NO802713L - Fremgangsmaate til fremstilling av racemiske eller optisk aktive cefalosporin-analoge karbacefemforbindelser eller farmaseutisk akseptable salter derav - Google Patents

Fremgangsmaate til fremstilling av racemiske eller optisk aktive cefalosporin-analoge karbacefemforbindelser eller farmaseutisk akseptable salter derav

Info

Publication number
NO802713L
NO802713L NO802713A NO802713A NO802713L NO 802713 L NO802713 L NO 802713L NO 802713 A NO802713 A NO 802713A NO 802713 A NO802713 A NO 802713A NO 802713 L NO802713 L NO 802713L
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
group
carbon atoms
denotes
formula
hydrogen atom
Prior art date
Application number
NO802713A
Other languages
English (en)
Inventor
Tadashi Hirata
Takehiro Ogasa
Shigeru Kobayashi
Kiyoshi Sato
Chikahiro Urakawa
Akira Sato
Yukio Hashimoto
Seigo Takasawa
Original Assignee
Kyowa Hakko Kogyo Kk
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from JP11672079A external-priority patent/JPS5640683A/ja
Priority claimed from JP13698779A external-priority patent/JPS5661378A/ja
Priority claimed from JP2203580A external-priority patent/JPS56118084A/ja
Application filed by Kyowa Hakko Kogyo Kk filed Critical Kyowa Hakko Kogyo Kk
Publication of NO802713L publication Critical patent/NO802713L/no

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
    • C12P17/184—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing a beta-lactam ring, e.g. thienamycin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D463/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring
    • C07D463/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D463/14—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbacephalosporins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulfur-containing hetero ring with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hetero atoms directly attached in position 7
    • C07D463/16—Nitrogen atoms
    • C07D463/18—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof
    • C07D463/20—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof with the acylating radicals further substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D463/22—Nitrogen atoms further acylated by radicals derived from carboxylic acids or by nitrogen or sulfur analogues thereof with the acylating radicals further substituted by hetero atoms or by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen further substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07F9/568—Four-membered rings
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte til fremstilling av cefalosporin-analoge med den generelle
t formel:
hvor X betegner en acylgruppe, R-^-betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe eller en lavere acylgruppe, og R2betegner et hydrogenatom eller en:beskyttende gruppe for karboksylsyre, og farmasøytisk akseptable salter derav.
Foreliggende fremgangsmåta, ,angår en fremgangsmåte til fremstilling av optisk aktive-cefalosporin-analoge forbindelser med den generelle formel-'I .og mer spesielt optisk aktive forbindelser av cefalosporin-analoge med den generelle formel:
hvor Q betegner et hydrogenatom eller' en halogengruppe, A , betegner et hydrogenatom eller en ,substituert eller usubstituert alkyl-, alkenyl-, alkinyl-,; cykloalkyl-, aryl- eller acylgruppe, R, og R^ har den ovenfor angitte betydning, hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingéne har cis-konfigurasjon, og OA^-gruppen har syn-konfigurasjon, og farmasøytisk akseptable salter derav.
En karbacefemforbindelse, som er navngitt som beskrevet i nomenklaturen i J. Am. Chem. Soc. 9_6, 7584 (1974), hvori cefalosporinets svovelatom er.substituert med et karbonatom, og som har en substituert' metylgruppe i 3-stillingen, er beskrevet i den ovenfor nevnte litteratur- henvisning og i J. Med. Chem. _2j0, 551 (1977) . Det er imidler-tid ikke blitt omtalt forbindelser med sterk antibakteriell virkning. I japansk publisert, ikke undersøkt patentsøknad nr. 9296/79 (tysk offentliggjørelsésskrift nr. 2716707)
nevnes forbindelser med den generélle formel I hvor gruppen -OR^er erstattet med et hydrogenatom, men det er ikke beskrevet noen praktiske utførelsesformer til fremstilling av forbindelsene eller nevnt den antibakterielle virkning av disse.
Man har nå fremstilt karbacefem-forbindelser som har forskjellige substituenter ved 4-, 5- eller 3-stillingen. Forbindelsene er omtalt i beskrivelsene i japansk publisert, ikke undersøkt patentsøknad nr. 128591/79, 49376/80 og 59186/80 og i japanske patentsøknader nr. 162005/78 og 8408/79 (tysk offentliggjørelsesskrift nr. 2911787, engelsk patentsøknad nr. 2017103) osv. Ytterligere har man vært istand til å fremstille hittil ukjente acylerte karbacefem-forbindelser som er hittil ukjente, antibiotika med sterk antibakteriell virkning. Forbindelsene er omhandlet i japansk publisert, ikke undersøkt patentsøknad nr. 128591/79, 49375/80, 53290/80 og 59185/80 og i japanske patentsøknader nr. 162006/78, 162007/78, 162008/78, 8409/7.9 og 92035/79
(tysk offentliggjørelsésskrift nr.' 2911787, engelsk patent-søknad nr. 2017103 osv.).
I følgende beskrivelse med krav omtales forbindelsene med formel I, II, III .... forbindelse I, forbindelse II, forbindelse III osv.
De cefalosporin-analoge omtalt i ovennevnte be-skrivelser er alle fremstilt ved fullstendig syntetiske metoder, idet man anvender optisk inaktive, utgangsforbindelser, og de er optisk inaktive dl-forbindelser, bortsett fra en forbindelse som har en bestemt optisK aktiv acylgruppe, som f.eks. D-fenylglycin, omhandlet i den japanske patentsøknad 162006/78 (tysk offentliggjørelsésskrift nr. 2911787, engelsk patentsøknad nr. 2017103 osv.).
Man har nå vært istand til å fremstille optisk aktive cefalosporin-analoge som er omtalt:i japansk patentsøknad nr. 14534/79 (europeisk patentsøknad ). Det har nå vist seg at den optisk-. aktive forbindelse III med den generelle formel: hvor X og R 2 har den ovenfor angitte betydning, og R., betegner et hydrogenatom, en lavere ålkylgruppe eller en lavere acyloksygruppe; dvs. optisk aktive acylforbindelser fremstilt under anvendelse av optisk aktive forbindelser av cefalosporin-analoge med den generelle formel:
hvor R2, R^har den ovenfor angitte betydning, og hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene har cis-konfigurasjon, utviser uventet sterk antibakteriell virkning, dvs. 2 til 4 ganger kraftigere aktivitet overfor forskjellige Gram-positive og Gram-negative mikroorganismer i sammenligning med den tilsvarende optisk inaktive dl-forbindelse III.
Optisk inaktive dl-forbindelser tilsvarende forbindelse IV finnes som en blanding av like deler speilbildefor-bindelser med de generelle formler:
hvor R^og R., har den ovenfor angitte betydning.
De optisk aktive forbindelser beskrevet i japansk patentsøknad nr. 14533/79 og 14534/79 (europeisk patentsøknad ) antas å ha den absolutte struktur representert av den generelle formel IV-1 utfra forskjellige egenskaper,
sterkere antimikrobiell virkning av acylforbindelsene i forhold til de tilsvarende optisk inaktive dl-forbindelser og sammenheng mellom cefalosporinenes absolutte struktur og deres * aktiviteter.
I den ovenfor nevnte beskrivelse forklares den optisk aktive forbindelse å ha den absolutte konfigurasjon 7<x-H og 6ct-H (6R 7S) tilsvarende den generelle formel IV-1. Forbindelser i eksempel og referanseeksempler er også navngitt i forhold til den antatte absolutte strukturformel. Ytterligere
er det funnet at optisk aktive forbindelser er mer verdifulle som legemidler og antimikrobielle! midler osv., enn de optisk inaktive forbindelser..
Ved foreliggende fremgangsmåte fremstilles således visse acylforbindelser av cefalosporin-analoge med den generelle formel:
hvor X betegner en acylgruppe X-^CQ, som anvendes innenfor penicillin- og cefalosporinkjemien', R, betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe eller,en lavere acylgruppe,
R2betegner et hydrogenatom eller; en beskyttende gruppe for karboksylsyre, og hydrogenatomene;ved 6- og 7-stillingene har cis-konfigurasjon, og farmasøytisk akseptable salter derav. : ; :.
