot lega cu grade de reversibilitate diferite. Acei compuşi care se leagă substanţial ireversibil sunt candidaţii ideali pentru a fi utilizaţi în această metodă a prezentei invenţii. Odată etichetati, compuşii care se leagă substanţial ireversibil sunt utili în calitate de sonde pentru detectarea VHC. În consecinţă, invenţia se referă la metode de detectare a NS3 într-o probă suspectată a conţine VHC cuprinzând etapele de: tratare a unei probe suspectate a conţine VHC cu o compoziţie care conţine un compus al invenţiei legat la o etichetă; şi observarea efectului probei asupra activităţii etichetei. Etichete adecvate sunt bine cunoscute în domeniul diagnosticului şi includ radicali liberi stabili, fluorofori, radioizotopi, enzime, grupe chemiluminescente şi cromogene. Compuşii descrişi aici sunt etichetaţi în mod convenţional utilizând grupe funcţionale, cum ar fi amino sau hidroxil. Într-un exemplu de realizare invenţia descrie un compus cu oricare din formulele (I) şi (A1) - (A4), care cuprinde sau care este legat sau cuplat la unul sau mai multe etichete detectabile. În contextul invenţiei probele suspectate a conţine VHC includ materiale naturale sau artificiale, cum ar fi organismele vii; culturile tisulare sau celulare; probele biologice, cum ar fi probele de materiale biologice (sânge, ser, urină, lichid cefalorahidian, lacrimi, spută, salivă, probe de ţesut şi altele asemenea); probe de laborator; probe de alimente, apă sau aer; probe de bioprodus precum extractele de celule, celule recombinante special care sintetizează o glicoproteină dorită; şi altele asemenea. De obicei proba va fi suspectată a conţine VHC. Probele pot fi conţinute în orice mediu, inclusiv apa şi amestecuri de solvent/apă organice. Probele includ organisme vii cum ar fi oameni, precum şi materiale artificiale cum ar fi culturile celulare.
Etapa de tratament conform invenţiei include adăugarea compusului invenţiei la probă sau aceasta cuprinde adăugarea unui precursor al compoziţiei la probă. Etapa suplimentară include orice metodă de administrare aşa cum este descris mai sus.
Dacă se doreşte, activitatea VHC după aplicarea compusului poate fi observată prin orice metodă, inclusiv metode directe şi indirecte de detectare a activităţii VHC. Metodele cantitativă, calitativă şi semicantitativă de determinare a activităţii VHC sunt toate contemplate. De obicei una din metodele de screening descrise mai sus este aplicată, cu toate acestea, orice altă metodă, cum ar fi observarea proprietăţilor fiziologice ale unui organism viu sunt de asemenea aplicabile.
Multe organisme conţin VHC. Compuşii din prezenta invenţie sunt utili în tratamentul sau profilaxia afecţiunilor asociate cu activarea VHC la animale sau la om.
Cu toate acestea, în compuşii de screening capabili să inhibe activitatea VHC ar trebui să se ţină cont de faptul că rezultatele testelor cu enzime nu pot fi corelate întotdeauna cu testele cu culturi celulare. Astfel, un test pe bază de celulă ar fi în mod tipic instrumentul de screening primar.
Compoziţii (formulări) farmaceutice
Compuşii prezentei invenţii sunt formulaţii cu purtători şi excipienţi convenţionali, care vor fi selectaţi în conformitate cu practica obişnuită. Comprimatele vor conţine excipienţi, glisanţi, materiale de umplutură, lianţi şi altele asemenea. Compoziţiile apoase se prepară în formă sterilă, iar când sunt destinate livrării prin administrare alta decât administrarea orală vor fi în general izotonice. Toate compoziţiile vor conţine opţional excipienţi, cum ar fi cei prevăzuţi în [27]. Excipienţii includ acidul ascorbic şi alţi antioxidanţi, agenţi de chelare, cum ar fi EDTA, carbohidraţi, cum ar fi dextrina, hidroxialchilceluloza, hidroxialchilmetilceluloza, acidul stearic şi alţii asemenea. PH-ul compoziţiilor variază de la aproximativ 3 până la aproximativ 11, dar este de obicei de aproximativ de la 7 la 10. Tipic, compusul va fi administrat într-o doză de la 0,01 miligrame la 2 grame. Într-o variantă de realizare, doza va fi de la circa 10 miligrame la 450 miligrame. Într-o altă variantă de realizare, doza va fi de la circa 25 la circa 250 miligrame. Într-o altă variantă de realizare, doza va fi de aproximativ 50 sau 100 miligrame. Într-o variantă de realizare, doza va fi de aproximativ 100 de miligrame. Se consideră că compusul poate fi administrat o dată, de două ori sau de trei ori pe zi.
Deşi este posibil ca ingredientele active să fie administrate singure, pot fi preferabil prezentate ca compoziţii farmaceutice. Compoziţiile, atât pentru uz veterinar, cât şi pentru uz uman, conform invenţiei cuprind cel puţin un ingredient activ, aşa cum este definit mai sus, împreună cu unul sau mai mulţi purtători acceptabili pentru aceasta şi, opţional, alte ingrediente terapeutice. Purtătorul(rii) trebuie să fie „acceptabil(i)” în sensul de a fi compatibil(i) cu celelalte ingrediente ale compoziţiei şi fiziologic inofensiv(i) recipientului.
Compoziţiile includ cele adecvate pentru metodele de administrare menţionate mai sus. Compoziţiile pot fi prezentate în mod convenabil sub formă de dozare unică şi pot fi preparate prin oricare dintre metodele binecunoscute în domeniul farmaciei. Metodele şi compoziţiile, în general, se găsesc în [29]. Astfel de metode includ etapa aducerii ingredientului activ în asociere cu purtătorul care constituie unul sau mai multe ingrediente auxiliare. În general, compoziţiile sunt preparate prin aducerea ingredientului activ în asociere uniformă şi intimă cu purtătorii lichizi sau purtătorii solizi fin divizaţi sau ambii, şi apoi, dacă este necesar, formarea produsului.
Compoziţiile prezentei invenţii potrivite pentru administrare orală pot fi prezentate sub formă de unităţi discrete cum ar fi capsule, caşete sau tablete, fiecare conţinând o cantitate predeterminată de ingredient activ; sub formă de pulbere sau granule; ca o soluţie sau o suspensie într-un lichid apos sau non-apos; sau ca o emulsie lichidă de ulei-în-apă sau o emulsie lichidă de apă-în-ulei. Ingredientul activ poate fi administrat, de asemenea, ca un bol, electuar sau pastă.
O tabletă este preparată prin comprimare sau turnare, opţional cu unul sau mai multe ingrediente auxiliare. Tabletele comprimate pot fi preparate prin comprimarea într-o maşină adecvată a ingredientului activ într-o formă cu curgere liberă, cum ar fi o pulbere sau granule, opţional amestecat cu un liant, lubrifiant, diluant inert, conservant, substanţă tensioactivă sau agent de dispersie. Comprimatele turnate pot fi fabricate prin turnarea într-o maşină adecvată a unui amestec de ingredient activ sub formă de pulbere, umectat cu un diluant lichid inert. Tabletele pot fi opţional acoperite sau marcate şi, opţional, sunt formulate astfel încât să asigure o eliberare controlată a ingredientului activ din acestea.
Pentru administrarea la ochi sau alte ţesuturi externe, de exemplu, gura şi pielea, compoziţiile sunt de preferinţă aplicate ca unguent sau cremă conţinând ingredientul(e) activ(e) într-o cantitate, de exemplu, de 0,075 la 20% g/g (inclusiv ingredientul(e) activ(e) într-un interval între 0,1% şi 20% în trepte de câte 0,1% g/g, cum ar fi 0,6% g/g, 0,7% g/g etc.), preferabil de la 0,2 la 15% g/g şi cel mai preferabil de la 0,5 la 10% g/g. Când sunt formulate într-un unguent, ingredientele active pot fi utilizate fie cu un parafinic sau o bază de unguent miscibil cu apa. Alternativ, ingredientele active pot fi formulate într-o cremă cu o bază-cremă ulei-în-apă.
Dacă se doreşte, faza apoasă a bazei-cremă poate include, de exemplu, cel puţin 30% g/g de alcool polihidroxilic, adică un alcool având două sau mai multe grupări hidroxil, cum ar fi propilen glicol, butan 1,3-diol, manitol , sorbitol, glicerol şi polietilenglicol (inclusiv PEG 400) şi amestecurile acestora. Compoziţiile topice pot cuprinde de preferinţă un compus care măreşte absorbţia sau penetrarea ingredientului activ prin piele sau alte zone afectate. Exemple de astfel de intensificatori ai penetrării dermice includ dimetilsulfoxidul şi analogii înrudiţi.
Faza uleioasă a emulsiilor acestei invenţii poate fi constituită din ingrediente cunoscute într-un mod cunoscut. În timp ce faza poate cuprinde numai un emulgator (altfel cunoscut ca un emulgent), aceasta cuprinde de preferinţă un amestec de cel puţin un emulgator cu o grăsime sau un ulei sau cu ambele o grăsime şi un ulei. De preferinţă, un emulgator hidrofil este inclus împreună cu un emulgator lipofil care acţionează ca un stabilizator. De asemenea, este de preferat să se includă atât un ulei, cât şi o grăsime. Împreună, emulgatorul(rii) cu sau fără stabilizator(i) formează aşa-numita ceară de emulsionare, iar ceara împreună cu uleiul şi grăsimea formează aşa-numita bază de unguent de emulsionare care formează faza dispersată uleioasă a compoziţiilor-cremă.
Emulgatorii şi stabilizatorii de emulsie adecvaţi pentru utilizare în compoziţia invenţiei includ Tween® 60, Span® 80, alcool cetostearilic, alcool benzilic, alcool miristilic, gliceril mono-stearat şi lauril sulfat de sodiu.
Alegerea uleiurilor sau grăsimilor adecvate pentru compoziţie se bazează pe atingerea proprietăţilor cosmetice dorite. Crema ar trebui să fie, de preferinţă, un produs non-gras şi lavabil, care nu pătează, cu consistenţă adecvată pentru a evita scurgerea din tuburi sau alte containere. Esterii alchilici mono- sau dibazici cu catenă liniară sau ramificată, cum ar fi di-isoadipatul, stearatul de izocetil, propilenglicol diesterul acizilor graşi de cocos, miristatul de izopropil, oleatul de decil, palmitatul de izopropil, stearatul de butil, palmitatul de 2-etilhexil sau un amestec de esteri cu catenă ramificată cunoscuţi ca Crodamol CAP poate fi utilizat, ultimii trei fiind esterii preferaţi. Aceştia pot fi folosiţi singuri sau în combinaţie în funcţie de proprietăţile cerute. Alternativ, se folosesc lipide cu un punct de topire ridicat cum ar fi parafina albă moale şi/sau parafina lichidă sau alte uleiuri minerale.
Compoziţiile farmaceutice conform prezentei invenţii conţin unul sau mai mulţi compuşi ai invenţiei împreună cu unul sau mai mulţi purtători acceptabili farmaceutic sau excipienţi şi opţional alţi agenţi terapeutici. Compoziţiile farmaceutice care conţin ingredientul activ pot fi sub orice formă adecvată pentru metoda destinată administrării. Atunci când este utilizat pentru uz oral, de exemplu, tablete, comprese, pastile, suspensii apoase sau uleioase, granule sau pulberi dispersabile, emulsii, capsule moi sau tari, siropuri sau elixiruri pot fi preparate. Compoziţiile destinate pentru uz oral pot fi preparate conform cu oricare metodă cunoscută în domeniu pentru fabricarea compoziţiilor farmaceutice şi astfel de compoziţii pot conţine unul sau mai mulţi agenţi, inclusiv agenţi de îndulcire, agenţi de aromatizare, agenţi de colorare şi agenţi de conservare, în scopul de a oferi un preparat acceptabil. Tabletele care conţin ingredientul activ în amestec cu excipienţi acceptabili farmaceutic netoxici, care sunt potriviţi pentru fabricarea tabletelor sunt acceptabili. Aceşti excipienţi pot fi, de exemplu, diluanţi inerţi, cum ar fi carbonatul de calciu sau de sodiu, lactoza, lactoza monohidrat, croscarmeloza sodică, povidona, fosfatul de calciu sau de sodiu; agenţi de granulare şi dezintegrare, cum ar fi amidonul de porumb sau acidul alginic; lianţi, cum ar fi celuloza, celuloza microcristalină, amidonul, gelatina sau acacia; şi agenţi de lubrifiere, cum ar fi stearatul de magneziu, acidul stearic sau talcul. Tabletele pot fi neacoperite sau pot fi acoperite prin tehnici cunoscute, inclusiv microcapsularea pentru a reţine dezintegrarea şi adsorbţia în tractul gastro-intestinal şi, prin aceasta, asigură o acţiune durabilă pe o perioadă mai lungă. De exemplu, un material de întârziere de timp, cum ar fi monostearatul de gliceril sau distearatul de gliceril singur sau cu o ceară, poate fi utilizat.
Compoziţiile pentru uz oral pot fi, de asemenea, prezentate sub formă de capsule gelatinoase în cazul în care ingredientul activ este amestecat cu un diluant solid inert, de exemplu, fosfat de calciu sau caolin, sau sub formă de capsule de gelatină moi, în care ingredientul activ este amestecat cu apă sau un mediu de ulei, cum ar fi ulei de arahide, parafină lichidă sau ulei de măsline.
Suspensiile apoase ale invenţiei conţin substanţele active în amestec cu excipienţi adecvaţi pentru fabricarea suspensiilor apoase. Astfel de excipienţi includ un agent de suspendare, cum ar fi carboximetilceluloză sodică, metilceluloză, hidroxipropil metilceluoză, alginat de sodiu, polivinilpirolidona, gumă tragacantă şi gumă arabică, şi agenţi de dispersare sau umectare, cum ar fi o fosfatidă naturală (de exemplu, lecitina), un produs de condensare al unui oxid alchilenic cu un acid gras (de exemplu, stearat de polioxietilenă), un produs de condensare a oxidului de etilenă, cu un ciclu lung de alcool alifatic (de exemplu, heptadecaetileneoxicetanol), un produs de condensare a oxidului de etilenă cu un ester parţial derivat dintr-un acid gras şi o anhidridă hexitol (de exemplu, monooleat de polioxietilen sorbitan). Suspensia apoasă poate conţine, de asemenea, unul sau mai mulţi conservanţi, cum ar fi etil sau n-propil p-hidroxi-benzoat, unul sau mai mulţi agenţi de colorare, unul sau mai mulţi agenţi de aromatizare şi unul sau mai mulţi agenţi de îndulcire, cum ar fi sucroza sau zaharina.
Suspensiile uleioase pot fi formulate prin suspendarea ingredientului activ într-un ulei vegetal, cum ar fi ulei de arahide, ulei de măsline, ulei de nucă de cocos sau ulei de susan, sau într-un ulei mineral, cum ar fi parafina lichidă. Suspensiile de orale pot să conţină un agent de îngroşare, cum ar fi ceară de albine, parafină grea sau alcool cetilic. Agenţi de îndulcire, cum ar fi cei prezentaţi mai sus, şi agenţi de aromatizare pot fi adăugaţi pentru a obţine un preparat oral acceptabil. Aceste compoziţii pot fi conservate prin adăugarea unui antioxidant cum este acidul ascorbic.
Pulberile şi granulele dispersabile ale invenţiei potrivite pentru prepararea unei suspensii apoase prin adăugarea apei produc un ingredient activ în amestec cu un agent de dispersare sau de umectare, un agent de suspendare, precum şi unul sau mai mulţi conservanţi. Agenţii de dispersie sau de umectare şi agenţii de suspendare potriviţi sunt exemplificaţi prin cei descrişi mai sus. Excipienţi suplimentari, de exemplu, agenţi de îndulcire, aromatizare şi colorare pot fi, de asemenea, prezenţi.
Compoziţiile farmaceutice ale invenţiei pot fi, de asemenea, sub formă de emulsii ulei-în-apă. Faza uleioasă poate fi un ulei vegetal, cum ar fi uleiul de măsline sau uleiul de arahide, un ulei mineral, cum ar fi parafina lichidă, sau un amestec al acestora. Agenţii de emulsionare adecvaţi includ gume naturale, cum ar fi guma arabică şi guma tragacantă, fosfatide produse în mod natural, cum ar fi lecitina de soia, esteri sau esteri parţiali derivaţi de la acizii graşi şi anhidridele hexitolului, cum ar fi monooleatul de sorbitan şi produse de condensare ale acestor esteri parţiali cu oxid de etilenă, cum ar fi monooleatul de polioxietilen sorbitan. Emulsia poate conţine, de asemenea, agenţi de îndulcire şi aromatizanţi. Siropurile şi elixirele pot fi formulate cu agenţi de îndulcire, cum ar fi glicerină, sorbitol sau zaharoză. Astfel de compoziţii pot conţine, de asemenea, un calmant, un conservant, un aromatizant sau un agent de colorare.
Compoziţiile farmaceutice ale invenţiei pot fi sub forma unui preparat injectabil steril, cum ar fi o suspensie apoasă sau oleaginoasă injectabilă sterilă. Această suspensie poate fi formulată conform domeniului tehnicii cunoscut folosind agenţii de dispersie sau umectare şi agenţii de suspendare adecvaţi care au fost menţionaţi mai sus. Preparatul injectabil steril poate fi, de asemenea, o soluţie injectabilă sterilă sau o suspensie într-un diluant sau solvent acceptabil parenteral netoxic, cum ar fi o soluţie în 1,3-butan-diol sau un preparat ca o pulbere liofilizată. Printre umpluturile şi solvenţii acceptabili care pot fi utilizaţi se numără apa, soluţia Ringer şi soluţia izotonică de clorură de sodiu. In plus, uleiurile fixe sterile pot fi folosite în mod convenţional ca solvent sau mediu de suspendare. Pentru acest scop, orice ulei sedativ nevolatil poate fi utilizat, inclusiv mono-sau digliceridele sintetice. In plus, acizii graşi, cum ar fi acidul oleic pot fi, de asemenea, utilizaţi la prepararea produselor injectabile.
Cantitatea de ingredient activ care poate fi combinată cu materiale purtătoare pentru a produce o singură formă de dozare vor varia în funcţie de gazda tratată şi modul special de administrare. De exemplu, o compoziţie cu acţiune prelungită destinată pentru administrare orală la oameni poate conţine aproximativ 1 la 1000 mg de material activ combinat cu o cantitate adecvată şi convenabilă de material purtător, care poate varia de la circa 5 la circa 95% din totalul compoziţiilor (greutate:greutate). Compoziţia farmaceutică poate fi preparată pentru a obţine cantităţi uşor măsurabile pentru administrare. De exemplu, o soluţie apoasă destinată pentru perfuzie intravenoasă poate conţine de la circa 3 la 500 µg de ingredient activ per mililitru de soluţie pentru ca să se poată producă perfuzia cu un volum corespunzător la un debit de aproximativ 30 mL/oră.
Compoziţiile adecvate pentru administrarea la ochi includ picături oftalmice în care ingredientul activ este dizolvat sau suspendat într-un purtător adecvat, în special un solvent apos pentru ingredientul activ. Ingredientul activ este prezent, de preferinţă, în astfel de compoziţii într-o concentraţie de 0,5 la 20%, în mod avantajos 0.5 la 10% în special circa 1,5% g/g.
Compoziţiile adecvate pentru administrarea topică în gură includ tablete conţinând ingredientul activ într-o bază aromatizată, de obicei, sucroză şi acacie sau tragacant; pastile conţinând ingredientul activ într-o bază inertă, cum ar fi gelatină şi glicerină, sau sucroză şi acacie; şi soluţii pentru clătirea gurii conţinând ingredientul activ într-un purtător lichid adecvat.
Compoziţiile pentru administrare rectală pot fi prezentate ca un supozitor cu o bază adecvată conţinând, de exemplu, unt de cacao sau un salicilat.
Compoziţiile adecvate pentru administrarea nazală sau intrapulmonară au o dimensiune a particulelor, de exemplu, în intervalul de la 0,1 la 500 microni (inclusiv dimensiunile particulelor într-un interval între 0,1 şi 500 microni în microni incremenţi, cum ar fi 0,5, 1, 30 microni, 35 microni etc.), care sunt administrate prin inhalare rapidă prin meatul nazal sau prin inhalare prin gură, astfel încât să se ajungă la sacii alveolari. Compoziţiile adecvate includ soluţii apoase sau uleioase ale ingredientului activ. Compoziţiile adecvate pentru administrarea pulberii uscate sau aerosolului pot fi preparate conform unor metode convenţionale şi pot fi livrate cu alţi agenţi terapeutici, cum ar fi compuşii utilizaţi până acum în tratamentul sau profilaxia afecţiunilor asociate cu activitatea VHC.
Compoziţiile adecvate pentru administrarea vaginală pot fi prezentate ca ovule, tampoane, creme, geluri, paste, spume sau compoziţii pulverizare care conţin în plus la ingredientul activ astfel de purtători ca cei care sunt cunoscuţi în domeniu ca fiind adecvaţi.
Compoziţiile adecvate pentru administrare parenterală includ soluţii apoase şi neapoase sterile injectabile care pot conţine antioxidanţi, tampoane, bacteriostate şi soluţii care fac compoziţia izotonică cu sângele recipientului tratat; şi suspensii sterile apoase şi neapoase care pot include agenţi de suspendare şi agenţi de îngroşare.
Compoziţiile sunt prezentate în recipiente cu doză unitară sau multi-doză, de exemplu fiole şi flacoane sigilate, şi pot fi stocate într-o stare liofilizată care necesită numai adăugarea unui purtător lichid steril, de exemplu apa pentru injectare, imediat înainte de utilizare. Soluţiile şi suspensiile injectabile extemporanee sunt preparate din pulbere sterile, granule şi tablete de tipul celor descrise anterior. Compoziţiile cu doză unitară preferate sunt cele care conţin o doză zilnică sau o sub-doză unitară zilnică, după cum s-a menţionat mai sus, sau o fracţiune adecvată a acesteia, de ingredient activ.
Trebuie să se înţeleagă că, în plus la ingredientele menţionate mai sus, compoziţiile acestei invenţii pot include alţi agenţi convenţionali din domeniul tehnicii ţinând cont de tipul compoziţiei în discuţie, de exemplu, cele adecvate pentru administrarea orală pot include agenţi de aromatizare.
Invenţia mai prevede compoziţii veterinare conţinând cel puţin un ingredient activ aşa cum a fost definit mai sus, împreună cu un purtător veterinar.
Purtătorii veterinari sunt materiale utile pentru scopul administrării compoziţiei şi pot fi materiale solide, lichide sau gazoase, care sunt de altfel inerte sau acceptabile în domeniul veterinar şi sunt compatibile cu ingredientul activ. Aceste compoziţii veterinare pot fi administrate oral, parenteral sau prin orice altă cale dorită.
Compuşii invenţiei pot fi, de asemenea, formulaţi pentru a asigura eliberarea controlată a ingredientului activ, pentru a permite dozarea mai puţin frecventă sau pentru îmbunătăţirea profilului farmacocinetic sau toxicitatea ingredientului activ. În consecinţă, invenţia prevede, de asemenea, compoziţii care conţin unul sau mai mulţi compuşi ai invenţiei formulaţi pentru uşurarea durabilă sau controlată.
Doza eficientă de ingredient activ depinde cel puţin de natura afecţiunii tratate, de toxicitate, dacă compusul este utilizat în scop profilactic (doze mai mici), metoda de administrare, precum şi compoziţia farmaceutică, şi va fi determinată de medic utilizând studiile privind escalarea dozei convenţionale.
Căi de administrare
Unul sau mai mulţi compuşi ai invenţiei (denumiţi în continuare ingrediente active) sunt administraţi pe orice cale adecvată afecţiunii care este tratată. Căile adecvate includ orală, rectală, nazală, topică (inclusiv bucală şi sublinguală), vaginală şi parenterală (inclusiv subcutanată, intramusculară, intravenoasă, intradermică, intratecală şi epidurală) şi altele asemenea. Se va determina că calea preferată să poată varia, de exemplu, cu starea recipientului. Un avantaj al compuşilor invenţiei este că acestea sunt biodisponibile oral şi pot fi dozate oral.
Terapia asociată cu VHC
Într-o altă variantă de realizare, exemplele nelimitative de combinaţii adecvate includ combinaţii de unul sau mai mulţi compuşi cu formula generală (I) şi (A1-A4), cu unul sau mai mulţi interferoni, ribavirină sau analogii săi, inhibitori ai proteazei VHC NS3, inhibitori ai alfa-glucozidazei 1, hepatoprotectanţi, inhibitori nucleozidici sau nucleotidici ai polimerazei VHC NS5B, inhibitori non-nucleozidici ai polimerazei VHC NS5B, inhibitori ai VHC NS5A, TLR-7 agonişti, inhibitori ciclofilini, inhibitori ai VHC IRES, amplificatori farmacocinetici şi alte medicamente sau agenţi terapeutici pentru tratarea VHC.
Mai precis, unul sau mai mulţi compuşi, aşa cum este descris în prezenta invenţie, poate fi combinat cu unul sau mai mulţi compuşi selectaţi din grupul constând din:
1) interferoni, de exemplu, rIFN-alfa 2b pegilat (PEG-INTRON), rIFN-alfa 2a pegilat (Pegasys), rIFN-alfa 2b (Intron A), rIFN-alfa 2a (Roferon-A), interferon alfa (MOR-22, OPC-18, Alfaferon, Alfanativ, Multiferon, subalin), interferon alfacon-1 (Infergen), interferon alfa-n1 (Wellferon), interferon alfa-n3 (Alferon), interferon-beta (Avonex, DL-8234), interferon-omega (omega DUROS, Biomed 510), albinterferon alfa-2b (Albuferon), IFN alfa-2b XL, BLX-883 (Locteron), DA-3021, interferon glicozilat alfa-2b (AVI-005), PEG-Infergen , interferon lambda-1 (IL-29 PEGilat) şi belerofon;
2) ribavirină şi analogii acesteia, de exemplu, ribavirina (Rebetol, Copegus) şi taribavirina (Viramidine)
3) inhibitori ai proteazei VHC NS3, de exemplu, boceprevir (SCH-503034, SCH-7), telaprevir (VX-950), TMC435350, BI-1335, BI-1230, MK-7009, VBY-376, VX-500, GS -9256, GS-9451, BMS-605339, PHX-1766, AS-101, YH-5258, YH5530, YH5531, ABT-450, ACH-1625, ITMN-191, MK5172, MK6325 şi MK2748;
4) inhibitorii ai alfa-glucozidazei 1, de exemplu, celgosivir (MX-3253), miglitol şi UT-231B;
5) hepatoprotectanţi, de exemplu, emericasan (IND-6556), ME-3738, GS-9450 (LB-84451), silibilin şi MitoQ;
6) inhibitori nucleozidici sau nucleotidici ai polimerazei VHC NS5B, de exemplu, R1626, R7128 (R4048), IDX184, IDX-102, BCX-4678, valopicitabină (NM-283), MK-0608, sofosbuvir (GS-7977 (anterior PSI- 7977)) şi INX-189 (acum BMS986094);
7) inhibitori non-nucleozidici ai polimerazei VHC NS5B, de exemplu, PF-868554, VCH-759, VCH-916, JTK-652, MK-3281, GS-9190, VBY-708, VCH-222, A848837, ANA-598 , GL60667, GL59728, A-63890, A-48773, A-48547, BC-2329, VCH-796 (nesbuvir), GSK625433, BILN-1941, XTL-2125, ABT-072, ABT-333, GS-9669, PSI-7792 şi GS-9190;
8) inhibitori ai VHC NS5A, de exemplu, AZD-2836 (A-831), BMS-790052, ACH-3102, ACH-2928, MK8325, MK4882, MK8742, PSI-461, IDX719 şi A-689;
9) agonişti TLR-7, de exemplu, imichimod, 852A, GS-9524, ANA-773, ANA-975, AZD-8848 (DSP-3025) şi SM, 360,320;
10) inhibitori ciclofilini, de exemplu, Debio-025, SCY-635 şi NIM811;
11) inhibitori ai ARN IRES, de exemplu, MCI-067;
12) amplificatori farmacocinetici, de exemplu, BAS-100, SPI-452, PF-4194477, TMC-41629, GS-9350, GS-9585 şi roxitromicină; şi
13), alte medicamente pentru tratarea VHC, de exemplu, alfa timozină 1 (Zadaxină), nitazoxanidă (Alinea, NTZ), BIVN-401 (virostat), PYN-17 (altirex), KPE02003002, actilon (CPG-10101), GS-9525 , KRN-7000, civacir, GI-5005, XTL-6865, BIT225, PTX-111, ITX2865, TT-033i, ANA 971, NOV-205, tarvacină, EHC-18, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065 , BMS-650032, BMS-791325, Bavituximab, MDX-1106 (ONO-4538), Oglufanidă şi VX-497 (merimepodib).
Mai precis, unul sau mai mulţi compuşi, aşa cum este descris în prezenta invenţie, poate fi combinat cu unul sau mai mulţi compuşi selectaţi din grupa constând din inhibitori non-nucleozidici ai VHC NS5B polimerazei (ABT-072 şi ABT-333), inhibitori ai VHC NS5A (ACH-3102 şi ACH-2928) şi inhibitori ai VHC NS3 proteazei (ABT-450 şi ACH-1625).
Într-o altă variantă de realizare, prezenta cerere descrie compoziţii farmaceutice care conţin un compus aşa cum este descris aici, sau o sare acceptabilă farmaceutic, un solvat, şi/sau un ester al acestuia, în combinaţie cu cel puţin un agent terapeutic suplimentar, şi un purtător sau excipient acceptabil farmaceutic.
Conform unui exemplu, agentul terapeutic utilizat în combinaţie cu compusul, aşa cum este descris aici, poate fi orice agent având un efect terapeutic atunci când este utilizat în combinaţie cu compusul descris aici. De exemplu, agentul terapeutic utilizat în combinaţie cu compusul descris aici poate fi interferoni, analogi ai ribavirinei, inhibitori ai NS3proteazei, inhibitori ai NS5B polimerazei, inhibitori ai alfa-glucozidazei 1, hepatoprotectanţi, inhibitori non-nucleozidici ai VHC şi alte medicamente pentru tratarea VHC.
Într-o altă variantă de realizare, prezenta cerere prevede compoziţii farmaceutice conţinând un compus cu formula generală (I), sau o sare acceptabilă farmaceutic, un solvat şi/sau un ester al acestuia, în combinaţie cu cel puţin un agent terapeutic suplimentar selectat din grupa constând din rIFN-alfa 2b pegilat, rIFN-alfa 2a pegilat, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, consens IFN alfa, infergen, rebif, locteron, AVI-005, PEG-infergen, IFN-beta pegilat, interferon alfa oral, FERON, referon, INTERMAX alfa, r-IFN-beta, infergen + actimun, IFN-omega cu DUROS, albuferon, rebetol, copegus, levovirină, VX-497, viramidină (taribavirină), A-831, A-689 , NM-283, valopicitabină, R1626, PSI-6130 (R1656), VHC-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VCH-759, PF-868554, GSK625433, XTL-2125, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir), ITMN-191 şi BILN-2065, MX-3253 (celgosivir), UT-231B, IDN-6556, ME 3738, MitoQ şi LB-84451, derivaţi ai benzimidazolului, derivaţi ai benzo-1,2,4-tiadiazinei şi derivaţi ai fenilalaninei, zadaxinei, nitazoxanidei (alinea), BIVN-401 (virostat), Debio-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituximab, oglufanidă, PYN- 17, KPE02003002, actilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA-975 (izatoribină), XTL-6865, ANA 971, NOV-205, tarvacină, EHC-18 şi NIM811, şi un purtător sau excipient acceptabil farmaceutic.
Într-o altă variantă de realizare, prezenta cerere prevede un agent farmaceutic combinaţie conţinând:
a) o primă compoziţie farmaceutică care conţine un compus cu formula generală (I), sau o sare acceptabilă farmaceutic, un solvat sau un ester al acestuia, şi
b) o a doua compoziţie farmaceutică care conţine cel puţin un agent terapeutic suplimentar selectat din grupa constând din compuşi inhibitori ai VIU proteazei, inhibitori non-nucleozidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori nucleozidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori nucleotidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori ai VIU integrazei, inhibitori ai gp41, inhibitori ai CXCR4, inhibitori ai gp120, inhibitori ai CCR5, interferoni, analogi ai ribavirinei, inhibitori ai proteazei NS3, inhibitori ai alfa-glucozidazei 1, hepatoprotectanţi, inhibitori non-nucleozidici ai VHC şi alte medicamente pentru tratarea VHC, şi combinaţii ale acestora.
Într-o altă variantă de realizare este descrisă o compoziţie farmaceutică care conţine un compus cu formula generală (I), aşa cum este descris aici şi un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei şi opţional un interferon sau ribavirină. Într-o variantă de realizare, compusul reprezintă metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroisochromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-yl)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-yl}carbamat având formula:
şi inhibitorul reprezintă sofosbuvir.
Combinaţii ale compuşilor cu formula I şi agenţi terapeutici activi adiţionali pot fi selectaţi pentru tratarea pacienţilor infectaţi cu VHC şi alte afecţiuni cum ar fi infecţiile cu VIU. În consecinţă, compuşii cu formula I pot fi combinaţi cu unul sau mai mulţi compuşi utili în tratarea VIU, de exemplu compuşi inhibitori ai VIU proteazei, inhibitori non-nucleozidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori nucleozidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori nucleotidici ai VIU transcriptazei inverse, inhibitori ai VIU integrazei, inhibitori ai gp41, inhibitori ai CXCR4, inhibitori ai gp120, inhibitori ai CCR5, interferoni, analogi ai ribavirinei, inhibitori ai proteazei NS3, inhibitorii ai NS5B polimerazei, inhibitori ai alfa-glucozidazei 1, hepatoprotectanţi, inhibitori non-nucleozidici ai VHC şi alte medicamente pentru tratarea VHC
Mai precis, unul sau mai mulţi compuşi cu formula generală (I) sau (A1) - (A4) poate fi combinat cu unul sau mai mulţi compuşi selectaţi din grupa constând din 1) inhibitori ai VIU proteazei, de exemplu, amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir, ritonavir, lopinavir + ritonavir, nelfinavir, sachinavir, tipranavir, brecanavir, darunavir, TMC-126, TMC-114, mozenavir (DMP-450), JE-2147 (AG1776), AG1859, DG35, L-756423, RO0334649, KNI-272, DPC-681, DPC-684 şi GW640385X, DG17, PPL-100, 2), un inhibitor non-nucleozidic al VIU transcriptazei inverse, de exemplu, capravirină, emivirină, delaviridină, efavirenz, nevirapină, (+) calanolid A , etravirină, GW5634, a DPC-083, DPC-961, DPC-963, MIV-150, şi TMC-120, TMC-278 (rilpivirină), efavirenz, BILR 355 BS, VRX 840,773, UK-453,061, RDEA806; 3) un inhibitor nucleozidic al VIU transcriptazei invese, de exemplu, zidovudină, emtricitabină, didanozină, stavudină, zalcitabină, lamivudină, abacavir, amdoxovir, elvucitabină, alovudină, MIV-210, racivir (±-FTC), D-d4FC, emtricitabină, fosfazidă, fozivudină tidoxil, tidoxil fosalvudină, apricitibină (AVX754), amdoxovir, KP-1461, abacavir + lamivudină, abacavir + lamivudină + zidovudină, zidovudină + lamivudină, 4), un inhibitor nucleotidic al transcriptazei inverse a VIU, de exemplu, tenofovir, fumarat de tenofovir disoproxil + emtricitabină, tenofovir disoproxil + emtricitabină + efavirenz, şi adefovir, 5) un inhibitor al integrazei a VIU, de exemplu, curcumina, derivaţi ai curcuminei, acid chicoric, derivaţi ai acidului chicoric, acidul 3,5-dicaffeoilchinic, derivaţi ai acidului 3,5-dicaffeoilchinic, acidul aurintricarboxilic, derivaţi ai acidului aurintricarboxilic, fenetil esterul acidului cafeic, derivaţi ai fenetil esterului acidului cafeic, tirfostină, derivaţi ai tirfostinei, chercetină, derivaţi ai chercetinei, S-1360, zintevir (AR-177), L-870812 şi L- 870810, MK-0518 (raltegravir), BMS-707035, MK-2048, BA-011, BMS-538158, GSK364735C, 6), un inhibitor al gp41, de exemplu, enfuvirtida, sifuvirtida, FB006M, TRI-1144, SPC3, DES6, Locus gp41, CovX şi REP 9, 7) un inhibitor al CXCR4, de exemplu, AMD-070, 8) un inhibitor de intrare, de exemplu, SP01A, TNX-355, 9) un inhibitor al gp120, de exemplu, BMS-488043 şi BlockAide / CR, 10) un inhibitor al G6PD şi NADH-oxidazei, de exemplu, imunitina, 10) un inhibitor al CCR5, de exemplu, aplaviroc, vicriviroc, INCB9471, PRO-140, INCB15050, PF-232798, CCR5mAb004 şi maraviroc, 11) un interferon, de exemplu, rIFN-alfa 2b pegilat, rIFN-alfa 2a pegilat, rIFN-alfa 2b, IFN alfa-2b XL, rIFN-alfa 2a, consens IFN alfa, infergen, Rebif, locteron, AVI-005, PEG-infergen, IFN-beta pegilat, alfa interferon oral, feron, reaferon, Iintermax alfa, r-IFN-beta, infergen + actimun, IFN-omega cu DUROS şi albuferon, 12) analogi ai ribavirinei, de exemplu, rebetol, copegus, levovirin, VX-497 şi viramidină (taribavirină) 13) inhibitori ai NS5A, de exemplu, A-831, A-689 şi BMS-790052, 14), inhibitori ai NS5B polimerazei, de exemplu, NM-283, valopicitabină, R1626, PSI-6130 (R1656), VHC-796, BILB 1941, MK-0608, NM-107, R7128, VHC-759, PF-868554, GSK625433 şi XTL-2125, 15), NS3 inhibitori ai proteazei, de exemplu, SCH-503034 (SCH-7), VX-950 (Telaprevir ), ITMN-191 şi BILN-2065, 16), inhibitori ai alfa-glucozidazei 1, de exemplu, MX-3253 (celgosivir) şi UT-231B, 17) hepatoprotectanţi, de exemplu, IND-6556, ME 3738, MitoQ şi LB- 84451, 18), inhibitori non-nucleozidici ai VHC, de exemplu, derivaţi ai benzimidazolului, derivaţi ai benzo-1 ,2,4-tiadiazinei şi derivaţi ai fenilalaninei, 19) alte medicamente pentru tratarea hepatitei C, de exemplu, zadaxin, nitazoxanidă (alinea), BIVN -401 (virostat), Debio-025, VGX-410C, EMZ-702, AVI 4065, bavituximab, oglufanidă, PYN-17, KPE02003002, actilon (CPG-10101), KRN-7000, civacir, GI-5005, ANA- 975 (izatoribină), XTL-6865, ANA 971, NOV-205, tarvacină, EHC-18 şi NIM811, 19) amplificatori farmacocinetici, de exemplu, BAS-100 şi SPI452, 20) H inhibitori ai ARN-azei, de exemplu, ODN-93 şi ODN-112, 21), alte medicamente anti-VIU, de exemplu, VGV-1, PA-457 (bevirimat), ampligen, HRG214, citolin, polimun, VGX-410, KD247, AMZ 0026, CYT 99007, VIU A-221, BAY 50-4798, MDX010 (iplimumab), PBS119, ALG889 şi PA-1050040.
Se consideră că al doilea agent terapeutic va fi administrat într-un mod în care este cunoscut în domeniul tehnicii, iar doza poate fi selectată de un specialist în domeniu. De exemplu, al doilea agent poate fi administrat într-o doză de la circa 0,01 miligrame la aproximativ 2 grame pe zi.
Metaboliţi ai compuşilor
De asemenea, în domeniul de aplicare al acestei invenţii sunt incluse produsele metabolice in vivo ale compuşilor descrişi în prezenta invenţie. Astfel de produse pot rezulta, de exemplu, din oxidarea, reducerea, hidroliza, amidarea, esterificarea şi altele asemenea a compusului administrat, în primul rând datorită proceselor enzimatice. În consecinţă, invenţia include compuşi produşi printr-un proces care include contactarea unui compus conform invenţiei cu un mamifer pentru o perioadă de timp suficientă pentru a produce un produs metabolic al acestuia. Astfel de produse sunt, de obicei, identificate prin prepararea unui compus marcat radioactiv (de exemplu, C14 sau H3) al invenţiei, administrarea acestuia parenteral într-o doză detectabilă (de exemplu, mai mare decât aproximativ 0,5 mg/kg) la un animal, cum ar fi şobolan, şoarece, cobai, maimuţă sau la om, care să permită suficient timp pentru producerea metabolismului (de obicei, aproximativ 30 de secunde la 30 de ore) şi izolarea produselor de conversie din urină, sânge sau alte probe biologice. Aceste produse sunt uşor de izolat, deoarece acestea sunt etichetate (altele sunt izolate prin utilizarea anticorpilor capabili de a lega epitopii care supravieţuiesc în metabolit). Structurile metabolitului sunt determinate în mod convenţional, de exemplu, prin analiza SM sau RNM. În general, analiza metaboliţilor se face în acelaşi mod ca şi în studiile convenţionale privind metabolismul medicamentului bine cunoscute persoanelor care lucrează în domeniu. Produsele de conversie, atât timp cât ele nu se găsesc altfel in vivo, sunt utile în teste de diagnostic pentru dozarea terapeutică a compuşilor invenţiei chiar dacă acestea nu posedă activitate inhibitoare a VHC proprie.
Metodele pentru determinarea stabilităţii compuşilor in secreţiile gastrointestinale surogate sunt cunoscute.
Metode exemplare de preparare a compuşilor
Invenţia se referă de asemenea la metodele de preparare a compoziţiilor prezentei invenţii. Compoziţiile sunt preparate prin oricare dintre metodele aplicabile ale sintezei organice. Multe astfel de metode sunt bine cunoscute în domeniu. Cu toate acestea, multe dintre metodele cunoscute sunt elaborate în Compendium of Organic Synthetic Methods [30], [31], [32], [33], [34], [35], precum şi [36], [37]. Alte metode adecvate pentru prepararea compuşilor invenţiei sunt descrise în cererea de brevet internaţională [38].
O serie de metode exemplare pentru prepararea compoziţiilor invenţiei este prevăzută în schemele şi exemplele de mai jos. Aceste metode sunt destinate ilustrării naturii unor astfel de preparate şi nu au intenţia de a limita scopul metodelor aplicabile.
In general, condiţiile de reacţie, cum ar fi temperatura, durata reacţiei, solvenţii, procedurile de tratare şi altele asemenea, vor fi cele comune în domeniu pentru efectuarea reacţiei speciale. Materialul de referinţă citat, împreună cu materialul citat aici, conţine descrieri detaliate ale acestor condiţii. De obicei temperaturile vor fi de la -100°C până la 200°C, solvenţii vor fi aprotici sau protici, iar duratele reacţiei vor fi de la 10 secunde până la 10 zile. Tratarea de obicei include călirea oricăror reactivi nereacţionaţi urmată de separarea între un sistem de apă/strat organic (extracţia) şi separarea stratului care conţine produsul.
Oxidarea şi reducerea reacţiilor sunt de obicei efectuate la temperaturi apropiate de temperatura camerei (aproximativ 20°C), cu toate că pentru reducerea cu hidrură metalică temperatura este redusă frecvent la 0°C până la -100°C, solvenţii sunt de obicei aprotici pentru reduceri şi pot fi fie protici sau aprotici pentru oxidare. Duratele reacţiei sunt ajustate pentru a atinge conversiile dorite.
Reacţiile de condensare sunt de obicei efectuate la temperaturi apropiate de temperatura camerei, deşi pentru neechilibrare, temperaturile reduse (de la 0°C până la -100°C) ale condensărilor controlate cinetic sunt, de asemenea, comune. Solvenţii pot fi protici (comun în echilibrarea reacţiilor) sau aprotici (comun în reacţii controlate cinetic).
Metodele sintetice standard, cum ar fi îndepărtarea azeotropică a produselor reacţiei şi utilizarea condiţiilor de reacţie anhidre (de exemplu, medii de gaz inert) sunt comune în domeniu şi se aplică atunci când este cazul.
