NO118064B - - Google Patents

Description

Fremgangsmåte for fremstilling av jordalkalimetallsalter av cycloserin.

Foreliggende oppfinnelse går ut på en

fremgangsmåte for fremstilling av et jordalkalimetallsalt av cycloserin bestående i

at sølvsaltet av antibiotisk cycloserin opp-slemmes i vann, der tilsettes til slammet

et vannoppløselig jordalkali-metallsalt som

har en anion som er istand til å danne et

vann-uoppløselig sølvsalt, det yannuopp-løselige sølvsalt som dannes av den resulterende oppløsning fjernes, og den gjen-værende oppløsning tørkes så at der fås det

faste jordalkali-metallsalt av antibiotisk

cycloserin.

Det antibiotiske cycloserin er et anti-bakterielt materiale med bredt spektrum

som er i besittelse av aktivitet likeoverfor

både Gram-negative og Gram-positive bak-terier innbefattet mykobakterier, som My-cobacterium ranae. Antibiotikumet fremstilles ved hjelp av en mikroorganisme som

er betegnet Streptomyces orchidaceus. Antibiotikumet er en amfoter substans, som

er i besittelse av svakt sure og svakt ba-siske grupper, og antibiotikumet er meget

oppløselig i vann, delvis oppløselig i gly-koler, isopropylalkohol, metanol, etanol og

aceton. Materialet er uoppløselig i heksan,

benzen, kloroform, eter, petroleumeter, di-oksan, 1-butanol, etylacetat og etyldiklorid.

Antibiotikumet smelter under spaltning ved

ca. 152° C og hydrolyserer ved 140° C med

1 N klorvannstoffsyre.

Ved fremstillingen av det antibiotiske

cycloserin kultiveres mikroorganismen

Streptomyces orchidaceus i et næringsmedium. Et medium som inneholder en passende proteinkilde og en passende kullhy-dratkilde er tilfredsstillende for cycloserin-fremstillingen, og der tilføres luft til me-diet som dyrkes ved en temperatur mellom ca. 20 og 30° C.

Det er nylig blitt påvist at cycloserin i den fri form er relativt ustabilt i vandig oppløsning, idet størsteparten av cycloseri-nets aktivitet går tapt bare etter en eller to dager i vandig oppløsning ved værelsestemperatur. Disse forhold gjør at det er uhensiktsmessig å anvende antibiotikumet hvis ikke den mengde som umiddelbart skal brukes, kan bringes i vandig oppløsning under sikre forhold.

Det har nu vist seg at nye salter av det antibiotiske cycloserin som fås lett og på en økonomisk måte med godt utbytte, er stabile i vandige oppløsninger i en len-gre tidsperiode.

De nye cycloserinsalter er jordalkalimetallsaltene av cycloserin. Jordalkalime-taller som anvendes ifølge oppfinnelsen ved fremstilling av saltene av cycloserin om-fatter kalsium, magnesium, barium og strontium. De nye salter kan fremstilles ved å oppslemme sølvsaltet av cycloserin i vann, hvoretter det tilsettes et vannopp-løselig jordalkalimetallsalt som oppviser en anion som er istand til å danne et uopp-løselig sølvsalt, som f. eks. jordalkalime-tallklorid, til slammet. Det utfelte sølvsalt, f. eks. sølvklorid fjernes fra oppløsningen av jordalkalimetallsaltet av cycloserin som dannes og derpå tørkes saltoppløsningen ved hvilken som helst hensiktsmessig fremgangsmåte som forstøvning-tørkning eller frysetørkning under vakuum for å få det amorfe jordalkalimetallsalt av cycloserin. Sølvsaltet av cycloserin kan fås ved hjelp av forskjellige fremgangsmåter. I henhold til en av disse fremgangsmåter som er beskrevet i patent nr. 94.567, ben-kullbehandles det filtrerte næringsmedium, i hvilket det antibiotiske cycloserin er frem-stilt ved kultivering av organismen Streptomyces orchidaceus, og derpå tilsettes sølvnitratet til det klarede næringsmedium med en pH varierende fra ca. 5.5 til 9.0. Utfelt sølvsalt av cycloserin fjernes derpå, fra den overliggende væske og tørkes.