Ytterligere fremstilles ved foreliggende fremgangsmåte optisk aktive acylforbindelser :;,av cefalosporin-analoge representert med den generelle formel I.
Terapeutisk aktive cefalosporin-analoge med den generelle formel:
hvor Q, R^, R2og A ^ har samme betydning som ovenfor, utviser kraftig antibakteriell virkning.
De ved foreliggende fremgangsmåte benyttede utgangsforbindelser, dvs. forbindelser méd den generelle formel:
hvor R'^er det samme som eller forskjellig fra R^og betegner et hydrogenatom, en lavere.alkylgruppe med 1-5 karbonatomer eller en beskyttende gruppe for hydroksygruppen, og R'2betegner det samme som eller er forskjellig fra R ? og betegner et hydrogenatom eller en beskyttende gruppe for karboksylgruppen, er omhandlet i tysk offentliggjørelses-skrift nr. 2911786, engelsk patentsøknad , og finnes som en blanding av like deler optiske isomere, nemlig forbindelsene V-l og V-2, som er speilbilder av hverandre:
t
De omhandlede optisk aktive forbindelser antas likeledes å ha den absolutte struktur betegnet med den generelle formel V-l definert utfra de .forskjellige egenskaper, sterkere mikrobiell virkning av acylforbindelsene i forhold til virkning av de tilsvarende optisk inaktive acyl dl-forbindelser, sammenhengen mellom cefalosporinenes absolutte struktur og aktivitetene herav og. data angitt i japansk patentsøknad nr. 14533/79 og 14534/79 (europeisk patent-søknad ) .
Likeledes antas de omhandlede acylforbindelser av de optisk aktive cefalosporin-analoge å ha den absolutte struktur• betegnet med den generelle formel:
I det følgende beskrives de optisk aktive forbindelser som å ha den absolutte konfigurasjon tilsvarende 7a-H og 6a-H (6R 7S), dvs. konfigurasjonen:illustrert med den generelle formel V-l eller VI, og i de følgende eksempler og referanseeksempler der forbindelsene beregnet i overensstemmelse med. den antatte absolutte strukturformel slik som i japansk patentsøknad nr. 14533/79 og 14534/79 (europeisk patentsøknad ) .
Forbindelsen I fremstilles: ved å acylere forbindelsen V eller forbindelsen V-l, salter derav, et derivat, hvor hydrogenet i aminogruppen ved 7-stillingen eller hydroksygruppen ved 4-still.ingen er substituert med en trialkylsilylgruppe osv., eller en forbindelse funksjonelt ekvivalent hermed (disse er omtalt som "7-aminoforbindelsen") med en karboksylsyre med den generelle formel:
hvor X2betegner en gruppe X^CO eller et derivat derav, hvor den/de funksjonelle grupper er beskyttet, og X^CO har samme betydning som angitt ovenfor, -eller et reaksjonsdyktig derivat derav, og eventuelt ved å fjerne den beskyttende gruppe i gruppen X2, den beskyttende gruppe R'2 eller den beskyttende gruppe for hydroksygruppeh ved 4-stillingen på vanlig kjent måte.
Som beskyttende grupper som krever beskyttelse i X^, kan nevnes en hydroksygruppe, en tiolgruppe, en aminogruppe,
en karboksygruppe og en sulfogruppe. Som beskyttende grupper anvendes de som er vanlig innenfor- peptid-syntesekjemien. Eksempler på beskyttende grupper beskrevet i "Protective Groups in Organic Chemistry", J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973.
Som eksempler på reaksjonsdyktige derivater av karboksylsyren med den generelle formel VII kan nevnes Cl) et syrehalogenid, (2) et syreanhydrid, (3) et blandet syreanhydrid, (4) en aktiv ester, (5) et syreazid osv.
I den før omtalte generelle formel I er den lavere alkylgruppe R, en rett eller forgrenet alkylgruppe med 1-5 karbonatomer, som f.eks. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, sek.-butyl, t.-butyl og lignende. Den lavere acylgruppe betegnet R^CO, hvor R^betegner en rett eller forgrenet alkylgruppe med 1-5 karbonatomer er f.eks. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, sek.-butyl, t.-butyl og lignende.
I den generelle formel I ér gruppen betegnet R2et hydrogenatom eller en beskyttende gruppe for karboksylsyre som vanligvis benyttet innen penicillin- og cefalosporinkjemien, som f.eks. en alkylgruppe med 1-5 karbonatomer, som metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl<:>, isobutyl, sek.-butyl, t.-butyl osv., en halogenert alkylgruppe med 1-5 karbonatomer, som 2,2,2-trifluoretyl, 2,2,2-trikloretyl osv., en arylmetylgruppe med 7-20 karbonatomer, som f.eks. benzyl, difenylmetyl, trifenylmetyl osv., en arylmetylgruppe' med 7-20 karbonatomer, og som har metoksy, nitro osv. på■ :fehylringen, en substituert silylgruppe som f.eks. trimetylsilyl eller trifenylsilyl, eller en gruppe som enzymatisk eller Mkke-enzymatisk lett kan fjernes in vivo, f .eks. en gruppe1 med den generelle formel:
hvor R^betegner et hydrogenatom eller en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, og R,- betegner en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkpksygruppe med 1-6 karbon atomer, eller en fenylgruppe osv.
Acylgruppen X i den generelle formel I er betegnet med X^CO, hvor X^betegner en gruppe valgt blant følgende 5 grupper: (1) en cyanometylgruppe eller en gruppe med den, generelle formel:hvor B betegner en cykloheksenylgruppe, en cykloheksadienylgruppe, en fenylgruppe eller en 5- eller 6-leddet heterocykel, som f.eks. furyl, tienyl, pyrrolyl, tiazolyl, oksa-zolyl, isotiazolyl, isoksazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, tiazolyl, tetrazolyl, pyridinyl, pyrimidihyl, pyrazinyl, pyridazinyl, triazinyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 5,6-dihydro-l,4-ditiin-2-yl osv., Abetegner substituenten/substituentene på ringen B, som er valgt blant et:hydrogenatom, en hydroksygruppe, en alkoksygruppe med 1-4 karbonatomer, en halogengruppe, en nitrogruppe, en aminogruppe, en aminometylgruppe, en metylsulfonaminogruppe og en acyloksygruppe med 1-4 karbonatomer, n er 0 eller et helt tall på 1-5, og Abetegner et hydrogenatom, en aminogruppe, en hydroksygruppe, en karboksygruppe eller en sulfogruppe, (2) en gruppe med den generelle formel:hvor A, B og n har den ovenfor angitte betydning, Aog A^ betegner det samme eller er forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4karbonatomer, en gruppe med den generelle formel:hvor A,, betegner en alkylgruppe med. 1-4 karbonatomer, eller en gruppe med den generelle formel.:'hvor Ag og Aer like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer eller et alkalimetall, ogbetegner en gruppe med den generelle formel:hvor Ag og A'g er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, eller en gruppe med den generelle- formel:hvor Ag betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, en metansulfonylgruppe eller en fufuryliden-iminogruppe, og A'g betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, (3) en gruppe med den generelle formel:hvor A, B og n har den ovenfor angitte betydning, og Aq betegner en substituert arylgruppe éller en substituert eller usubstituert mono-, bi- eller;tricyklisk heterocykel med den generelle formel:(Y betegner et oksygen eller svovelatom), (4) en gruppe med den generelle formel:hvor A, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^ betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkenylgruppe med 2-6 karbonatomer, en lavere alkinylgruppe med 2-6 karbonatomer, en cykloalkyl-gruppe med 3-6 karbonatomer eller■en arylgruppe, og disse grupper kan være substituert med passende substituenter som f.eks. karboksy, cyano, halogen, karbamoyl eller en lavere alkyloksykarbonylgruppe med 1-4 karbonatomer, (5) en gruppe med den generelle formel:hvor Bbetegner en trifluormetylgruppe, en cyanometylgruppe eller en gruppe —B-, hvor A, n og B har den ovenfor angitte betydning, og Z betegner ét Oksygenatom eller et svovelatom.