Termenii „tratat”, „tratare”, „tratament” şi altele asemenea, atunci când sunt utilizaţi în legătură cu o operaţiune sintetică chimică, înseamnă contactarea, amestecarea, reacţionând, permiţând să reacţioneze, aducerea în contact, precum şi alţi termeni comuni în domeniu pentru a indică faptul că una sau mai multe entităţi chimice este tratată în aşa fel încât să se convertească în unul sau mai multe alte entităţi chimice. Aceasta înseamnă că „tratarea unui compus cu compusul doi” este sinonim cu „permiterea compusului unu să intre în reacţie cu compusul doi”, „contactarea compusului unu cu compusul doi”, „reacţia compusului unu cu compusul doi” şi alte expresii comune în domeniul sintezei organice pentru a indica în mod rezonabil că compusul unu a fost „tratat”, „a intrat în reacţie”, „a permis să intre în reacţie” etc., cu compusul doi. De exemplu, tratarea indică modul rezonabil şi uzual în care substanţele chimice organice au voie să intre în reacţie. Concentraţiile normale (de la 0,01M până la 10M, precis de la 0,1M până la 1M), temperaturile (de la -100°C până la 250°C, precis de la -78°C până la 150°C, mai precis de la -78°C până la 100°C, încă mai precis 0°C până la 100°C), vase de reacţie (de obicei de sticlă, plastic, metal), solvenţi, presiuni, atmosfere (de obicei aer pentru reacţii insensibile cu oxigen şi apă sau azot sau argon pentru sensibile cu oxigen sau apă) etc., sunt destinate cu excepţia cazului în care se indică altfel. Cunoştinţele de reacţii similare, cunoscute în domeniul sintezei organice, se utilizează în selectarea condiţiilor şi aparatelor pentru „tratare” într-un proces dat. În special, un specialist în domeniul sintezei organice selectează condiţiile şi aparatele în mod rezonabil pentru a efectua cu succes reacţiile chimice din procesele descrise pe baza cunoştinţelor în domeniu.
Modificările fiecărei dintre schemele exemplare şi în Exemple (denumite în continuare „scheme exemplare”) conduce la diferiţi analogi ai materialelor exemplare specifice. Citatele de mai sus care descriu metodele adecvate de sinteză organică se aplică pentru astfel de modificări.
În fiecare dintre schemele exemplare poate fi avantajoasă separarea produselor reacţiei unul de la altul şi/sau de la materialele iniţiale. Produsele dorite a fiecărei etape sau serii de etape sunt separate şi/sau purificate (în continuare separate) la gradul dorit de omogenitate prin metodele comune în domeniu. În mod tipic, aceste separări implică extracţia multifazică, cristalizarea dintr-un solvent sau un amestec de solvenţi, distilarea, sublimarea sau cromatografia. Cromatografia poate implica orice număr de metode, inclusiv, de exemplu: în fază inversă şi fază normală; excluziunea sterică, schimbul ionic; presiunea ridicată, medie şi joasă; metodele şi aparatele de cromatografie în fază lichidă; analiticul cu scară mică; patul mobil simulat (PMS) şi cromatografia în strat subţire sau gros preparativă, precum şi tehnicile cromatografiei rapide la scară mică în strat subţire.
O altă clasă de metode de separare implică tratarea unui amestec cu un reactiv ales pentru a lega la sau separa altfel un produs dorit, o materie primă nereacţionată, reacţia prin produs sau altele asemenea. Astfel de reactivi includ adsorbanţi sau absorbanţi, cum ar fi cărbune activ, site-uri moleculare, medii cu schimb de ioni sau altele asemenea. Alternativ, reactivii pot fi acizi în cazul unui material de bază, baze în cazul unui material acidic, reactivi de legare, cum ar fi anticorpi, proteine de legare, chelatori selectivi, cum ar fi eteri macrociclici, reactivi lichid/lichid de extragere a ionilor (LIX) sau altele asemenea.
Selecţia unor metode adecvate de separare depinde de natura materialelor implicate. De exemplu, punctul de fierbere şi greutatea moleculară în distilare şi sublimare, prezenţa sau absenţa unor grupări funcţionale polare în cromatografie, stabilitatea materialelor în medii acide şi bazice în extracţia multifazică şi altele asemenea. Un specialist în domeniu va aplica tehnici cel mai probabil pentru a atinge separarea dorită.
Un singur stereoizomer, de exemplu, un enantiomer, substanţial liber de stereoizomerul său poate fi obţinut prin rezoluţia amestecului racemic folosind o metodă cum ar fi formarea diastereomerilor utilizând agenţi de rezolvare optic activi [39]. Amestecurile racemice ale compuşilor chirali ai invenţiei pot fi separate şi izolate prin orice metodă adecvată, inclusiv: (1) formarea sărurilor diastereomere ionice cu compuşi chirali şi separarea prin cristalizare fracţionată sau alte metode, (2) formarea compuşilor diastereomeri cu reactivi de derivatizare chirali, separarea diastereomerilor şi conversia în stereoizomeri puri, şi (3) separarea stereoizomerilor puri sau îmbogăţiti direct în condiţii chirale.
Conform metodei (1), sărurile diastereomerice pot fi formate prin reacţia bazelor pure enantiomeric chirale precum brucina, chinina, efedrina, stricnină, α-metil-β-feniletilamină (amfetamina) şi altele asemenea, cu compuşi asimetrici care poartă funcţionalitate acidă, cum ar fi acidul carboxilic şi acidul sulfonic. Sărurile diastereomerice pot fi induse pentru a separa prin cristalizare fracţionată sau cromatografie ionică. Pentru separarea izomerilor optici ai compuşilor amino, adăugarea acizilor carboxilici sau sulfonici chirali, cum ar fi acidul camforsulfonic, acidul tartric, acidul mandelic sau acidul lactic poate duce la formarea sărurilor diastereomerice.
Alternativ, prin metoda (2), substratul care urmează să fie rezolvat este reacţionat cu un enantiomer al unui compus chiral pentru a forma o pereche diastereomerică [40]. Compuşii diastereomerici pot fi formaţi prin reacţia compuşilor asimetrici cu reactivi de derivatizare puri enantiomeric chirali, cum ar fi derivaţii mentilului, urmată de separarea diastereomerilor şi hidroliză pentru a obţine un substrat liber îmbogăţit enantiomeric. O metodă de determinare a purităţii optice implică producerea esterilor chirali, cum ar fi un mentil ester, de exemplu, (-) mentil cloroformiat în prezenţa unei baze, sau un ester Mosher, α-metoxi-α-(trifluorometil)fenil acetat [41], a amestecului racemic, şi analiza spectrului RMN pentru prezenţa celor doi diastereomeri atropisomerici. Diastereomerii stabili ai compuşilor atropisomerici pot fi separaţi şi izolaţi prin cromatografia în fază inversă şi normală pe baza unor metode de separare a naftil-izochinolinelor atropisomerice [42]. Prin metoda (3), un amestec racemic de doi enantiomeri poate fi separat prin cromatografie folosind o fază staţionară chirală [43]. Enantiomerii îmbogăţiţi sau purificaţi se pot distinge prin metodele utilizate pentru a distinge alte molecule chirale cu atomi de carbon asimetrici, cum ar fi rotaţia optică şi dicroismul circular.
Scheme şi exemple
Aspectele generale ale acestor metode exemplare sunt descrise mai jos şi în Exemple. Fiecare dintre produsele următoarelor procese este opţional separat, izolat şi/sau purificat înainte de utilizarea sa în procesele ulterioare.
O serie de metode exemplare pentru prepararea unor compuşi ai invenţiei este prevăzută aici, de exemplu, în exemplele de mai jos. Aceste metode sunt destinate pentru a ilustra natura unor astfel de preparate şi nu au intenţia de a limita scopul metodelor aplicabile. Anumiţi compuşi ai invenţiei pot fi utilizaţi ca intermediari pentru prepararea altor compuşi ai invenţiei. În metodele exemplare descrise aici, fragmentul E-V- poate, de asemenea, fi scris ca R9-. PG reprezintă o grupă protectoare comună pentru grupa funcţională dată care este ataşată. Instalarea şi îndepărtarea grupării protectoare poate fi realizată folosind metode standard, cum ar fi cele descrise în [44].
Schema 1. Sinteza reprezentativă a E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E
Schema 1 prezintă o sinteză generală a unei molecule a invenţiei E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E în care, în scopuri ilustrative, E reprezintă metoxicarbonilamino. Prin tratarea fie a 1a sau 1c cu unul sau doi echivalenţi respectiv ai cloroformiatului de metil în condiţii de bază (de exemplu hidroxid de sodiu) se obţine molecula 1b sau 1d.
Schema 2. Sinteza reprezentativă a E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E
Schema 2 prezintă o sinteză generală a unei molecule a invenţiei E-V-C(=O)-P-W-P-C(=O)-V-E în care, în scopuri ilustrative, P reprezintă pirolidină. Cuplarea aminei 2a cu acidul 2b se realizează cu ajutorul unui agent de cuplare a peptidei (ex. HATU) pentru a se obţine 2c. Alternativ, amina 2d este cuplată cu doi echivalenţi ai 2b în condiţii similare pentru a obţine 2e.
Schema 6. Sinteza reprezentativă a R1-V-C(=O)-P-R2
Schema 6 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei R1-V-C(=O)-P-R2 în care, în scopuri ilustrative, P reprezintă pirolidină, R1 este o grupă generică care este descrisă ca fie -E sau o grupă protectoare amino, iar R2 reprezintă o grupă generică care este descrisă ca -W-P-C(= O)-V-E, -W-P-C(= O)-V-NH-PG, -W-P-NH-PG sau -W-NH-PG. Cuplarea aminei 6a (sau 6d, 6h, 6k) cu acidul 6b sau 6e se realizează cu ajutorul unui agent de cuplare a peptidei (ex. HATU) pentru a se obţine 6c (sau 6f, 6g, 6i, 6j, 6l, 6m), respectiv.
Schema 7. Sinteza reprezentativă a E-V-C(= O)-R1
Schema 7 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei E-V-C(= O)-R1 în care, în scopuri ilustrative, E reprezintă metoxicarbonilamino şi R1 este o grupă generică care este descrisă ca fie -P-W-P-C(= O)-V-NH-PG, - P-W-P-PG, -P-W-PG -PG, -P-PG sau -O-PG. Prin tratarea 7a (sau 7c, 7e, 7g, 7i) cu cloroformiat de metil în condiţii de bază (de exemplu, hidroxid de sodiu) se obţine molecula 7b (sau 7d, 7f, 7h, 7j).
Schema 9. Sinteza reprezentativă a R1-P-R2
Schema 9 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei R1-P-R2 în care, în scopuri ilustrative, R1 reprezintă -C(= O)-VE sau o grupă protectoare şi R2 reprezintă un benzimidazol substituit. Formarea benzimidazolului se realizează prin cuplarea acidului 9b sau 9e cu o arilamină 9a, folosind un agent de cuplare a peptidei, cum ar fi HATU, pentru a se obţine 9c sau 9d. Prin ciclizarea amidei în prezenţa unui acid (cum ar fi acidul acetic) se obţine molecula 9d sau 9g ce conţine benzimidazol.
Formarea benzimidazolilor multipli se efectuează în acelaşi mod, pornind de la o bis-diamină pentru a obţine bis-benzimidazolul corespunzător.
Schema 20. Sinteza reprezentativă a R1-P-W-P-R2
Schema 20 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei R1-P-W-P-R2 în care, în scopuri ilustrative, R1 şi R2 reprezintă grupe protectoare independente şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice construită prin intermediul ciclizării mediate a unui metal de tranziţie. Prin alchilarea fenolului 20b cu o bromură de alchil, cum ar fi 20a, se obţine eterul 20c. Prin ciclizarea ciclului aromatic în prezenţa unui catalizator de paladiu se obţine compusul 20d. Prin tratarea 20d cu CuBr2 se obţine α-halocetona 20e, care oferă 20f la adăugarea unui acid în condiţii de bază (de exemplu, Et3N). Prin reacţia 20f cu o amină sau o sare de amină (de exemplu, acetat de amoniu) se obţine molecula 20g care conţine imidazol. Oxidarea 20g, 20i sau 20l poate fi realizată prin încălzire în prezenţa MnO2 pentru a se obţine 20h, 20j sau 20m, respectiv. Conversia 20g sau 20h cu un catalizator de paladiu, cum ar fi Pd2dba3 şi X-Phos, şi o sursă de bor, cum ar fi bis(pinacolato)dibor oferă esterul boronic 20i sau 20j. Esterul boronic este cuplat cu un partener de cuplare adecvat (de exemplu, 20k) folosind un catalizator de paladiu, cum ar fi Pd(PPh3)4 sau PdCl2(dppf), pentru a obţine 20l sau 20m. Pentru fiecare reacţie de cuplare încrucişată mediată a metalului de tranziţie, rolurile nucleofilului şi electrofilului pot fi inversate pentru a obţine acelaşi produs de cuplare. Alte cuplări încrucişate mediate ale metalului de tranziţie care permit construirea W, dar includ parteneri şi reactivi de cuplare alternativi, includ, dar nu sunt limitate la, legăturile Negishi, Kumada, Stille şi Ullman. Pentru prepararea a două cicluri aromatice alternative conţinând grupe W, această schemă generală poate fi aplicată prin alegerea corespunzătoare a reactivilor iniţiali.
Schema 21. Sinteza reprezentativă a R1-P-W-P-R2
Schema 21 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei R1-P-W-P-R2 în care, în scopuri ilustrative, R1 şi R2 reprezintă grupe protectoare independente şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice construite prin ciclizarea mediată a unui metal de tranziţie. Prin tratarea 20d cu un reactiv de vinil activat (de exemplu, viniltrifluoroborat de potasiu) în prezenţa unui catalizator de paladiu (de exemplu, acetat de paladiu şi S-Phos) se obţine compusul vinil 21a. Conversia în cetonă α-halo corespunzătoare poate fi realizată prin bromurarea cu N-bromsuccinimidă, urmată de oxidarea cu MnO2. Deplasarea α-halo cetonei începe prin adăugarea unui acid în condiţii de bază (de exemplu, Et3N). Bromurarea 21d începe cu tratarea cu tribromură de piridiniu şi este urmată de adăugarea unui al doilea acid în condiţii de bază pentru a se obţine diesterul 21e. Prin reacţia 21e cu o amină sau sare de amină (de exemplu, acetat de amoniu) se obţine molecula 21f care conţine imidazol. Oxidarea 21f poate fi realizată în prezenţa MnO2 pentru a se obţine 21g.
Schema 22. Sinteza reprezentativă a E-V-C(= O)-P-W-P-R
Schema 22 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei E-V-C(= O)-P-W-P-R în care, în scopuri ilustrative, R reprezintă o grupă protectoare şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice. Deplasarea α-halo cetonelor 21b începe prin adăugarea unui acid, în condiţii de bază (de exemplu, Et3N). Bromurarea 22b începe cu tratarea cu tribromură de piridiniu şi este urmată de adăugarea unui al doilea acid în condiţii de bază pentru a obţine diesterul 22c. Prin reacţia 22c cu o amină sau sare de amină (de exemplu, acetat de amoniu) se obţine molecula 22d care conţine imidazol. Oxidarea 22d se poate realiza în prezenţa MnO2 pentru a se obţine 22e.
Schema 23. Sinteza reprezentativă a R-P-W-P-C(= O)-V-E
Schema 23 prezintă o sinteză generală a unui intermediar al invenţiei E-V-C(= O)-P-W-P-R în care, în scopuri ilustrative, R reprezintă o grupă protectoare şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice. Deplasarea α-halo cetonelor 21d continuă prin adăugarea unui acid, în condiţii de bază (de exemplu, Et3N). Prin reacţia 23a cu o amină sau sare de amină (de exemplu, acetat de amoniu) se obţine molecula 23b care conţine imidazol. Oxidarea 23b poate fi realizată în prezenţa MnO2 pentru a se obţine 23c.
Schema 25. Sinteza reprezentativă a E-V-C(= O)-P-W-P-C(= O)-V-E
Schema 25 prezintă o sinteză generală a unei molecule a invenţiei E-V-C(= O)-P-W-P-C(= O)-V-E în care, în scopuri ilustrative, E reprezintă etilcarbonilamino. Prin tratarea fie a 25a sau 25c cu unul sau doi echivalenţi respectiv ai clorurii de propionil în condiţii de bază (de exemplu hidroxid de sodiu) se obţine molecula 25b sau 25d.
Schema 26. Sinteze reprezentativă a E-V-C(= O)-P-R şi R1-P-R
Schema 26 prezintă o sinteză generală a unei molecule a invenţiei E-V-C(= O)-P-R şi a unei molecule a invenţiei R1-P-R în care, în scopuri ilustrative, R reprezintă un haloimidazol. Prin tratarea aldehidei 26a cu glioxal în prezenţa hidroxidului de amoniu se obţine imidazolul 26b. Prin tratarea fie cu N-bromosuccinamidă sau iod se obţine haloimidazolul corespunzător 26c şi 26d, respectiv. Separarea de la compusul bis-halogenat corespunzător poate fi realizată prin HPLC preparativă. Transformarea bis-haloimidazolului în mono-haloimidazol poate fi, de asemenea, realizată prin încălzire în prezenţa sulfitului de sodiu. Funcţionalizarea ulterioară a grupei P poate fi realizată după înlăturarea grupei protectoare şi cuplarea cu un acid adecvat (E-V-C(= O)-OH).
Schema 27. Sinteza reprezentativă a R1-P-W-P-R2
Schema 27 prezintă o sinteză generală alternativă a unui intermediar al invenţiei R1-P-W-P-R2 în care, în scopuri ilustrative, R1 şi R2 sunt grupe protectoare independente şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice construite printr-o ciclizare mediată a unui metal de tranziţie. Prin bromurarea 21b cu un agent de bromurare (adică tribromură de piridiniu) se obţine dibromura 27a. Deplasarea bromurii primare este urmată apoi de adăugarea unui acid în condiţii de bază (de exemplu K2CO3) pentru a obţine 21d. Conversia în 21f sau 21g poate fi realizată în conformitate cu metodele descrise în Schema 21.
Schema 28. Sinteza reprezentativă a E-V-C(= O)-P-W-P-R
Schema 28 prezintă o sinteză alternativă generală a unui intermediar al invenţiei E-V-C(= O)-P-W-P-R în care, în scopuri ilustrative, R reprezintă o grupă protectoare şi W reprezintă o unitate cu două cicluri aromatice. Prin bromurarea 21b cu un agent de bromurare (adică tribromură de piridiniu) se obţine dibromura 27a. Deplasarea bromurii primare este precedată apoi de adăugarea unui acid în condiţii de bază (de exemplu K2CO3) pentru a se obţine 22d. Transformarea în 22d sau 22e poate fi realizată în conformitate cu metodele descrise în Schema 22.
Variante de realizare specifice
Într-o variantă de realizare invenţia prevede un compus care are formula:
în care ciclul imidazolic prezentat în formula A1, A2, A3 şi A4 este opţional substituit cu una sau mai multe grupe alese independent dintre halo, haloalchil, ciano sau alchil; sau o sare acceptabilă farmaceutic sau un promedicament al acestuia.
Într-o variantă de realizare invenţia prevede un compus care are formula:
în care ciclul imidazolic prezentat în formula A2 şi A4 este opţional substituit cu una sau mai multe grupe alese independent dintre halo, haloalchil, ciano sau alchil;
sau o sare acceptabilă farmaceutic sau un promedicament al acestuia.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre E1a şi E1B reprezintă -N(H)(alcoxicarbonil).
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre E1a şi E1B reprezintă -N(H)C(= O)OMe. Într-o variantă de realizare atât E1a cât şi E1B reprezintă -N(H)C(= O)OMe.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre E1a şi E1B reprezintă -N(H)(cicloalchilcarbonil) sau -N(H)(cicloalchiloxicarbonil).
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre E1a şi E1B reprezintă ciclopropilcarbonilamino, ciclobutilcarbonilamino, ciclopropiloxicarbonilamino sau ciclobutiloxicarbonilamino.
Într-o variantă de realizare E1a şi E1B reprezintă fiecare independent, selectate dintre ciclopropilcarbonilamino, ciclobutilcarbonilamino, ciclopropiloxicarbonilamino sau metoxicarbonilamino.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre V1a şi V1b reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare E1a-V1a luate împreună reprezintă R9a sau în care E1B-V1b luate împreună reprezintă R9b.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre P1a şi P1b este selectat dintre:
.
Într-o variantă de realizare P1a şi P1b sunt fiecare independent selectate dintre:
.
Într-o variantă de realizare una dintre P1a şi P1b reprezintă:
iar cealaltă dintre P1a şi P1b reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare una dintre P1a şi P1b reprezintă:
iar cealaltă dintre P1a şi P1b reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre P1a şi P1b reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre P1a şi P1b reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre -V1a -C(=O)-P1a - şi -P1b-C(=O)-V1b- reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare cel puţin una dintre -V1a -C(=O)-P1a - şi -P1b-C(=O)-V1b- reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare atât -V1a -C(=O)-P1a - cât şi -P1b-C(=O)-V1b- sunt independent selectate dintre:
.
Într-o variantă de realizare una dintre V1a -C(=O)-P1a - şi -P1b-C(=O)-V1b- reprezintă:
.
iar cealaltă dintre V1a -C(=O)-P1a - şi -P1b-C(=O)-V1b- reprezintă:
.
Într-o variantă de realizare invenţia descrie un compus cu formula:
sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia.
Într-o variantă de realizare invenţia prevede un compus cu formula:
sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia.
Într-un exemplu de realizare invenţia prevede un compus cu formula:
sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia.
Invenţia este în continuare ilustrată prin următoarele Exemple nelimitative. Următoarele abrevieri sunt folosite în descrierea invenţiei, inclusiv în Exemple.
(aq) Apos (g) Gazos (s) Solid °C Grade Celsius Ac Acetat ACN Acetonitril apprx Approximativ Bis-pinB/(Bpin)2/(pinB)2 Bis(pinacolato)dibor BOC/Boc tert-Butoxicarbonil calc'd Calculat CC50 50% Concentraţie a citotoxicităţii COMU 1-[(1-(Ciano-2-etoxi-2-oxoetilideneaminooxi)dimetilaminomorfolino)] uroniu hexafluorofosfat d Dublet dba dibenzalacetonă DCM Diclorometan dd Dublet de dublete ddd Dublet de dublet de dublete DIPEA/DIEA N,N-Diizopropiletilamină DMA N,N-Dimetilacetamidă DMAP 4-Dimetilaminopiridină DME Dimetoxietan DMEM Mediul esenţial minimal al lui Eagle DMF Dimetilformamidă DMSO/dmso Dimetilsulfoxidă dppf 1,1'-bis( difenilfosfanil) ferocen dt Dublet de triplete CE50 Semiconcentraţie maximală efectivă IEP Ionizare prin electropulverizare Et Etil ext. Externă SFB Ser fetal bovin g Gram HATU 2-(1H-7-Azabenzotriazol-1-yl)-1,1,3,3-tetrametil uroniu hexafluorofosfat Metanaminiu HPLC Cromatografie în fază lichidă de înaltă performanţă hr/h Oră Hz Herţ J Constantă de cuplare (legătură) SMCL Spectrometrie de masă a cromatografiei în fază lichidă M Molar m Multiplet m/z Masă pentru încărcare M+ Punct material Me Metil mg Miligram MHz Megaherţ min Minută mL Mililitru mmol Milimol Moc Metoxicarbonil MS Spectrometrie de masă MTBE Metil tert-butil eter N Normal NADPH Nicotinamidă adenină dinucleotidă fosfat NBS N-Bromosuccinimidă NMM N-Metilmorfolină RMN Rezonanţă magnetică nucleară o/n Peste noapte Papp Permeabilitate aparentă PBS Sistem tampon fosfatic Pd/C Paladiu pe carbon F Fenil Fg/FGli Fenilglicină Piv Pivalat Pro Prolină pir Piridină cv Cvartet cvd Cvartet de dublete cant Cantitativ cvint Cvintet tc/TC Temperatura camerei s Singlet SFos 2-Diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenil t Triplet t-Bu tert-Butil TEMPO (2,2,6,6-Tetrametil-piperidină-1-il)oxil Tf Trifluorometansulfonat ATF Acid trifluoroacetic THF Tetrahidrofuran Tr Treonină CSS Cromatografie în strat subţire tol. Toluen UV Ultraviolet Val Valină w/v Greutate per volum w/w Greutate per greutate X-Fos/XPOS/Xfos 2-Diciclohexilfosfino-2′,4′,6′-triizopropilbifenil δ Deplasare chimică µg Microgram µL Microlitru
EXEMPLE
Exemplul LQ
7-(2-bromo-5-clorbenziloxi)-3,4-dihidro-naftalen-1(2H)-ona
La o soluţie agitată de 7-hidroxi-1-tetralonă (13,9 g, 85,7 mmol) şi 1-bromo-2-(bromometil)-4-clorbenzen (25,6 g, 90,0 mmol) în dimetilformamidă (850 mL) se adaugă carbonat de potasiu (24 g, 172 mmol). Produsul reacţiei se agită în atmosferă de argon, timp de 18 ore, apoi se diluează cu acetat de etil (1 L). Straturile organice se spală de trei ori cu apă şi o dată cu soluţie salină. Stratul organic se usucă apoi cu sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează. La uleiul rezultat se adăugă metanol (500 mL) şi suspensia se agită timp de treizeci de minute. 7-(2-bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-dihidro-naftalen-1(2H)-ona (27,8 g, randamentul este de 89%) se izolează prin filtrare.
3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromeno-8(9H)-ona
Într-un flacon de 1 L conţinând pivalat de paladiu(II) (1,18 g, 3,8 mmol), tri(4-fluorofenil)fosfină (1,20 g, 3,8 mmol), acid pivalic (2,33 g, 22,8 mmol) şi carbonat de potasiu (31,8 g, 228 mmoli) se adăugă o soluţie de 7-(2-bromo-5-clorbenziloxi)-3,4-dihidro-naftalenă-1(2H)-onă (27,8 g, 76,2 mmol) în dimetiacetamidă (380 mL). Flaconul se evacuează şi se umple din nou cu argon de 5 ori şi apoi se agită în atmosferă de argon la temperatura de 60°C timp de 24 ore. Produsul reacţiei se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu MTBE şi apă. Amestecul bifazic rezultat se agită timp de 3 ore şi se filtrează prin Celită, apoi se clăteşte cu MTBE. Stratul organic al filtratului se separă şi apoi se spală de două ori cu apă şi o dată cu soluţie salină. Straturile organice se usucă apoi cu sulfat de magneziu, se filtrează, se concentrează şi se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (Hexani/DCM) pentru a obţine 3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromeno-8(9H)-ona (14,4 g, randamentul este de 67%) sub forma unui solid alb-cenuşiu.
9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromeno-8(9H)-ona
La un amestec de 3-cloro-10 11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromeno-8(9H)-onă (14,8 g, 52 mmol) în cloroform (50 mL) şi acetat de etil (50 mL) se adaugă bromură cupru(II) (24,3 g, 104 mmol). Produsul reacţiei se încălzeşte până la temperatura de 80°C timp de 2 ore şi apoi se răceşte la temperatura camerei. Amestecul se diluează cu diclormetan şi se spală de două ori cu o soluţie 5:1 de clorură de sodiu saturată apoasă şi hidroxid de amoniu apos (~ 38%), şi se spală o dată cu apă. Stratul organic se usucă cu sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează pentru a se obţine 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromeno-8(9H)-ona (18,5 g, randamentul este de > 95 %); puritatea de > 95%.
Notă: Această reacţie nu întotdeauna este curată. Uneori există o supra-bromurare, iar uneori există materie primă semnificativă. Aceste impurităţi pot fi îndepărtate prin cromatografie rapidă pe coloană.
tert-Butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de acid (1R)-2-(tert-butoxicarbonil)ciclopentancarboxilic (10,17 g, 47,25 mmol) şi 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromeno-8(9H)-onă (5,7 mg, 15,7 mmol) în acetonitril (50 mL) se adaugă diizopropiletilamină (11.11 ml, 64 mmol). Produsul reacţiei se agită la temperatura de 50°C timp de 4 ore şi apoi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Reziduul brut rezultat se purifică prin cromatografie rapidă obţinându-se (2S)-1-tert-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-nafto[c, g]cromen-9-il)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (4,52 g, 58%). La o soluţie de (2S)-1-tert-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto [2,3-c]cromen-9-il)pirolidină-1,2-dicarboxilat (3,27 mg, 6,56 mmol) într-un amestec de toluen (11 mL) şi 2-metoxietanol (0,7 mL) se adaugă acetat de amoniu (5,06 g, 65,6 mmol). Amestecul de reacţie se încălzeşte până la 110°C timp de 3 ore, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă, obţinându-se tert-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (1,95 g, 61%). LCMS-ESI+: calculat pentru C27H28ClN3O342: 477.98; observat [M+1]+: 478.47
tert-Butil 2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3': 6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de tert-butil 2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3': 6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (1,9 g, 3,96 mmol) în diclormetan (35 mL) se adaugă oxid de mangan(IV) (17 g, 198 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de 18 ore, apoi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă, obţinându-se tert-butil 2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3': 6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (1,52 g, 81%). LCMS-ESI+: calculat pentru C27H26ClN3O342: 475,9; observat [M+1]+: 476.45.
tert-Butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec degazat de tert-butil 2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (1,52 g, 3,17 mmol), bis(pinacolato)bor (1,21 g, 4,75 mmol), acetat de potasiu (934 mg, 9,52 mmol), tris(dibenzilidenacetonă)paladiu (116 mg, 0,13 mmol) şi 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (121 mg, 0,08 mmol) în 1,4-dioxan (16 ml) se încălzeşte până la temperatura de 90°C timp de 1,5 oră, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă, obţinându-se tert-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (1,7 g, 94%)
tert-Butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxylatul
La o soluţie de metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat ( 1,48 g, 3,97 mmol), tert-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (1,88 g, 1,48 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0) (191 mg, 0,16 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (242 mg, 0,33 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (37,0 mL) şi dimetilformamidă (6 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 5 mL, 9,93 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte până la temperature de 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă, obţinându-se tert-butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (1,45 mg, 59%). LCMS-ESI+: calculat pentru C41H47N7O673 733.86; observat [M+1]+: 734.87.
Acidul [1-(2-{5-[2-(1-{[(Metoxicarbonil)amino](fenil)acetil}pirolidină-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamic
O soluţie de tert-butil 2-[9-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (462 mg, 0,63 mmol), etanol (6 mL) şi acid clorhidric concentrat (2 mL) se încălzeşte până la temperatura de 60°C timp de 1 oră. Produsul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (172 mg, 0,82 mmol) şi COMU (311 mg, 073 mmol) în DMF (6 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (330 µL, 1,89 mmol). După agitare timp de 18 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemini, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine acidul [1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino](fenil)acetil}pirolidină-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamic (231 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculat pentru C46H48N8O78: 824.92; observat [M+1]+: 826.00
Exemplul LR
(2S,4S)-1-tert-butil 2,4-dimetilpirolidină-1,2,4-tricarboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-1-tert-butil-2-metil-4-cianopirolidină-1 ,2-dicarboxilat (9,0 g, 35,4 mmol) în MeOH (196 ml) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 100 mL, 403 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 16 ore şi se concentrează în vid. Intermediarul brut se dizolvă în acetat de etil (180 mL) şi se alcalinizează cu bicarbonat apos (soluţie saturată). Se adaugă di-tert-butildicarbonat (8,5 g, 38,9 mmol) şi soluţia bifazică se agită la temperatura camerei timp de 12 ore. Apoi straturile se separă, iar stratul apos se re-extrage cu EtOAc. Straturile organice combinate se spală cu soluţie salină, se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Uleiul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (de la 15% până la 40% la 100% EtOAc/Hexani) pentru a obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2,4-dimetilpirolidină-1,2,4-tricarboxilatul ( 9,56 g, 94%).
Acidul (3S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil)pirolidină-3-carboxilic
La o soluţie de (2S,4S)-1-tert-butil 2,4-dimetil pirolidină-1,2,4-tricarboxilat (9,56 g, 33,3 mmol) în THF (70 mL), la 0°C (temperatură externă, baie de gheaţă) se adaugă prin picurarei NaOH (1N apoasă, 33 mL, 33,3 mmol) timp de 15 min. Soluţia se agită la 0°C, timp de 5 ore înainte de acidulare cu HCţ (1N). Soluţia se extrage cu EtOAc (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Uleiul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (de la 2% până la 5% până la 10% MeOH/CH2Cl2) pentru a obţine acidul (3S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil)pirolidină-3-carboxilic ( 6.38g, 70%).
(2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de acid (3S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-(metoxicarbonil)pirolidină-3-carboxilic (6,38 g, 23,3 mmol) în THF (116 mL), la 0°C (temperatură externă, baie de gheaţă) se adaugă Et3N (4,9 mL, 35,0 mmol) şi cloroformiat de etil (2,7 mL, 28,0 mmol). Soluţia rezultată se agită la 0°C timp de 45 min, timp în care se formează un precipitat alb. Amestecul reacţiei se filtrează prin celită şi se concentrează.
Intermediarul brut se dizolvă în THF (59 ml) şi se răceşte la 0°C (temperatură externă, baie de gheaţă). Se adaugă lent NaBH4 (4,41 g, 116,7 mmol) în H2O (59 mL) şi soluţia rezultată se agită la 0°C, timp de 2 ore. Amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală cu H2O. Stratul apos se re-extrage cu EtOAc. Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Uleiul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (de la 42% până la 69% la 100% EtOAc /Hexani) pentru a se obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (3,63 g, 60%).
(2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (2,57 g, 9,9 mmol) în CH2Cl2 (50 mL) se adaugă AgOTf (4,07 g, 15,8 mmol) şi 2,6-di-tert-butilpiridină (4,4 mL 19,8 mmol). Amestecul reacţiei se răceşte la 0°C (temperatură externă, baie de gheaţă) şi se adaugă lent MeI (0,98 mL, 15,8 mmol). Suspensia rezultată se agită la 0°C timp de 1,5 ore şi la temperatura camerei timp de 1,5 ore. Suspensia se diluează cu CH2Cl2 şi se filtrează prin celită. Filtratul se concentrează până la uscare, se dizolvă în Et2O şi se spală cu HCl (1N) şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu Et2O, iar straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Uleiul brut se purifică prin cromatografie pe silicagel (10% până la 75% la 100% EtOAc/Hexani) pentru a obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (2,11 g, 78%). 1H-RMN: 400 MHz, (CDCI3) δ: (amestec de rotameri, raportat principal) 4,20 (t, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,67 (m, 1H), 3,34 (m, 2H), 3,30 ( s, 3H), 3,16 (t, 1H), 2,43 (m, 2H), 1,74 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).
Acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxylic
La o soluţie de (2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (2,11 g, 7,7 mmol) într-un amestec de THF (38 mL) şi MeOH (15 mL) se adaugă LiOH (2,5 M soluţie apoasă, 15 mL, 38,6 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se acidulează cu soluţie apoasă de HCl (1N). Produsul dorit se extrage cu CH2Cl2 (de 4 ori). Straturile organice se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează pentru a obţine acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic (2,0 g, 99%). 1H-RMN: 400 MHz, (CDCl3) δ: (amestec de rotameri, raportat principal) 4,33 (t, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,32 (s, 3H), 3,16 ( t, 1H), 2,45 (m, 2H), 2,12 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
Exemplul LR-1
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul:
La o soluţie de acid ((S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic (5,9 g, 23,1 mmol) şi 9-bromo-3-clor-10,11-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno-8(9H)-onă (5,6 mg, 15,4 mmol) în acetonitril (60 mL) se adaugă diizopropiletilamină (5,35 mL, 30,8 mmol). Produsul reacţiei se agită la 50°C timp de 18 ore şi se diluează apoi cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Reziduul brut rezultat se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S)-1-tert-butil-2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3-c]cromeno-9-il)-4(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (5,12 g, 61%). La o soluţie de (2S)-1-tert-butil-2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-6H-nafto[2,3-c]cromeno-9-il)-4(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (5.11 mg, 9,42 mmol) într-un amestec de toluen (94 mL) şi 2-metoxietanol (0,1 mL) se adaugă acetat de amoniu (23,5 g, 304 mmol). Amestecul reacţiei se încălzeşte până la 110°C timp de 18 ore, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Fazele organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4R)-tert-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (1.05g, 21%) and (2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro-4,5-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (2,0 g, 41%) LCMS-ESI+: calculat pentru C29H32ClN3O42: 522,0; observat [M+1]+: 522,2.
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (1,99 g, 3,82 mmol) în diclormetan (30 mL) se adaugă oxid de mangan(IV) (10 g, 115 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de 18 ore, se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro-6H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (1.05g, 21%) şi (2S,4S)-tert-butil-2-(9-cloro- 4,5-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (1,64 g, 82%). LCMS-ESI+: calculat pentru C29H30ClN3O42: 520,02; observat [M+1]+: 520,97.
(2S,4S)-tert-butil-4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul:
Un amestec degazat de - (2S, S)-tert-butil-2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d] imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (649 mg1.25 mmoli), bis(pinacolato)dibor (635 mg, 2,5 mmol), acetat de potasiu (368 mg, 3,7 mmoli), tris(dibenzilidenacetonă)paladiu (46 mg, 0,05 mmol) şi 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (60 mg, 0,12 mmoli) în 1,4-dioxan (7 mL) se încălzeşte la 90°C timp de 3 ore, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (467 mg, 61%) LCMS-ESI+: calculat pentru C35H42BN3O6: 611,54; observat [M+1]+: 612,96.
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (467 mg, 0,76 mmoli), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (342 mg, 0,92 mmoli), tetrakis(trifenilfosfin)paladiu (0) (44 mg, 0,04 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (56 mg, 0,07 mmol ) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (11,0 ml) şi dimetilformamidă (1,9 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 1,15 mL, 2,29 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (180 mg, 67%). LCMS-ESI+: calculat pentru C43H51N7O73: 777,91; observat [M+1]+: 778,84.
metyl {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-yl]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxiat (196 mg, 0,25 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Reacţia se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (69 mg, 0,33 mmol) şi COMU (124 mg, 029 mmol) în DMF (4 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (130 µL, 0,76. După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului au fost liofilizate pentru a obţine metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (84 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculat pentru C48H52N8O8: 868,98; observat [M+1]+: 870,11
Exemplul LS
metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (116 mg, 0,15 mmol), etanol (5 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţie se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (10 mL). Această soluţiei se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid 2-metoxicarbonilamino-3-metilbutiric (38 mg, 0,22 mmol) şi HATU (79 mg, 0,21 mmol) în DMF (1,4 ml). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (270 µL, 1,5 mmol). După agitare timp de 18 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului au fost liofilizate pentru a obţine metil {1-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (58 mg, 13%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O8: 834,96; observat [M+1]+: 835,70.
Exemplul LT
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino) metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidineă-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (557 mg, 0,91 mmol), metil (S)-1-((1S,3S,5S)-3-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (350 mg, 0.91 mmol) tetrakis(trifenilphosfină)palladiu(0) (53 mg, 0,04 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (67 mg, 0,07 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (11,0 mL) şi dimetilformamidă (1,9 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 1,37 mL, 2,7 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte până la 85°C în atmosferă de argon timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (271 mg, 38%). LCMS-ESI+: calculat pentru C44H51N7O7. 789,92; observat [M+1]+: 790,76.
metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamat:
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (196 mg, 0,25 mmoli), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Reacţia se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (69 mg, 0,33 mmol) şi COMU (124 mg, 029 mmol) în DMF (4 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (130 µL, 0,76 mmoli). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {2-[2-{9-[2-(2-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (84 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculat pentru C49H52N8O8: 880,99; observat [M+1]+: 882,09
Exemplul LZ
5-(2-bromo-5-clorobenziloxi)-3,4-dihidronaftalenă-1(2H)-ona