De følgende eksempler skal tjene til å klargjøre oppfinnelsen.

Eksempel I.

10 gram av sølvsaltet av cycloserin som oppviste en styrke av 2.45 enh/mg ble

suspendert i 100 ml vann, og til denne su-spensjon ble tilsatt 2.64 gram vannfritt kalsiumklorid. Til den resulterende blan-ding ble tilsatt 2 pst. aktivt benkull, og blandingen ble omrørt og derpå filtrert. Den filtrerte oppløsning ble frysetørket under vakuum så at man fikk 4.6 gram kal-siumsalt av cycloserin som oppviste en styrke av 2/3 enh/mg og inneholdt 17.31

pst. kalsium og 15.9 pst. fuktighet.

500 mg av kalsiumsaltet av cycloserin ble oppløst i 5 ml vann, og oppløsningen lagret ved værelsestemperatur i en periode av 456 timer, og prøver av materialet ble periodisk tatt ut for å prøve cycloserinaktiviteten. Den følgende tabell angir resultatene av lagringsprøven av kalsiumsaltet av cycloserin i vandig oppløsning ved værelsestemperatur.

Til sammenligning ble 40 mg av fritt amorft cycloserin oppløst i 1 ml vann og lagret ved værelsestemperatur i en periode av 216 timer. Ved periodiske intervaller i lagringsperioden ble prøver uttatt for for-søk, og følgende tabell viser resultatene av lagringsprøven. På lignende måte ble 120 mg av fritt krystallinsk cycloserin oppløst i 1 ml vann og lagret i 36 timer ved værelsestemperatur. Prøver ble uttatt ved periodiske inter-Ivaller, og den følgende tabell viser resultatene av lagringsprøven.

Av de ovenanførte tabeller vil det sees at kalsiumsaltet av cycloserin er stabilt over en tidsperiode hvor den amorfe form for cycloserin og den krystallinske form for cycloserin taper praktisk talt all antibiotisk aktivitet.

Eksempel II.

■ En 100 mg/ml oppløsning av barium - saltet av cycloserin ble lagret ved værelses-

temperatur i en periode av 288 timer, og prøver av materiale ble periodisk tatt ut for å bestemme cycloserinaktiviteten. Føl-gende tabell angir resultatet av lagrings-prøven.

Eksempel III.

En 100 mg/ml oppløsning av strontium-saltet av cycloserin ble lagret ved værelsestemperatur i en periode av 288 timer, prøver av materialet ble periodisk tatt ut for å undersøke cycloserinaktiviteten. Den følgende tabell angir resultatene av lag-ringsprøven.

Eksempel IV. 10 gram av sølvsaltet av cycloserin ble oppslemmet i 50 ml vann og til slammen ble der tilsatt 4.84 gram magnesiumklorid, MgCl:>. 6H2O. Til den resulterende blan-ding ble der tilsatt 2 pst. aktivert benkull og omrørt og blandingen ble filtrert. Den filtrerte oppløsning ble derpå frysetørket under vakuum for å gi 4.65 gram av mag-nesiumsaltet av cycloserin som oppviste en styrke av 3.8 enh/mg og inneholdt 9.43 pst. magnesium. 100 mg/ml oppløsning av magnesium-saltet av cycloserin ble lagret ved værelsestemperatur i en periode av 168 timer, prø-ver av materialet ble periodisk tatt ut for å undersøke cycloserinaktiviteten. Den føl-gende tabell angir resultatene av lagrings-prøven.

Av de ovenfor anførte eksempler frem-går det at jordalkalimetallsaltene av cycloserin er stabile i en periode hvor den fri form av cycloserin taper praktisk talt all antibiotisk aktivitet.

Claims (1)

1. Fremgangsmåte for fremstilling av et jordalkalimetallsalt av cycloserin bestående i at sølvsaltet av antibiotisk cycloserin opp-slemmes i vann, der tilsettes til slammet et vannoppløselig jordalkalimetallsalt som har en anion som er istand til å danne et vann-uoppløselig sølvsalt, det vannuopp-løselige sølvsalt som dannes fjernes fra den resulterende oppløsning og den gjenvæ-rende oppløsning tørkes (f. eks. frysetør-kes), så at man får det faste jordalkalimetallsalt av antibiotisk cycloserin.