Som en spesielt interessant acylgruppe X kan nevnes acylgruppen X^CO, hvor X^betegner hvor A^betegner en aminogruppe og/eller en halogengruppe, B er en 5- eller 6-leddet heterocykle som f.eks. tiazolyl, tiadiazolyl og pyrimidyl, dsv. (A2.~^n—B_ er en am:'-nosu^)S'':;'-~ tuert 5- eller 6-leddet heterocykel, som f.eks. 2-amino-4-tiazolyl, 2-amino-5-halogen-tiazolyl-4-yl, 3-amino-l,2,4-tiadiazolyl-5-yl og 4-amino-pyrimidin-2-yl, og A^ har den ovenfor angitte betydning/..,
I det ovenfor anførte representerer Y.^ en gruppe valgt blant følgende fem grupper:
(l<1>) En cyanometylgruppe eller en gruppe med den generelle formel:
hvor B og n har den ovenfor angitte betydning, A'^betegner en substituent som er valgt blant ét hydrogenatom, en hydroksy-,, gruppe, en beskyttet hydroksygruppe, en alkoksygruppe med 1-4 karbonatomer, en halogengruppe, en nitrogruppe, en beskyttet aminogruppe, en beskyttet aminometylgruppe, en metylsulfonamidogruppe og en acyloksygruppe med 1-4 karbonatomer, og A<1>2betegner et hydrogenatom, én beskyttet aminogruppe, en hydroksygruppe, en beskyttet hydroksygruppe, en karboksygruppe, en beskyttet karboksygruppe, en sulfogruppe eller en beskyttet sulfogruppe, (2') en gruppe med den generelle formel:hvor A'-^, A, A, B og n har den ovenfor angitte betydning, (3') en gruppe med den generelle formel:hvor A'^, ABn nar ^en ovenfor angitte betydning, (4) en gruppe med den generelle fOrmel:hvor A, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A, ~ betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkenylgruppe med 2-6 karbonatomer, en lavere alkinylgruppe med 2-6 karbonatomer, en cykloalkyl-gruppe med 3-6 karbonatomer-eller en arylgruppe, og disse grupper kan være substituert med en passende substituent valgt blant en beskyttet karboksygruppe, en cyanogruppe, en .halogengruppe, en karbamoylgruppe:og en lavere alkyloksykarbonylgruppe med 1-4 karbonatomer, (5') en gruppe med den generelle formel:hvor B'betegner en trifluormetylgruppe, en cyanometylgruppe eller en gruppe med den generelle formel (A'-j4-^—B_ / hvor A', n og B har den ovenfor angitte betydning, og Z betegner et oksygenatom eller en sulfogruppe.
Dersom betegner et hydrogenatom, eller X betegner en acylgruppe med en karboksygruppe eller en sulfogruppe, kan forbindelsene med den generelle formel I være salter med farmasøytisk akseptabele uorganiske eller organiske baser. Videre, dersom X betegner en acylgruppe med en aminogruppe, kan forbindelsene med den generelle formel I være salter med farmasøytisk akseptable uorganiske eller organiske syrer. Som salter kan nevnes klorider, sulfater, fosfater, formiater, malater, fumarater, natriumsalter, kaliumsalter, magnesium-salter, organiske aminsalter osv.'
Forbindelser med den generelle formel I omfatter alle stereoisomere ved 4-, 6- og 7-stillijigene. Forbindelser med den generelle formel V omfatter på samme måte alle stereoisomere med 4-, 6- og 7-stillingene. Blant de stereoisomere har de som har cis-konfigurasjonen ved 6- dg 7-stillingene, høyere antibakteriell virkning enn de trans-isomere, og derfor, er de cis-isomere mer verdifulle som antibiotika.
=NOA^1~gruppen i acylgruppen har to geometriske isomere, dvs. syn og anti.
Siden den syn-isomere er bedre enn den anti-isomere med hensyn til antibakteriell virkning, er den syn-isomere mer verdifull som antibiotikum.
I foreliggende beskrivelse med krav omfatter en heterocykel, som f.eks. 2-amino-tiazolylgruppen i acylgruppen dens tautomere form, 2-imino-tiazolinylgruppen: 2-amino-tiazolyl-gruppe 2-imino-tiazolinyl-gruppe Forbindelsen I fremstilles;ved å acylere forbindelsen V med en karboksylsyre med den generelle formel
hvor har en ovenfor angitte betydning.
Acyleringsreaksjonen utføres ved vanlige metoder benyttet innen penicillin- og cefalosporin-kjemien.
Skjønt slike metoder er beskrevet i tysk offentlig-gjørelsésskrift nr. 2911787 og engelsk patentsøknad nr. 2017103, omtales acyleringsmetodene i, følgende avsnitt.
Forbindelsen V, salter derav, et derivat hvor hydrogenet i aminogruppen eller hydroksygruppen ved 4-stillingen er substituert med en trialkylsilylgruppe osv., eller en forbindelse funksjonelt ekvivalent hermed '(disse omtales som "7-amino-forbindelser"), acyleres med eh karboksylsyre med den generelle formel VII eller et reaksjonsdyktig derivat derav, eventuelt etterfulgt av fjerning av,den beskyttende gruppe i gruppen X2, den beskyttende gruppe R2' eller den beskyttende gruppe i hydrosygruppen ved 4-stillingen på vanlig måte. Acyleringsreaksjonene som anvender de ovenfor nevnte derivater, beskrives nærmere nedenfor.
iil_^§£odei_hvor_det_benYttes_et_SYreh
En 7-amino-forbindelse og.et syrehalogenid underkastes kondensasjon, fortrinnsvis 1 nærvær av en protonakseptor.
Som protonakseptor anvendes uorganiske baser, som f.eks. natriumkarbonat, kaliumkarbonat, natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd osv., og organiske baser som trietylamin, N-metylmorfolin, pyridin osv.
Som oppløsningsmiddel anvendes et hvilket som helst inaktivt oppløsningsmiddel som ikke påvirker reaksjonen, fortrinnsvis en eter, som f.eks. tetrahydrofuran, dimetoksy-etan osv., en ester som f.eks. etylacetat osv., et halogenert hydrokarbon som f.eks. metylenklorid, kloroform osv., et amid som f.eks. dimetylformamid, dimetylacetamid, heksametylfosfor-amid osv., et sulf oksyd som f. eks .;■ dimetylsulf oksyd osv., eller vann alene eller i blanding.
Reaksjonen utføres ved en temperatur på fra -20 til 40°C.
i2i_Metode_som_anvender_et_SYreanh
En 7-aminoforbindelse og et syreanhydrid underkastes kondensasjon i et inaktivt oppløsningsmiddel. Oppløsnings-midlene, temperaturen osv., benyttet i metode 1, anvendes også ved denne metode.
Syreanhydridmetoden anvender fortrinnsvis dicyklo-heksylkarbodiimid.
iJi_Metode_som_anvender_et_blandet_SYreanhYdrid
En 7-aminoforbindelse og■et blandet syreanhydrid underkastes kondensasjon i et inaktivt oppløsningsmiddel.
Det blandede syreanhydrid:fremstilles på vanlig måte, f.eks. ved metoden hvor en tilsvarende karboksylsyre X2COOH
og en klorkarbonsyreester omsettes i inærvær av en base.
Oppløsningsmidlet, temperaturen osv., er den samme som benyttes i metode 2.
_(4) Metode_som_anvender_en_aktiv_est^
En 7-aminoforbindelse og en<aktiv ester underkastes kondensasjon i et inaktivt oppløsningsmiddel. Som aktiv ester anvendes fenylester, p-nitrofenylester, p-nitrotiofenylester, triklorfenylester, cyanometylester, N-hydroksysuccinimidester osv.
Oppløsningsmidler, temperaturer osv., er det samme som benyttet i de ovenfor beskrevne metoder.
_(5) Metode_som anvender et_sy_reazid
En 7-aminoforbindelse og en syreazidforbindelse underkastes kondensasjon som beskrevet.ovenfor.
Syreazidet kan fremstilles ved å omsette hydrazidet
av en tilsvarende karboksylsyre med salpetersyrling ved en temperatur på fra -20 til 0°C.
Dersom karboksylsyrene eller de reaksjonsdyktige derivater derav har slike funksjonelle grupper som amino, hydroksy, tiol, karboksy, sulfo osv., som er følsomme overfor acylering, beskyttes disse grupper fortrinnsvis med passende beskyttende grupper før kondensasjonen.