La o soluţie agitată de 5-hidroxi-1-tetralonă (2,0 g, 12,3 mmol) şi 1-bromo-2-(bromometil)-4-clorbenzen (3,6 g, 12,7 mmol) în dimetilformamidă (125 mL) se adaugă carbonat de potasiu (3,5 g, 25,1 mmol). Reacţia se agită în atmosferă de argon timp de 1 oră, apoi se diluează cu acetat de etil (1 L). Straturile organice se spală de trei ori cu apă şi o dată cu soluţie salină. Stratul organic se usucă apoi cu sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează. La uleiul rezultat se adaugă metanol (100 mL) şi suspensia se agită timp de treizeci de minute. 5-(2-bromo-5-clorbenziloxi)-3,4-dihidro-naftalenă-1 (2H)-ona (4,25 g, cu un randament de 94%) se izolează prin filtrare.
8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-1-ona
Într-un flacon ce conţine pivalat de paladiu(II) (68 mg, 0,22 mmol), tri-(4-fluorofenil)fosfină (70 mg, 0,22 mmol), acid pivalic (135 mg, 1,3 mmol) şi carbonat de potasiu (1,83 g, 13,1 mmol ) se adaugă o soluţie de 5-(2-bromo-5-clorbenziloxi)-3,4-dihidro-naftalenă-1(2H)-onă (1,61 g, 4,4 mmol) în dimetiacetamidă (23 mL). Flaconul se evacuează şi se re-umple cu argon de 5 ori şi apoi se agită în atmosferă de argon la 60°C timp de 24 ore. Amestecul reacţiei se toarnă direct pe o coloană de silicagel şi se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (hexani/DCM) pentru a obţine 8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromeno-1-ona (1,22 g, cu un randament de 97%) sub forma unui solid alb-cenuşiu.
2-bromo-8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c, h]cromen-1-ona
La un amestec de 8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromeno-1-onă (2,58 g, 9,1 mmol) în cloroform (9.1 mL) şi acetat de etil (9,1 ml ) se adaugă bromură de cupru(II) (4,65 g, 19,9 mmol). Reacţia se încălzeşte până la 80°C timp de 5 ore şi apoi se răceşte la temperatura camerei. Amestecul se diluează cu diclormetan şi se spală de două ori cu o soluţie 5:1 de clorură de sodiu saturată apoasă şi hidroxid de amoniu apos (~ 28%), şi se spală o dată cu apă. Stratul organic se usucă cu sulfat de magneziu, se filtrează şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (hexani/DCM) pentru a obţine 2-bromo-8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromeno-1-ona (2,45 g , cu un randament de 75%).
(2S)-1-tert-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)-pirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de 2-bromo-8-cloro-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-1-onă (1,05 g, 2,9 mmol) şi Boc-Pro-OH (1,75 g, 8,1 mmol) în acetonitril (9,0 mL) se adaugă diizopropiletilamină (1,5 mL, 8,7 mmol). Soluţia se agită în atmosferă de argon la 50°C timp de două ore. Extra Boc-Pro-OH (620 mg, 2,9 mmol) şi diizopropiletilamină (0,5 ml, 2,9 mmol) se adaugă şi amestecul reacţiei se agită la 50°C timp de 16 ore. Reacţia se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă cu sulfat de magneziu şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană, iar produsul de (2S)-1-tert-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1Hdibenzo[c,h]cromen-2-il)pirolidină-1,2-dicarboxilat se izolează ca un amestec de diastereomeri (0,99 g, cu un randament de 69%).
tert-butil(2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7-tetrahidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S)-1-tert-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)-pirolidină-1,2-dicarboxilat (2,2 g, 4,4 mmol) în toluen (40 mL) se adaugă acetat de amoniu (7 g, 91 mmol). Amestecul reacţiei se refluxează viguros timp de 3 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă cu sulfat de magneziu şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană pentru a obţine tert-butil (2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7-tetrahidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (1,13 g, cu un randament de 54%), precum şi (2S)-1-tert-butil 2-(8-cloro-1-oxo-2 ,3,4,6-tetrahidro-1H-dibenzo[c,h]cromen-2-il)pirolidină-1,2-dicarboxilatul recuperat (0,8 g, 36%). LCMS-ESI+: calculat pentru C27H28N3O3: 477,98; observat [M+1]+: 478,54.
tert-butil (2S)-2-(9-cloro-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de intermediar tert-butil 2S)-2-(9-cloro-3,4,5,7-tetrahidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (1,43 g, 3,0 mmol) în diclormetan (30 mL) se adaugă oxid de mangan(IV) (15 g, 198 mmol). Amestecul se agită timp de patru ore la temperatura camerei, apoi se filtrează prin celită. MnO2 se clăteşte bine cu diclormetan şi filtratul total se concentrează pentru a obţine tert-butil (2S)-2-(9-cloro-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (1,37 g, cu un randament de 96%). Acest material a fost utilizat fără purificare ulterioară.
tert-butil(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de tert-butil (2S)-2-(9-cloro-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (1,4 g, 2,9 mmol) în dioxan (20 mL) se adaugă bis(pinacolato)dibor (1,5 g, 5,9 mmol), tris(dibenzilidenacetonă)dipalladiu (0) (110 mg, 0,12 mmol), X-Phos (145 mg, 0,30 mmol) şi acetat de potasiu (870 mg, 8,9 mmol). Amestecul se degazează cu un curent de argon timp de zece minute. Amestecul reacţiei degazat se încălzeşte în atmosferă de argon la 90°C timp de 2,5 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă cu sulfat de magneziu şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (DCM/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (1,5 g, cu un randament de 90%).
metil [(2S)-3-metil-1-oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}butan-2-il]carbamatul
O soluţie de tert-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,98 g, 1,7 mmol), acid clorhidric concentrat (2 mL) şi etanol (20 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 2 ore. Reacţia se concentrează şi se redizolvă într-o cantitate minimă de metanol. Un volum egal de diclormetan se adaugă şi soluţia se re-concentrează. Se adaugă diclormetan la reziduul rezultat şi se concentrează încă de două ori. Materialul brut rezultat se dizolvă în dimetilformamidă (17 mL). La această soluţie se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (455 mg, 2,6 mmol), HATU (955 mg, 2,5 mmol) şi diizopropiletilamină (3 ml, 17 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de o oră, apoi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă (de 2 ori) şi soluţie salină, se usucă cu sulfat de magneziu şi se concentrează. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană pentru a obţine intermediarul metil [(2S)-3-metil-1-oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}butan-2-il]carbamat I (780 mg, cu un randament de 72% peste 2 etape).
tert-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec de intermediar pentaciclic metil [(2S)-3-metil-1-oxo-1-{(2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}butan-2-il]carbamat (780 mg, 1,3 mmol), (S)-tert-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (450 mg, 1,4 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (30 mg, 0,03 mmol), PdCl2 (dppf) (60 mg, 0,08 mmol), carbonat de potasiu apos 2M (1,9 mL, 3,9 mmol), dimetoxietan (10 mL) şi dimetilformamidă (2 mL) se degazează cu argon timp de 15 minute. Amestecul reacţiei se încălzeşte apoi la 85°C timp de 3 ore. După terminare, amestecul reacţiei se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu acetat de etil şi se filtrează prin celită. Filtratul se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Materialul brut rezultat se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (EtOAc/MeOH) pentru a obţine intermediarul tert-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxycarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (390 mg, cu un randament de 43%).
metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]naftho[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Un amestec de intermediar tert-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (390 mg, 0,53 mmoli), acid clorhidric concentrat (2 mL) şi etanol (10 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 2 ore. Amestecul reacţiei se concentrează şi se redizolvă într-o cantitate minimă de metanol. Un volum egal de diclormetan se adaugă şi soluţia se concentrează din nou. Se adaugă diclormetan la reziduul rezultat şi se concentrează încă de două ori. O jumătate din materialul brut (~ 0,27 mmol) se dizolvă în dimetilformamidă (2,5 mL). La această soluţie se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (66 mg, 0,38 mmol), HATU (140 mg, 0,37 mmol) şi diizopropiletilamină (0,48 mL, 2,7 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi apoi se diluează cu acetonitril (2 mL) şi metanol (2 mL). La această soluţie se adaugă zece picături de soluţie apoasă de 5M NaOH şi se continuă agitarea timp de 30 min. Amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil şi stratul organic se spală cu apă şi soluţie salină. Spălările apoase combinate se extrag de trei ori cu acetat de etil, iar straturile organice combinate se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin HPLC în fază inversă (Gemeni, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA) pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (140 mg, cu un randament de 67% peste 2 etape). LCMS-ESI+: calculat pentru C43H50N8O7: 790,91; observat [M+1]+: 791,71.
Exemplul MA
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul, substituind acidul (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic cu acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic şi substituind COMU cu HATU în etapa finală de cuplare amidică. LCMS-ESI+: calculat pentru C46H48N8O7: 824,92; observat [M+1]+: 825,72.
Exemplul MB
tert-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec de tert-butil (2S)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (450 mg, 0,79 mmoli), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan- 2-ilcarbamat (325 mg, 0,87 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (30 mg, 0,02 mmol), PdCl2 (dppf) (35 mg, 0,05 mmol), carbonat de potasiu apos 2M (1,2 mL, 2,4 mmol), dimetoxietan (6,8 mL) şi dimetilformamidă (1,2 mL) se degazează cu argon timp de 15 minute. Amestecul reacţiei se încălzeşte apoi la 85°C timp de 2,5 ore. După terminare, amestecul reacţiei se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu acetat de etil şi se filtrează prin celită. Filtratul se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Materialul brut rezultat se purifică prin cromatografie rapidă pe coloană (EtOAc/MeOH) pentru a obţine tert-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (270 mg, cu un randament de 46%).
metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul:
Un amestec de tert-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxlat (270 mg, 0,37 mmol), acid clorhidric concentrat (1,5 mL) şi etanol (8 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi se redizolvă într-o cantitate minimă de metanol. Un volum egal de diclormetan se adaugă şi soluţia se concentrează din nou. Se adaugă diclormetan la reziduul rezultat şi se concentrează pe două ori. Materialul brut se dizolvă în 5:1 diclormetan/dimetilformamidă (3,8 mL). La această soluţie se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (96 mg, 0,46 mmol), COMU (190 mg, 0,44 mmol) şi diizopropiletilamină (0,20 mL, 1,1 mmol). Amestecul reacţiei se agită la 0°C timp de 30 min, apoi se încălzeşte la temperatura camerei. După terminare, amestecul reacţiei se diluează cu acetonitril (2 mL) şi metanol (2 mL). La această soluţie se adaugă zece picături de soluţie apoasă de 5M NaOH şi se continuă agitarea timp de 30 min. Amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil şi stratul organic se spală cu apă şi soluţie salină. Spălările apoase combinate se extrag de trei ori cu acetat de etil, iar straturile organice combinate se usucă (MgSO4) şi se concentrează. Materialul brut se purifică prin HPLC în fază inversă (Gemeni, între 15 şi 45% ACN/H2O + 0,1% TFA) pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidină-2-yl]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (155 mg, cu un randament de 51% peste 2 etape). LCMS-ESI+: calculat pentru C46H48N8O7: 824,92; observat [M+1]+: 825,67.
Exemplul MC
dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidină-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il))bis(3-metil-1-oxobutane-2,1-diil)dicarbamatul
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul, substituind 7-hidroxi-1-tetralona cu 5-hidroxi-1-tetralona în primul pas al secvenţei. Toate reacţiile în sinteză dau randamente ale produselor similare ca în sinteza metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatului. LCMS-ESI+: calculat pentru C43H50N8O7: 790,91; observat [M+1]+: 791,6.
Exemplul MD
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidină-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il))bis(3-metil-1-oxobutane-2,1-diil)dicarbamatul, substituind acidul (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic cu acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-methylbutanoic şi substituind COMU cu HATU în etapa finală de cuplare amidică. LCMS-ESI+: calculat pentru C46H48N8O7: 824,92; observat [M+1]+: 825,67.
Exemplul ME
dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidină-2-il)-7H-dihidro-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il))bis(3-metil-1-oxobutan-2,1-diil)dicarbamatul
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidină-2-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il))bis(3-metil-1-oxobutan-2,1-diil)dicarbamatul omiţând oxidarea cu MnO2 a tert-butil 2-(9-chloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatului LCMS-ESI+: calculat pentru C43H52N8O7: 792,40; observat [M+1]+: 793,69.
Exemplul MF
metil[1-(2-{5-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino]-3-metil-1-oxobutan-2-il}pirolidină-2-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il]-1H-imidazol-2-il}pirolidină-1-il)-fenil-1-oxoacet-2-il]carbamatul
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu dimetil (2S,2'S)-1,1'-((2S,2'S)-2,2'l-pirolidină-2-il)-7H-dihidro-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il))bis(3-metil-1-oxobutan-2,1-diil)dicarbamatul, substituind acidul (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic cu acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-methylbutanoic şi substituind COMU cu HATU în etapa finală de cuplare amidică. LCMS-ESI+: calculat pentru C46H50N8O7: 826,94; observat [M+1]+: 827,71.
Exemplul MG
Acest compus a fost preparat într-un mod analog cu metil {(2S)-1-[(2R)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidină-2-il]-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul, substituind tert-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul cu tert-butil (2S)-2-[9-(2-{(2R)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,7-dihidroizocromeno[3',4':5,6]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul. LCMS-ESI+: calculat pentru C46H50N8O7: 826,94; observat [M+1]+: 827,64.
Exemplul MM
(2S,4S)-metil {4 -(metoximetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]-imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (424 mg, 0,69 mmol), etanol (6 mL) şi acid clorhidric concentrat (2 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (10 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid 2-metoxicarbonilamino-3-metilbutiric (152 mg, 0,86 mmol) şi HATU (303 mg, 0,79 mmol) în DMF (6 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (360 µL, 2,08 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu soluţie de NaHCO3 de 5%, apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se usucă în vid pentru a obţine (2S,4S)-metil {4-(metoximetil)-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul.
ter-butil (2S)-2-[5-(2-(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4- metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-metil{4-(metoximetil)-2-[(9 -(4,4,5,5-tetrametil-1 3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamat (0,69 mmol ), (S)-tert-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (220 mg, 0,69 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (24 mg, 0,02 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (31 mg, 0,04 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (6,0 mL) şi dimetilformamidă (1,0 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 1,04 mL, 2,0 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C sub atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (tert-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxyiarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (145 mg, 27%).
metil{(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de tert-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (145 mg, 0,18 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (51 mg, 0,24 mmol) şi COMU (92 mg, 021 mmol) în DMF (3 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (100 µL, 0,56 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, între 15 şi 43% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (68 mg, 39%). MS (ESI) m/z 870 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,71 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,09 (m, 1H), 7,88 - 7,63 (m, 6H), 7,36 - 7,29 (m, 6H), 5,41 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,30 - 5,24 (m, 2H), 5,14 - 5,10 (m, 1 H), 4,13 - 3,09 (m, 15H), 2,47 - 1,80 (m, 8H), 0,80 (dd, 6H, J = 6,4 Hz, J = 23 Hz).
Exemplul MN
tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metil pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il] -4 -(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S, 4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (438 mg, 0,72 mmol), metil (276 mg, 0,72 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (41 mg, 0,04 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (52 mg, 0,07 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (8,6 mL) şi dimetilformamidă (1,5 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 1,07 mL, 2,15 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul (182 mg, 32%).
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-yl}carbamatul
O soluţie de tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (182 mg, 0,18 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Reacţia se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (47 mg, 0,23 mmol) şi COMU (85 mg, 0,2 mmol) în DMF (3 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (90 µL, 0,52 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 şi 49% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil{(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-yi}carbamatul (32 mg, 39%). MS (ESI) m/z 884 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,70 (s, 1H), 8,21 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,08 (s, 1H), 7,90-7,64 (m, 6H), 7,34 - 7,31 (m, 3H), 7,64 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,28 - 5,25 (m, 3H), 5,05 - 5,01 (m, 1H), 4,19 - 4,04 (m , 3H), 3,67 - 3,15 (m, 15H), 2,51 - 2,46 (m, 4H), 1,95 - 1,92 (m, 2H), 1,82 - 1,76 (m, 1H), 1,10 (d, 3H, J = 6 Hz ), 0,75 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 14 Hz).
Exemplul MO
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoximetilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamat (57 mg, 0,08 mmol), se adaugă acid 2-metoxicarbonilamino-3-metilbutiric (19 mg, 0,1 µL, mmol), HATU (303 mg, 0,79 mmol) în DMF (1 mL) diizopropiletilamină (43 0,24 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu soluţie de NaHCO3 de 5%, apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 la 43% ACN / H2O + 0,1% TFA). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-1- (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul. (13 mg, 19%) MS (ESI) m/z 850 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,66 (s, 1H), 8,28 - 8,13 (m, 1H), 8,12 - 7,99 (m, 1H), 7,90 - 7,75 (m, 3H), 7,73 - 7,65 (m, 1H ), 7,63 - 7,57 (m, 1H), 7,34 - 7,19 (m, 2H), 5,30 - 5,24 (m, 2H), 5,21 - 4,95 (m, 2H), 4,33 - 3,93 (m, 6H), 3,23 - 3,58 (m, 12H), 2,76 - 2,59 (m, 2H), 2,02 - 1,73 (m, 6H), 1,12 - 1,07 (m, 3H), 0,86 - 0,68 (m, 12H).
Exemplul MP
tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metil pirolidină-2-il}-1H- imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il] -4 -(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (217 mg, 0,35 mmol), metil (170 mg, 0,39 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (21 mg, 0,02 mmol) şi dicloro[1,1'-bis difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (26 mg, 0,04 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (4,3 mL) şi dimetilformamidă (0,75 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,53 mL, 1,06 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (110 mg, 39%).
methyl{(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoximetilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (108 mg, 0,14 mmol), etanol (2 mL) şi acid clorhidric concentrat (0,7 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (10 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid 2-metoxicarbonilamino-3-metilbutiric (31 mg, 0,18 mmol) şi HATU (60 mg, 0,16 mmol) în DMF (2 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (70 µL, 0,41 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu soluţie de NaHCO3 de 5%, apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu soluţie de NaHCO3 de 5%, apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, între 15 şi 43% ACN/H2O + 0,1% TFA). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoximetilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (52 mg, 45%). MS (ESI) m/z 850 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmsoO) δ 8,69 (s, 1H), 8,18 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 7,99-7,86 (m, 4H), 7,72 (s, 1H), 7,64 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,51 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,23 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,29 (s, 2H), 5,22 - 5,18 (m, 1H), 5,01 - 4,70 ( m, 1H), 4,64 - 4,61 (m, 1H), 4,21 - 4,17 (m, 1H), 4,09 - 4,05 (m, 1H), 3,92 - 3,88 (m, 1H), 3,59 - 3,08 (m, 14H), 2,67 - 1,83 (m, 7H), 1,43 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,91 - 0,71 (m, 12H).
Exemplul MQ
(2S,4R)-tert-butil-4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec degazat de -(2S,4R)-tert-butil-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (335 mg, 0,64 mmol), bis(pinacolato)dibor (246 mg, 0,96 mmol), acetat de potasiu (190 mg, 1,9 mmol), tris(dibenzilidenacetonă)paladiu (24 mg, 0,02 mmol) şi 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (31 mg, 0,06 mmol) în 1,4-dioxan (3,3 mL) se încălzeşte la 90°C timp de 3 ore, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4R)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol -2-il)-pirolidină-1-carboxilatul (379 mg, 96%).
(2S,4R)-tert-butyl 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metil butanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il)-4(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4R)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (299 mg, 0,49 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil--oxobutan-2-ilcarbamate (217 mg, 0,58 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu( 0) (28 mg, 0,02 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (35 mg, 0,04 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (4,3 mL) şi dimetilformamidă ( 0,75 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,73 mL, 1,46 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4R)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (170 mg, 45%).
metil{(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metioxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno [4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-feniletil}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (170 mg, 0,22 mmol), etanol (3 mL) şi HCl concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (59 mg, 0,28 mmol) şi COMU (108 mg, 025 mmol) în DMF (3 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (110 µL, 0,66 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază inversă (Gemeni, 15 şi 44% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4R)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-feniletil}carbamatul (67 mg, 35%). MS (ESI) m/z 870 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,71 (s, 1H), 8,20 (d, 1 H, J = 8,4 Hz), 8,01 (m, 1H), 7,91 - 7,64 (m, 6H), 7,38 - 7,28 (m, 6H), 6,85 (s, 1H), 5,51 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 5,39 - 5,29 (m, 3H), 5,13 - 5,09 (m, 1H), 4,11 - 3,04 (m, 15H), 2,77 - 1,98 (m, 8H), 0,79 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 12,8 Hz).
Exemplul MR
(2S, 4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec degazat de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-1,1-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (322 mg, 0,61 mmol), bis(pinacolato)dibor (235 mg, 0,92 mmol), acetat de potasiu (182 mg, 1,9 mmol), tris(dibenzilidenacetonă)paladiu (23 mg, 0,02 mmol) şi 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (29 mg, 0,06 mmol) în 1,4-dioxan ( 3.3 mL) se încălzeşte la 90°C timp de 3 ore, se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (267 mg, 70%).
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutano il)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S, S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (267 mg, 0,52 mmol), metil (S)-1-((S)-2- 5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (195 mg, 0,52 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (25 mg, 0,02 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (32 mg, 0,04 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (4,3 mL) şi dimetilformamidă (0,75 mL ) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,65 mL, 1,3 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (75 mg, 22%).
metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno [4',3':6,7]-4,5-dihidro-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il-4,5-dihidro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (75 mg, 0,09 mmol), etanol (2 mL) şi acid clorhidric concentrat (0,6 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (26 mg, 0,13 mmol) şi COMU (47 mg, 0,11 mmol) în DMF (2 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (50 µL, 0,29 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (Gemeni, 15 şi 44% ACN/H2O + 0.1% TFA). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]-4,5-dihidro-nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (15 mg, 18%). MS (ESI) m/z 872 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 7,95 - 7.63 (m, 6H), 7,35 - 7,25 (m, 7H), 6,97 (s, 1H), 5,42 (d, 1H, J = 6,8 Hz), 5,18 (s, 2H), 5,09 (s, 2H), 4,28 - 2,63 (m, 19H), 2,47 - 1,80 (m, 8H), 0,77 (dd, 6H, J = 4,8 Hz, J = 12,4 Hz).
Exemplul MS
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirrolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)- 1,11-dihidroizocromeno[4',3': 6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il)-4-(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (400 mg, 0,85 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(6-bromo-1H-benzo[d] imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamate (360 mg, 0,85 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (38 mg, 0,03 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (48 mg, 0,07 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (8,0 mL) şi dimetilformamidă (1,4 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,98 mL, 1,96 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (156 mg, 29%).
metil{(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-yl)-1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pyrrolidin-1-yl]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (156 mg, 0,18 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la (90 mg, 0,12 mmol) de acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (34 mg, 0,16 mmol) şi COMU (61 mg, 014 mmol) în DMF (2 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (60 µL, 0,37 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 şi 49% ACN/H2O + 0,1% TFA). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-2-[[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (62 mg, 56%). MS (ESI) m/z 920 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,73 (s, 1H), 8,17 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,94 (d, 3H, J = 8,8 Hz), 7,84 - 7,67 (m, 6H), 7,37 - 7,29 (m, 6H), 5,48 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,35 - 5,20 (m, 5H), 4,14 - 3,12 (m, 15H), 2,52 - 1,92 (m, 8H), 0,80 (dd, 6H, J = 6,8 Hz, J = 6,4 Hz).
Exemplul MT
metil{(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-benzo [d]imidazol-6-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (156 mg, 0,18 mmol), etanol (3 ml) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (6 mL). Soluţia dată se concentrează şi la (68 mg, 0,09 mmol) de acest produs se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (21 mg, 0,12 mmol) şi COMU (41 mg, 01 mmol ) în DMF (1 mL. La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (50 µL, 0,28 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 şi 44% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-2-[(2S,4S)-2-{9-[2-((2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-6-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (32 mg, 40%). MS (ESI) m/z 886 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,71 (s, 1H), 8,15 (d, 1 H, J = 8 Hz), 7,95 - 7,64 (m, 8H), 7,28 (dd, 2H, J = 8,8 Hz, J = 14,4 Hz), 5,31 (s, 2H), 5,23 - 5,19 (m, 2H), 4,09 - 3,85 (m, 5H), 3,58 - 3,28 (m, 14H), 2,47 - 1,89 (m, 9H), 0,83 - 0,72 (m, 12H).
Exemplul MU
tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S)-metil {-2-[(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamat (460 mg, 0,74 mmol), (2S,4S)-tert-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilat (250 mg, 0,61 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (35 mg, 0,03 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (45 mg, 0,06 mmol) într-un amestec de 1,2-dimetoxietan (9,0 mL) şi dimetilformamidă (1,5 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,92 mL, 1,84 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte la 85°C în atmosferă de argon, timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilatul (123 mg)
metil{(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxi carbonil)-L-valil]-pirolidin-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-carboxilat (122 mg, 0,16 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte până la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (3 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (43 mg, 0,2 mmol) şi COMU (77 mg, 018 mmol) în DMF (3 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (80 µL, 0,37 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 şi 44% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (60 mg, 44%). MS (ESI) m/z 870 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,71 (s, 1H), 8,22 (d, 1H, J = 8 Hz), 8,09 (m, 1H), 7,88 - 7,63 (m, 6H), 7,36 - 7,29 (m, 6H), 5,41 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,30 - 5,24 (m, 2H), 5,14 - 5,10 (m, 1H), 4,13 - 3.09 (m, 15H), 2,47 - 1,80 (m, 8H) , 0,80 (dd, 6H, J = 6,4 Hz, J = 23 Hz).
Exemplul MV
(1R,3S,5R)-tert-butil3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metoximetilpirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)- 1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilatul
La o soluţie de (1R,3S,5R)-tert-butil-3-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d] imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilat (213 mg, 0,37 mmol), metil (142 mg, 0,31 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (35 mg, 0,03 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (22 mg, 0,03 mmol) într-un amestec de 1,4-dioxan (3,0 mL) şi dimetilsulfoxid (3,0 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,46 mL, 0,9 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte până la 95°C în atmosferă de argon, timp de 7 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (1R,3S,5R)-tert-butil-3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonil amino)-3-metilbutanoil)-4-metoximetilpirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilatul (101 mg, 42%).
metil{(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoximetilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de (1R,3S,5R)-tert-butil 3-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metoximetilpirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-2-carboxilat (101 mg, 0,16 mmol), etanol (3 mL) şi acid clorhidric concentrat (1 mL) se încălzeşte până la 60°C timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DCM (3 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (35 mg, 0,17 mmol) şi COMU (63 mg, 015 mmol) în DMF (3 mL). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (70 µL, 0,38 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil, se spală cu apă şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC în fază reversibilă (Gemeni, 15 şi 44% ACN/H2O + 0,1% TFA ). Fracţiunile produsului se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(1R,3S,5R)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metoximetilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5 il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-2-azabiciclo[3.1.0] hex-3-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (71 mg, 63). MS (ESI) m/z 882 [M+H]+.
1H RMN (400 MHz, dmso) δ 8,66 (s, 1H), 8,17 (d, 1 H, J = 8,8 Hz), 8,04 (s, 1H), 7,87 - 7,59 (m, 6H), 7,39 - 7,22 (m, 6H), 5,72 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 5,68 (s, 1H), 5,25 (s, 1H), 5,13 - 5,01 (m, 2H), 4,12 - 4,00 (m, 2H), 3,81 - 3,00 (m, 13H), 2,60 (m, 1H), 2,43 - 2,37 (m, 3H), 1,92 - 1,82 (m, 3H), 0,83 - 0,58 (m, 7H), 0,59 (s, 1H), 0,00 (s, 1H).
Exemplul MW
Acest compus a fost sintetizat folosind aceleaşi condiţii ca în exemplul OO substituind cu acidul (1R,3S,5R)-2-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxilic şi, respectiv, acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidina-2-carboxilic, după caz. MS (ESI) m/z 918 [M+H]+.
Exemplul MX
Acest compus a fost sintetizat folosind aceleaşi condiţii ca în exemplul OO substituind cu acidul (1R,3S,5R)-2-((2S, 3S)-3-metoxi-2 (metoxicarbonilamino)butanoil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxilic şi, respectiv, acidul (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic, după caz. MS (ESI) m/z 898 [M+H]+.
Exemplul MY
(2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c, g]cromen-9-il)-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c, g]cromen-8(9H)-onă (1,32 g, 3,63 mmol) în MeCN (40 mL) se adaugă acid (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-carboxilic (1,0 g, 4,36 mmol) şi DIPEA (0,7 mL, 3,99 mmol). După agitare timp de 18 ore, soluţia se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (10% până la 40% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (1,31 g, 70%).
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (1,31 g, 2,56 mmol) se adaugă xilen (25 mL) şi acetat de amoniu (3,95 g, 51,2 mmol) şi soluţia se încălzeşte până la 136°C şi se agită peste noapte. În dimineaţa următoare, soluţia se răceşte până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă cu MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (60% până la 100% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (711 mg, 56%).
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidină-1-carboxilat (935 mg, 1,9 mmol) în CH2Cl2 (20 mL) se adaugă MnO2 (8,25 g, 95 mmol). Amestecul reacţiei se agită timp de 3 ore, apoi se filtrează pe celită. Precipitatul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH, iar filtratul se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (0% până la 10% MeOH/AcOEt) pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno [8,9 -d] imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (692 mg, 74%).
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (692 mg, 1.41 mmol) în dioxan (15 ml) se adaugă bis(pinacolato)dibor (1,07 g, 4,23 mmol), KOAc (415 mg, 4,23 mmol), X-Phos (52 mg, 0,11 mmol) şi Pd2dba3 (26 mg, 0,03 mmol). Soluţia se degazează cu N2 timp de 10 min, apoi se încălzeşte până la 100°C timp de 16 ore. Soluţia se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc, se spală cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3, soluţie salină, se usucă cu MgSO4 şi se concentrează. Apoi se purifică prin cromatografie pe silicagel (0% până la 30% MeOH/AcOEt) pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (în cantitate de 821 mg).
(2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4(metil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (821 mg, 1,41 mmol), metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (1,05 g, 2,82 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (162 mg, 0,14 mmol) şi dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (102 mg, 0,14 mmol) în DME (15 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 2,32 mL, 4,65 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte până la 85°C timp de 18 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu bicarbonat de sodiu saturat şi soluţie salină, se usucă pe MgSO4 şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă pentru a obţine (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4metilpirolidină-1-carboxilatul (386 mg, 37%).
Metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-yl)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de (2S,4S)-tert-butil 2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4metilpirolidină-1-carboxilat (386 mg, 0,52 mmol), CH2Cl2 (8 mL), MeOH (2 mL) şi HCl (4M în dioxan, 2 mL) şi se agită peste noapte. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DMF (8 mL). Soluţia dată se concentrează şi la acest material se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (108 mg, 0,52 mmol) şi COMU (248 mg, 0,52 mmol). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (0,45 mL, 2,6 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu 10% MeOH/AcOEt, se spală cu apă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, se usucă (Na2SO4), se concentrează şi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {2-[2-{9-[2-(1-{2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-metilpirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (27 mg, 6%). LCMS-ESI+: calculat pentru C47H50N8O7: 838,38; observat [M+1]+: 840,12
Exemplul NB
Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-(metil)pirolidină-1-carboxilat (950 mg, 1,63 mmol) se dizolvă în DCM (12 mL), se adaugă MeOH (3 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 3 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 4 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (285 mg, 1,63 mmol), HATU (620 mg, 1,63 mmol) şi DMF (15 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (1,42 mL, 8,15 mmol). După 1 oră, amestecul se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul (596 mg, 57%).
Tert-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-yl]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamat (298 mg, 0,47 mmol), (S)-tert-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (443 mg, 1,4 mmol), Pd (PPh3)4 (54 mg, 0,05 mmol), PdCl2(dppf)2 (36 mg, 0,05 mmol) şi K2CO3 (2M în H2O, 0,78 mL, 1,55 mmol) se combină în DME (5 mL). Amestecul se degazează cu barbotarea N2 timp de 10 min, apoi se încălzeşte la 85°C timp de 16 ore. După răcire, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a opbţine tert-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (84 mg, 24%).
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
Tert-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (84 mg, 0,11 mmol) se dizolvă în DCM (2,5 mL), se adaugă MeOH (0,5 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 0,5 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 18 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (23 mg, 0,11 mmol), COMU (53 mg, 0,11 mmol) şi DMF (3 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,10 mL, 0,56 mmol). După 30 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (41 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculat pentru C47H50N8O7: 838,38; observat [M+1]+: 839,39