Som eksempler på aminobeskyttende grupper kan nevnes t-butyloksykarbonyl, benzyloksykarbonyl, trikloretyloksy-karbonyl, trityl, formyl, kloracetyl, trialkylsilyl, proton, (3-diketon, 3-ketoester osv. Som et eksempel på en forbindelse beskyttet med et proton kanhevnes forbindelsen:
Som en forbindelse beskyttet med en (3-ketoester kan nevnes forbindelsen med formelen: :
Som hydroksybeskyttende gruppe kan nevnes benzyl, benzyloksykarbonyl, trityl, tetrahydrOpyranyl, t-butyl osv.
Som den karboksybeskyttende gruppe kan nevnes t-butyl, benzyl, p-metoksybenzyl, p-nitrobenzyl, benzhydryl osv.
Ved acyleringen er beskyttelsen av hydroksygruppen ved 4-stillingen i forbindelsen V.ikke absolutt påkrevet. Dersom hydroksygruppen beskyttes, fjernes den beskyttende gruppe etter acyleringen. Som eksempel på den beskyttende gruppe av hydroksygruppen kan nevnes en trialkylsilylert forbindelse som anvendes til beskyttelse av aminogruppen.
Som tiolbeskyttende-gruppe kan nevnes benzyl, trityl,
benzyloksykarbonyl, p-nitrobenzyl osv.
Innføring og fjerning av de ovenfor omtalte beskyttende grupper utføres ved alminnelig anvendte metoder slik som beskrevet i "Protective Group;in Organic Chemistry".
Fjerning av de karboksybeskyttende grupper R'2ut-føres ved vanlige metoder som anvendes av fagmannen innen penicillin- og cefalosporinkjemien-, fortrinnsvis ved (1) katalytisk reaksjon, (2) fjerning ved hjelp av syre, (3) spalting under anvendelse av en Lewis-syre, (4) hydro-lyse, (5) en reduksjon som er forskjellig fra en katalytisk reduksjon under anvendelse av Zn-eddiksyre, og (6) en fremgangsmåte som anvender esterase.
De optisk inaktive forbindelser av utgangsforbindelsene som anvendes ved foreliggende fremgangsmåte, fremstilles ved fremgangsmåten omhandlet i japansk: publisert ikke-undersøkt patentsøknad nr. 128591/79, 4337/80 og 49376/80 og i japansk patentsøknad nr. 8408/79 (tysk offentliggjørelsésskrift nr. 2911787, engelsk patentsøknad nr. ;2017103) , hvor et eksempel er illustrert i følgende reaksjonsskjerna I:
Ved denne metode fremstilles fortrinnsvis forbindelser hvor hydroksygruppen ved 4-stillingen er i cis-konfigurasjon til hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene. De forbindelser hvor hydroksygruppen har trans-konfigurasjon til hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene, fremstilles ved fremgangsmåten angitt i reaksjonsskjerna II:
i
Forbindelsene 4, 6, 10 og 11 anvendes som utgangs-
't
forbindelsen V. Forbindelse I i.reaksjonsskjema I fremstilles som beskrevet i japansk offentliggjort, ikke-undersøkt patent-søknad nr. 128591/79, fortrinnsvis i japansk patentsøknad nr. 53076/79, hvorpå det er angitt eksempler i følgende reaksjonsskjema III og reaksjonsskjema IV:
Fremgangsmåtene i reaksjonsskjema I, II, III og IV beskrives nærmere nedenfor i referanseeksemplene 1-9.
Videre er de optisk aktive forbindelser av utgangs-materialene som anvendes ved foreliggende- fremgangsmåte, først fremstilt ved en lignende metode omhandlet i japansk patent-søknad nr. 14533/79 og 107070/79 (.europeisk patentsøknad nr. ).
Optisk aktive forbindelser av cefalosporin-analoge
med den generelle formel V eller forbindelser med den antatte absolutte strukturformel V-l, fremstilles ved optisk selektiv deacylering av forbindelsen med den generelle formel:
hvor Rg betegner en substituert elier usubstituert umettet 6-leddet karbocyklisk ring, en 5- eller 6-leddet heterocykel eller en fenoksygruppe, Y betegner et hydrogenatom, en aminogruppe, en hydroksygruppe ellér en lavere alkylgruppe, og R^ogR2har den ovenfor angitte betydning.
Som den umettede 6-leddede, karbocykliske gruppe og den 5- eller 6-leddede heterocykel kan nevnes en fenylgruppe, en cykloheksenylgruppe, en cykloheksadienylgruppe, en tienyl-gruppe, en furylgruppe, en pyrrolylgruppe, en tiazolylgruppe, en isotiazolylgruppe, en oksazolylgruppe, en isooksazolyl-gruppe, en imidazolylgruppe, pyrazolylgruppe, en triazolyl-gruppe, en tetrazolylgruppe, en pyridinylgruppe og en pyrazinyl-gruppe.
Som substituent kan nevnes' en. hydroksygruppe, et halo-genatom, en nitrogruppe, en metansulfonamidgruppe og lignende. Som den lavere alkylgruppe kan nevnes en rett eller forgrenet alkylgruppe med 1-5 karbonatomer, som f.eks. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl,,sek.-butyl, t-butyl og lignende.
Den optisk selektive deacylering av forbindelse VIII til den optisk aktive forbindelse'V-l utføres i nærvær av celler eller behandlet materiale fra dyrkningsbuljongen av en mikroorganisme som er i stand til å frembringe en optisk aktiv forbindelse V-l ved optisk selektiv deacylering av forbindelsen VIII eller et enzym som er fremstilt utfra mikroorganismer.
Som mikroorganismer som er istand til optisk selektiv deacylering, kan anvendes mikroorganismer som hører til slekten Aeromonas, Achromobacter,: Arthrobacter, Acetobacter, Alcaligenes, Escherichia, Xanthombhas, Kluyvera, Gluconobacter, Clostridium, Comamonas, Corynebacterium, Sarcina, Staphylo-coccus, Sporillum, Bacillus, Pseudompnas, Flavobacterium, Brevibacterium, Protaminobacter, Preoteus, Beneckea, Micrococcus, Mycoplana, Rhodopseudomonas, Nocardia, Neurospora, Talaromyces eller Acinetobacter.
Følgende stammer er eksempler på mikroorganismer:
Mikroorganismene nr. 3 2 og 35 anvendes ved fremstilling av forbindelsen VIII, hvor Rg betegner en fenoksygruppe, og Y betegner et hydrogenatom.
Ved den optisk selektive deacylering kan følgende materialer anvendes isteden for ehzymer frembragt av de ovenfor nevnte mikroorganismer. 1. Dyrkningsbuljongen fra mikroorganismer eller behandlet materiale derav. 2. Celler utvunnet fra dyrkningsbuljongen ved sentrifugering, som ytterligere kan være vasket med saltvann (vanligvis ca. 1%), bufferoppløsning og lignende, eller en celle-suspensjon. 3. En suspensjon, av istykker revne celler, dvs. en suspensjon av cellelegemer som er revet istykker mekanisk
eller kjemisk.
4. Cellefri ekstrakt, dvs. en væske' fremstilt ved å fjerne istykker revne cellelegemer fra .suspensjonen av istykker
revne celler.
5. Renset enzymoppløsning som er .; oppnådd ved å utvinne enzym-proteinet med ammoniumsulfat fra :.det cellefrie ekstrakt og underkaste enzymproteinet.gelfiltrering, ioneveksler-cellulosesøylekromatografi, ioneveksler-"Sephadex"-søylekromatografi og lignende.
Det kan anvendes celler eller renset celleenzym immobilisert ved en alminnelig benyttet metode.
Reaksjonen utføres ved en temperatur på 0-50°C, fortrinnsvis ved 20-45°C og ved en ,pH-yerdi på 4-10 i et inaktivt oppløsningsmiddel som ikke har innvirkning på reaksjonen.