Exemplul NC
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (164 mg, 0,23 mmol) se dizolvă în DCM (2,57 mL), se adaugă MeOH (0,7 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 0,7 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 16 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (30 mg, 0,17 mmol), HATU (65 mg, 0,17 mmol) şi DMF (3 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,15 mL, 0,85 mmol). După 45 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (23 mg, 16%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O7: 818,41; observat [M+1]+: 820,70.
Exemplul ND
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxycarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (293 mg, 0,078 mmol), (2S,4S)-tert-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (300 mg, 0,52 mmol), Pd(PPh3)4 (60 mg, 0,052 mmol), PdCl2(dppf)2 (38 mg, 0,052 mmol) şi K2CO3 (2M în H2O, 0,86 mL, 1,72 mmol) se combină în DME (6 mL). Amestecul se degazează cu barbotarea N2 timp de 10 min şi apoi se încălzeşte la 85°C timp de 16 ore. După răcire, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (100% EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (183 mg, 50%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (183 mg, 0,26 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 2 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-methylbutanoic (91 mg, 0,52 mmol), HATU (198 mg, 0,52 mmol) şi DMF (5 ml), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,45 mL, 2,6 mmol). După 1 oră, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilprolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (6 mg, 3%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O7: 818,41; observat [M+1]+: 819,41.
Exemplul NF
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
(2S,4S)-tert-butil-2-(9-(2-((S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)metilbutanoil)azabiciclo[3.1.0]hexan-3-il)-1H-imidazol-5-il)-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (558 mg, 0,96 mmol), metil (501 mg, 1,15 mmol), Pd(PPh3)4 (111 mg, 0,096 mmol), PdCl2(dppf)2 (70 mg, 0,096 mmol) şi K2CO3 (2M în H2O, 1,6 mL, 3,17 mmol) se combină în DMSO (6 mL) şi dioxan (6 mL). Amestecul se degazează cu barbotarea N2 timp de 10 min şi apoi se încălzeşte la 95°C timp de 14 ore. După răcire, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (0%-30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (257 mg, 35%).
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxcarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-vali]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (257 mg, 0,34 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (71 mg, 0,34 mmol), COMU (161 mg, 0,34 mmoli) şi DMF (6 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,3 mL, 1,67 mmol). După 15 ore, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (152 mg, 53%). LCMS-ESI+: calculat pentru C48H52N8O7: 852,40; observat [M+1]+: 854,26. 'H-RMN (CD3OD): 8,677 (s, 1H), 8,232 - 7,837 (m, 5H), 7,695 - 7,673 (m, 2H), 7,496 - 7,426 (m, 5H), 5,499 (s, 1H), 5,445 - 5,401 (m, 1H), 5,337 (s, 1H), 5,253 - 5,208 (q, 1H, J = 7,2 Hz), 4,870 (m, 1H), 4,230 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 3,781 (m , 1H), 3,671 (s, 3H), 3,607 (s, 3H), 3,425 (m, 3H), 2,750 - 2,689 (m, 2H), 2,683 (m, 2H), 2,384 (m, 1H), 1,894 ( cvint., 2H, J = 12 Hz), 1,249 - 1,151 (m, 6H), 0,974 la 0.890 (m, 6H).
Exemplul NG
(2S,5S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo [c,g]cromen-3-il)etil) 5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă în MeCN (30 mL) se adaugă acid (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (1,2 g, 3,23 mmol) şi trietilamină (0,48 mL, 3,55 mmoli) şi soluţia se încălzeşte până la 50°C. După agitare timp de 15 ore, soluţia se răceşte până la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 50% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,5S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c, g]cromen-3-il)etil) 5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (1,09 g, 65%).
(2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5 metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,5S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (1,29 g, 2,48 mmol) se dizolvă într-o soluţie de DCM (17,5 mL) şi MeOH (7 mL), apoi se tratează cu tribromură de piridiniu (873 mg, 2,73 mmol). După agitare la temperatura camerei timp de 1 oră, amestecul reacţiei se diluează cu DCM şi 10% de HCl, şi se extrage cu DCM. Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă şi materialul brut prepară mai departe fără purificare ulterioară.
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5 metilpirolidina-2-carboniloxi)-8-oxo-8 ,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (700 mg, 1,17 mmol) se tratează cu o soluţie de acid (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (375 mg, 1,64 mmol) în acetonă (6 mL) şi Cs2CO3 (267 mg, 0,82 mmol). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 40°C timp de 16 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu CH2Cl2 şi se extrage de 3 ori. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (40% până la 100% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carbonyloxy)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (464 mg, 53%).
Tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (464 mg, 0,62 mmol) şi NH4OAc (8,48 g, 110,0 mmol) se suspendă într-o soluţie de PhMe/2-metoxietanol într-un raport de 10:1 (22 mL). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 110°C timp de 20 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (393 mg, 90%).
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
Tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (393 mg, 0,55 mmol) se suspendă în DCM (7 mL) şi se adaugă într-o singură porţie MnO2 activat (1,45 g, 16,7 mmol). Amestecul reacţiei se încălzeşte până la 40°C. După agitare timp de 2,5 ore, amestecul se răceşte la temperatura camerei şi suspensia se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH, iar filtratul se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se avansează la etapa următoare fără purificare ulterioară pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (328 g, 85%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (164 mg, 0,23 mmol) se dizolvă în DCM (7 mL), se adaugă MeOH (1,5 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1,5 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 16 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (81 mg, 0,46 mmol), HATU (175 mg, 0,46 mmol) şi DMF (5 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,4 mL, 2,34 mmol). După 35 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (132 mg, 69%). LCMS- ESI+: calculat pentru C45H54N8O7: 818,41; observat [M+1]+: 820,19. 'H-RMN (CD3OD): 8,492 (m, 1H), 8,179 - 7,538 (m, 7H), 5,267 - 5,201 (m, 3H), 5,125 - 5,082 (m, 1H), 4,070 (m, 1H), 3,383 - 3,592 (m, 4H), 3,225 (s, 3H), 2,466 - 2,249 (m, 5H), 1,992 - 1,892 (m, 3H), 1,568 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,490 (d, 3H , J = 6,8 Hz), 1,266 (m, 2H), 1,020 - 0,806 (m, 14H).
Exemplul NI
Metil [(2S,3R)-3-metoxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-threonil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (164 mg, 0,23 mmol) se dizolvă în DCM (7 mL), se adaugă MeOH (1,5 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1,5 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 16 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (90 mg, 0,46 mmol), HATU (175 mg, 0,46 mmol) şi DMF (6 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,4 mL, 2,34 mmol). După 30 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil [(2S,3R)-3-metoxi-1-{(2S,5S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-5-metilpirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul (97 mg, 50%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O9: 850,40; observat [M+1]+: 851,58. 'H-RMN (CD3OD): 8,631 (s, 1H), 8,191 - 7,938 (m, 7H), 6,100 (m, 1H), 5,925 (m, 1H), 5,303 (m, 3H), 5,179 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,406 - 4,358 (m, 2H), 3,754 - 3,598 (m, 8H), 3,376 (s, 3H), 3,263 (s, 3H), 2,625 - 2,256 (m, 6H), 2,038 - 1,955 (m, 2H), 1,598 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,530 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,302 - 1,099 (m, 6H).
Exemplul NJ
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (800 mg, 1,34 mmol) se tratează cu o soluţie de acid (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4- (metoximetil)pirolidină-2-carboxilic (485 mg, 1,87 mmol) în acetonă (6 mL) şi Cs2CO3 (306 mg, 0,94 mmol). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 40°C timp de 16 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu CH2Cl2 şi se extrage de 3 ori. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 40% până la 100% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (680 mg, 65%).
Tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxlatul
(2S,5S)-2-(2-(9-((2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (680 mg, 0,87 mmol) şi NH4OAc (10,0 g, 130,0 mmol) se suspendă într-o soluţie de PhMe/2-metoxietanol (22 mL) într-un raport de 10:1, Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 110°C timp de 24 de ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (461 mg, 72%).
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
Tert-butil 2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (461 mg, 0,62 mmol) se suspendă în DCM (7 mL) şi se adaugă MnO2 activat (1,6 g, 18,8 mmol) într-o singură porţie. Amestecul reacţiei se încălzeşte până la 40°C. După agitare timp de 5,5 ore, amestecul se răceşte la temperatura camerei şi suspensia se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH, iar filtratul se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se avansează la etapa următoare fără purificare ulterioară pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (414 g, 90%).
Metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-yl]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (207 mg, 0,28 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 1,5 oră şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic (106 mg, 0,56 mmol), HATU (214 mg, 0,56 mmoli) şi DMF (5 ml), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,49 mL, 2,8 mmol). După 30 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S,3S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul (132 mg, 69%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O7: 876,45; observat [M+1]+: 879,02
Exemplul NK
(2S,4S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil ) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (647 mg, 1,74 mmoli) în MeCN (20 mL) se adăugă acid ((2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-carboxilic (559 mg, 2,44 mmol) şi DIPEA (0,36 mL, 2,09 mmol) şi soluţia se încălzeşte până la 60°C. După agitare timp de 3 ore, soluţia se răceşte la temperature camerei, se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (20 % până la 50% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (621 mg, 69%).
(2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,4S)-1-tert-butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)etil) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (621 mg, 1,19 mmoli) se dizolvă într-o soluţie de DCM (10 mL) şi MeOH (4 mL), apoi se tratează cu tribromură de piridiniu (421 mg, 1,3 mmol). După agitare la temperatura camerei timp de 1,5 oră, amestecul reacţiei se diluează cu DCM şi 10% HCl şi se extrage cu DCM. Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă şi materialul brut se avansează mai departe fără purificare ulterioară.
(2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (709 mg, 1,18 mmoli) se tratează cu o soluţie de acid (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic (614 mg, 2,36 mmol) în Me-THF (12 mL) şi Cs2CO3 (384 mg, 1,18 mmol). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 50°C timp de 16 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu CH2Cl2 şi se extrage de 3 ori. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 40% până la 100% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (651 mg, 71%).
Tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
(2S,4S)-2-(2-(9-((2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil-4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (651 mg, 0,84 mmol) şi NH4OAc (10,0 g, 129,7 mmol) se suspendă într-o soluţie de PhMe/2-metoxietanol într-un raport de 10:1 (22 mL). Amestecul eacţiei agitat se încălzeşte până la 110°C timp de 20 de ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-yl]-1H-imidazol-5-yl}-1,4,5,11-tetrahydroisochromeno[4',3':6,7]naphtho[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (382 mg, 62%).
Tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
Tert-butil (2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (382 mg, 0,52 mmol) se suspendă în DCM (8 mL) şi se adaugă într-o singură porţie MnO2 activat (1,35 g, 15,5 mmoli). Amestecul reacţiei se încălzeşte la 35°C. După agitare timp de 15 ore, amestecul se răceşte la temperatura camerei şi suspensia se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH şi filtratul se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se avansează la etapa următoare fără purificare ulterioară pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (347 g, 91%).
Metil {(2S,3R)-3-metoxi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (174 mg, 0,24 mmoli) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 5 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid ((2S, 3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (92 mg, 0,48 mmol), HATU (182 mg, 0,48 mmol) şi DMF (5 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,31 mL, 2,4 mmol). După 35 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S,3R)-3-metoxi-1-[(2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamatul (72 mg, 34%) LCMS-ESI+: calculat pentru C46H56N8O10:. 880,41; observat [M+1]+: 882,39 'H-RMN (CD3OD): 8,558 (s, 1H), 8,123 - 7,572 (m, 7H), 5,436 - 5,391 (dd, 1H, J = 7,2, 3,6 Hz), 5,252 (s, 2H), 5,220 (m, 1H), 4,493 - 4,444 (m, 2H), 4,287 - 4,206 (m, 2H), 3,756 - 3,256 (m, 21H), 2,834 (m, 1H), 2,717 - 2,621 (m, 2H), 2,500 (m, 1 H), 2,150 (m, 1H), 1,882 (m, 1H), 1,208 (d, 3H , J = 6,4 Hz), 1,159 - 1,099 (m, 6H).
Exemplul NL
(2S,5S)-2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilatul
La o soluţie de 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (750 mg, 2,02 mmoli) în MeCN (20 mL) se adaugă acid (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (600 mg, 2,09 mmol) şi DIPEA (0,35 mL, 2,02 mmoli) şi soluţia se încălzeşte până la 60°C. După agitare timp de 4 ore, soluţia se răceşte la temperature camerei, se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 40% până la 80% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,5S)-2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1-((S)-2- (metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilatul (în cantitate de 1,16 g).
(2S,5S)-2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilatul
(2S,5S)-2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilat (400 mg, 0,61 mmoli) se dizolvă într-o soluţie de DCM (15 mL) şi MeOH (6 mL), apoi se tratează cu tribromură de piridiniu (409 mg, 1,28 mmol). După 2 ore se adaugă o porţie suplimentară de piridiniu tribromură (40 mg). După agitare la temperatura camerei timp de 20 min, amestecul reacţiei se diluează cu DCM şi 10% HCl şi se extrage cu DCM. Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă, iar materialul brut se avansează mai departe fără purificare ulterioară.
(2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarboni8lamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)acetil)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,5S)-2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilat) se tratează cu o soluţie de acid (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-metilpirolidină-2-carboxilic ( 280 mg, 1,22 mmol) în Me-THF (6 mL) şi Cs2CO3 (199 mg, 0,61 mmol). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 50°C timp de 2,5ore, apoi se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu CH2Cl2 şi se extrage de 3 ori. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 50% până la 100% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)acetil)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (441 mg, 90%).
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
(2S,4S)-1-tert-butil 2-(3-(2-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)acetil)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (441 mg, 0,55 mmol) şi NH4OAc (5 g, 65,0 mmol) se suspendă într-o soluţie de PhMe/2-metoxietanol într-un raport de 10:1 (11 mL). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la 110°C timp de 7 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (266 mg, 63%).
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
Tert-butil 2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11 tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (266 mg, 0,35 mmol) se suspendă în DCM (7 mL) şi se adaugă într-o singură porţie MnO2 activat (908 mg, 10.45 mmol). Amestecul reacţiei se agită peste noapte. După agitare timp de 15ore, se adaugă suplimentar într-o singură porţie MnO2 activat (500 mg, 5,75 mmol). După agitare timp de 2 ore la 35°C, amestecul se răceşte la temperatura camerei şi suspensia se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH şi filtratul se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se avansează la etapa următoare fără purificare ulterioară pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (în cantitate de 266 mg).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (266 mg, 0,23 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 1,5 oră şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (44 mg, 0,23 mmol), HATU (87 mg, 0,23 mmol) şi DMF (5 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,3 mL, 1,75 mmol). Peste 30 min, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (59 mg, 31%). LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O8: 834,41; observat [M+1]+: 836,89. 'H-RMN (CD3OD): 8,186 (s, 1H), 7,800 - 7,291 (m, 7H), 5,258 - 5,213 (dd, 1H, J = 7,2, 3,6 Hz), 5,027 - 4,918 (m, 4H), 4,620 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 4,246 (m, 1H), 4,116 (m, 1H), 3,972 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 3,701 - 3,675 (m, 1H), 3,503 (s, 3H ), 3,479 (s, 3H), 3,177 (s, 3H), 2,554 - 2,191 (m, 3H), 1,906 - 1,821 (m, 6H), 1,392 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 1,113 - 0,728 ( m, 12H).
Exemplul NM
Tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-i]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamat (312 mg, 0,49 mmol), metil (219 mg, 0,54 mmol), Pd(PPh3)4 (58 mg, 0,05 mmol), PdCl2(dppf)2 (36 mg, 0,05 mmol) şi K2CO3 (2M în H2O, 0,8 mL, 1,6 mmol) se combină în DMSO (5 mL) şi dioxan (5 mL). Amestecul se degazează cu barbotarea N2 timp de 10 min şi apoi se încălzeşte până la 95°C, timp de 5 ore. După răcire, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (0% - 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (166 mg, 43%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
Tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (166 mg, 0,21 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL), se adaugă MeOH (1 mL) şi HCl (4 M în dioxan, 1 mL). Amestecul reacţiei se agită timp de 2 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (44 mg, 0,21 mmol), COMU (100 mg, 0,21 mmol) şi DMF (5 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (0,18 mL, 1,05 mmol). După 1 oră, amestecul se diluează cu 10% MeOH/EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (71 mg, 38%). LCMS-ESI+: calculat pentru C49H54N8O8: 882,41; observat [M+1]+: 884,34. 'H-RMN (CD3OD): 8,462 (s, 1H), 8,029 - 7,471 (m, 7H), 7,394 - 7,343 (m, 5H), 5,410 (d, 2H, J = 6,8 Hz), 5,300 (m, 1H), 5,233 (m, 2H), 4,341 (m, 1H), 4,236 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 3,603 (s, 3H), 3,551 (s, 3H), 3,522 - 3,241 (m, 8H), 2,650 (m, 1H), 2,550 (m, 2H), 1,977 - 1,926 (m, 4H), 1,221 (d, 3H, J = 3,2 Hz), 0,897 - 0,779 (dd, 6H, J = 19,2, 6,8 Hz).
Exemplul NO
(S)-etil-2-(tert-butoxicarbonilamino)-5-oxohexanoatul
O soluţie de etil N-Boc (S)-piroglutamat (20,0 g, 77,7 mmol) în THF anhidru (150 mL) se răceşte în atmosferă de argon într-un fund rotund cu gât dublu până la temperatura de -40°C. Soluţie de bromură de metil-magneziu (3,0 M în eter, 28,5 mL, 85,5 mmol) se adaugă prin picurare la amestecul reacţiei timp de 30 min. Reacţia se agită timp de 4 ore la temperature de -40°C, apoi timp de 1 oră la temperature de 0°C. Reacţia se porţionează în acetat de etil şi soluţie saturată de clorură de amoniu şi se acidulează cu 1 N HCl. Stratul apos se extrage de două ori cu acetat de etil. Straturile organice se combină şi se usucă cu sulfat de sodiu. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană (20% - 40% EtOAc/hexani) pentru a obţine (S)-etil 2-(tert-butoxicarbonilamino)-5-oxohexanoatul sub forma unui ulei vâscos şi se avansează direct la etapa următoare.
(S)-etil 5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-carboxilatul
(S)-etil 2-(tert-butoxicarbonilamino)-5-oxohexanoat într-un balon de 1 L se tratează cu o soluţie de acid trifluoroacetic / diclormetan (amestec 1:1, 100 mL). Se observă efervescenţa şi amestecul se lasă pentru agitare timp de 4 ore la temperatura camerei. După care substanţele volatile se evaporă în vid pentru a se obţine (S)-etil 5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-carboxilatul sub formă de ulei şi se utilizeză direct în etapa următoare.
(2S,5S)-etil-5-metilpirolidină 2-carboxilatul
Imina brută 3 se dizolvă într-un balon de 1 L cu etanol (400 mL), se evacuază şi se încărcă cu argon de trei ori. Se adaugă paladiu pe cărbune (apprx. 750 mg, 10% greutate/greutate, uscată), apoi amestecul reacţiei se purifică de gaz şi se încarcă cu hidrogen gazos (de 3 ori). Reacţia se lasă pentru agitare în hidrogen atmosferic timp de 16 ore. Amestecul se filtrează printr-un strat de celită, iar filtratul se concentrează în vid. Se adaugă dietileter la ulei şi se formează un precipitat. Amestecul se filtrează pentru a obţine (2S,5S)-etil-5-metilpirolidină-2-carboxilatul, ca un solid alb (10,6 g, 67,4 mmol, 86,7% în trei etape). 1H RMN (400 MHz, cdcl3) δ 4,48 (dd, 1H), 4,27 (c, 2H), 3,92 - 3,80 (m, 1H), 2,52 - 2,36 (m, 1H), 2,32 - 2,13 (m, 2H), 1,75 - 1,60 (m, 1H), 1,51 (d, 3H), 1,30 (t, 3H).
(2S,5S)-1-tert-butil 2-etil-5metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de (2S,5S)-etil-5-metilpirolidină-2-carboxilat (7,0 g, 44,5 mmol) în diclormetan (250 mL) se adaugă succesiv prin picurare ditertbutilanhidridă (10,7 g, 49,0 mmoli), diizopropiletilamină (17,1 mL, 98,0 mmol) peste 10 minute şi dimetil aminopiridină (0,27 g, 2,23 mmol). Se observă efervescenţa şi amestecul se lasă pentru agitare timp de 16 ore la temperatura camerei. Amestecul reacţiei se spală cu HCl (250 mL, din 1N). Stratul organic se usucă apoi cu sulfat de sodiu. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană (5% - 25% EtOAc/hexani) pentru a obţine (2S,5S)-1-tert-butil-2-etil-5 metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul sub formă de ulei (6,46 g, 25,1 mmol, 56%). LCMS-ESI+: calculat pentru C13H23NO4: 257,16 (M+); Găsit: 258,70 (M+H+).
Acidul (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic
La o soluţie de (2S,5S)-1-tert-butil-2-etil-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (6,46 g, 25,1 mmoli) în etanol (20 ml) se adaugă monohidrat de hidroxid de litiu (2,11 g, 50.2 mmol) şi apă deionizată (12mL). Amestecul se lasă să se agite timp de 16 ore, apoi se porţionează în acetat de etil şi un amestec 1:1 de soluţie salină saturată şi 1N HCl. Stratul apos se extrage suplimentar cu acetat de etil. Straturile organice se combină, se usucă cu sulfat de sodiu şi solventul se evaporă în vid pentru a obţine acidul (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic sub forma unui solid alb (cant.) şi se utilizează direct în etapa următoare.
(2S,5S)-tert-butil-2-(hidroximetil)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de acid (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (5,91 g, 25,8 mmoli) în tetrahidrofuran la temperatura de 0°C se adaugă prin picurare boran în sulfură de dimetil (1,0 M, 3,4 mL , 34 mmol). Amestecul reacţiei se agită timp de 4 ore la temperatura de 0°C, apoi timp de 18 ore la temperatura camerei. Amestecul se răceşte apoi la temperatura de 0°C şi se adaugă prin picurare metanol (70 mL). Amestecul reacţiei se încălzeşte la temperatura camerei, iar solvenţii sunt evaporaţi în vid. Reziduul se reia în diclormetan (200 mL) şi se extrage cu bicarbonat de sodiu saturat. Stratul organic se usucă cu sulfat de sodium, iar solventul este eliminat în vacuum pentru a obţine (2S,5S)-tert-butil-2-(hidroximetil)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul sub formă de ulei pur (5,15 g, 23,9 mmoli, 93%) şi se utilizează direct în etapa următoare.
(2S,5S)-tert-butil 2-formil-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,5S)-tert-butil-2-(hidroximetil)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (5,15 g, 23,9 mmol) în diclormetan se adaugă TEMPO (0,075 g, 0,48 mmol), bromură de sodiu ( 0,246 g, 2,39 mmol) şi bicarbonat de sodiu (0,442 g, 5,26 mmol). Se adaugă hipoclorit de sodiu (2,67 g, 35,9 mmol) al unei soluţii de 6% şi amestecul bifazic se agită viguros timp de 2 ore la temperatura camerei. Amestecul reacţiei se extrage de două ori cu diclormetan (2x100mL). Straturile organice se combină şi se spală cu soluţie saturată de tiosulfat de sodiu, se usucă cu sulfat de sodium, iar solventul se evaporă în vid pentru a obţine (2S,5S)-tert-butil-2-formil-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (3,9 g, 18,29 mmol, 77%), sub formă de ulei slab colorat şi se foloseşte direct în etapa următoare.
(2S,5S)-tert-butil-2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat
La o soluţie de (2S,5S)-tert-butil-2-formil-5-metilpirolidină-1-carboxilat (3,9 g, 18.30 mmoli) în MeOH (15 mL) şi hidroxid de amoniu (15 mL, 99,9%) se adaugă prin picurare glioxal ( 11,7 mL, 40% g/v în apă, 102.40 mmol). Amestecul bifazic devine portocaliu şi tulbure. Amestecul reacţiei se agită viguros peste noapte la temperatura camerei. Solventul se evaporă în vid. Amestecul brut se redizolvă în acetat de etil şi se spală cu apă. Stratul apos se spală suplimentar cu acetat de etil. Straturile organice se combinevaporă elimină în vid. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de la 85% până la 100% acetat de etil în hexani pentru a obţine (2S,5S)-tert-butil-2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul sub forma unui solid alb (3,47 g, 13,8 mmol, 75%). LCMS-ESI+: calculat pentru C13H21N3O2: 251,16 (M+); Găsit: 252,20 (M+H+).
(2S,5S)-tert-butil-2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
Un balon cu fund rotund de 500 mL se încarcă cu (2S,5S)-tert-butil-2-(1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (3,47 g, 13,8 mmoli), iod (7,7 g, 30,4 mmol) şi carbonat de sodiu (4,54 g, 42,8 mmol). Dioxan (70 mL) şi apă (45 ml) se adaugă la amestec şi amestecul reacţiei se agită viguros peste noapte la întuneric. Amestecul reacţiei se porţionează apoi în acetat de etil şi o soluţie apoasă de tiosulfat de sodiu de 10% şi se extrage. Stratul apos se extrage suplimentar cu acetat de etil. Straturile organice se combină, se usucă cu sulfat de sodium, iar solventul se evaporă în vid. Materialul brut se filtrează printr-un strat de silice cu 25% acetat de etil în hexani pentru a obţine (2S,5S)-tert-butil-2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul sub forma unui solid alb (4,28 g, 8,50 mmol, 62%). LCMS-ESI+: calculat pentru C13H19I2N3O2: 502,96 (M+); Găsit: 503,94 (M+H+).
(2S,5S)-tert-butil-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,5S)-tert-butil-2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (4.28 g, 8,50 mmoli) în etanol (75 mL ) şi apă (75 mL) se adaugă tiosulfat de sodiu (10,72 g, 85,1 mmol) şi amestecul reacţiei se agită viguros timp de 1 oră la temperatura de 100°C, apoi timp de 16 ore la temperatura de 90°C şi timp de 5 ore la temperatura de 100°C. Amestecul reacţiei se porţionează în acetat de etil şi apă. Stratul apos se spală suplimentar cu acetat de etil, iar straturile organice se combină. Stratul organic se usucă cu sulfat de sodiu, se concentrează, iar materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană pentru a obţine (2S,5S)-tert-butil-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul sub forma unui solid alb (2,34 g, 6,20 mmol, 73%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,04 (s, 1H), 4,89 (dd, 1H), 3,92 (m, 1H), 2,91 (s, 1H), 2,18 - 2,06 (m, 2H), 1,78 (m, 1H), 1,52 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 1,13 (d, 3H).
(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona
Un balon cu fund rotund se încarcă cu (2S,5S)-tert-butil-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (1,5 g, 3,98 mmol) şi se tratează cu un exces de acid clorhidric (100 mL de 4,0 M în dioxan). Amestecul se agită viguros timp de 3 ore, pe parcursul cărora se formează un precipitat, iar solventul se evaporă în vid. La un amestec de intermediar brut se adaugă apoi prin picurare acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,836 g, 4,77 mmol), HATU (1,81 g, 4,77 mmol) în diclormetan (25 mL), diizopropiletilamină (3,46 mL, 19,9 mmol) şi se agită peste noapte în atmosferă de azot. Amestecul reacţiei se porţionează în acetat de etil şi bicarbonat de sodiu saturat. Stratul organic se usucă cu sulfat de sodiu, solventul se evaporă în vid. Produsul brut se purifică prin cromatografie pe coloană pentru a obţine (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona suf forma unui solid alb (1,63 g, 3,75 mmol, 94%). LCMS-ESI+: calculat pentru C15H23IN4O3: 434,08 (M+); Găsit: 435,51 (M+H+).
Exemplul NP
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11 dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Sinteza acestui compus a fost preparată în conformitate cu procedura din exemplul LR-1 cu următoarea modificare. (2S)-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona se utilizează în timpul legăturii Suzuki în locul (2S)-1-[(2S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-onei. Materialul brut se purifică prin HPLC preparativă pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul sub forma unui solid alb (17 mg, 0,019 mmol, 17%). 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,63 (s, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,04 (m, 1H), 7,87 (m, 2H), 7,66 (m, 2H), 7,52 - 7,39 (m, 6H), 5,50 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,16 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 3,80 (m, 4H), 3,66 (s, 6H), 3,43 (m, 4H ), 3,23 (s, 3H), 2,72 - 1,99 (m, 9H), 1,56 (d, 3H), 1,29 (m, 1H), 0,99 (d, 3H), 0,88 (d, 3H).
Exemplul NQ
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Sinteza acestui compus a fost preparată în conformitate cu procedura din exemplul LQ cu următoarea modificare. (2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-ona se utilizează în timpul legăturii Suzuki în locul (2S)-1-[(2S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-[(1-metoxietenil)amino]-3-metilbutan-1-onei. Materialul brut se purifică prin HPLC preparativă pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul sub forma unui solid alb (110 mg, 0,131 mmol, 57%). 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,65 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 8,04 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,67 (m, 2H) , 7,46 (m, 6H), 5,59 (s, 1H), 5,50 (dd, 1H), 5,33 (s, 2H), 5,22 - 5,09 (m, 1H), 4,14 (m, 2H), 3,74 (s, 1H ), 3,65 (m, 6H), 3.52-3.37 (m, 2H), 2,60 - 1,89 (m, 11H), 1,56 (d, 3H), 1,29 (d, 1H), 0,99 (d, 3H), 0,88 (d, 3H).
Exemplul NR
Metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul
Sinteza acestui compus a fost preparată în conformitate cu procedura din exemplul NQ cu următoarele modificări. Acidul (R)-2-(tert-butoxicarbonilamino)-2-fenilacetic se utilizează în timpul legăturii amidice în locul acidului (R)-2- (metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic. Acesta este apoi tratat cu un exces de acid clorhidric (15 mL, 4,0 M în dioxan) timp de 2 ore. Produsul brut se purifică prin HPLC pentru a obţine metil [(2S)-1-{(2S,5S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-5-metilpirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul sub forma unui solid alb (153 mg, 0,196 mmol, 74%). 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,63 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,99 (m, 1H), 7,93 (m, 2H), 7,80 (m, 2H), 7,72 - 7,64 (m, 2H), 7,63 - 7,52 (m, 5H), 5,52 (dd, 1H), 5,44 (m, 1H), 5,33 (s, 2H), 5,21 - 5,10 (m, 1H), 4,80 (m, 2H), 4,14 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,75 (s, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,12 (dd, 1H), 2,72 - 2,13 (m, 7H), 2,00 (m, 3H), 1,56 (d, 3H), 1,30 (d, 1H), 0,98 (d, 3H), 0,88 (d, 3H).
Exemplul OE
(2S,5S)-Etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilatul
(2S,5S)-Etil 5-metilpirolidină-2-carboxilat-TFA (10.0 g, 39.3 mmol), acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (6,88 g, 39,3 mmol) şi HATU (14,9 g, 39,3 mmol) se combină în DMF (100 mL) şi se adaugă DIPEA (15,0 mL, 86,5 mmol). După agitare timp de 1 oră la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală succesiv cu 10% de HCl, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă pentru a obţine (2S,5S)-etil-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)- 3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilatul. Materialul brut se foloseşte în continuare fără purificare ulterioară.
Acidul (2S,5S)-1-((S)-2)-(Metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic
(2S,5S)-Etil 1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidina-2-carboxilat (39,3 mmol, presupunând conversia completă de la transformarea precedentă) se suspendă în MeOH (200 mL) şi soluţie apoasă (1,0 M, 100 mL, 100 mmol). Amestecul reacţiei se agită peste noapte, apoi se concentrează sub presiune redusă pentru a îndepărta cea mai mare parte de MeOH. Soluţia apoasă se spală de 2 ori cu DCM înainte de a fi acidulată la pH~1-2 cu 10% de HCl. Faza apoasă acidă se extrage apoi cu EtOAc de 5 ori. Extractele EtOAc combinate se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă pentru a obţine acidul (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (6,89 g, 56% peste 2 etape).
Exemplul OF
3-Vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
Un balon de 500 ml cu fund rotund cu gât triplu uscat într-un cuptor se răceşte cu Ar, apoi se încarcă cu 3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8 (9H)-onă (12,0 g , 42,1 mmol), viniltrifluoroborat de potasiu (8,47 g, 6,32 mmol), Pd(OAc)2 (473 mg, 2,11 mmol), SPhos (1,74 g, 4,25 mmol), K2CO3 (17,5 g, 126 mmol) şi propanol anhidru (120 mL). Amestecul reacţiei se barbotează cu Ar timp de 16 min, apoi se încălzeşte la reflux timp de 5,5 ore. După finisare, amestecul reacţiei se răceşte la temperatura camerei şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se suspendă în DCM, apoi se spală cu H2O şi soluţie salină. Soluţia organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul rezultat se purifică în continuare prin intermediul unui tampon de silice, eluând cu DCM pentru a se obţine 3-vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (10,2 g, 87%).
3-(2-Bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
3-Vinil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (9,98 g, 36,1 mmol) se dizolvă într-o soluţie agitată de THF (70 mL), DMSO (70 mL ) şi H2O (35 mL). NBS (6,75 g, 37,9 mmol) se adaugă într-o singură porţie şi amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de 33 min. La finisare, mediul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală de două ori cu H2O şi o dată cu soluţie salină. Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Bromohidrinul brut rezultat se suspendă în DCM (200 mL) şi se tratează cu MnO2 activat (62,7 g, 722 mmol). După agitare timp de 15 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se filtrează pe celită, iar reziduul se spală de mai multe ori cu DCM. Filtratul combinat (~400 mL) se tratează cu MeOH (~100 mL) şi amestecul se concentrează treptat sub presiune redusă, cauzând ca materialul solid să precipite din soluţie. Când volumul lichidului atinge ~200 mL, solidul se filtrează şi se clăteşte cu MeOH. Secvenţa de concentraţie/precipitare/filtrare/clătire se efectuează încă de 2 ori, rezultând în colectarea a 3 culturi de pulbere de 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H )-ona (7,49 g, 56% peste 2 etape).
(4S)-1-tert-Butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il) etil) 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
3-(2-Bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (7,47 g, 20,1 mmol) şi acid (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic (5,22 g, 20,1 mmol) se suspendă în 2-Me-THF (75 mL) şi se tratează cu Cs2CO3 (3,27 g, 10,1 mmol). După agitare timp de 4 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu DCM. Stratul organic se spală cu H2O. Stratul apos se re-extrage de 2 ori cu DCM. Straturile organice combinate se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 10% până la 50% EtOAc/DCM) pentru a obţine (4S)-1-tert-butil-2-(2-oxo-2-(8-oxo-8, 9,10, 11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)etil)-4-(metoximetil)pirolidină-1 ,2-dicarboxilatul (7,73 g, 70%).
(2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil)-1-tert-butil-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
(4S)-1-tert-Butil 2-(2-oxo-2-(8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)etil)-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (7,66 g, 13,9 mmol) se dizolvă într-o soluţie de DCM (100 mL) şi MeOH (40 mL), apoi se tratează cu tribromură de piridiniu (4,90 g, 15,3 mmol). După agitare la temperatura camerei timp de 1,75 oră, amestecul reacţiei se diluează cu DCM şi se spală succesiv cu 10% de HCl, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă, iar materialul brut se foloseşte în continuare fără purificare ulterioară.
(2R,4R)-1-tert-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil)-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
(2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil)-1-tert-butil-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (8,76 g, 13,94 mmol) se tratează cu o soluţie de acid (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (6,85 g, 23,92 mmol) în 2-Me-THF (70 mL) şi Cs2CO3 (3,63 g, 11,15 mmol). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 20 de ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală cu H2O şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/AcOEt) pentru a se obţine (2R, R)-1-tert-butil-2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,1-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil)-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (10,47 g, 90%).
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
(2R,4R)-1-tert-Butil 2-(2-(9-((2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboniloxi)-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil)-4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (10,47 g, 12,56 mmol) şi NH4OAc (50.9 g, 660 mmol) se suspendă într-o soluţie de 10:1 PhMe/2-metoxietanol (132 mL). Amestecul reacţiei agitat se încălzeşte până la temperatura de 110°C timp de 4,5 ore, apoi se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Faza organică se spală de 3 ori cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 30% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (8,33 g, 84%).