Som oppløsningsmiddel anvendes som oftest vann. For
å oppløse substratet/substratene,;cefalosporin-analoge, kan organiske oppløsningsmidler som adetqn, metanol, etanol, N,N-dimetylformamid, dimetylsulfoksyd:, og lignende anvendes. Det er effektivt å tilsette fosfatbuffer, Veronal-buffer eller sitronsyrebuffer for å kontrollere' pH-verdien i reaksjonen. Reaksjonstiden som er påvirket av arten og konsentrasjonen av enzymer, arten og konsentrasjonen av,substratet, reaksjons-temperaturen eller reaksjonens pH-verdi, er vanligvis fra 3 0 minutter til 24 timer. Det foretrekkes å avslutte reaksjonen når réaksjonshastigheten når maksimum.
Cellekonsentrasjonen er vanligvis 1-50 mg tørrvekt pr. ml reaksjonsoppløsning. Dersom det anvendes et renset enzym, er det passende å anvende den mengde enzym som har samme aktivitet som mengden av tørre celler. Substratforbindelsen VIII anvendes i en mengde på 0,5-5.0 mg pr. ml reaksjonsopp-løsning.
Dersom det finnes enzymer som forhindrer reaksjonen, som f.eks. 3~laktamase, esterase og lignende i cellelegemet, kan det anvendes en mutant stamme'som inneholder mindre av disse enzymer. Ytterligere kan inhibitorer overfor slike enzymer tilsettes reaksjonssystemet for å forøke reaksjons-hastigheten.
Etter at reaksjonen er fullført,utføres isoleringen
av den angjeldende forbindelse ved; hjelp av alminnelig benyttede metoder, som anvendes for .å isolere og rense organiske forbindelser utvunnet fra dyrkningsbuljonger, som f.eks. adsorpsjon på forskjellige bærestoffer, ionevekslerkromato-grafi, gelfiltrering, væske-væske-ekstraksjon og lignende.
Blant forbindelsene betegnet ;med den generelle formel V, oppnås de optisk aktive forbindelser av cefalosporin-analoge med den generelle formel: hvor har den ovenfor angitte betydning, R2 ' betegner en beskyttende gruppe for karboksylsyren, og hydrogenatomet ved 6- og 7-stillingene har cis-konfigurasjon, ved :forestring av de optisk aktive cefalosporin-analoge med den generelle formel:
hvor R^har den ovenfor angitte betydning, og hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene er i cisrkonfigurasjon, ved hjelp av alminnelige metoder.
Forbindelsen VIII fremstilles ved å acylere forbindelsen V, et derivat av forbindelsen V, hvori aminogruppen ved 7-stillingen eller hydroksygruppen ved 4-stillingen eventuelt er passende beskyttet, eller en funksjonelt ekvivalent forbindelse derav ved hjelp av en karboksylsyre med den generelle formel:
't
hvor Rg og Y har den ovenfor angitte;betydning, ved hjelp av et reaksjonsdyktig derivat av karboksylsyren eller et derivat av karboksylsyren hvori aminogruppen:' eller hydroksygruppen er beskyttet med en beskyttende gruppe■>. hvoretter man fjerner den beskyttende gruppe ved vanlig benyttede metoder dersom dette er nødvendig. Metoder for å fremstille forbindelsen VIII er beskrevet i verserende ansøkning .........
De beskyttende grupper, metodene for fjerning av disse og acyleringsmetodene omtalt ovenfor anvendes ved frem-stillingen av forbindelsen VIII, og disse metoder er angitt 1 referanseeksemplene.
Oppfinnelsen forklares nærmere i følgende eksempler.
Eksempel 1
E^§m§!:ii:LiD2_§Y_li§£§5iZ§ll Iii2i22okt-2-en-8-on-2-karboksYlsy_re
1-1. Fremstilling av suspensjon av istykker revne celler (1) Dyrking av en mikroorganisme som er istand til optisk selektivt å deacylere.
Som kimstamme anvendes Kluyvera citrophila ATCC 21285 (biologiske egenskaper er beskrevet i J. General Applied Microbiology 3, 28-31 (1957)).
Som kimsubstrat anvendes en vandig oppløsning inneholdende 1% polypepton, 1% gjæreks^rakt, 0,5% kjøttekstrakt, 0,5% natriumglutamat og 0,25% natriumklorid innstilt til pH 7,0 ved hjelp av 5N NaOH. En øyefull av kimstammen inokuleres i 10 ml av kimsubstratet i et stort reagensrør
(50 ml), og man dyrker ved en temperatur på 30°C i 24 timer. Hele kimbuljongen overføres til 300 ml dyrkningssubstrat i en 2 liters Erlenmeyer-kolbe og det foretas dyrking under om-rystning ved 30°C. Sammensetningen av dyrkningssubstratet er den samme som kimsubstratet. (2) Fremstilling av suspensjon av istykker revne celler.
Etter dyrking i 24 timer sentrifugeres dyrknings-bul jongen hvorved man får cellélegeméne. Cellene vaskes to ganger med 50 ml 0,9% saltvannsoppløsning og de oppslemmes i en konsentrasjon på 40 mg/ml tørrvekt i 1/30 M fosfatbuffer-oppløsning (pH 8,0).
1-2. Fremstilling av en substratoppløsning
I dette trinn tilsettes 200' :ntg (t) -cis-7|3-fenyl-acetamido-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4 > 2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre, som er fremstil i referanseeksempel 9 nedenfor, til 9 ml 1/30M fosfatbuffer (pH 8,0).'Siden forbindelsen ikke oppløses, tilsettes 2N NaOH i små- porsjoner og blandingen innstilles igjen til pH 8,0 for å oppløse forbindelsen. Tilslutt tilsettes, avionisert vann.til i alt 10 ml oppløsning.
1-3. Enzymomsetning
I dette trinn tilsettes 10 ml av suspensjonen av istykker revne celler beskrevet oyenfor til 10 ml substrat-oppløsning, og enzymomsetningen utføres ved en temperatur på 40°C i 80 minutter. Tidsforløpet .av reaksjonen er angitt i tabell 1.
1-4. Isolering og rensing av den ønskede forbindelse
(a) Etter reaksjonen er fullendt, fjernes cellene ved sentrifugering fra reaksjonsoppløsningen. Den ovenstående væske konsentreres under redusert* trykk og påføres en søyle (diameter 0,88 cm, høyde 70 cm), pakket med 43 ml "Dianion HP-20AG" (100-200 mesh). Elueringen utføres med avionisert vann og den ønskede forbindelse elueres fra 36 ml til 45 ml av eluatet. Eluatet konsentreres.under redusert trykk og underkastes high speed-væskekromatpgrafi, idet man anvender "TRI ROTAR" og "Shodex OH Pak B-80 4"., • Eluering utføres med vann. Eluatene konsentreres under redusert tykk og lyofiliseres, hvorved man får 37,6 mg av;et hvitt pulver.
Forbindelsen har følgende egenskaper:
IRKM5 (cm"1): 3530, 3190, 1746, 1620, 1550 maks ' ■:' NMR (D20, med DSS som indre standard)6:
6,17 (1H, d, J = 5,4 Hz)
4,95 (1H, d, J = 5,4 Hz)
4,59 (1H, m)
4,11 (1H, m)
2,23 (1H, m)
1,80 (1H, m)
Forbindelsenes egenskaper, svarer godt til egenskapene til "den tilsvarende dl-forbindelse.■ Verdien av den optiske dreiing er [a]^° = +24,2° (c a 0,153, H20) .
Det antas at forbindelsen,er en blanding av den ønskede forbindelse fremstilt ved rensing som beskrevet i metodene (b) og (c) og en betydelig mengde av en høyre-dreiende forbindelse.
Forbindelsen utviser en ninhydrin-positiv enkelt flekk ved en Rf-verdi på 0,38 ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografi (tynnsjiktsplate "Merck nr. 5721", oppløsnings-middel til fremkalling etanol:eddiksyre:vann = 4:1:1). Rf-verdien faller sammen med verdien- for.den optisk inaktive dl-forbindelse. (b) Etter enzymomsetningen er .'fullstendig - utført som beskrevet i eksempel 1-1-1-3, fjernes cellelegemene fra reaksjonsoppløsningen under sentrifugering og den ovenstående væske konsentreres under redusert trykk. Konsentratet på-føres en søyle (diameter 0,88 cm, høyde -70 cm) pakket med 43 ml "Diaion HP-20AG", 100-200 mesh. Elueringen utføres med vann. Eluerende fraksjoner (36 ml - 45 ml) inneholdende den ønskede forbindelse konsentreres■igjen under redusert trykk. Konsentratet påføres en søyle (diameter 0,88 cm,
høyde 33 cm) pakket med 20 ml "Diaion WA-30-S", som i for-veien er overført til eddiksyreformen ved å lede 40 ml 0,5N vandig eddiksyre gjennom søylen. Etter at 20 ml vann er ledet gjennom søylen for å fjerne:forurensende produkter som f.eks. uorganiske ioner, ledes 0;5N vandig eddiksyre gjennom søylen. Den ønskede forbindelse elueres i fraksjoner (30-45 ml) med 0,5N vandig eddiksyre.. Fraksjonene lyofiliseres hvorved man får 32 mg av den ønskede forbindelse som et svakt gult pulver. Forbindelsenes .egenskaper er følgende, og forbindelsen er identifisert som acetatet.
IR maksV(cm_1): 3400'1805, 1760, 1745(sh), 1600, 1560 (sh),
1410
NMR (D20'rae^ DSS som indre standard) 6 (ppm) :
6,16 (1H, J = 5,4 Hz)
4,89 (1H, d, J - ,5,4 Hz)
4,57 (m, overlappet med signalet som skyldes
H20)-
4,08 (1H, m)
2,21 (1H, m)
1,97 (3H, s)
1,78 (1H, m)
Optisk dreiing [a]D20° = -62,1° (c=0,16, IM fosfatbuffer, pH 7,0) .
(c) Fremstilling av (4S, 6R, 7S):r7-amino-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karbqksylsyre (alternativ metode): (c-1) Fremstilling av (4S,6R,7S)-7-t-butoksykarbonylamino-4-hydroksy-l-azabicyklo [4,2, 0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre:
Etter at enzymomsetningen.:' er fullført som beskrevet i eksempel 1-1 til 1-3, fjernes céllelegemene fra reaksjons-oppløsningen ved sentrifugering, og den ovenstående væske konsentreres under redusert trykk. Konsentratet påføres en søyle (diameter 0,88 cm, høyde 70 cm) pakket med 4 3 ml "Diaion HP-20", 100-200 mesh. Elueringen utføres med vann. De eluerte fraksjoner (36 ml-45 ml) kombineres, det foretas konsentrasjon under redusert trykk og lyofilisering, hvorved man får 100 mg hvitt pulver. Til pulveret tilsettes 1,0 ml dioksan, 1,0 ml vann, 21 yl trietylamin, 40 mg S-t-butoksy-karbonyl-4,6-dimetyl-2-merkaptopyridin, og blandingen om-røres ved romtemperatur i 4 dager og:ved 4 0°C i 17 timer. Reaksjonsoppløsningen konsentreres 'under redusert trykk til ca. det halve volum. Resten vaskes med etylacetat i alt tre ganger og vannlagets pH-verdi innstilles til ca. 3 med 10% vandig sitronsyre under isavkjøling. ' Etter ekstraksjonen med etylacetat fem ganger, vaskes etylacetatlaget med mettet saltoppløsning i alt to ganger, det tørkes med vandig natrium sulfat og konsentreres under redusert trykk, og dette gir 6,5 mg hvite krystaller. Forbindelsen identifiseres som den ønskede forbindelse, basert på følgende egenskaper: IR maksV(cm_1) : 3450'3350, 1785,; 1765, 1640, 1540
NMR (CD3OD) 6 (ppm):
6,42 (1H, d, J =5,4 Hz) 5,27 (1H, d, J =5,4 Hz) 4,41 (1H, m) 3,95 (1H, m) 2,3-1,2 (2H, m) 1,46 (9H, s) (c-2) Fremstilling av (4S,6R,7S)-7-amino-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre: Ved denne prosess tilsettes 3 ml vannfritt metylenklorid til 63 mg (4S,6S,7S)-7-t-butoksykarbonylamino-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre fremstilt som beskrevet i eksempel c-1, og det tilsettes 3 ml trifluoreddiksyre under omrøring og isavkjøling. Blandingen omrøres ved denne temperatur i ca. 3,5 timer. Deretter konsentreres reaksjonsoppløsningen under redusert trykk hvorved man får et brunt oljeaktig'produkt. Produktet behandles ved etyleter og dette gir 35 mg av det rå produkt i form av et hvitt pulver. Produktet påføres en søyle pakket med 50 ml "Diaion HP-20AG" og det elueres med vann. Fraksjoner som er positive overfor ninhydrin-fargereaksjonen, kombineres og det konsentreres under-redusert trykk, og dette gir 31 mg (47%) av trifluoracetat: av den ønskede forbindelse. Produktet identifiseres som trifluoråcetatet av den ønskede forbindelse på grunnlag av følgende egenskaper: IF KB5 (cm_1): 3400, 1800, 1780, 1680, 1620.
maks
NMR (D20) (ppm):
6,31 (1H, d, J = 5-, 4 Hz)
5,0 0 (1H, d, J = 5,4'Hz)
4,60 (1H, m)
4,16 (1H, m)
2,37-1,66 (sH, m) r '
Optisk dreiing la]^ 21°= -61,0 (c=0,0743, H20)
Forbindelsene oppnådd i trinnene (b) og (c) oppfører seg nøyaktig som forbindelsen fra trinn (a) ved tynnsjiktskromatografi under de samme betingelser.
Eksempel 2
E£§m§£iiiin2_§Y_ii§i§5' 2§. l~ lZ^ m^ 2ZåzllY. §:l£°] 5:§. Y. ZlZ^ :?L^. 2:£Y.]^] z2~ 14^2^0lokt-2-en-8-on22-karboksylsYre j_ (Alternativ_metode)_.
2-1. Fremstilling av immobilisert enzym
Cellelegemer av Kluyvera citrophila ATCC 21285
dyrket i fem 2-liters kolber som beskrevet i eksempel 1-1 oppslemmes i 1/30M fosfatbuffer (pH 7,0) til en konsentra-
sjon på 40 mg/ml beregnet som tørrvekt. Cellene underkastes ultralydbehandling ved 200 W i 2 minutter, idet man benytter en ultralyd-disintegratormodell "UR-200P". De istykker revne celler sentrifugeres hvorved man oppnår en ovenstående væske. Etter tilsetning av 1 vekt-% av sulfatet av streptomycin hensettes den ovenstående oppløsning natten over. Nuklein-syre fjernes fra oppløsningen og dét tilsettes ammoniumsulfat i en konsentrasjon på 70% metning'for å avleire enzymproteinene. Avleiringen fjernes ved sentrifugering og det oppløses igjen
i 50 ml avionisert vann. Oppløsningen underkastes dialyse for å avsalte. Enzymoppløsningen konsentreres under redusert trykk til 10 ml og det tilsettes 0<:>,5 ml IM eddiksyre-natriumacetatbuffer (pH 5). 10 ml "Diaion WK-10" behandles for seg i 1/20M eddiksyre-natriumacetatbuffer (pH. 5). Enzymoppløs-ningen og "DiaionWK-10" blandes og blandingen omrøres ved 30°C natten over. På denne måte fås et immobilisert enzym. 2-2. Omsetning, isolering. og rénslng av den ønskede forbindelse
10 ml av det ovenfor nevnte immobiliserte enzym og 10 ml substratoppløsning fremstilt som beskrevet i eksempel 1-2, blandes i et stort reagensrør og det omrøres i 2 timer ved en temperatur på 40°C. Deretter, dekanteres oppløsningen og rensing foretas som beskrevet i eksempel 1-4 . Den fremstilte forbindelse utviser nesten samme egenskaper som forbindelsene i eksempel 1.