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (8,33 g, 1,049 mmol) se suspendă în DCM şi se adaugă într-o singură porţie MnO2 activat (55.0 g, 630 mmol). După 13 ore se adaugă MeOH (200 mL) şi suspensia se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu MeOH (600 mL), iar filtratul se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 0% până la 45% MeOH/EtOAc) pentru a obţine tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (4,85 g, 58%).
Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (179 mg, 0,226 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL) şi se adaugă HCl (4,0 M în dioxan, 1 ml). Amestecul reacţiei se agită timp de 1 oră la temperatura camerei, apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul rezultat se tratează cu acid (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic (51 mg, 0,27 mmol), HATU (95 mg, 0,25 mmoli), DMF (2 mL) şi DIPEA (0,39 mL, 2.3 mmol). După agitare timp de 6 min, reacţia se stinge cu H2O, se filtrează şi se purifică prin HPLC în fază inversă pentru a obţine metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul (116 mg, 59%). MS (ESI) m/z 864 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,57 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 8,20 (d, J = 14,4 Hz, 1H), 8,15 - 7,98 (m, 2H), 7,91 (dd, J = 21,8, 14,1 Hz, 2H), 7,85 - 7,69 (m, 2H), 7,69 - 7,48 (m, 2H), 5,42 - 5,12 (m, 5H), 4,34 (dd, J = 22,3, 13,7 Hz , 1H), 4,30 - 4,10 (m, 2H), 3,87 - 3,73 (m, 1H), 3,73 - 3,63 (m, 7H), 3,62 - 3,48 (m, 2H), 3,48 - 3,38 (m, 4H), 3,35 (s, 3H), 2,95 - 2,70 (m, 1H), 2,70 - 2,55 (m, 2H), 2,55 - 2,20 (m, 2H), 2,20 - 1,91 (m, 3H), 1,77 (d, J = 42,0 Hz , 1H), 1,65 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,43 (t, J = 24,6 Hz, 1H), 1,28 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 1,23 - 1,01 (m, 3H), 0,98 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,90 (dd, J = 13,1, 5,9 Hz, 10H).
Exemplul OG
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul se prepară din tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat prin aceeaşi metodă utilizată în sinteza {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatului, substituind acidul (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic cu acidul (2S,3R)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic. MS (ESI) m/z 864 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,62 - 8,41 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,07 (dt, J = 20,1, 10,0 Hz, 1H), 7,89 (dt, J = 35,6, 15,6 Hz, 2H), 7,77 (dd, J = 20,3, 7,0 Hz, 2H), 7,68 - 7,48 (m, 2H), 5,95 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 5,42 - 5,13 (m, 4H), 4,47 (t , J = 5,5 Hz, 1H), 4,40 - 4,09 (m, 2H), 3,80 - 3,73 (m, 1H), 3,73 - 3,62 (m, 6H), 3,57 (dt, J = 16,1, 9,7 Hz, 2H), 3,40 (s, 3H), 3,34 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 18,4, 12,5 Hz, 1H), 2,63 (td, J = 13,3, 6,8 Hz, 2H), 2,55 - 2,18 (m, 2H), 2,16 - 1,77 (m, 4H), 1,65 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,50 - 1,31 (m, 1H), 1,26 (dd, J = 15,6, 6,7 Hz, 2H), 1,17 - 1,03 (m, 2H), 0,98 (dd, J = 6,7, 4,5 Hz, 5H), 0,89 (dd, J = 15,5, 7,8 Hz, 3H), 0,86 - 0,74 (m, 3H).
Exemplul OH
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (102 mg, 0,128 mmol) se dizolvă în DCM (4 mL) şi HCl (4,0 M în dioxan, 2,0 mL, 8,0 mmol). După agitare la temperatura camerei timp de 30 min, soluţia se concentrează sub presiune redusă. Reziduul se tratează cu acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (29 mg, 0,141 mmol), COMU (60 mg, 0,141 mmol), DMF (3,0 mL) şi DIPEA (0,223 ml, 1,28 mmol) . După agitare la temperatura camerei timp de 20 min, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc. Soluţia organică se spală cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Materialul brut se purifică prin HPLC în fază inversă pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul în calitate de sare de bis-TFA (82,4 mg, 60%). MS (ESI) m/z 866 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 7,94 - 7,67 (m, 4H), 7,59 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,48 - 7,33 (m, 4H), 7,11 (d, J = 18,7 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,48 - 5,33 (m, 1H), 5,23 (dd, J = 24,1, 15,7 Hz, 1H), 5,17 - 5,03 (m, 3H ), 4,22 (dd, J = 17,0, 9,6 Hz, 1H), 4.16-4.01 (m, 1H), 3,91 (d, J = 24,1 Hz, 1H), 3,83 - 3,68 (m, 1H), 3,68 - 3,59 ( m, 3H), 3,59 - 3,49 (m, 3H), 3,38 (ddd, J = 15,9, 9,6, 5,7 Hz, 2H), 3,28 - 3,14 (m, 5H), 3,10 (dd, J = 14,0, 8,2 Hz, 1H), 3,00 (dd, J = 17,8, 9,6 Hz, 1H), 2,92 (dd, J = 14,5, 6,7 Hz, 1H), 2,73 - 2,41 (m, 2H), 2,40 - 2,11 (m, 2H), 2,11 - 1,83 (m, 2H), 1,54 (t, J = 9,7 Hz, 2H), 1,24 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 1,06 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 0,99 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 0,94 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 0,85 (d, J = 6,7 Hz, 2H).
Exemplul OI
tert-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul se prepară din (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat prin aceeaşi metoda utilizată în sinteza tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului, substituind acidul (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic cu acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic.
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
tert-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidin[-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (137 mg, 0,179 mmol) se dizolvă în DCM (5 mL) şi se adaugă HCl (4,0 M în dioxan, 1 mL). După agitare la temperatura camerei timp de 1,5 oră, amestecul reacţiei se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (69 mg, 0,39 mmol), HATU (149 mg, 0.393 mmol), DMF (2,0 mL) şi DIPEA (0,31 mL, 1,8 mmol ). După agitare timp de 15 min la temperatura camerei, amestecul reacţiei se răceşte cu apă şi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (123 mg). MS (ESI) m/z 880 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,48 (s, 1H), 8,05 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 7,92 (dd, J = 19,7, 10,1 Hz, 2H), 7,74 (s, 2H), 7,59 - 7,44 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 5,40 (dt, J = 16,3, 8,1 Hz, 1H), 5,31 - 5,15 (m, 3H), 4,47 - 4,10 (m, 4H), 3,86 - 3,44 (m, 12H), 3,39 (dd, J = 13,2, 7,1 Hz, 6H), 2,94 - 2,57 (m, 4H), 2,25 - 1,94 (m, 4H), 1,02 - 0,82 (m, 12H).
Exemplul JO
Metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul se prepară din tert-Butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat prin aceeaşi metodă utilizată în sinteza metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatului, substituind acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic cu acidul (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic. MS (ESI) m/z 908 [M+H]+.
Exemplul OK
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul se sintetizează din (2S,4S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g] cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil 4-(metoximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat prin aceleaşi metode descries pentru sinteza tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului, substituind acidul (S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoll)pirolidină-2-carboxilic cu acidul (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic.
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul se sintetizează din tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat prin aceeaşi metodă utilizată pentru sinteza metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatului, substituind tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 871 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 7,87 (ddd, J = 20,5, 15,3, 6,8 Hz, 4H), 7,65 (s, 1H), 7,50 - 7,38 (m, 5H), 7,17 (s, 1H), 5,41 ( d, J = 24,5 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 5,20 (d, J = 7,3 Hz, 3H), 4,24 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,03 - 3,94 (m, 1H), 3,89 (dd, J = 15,4, 8,6 Hz, 1H), 3,77 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 3,72 - 3,64 (m, 4H ), 3,63 - 3,52 (m, 4H), 3,43 (qd, J = 9,5, 5,6 Hz, 3H), 3,30 (s, 3H), 3,24 - 3,08 (m, 2H), 2,97 (dd, J = 11,6, 5,4 Hz, 2H), 2,59 (dt, J = 21,1, 7,8 Hz, 3H), 2,29 (s, 1H), 2,24 - 2,14 (m, 2H), 2,11 - 1,85 (m, 2H), 0,92 (dd, J = 15,8, 6,7 Hz, 6H).
Exemplul OL
tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul se prepară conform metodei descrise pentru sinteza tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului, substituind tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul.
Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul se prepară conform metodei descrise pentru sinteza metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamatului, substituind metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-tert-butoxicarbonilamino-2-fenilacetil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamatul cu tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 811 [M+H]+.
Exemplul OM
tert-Butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul se sintetizează de la 3-(2-bromoacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă, prin aceleaşi metode utilizate în sinteza tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului, substituind acidul (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic cu acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxylic şi acidul (2S,4S)-1-(tert-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxylic cu acidul (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil-5-metilpirolidină-2-carboxilic.
tert-Butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-yl]-4-(methoxymethyl)pirolidină-1-carboxilatul se prepară conform metodei descrise pentru sinteza tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naftio[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului, substituind tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu tert-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul.
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul se prepară din tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat în conformitate cu aceeaşi metodă descrisă pentru sinteza metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((2S,3R)-2-metoxicarbonilamino-3-metoxibutanoil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamatului, substituind (2S,4S)-tert-Butil 2-(2'-((2S,4S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metilpirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 866 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,44 (d, J = 19,8 Hz, 1H), 8,02 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 7,98 - 7,81 (m, 3H), 7,74 (dd, J = 22,2, 13,6 Hz, 2H), 7,63 - 7,41 (m, 2H), 5,79 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 5,42 (dt, J = 43,3, 21,5 Hz, 2H), 5,31 - 5,10 (m, 5H), 4,85 - 4,70 (m, 1H), 4,52 (d, J = 3,8 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 20,8, 8,8 Hz, 1H), 3,80 (dt , J = 19,0, 7,3 Hz, 2H), 3,73 - 3,63 (m, 7H), 3,63 - 3,49 (m, 3H), 3,39 (d, J = 9,7 Hz, 4H), 3,35 (s, 5H), 3,28 ( d, J = 4,4 Hz, 3H), 2,84 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,72 (dd, J = 12,5, 6,6 Hz, 1H), 2,59 - 2,45 (m, 1 H), 2,45 - 2,11 (m , 4H), 2,11 - 1,82 (m, 2H), 1,56 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,35 - 1,21 (m, 1 H), 1,22 - 1,12 (m, 4H), 1,10 - 1,01 (m, 2H ), 0,99 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 0,91 (d, J = 6,7 Hz, 3H).
Exemplul ON
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoximetil)-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul se prepară conform metodei descrise pentru sinteza metil {(2S,3S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatului, substituind tert-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu tert-Butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 863 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,43 (d, J = 24,6 Hz, 1H), 8,01 (dt, J = 16,1, 8,0 Hz, 1H), 7,95 - 7,78 (m, 2H), 7,77 - 7,64 (m, 2H), 7,59 - 7,41 (m, 2H), 5,79 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,39 (dt, J = 46,2, 23,1 Hz, 1H), 5,27 - 5,07 (m, 3H), 4,85 - 4,72 (m, 1H), 4,42 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 4,31 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 19,7, 8,7 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 23.6, 13.3 Hz, 1H), 3,69 (d, J = 10,0 Hz, 5H), 3,60 (dd, J = 14,7, 7,8 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 3,17 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,99 - 2,91 (m, 1H), 2,85 (s, 1H), 2,73 (dd, J = 12,5, 6,4 Hz, 1H), 2,62 - 2,48 (m, 1 H), 2,45 - 2,14 (m, 3H), 2,10 - 1,91 (m, 2H), 1,83 (s, 1H), 1,57 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,44 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 1,34 - 1,23 (m, 1 H), 1,20 - 0,96 (m, 5H), 0,90 (dt, J = 14,8, 6,7 Hz, 9H).
Exemplul OO
Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[(2R)-2-amino-2-fenilacetil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul se prepară conform metodei descrise pentru sinteza metil (S)-1-((2S,4S)-2-(2'-((2S,4S)-1-((R)-2-amino-2-fenilacetil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamatulu, substituind terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu (2S,4S)-terţ-butil 2-(2'-((2S,4S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-metilpirolidină-2-il)-1H,1'H-7,7'-binafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 811 [M+H]+.
Exemplul OP
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul se sintetizează conform protocolului descris pentru prepararea metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatului, substituind terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximethyl)pyrrolidine-1-carboxilatul. MS (ESI) m/z 886 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,02 - 7,85 (m, 2H), 7,85 - 7,68 (m, 2H), 7,58 (d, J = 21,5 Hz , 1H), 7,55 - 7,35 (m, 4H), 7,31 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 5,43 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 5,28 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 5,25 - 5,10 (m, 3H), 4,13 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 3,93 - 3,54 (m, 7H), 3,42 (qd, J = 9,5, 5,5 Hz, 2H), 3,34 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 3,28 (s, 3H), 3,19 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,00 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,74 - 2,46 (m, 3H), 2,44 - 2,15 (m , 2H), 2,12 - 1,86 (m, 2H), 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,29 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 1,15 - 1,01 (m, 1H), 0,98 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 0,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H).
Exemplul OQ
(2S,4S)-1-Terţ-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-4-etoxipirolidină-1,2-dicarboxilatul
La o suspensie de 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (2,50 g, 6,8 mmol) în MeCN (20 mL) se adaugă acid (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etoxipirolidină-2-carboxilic (2,68 g, 10,3 mmol) şi DIPEA (1,3 mL, 7,5 mmol). Amestecul reacţiei se încălzeşte cu agitare până la 50°C timp de 18 ore. Amestecul reacţiei se răceşte apoi până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Soluţia se spală cu HCl (1N) şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu EtOAc, iar straturile organice rezultate se combină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 15% până la 50% EtOAc/hexani) pentru a se obţine (2S,4S)-1-terţ-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8, 9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-etoxipirolidină-1,2-dicarboxilatul (2,08 g, 56%).
Terţ-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-1-terţ-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8 ,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 4-etoxipirolidină-1,2-dicarboxilat (2,08 g, 3,8 mmol) într-un amestec de toluen (30 mL) şi metoxietanol (4 mL) se adaugă acetat de amoniu (2,90 g, 37,7 mmol). Soluţia se încălzeşte cu agitare până la 80°C timp de 18 ore. Amestecul reacţiei se răceşte apoi până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Soluţia se spală cu soluţie salină, iar stratul apos rezultat se re-extrage cu EtOAc. Straturile organice rezultate se combină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 10% până la 75% EtOAc (g/5% MeOH)/hexani) pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilatul (0,99 g, 50%).
Terţ-butil (2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,4S)-2-(9-cloro-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilat (0,99 g, 1,9 mmol) în CH2Cl2 (18 mL) se adaugă MnO2 (4,52 g, 52,0 mmol). Suspensia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 18 ore. Amestecul reacţiei se filtrează prin celită, se spală cu CH2Cl2 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 10% până la 75% EtOAc (g/5% MeOH)/hexani) pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-(9-chloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilatul (0,71 g, 72%)
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de (2S,4S)-2-(9-chloro-1,11-dihdroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-carboxilat (0,46 g, 0,9 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (9,0 ml) şi MeOH (1,5 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 6,5 mL, 26,0 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 2 ore. Soluţia se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut în CH2Cl2 (10,0 mL) se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,17 g, 0,9 mmol), HATU (0,41 g, 1,1 mmol) şi DIPEA (0,5 mL, 2,9 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 48 ore şi se diluează cu CH2Cl2. Soluţia se spală cu soluţie apoasă de HCl (1N) şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu CH2Cl2 (de 2 ori). Straturile organice rezultate se combină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/hexani la 80% MeOH/EtOAc) pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,46 g, 90%).
Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul
La o soluţie de metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-chloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-etoxipirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamat (0,46 g, 0,84 mmol) în dioxan (8,5 mL) se adaugă 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolan) (0,32 g, 1,3 mmol), acetat de potasiu (0,25 g, 2,5 mmol), bis(dibenzilidenacetonă)paladiu (0,032 g, 0,035 mmol) şi 2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (Xphos, 0,032 g, 0,067 mmol). Soluţia rezultată se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la 90°C timp de 6 ore. Amestecul reacţiei se răceşte până la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc şi se filtrează prin celită. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/hexani la 90% MeOH/EtOAc) pentru a obţine metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul (0,41 g, 73%).
Terţ-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoxi-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamat (0,41 g, 0,61 mmol) într-un amestec de DME (6,1 mL) şi DMF (1,0 mL) se adaugă (S)-terţ-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-1-pirolidină-1-carboxilat (0,39 g, 1,2 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0,021 g, 0,018 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu (0,030 g, 0,041 mmol) şi carbonat de potasiu apos (2M, 1,0 mL, 2,0 mmol). Soluţia se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la 85°C timp de 6 ore. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Stratul organic se spală cu apă şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu EtOAc (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/hexani la 80% MeOH/EtOAc) pentru a obţine terţ-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoxi-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul (0,16 g, 33%).
Metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoxi-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidinî-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metiyl-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoxy-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,048 g, 0,062 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,0 mL) şi MeOH (0,25 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 0,47 mL, 1,9 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 3 ore, apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (1,5 mL) se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,012 g, 0,069 mmol), HATU (0,029 g, 0,076 mmol) şi DIPEA (0,050 mL, 0,28 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 1,5 oră. Amestecul reacţiei se diluează cu DMF şi se adaugă soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 4 picături). Soluţia se concentrează pentru a îndepărta CH2Cl2, iar reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 52% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatului de sodiu apos cu agitare a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(2S)-1-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoxi-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,008 g, 17%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,37 (s, 1H), 7,97 (s, 2H), 7,37 - 7,76 (m, 5H), 5,38 - 5,54 (m, 1 H), 5,18 (s, 2H), 5,14 - 5,16 (m, 1H), 4,21 - 4,31 (m, 4H), 3,87 - 4,09 (m, 1H), 3,79 - 3,85 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,46 - 3,55 (m, 2H), 2,30 - 2,35 (m, 3H), 2,04 - 2,06 (m, 3H), 1,11 (m, 2H), 0,95 (d, 3H), 0,88 (d, 3H). MS (ESI) m/z 836,02 [M+H]+.
Exemplul OR
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoxi-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-4-etoxi-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,11 g, 0,14 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (2,0 mL) şi MeOH (0,5 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 1,0 mL, 4,0 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 3 ore, apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (1,5 mL) se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,044 g, 0,21 mmol) şi DIPEA (0,075 mL, 0,43 mmol). Soluţia rezultată se răceşte până a -40-C şi se adaugă COMU (0,096 g, 0,22 mmol). Amestecul reacţiei se lasă să se încălzească lent până la 0°C, timp de 1 oră. Amestecul reacţiei se diluează cu DMF. Soluţia se concentrează pentru a îndepărta CH2Cl2, iar reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 55% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatului de sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-etoxi-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,022 g, 18%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (Amestec de rotomeri) 8,28 (d, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,52 - 7,70 (m, 3H), 7,28 - 7,38 (m, 5H), 6,90 - 6,96 (m, 2H), 5,44 - 5,47 (m, 1H), 5,31 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,16 - 4,48 (m, 3H), 3,81 - 3,19 (m, 1 H), 3,62 - 3,76 (m, 2H), 3,58 (s, 3H), 2,56 (s, 3H), 2,42 - 2,57 (m, 1H), 2,31 (m, 1H), 1,81 - 2,41 (m, 5H), 1,04 (t , 3H), 0,87 (d, 3H), 0,81 (d, 3H). MS (ESI) m/z 869,55 [M+H]+.
Exemplul OS
Metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metoxi-1-oxobutan-2-ilcarbamatul
La o soluţie de (S)-terţ-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (1,00 g, 3,2 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (30 mL) şi MeOH (5 mL) se adaugă HCl (în dioxan, 4 M, 11,5 mL, 46,0 mmol). Soluţia se agită la 40°C timp de 1 oră, se răceşte până la temperatura camerei şi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (30 mL) se adaugă acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (0,67 g, 3,5 mmol), HATU (1,47 g, 3,8 mmol) şi DIPEA (1,00 mL, 6,0 mmol), soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 24 de ore. Se adaugă DMF (2 mL) şi soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 1 mL) şi amestecul reacţiei se concentrează până la uscare sub presiune redusă. Materialul brut se diluează cu EtOAc şi se spală cu H2O şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu EtOAc. Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/CH2Cl2) pentru a se obţine metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H -imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metoxi-1-oxobutan-2-ilcarbamatul (1,2 g, 100%).
Exemplul OT
Terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-methi-L-treonil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de terţ-butil 4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]-nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (1,0 g, 3,2 mmol) într-un amestec de DMSO (2,0 mL) şi dioxani (2,0 ml) se adaugă metil (2S,3R)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2 -il) pirolidină-1-il)-3-metoxi-1-oxobutan-2-ilcarbamat (0,24 g, 0,62 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0,050 g, 0,043 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu (0,030 g, 0,041 mmol) şi carbonat de potasiu apos (2M, 0,65 mL, 1,3 mmol). Soluţia se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la 85°C timp de 6 ore. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Stratul organic se spală cu apă şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu EtOAc (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 20% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/hexani la 60% MeOH/EtOAc) pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-teonil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (0,20 g, 63%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]pirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,20 g, 0,26 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (3,0 mL) şi MeOH (0,5 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 2,0 mL, 8,0 mmol). Soluţia se agită la temperatura de 40°C timp de 1 oră, apoi se răceşte până la temperatura camerei şi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (3,0 mL) se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,081 g, 0,39 mmol) şi DIPEA (0.150 mL, 0,86 mmol). Soluţia rezultată se răceşte până la -40°C şi se adaugă COMU (0,180 g, 0,42 mmol). Amestecul reacţiei se lasă să se încălzească lent până la temperatura camerei timp de 30 min şi se menţine timp de 1,5 oră. Soluţia se diluează cu CH2Cl2 şi se spală cu bicarbonat apos. Stratul apos se re-extrage cu CH2Cl2. Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 50% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonat ului de sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S)-1-{(2S,3R)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,10 g, 46%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,34 (s, 1H), 7,92 - 7,97 (m, 2H), 7,33 - 7,69 (m, 10H), 5,53 (s, 1H), 5,36 - 5,39 (m, 1H), 5,15 - 5,21 (m, 3H), 4,44 (d, 1H), 3,86 - 3,93 (m, 2H), 3,68 - 3,75 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,46 - 3,57 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,19 (s, 3H), 2,47 - 2,60 (m, 3H), 2,22 - 2,36 (m, 4H), 1,99 - 2,08 (m, 3H), 1,15 (d, 3H). MS (ESI) m/z 886,19 [M+H]+.
Exemplul OU
Metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metoxi-1-oxobutan-2-il)carbamatul
La o soluţie de terţ-butil 4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,25 g, 0,41 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (4,0 mL) şi MeOH (1,0 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 3,0 mL, 12,0 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura de 40°C timp de 45 min. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei şi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut în CH2Cl2 (4,0 mL) se adaugă acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (0,08 g, 0,42 mmol), HATU (0,17 g, 0,45 mmol) şi DIPEA (0,4 mL, 2,3 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 48 de ore şi se diluează cu CH2Cl2. Soluţia se spală cu o soluţie salină. Stratul apos se re-extrage cu CH2Cl2 (de 2 ori). Straturile organice rezultate se combină, se usucă (Na2SO4) şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 30% până la 100% EtOAc(g/5% MeOH)/hexani la 80% MeOH/EtOAc) pentru a obţine metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metoxi-1-oxobutan-2-il)carbamatul (0,24 g, 92%).
Terţ-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metoxi-1-oxobutan-2-il)carbamat (0,15 g, 0,22 mmol) într-un amestec de DMSO (2,0 mL) şi dioxan (2,0 mL) se adaugă (S)-terţ-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-1-pirolidină-1-carboxilat (0,15 g, 0,40 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0,028 g, 0,024 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu (0,018 g, 0,025 mmol) şi carbonat de potasiu apos (2M, 0,35 mL, 0,70 mmol). Soluţia se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la temperatura de 90°C timp de 6 ore. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc. Stratul organic se spală cu apă şi soluţie salină. Straturile apoase se re-extrag cu EtOAc (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 55% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Soluţia rămasă se alcalinizează cu bicarbonat apos şi se extrage cu CH2Cl2 (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a obţine terţ-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul (0,013 g, 7%).
Metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metoxibutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (0,013 g, 0,016 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (0,5 mL) şi MeOH (0,02 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 0,20 mL, 0,80 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 1 oră, apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (0,5 ml) se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,006 g, 0,029 mmol) şi DIPEA (0,05 mL, 0,28 mmol). Soluţia rezultată se răceşte până la temperatura de 0°C şi se adaugă COMU (0,012 g, 0,028 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura de 0°C timp de 30 min. Soluţia se diluează cu DMF şi soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 2 picături) şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta CH2Cl2. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 55% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatuluide sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(1R)-2-[(2S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metoxibutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,008 g, 61%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,37 (m, 1H), 7,96 - 7,98 (m, 2H), 7,60 - 7,79 (m, 3H), 7,35 - 7,52 (m, 6H) , 6,98 - 7,03 (m, 1H), 5,52 (s, 1H), 5,26 - 5,39 (m, 2H), 5,20 (s, 2H), 4,44 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 3,64 (s, 6H), 3,50 - 3,57 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 3,29 - 3,44 (m, 3H), 3,20 (s, 3H), 2,68 - 2,72 (m, 2H), 2,57 - 2,62 (m , 2H), 1,89 - 2,15 (m, 6H), 1,18 (d, 3H). MS (ESI) m/z 885,73 [M+H]+.
Exemplul OV
Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-2-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul
Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-2-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul se prepară respectând procedura pentru obţinerea metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatului prin substituirea acidului (1S,3S,5S)-2-(tert-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxilic cu acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-etoxipirolidină-2-carboxilic.
Terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de metil [(2S)-1-{(2S,4S)-3-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-2-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamat (0,19 g, 0,30 mmol) într-un amestec de DMSO (2,0 mL) şi dioxan (2,0 mL) se adaugă (2S,4S)-terţ-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)-pirolidină-1-carboxilat (0,20 g, 0,55 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0,035 g, 0,030 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu (0,025 g, 0,034 mmol) şi carbonat de potasiu apos (2M, 0,5 mL, 1,0 mmol). Soluţia se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la temperatura de 90°C timp de 6 ore. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc şi se filtrează prin celită. Filtratul se concentrează sub presiune redusă şi se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 2% până la 25% CH2Cl2/MeOH) şi HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 55% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Stratul apos se alcalinizează cu bicarbonat de sodiu apos şi se extrage cu CH2Cl2 (de 3 ori). Straturile organice se combină, se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (0,025 g, 11%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabicyclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1S,3S,5S)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,025 g, 0,032 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,0 mL) şi MeOH (0,25 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 0,50 mL, 2,0 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 12 ore, apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (0,5 mL) se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,012 g, 0,057 mmol) şi DIPEA (0,05 mL, 0,28 mmol). Soluţia rezultată se răceşte până la temperatura de 0°C şi se adaugă COMU (0,023 g, 0,054 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura de 0°C timp de 30 min. Soluţia se diluează cu DMF şi soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 2 picături) şi se concentrează sub presiune redusă pentru a îndepărta CH2Cl2. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 55% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatului de sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1S,3S,5S)-2-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,015 g, 55%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,35 (m, 1H), 7,94 - 7,96 (m, 2H), 7,54 - 7,78 (m, 6H), 6,93 - 7,00 (m, 1H) , 5,72 (m, 1H), 5,46 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 5,14 - 5,16 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,63 (s, 3H ), 3,42 - 3,49 (m, 2H), 3,24 (s, 3H), 2,67 - 2,78 (m, 2H), 2,41 - 2,62 (m, 3H), 2,01 - 2,13 (m, 2H), 1,86 - 1,99 (m, 3H), 0,99 - 1,03 (m, 2H), 0,90 (d, 3H). MS (ESI) m/z 882,23 [M+H]+.
Exemplul OW
Terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de metil (1-{4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il)carbamat (0,47 g, 0,78 mmol) într-un amestec de DMSO (4,0 mL) şi dioxan (4,0 ml) se adaugă metil (2S,3S)-1-((2S,5S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamat (0,26 g, 0,72 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu (0,090 g, 0,078 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dicloropaladiu (0.061g, 0,083 mmol) şi carbonat de potasiu apos (2M, 1.2 mL, 2,4 mmol). Soluţia se degazează cu argon timp de 5 min şi se încălzeşte, cu agitare, până la temperatura de 90°C timp de 6 h.. Soluţia se răceşte până la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc şi se filtrează prin celită. Filtratul se concentrează sub presiune redusă şi se diluează cu EtOAc. Soluţia organică se spală cu apă şi soluţie salină, iar straturile apoase se re-extrag cu EtOAc. Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 10% până la 100% EtOAc(5% MeOH)/CH2Cl2) pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (0,25 g, 40%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,175 g, 0,21 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (2,0 mL) şi MeOH (0,5 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4m, 1,6 mL, 6,4 mmol). Soluţia se agită la temperatura de 40°C timp de 1 oră, se răceşte până la temperatura camerei şi apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (3,0 mL) se adaugă acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,070 g, 0,34 mmol) şi DIPEA (0,15 ml, 0,86 mmol). Soluţia rezultată se răceşte până la temperatura de -40°C şi se adaugă COMU (0,15 g, 0,35 mmol). Amestecul reacţiei se încălzeşte până la temperatura camerei timp de 30 min şi se diluează cu CH2Cl2. Soluţia se spală cu o soluţie saturată de bicarbonat de sodiu apos. Stratul apos se re-extrage cu CH2Cl2 şi straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 58% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatului de sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,079 g, 41%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,36 (m, 1H), 7,93 - 7,98 (m, 2H), 7,66 - 7,84 (m, 3H), 7,35 - 7,48 (m, 7H), 5,53 (s, 1H), 5,36 - 5,39 (m, 1H), 5,17 (d, 2H), 5,08 (m, 1H), 4,14 - 4,35 (m, 1H), 3,74 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 3,46 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,76 (m, 1H), 2,46 - 2,60 (m, 3H), 2,24 - 2,35 (m, 1H), 2,08 - 2,18 (m, 2H), 1,91 (m, 1H), 1,61 - 1,87 (m, 2H), 1,48 (d, 3H), 1,13 - 1,21 (m, 3H), 0,80 - 0,97 (m, 3H). MS (ESI) m/z 898,24 [M+H]+.
Exemplul OX
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-izoleucil]-5-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naito[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,075 g, 0,09 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,0 mL) şi MeOH (0,25 mL) se adaugă HCl (în dioxani, 4M, 0,7 mL, 2,8 mmol). Soluţia se agită la temperatura de 40°C timp de 1 oră, se răceşte până la temperatura camerei, apoi se concentrează până la uscare sub presiune redusă. La intermediarul brut suspendat în CH2Cl2 (3,0 mL) se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,020 g, 0,14 mmol), HATU (0,043 g, 0,11 mmol) şi se adaugă DIPEA (0,10 mL, 0,57 mmol). Amestecul reacţiei se agită la temperatura camerei timp de 2 ore. Amestecul reacţiei se diluează cu DMF şi soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 3 picături) şi CH2Cl2 se îndepărtează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin HPLC preparativă în fază inversă (de la 10% până la 58% MeCN/apă cu 0,1% TFA). Fracţiunile dorite se combină şi se concentrează sub presiune redusă, pentru a îndepărta produsele organice volatile. Adăugarea bicarbonatului de sodiu apos, cu agitare, a dus la precipitarea unui solid alb. Precipitatul se filtrează printr-un filtru cu membrană şi se spală cu apă. Prin uscarea sub presiune redusă se obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,031 g, 38%). 1H-RMN: 400 MHz, (MeOD) δ: (amestec de rotomeri) 8,34 (m, 1H), 7,91 - 9,97 (m, 2H), 7,50 - 7,81 (m, 3H), 7,35 - 7,38 (m, 2H), 5,17 - 5,26 (m, 3H), 5,08 (m, 1H), 4,14 - 4,33 (m, 4H), 3,64 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,51 - 3,59 (m, 3H), 3,37 (s, 3H), 2,71 (m, 1H), 2,55 - 2,59 (m, 1H), 2,23 - 2,33 (m, 1H), 1,92 - 2,10 (m, 2H), 1,77 - 1,89 (m, 1H), 1,60 (m, 1H), 1,48 (d, 1H), 1,11 - 1,22 (m, 2H), 0,81 - 0,98 (m, 12H). MS (ESI) m/z 864,27 [M+H]+.
Exemplul PF
terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Compusul din titlu este obţinut ca în exemplul LQ, dar utilizând acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic în locul acidului (S)-1-(terţ-butoxicarbonil)pirolidină-2-carboxilic.
2-[4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazolul
Terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxylatul (310 mg, 0,507 mmol) se tratează cu 2 ml de 1,25N HCl în etanol şi se agită la temperatura camerei timp de 2 ore, apoi la temperatura de 50°C timp de 2 ore. Amestecul reacţiei se concentrează sub presiune redusă pentru a se obţine un solid galben-închis, care se utilizează direct în etapa următoare.
Metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamatul
Un amestec de acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (107 mg, 0,608 mmol), HATU (231 mg, 0,608 mmol) şi 6 ml de 10% DIPEA în DMF se activează preliminar timp de 5 min, apoi se adaugă la sarea aminei din etapa menţionată mai sus şi se agită peste noapte. Amestecul reacţiei se porţionează între acetat de etil şi bicarbonat de sodiu saturat. Faza organică se concentrează şi se purifică prin cromatografie pe silicagel. (103 mg)
terţ-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
Compusul din titlu este obţinut ca în exemplul LQ, dar folosind metil [(2S)-1-{(2S,4S)-4-etoxi-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidiă-1-il}-3-metil-1-oxobutan-2-il]carbamat (103 mg, 0,154 mmol) în loc de terţ-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat şi metil (S)-1-((S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (58 mg, 0,154 mmol) în loc de metil (S)-1-((S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat. (50,0 mg)