Eksempel 3
Fremstilling_av^ sy^2metoksv^minoacetamido2-4-hyd , 0 )_-okt-2-en-83on-2-karboksYlsyre:
I dette eksempel oppløses 78,8 mg (0,178 mmol) 2-(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-syn-metdksyiminoeddiksyre i 0,8 ml vannfritt diklormetan, og 25 yl (0,178 mmol) trietylamin tilsettes ved en temperatur på -20°C;' Etter tilsetning av 37 mg (0,178 mmol) fosforpentaklorid hensettes blandingen for å reagere under omrøring ved en temperatur på -20°C i 40 minutter, hvoretter det hele konsentreres under redusert trykk. Resten oppløses i 2 ml vannfri tetrahydrqfuran for å fremstille en syrekloridoppløsning. 34 mg (0,162 mmol) (4S,6R,7S)-7-amino-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre (i det etter-følgende omtalt som forbindelse A) fremstilt som beskrevet i eksempel 1-4-a, oppløses i en blanding av 1 ml tetrahydrofuran og 1 ml vann, og 79 yl (0,565 mmol) ' :t.rietylamin tilsettes.
Den fremstilte syrekloridoppløsning tilsettes dråpevis til oppløsningen under omrøring og isavkjøling og det tilsettes ytterligere 20 yl trietylamin. Man lar blandingen reagere i 2 timer og 4 5 minutter under isavkjøling. Deretter innstilles blandingen til en pH-verdi1 på'2,0 med 10% saltsyre og det ekstraheres to ganger med 10; ml etylacetat. Etyl- acetatlagene vaskes med 10 ml mettet saltvannsoppløsning og tørkes med mettet natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk og dette gir 114 mg av.den rå acylforbindelse. Forbindelsen oppløses i 10 ml 50% .'eddiksyre og omrøring foretas ved en temperatur på 50°C i 30 minutter. Oppløsningen av-kjøles til romtemperatur og konsentreres. Resten oppløses i
1 ml metanol. 20 ml eter og 20 ml n-heksan tilsettes til oppløsningen og blandingen sentrifugeres for å fjerne bunnfallet. Bunnfallet lyof-iliseres hvorved man får 51 mg fast stoff. Det faste stoff oppløses i en blanding av metanol og vann (1:1). Oppløsningen helles, på en søyle som er pakket med 30 ml "HP-20AG" og eluering foretas med 40 ml av en blanding av vann og metanol (10:1), 30 ml av en blanding av vann og metanol (4:1) og 150 ml av en blanding av vann og metanol (1:1). Fraksjoner som viser en Rf-verdi på 0,3
ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografi (plate: "Merck Art. nr..5719", oppløsningsmiddel butanol:eddiksyre: vann = 4:1:1) kombineres og konsentrasjon foretas under redusert trykk. Konsentratet oppløses i 20 ml eter og 20 ml n-heksan og dette gir et bunnfall; Bunnfallet fjernes ved sentrifugering og lyofiliseres hvilket gir 29,8 mg (utbytte 45,5%) hvite krystaller. Forbindelsén har følgende egenskaper: IRmaksV(cm<_1>): 3450'1775, 1670, 1634, 1550
NMR (DMSO dc-CDo0D)6: 6 3
9,28 (1H, d, J =;8,4 Hz)
7,07 (2H, s)
6,75 (1H, s)
6,27 (1H, d, J =5,4 Hz)
5,56 (2H, m)
2,77-2,04 (2H, m)
Signal fra -OCH^er overlappet av signalene som stammer fra oppløsningsmidlet. [<°--3?° Cp-0,5..etano!,. 5
For ytterligere å rense oppløser man 200 mg krystaller i 1 ml metanol og det tilsettes 1 ml varmt vann under oppvarming ved 50°C. Oppløsningen hensettes ved romtemperatur og dette gir hvite krystaller. De fremstilte krystaller vaskes ved gjentatt omkrystallisering med 1 ml vann og tørkes i vakuum i 12 timer ved 45°C. Utbytte 120 mg. Forbindelsen har følgende egenskaper: Smeltepunkt: Forbindelsen blir fiolett ved ca. 140°C og etterhvert brun og dekomponerer ve.d 176-178°C.
19°
[<a>]D<=>-1° (c=0,9, metanol). NMR (DMSO-dg, 10OM) 6:
1,31 (1H, br)
9,25 (1H, d,' J = 8,3 Hz)
7,20 (2H, br)
6,76 (1H, s)
6.25 (1H, d, J 5,4 Hz)
5,48 (1H, dd, J =. 8,3, 5,1 Hz)
5.26 (1H, br)
4,30 (1H, m)
3,84 (3H, s)
1,43-2,05 (2H, m)V
Signalet fra protonet ved 6-stillingen er overlappet med signalet fra -OCH3(<5 3,84).
Elementæranalyse for C14H15N50gSl/2H20:
Beregnet: C 43,08 - H 4,13 - N 17,94%
Funnet: C 43,33 - H 4,43 - N 17,89%.
Massespektrum med stor oppløsningsevne.
De ovenfor nevnte krystaller! som er oppvarmet ved 60°C i 5 timer i N,0-bistrimetylsilylacetamido, anvendes som prøve. Masse = 669,23408 (C^<H>^<OgN>j<-S>Si^)
Eksempel 4
Fremstilling av_ (4^^, 7S)_-73J.2-^22amino-4^ metoksYiminoacetamido]_-4-hYdrok§2l§Z2n-2~karboksylsYrei_!Alternativ_metode)_.
I dette eksempel gjentas fremgangsmåten fra eksempel 3 bortsett fra at den samme mengde forbindelse A fremstilt i eksempel 1-4-b eller 1-4-c anvendes, 1 steden for forbindelse A, fremstilt i eksempel 1-4-a. Den fremstilte forbindelse viser nesten samme fysikalsk-kjemiske egenskaper som forbindelsen fremstilt i eksempel 3.
Eksempel 5
De antimikrobielle egenskaper av forbindelsen fremstilt i eksempel 3, 8 og 12 er følgende: Det anvendes hjerteinfusjonsagar-fortynningsmetoden (pH 7,2). Cefazolin anvendes som kontroll.
Eksempel 6
FE§m§£iiiin2_§Y_na.trium^ tiazolYl) -2-sYn-metok^yåminoacetami^ £1^. 1:2ill.^. 1. 9.l2^tr2lÉnl8-on-karboksYlsyre : I dette eksempel oppslemmes 131 mg (0,344 mmol) av krystallene fremstilt som beskrevet i eksempel 3 i 1,5 ml vann. Til blandingen tilsettes 28. mg (0,333 mmol) natirum-hydrogenkarbonat og blandingen omrøres ved romtemperatur i 4 timer. Den fremstilte oppløsning ledes gjennom en søyle som er pakket med 4,5 ml "Diaion HP-20AG" og eluering foretas med vann. Eluatet oppsamles i 3,3 ml fraksjoner. Fraksjonene nr. 20-28 konsentreres og konsentratet ledes igjen gjennom en søyle som er pakket med 25 ml "Sephadex LH 20". Elueringén utføres med vann og eluatet oppsamles i 1,4 ml fraksjoner. Fraksjonene 12-15 konsentreres og'dette gir krystaller som tørkes i vakuum ved 4 0°C i 12 timer. Utbytte 10 5 mg (76%). Produktet har følgende egenskaper: : Smeltepunkt: Forbindelsen blir brun ved 165°C hvoretter fargen etterhvert blir mørkere. [a]20 = -1° (vann, c=l,3) :
-1
IR(KBr)v^mks = 3400, 1760, 1665,-1600
NMR (D20)6: 6,97 (1H, s)
6,14 (1H, d, J = 5,4 Hz)
5,61 (1H, d, J = 5,1 Hz)
4 , 47 - 4,56 (1H, m)
3.97 - 4,21 (1H, m)
3.98 (3H, s)
1,53 - 2,20 (2H, m)
Elementæranalyse for<c>i4<H>i4N5°5<S>Na
Beregnet: C 39,91 - H 3,82 - N 16,62%
Funnet: C .40,15 - H 3,74 - N 16,6.1%
Eksempel 7
Fremstilling__ay^^ ' SYn-^2-karboksYgrop_-2-oksyimino)_a azabicYklo_[4 , 2L0 ] okt-2-en-8-on-2-karboksylsYre :
I dette eksempel oppløses;159 mg (0,763 mmol) fosforpentaklorid i 7,4 ml vannfri metylenklorid, og oppløsningen avkjøles til 0°C. Til oppløsningen; tilsettes 404 mg (0,706 mmol) 2-(2-trif enylmetylaminotiazo'l-4-yl)-2-syn-(2-t-butyl-oksykarbonylprop-2-oksyimino)eddiksyre, etterfulgt av om-røring ved 0°C i 20 minutter hvorved man får en gul opp-løsning. Til oppløsningen tilsettes 0,233 ml (1,67 mmol) trietylamin, og blandingen omrøres' i 5 minutter ved 0°C. Deretter konsentreres reaksjonsblandingen under redusert trykk og tørkes i vakuum, det tilsettes 3,6 ml vannfritt tetrahydrofuran for å fremstille én oppløsning av syrekloridet.