Metil {1-[4-(metoximetil)-2-{9-[2-(4-metilpirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
terţ-butil 2-[5-(2-{1-[N-(metoxicarbonil)valil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (50 mg, 0,063 mmol) se tratează cu 2 ml de 1,25N HCl în etanol şi se încălzeşte până la temperatura de 60°C timp de 2 ore, apoi se concentrează sub presiune redusă şi se pompează uscat în vid înalt şi se utilizează direct în etapa următoare.
metil {1-[2-{9-[2-(1-{[(metoxicarbonil)amino](fenil)acetil}-4-metilpirolidină-2-il)-1H-imidazol-5-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il}-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Un amestec de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (13 mg, 0,063 mmol), COMU (30 mg, 0,069 mmol) în 0,500 mL de DMF şi DIPEA (0,033 mL, 0,189 mmol) se lasă să se activeze preliminar timp de 15 minute înainte de a fi adăugat la sarea amină solidă brută din etapa anterioară şi se agită peste noapte. Produsul se purifică prin HPLC în fază inversă. Produsul se transformă în bază liberă prin dizolvarea în 2 mL de 1:1 acetonitril:metanol şi trecerea printr-un cartuş preambalat de carbonat pe suport de polimer. Concentrarea şi uscarea oferă un praf alburiu. (23,3 mg).
MS (ESI) m/z 883,8 [M+H]+
'H-NMR (CD3CN) 8,176 (s, 1H), 7,778 (m, 1H), 7,596 - 7,521 (m, 4H), 7,455 - 7,347 (m, 6H), 7,218 (s, 1H), 5,482 (s , 1H), 5,310 (m, 1H), 5,192 (m, 1H), 4,999 (q, 2H, J = 14 Hz), 4,372 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 4,279 (m, 1H), 3,800 - 3,697 (m, 2H), 3,632 (s, 3H) 3,597 - 3,445 (m, 7H), 3,355 (s, 3H), 2,876 (m, 2H), 2,761 (m, 1H), 2,583 (m, 2H) , 2,220 (m, 2H), 1,764 (m, 1H), 1,070 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,020 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,898 (d, 3H, J = 6,4 Hz) .
Exemplul PG
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
Compusul din titlu este obţinut ca în exemplul LQ, dar folosind metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,4S)-4-metil-2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamat (307 mg, 0,481 mmol) în loc de terţ-butil 2-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat şi metil (S)-1-((S)-2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (181 mg, 0,481 mmol) în loc de metil (S)-1-((S)-2- (5-bromo-1H-imidazol-2-il) pirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat. (200,8 mg)
metil {(2S)-3-metil-1-[(2S,4S)-4-metil-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (200 mg, 0,262 mmol) se tratează cu 2 ml de 1,25N HCl în etanol şi se încălzeşte până la temperatura de 60°C timp de 2 ore, apoi se concentrează sub presiune redusă şi se pompează uscat în vid înalt şi se utilizează direct în etapa următoare.
metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
Un amestec de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (13 mg, 0,063 mmol), COMU (30 mg, 0,069 mmol) în 1,5 mL de DMF se lasă să se preactiveze timp de 5 minute înainte de a fi adăugat la o soluţie de amină din sarea precedentă în 1,5 mL de DMF şi DIPEA (0,137 mL, 0,786 mmol) şi se agită peste noapte. Produsul se purifică prin HPLC în fază inversă. Produsul se transformă în bază liberă prin dizolvarea în 2 mL de 1:1 acetonitril: metanol şi trecerea printr-un cartuş preambalat de carbonat pe suport de polimer. Concentrarea şi uscarea oferă un praf alburiu. (25,8 mg).
MS (ESI) m/z 853,8 [M+H]+.
'H-RMN (CD3CN) 8.164 (s, 1H), 7,781 (m, 1H), 7,609 (m, 2H), 7,535 (m, 2H), 7,433 - 7,305 (m, 6H), 7,229 (s, 1H ), 5,482 (s, 1H), 5,290 (m, 1H), 5,191 (m, 1H), 4,997 (m, 2H), 4,372 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 4,267 (m, 1H), 3,735 - 3,445 (m, 10H), 2,573 (m, 4H), 2,197 (m, 2H), 2,017 (m, 1H), 1,760 (m, 1H), 1,204 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,068 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 1,010 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 0,887 (d, 3H, J = 6,8 Hz).
Exemplul PH
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(benziloxi)carbonil]pirolidiă-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxlatul
Compusul din titlu este obţinut ca în exemplul OF (compusul terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat), dar folosind acid (S)-1-(benziloxicarbonil)pirolidină-2-carboxilic în loc de acid (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic în etapa 6.
terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S)-pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S)-1-[(benziloxi)carbonil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (724 mg, 0,96 mmol) şi 70 mg de 10%Pd/C în 20 mL de etanol se hidrogenează la 1atm peste noapte. Se adaugă suplimentar 10%Pd/C (300 mg) şi o porţiune de NaHCO3 solid şi se continuă hidrogenarea timp de 4 ore. Filtrarea prin celită şi concentrarea filtratului sub presiune redusă oferă produsul sub forma unui solid cafeniu-închis, 454 mg. Purificarea prin HPLC în fază inversă oferă 65 mg de produs purificat.
metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
Un amestec de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (22 mg, 0,105 mmol), COMU (45 mg, 0,069 mmol) şi terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S)-pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (65 mg, 0,105 mmol) în 1,5 mL de10% DIPEA în DMF se agită timp de 1,5 oră. Amestecul reacţiei se porţionează între acetat de etil şi bicarbonat de sodiu saturat. Faza organică se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Intermediarul brut se tratează cu 8 mL de 1,25N HCl în etanol, la temperatura de 50°C timp de 4 ore. Se adaugă bicarbonat de sodiu saturat şi se extrage baza liberă în diclormetan. (106 mg).
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}pyrrolidin-2-yl]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Un amestec de metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamat (55 mg, 0,077 mmol), acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (14 mg, 0,077 mmol), HATU (32 mg, 0,085 mmol) şi 0,4 mL de 10% DIPEA în DMF se agită la temperatura camerei timp de 1 oră. Produsul se purifică prin HPLC în fază inversă. Produsul se transformă în bază liberă prin dizolvarea în 2 ml de 1:1 acetonitril: metanol şi trecerea printr-un cartuş preambalat de carbonat pe suport de polimer. Eluentul se concentrează, apoi se preia în 1% TFA în 1:1 acetonitril: apă, se congelează şi seliofilizează pentru a obţine produsul sub formă de sare trifluoroacetat. (30,7 mg)
MS (ESI) m/z 869,9 [M+H]+.
metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
Un amestec de metil {(1R)-2-[(2S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamat (51 mg, 0,072 mmol), acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (14 mg, 0,072 mmol), HATU (30 mg, 0,079 mmol) şi 0,4 mL de 10% DIPEA în DMF se agită la temperatura camerei timp de 1 oră. Produsul se purifică prin HPLC în fază inversă. Produsul se transformă în bază liberă prin dizolvarea în 2 mL de 1:1 acetonitril: metanol şi trecerea printr-un cartuş preambalat de carbonat pe suport de polimer. Eluentul se concentrează, apoi se preia în 1% TFA în 1:1 acetonitril: apă, se congelează şi se liofilizează pentru a obţine produsul sub formă de sare de trifluoroacetat. (24 mg)
MS (ESI) m/z 885,8 [M+H]+;
'H-RMN (CD3CN) 7,635 (s, 1H), 7,434 (m, 3H), 7,330 (m, 4H), 7,233 (m, 1H), 7,164 (m, 1H), 6,983 (m, 1H), 6,747 (m, 2H), 6,127 (m, 1H), 5,584 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 5,431 (m, 1H), 5,145 (m, 1H), 4,729 (s, 2H), 4,442 (m , 1H), 4,029 (m, 2H), 3,838 (m, 1H), 3,662 - 3,534 (m, 2H), 3,572 (s, 3H) 3,552 (s, 3H), 3,444 - 3,310 (m, 3H), 3,240 (s, 3H), 3,225 (s, 3H), 2,618 (m, 1H), 2,464 (m, 1H), 2,304 (m, 1H), 2,129 (m, 1H), 2,041 (m, 1H), 1,899 ( m, 2H), 1,107 (d, 3H, J = 6,4 Hz).
Exemplul PI
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(benziloxi)carbonil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Compusul din titlu este obţinut ca în exemplul OF (compusul terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,4,5,11-tetrahidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat), dar folosind acid (2S,5S)-1-(benziloxicarbonil)-5-metilpirolidina-2-carboxilic în loc de acid (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic.
terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[(benziloxi)carbonil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (830 mg, 1,08 mmol) şi 100 mg de 10%Pd/C în 20 mL de etanol se hidrogenează la 1atm peste noapte. Suplimentar se adaugă 10%Pd/C (300 mg) şi o porţiune de NaHCO3 solid şi se continuă hidrogenarea timp de 4 ore. Filtrarea prin celită şi concentrarea filtratului sub presiune redusă oferă produsul sub forma unui solid cafeniu-închis, 722 mg. Purificarea prin HPLC în fază inversă oferă 100 mg de produs purificat.
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-treonil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Un amestec de terţ-butil (2S,4S)-4-(metoximetil)-2-(5-{2-[(2S,5S)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-carboxilat (101mg, 0,159 mmol), acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (30 mg, 0,159 mmol), HATU (61 mg, 0,159 mmol) şi 2 mL de 10% DIPEA în DMF se agită la temperatura camerei timp de 1,5 ore. Se adaugă bicarbonat de sodiu saturat şi produsul se extrage în diclormetan, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Acest produs brut se tratează cu 5 mL de 1,25N HCl în etanol, la temperatura de 50°C timp de 4 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Se adaugă bicarbonat de sodiu saturat şi produsul se extrage în diclormetan, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. (74,6 mg)
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S,3R)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Un amestec de metil {(2S,3R)-3-metoxi-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-1-oxobutan-2-il}carbamat (74,6 mg, 0,105 mmol), acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (18,5 mg, 0,105 mmol), HATU (44 mg, 0,116 mmol) şi 0.6 mL de 10% DIPEA în DMF se agită la temperatura camerei timp de 1 oră. Produsul se purifică prin HPLC în fază inversă. (48,1 mg) MS (ESI) m/z 866,1 [M+H]+.
Exemplul PJ
terţ-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(trifluorometil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Compusul din titlu se prepară ca în exemplul OF pentru compusul terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat utilizând acid (2S,4S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-4-(trifluorometil)pirolidină-2-carboxilic în loc de acid (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic şi acid (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină -2-carboxilic în loc de acid (2S,5S)-1-((S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic.
metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(trifluorometil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-4-(trifluorometil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (<0,412 mmol, brut din etapa anterioară) se tratează cu 6 mL de 4N HCl în dioxan, la temperatura camerei, peste noapte şi apoi la temperatura de 50°C timp de 1 oră. Se adaugă eter dietilic (20 mL) şi precipitatul de sare de clorhidrat se colectează prin filtrare în vid. (126 mg, 0,16 mmol). Acest material se combină cu acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (34 mg, 0,16 mmol), COMU (70 mg, 0,16 mmol) şi 1.6mL de 10% DIPEA în DMF. După 1 oră la temperatura camerei, amestecul se adaugă prin picurare în 25 mL de bicarbonat de sodiu saturat, cu agitare şi precipitatul rezultat se colectează prin filtrare în vid şi se spală cu 2 mL de apă. Produsul se purifică, apoi se re-purifică prin HPLC în fază inversă. (3,5 mg).
MS (ESI) m/z 938,1 [M+H]+.
Exemplul PK
(2S,4S)-terţ-butil 2-formil-4-metilpirolidină-1-carboxilatul:
Un amestec de acid (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-metilpirolidina-2-carboxilic (5,2 g, 22,7 mmol), clorhidrat de O,N-dimetilhidroxilamină (2,4 g, 24,9 mmol), HATU (10,4 g, 27,2 mmol) şi DIPEA (9,5 mL, 54,5 mmol) în 114 mL de DMF se agită la temperatura camerei peste noapte. Amestecul se extrage cu acetat de etil şi se spală cu bicarbonat saturat şi apă, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează. Acesta este apoi dizolvat în eter dietilic (100 mL) şi se spală cu apă pentru a îndepărta DMF rezidual, se usucă, se filtrează şi se concentrează până la un ulei galben pal (5,30 g, 19,5 mmol) de (2S,4S)-terţ-butil 2-(metoxi(metil)carbamoil)-4-metilpirolidină-1-carboxilat.
(2S,4S)-terţ-butil 2-(metoxi(metil)carbamoil)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (5,30 g, 19,5 mmol) se dizolvă în 120 ml de THF, se răceţte până la temperatura de -78°C şi se tratează cu hidrură de litiu şi aluminiu ( 1M în THF, 19,5 mL, 19,5mmol) prin picurare prin intermediul unei pâlnii adiţionale. După 1 oră, amestecul este adus la temperatura de 0°C şi menţinut la această temperatură timp de 2 ore. Acesta se stinge prin adăugarea prin picurare a 50 mL de soluţie de 3,0 g de KHSO4 în apă, se elimină din baia de gheaţă şi se agită 15 min, la temperatura camerei. Produsul se extrage cu trei porţiuni de 75 mL de acetat de etil şi se spală cu soluţie salină. Faza organică se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează pentru a obţine (2S,4S)-terţ-butil 2-formil-4-metilpirolidină-1-carboxilatul brut. (4,89 g)
(2S,4S)-terţ-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul:
La o soluţie de (2S,4S)-terţ-butil 2-formil-4-metilpirolidină-1-carboxilat (4,89 g, 22,9 mmol), hidroxid de amoniu (17 mL) şi apă (17 mL) se adaugă, prin picurare, glioxal (40 % în apă, 14,6 mL, 128 mmol) şi amestecul rezultat se agită la temperatura camerei peste noapte. Se adaugă bicarbonat de sodiu saturat (100 mL) şi amestecul se extrage cu patru porţiuni de 75 mL de diclormetan. Faza organică se spală cu apă, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează, apoi se purifică prin cromatografie pe silicagel pentru a obţine un total de 3,76 g de produs.
(2S,4S)-terţ-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul:
Un amestec de (2S,4S)-terţ-butil 2-(1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (1,0 g, 3,97 mmol), iod (2,22 g, 8,75 mmol) şi carbonat de sodiu (1,3 g, 12,31 mmol) în 20 mL de dioxan şi 13,25 mL apă se acoperă în folie şi se agită la temperatura camerei peste noapte. Amestecul se diluează cu acetat de etil şi se tratează cu 10% de tiosulfat de sodiu (5 mL) şi se agită timp de 10 min. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi faza apoasă se re-extrage cu acetat de etil. Fazele organice combinate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează pentru a se obţine (2S,4S)-terţ-butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilatul brut (2,25 g) ca un solid galben pal.
O soluţie de (2S,4S)-terţ-butil 2-(4,5-diiodo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (2,25 g, 4,4 mmol) în 18 mL de etanol şi 18 mL de apă se tratează cu sulfit de sodiu (5,59 g, 44,4 mmol) şi se încălzeşte până la temperatura de 90°C peste noapte. Amestecul se porţionează între acetat de etil şi apă. Faza apoasă se extrage cu mai mult acetat de etil, iar faza organică combinată se spală cu soluţie salină, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează, se concentrează şi se purifică prin cromatografie pe silicagel pentru a obţine 766 mg de (2S,4S)-terţ-butil 2-(5 -iod-1 H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat.
Exemplul PL
(2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terţ-butil hexahidrociclopenta[b]pirol-1,2(2H)-dicarboxilatul
La o soluţie de (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terţ-butil hexahidrociclopenta[b]pirol-1,2(2H)-dicarboxilat disponibil în comerţ (4,70 g, 16,68 mmol) în clorură de metilen (42 mL) se adaugă Di-terţ-butil dicarbonat (7,28 g, 33,36 mmol), N, N-diizopropiletilamină (5,82 mL, 33,36 mmol) şi 4 - (Dimetilamino)piridină (0,20 g, 1,67 mmol). Soluţia se agită în aer timp de 16 ore. După terminare, amestecul reacţiei se concentrează în vid, se diluază cu acetat de etil şi se spală cu soluţie de 1N HCl. Straturile apoase se re-extrag de două ori cu acetat de etil, iar straturile organice combinate se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel (5-40% acetat de etil în hexani) pentru a se obţine (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terţ-butil hexahidrociclopenta[b]pirol-1,2(2H)-dicarboxilatul care se utilizează fără purificare ulterioară. MS (ESI) m/z 368,47 [M+Na]+.
Acidul (2S,3aS,6aS)-1-(terţ-butoxicarbonil)octahidrociclopenta[b]pirol-2-carboxilic
Într-un balon cu fund rotund de 250 mL prevăzut cu un beţişor de amestecare magnetică şi (2S,3aS,6aS)-2-benzil 1-terţ-butil hexahidrociclopenta[b]pirol-1,2(2H)-dicarboxilat (5,76 g, 16,68 mmol) se adaugă 10% de paladiu pe carbon (1,77 g). Peste amestecul reacţiei se toarnă etanol şi amestecul reacţiei se evacuează şi se spală cu hidrogen gazos de trei ori. Suspensia se agită la temperatura camerei în atmosferă de hidrogen timp de 24 de ore. După terminare, amestecul reacţiei se filtrează prin celită şi se concentrează pentru a se obţine acidul (2S,3aS,6aS)-1-(terţ-butoxicarbonil)octahydrocyclopenta[b]pirol-2-carboxilic (4,45g, > 99%). MS (ESI) m/z 256,21 [M+H]+.
Exemplul PM
terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Acest compus se prepară tîntr-un mod analog cu terţ-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidin-2-il}-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (2S,3aS,6aS)-1-(terţ-butoxicarbonil)octahidrociclopenta[b]pirol-2-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromen-8(9H)-onei. Reacţiile în sinteza terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-yl]pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidiă-2-il}-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatului. MS (ESI) m/z 774,1 [M+H]+.
Exemplul PN
metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naito[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-vali]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,128 g, 0,165 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,6 mL) şi MeOH (0,33 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 1,24 mL, 4,9 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 1,5 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (1,6 mL). Acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,052 g, 0,25 mmol) şi DIPEA (0,087 mL, 0,496 mmol) se adaugă apoi la soluţie. Amestecul reacţiei se răceşte până la temperatura de -40°C (temperatura externă, MeCN/CO2 (s) baie). Apoi se adaugă COMU (0,113 g, 0,265 mmol) şi soluţia obţinută se lasă să se încălzească până la temperatura de 0°C, timp de 1,5 ore. După finalizarea prin LCMS, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-47% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi fracţiunile dorite se combină. Soluţia se concentrează până ce rămâne stratul apos şi se adaugă lent bicarbonat apos (saturat) până la soluţia de bază. Suspensia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se filtrează. Solidul rezultat este uscat în vid pentru a se obţine metil {(1R)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,068 g, 48%).
MS (ESI) m/z 865,7 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,44 - 8,30 (m, 1H), 8,02 - 7,82 (m, 2H), 7,81 - 7,58 (m, 4H), 7,50 - 7,11 (m, 6H), 7,09 - 6,83 (m, 2H), 5,72 - 5,45 (m, 2H), 5,41 (s, 1H), 5,34 - 5,28 (m, 1H), 5,22 (s, 3H), 4,69 - 4,64 (m, 1H), 4,26 - 4,19 (m , 1H), 4,03 - 3,98 (m, 1H), 3,96 - 3,91 (m, 1H), 3,66 (d, 4H), 2,98 - 2,91 (m, 1H), 2,88 - 2,83 (m, 1H), 2,58 - 2,48 (m, 1H), 2,27 - 2,12 (m, 4H), 2,11 - 2,00 (m, 3H), 2,00 - 1,89 (m, 2H), 1,77 - 1,72 (m, 1H), 1,31 - 1,04 (m, 3H) , 0,93 (d, 6H).
ExemplulPO
metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilat (0,030 g, 0,039 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (0,39 mL) şi MeOH (0,078 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 0,29 mL, 1,16 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 1,5 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (0,39 mL). Apoi la soluţie se adaugă acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,007 g, 0,043 mmol) şi DIPEA (0,020 mL, 0,116 mmol). Se adaugă HATU (0,018 g, 0,047 mmol) şi soluţia se lasă să se agite la temperatura camerei. După terminare, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-47% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi fracţiunile dorite se combină şi se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidin-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,010g, 31%). MS (ESI) m/z 832,2 [M+H]+.
Exemplul PP
metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu metil {(2S)-1-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul substituind acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-2-(tetrahidro-2H-piran-4-il)acetic cu acidul (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic pentru a obţine metil [(1S)-2-[2-(5-{2-[(2S,3aS,6aS)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}octahidrociclopenta[b]pirol-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil]carbamatul (0,039, 56%). MS (ESI) m/z 874,34 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,58 (s, 2H), 8,26 - 8,08 (m, 2H), 7,96 - 7,75 (m, 4H), 7,65 - 7,54 (m, 5H), 5,36 - 5,11 (m, 4H ), 4,34 - 4,04 (m, 4H), 3,97 - 3,79 (m, 4H), 3,65 (s, 4H), 3,53 - 3,44 (m, 2H), 2,68 - 2,47 (m, 4H), 2,32 - 2,02 (m , 7H), 1,95 - 1,82 (m, 3H), 1,77 - 1,54 (m, 4H), 1,49 - 1,24 (m, 5H), 1,10 - 0,99 (m, 3H), 0,92 - 0,85 (m, 4H).
Exemplul PQ
terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromen-8(9H)-onei. Reacţiile în sinteza terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil 2-[5-(2-{(2S,3aS,6aS)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]octahidrociclopenta[b]pirol-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatului. MS (ESI) m/z 815,04 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,58 (s, 1H), 8,18 (d, 1H), 7,96 - 7,85 (m, 3H), 7,70 (s, 1H), 7,60 (d, 1H), 7,50 - 7,38 ( m, 4H), 7,10 (s, 1H), 6,46 (t, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,39 - 5,36 (m, 1H), 5,31 - 5,28 (m, 2H), 4,43 - 4,36 (m, 1H), 4,24 (d, 1H), 4,13 - 4,02 (m, 3H), 3,75 - 3,62 (m, 7H), 3,51 - 3,47 (m, 1H), 3,18 - 3,11 (m, 2H), 2,93 - 2,83 ( m, 2H), 2,75 - 2,69 (m, 1H), 2,47 - 2,36 (m, 2H), 2,23 - 2,09 (m, 3H), 2,01 - 1,94 (m, 2H), 0,87 (dd, 6H).
Exemplul PR
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu terţ-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (1R,5R)-2-(terţ-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[3.1.0]hexan-3-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-6H-nafto[2,3-c]cromen-8 9H)-onei, şi substituind (2S,4S)-terţ-butil 2-(5-iodo-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul cu legătura Suzuki-Miyara. Reacţiile în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil (2R)-2-[5-(2-{(2S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]pirolidină-2-il}-3,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]pirolidină-1-carboxilatului. MS (ESI) m/z 791,0 [M+H]+.
metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1R,3S,5R)-2-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(1R,3S,5R)-2-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,060 g, 0,076 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (0,76 mL) şi MeOH (0,15 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 0,570 mL, 2,28 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (0,76 mL). Acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (0,024 g, 0,114 mmol) şi DIPEA (0,040 mL, 0,228 mmol) se adaugă apoi la soluţie. Amestecul reacţiei se răceşte până la temperatura de -40°C (temperatura externă, MeCN/CO2 (s) baie). Apoi se adaugă COMU (0,052 g, 0,122 mmol) şi soluţia obţinută se lasă să se încălzească până la temperatura de 0°C, timp de 1,5 ore. După finalizarea prin LCMS, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-45% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(1R,3S,5R)-2-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoyl}-2-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (0,028 g, 42%). MS (ESI) m/z 881,8 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,45 - 8,33 (m, 1H), 8,02 - 7,94 (m, 1H), 7,91 - 7,75 (m, 2H), 7,72 - 7,67 (m, 1H), 7,61 (s, 1H ), 7,59 - 7,34 (m, 6H), 7,09 - 6,91 (m, 2H), 5,62 - 5,38 (m, 2H), 5,29 (t, 1H), 5,24 - 5,09 (m, 3H), 4,61 (d, 1H ), 4,37 - 4,26 (m, 1H), 3,83 - 3,73 (m, 1H), 3,69 - 3,56 (m, 6H), 3,50 - 3,40 (m, 1H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,99 (s , 1H), 2,83 (d, 1H), 2,63 - 2,50 (m, 2H), 2,47 - 2,34 (m, 2H), 2,29 - 2,13 (m, 2H), 2,10 - 1,95 (m, 2H), 1,37 - 1,23 (m, 3H), 1,19 - 1,10 (m, 1H), 1,03 - 0,78 (m, 7H).
Exemplul PS
terţ-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-1-carboxilatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onei şi substituind acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic pentru altă alchilare în secvenţă. Reacţiile în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului. MS (ESI) m/z 772,03 [M+H]+.
metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La o soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-1-carboxilat (0,081 g, 0,105 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,05 mL) şi MeOH (0,210 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 0,788 mL, 3,15 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (1,05 mL). Acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (0,040 g, 0,231 mmol) şi DIPEA (0,055 mL, 0,315 mmol) se adaugă apoi la soluţie. Se adaugă HATU (0,176 g, 0,462 mmol) şi soluţia se lasă să se agite la temperatura camerei. După terminare, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-45% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi fracţiunile dorite se combină. Soluţia se concentrează până ce rămâne stratul apos şi se adaugă lent bicarbonat apos (saturat) până la formarea soluţiei de bază. Suspensia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se filtrează. Solidul rezultat este uscat în vid pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,025 g, 27%). MS (ESI) m/z 886,1 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,49 - 8,25 (m, 2H), 8,08 - 7,82 (m, 2H), 7,79 - 7,27 (m, 5H), 6,45 (t, 1H), 5,36 - 5,26 (m, 1H ), 5,22 - 5,07 (m, 3H), 4,78 - 4,49 (m, 2H), 4,45 - 4,19 (m, 3H), 4,16 - 4,05 (m, 2H), 3,99 - 3,92 (m, 1H), 3,85 - 3,71 (m, 2H), 3,66 (s, 3H), 2,88 - 2,70 (m, 2H), 2,69 - 2,49 (m, 2H), 2,42 - 2,26 (m, 2H), 2,23 - 2,10 (m, 2H), 2,07 - 1,87 (m, 3H), 1,51 (d, 2H), 1,34 - 1,20 (m, 2H), 1,17 - 0,76 (m, 12H).
Exemplul PT
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onei şi substituind acidul (2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic pentru altă alchilare în secvenţă. Reacţiile în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului. MS (ESI) m/z 772,31 [M+H]+.
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La terţ-butil (2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-1-carboxilat (0,057 g, 0,074 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (0.739 ml) şi MeOH (0.148 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 0,555 mL, 2.218 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (0.739 mL). Acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-methylbutanoic (0,028 g, 0,163 mmol) şi DIPEA (0,039 mL, 0,222 mmol) se adaugă apoi la soluţie. Se adaugă HATU (0,124 g, 0,325 mmol) şi soluţia se lasă să se agite la temperatura camerei. După terminare, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-46% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi fracţiunile dorite se combină şi se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-2-(5-{2-[(2S,5S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-5-metilpirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,011 g, 17%). MS (ESI) m/z 886,1 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,67 - 8,51 (m, 1H), 8 26 - 8,11 (m, 1H), 8,04 - 7,75 (m, 3H), 7,69 - 7,58 (m, 2H), 6,43 (t, 1H ), 5,41 - 5,15 (m, 4H), 4,48 - 3,90 (m, 6H), 3,82 (s, 1H), 3,71 - 3,57 (m, 5H), 3,53 - 3,43 (m, 1H), 3,20 - 3,01 (m, 2H), 2,92 - 2,63 (m, 3H), 2,60 - 2,25 (m, 4H), 2,15 - 1,86 (m, 4H), 1,57 (d, 3H), 1,24 (d, 2H), 1,07 (dd, 2H ), 0,98 - 0,77 (m, 9H).
Exemplul PU
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
Acest compus se prepară într-un mod analog cu terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul substituind acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-(metoximetil)pirolidină-2-carboxilic pentru alchilarea iniţială a 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onei şi substituind acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic pentru altă alchilare în secvenţă. Reacţiile în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatului dau randamente de produse similare ca în sinteza terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilateului. MS (ESI) m/z 801,1 [M+H]+.
metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
La terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,4S)-1- (terţ-butoxicarbonil)-4-[(difluorometoxi)metil]pirolidină-2-il}-1,11 dihydroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (0,092 g, 0,115 mmol) într-un amestec de CH2Cl2 (1,15 mL) şi MeOH (0,230 mL) se adaugă HCl (4M în 1,4-dioxan, 0,862 mL, 3,446 mmol). Soluţia se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se concentrează până la uscare.
Intermediarul se dizolvă în CH2Cl2 (1,149 mL). Acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-methylbutanoic (0,044 g, 0,253 mmol) şi DIPEA (0.060 mL, 0,345 mmol) se adaugă apoi la soluţie. Se adaugă HATU (0,192 g, 0,505 mmol) şi soluţia se lasă să se agite la temperatura camerei. După terminare, soluţia se diluează cu DMF şi se concentrează. Produsul brut se purifică prin HPLC preparativă (coloană Gemeni, 10-45% MeCN/H2O cu 0,1% TFA) şi fracţiunile dorite se combină. Soluţia se concentrează până ce rămâne stratul apos şi se adaugă lent bicarbonat apos (saturat) până la formarea soluţeiia de bază. Suspensia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 2 ore şi se filtrează. Solidul rezultat este uscat în vid pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-4-[(difluorometoxi)metil]-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (0,042 g, 40%). MS (ESI) m/z 916,30 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, cd3od) δ 8,55 - 8,25 (m, 1H), 8,15 - 7,85 (m, 2H), 7,83 - 7,26 (m, 5H), 6,44 (t, 1H), 5,37 - 5,02 (m, 4H), 4,47 - 4,35 (m, 1H), 4,33 - 4,18 (m, 3H), 4,15 - 3,90 (m, 3H), 3,81 - 3,45 (m, 11H), 3,39 (s, 3H), 2,90 - 2,27 (m , 5H), 2,22 - 1,92 (m, 4H), 1,12 - 0,73 (m, 13H).
Exemplul PX
(2S,4S)-1-terţ-butil 2-metil 4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul
Un balon cu fund rotund de 100 mL se încărcă cu (2S,4S)-1-terţ-butil 2-metil 4-(hidroximetil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (3,33 g, 12,84 mmol), CuI (0,489 g, 2,56 mmol) şi acetonitril anhidru (57,1 mL). Amestecul reacţiei se încălzeşte până la temperatura de 45°C (ext. baie de ulei). Acid 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetic (2.655 mL, 25,68 mmol) se adaugă la temperatura de 45°C timp de 30 min prin intermediul unei pompe cu seringă. Amestecul reacţiei se încălzeşte timp de 30 min. După finalizarea monitorizată prin TLC, amestecul reacţiei se răceşte până la temperatura camerei şi se concentrează în vid. Reziduul brut se diluează în EtOAc şi se spală cu bicarbonat de sodiu (apos). Stratul de bicarbonat se re-extrage de două ori cu acetat de etil. Straturile organice combinate se spală cu soluţie salină, se usucă pe sulfat de sodiu, se filtrează şi se concentrează. Reziduul rezultat se purifică prin cromatografie pe silicagel (de la 10 până la 40% EtOAc/hexani) pentru a se obţine (2S,4S)-1-terţ-butil 2-metil 4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-1,2-dicarboxilatul (2,41 g, 61%). MS (ESI) m/z 210,21 [M+H - Boc]+.
Acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic
La o soluţie de (2S,4S)-1-terţ-butil 2-metil 4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-1,2-dicarboxilat (2,41 g, 7,79 mmol) într-un amestec de THF (39 mL) şi MeOH (15,6 mL) se adaugă soluţie apoasă de LiOH (2,5 M, 15,6 mL, 38,9 mmol). Soluţia rezultată se agită la temperatura camerei timp de 1 oră. După finalizare prin TLC amestecul reacţiei se acidulează cu soluţie apoasă de HCl (1N). Produsul dorit se extrage cu CH2Cl2 (de 3 ori). Straturile organice combinate se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează pentru a obţine acidul (2S,4S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-4-((difluorometoxi)metil)pirolidină-2-carboxilic (2,4 g, 99%). MS (ESI) m/z 294,96 [M - H]-. 1H-RMN: 400 MHz, (acetonă-d6) δ (amestec de rotomeri): 6,50 (t, 1H), 4,36 - 4,17 (m, 1H), 3,93 (d, 2H), 3,77 - 3,67 (m, 1H), 3,63 - 3,59 (m, 1H), 3,26 - 3,12 (m, 1H), 2,72 - 2,41 (m, 2H), 1,89 - 1,73 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
Exemplul PY
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (150 mg, 0,19 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se agită peste noapte, apoi se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DMF (2 mL). La această soluţie se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (52 mg, 0,25 mmol) şi COMU (90 mg, 0,21 mmol). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (0,099 mL, 0,57 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul eacţiei se stinge cu 1N HCl (0.200 mL) şi se purifică prin HPLC. După liofilizare, sarea de TFA se dizolvă în acetat de etil şi se spală cu soluţie saturată de NaHCO3. Faza organică se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Baza liberă se dizolvă apoi în MeCN/H2O şi se liofilizează pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (65 mg, 39%). LCMS-ESI+: calculat pentru C49H54N8O8: 882,4; [M+1]+ înregistrat: 884,1. Punctele diagnostice în RMN 'H-RMN (CD3OD): 8,28 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,91 - 7,01 (m, 10H), 3,62 (s, 3H), 3,34 ( s, 3H), 3,23 (s, 3H), 1,56 (d, 3H), 1,03 (d, 3H), 0,94 (d, 3H).
Exemplul PY-1
9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
La 3-(2-brom-1-hidroxietil)-10,1-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (20,3 g, 54,4 mmol) în DCM (365 mL) se adaugă MeOH (22 mL) şi tribromură de piridiniu (18,24 g, 57,0 mmol). După 2 ore, se adaugă apă (100 mL) şi după o agitare scurtă straturile se separă şi se colectează stratul organic inferior. Stratul organic se spală apoi cu 1M HCl (100 mL) şi se colectează stratul organic inferior care conţine 9-bromo-3-(2-bromo-1-hidroxietil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă. 400 MHz 1H RMN (CDCl3) 7,75 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,42 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,24 (s, 1H ), 5,13 (s, 2H), 4,99 - 4,96 (m, 1H), 4,73 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 3,69 - 3,66 (m, 1H), 3,58 - 3,53 (m, 1H), 3,35 - 3,27 (m, 1H), 2,96 - 2,90 (m, 1H), 2,58 - 2,44 (m, 2H), C-OH nu s-a observat.
La 9-bromo-3-(2-bromo-1-hidroxietil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (aprox. 54,4 mmol) în DCM (365 mL) se adaugă bicarbonat de sodiu (5,45 g), bromură de sodiu (6,14 g), TEMPO (16,55 mg) şi apă (60 mL). Soluţia se răceşte între 0-5°C şi se adaugă înălbitor de 6% (91,5 mL). După 1 oră se adaugă alcool izopropilic (20 mL) şi amestecul reacţiei se încălzeşte până la temperatura camerei. Se stopează agitaţia, straturile se separă, apoi se colectează şi se concentrează stratul organic inferior, eliminând aproximativ 345 g de solvent. Suspensia se filtrează şi reziduul se spală cu 50 mL de apă şi apoi cu 50 ml de DCM (pre-răcit până la temperatura de 5°C). Produsele solide se colectează şi se usucă în vid, pentru a obţine 9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (18,6 g, cu un randament de 76%). 400 MHz 1H RMN (CDCl3) δ 8,03 - 8,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37 - 3,29 (m, 1H), 2,99 - 2,92 (m, 1H), 2,59 - 2,46 ( m, 2H); 100 MHz 13C RMN (CDCl3) δ 190,4, 189,6, 154,2, 136,6, 134,1, 133,9, 132,9, 131,8, 129,3, 127,2, 125,6, 124,2, 123,3, 117,0, 68,1, 49,9, 31,8, 30,4, 25,5 .
Exemplul PY-2
9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
Un amestec de 3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (2,58 g, 6,95 mmol), tribromură de piridiniu (2,56 g, 8,0 mmol) , diclormetan (22 mL) şi metanol (2,5 mL) se agită la temperatura de aproximativ 20°C timp de 3 ore pentru a obţine un precipitat. Produsul precipitat se filtrează, se spală cu diclormetan (10 mL) şi se usucă într-un cuptor cu vid la temperatura de 40°C pentru a obţine 9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (2,62 g, cu un randament de 84%). 400 MHz 1H RMN (CDCl3) δ 8,03 - 8,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37 - 3,29 (m, 1H), 2,99 - 2,92 (m, 1H), 2,59 - 2,46 ( m, 2H).
Exemplul PY-3
3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
Un balon de 300 mL prevăzut cu un beţişor de amestecare magnetică suspendat şi un condensator de reflux într-o atmosferă de azot se încarcă cu 3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (10,0 g , 35,12 mmol), pulbere de fosfat tripotasiu anhidru (22,4 g, 105,4 mmol), XPhos (1,34 g, 2,81 mmol) şi PdCl2(MeCN)2 (364 mg, 1,40 mmol). Se adaugă acetonitril (140 mL), urmat de TMSacetilenă (18 mL, 141 mmol). Amestecul se încălzeşte până la temperatura de 65°C. După 6 ore, reacţia se consideră completă, iar amestecul se răceşte până la temperatura de 20°C. Amestecul se filtrează printr-o pâlnie frită, iar precipitatul de pe filtru se spală cu acetonitril. Filtratul se concentrează până la circa 150 mL sub presiune redusă şi se extrage cu heptan (50 mL, 3×100 mL). N-acetilcisteină (15 g) se adaugă la faza acetonitrilică, iar amestecul se agită timp de 5 ore la temperatura de 45°C. Amestecul se răceşte lpână la temperatura ambiantă, se filtrează printr-o pâlnie frită, iar precipitatul de pe filtru se spală cu acetonitril. Filtratul se concentrează până la circa 120 mL sub presiune redusă. Se adaugă apă (120 mL) şi amestecul se agită timp de 40 min la temperatura de 45°C şi apoi se răceşte până la temperatura ambiantă. După 30 min, amestecul se filtrează printr-o pâlnie frită pentru a obţine 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g] romen-8(9H)-ona (4,07 g, cu un randament de 33,4%), sub forma unui solid galben: 400 MHz 1H RMN (CDCl3) δ 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,1, 1,4 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 5,06 (s, 2H), 2,95 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,67 - 2,59 (m, 2H), 2,18 - 2,08 (m, 2H), 0,26 (s, 9H).
3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
Un balon de 20 mL cu un beţişor de amestecare magnetică se încarcă cu 3-((trimetilsilil)etinil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (850 mg, 2,44 mmol) şi acid formic (9,8 mL). Soluţia se încălzeşte până la temperatura de 65°C. După 3 ore, reacţia se consideră completă. Amestecul se concentrează sub presiune redusă; reziduul rezultat se preia în CH2Cl2 şi se încarcă pe un cartridge preambalat cu 25 g de silicagel. Produsul se purifică prin cromatografie pe un cartridge preambalat cu 80 g de silicagel eluând cu un gradient de solvent de la 5% la 85% EtOAc/hexani. Fracţiunile, conţinând produsul, se combină şi se concentrează pentru a obţine 3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona (616 mg, 86%): 400 MHz 1H RMN (CDCl3 ) δ 8,00 - 7,94 (m, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,64 (s, 2H), 5,16 (s, 2H), 2,98 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,69 - 2,64 (m, 2H), 2,63 (s, 3H), 2,21 - 2,09 (m, 2H).
9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-ona
Un balon de 20 mL cu un beţişor de amestecare magnetică se încarcă cu 3-acetil-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (100 mg, 0,366 mmol), 9:1 CH2Cl2/MeOH (3,4 mL) şi tribromură de piridiniu (246 mg, 0,769 mmol). Soluţia se încălzeşte până la temperatura de 5°C. După 30 min, reacţia se consideră completă. Amestecul se răceşte până la temperatura ambiantă, se diluează cu EtOAc (50 mL) şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de Na2S2O3 (20 mL), soluţie apoasă de NaHCO3 de 2% (20 mL), apă (20 ml) şi soluţie salină (10 mL). Faza organică se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă rezultând în 9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (68 mg, 41%): 400 MHz 1H RMN (CDCl3) δ 8,03 - 8,01 (m, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,67 (s, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,74 (dd, J = 4,1, 4,1 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,37 - 3,29 (m, 1H), 2,99 - 2,92 (m , 1H), 2,59 - 2,46 (m, 2H).
Exemplul PY-4
(2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-tert-butil 5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul
9-bromo-3-(2-bromacetil)-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8 (9H)-ona (1,43 g, 3,17 mmol) se tratează cu o soluţie de acid (2S,5S)-1-(tert-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (800 mg, 3,49 mmol) în diclormetan (14 mL) şi K2CO3 (658 mg, 1,18 mmol). Amestecul reacţiei agitat se agită la temperatura camerei şi se diluează cu CH2Cl2 şi se extrage de 3 ori. Faza organică se spală cu soluţie salină, apoi se usucă pe MgSO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă pentru a obţine ((2S,5S)-2-(2-(9-bromo-8-oxo-8, 9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-3-il)-2-oxoetil) 1-terţ-butil-5 metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (1,61 g, 84%).
Această sinteză poate fi folosit pentru a prepara o varietate de compuşi descrişi aici, inclusiv compusul exemplificat în PY.
Exemplul PZ
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (100 mg, 0,13 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (34 mg, 0,20 mmol), HATU (54 mg, 0,14 mmol) şi DMF (1,3 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,043 mL , 0,39 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0,100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (91 mg, 82%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C46H56N8O8: 848,4; [M+1]+ înregistrat: 850,2.
Exemplul QA
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
Terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (119 mg, 0,15 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (43 mg, 0,23 mmol), HATU (63 mg, 0,17 mmol) şi DMF (2 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,050 mL, 0,45 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3S)-3-metoxi-2-[(metoxicarbonil)amino]butanoil}-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (76 mg, 59%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C46H56N8O9: 864,4; [M+1]+ înregistrat: 866,1.
Exemplul QB
Metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidiă-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamatul
(2S,4S)-terţ-butil 2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-carboxilat (100 mg, 0,13 mmol) în 1,25 N HCţ în EtOH (15 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic (625 mg, 3,30 mmol), HATU (1,05 g, 2,77 mmol) şi DMF (10 mL), apoi se adaugă prin picurare DIPEA (1,33 mL, 7,62 mmol). După 2 ore, amestecul se toarnă în soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi apoi se extrage cu acetat de etil. Faza organică se spală succesiv cu soluţie apoasă de LiCl de 5% şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 30 până la 90% de 10% MeOH/EtOAc la hexani) pentru a se obţine metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamatul (932 mg, 81%).
Terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul
(2S,4S)-terţ-butil 4-(metoximetil)-2-(9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-pirolidină-1-carboxilat (856 mg, 1,4 mmol), metil (2S,3S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxopentan-2-ilcarbamat (932 mg, 2,1 mmol), Pd(PPh3)4 (162 mg, 0,14 mmol), PdCl2(dppf)2 (102 mg, 0,14 mmol) şi K2CO3 (2M în H2O, 2,31 mL, 4,62 mmol) se combină în DMSO (8 mL) şi dioxani (8 mL). Amestecul se degazează cu barbotarea Argonului timp de 10 min apoi se încălzerşte până la temperatura de 95°C timp de 1 oră. După răcire, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de 1% până la 20% de MeOH/EtOAc) pentru a se obţine terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilatul (701 mg, 62%).
Metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-i]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul
O soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (218 mg, 0,27 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DMF (3 mL). La această soluţie se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (73 mg, 0,35 mmol) şi COMU (127 mg, 0,30 mmol). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (0,141 mL, 0,81 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se stinge cu 1N HCl (0.200 mL) şi se purifică prin HPLC. După liofilizare, sarea TFA se dizolvă în EtOAc şi se spală cu soluţie saturată de NaHCO3. Faza organică se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Baza liberă se dizolvă apoi în MeCN/H2O şi se liofilizează pentru a obţine metil {(1R)-2-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-2-oxo-1-feniletil}carbamatul (121 mg, 50%). LCMS-ESI+: calculat pentru C50H56N8O8: 896,4; [M+1]+ înregistrat: 897,5.
Exemplu QC
Metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naito[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (105 mg, 0,13 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2- metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (32 mg, 0,18 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol) şi DMF (1,3 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,043 mL, 0,39 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (80 mg, 71%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C47H58N8O8: 862,4; [M+1]+ înregistrat: 864,2.
Exemplul QD
Metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (105 mg, 0,13 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (35 mg, 0,18 mmol), HATU (59 mg, 0,16 mmol) şi DMF (1,3 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,043 mL, 0,39 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S,3R)-1-[(2S,4S)-2-(5-{2-[(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-O-metil-L-alotreonil]-4-(metoximetil)pirolidină-2-il]-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il}-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul (92 mg, 81%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C47H58N8O9: 878,4; [M+1]+ înregistrat: 879,3.
Exemplul QE
Metil {(3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naho[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-[9-(2-{(2S,4S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-aloizoleucil]-4-metilpirolidină-2-il}-1H-imidazol-5-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]-4-(metoximetil)pirolidină-1-carboxilat (105 mg, 0,13 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (3 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilpentanoic (34 mg, 0.18 mmol), HATU (59 mg, 0.16 mmol) and DMF (1.3 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,043 mL, 0,39 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(3R)-1-[(2S,4S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S,3R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilpentanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-4-(metoximetil)pirolidină-1-il]-3-metil-1-oxopentan-2-il}carbamatul (98 mg, 86%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C48H60N8O8: 876,5; [M+1]+ înregistrat: 878,2.
Exemplul QF
(2S,5S)-1-terţ-butil 2-(3-clor-8-oxo-8 ,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-5-metilpirolidină 1,2-dicarboxilatul
La o soluţie de 9-bromo-3-cloro-10,11-dihidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-8(9H)-onă (1,41 g, 3,88 mmol) în MeCN (17 mL) se adaugă acid (2S,5S)-1-(terţ-butoxicarbonil)-5-metilpirolidină-2-carboxilic (980 mg, 4,27 mmol) şi DIPEA (1,49 mL, 8,54 mmol). După agitare timp de 18 ore la temperatura de 50°C, soluţia se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu 1N HCl, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 10% până la 30% de EtOAc/hexani) pentru a se obţine (2S,5S)-1-terţ-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il) 5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilatul (1,63 g, 81%).
(2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-(metil)pirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,5S)-1-terţ-butil 2-(3-cloro-8-oxo-8 ,9,10,11-tetrahidro-5H-dibenzo[c,g]cromen-9-il)-5-metilpirolidină-1,2-dicarboxilat (1,63 g, 3,18 mmol) se adaugă toluen (30 mL), 2-metoxietanol (3 mL) şi acetat de amoniu (3,68 g, 77,1 mmol) şi soluţia se încălzeşte la reflux peste noapte. În dimineaţa următoare, soluţia se răceşte la temperatura camerei şi se diluează cu EtOAc, apoi se spală succesiv cu apă, soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 40% până la 80% EtOAc/hexani) pentru a se obţine (2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul (1,13 g, 72%).
((2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de (2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-4,5-dihidro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-(metil)pirolidină-1-carboxilat (1,13 g, 2,3 mmol) în CH2Cl2 (25 mL) se adaugă MnO2 (9,98 g, 115 mmol). Amestecul reacţiei se agită peste noapte, apoi se filtrează pe celită. Reziduul se spală cu multă soluţie de CH2Cl2 şi MeOH, iar filtratul se concentrează sub presiune redusă pentru a obţine produsul brut (2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (931 mg, 83%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
(2S,5S)-terţ-butil 2-(9-cloro-5H-nafto[c,g]cromeno[8,9-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-carboxilat (931 mg, 1,9 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (8 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (499 mg, 2,9 mmol), HATU (795 mg, 2,1 mmol) şi DMF (10 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,627 mL, 5,7 mmol). După agitare timp de 1 oră, amestecul reacţiei se diluează cu EtOAc şi se spală succesiv cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3, 5% de LiCl şi soluţie salină. Fazele organice se usucă pe Na2SO4, se filtrează şi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se purifică prin cromatografie pe coloană de silice (de la 50% până la 100% de EtOAc/hexani) pentru a se obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (950 mg, 91%).
Metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul
La o soluţie de metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-cloro-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamat (950 mg, 1,74 mmol) în dioxan (17 mL) se adaugă bis(pinacolato)dibor (662 mg, 2,61 mmol), KOAc (512 mg, 5,22 mmol), X-Phos (25 mg, 0,05 mmol) şi Pd2dba3 (80 mg, 0,08 mmol). Soluţia se degazează cu N2 pentru 10 min, apoi se încălzeşte până la temperatura de 90°C timp de 16 ore. Soluţia se răceşte la temperatura camerei, se diluează cu EtOAc, se spală cu soluţie apoasă saturată de NaHCO3 şi soluţie salină, se usucă cu Na2SO4, şi se concentrează, apoi se purifică prin cromatografie pe silicagel (cu un gradient de la 30% până la 75% utilizând 5% de MeOH/EtOAc la hexan) pentru a obţine metil [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamatul (800 mg, 72%).
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul
La o soluţie de [(2S)-3-metil-1-{(2S,5S)-2-metil-5-[9-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il]pirolidină-1-il}-1-oxobutan-2-il]carbamat (269 mg, 0,42 mmol), metil (S)-1-((2S,4S)-2-(5-bromo-1H-imidazol-2-il)-4-metilpirolidină-1-il)-3-metil-1-oxobutan-2-ilcarbamat (206 mg, 0,54 mmol), tetrakis(trifenilfosfină)paladiu(0) (49 mg, 0,042 mmol) şi dicloro[1,1'bis-(difenilfosfino)ferocen]paladiu(II) (31 mg, 0,042 mmol) în DMSO (3 mL) şi dioxani (3 mL) se adaugă o soluţie de carbonat de potasiu (2M în apă, 0,69 mL, 1,39 mmol). Amestecul rezultat se degazează şi apoi se încălzeşte până la temperatura de 95°C timp de 2 ore. După răcire la temperatura camerei, amestecul reacţiei se diluează cu acetat de etil. Straturile organice se spală cu bicarbonat de sodiu saturat şi soluţie salină, se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Reziduul brut se purifică prin cromatografie rapidă (de la 1 până la 20% de MeOH/AcOEt) pentru a obţine terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilatul (202 mg, 63%).
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
O soluţie de terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (80 mg, 0,11 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (2 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore. Amestecul reacţiei se concentrează şi materialul brut se dizolvă în DMF (1,5 mL). La această soluţie se adaugă o soluţie de acid (R)-2-(metoxicarbonilamino)-2-fenilacetic (29 mg, 0,14 mmol) şi COMU (52 mg, 0,12 mmol). La soluţia rezultată se adaugă diizopropiletilamină (0,057 mL, 0,33 mmol). După agitare timp de 2 ore la temperatura camerei, amestecul reacţiei se stinge cu 1N HCl (0.200 mL) şi se purifică prin HPLC. După liofilizare, sarea TFA se dizolvă în EtOAc şi se spală cu soluţie saturată de NaHCO3. Faza organică se usucă pe Na2SO4 şi se concentrează. Baza liberă se dizolvă apoi în MeCN/H2O şi se liofilizează, obţinându-se metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2R)-2-[(metoxicarbonil)amino]-2-fenilacetil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (42 mg, 45%). LCMS-ESI+: calculat pentru C48H52N8O7: 852,4; [M+1]+ înregistrat: 854,2.
Exemplul QG
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]naito[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (60 mg, 0,079 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (2 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (S)-2-(metoxicarbonilamino)-3-metilbutanoic (21 mg, 0,12 mmol), HATU (36 mg, 0,095 mmol) şi DMF (1,5 mL), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,027 mL, 0,24 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 mL) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (33 mg, 51%).
LCMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O7: 818,4; [M +1]+ înregistrat: 820,2.
Exemplul QH
Metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul
terţ-butil (2S,4S)-2-[5-(2-{(2S,5S)-1-[N-(metoxicarbonil)-L-valil]-5-metilpirolidină-2-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-9-il)-1H-imidazol-2-il]-4-metilpirolidină-1-carboxilat (20 mg, 0,079 mmol) în 1,25 N HCl în EtOH (2 mL) se încălzeşte până la temperatura de 50°C timp de 3 ore şi apoi se concentrează sub presiune redusă. Reziduul brut se tratează cu acid (2S,3R)-3-metoxi-2-(metoxicarbonilamino)butanoic (8 mg, 0,04 mmol), HATU (12 mg, 0,03 mmol) şi DMF (0,5 ml), apoi se adaugă prin picurare N-metilmorfolină (0,009 mL, 0,078 mmol). După 3 ore, amestecul se stinge cu 1N HCl (0.100 ml) şi apoi se purifică prin HPLC pentru a obţine metil {(2S)-1-[(2S,5S)-2-(9-{2-[(2S,4S)-1-{(2S)-2-[(metoxicarbonil)amino]-3-metilbutanoil}-4-metilpirolidină-2-il]-1H-imidazol-5-il}-1,11-dihidroizocromeno[4',3':6,7]nafto[1,2-d]imidazol-2-il)-5-metilpirolidină-1-il]-3-metil-1-oxobutan-2-il}carbamatul (7,5 mg, 35%).
CMS-ESI+: calculat pentru C45H54N8O8: 834,4; [M+1]+ înregistrat: 835,7.
Compuşii 478-647
Folosind procedee similare celor descrise aici, s-au preparat următorii compuşi ai invenţiei.
# Compusul LCMS (M+H)+) observat) 478 879,4 493 838,2 494 837,3 495 835,73 498 835,34 499 823,35 503 837,35 507 865,32 510 880,0 516 836,04 518 803,2 526 806,11 536 838,29 588 842,10 602 847,99 603 822,02 617 854,19 626 885,80 643 878,15 646 881,66
TESTE BIOLOGICE
Efectul proteinei serice asupra potenţei repliconului: testele de replicare sunt efectuate într-un mediu normal de cultură celulară (DMEM + 10% FBS) suplimentat cu concentraţii fiziologice ale albuminei serice umane (40 mg/mL) sau glicoproteinei α-acide (1 mg/ml). EC50 în prezenţa proteinelor serice umane sunt comparate cu EC50 în mediu normal pentru a determina migraţia în direcţia potenţei.
Citotoxicitatea celulei MT-4: celulele MT4 sunt tratate cu diluţii seriale de compuşi pentru o perioadă de cinci zile. Viabilitatea celulară se măsoară la sfârşitul perioadei de tratament folosind testul Promega CellTiter-Glo, iar regresia neliniară se efectuează pentru a calcula CC50.
Concentraţia compusului asociată cu celulele la EC50: culturile Huh-luc sunt incubate cu compusul la concentraţii egale cu EC50. La mai multe intervale de timp (0-72 ore), celulele se spală de 2 ori cu mediu rece şi se extrag cu 85% de acetonitril; de asemenea, o probă a mediilor la fiecare interval de timp se va extrage. Extractele din celule şi medii sunt analizate prin LC/MS/MS pentru a determina concentraţia molară a compuşilor în fiecare fracţiune. Compuşii reprezentativi ai invenţiei au arătat activitate.
Solubilitatea şi stabilitatea: Solubilitatea este determinată prin luarea unui alicvot de soluţie stoc de 10 mM DMSO şi prepararea compusului la o concentraţie finală de 100 µM în soluţiile mediilor de testare (PBS, pH 7,4 şi 0,1N HCl, pH 1,5) cu o concentraţie totală a DMSO de 1%. Soluţiile mediilor de testare sunt incubate la temperatura camerei, cu agitare timp de 1 oră. Apoi soluţiile sunt centrifugate, iar supernatanţii recuperaţi sunt analizaţi prin HPLC/UV. Solubilitatea se calculează prin compararea cantităţii compusului detectat în soluţia de testare definită în comparaţie cu cantitatea detectată în DMSO la aceeaşi concentraţie. Stabilitatea compuşilor după o oră de incubare cu PBS la temperatura de 37°C va fi, de asemenea, determinată.
Stabilitatea în hepatocitele crioconservate ale omului, câinelui şi şobolanului: Fiecare compus este incubat timp de până la 1 oră în suspensii hepatocitare (100 µL, 80,000° celule per alveolă), la temperatura de 37°C. Hepatocitele crioconservate sunt reconstituite în mediul de incubare fără ser. Suspensia este transferată în plăci cu 96 de alveole (50 µL/alveolă). Compuşii se diluează la 2 µM în mediul de incubare şi apoi se adaugă la suspensiile hepatocitare pentru a începe incubarea. Probele sunt luate la 0, 10, 30 şi 60 minute de la începerea incubării şi reacţia se stinge cu un amestec format din 0,3% de acid formic în 90% de acetonitril/10% de apă. Concentraţia compusului în fiecare probă este analizată prin LC/MS/MS. Perioada de descompunere a compusului în suspensia hepatocitară este determinată de selectarea datelor de concentraţie-timp printr-o ecuaţie exponenţială monofazică. Datele vor fi de asemenea extinse pentru a reprezenta clearance-ul hepatic intrinsec şi/sau clearance-ul hepatic total.
Stabilitatea în fracţiunea S9 hepatică la om, câine şi şobolan: Fiecare compus este incubat timp de până la 1 oră în suspensie S9 (500 µL, 3 mg proteină/mL) la temperatura de 37°C (n = 3). Compuşii se adaugă la suspensia S9 pentru a începe incubarea. Probele sunt luate la 0, 10, 30 şi 60 minute după începerea incubării. Concentraţia compusului în fiecare probă este analizată prin LC/MS/MS. Perioada de descompunere a compusului în suspensia S9 este determinată de selectarea datelor de concentraţie-timp printr-o ecuaţie exponenţială monofazică.
Permeabilitatea Caco-2: Compuşii se analizează prin intermediul unui serviciu contractual (Absorption Systems, Exton, PA). Compuşii sunt furnizaţi contractantului într-o manieră orbită. Atât permeabilitatea directă (A-to-B), cât şi cea invers (B-to-A) va fi măsurată. Monostraturile Caco-2 sunt crescute la confluenţă pe membrane de policarbonat microporoase acoperite cu colagen în cutii Costar TRANSWELL® cu 12 alveole. Compuşii sunt dozaţi pe partea apicală pentru permeabilitatea directă (A-to-B) şi sunt dozaţi pe partea basolaterală pentru permeabilitatea inversă (B-to-A). Celulele sunt incubate la temperatura de 37°C cu 5% de CO2 într-un incubator umidificat. La începutul incubării şi la 1 oră şi 2 ore după incubare, un alicvot de 200 µL este luat din camera de recepţie şi înlocuit cu un tampon de testare proaspătă. Concentraţia compusului în fiecare probă este determinată prin LC/MS/MS. Se calculează permeabilitatea aparentă Papp.
Legarea de proteinele plasmatice: Legarea de proteinele plasmatice este măsurată prin dializa echilibrată. Fiecare compus este îmbogăţit într-o plasmă imaculată la o concentraţie finală de 2 µM. Plasma îmbogăţită şi tampon fosfatic se plasează în părţile opuse ale celulelor de dializă asamblate, care apoi se rotesc lent într-o baie de apă la temperatura de 37°C. La sfârşitul incubării este determinată concentraţia compusului în plasmă şi tampon fosfatic. Procentajul nelegat este calculat folosind următoarea ecuaţie:
% Nelegat =
unde Cf şi Cb sunt concentraţiile libere şi legate determinat ca concentraţii ale plasmei şi tamponului post-dializă, respectiv.
Profilarea CYP450: Fiecare compus este incubat cu fiecare dintre cele 5 enzime CYP450 umane recombinante, inclusiv CYP1A2, CYP2C9, CYP3A4, CYP2D6 şi CYP2C19 în prezenţa şi absenţa NADPH. Probele de serie vor fi luate din amestecul de incubare la începutul incubării şi la 5, 15, 30, 45 şi 60 de minute după începutul incubării. Concentraţia compusului în amestecul de incubare se determină prin LC/MS/MS. Procentajul compusului rămas după incubare la fiecare interval de timp este calculat prin compararea cu eşantionarea la începutul incubării.
Stabilitatea în plasma omului, câinelui, maimuţei şi şobolanului: Compuşii se vor incuba timp de până la 2 ore în plasma (şobolanului, câinelui, maimuţei sau omului) la temperatura de 37°C. Compuşii se adaugă la plasmă în concentraţii finale de 1 şi 10 µg/mL. Alicvotele sunt luate la 0, 5, 15, 30, 60 şi 120 min după adăugarea compusului. Concentraţia compuşilor şi metaboliţilor principali la fiecare interval de timp este măsurată prin LC/MS/MS.
Evaluarea activităţii anti-VHC celulare: Potenţa antivirală (CE50) a fost determinată cu ajutorul unui test al reporterului repliconului VHC pe baza (RLuc) luciferazei Renilla. Pentru a efectua testul pentru genotipul 1 şi 2a JFH-1, celulele VHC 1a RLuc replicante stabile (adăpostirea unui replicon 1a H77 al genotipului dicistronic care codifica un reporter RLuc), celulele VHC 1b RLuc replicante stabile (adăpostirea unui replicon 1b Con1 al genotipului dicistronic care codifica un reporter RLuc) sau celulele VHC 2a JFH-1 Rluc replicante stabile (adăpostirea unui replicon 2a JFH-1 al genotipului dicistronic care codifica un reporter RLuc; cu L31 prezent în NS5A) au fost distribuite în cutii cu 384 de alveole pentru testele EC50. Pentru a efectua testul pentru genotipul 2a (cu M31 prezent în NS5A) sau 2b, repliconii 2a JFH-1 genotipului himeric NS5A care codifica un reporter RLuc-Neo şi fie genotipul genei 2a J6 tulpinii NS5A sau genotipul genei NS5A tulpinii 2b MD2b-1 ( ambele cu M31 prezent), respectiv, fie au fost temporar transfectate (t) în celule Huh-Lunet sau au fost stabilite ca celule ale repliconului de replicare stabile). Fie celulele au fost repartizate în cutii cu 384 de alveole pentru testele EC50. Pentru a efectua testul pentru genotipul 3 şi 4, repliconii 1b Con1 genotipului NS5A himeric care codifică un reporter Pi-RLuc şi fie genotipul tulpinii 3a S52 genei NS5A sau genotipul 4a ED43 tulpinei genei NS5A respectiv, au fost temporar transfectate (t) în celule Huh-Lunet, care au fost ulterior distribuite în cutii cu 384 de alveole. Compuşii se dizolvă în DMSO, la o concentraţie de 10 mM şi se diluează în DMSO fie manual, fie cu ajutorul unui instrument pentru picurare automatizat. Compuşii diluaţi serial de 3 ori sunt fie amestecaţi manual cu medii de cultură de celule şi adăugaţi la celulele însămânţate sau adăugaţi direct la celule folosind un instrument automatizat. DMSO se utilizează ca un control negativ (solvent; nici o inhibare), iar inhibitorul ITMN-191 proteazei se include într-o concentraţie > 100 x EC50 ca un control pozitiv. 72 ore mai târziu, celulele au fost lizate şi activitatea luciferazei Renilla cuantificată astfel cum a recomandat producătorul (Promega-Madison, WI). Regresia neliniară a fost efectuată pentru a calcula valorile CE50.
Pentru a determina potenta antivirală (EC50) împotriva mutanţilor rezistenţi, mutaţii de rezistenţă, inclusiv M28T, Q30R, Q30H, L31M şi Y93C în genotipul 1a NS5A şi Y93H în genotipul 1b NS5A, au fost introduse în mod individual fie în repliconii 1a Pi-Rluc sau 1b Pi- Rluc prin mutageneza cu site specific. Repliconul ARN fiecărui mutant rezistent a fost transfectat în celule tratate-51 derivate din Huh-7 şi a fost determinată potenţa antivirală pe aceste celule transfectate aşa cum este descris mai sus.
Diapazoanele EC50 pentru genotipul 1a, 1a Q30R şi 2a JFH sunt după cum urmează: A ≥ 44 nM, B = 1 nM la 43,99 nM, c <1 nM. Diapazoanele EC50 pentru genotipul 2a J6, 2b, 3a şi 4a sunt după cum urmează: A ≥ 5 nM, B = 1 nM la 4,99 nM, c <1 nM. Diapazoanele EC50 pentru genotipul 2a J6, 2b şir 4a corespund analizei celulelor transfectate (t) temporar. Dacă aceste date nu sunt disponibile, se aplică diapazonul EC50 pentru celulele de replicare stabilă (s).
Studiile farmacocinetice ale dozei unice IV şi PO la şobolani SD: Farmacocinetica compuşilor selectaţi a fost caracterizată în sobolani masculi Sprague-Dawley (SD) (250-300g). În acest studiu, două grupe de şobolani naivi de rasa SD (N = 3 per grupă, postiţi peste noapte) au primit compusul selectat fie ca perfuzie intravenoasă (IV) (1 mg/kg timp de 30 de minute) prin vena jugulară sau prin alimentaţie artificială orală (2 mg/kg). Transportorul intravenos (IV) fost 5% etanol, 35% de polietilenglicol 400 (PEG 400) şi 60% de apă pH 2,0. Transportorul oral a fost 5% de etanol, 55% de PEG 400 şi 40% de tampon citrat pH 2,2.
Probe de sânge de serie (aproximativ 0,3 mL fiecare) au fost colectate din vena jugulară sau altă venă adecvată la intervale de timp specificate. Pentru grupa IV de perfuzie, probele de sânge au fost colectate înainte de dozare şi la 0,25, 0,48, 0,58, 0,75, 1,5, 3, 6, 8, 12 şi 24 ore după începerea perfuziei. Pentru grupul orală, probele de sânge au fost colectate înainte de dozare şi la 0,25, 0,50, 1, 2, 4, 6, 8, 12 şi 24 ore după dozare. Probele de sânge au fost colectate în tuburi Vacutainer™ care conţin EDTA-K3 ca anticoagulant şi au fost centrifugate la aproximativ 4°C pentru a obţine plasmă. Probele de plasmă au fost depozitate la temperatura de -20°C până la analiza prin LC/MS/MS.
O metodă bioanalitică care utilizează cromatografia în fază lichidă de înaltă performanţă cuplată cu spectrometria de masa tandem (LC/MS/MS) a fost elaboratăt pentru analiza compusului selectat din plasma de şobolan. Detectarea a fost realizată utilizând monitorizarea reacţiei selectate (MRS); Ionii care reprezintă speciile precursoare (M+H)+ au fost selectaţi în cvadripolul 1 (Q1) şi s-au ciocnit cu gas de argon în celula de coliziune (Q2) pentru a genera ioni produşi specific, care au fost monitorizaţi ulterior prin cvadripolul 3 (T3). Probe de control al calităţii şi curbei standard au fost preparate în plasma de şobolan mascul şi prelucrate în acelaşi mod ca şi probele de testare pentru a genera date cantitative.
Parametrii farmacocinetici au fost generate folosind analiza farmacocinetică necompartimentală (Phoenix WinNonlin, versiunea 6.3). Valorilor sub limita inferioară de cuantificare (LIC) li s-au atribuit o valoare de zero în cazul dozei preliminare şi au fost tratate ca lipsă ulterior. Aria de sub curbă (ASC) a fost calculată prin regula trapezoidală lineară. Biodisponibilitatea orală (F %) a fost determinată prin compararea ariei de sub curbă (AUC) a compusului şi/sau a unui metabolit generat în plasmă după administrarea orală cu cea generată după administrarea intravenoasă.
# Exemplul nr., 1b (nM) 1a 1a Q30R 2a JFH 2a J6 2b 3a 4a 1a (nM) 1a Q30R (nM) 2a JFH (nM) 2a J6 (t) (nM) 2a J6 (s) (nM) 2b (t) (nM) 2b (s) (nM) 3a (nM) 4a (t) (nM) 4a (s) (nM) % F şobolanului 422 MC 0,017 C C C B C C C 0,016 0,990 0,004 1,155 3,523 0,162 0,375 0,004 0,008 0,028 423 LQ 0,020 C C C C C C C 0,022 0,135 0,004 0,134 0,543 0,012 0,035 0,005 0,008 0,02 426 MD 0,033 C C C C C C C 0,035 0,192 0,006 0,073 0,439 0,016 0,038 0,006 0,011 0,035 427 ME 0,049 C B C B C C C 0,033 2,514 0,012 3,428 16,075 0,198 0,701 0,015 0,016 0,029 434 MG 0,055 C C C C C C C 0,054 0,663 0,012 0,337 2,288 0,070 0,010 0,024 0,08 435 MF 0,058 C C C C C C C 0,059 0,768 0,012 0,476 2,136 0,083 0,011 0,025 478 478 0,048 C C B C C C 0,045 0,011 3,654 0,820 0,065 0,023 0,019 493 493 0,030 C C A C C C 0,036 0,008 5,036 0,650 0,050 0,013 0,018 494 494 0,021 C C C C C C C 0,037 0,118 0,005 0,098 0,017 0,005 0,017 0,031 495 495 0,026 C C C C C C C 0,021 0,201 0,008 0,280 1,016 0,135 0,541 0,024 0,014 0,014 498 498 0,016 C C C C C C C 0,030 0,040 0,004 0,012 0,039 0,010 0,013 0,005 0,011 0,004 499 499 0,032 C C C C C C 0,057 0,008 0,206 0,040 0,010 0,021 0,005 503 503 0,041 C C C C C C 0,062 0,012 0,155 0,037 0,016 0,028 0,025 507 507 1,503 B C A B C C 3,698 0,297 20,096 1,561 0,382 0,594 0,025 510 510 0,050 C C C C C C 0,021 0,009 0,007 0,018 0,017 0,020 0,008 0,016 0,072 516 516 0,024 C C C C C C 0,015 0,009 0,043 0,013 0,005 0,010 0,025 518 518 0,010 C C B C C C 0,005 0,006 2,493 0,643 0,005 0,004 0,011 526 526 0,018 C C C C C C C 0,011 0,095 0,007 0,443 1,639 0,132 0,404 0,018 0,011 0,011 536 536 0,013 C C C C C C C 0,008 0,048 0,004 0,040 0,154 0,011 0,037 0,009 0,005 0,01 538 LR-1 0,016 C C C C C C C 0,011 0,015 0,005 0,018 0,048 0,010 0,024 0,013 0,010 0,012 539 LT 0,016 C C C C C C C 0,009 0,010 0,004 0,010 0,047 0,009 0,039 0,012 0,015 0,009 543 MY 0,015 C C C C C C C 0,016 0,024 0,005 0,047 0,165 0,016 0,047 0,010 0,008 0,02 544 MM 0,026 C C C C C C C 0,022 0,044 0,007 0,018 0,064 0,015 0,042 0,020 0,017 0,016 551 OQ 0,018 C C C C C C C 0,015 0,102 0,007 0,378 1,492 0,265 0,982 0,048 0,020 0,016 552 OR 0,033 C C C C C C C 0,030 0,059 0,011 0,068 0,160 0,037 0,109 0,031 0,036 0,006 555 MN 0,021 C C C C C C C 0,014 0,018 0,008 0,017 0,071 0,013 0,040 0,034 0,024 0,007 1,5 556 MS 0,008 C C A A C 0,008 0,005 15,564 9,562 0,014 0,02 558 PQ 0,014 C C C C C C 0,014 0,106 0,005 0,025 0,155 0,032 0,057 0,015 0,017 561 MP 0,010 C C C C C C C 0,006 0,031 0,004 0,039 0,336 0,032 0,184 0,015 0,015 0,013 24,2 562 MO 0,019 C C C C C C C 0,013 0,052 0,007 0,089 0,471 0,137 0,427 0,051 0,022 0,018 7,46 563 MT 0,007 C C A A B C 0,003 0,021 44,444 44,444 1,092 0,015 0,025 565 NB 0,017 C C C C C C C 0,010 0,034 0,004 0,020 0,138 0,007 0,039 0,011 0,023 0,025 566 NC 0,009 C C C C C C C 0,007 0,060 0,005 0,089 0,762 0,068 0,191 0,014 0,011 0,026 569 ND 0,024 C C C C C C C 0,020 0,057 0,014 0,314 2,338 0,270 1,319 0,035 0,031 0,044 571 OO 0,114 C C C C C C C 0,072 0,139 0,015 0,028 0,259 0,020 0,076 0,028 0,086 0,018 572 PF 0,044 C C C C C C C 0,032 0,034 0,014 0,025 0,127 0,023 0,117 0,072 0,050 0,018 4,3 573 PG 0,030 C C C C C C C 0,033 0,043 0,018 0,045 0,335 0,027 0,119 0,050 0,063 0,008 574 PN 0,016 C C C C C C C 0,015 0,030 0,009 0,027 0,277 0,014 0,035 0,016 0,014 0,02 575 PP 0,029 C C C C C C C 0,014 0,043 0,011 0,061 0,403 0,038 0,110 0,019 0,027 0,011 576 PO 0,014 C C B C C C 0,013 0,011 3,135 0,470 0,012 0,013 0,013 579 OI 0,034 C C C C C C C 0,024 0,086 0,010 0,061 0,326 0,178 0,629 0,206 0,036 0,007 580 OJ 0,017 C C C C C C 0,018 0,013 0,502 0,813 0,259 0,026 0,017 582 NF 0,010 C C C C C C C 0,011 0,017 0,006 0,031 0,218 0,018 0,064 0,017 0,009 0,012 585 NG 0,009 C C C C C C C 0,006 0,243 0,010 0,370 1,672 0,063 0,135 0,020 0,008 587 MR 0,041 C C C C C C C 0,028 0,128 0,017 0,079 0,176 0,039 0,053 0,078 0,045 588 588 0,017 C C C C C C C 0,012 0,087 0,004 0,038 0,140 0,012 0,017 0,027 0,019 589 MQ 0,011 C C C C C C C 0,008 0,023 0,004 0,017 0,095 0,009 0,023 0,016 0,011 590 MU 0,014 C C C C C C C 0,008 0,023 0,004 0,013 0,046 0,009 0,025 0,017 0,011 592 NI 0,015 C C C C C C C 0,015 0,059 0,007 0,026 0,169 0,019 0,054 0,022 0,020 24,1 594 NP 0,013 C C C C C C C 0,014 0,032 0,007 0,010 0,096 0,011 0,043 0,020 0,028 26,1 597 NJ 0,005 C C C C C C C 0,007 0,025 0,007 0,099 0,939 0,094 0,416 0,019 0,017 599 PY 0,009 C C C C C C C 0,012 0,013 0,006 0,009 0,098 0,007 0,030 0,017 0,018 27,7 600 PZ 0,007 C C C C C C 0,009 0,057 0,005 0,175 1,712 0,071 0,386 0,025 601 MV 0,014 C C C C C C C 0,010 0,012 0,004 0,047 0,034 0,041 0,011 0,011 602 602 0,025 C C C C C 0,025 0,010 0,053 0,036 0,036 0,013 603 603 0,015 C C C C C C C 0,009 0,146 0,007 0,194 0,067 0,088 0,015 0,022 604 NR 0,020 C C C C C 0,026 0,006 0,118 0,017 0,017 0,007 605 NQ 0,015 C C C C C C 0,017 0,039 0,006 0,064 0,013 0,012 0,013 606 OK 0,034 C C C C C C 0,026 0,039 0,011 0,076 0,036 0,045 0,028 607 OL 0,067 C C C C 0,047 0,012 0,070 0,052 0,052 608 OH 0,017 C C C C C C 0,016 0,031 0,007 0,054 0,023 0,022 0,026 22,7 609 QF 0,005 C C C C C C 0,008 0,032 0,004 0,053 0,015 0,011 0,020 610 QA 0,013 C C C C C C 0,012 0,045 0,007 0,094 0,052 0,040 0,038 7,46 612 QH 0,005 C C C C C C 0,007 0,051 0,005 0,182 0,051 0,049 0,020 613 QG 0,005 C C C C C C 0,005 0,071 0,004 0,551 0,065 0,043 0,016 614 OP 0,013 C C C C C C 0,013 0,026 0,008 0,018 0,011 0,007 0,027 15,1 615 OM 0,019 C C C C C C 0,014 0,035 0,009 0,045 0,053 0,054 0,035 12,2 617 617 0,005 C C C C C C 0,009 0,024 0,004 0,032 0,013 0,011 0,019 14,4 618 OT 0,020 C C C C C C 0,011 0,041 0,005 0,013 0,012 0,024 619 OF 0,007 C C C C 0,010 0,008 0,445 0,196 620 NK 0,081 C C C C 0,049 0,018 0,056 0,154 621 NL 0,013 C C C C 0,011 0,007 0,043 0,034 622 NM 0,016 C C C C C C 0,011 0,028 0,006 0,012 0,013 0,024 6,93 623 ON 0,006 C C C C 0,005 0,004 0,068 0,086 625 PH 0,031 C C C C C C 0,024 0,051 0,014 0,055 0,042 0,029 626 626 0,030 C C C C C C 0,021 0,041 0,009 0,021 0,021 0,027 627 PI 0,039 C C C C C C 0,031 0,094 0,020 0,129 0,090 0,065 8,7 628 OG 0,009 C C C C 0,009 0,008 0,601 0,437 631 PS 0,006 C C C C A 0,005 0,004 0,077 0,113 44,444 632 PT 0,008 C C C C 0,007 0,007 0,383 0,182 633 PR 0,020 C C C C C C 0,013 0,045 0,007 0,022 0,028 0,018 634 PU 0,015 C C C C 0,012 0,006 0,068 0,442 635 OU 0,041 C C C C 0,047 0,016 0,040 0,035 636 OV 0,011 C C C C C C 0,010 0,031 0,007 0,113 0,046 0,013 637 OW 0,009 C C C C C C 0,009 0,019 0,006 0,009 0,008 0,013 13,3 638 OX 0,009 C C C C 0,007 0,006 0,113 0,107 639 QB 0,011 C C C C C C 0,011 0,029 0,008 0,021 0,022 0,028 9,56 640 QE 0,015 C C C C 0,013 0,011 0,291 0,563 641 QD 0,030 C C C C 0,025 0,013 0,103 0,193 642 QC 0,014 C C C C 0,012 0,008 0,157 0,317 643 643 0,015 C C C C 0,015 0,013 0,206 0,607 644 MW 0,026 C C C C C 0,012 0,012 0,020 0,043 0,123 0,011 645 MX 0,076 C C C C C 0,036 0,024 0,035 0,070 0,139 0,033 646 646 0,109 C C C C C 0,058 0,030 0,042 0,112 0,262 0,034 648 PJ 0,088 C C C C C 0,068 0,058 0,136 0,335 0,854 0,056
Suplimentar, aici sunt dezvăluite următoarele concretizări sau aspecte ale invenţiei:
(i) Compoziţie farmaceutică care conţine compusul descris în oricare dintre revendicările 1-22 sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia; şi cel puţin un purtător acceptabil farmaceutic;
(ii) Compoziţie farmaceutică conform (i) pentru utilizare la tratarea tulburărilor hepatitei C (VHC);
(iii) Compoziţie farmaceutică conform (ii), care mai conţine cel puţin un agent terapeutic suplimentar pentru tratarea VHC;
(iv) Compoziţie farmaceutică conform (iii), unde agentul terapeutic suplimentar este selectat dintre ribavirină, un inhibitor al NS3 proteazei, un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei, un inhibitor al alfa 1-glucozidazei, un hepatoprotectant, un inhibitor non-nucleozidic al VHC polimerazei, sau combinaţii ale acestora;
(v) Compoziţie farmaceutică conform (i), care mai conţine un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei;
(vi) Compoziţie farmaceutică conform (v), unde inhibitorul nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei este selectat dintre ribavirină, viramidină, levovirină, o L-nucleozidă sau izatoribină;
(vii) Compoziţie farmaceutică care conţine un compus, conform revendicărilor 1-22, cel puţin un inhibitor nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei şi cel puţin un purtător acceptabil farmaceutic;
(viii) Compoziţie farmaceutică conform (vii), care mai conţine un interferon, un interferon pegilat, ribavirină sau combinaţii ale acestora;
(ix) Compoziţie farmaceutică conform (vii) sau (viii), unde inhibitorul nucleozidic sau nucleotidic al VHC NS5B polimerazei este sofosbuvir;
(x) Un compus aşa cum este descris în oricare dintre revendicările 1-22 sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia pentru utilizare în terapia medicală; şi
(xi) Un compus aşa cum este descris în oricare dintre revendicările 1-22 sau o sare acceptabilă farmaceutic, sau un promedicament al acestuia pentru utilizare în tratamentul profilactic sau terapeutic al hepatitei C sau al tulburării asociate cu hepatita C
Surse bibliografice:
1. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, september 2010, Volume 54, p. 3641-3650
2. Paquette, Leo A.; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W.A. Benjamin, New York, 1968), în special Capitolele 1, 3, 4, 6, 7 şi 9;
3. The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs” (John Wiley & Sons, New York, 1950 până în prezent), în special volumele 13, 14, 16, 19 şi 28;
4. J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566
5. S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984), McGraw-Hill Book Company, New York;
6. Eliel, E. şi Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., New York
7. Bundgaard, Hans, „Design and Application of Prodrugs” în Textbook of Drug Design and Development (1991),
8. P. Krogsgaard-Larsen şi H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, pp. 113-191
9. Farquhar, (1983) J. Pharm. Sci. 72: 324;
10. US 4816570,
11. US 4968788,
12. US 5663159
13. US 5792756
14. (De Lombaert şi alţii (1994) J. Med Chem. 37: 498)
15. (Khamnei şi Torrence, (1996) J. Med. Chem. 39:4109-4115).
16. Mitchell şi alţii, (1992) J. Chem. Soc. Perkin Trans. II 2345;
17. Glazier WO 91/19721.
18. Puech şi alţii (1993) Antiviral Res., 22: 155-174;
19. Benzaria şi alţii (1996) J. Med. Chem. 39: 4958)
20. Protective Groups in Organic Chemistry, Theodora W. Greene, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1991
21. Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., New York, 1991, ISBN 0-471-62301-6) („Greene”)
22. Kocienski, Philip J.; Protecting Groups (Georg Thieme Verlag Stuttgart, New York, 1994)
23. Capitolul 1, Protecting Groups: An Overview, paginile 1-20,
24. Capitolul 2, Hydroxyl Protecting Groups, paginile 21-94,
25. Capitolul 3, Diol Protecting Groups, paginile 95-117,
26. Capitolul 4, Carboxyl Protecting Groups, paginile 118 - 154,
27. Capitolul 5, Carbonyl Protecting Groups, paginile 155-184
28. Handbook of Pharmaceutical Excipients (1986)
29. Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA)
30. Compendium of Organic Synthetic Methods (John Wiley & Sons, New York), Vol. 1, Ian T. Harrison şi Shuyen Harrison, 1971;
31. Vol. 2, Ian T. Harrison şi Shuyen Harrison, 1974,
32. Vol. 3, Louis S. Hegedus şi Leroy Wade, 1977,
33. Vol. 4, Leroy G. Wade, Jr., 1980,
34. Vol. 5, Leroy G. Wade, Jr., 1984;
35. şi Vol. 6, Michael B. Smith;
36. March, J., Advanced Organic Chemistry, ediţia a treia, (John Wiley & Sons, New York, 1985),
37. Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry. În 9 volume, Barry M. Trost, redactor principal (Pergamon Press, New York, editura 1993)
38. WO 2006/020276
39. (Stereochemistry of Carbon Compounds, (1962) de către E.L. Eliel, McGraw Hill; Lochmuller, C.H., (1975) J.Chromatogr., 113, 3) 283-302)
40. (Eliel, E. şi Wilen, S. (1994) Stereochemistry of Organic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., p. 322)
41. Jacob III (. 1982) J. Org. Chem. 47:4165)
42. (Hoye, T., WO 96/15111)
43. (Chiral Liquid Chromatography (1989) W.J. Lough, Ed. Chapman şi Hall, New York; Okamoto, (1990) J. of Chromatogr . 513:375-378)
44. Wuts, P.G.M., Greene, T. Protective Groups in Organic Synthesis, ediţia a 4-a; John Wiley & Sons, Inc.:. Hoboken, New Jersey , 2007
Descrierea şi referinţele bibliografice se publică în redacţia solicitantului.

Claims (1)

  1. Compus sau o sare acceptabilă farmaceutic a acestuia, selectat dintr-o grupă formată din compuşi cu formulele:
    .
MDA20150091A 2011-11-16 2012-11-16 Compuşi antivirali pe bază de imidazolil-dihidroizocromeno-naftoimidazoli condensaţi MD4521C1 (ro)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161560654P 2011-11-16 2011-11-16
PCT/US2012/065681 WO2013075029A1 (en) 2011-11-16 2012-11-16 Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds

Publications (3)

Publication Number Publication Date
MD20150091A2 MD20150091A2 (ro) 2016-02-29
MD4521B1 MD4521B1 (ro) 2017-10-31
MD4521C1 true MD4521C1 (ro) 2018-05-31

Family

ID=47324426

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20130029A MD4403C1 (ro) 2011-11-16 2012-11-16 Compuşi antivirali în bază de dihidroxiizocromen-naftoimidazoli condensaţi
MDA20150091A MD4521C1 (ro) 2011-11-16 2012-11-16 Compuşi antivirali pe bază de imidazolil-dihidroizocromeno-naftoimidazoli condensaţi

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MDA20130029A MD4403C1 (ro) 2011-11-16 2012-11-16 Compuşi antivirali în bază de dihidroxiizocromen-naftoimidazoli condensaţi

Country Status (36)

Country Link
US (14) US20130164260A1 (ro)
EP (4) EP3431477B1 (ro)
JP (5) JP6082749B2 (ro)
KR (5) KR101890400B1 (ro)
CN (2) CN105837584B (ro)
AP (1) AP2013006877A0 (ro)
AU (1) AU2012318253B8 (ro)
BR (1) BR112013012091A2 (ro)
CA (2) CA2815082C (ro)
CL (1) CL2013001428A1 (ro)
CO (1) CO6791562A2 (ro)
CR (1) CR20130231A (ro)
CY (2) CY1116987T1 (ro)
DK (2) DK2635588T3 (ro)
EA (4) EA037883B1 (ro)
EC (2) ECSP13012790A (ro)
ES (3) ES2843023T3 (ro)
HR (2) HRP20150725T1 (ro)
HU (2) HUE027733T2 (ro)
IL (5) IL226345A (ro)
LT (1) LT2907816T (ro)
MA (1) MA34727B1 (ro)
MD (2) MD4403C1 (ro)
ME (1) ME02196B (ro)
MX (4) MX346729B (ro)
MY (2) MY173045A (ro)
PE (2) PE20141163A1 (ro)
PH (2) PH12013500976A1 (ro)
PL (3) PL2635588T3 (ro)
PT (3) PT2907816T (ro)
RS (2) RS57638B1 (ro)
SG (1) SG10201700947UA (ro)
SI (3) SI2635588T1 (ro)
SM (2) SMT201800470T1 (ro)
UA (2) UA110354C2 (ro)
WO (1) WO2013075029A1 (ro)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE029877T2 (en) 2003-05-30 2017-04-28 Gilead Pharmasset Llc Modified fluorinated nucleoside analogues
HUE030465T2 (hu) 2009-05-13 2017-05-29 Antivirális vegyületek
NZ710567A (en) 2010-11-17 2017-01-27 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
CA2841095A1 (en) 2011-07-09 2013-01-17 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Spiro compounds as hepatitis c virus inhibitors
EP2709613B2 (en) 2011-09-16 2020-08-12 Gilead Pharmasset LLC Methods for treating hcv
CN105837584B (zh) 2011-11-16 2018-07-13 吉利德制药有限责任公司 作为抗病毒化合物的缩合的咪唑基咪唑
US9326973B2 (en) 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20130309196A1 (en) * 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
EP2950786B1 (en) 2013-01-31 2019-11-27 Gilead Pharmasset LLC Combination formulation of two antiviral compounds
JP5614568B1 (ja) 2013-02-07 2014-10-29 保土谷化学工業株式会社 ジアザトリフェニレン環構造を有する化合物および有機エレクトロルミネッセンス素子
WO2014185995A1 (en) * 2013-05-16 2014-11-20 Gilead Pharmasset Llc Hepatitis c treatments with sofosbuvir
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
WO2015005901A1 (en) * 2013-07-09 2015-01-15 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis c virus inhibitors
US9775831B2 (en) 2013-07-17 2017-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising biphenyl derivatives for use in the treatment of HCV
US20150064252A1 (en) 2013-08-27 2015-03-05 Gilead Pharmasset Llc Solid dispersion formulation of an antiviral compound
PT3038601T (pt) 2013-08-27 2020-06-30 Gilead Pharmasset Llc Formulação combinada de dois compostos antivirais
CN104418784B (zh) * 2013-09-04 2019-02-19 浙江九洲药业股份有限公司 一种抗病毒药物中间体的拆分方法
JP6568541B2 (ja) 2013-12-23 2019-08-28 ギリアド ファーマセット エルエルシー 大環状ｈｃｖ ｎｓ３阻害トリペプチドの結晶形態
TWI721947B (zh) * 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
TW202014413A (zh) * 2014-06-11 2020-04-16 美商基利法瑪席特有限責任公司 製備抗病毒化合物之方法
JP7381190B2 (ja) 2014-12-26 2023-11-15 エモリー・ユニバーシテイ Ｎ４－ヒドロキシシチジン及び誘導体並びにそれに関連する抗ウイルス用途
CN110372559A (zh) * 2014-12-29 2019-10-25 重庆博腾制药科技股份有限公司 一种(4S)-N-Boc-4--甲氧基甲基-L-脯氨酸的合成方法
CN104586802B (zh) * 2015-02-02 2018-01-16 长春海悦药业股份有限公司 一种含有索菲布韦的药物组合物
CN106008552B (zh) * 2015-03-01 2020-08-21 南京圣和药业股份有限公司 苯并[e]吡唑并[1,5-c][1,3]噁嗪类化合物及其应用
WO2017023631A1 (en) 2015-08-06 2017-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2017060820A1 (en) * 2015-10-08 2017-04-13 Mylan Laboratories Limited Process for the preparation of velpatasvir
CN105294713A (zh) * 2015-10-09 2016-02-03 重庆康施恩化工有限公司 Velpatasvir中间体及其制备方法
CN105801553B (zh) * 2016-04-12 2018-06-19 爱斯特（成都）生物制药股份有限公司 一种苯并色烯衍生物的制备方法
CN106916134B (zh) * 2016-04-14 2020-04-17 苏州楚凯药业有限公司 一种10,11-二氢-5H-苯并[d]萘并[2,3-b]吡喃酮衍生物的制备方法
WO2017184670A2 (en) 2016-04-22 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating zika virus infections
WO2017191546A1 (en) * 2016-05-05 2017-11-09 Laurus Labs Private Ltd. Process for the preparation of intermediates useful in the preparation of hepatitis c virus (hcv) inhibitors
CN109790143A (zh) 2016-05-10 2019-05-21 C4医药公司 用于靶蛋白降解的胺连接的c3-戊二酰亚胺降解决定子体
CN109641874A (zh) 2016-05-10 2019-04-16 C4医药公司 用于靶蛋白降解的c3-碳连接的戊二酰亚胺降解决定子体
EP3454856B1 (en) 2016-05-10 2024-09-11 C4 Therapeutics, Inc. Heterocyclic degronimers for target protein degradation
ES2990061T3 (es) 2016-05-10 2024-11-28 C4 Therapeutics Inc Degronímeros espirocíclicos para la degradación de proteínas diana
EA201892375A1 (ru) 2016-05-27 2019-08-30 Джилид Сайэнс, Инк. Способы лечения инфекций, вызываемых вирусом гепатита b
JOP20170127A1 (ar) 2016-06-02 2017-12-02 Gilead Pharmasset Llc صيغة مشتركة مكونة من ثلاث مركبات مضادة للفيروسات
CN108368123B (zh) * 2016-07-08 2021-02-19 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的咪唑基化合物及其药物组合物
KR101887969B1 (ko) * 2016-08-30 2018-08-13 한국과학기술연구원 항바이러스 활성을 가지는 카르바졸 화합물
CN107674062B (zh) * 2016-11-30 2020-03-27 上海博志研新药物技术有限公司 抗丙肝药物中间体、制备方法及应用
CN106831737B (zh) * 2017-02-27 2020-03-17 上海众强药业有限公司 维帕他韦及其衍生物的制备
CN110769822A (zh) 2017-06-20 2020-02-07 C4医药公司 用于蛋白降解的n/o-连接的降解决定子和降解决定子体
CN107501280A (zh) * 2017-09-05 2017-12-22 安徽华昌高科药业有限公司 一种维帕他韦的合成方法
CN107655986B (zh) * 2017-09-08 2020-11-03 安徽一灵药业有限公司 一种维帕他韦有关物质的检测方法
US10849960B2 (en) 2017-09-08 2020-12-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Synergistic combination of IL-4, interferon gamma, and interferon alpha in treating ovarian cancer
PT3706762T (pt) 2017-12-07 2024-12-05 Univ Emory N4-hidroxicitidina e derivados e utilizações antivirais relacionadas com os mesmos
CN108276421B (zh) * 2018-02-13 2019-08-06 浙江永太药业有限公司 一种维帕他韦的合成方法
DK4045040T3 (da) 2019-10-18 2023-06-26 Wockhardt Ltd Nitrogen-holdige bicycliske forbindelser
CN111018870B (zh) * 2019-11-29 2021-07-23 南京正济医药研究有限公司 一种维帕他韦中间体的制备方法
CN110981879B (zh) * 2019-12-09 2021-03-05 南通常佑药业科技有限公司 一种制备ns5a抑制剂-维帕他韦的方法
CN113072615B (zh) * 2021-03-24 2023-01-10 上海法默生物科技有限公司 一种维帕他韦中间体的制备方法
US12497408B2 (en) 2021-05-21 2025-12-16 Gilead Sciences, Inc. Tetracyclic compounds and methods for the treatment of Zika virus infection
US12037340B2 (en) 2021-05-21 2024-07-16 Gilead Sciences, Inc. Pentacyclic derivatives as Zika virus inhibitors
IL308921A (en) 2021-06-17 2024-01-01 Atea Pharmaceuticals Inc Combination anti-HCV therapy is beneficial

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816570A (en) 1982-11-30 1989-03-28 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective groups
US4968788A (en) 1986-04-04 1990-11-06 Board Of Regents, The University Of Texas System Biologically reversible phosphate and phosphonate protective gruops
EP0533833B1 (en) 1990-06-13 1995-12-20 GLAZIER, Arnold Phosphorous produgs
EP0481214B1 (en) 1990-09-14 1998-06-24 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Prodrugs of phosphonates
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
US5858389A (en) 1996-08-28 1999-01-12 Shaker H. Elsherbini Squalene is an antiviral compound for treating hepatitis C virus carriers
CA2448737C (en) 2001-07-20 2010-06-01 Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd. Viral polymerase inhibitors
DK1625154T3 (da) 2003-05-09 2014-02-24 Boehringer Ingelheim Int Hepatitis c virus ns5b-polymeraseinhibitor-bindende lomme
US7157492B2 (en) 2004-02-26 2007-01-02 Wyeth Dibenzo chromene derivatives and their use as ERβ selective ligands
RS51974B (sr) 2004-07-16 2012-02-29 Gilead Sciences Inc. Antivirusna jedinjenja
US8891379B2 (en) 2006-06-02 2014-11-18 Riverbed Technology, Inc. Traffic flow inference based on link loads and gravity measures
US7759495B2 (en) * 2006-08-11 2010-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7659270B2 (en) 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
JPWO2008069262A1 (ja) 2006-12-07 2010-03-25 第一三共株式会社 安定性が改善されたフィルムコーティング製剤
US7741347B2 (en) 2007-05-17 2010-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2009102621A2 (en) * 2008-02-11 2009-08-20 Qualcomm Mems Technologies, Inc. Methods for measurement and characterization of interferometric modulators
DK2250163T3 (da) 2008-02-12 2012-07-16 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C-virusinhibitorer
US8147818B2 (en) * 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2009102325A1 (en) 2008-02-13 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Imidazolyl biphenyl imidazoles as hepatitis c virus inhibitors
US7704992B2 (en) 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100256184A1 (en) 2008-08-13 2010-10-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical composition and administrations thereof
US8729077B2 (en) * 2008-11-28 2014-05-20 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
CA2750577A1 (en) 2008-12-03 2010-06-10 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
US20120040977A1 (en) * 2009-02-23 2012-02-16 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
RU2544010C2 (ru) 2009-02-27 2015-03-10 Энанта Фармасьютикалс, Инк. Ингибиторы вируса гепатита с
US8709999B2 (en) 2009-03-27 2014-04-29 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Substituted bicyclic HCV inhibitors
SG174883A1 (en) 2009-03-27 2011-11-28 Presidio Pharmaceuticals Inc Fused ring inhibitors of hepatitis c
EP2430015B1 (en) 2009-05-12 2015-06-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds useful for the treatment of viral diseases
HUE030465T2 (hu) 2009-05-13 2017-05-29 Antivirális vegyületek
TWI583692B (zh) 2009-05-20 2017-05-21 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
CN102480971B (zh) * 2009-09-04 2014-11-26 杨森制药公司 化合物
US9156818B2 (en) 2009-09-11 2015-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
EP2503881B1 (en) * 2009-11-25 2015-05-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
US8476225B2 (en) 2009-12-04 2013-07-02 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US8377980B2 (en) 2009-12-16 2013-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20110152246A1 (en) * 2009-12-18 2011-06-23 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
AU2010341537A1 (en) * 2009-12-22 2012-08-09 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused Tricyclic Compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EP2545060B1 (en) 2010-03-09 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
US9125904B1 (en) 2010-05-11 2015-09-08 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Biphenyl imidazoles and related compounds useful for treating HCV infections
US20110312996A1 (en) 2010-05-17 2011-12-22 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
US8859595B2 (en) 2010-08-26 2014-10-14 Rfs Pharma, Llc Potent and selective inhibitors of hepatitis C virus
WO2012048421A1 (en) 2010-10-14 2012-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
NZ710567A (en) 2010-11-17 2017-01-27 Gilead Sciences Inc Antiviral compounds
WO2012087976A2 (en) 2010-12-21 2012-06-28 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
CN105837584B (zh) 2011-11-16 2018-07-13 吉利德制药有限责任公司 作为抗病毒化合物的缩合的咪唑基咪唑
WO2013101550A1 (en) 2011-12-29 2013-07-04 Abbvie Inc. Solid compositions comprising an hcv inhibitor
US20130309196A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9079887B2 (en) 2012-05-16 2015-07-14 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US9233974B2 (en) 2012-12-21 2016-01-12 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US20150064252A1 (en) 2013-08-27 2015-03-05 Gilead Pharmasset Llc Solid dispersion formulation of an antiviral compound
PT3038601T (pt) 2013-08-27 2020-06-30 Gilead Pharmasset Llc Formulação combinada de dois compostos antivirais
TWI721947B (zh) 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
TW202014413A (zh) 2014-06-11 2020-04-16 美商基利法瑪席特有限責任公司 製備抗病毒化合物之方法
JP2016051146A (ja) 2014-09-02 2016-04-11 ウシオ電機株式会社 光検出装置

Also Published As

Publication number Publication date
AP2013006877A0 (en) 2013-05-31
US20150141326A1 (en) 2015-05-21
CN105837584A (zh) 2016-08-10
KR20180095119A (ko) 2018-08-24
SMT201500197B (it) 2015-09-07
ECSP18048718A (es) 2018-07-31
ES2544107T3 (es) 2015-08-27
PT2635588E (pt) 2015-09-14
PH12015502839B1 (en) 2020-10-30
US10807990B2 (en) 2020-10-20
IL226345A (en) 2016-03-31
JP2015512860A (ja) 2015-04-30
IL226345A0 (en) 2013-07-31
HUE027733T2 (en) 2016-10-28
DK2635588T3 (en) 2015-09-07
EP2635588B1 (en) 2015-06-10
SMT201800470T1 (it) 2018-11-09
EA037883B1 (ru) 2021-05-31
US20170145027A1 (en) 2017-05-25
IL244124A0 (en) 2016-04-21
MD20150091A2 (ro) 2016-02-29
US20200071337A1 (en) 2020-03-05
PE20171444A1 (es) 2017-09-29
JP6082749B2 (ja) 2017-02-15
US9868745B2 (en) 2018-01-16
AU2012318253A1 (en) 2013-05-30
US20210053981A1 (en) 2021-02-25
US20180244683A1 (en) 2018-08-30
LT2907816T (lt) 2018-09-10
CL2013001428A1 (es) 2014-06-27
IL244122A0 (en) 2016-04-21
EA030941B1 (ru) 2018-10-31
NZ752834A (en) 2021-01-29
CA2884712A1 (en) 2013-05-23
EP3431477B1 (en) 2020-10-14
ES2843023T3 (es) 2021-07-15
CY1121225T1 (el) 2020-05-29
US20130164260A1 (en) 2013-06-27
HRP20181384T1 (hr) 2018-12-28
IL252345A0 (en) 2017-07-31
EP3778606A3 (en) 2021-03-03
EA201591244A1 (ru) 2016-02-29
US20140309432A1 (en) 2014-10-16
KR102036469B1 (ko) 2019-10-24
ECSP13012790A (es) 2013-10-31
KR20190121406A (ko) 2019-10-25
SG10201700947UA (en) 2017-03-30
HRP20150725T1 (hr) 2015-08-14
MX377552B (es) 2025-03-10
US9221833B2 (en) 2015-12-29
CN103328480B (zh) 2016-05-25
HUE039966T2 (hu) 2019-02-28
CA2815082C (en) 2015-07-07
WO2013075029A1 (en) 2013-05-23
BR112013012091A2 (pt) 2019-09-10
EA201390576A1 (ru) 2013-11-29
HK1188989A1 (en) 2014-05-23
AU2012318253B8 (en) 2015-08-13
KR102241651B1 (ko) 2021-04-20
SI2635588T1 (sl) 2015-10-30
US8575135B2 (en) 2013-11-05
EA201890333A1 (ru) 2018-10-31
EP3778606A2 (en) 2021-02-17
US20180186806A1 (en) 2018-07-05
MX2020010330A (es) 2020-10-22
KR20210043734A (ko) 2021-04-21
AU2012318253B2 (en) 2015-08-06
IL252345B (en) 2022-01-01
EP2907816A1 (en) 2015-08-19
CY1116987T1 (el) 2017-04-05
NZ610525A (en) 2017-05-26
PH12013500976A1 (en) 2016-10-26
AU2012318253A8 (en) 2015-08-13
IL244123A0 (en) 2016-04-21
NZ737924A (en) 2019-06-28
EP2635588A1 (en) 2013-09-11
US9809600B2 (en) 2017-11-07
CO6791562A2 (es) 2013-11-14
PE20141163A1 (es) 2014-09-21
US8921341B2 (en) 2014-12-30
US20150299213A1 (en) 2015-10-22
US20130177530A1 (en) 2013-07-11
CR20130231A (es) 2013-09-19
MX361735B (es) 2018-12-14
PT2907816T (pt) 2018-10-18
JP2016199593A (ja) 2016-12-01
KR101890400B1 (ko) 2018-08-21
KR20140096239A (ko) 2014-08-05
CN105837584B (zh) 2018-07-13
MX346729B (es) 2017-03-30
MX2013005575A (es) 2013-09-05
RS57638B1 (sr) 2018-11-30
NZ720856A (en) 2017-12-22
UA119437C2 (uk) 2019-06-25
MD4403C1 (ro) 2016-09-30
SI2907816T1 (sl) 2018-10-30
JP2021001230A (ja) 2021-01-07
EP3431477A1 (en) 2019-01-23
PL3431477T3 (pl) 2021-04-06
CA2815082A1 (en) 2013-05-23
SI3431477T1 (sl) 2021-01-29
MY201670A (en) 2024-03-12
KR20200117043A (ko) 2020-10-13
US20140112885A1 (en) 2014-04-24
US20130156732A1 (en) 2013-06-20
PT3431477T (pt) 2020-12-15
PH12015502839A1 (en) 2019-05-15
ES2687291T3 (es) 2018-10-24
MD20130029A2 (ro) 2013-09-30
DK2907816T3 (en) 2018-09-24
JP2018024705A (ja) 2018-02-15
US20160083394A1 (en) 2016-03-24
MA34727B1 (fr) 2013-12-03
JP2019206597A (ja) 2019-12-05
PL2635588T3 (pl) 2015-10-30
US8940718B2 (en) 2015-01-27
EP2907816B1 (en) 2018-06-13
EA023644B1 (ru) 2016-06-30
RS54207B1 (sr) 2015-12-31
US9051340B2 (en) 2015-06-09
MD4521B1 (ro) 2017-10-31
MD4403B1 (ro) 2016-02-29
EA202190619A1 (ru) 2021-09-30
MY173045A (en) 2019-12-20
CN103328480A (zh) 2013-09-25
ME02196B (me) 2016-02-20
PL2907816T3 (pl) 2019-03-29
US20190276468A1 (en) 2019-09-12
UA110354C2 (uk) 2015-12-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10807990B2 (en) Antiviral compounds
AU2019202345B2 (en) Antiviral Compounds
HK40002411A (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
HK40002411B (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
HK1188989B (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
NZ737924B2 (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds
NZ720856B2 (en) Condensed imidazolylimidazoles as antiviral compounds

Legal Events

Date Code Title Description
FG4A Patent for invention issued