70 mg (0,353 mmol) (4S,6R,7S)-7-amiho-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre oppløses i en blanding av 8,4 ml vann og 4,9 ml<;>tetrahydrofuran, og opp-løsningen innstilles til pH 9,8 med trietylamin. Opp-løsningens pH-verdi holdes på 8-i0 med trietylamin og den ovenfor nevnte oppløsning av syrekloridet tilsettes dråpevis. Blandingen omrøres under isavkjøling i 1 time og 15 minutter og det foretas konsentrasjon under redusert trykk for å fjerne tetrahydrofuranen. Konsentratet innstilles til pH 1-2 med 2N-iivandig saltsyre, det foretas metning med natriumklorid
og ekstraksjon med 30 ml etylacetat 'tre ganger. Etylacetat-ekstraktet vaskes med mettet saltvannsoppløsning, tørking foretas over vannfritt natriumsulfat og konsentrering under redusert trykk, og dette gir 50 7 mg av et fast gult stoff. Konsentratet tørkes i vakuum og 5 ml trikloreddiksyre til-
settes. Blandingen hensettes ved romtemperatur i 10 minutter. Til blandingen tilsettes 3 ml vann og blandingen hensettes igjen i 10 minutter. Blandingen konsentreres under redusert trykk og' den dannede gule oppslemming renses ved søyle-kromatografi under anvendelse av 65 ml "Diaion HP-10" behandlet med dimetylsulfoksyd. Elueringen utføres med 65 ml vann, 30 0 ml av en blanding av vann. og metanol (10:1) og 4 20 ml av en blanding av vann og metanol (6:1) , hvorved man får fraksjonene 1-25, 26-60 og 61-130. Fraksjonene 42-95 kombineres og det foretas konsentirering under redusert trykk, og dette gir 35,3 mg av den rå forbindelse. Produktet renses ved søylekromatografi idet man benytter 7 ml "Diaion HP-10". Elueringen utføres med 20 ml vann, 40 ml av en blanding av vann og metanol (20:1), 40 ml av en blanding av vann og metanol (15:1) og 100 ml av en blanding av vann og metanol (10:.l), hvorved man får fraksjonene 1-15, 16-43, 44-70 og 71-136. Fraksjonene 26-90 kombineres og det foretas konsentrasjon under redusert trykk og dette gir 22,1 mg (13,8%)
av den ønskede forbindelse. Produktet har følgende egenskaper: IRvCm, (KBr): 1770, 1660, 1635
maks ' '.
NMR (DMS0-dg)6: 9,28 (1H, d, J = 8,3 Hz)
7,26 (3H, s)
6,7 3 (1H, s)
.6,33 (1H, d, J = 4,9 Hz)
5,5 3 (1H, dd, J =5,0, 8,3 Hz)
5,3-5,4 (1H, m)
4,3-4,4 (lH, br)
3,8-4,0 (1H, m)
1,6-2,0 (2H, m)
1,41 (6H, s)
24° o
ta]p = -24,4 (metanol, c=l,0) Eksempel 8
Fr§5}§tilling_a^ ™^tok.sY_iTainoaceta.mLdo] "^■"hy^oksy^ll^zabicyklo- [4,2,0]-okt-2-en38-on-2-karboksYlsYre:
I dette eksempel oppløses 60 mg (0,20 3 mmol) av trifluoracetatet av (±)-cis-73_amino-.7a-hydroksy-l-azabicyklo-[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 5 i en blanding med 1 ml vann og 1 ml tetrahydrofuran og 56 yl trietylamin tilsettes til oppløs-ningen. Blandingen omtales som reaksjonsblanding A. Sam-tidig oppløses 125,7 mg (0,280 mmol) 2-(2-tritylaminO-4-tiazolyl)-2-syn-metoksyiminoeddiksyre i 1,2 ml vannfri t metylenklorid og oppløsningen hensettes for å reagere under avkjøling på et tørris-karbontetrakloridbad under omrøring i 50 minutter, etter at man har tilsatt. 39,3 yl trietylamin og
55 mg (0, 264 mmol) fosforpentakloridReaksjonsoppløsningen konsentreres under redusert trykk;og :til resten tilsettes 1 ml vannfritt tetrahydrofuran for å fremstille en oppløsning av syreklorid. Syrekloridoppløsningen tilsettes med 28 yl trietylamin til reaksjonsoppløsningen A, som er fremstilt som angitt ovenfor, i tre porsjoner iløpet av 5 minutter. Blandingen hensettes ytterligere 35 minutter for å reagere og pH-verdien innstilles til 2,5 med 10% sitronsyre. Oppløs- ningen mettes med natriumklorid og ekstraheres tre ganger med etylacetat. Lagene av det organiske oppløsnings-
middel vaskes med mettet saltvannsoppløsning og tørkes over vannfritt natriumsulfat. Etter filtrering og konsentrering underkastes resten rensing ved hjelp av silisiumdioksydgelkromatografi (silisiumdioksydgel 15 g, oppløsnings-
middel: metanol:kloroform = 1:3) ,: hvorved man får 185,5 mg av et rått acylprodukt. Til 86 mg av acylproduktet (forbindelse 13) tilsettes 3 ml 50% eddiksyre og blandingen om-røres ved en temperatur på 50°C i>50 minutter. Blandingen avkjøles og det avleirede trifenylkarbinol fjernes ved filtrering. Filtratet konsentreres under redusert trykk og dette gir et gult glassaktig rått produkt. Produktet renses under anvendelse av 8 ml "Diaion HP-20", og et oppløsnings-middel bestående av metanol og vann (1:9 til 2:1 volum,
det samme brukes i det følgende), hvorved man får 14,5 mg
(44,3%) av den ønskede forbindelse: Forbindelsen har følgende egenskaper: IRvKBf (cm_1): ■ 3450, 1775, 1670/1635, 1550 maks ' ' '
NMR (DMSO d^-CD-OD)6:
o 3
9,28 (1H, d, J =: 8,4 Hz)
7,07 (2H, s)
. 6 , 75 UH, s)
6,27 (1H, d, J =:5,4 Hz)
5,56 (2H, m)
2,77-2,04 (2H, m): Signalet fra -OCH^ er overlappet med signaler som skyldes oppløsningsmidlet.
Eksempel 9
Fremstillin2_av_(-iicis-73-fenYlaqetamido-^a^hYdroksy^l"azabicy_klo [4i2 , 0 ] okt-2-en-8-on-2-karboks'ylsYre :
I dette eksempel oppløses 194,6 mg (0,623 mmol) av trifluoracetatet av (±)-cis-73-amino-7a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre i en blanding av 3,1 ml vann og 6,2 ml aceton, og 209 mg (2,49 mmol) natrium-hydrogenkarbonat tilsettes til oppløsningen. Deretter tilsettes 125 mg (0,810 mmol) fenylacetylklorid i 2 ml aceton dråpevis til blandingen under omrøring og isavkjøling. 10,5 mg (0,068 mmol) og 17,6 mg '(0,114 mmol) f enylacetylklorid tilsettes til blandingen etter henholdsvis 1,5 og 2,5 timer. Etter 2 timer og 45 minutters forløp.konsentreres reaksjons-oppløsningen under redusert trykk fOr å fjerne acetonet.
Vann (10 ml) og IN saltsyre (1 ml) tilsettes til konsentratet og den dannede oppløsning ekstraheres tre ganger med 20 ml etylacetat. Etylacetatbadet vaskes med mettet salt-vannsoppløsning og tørkes med vannfritt natriumsulfat, hvoretter filtrering og konsentrasjon foretas under redusert trykk. Det fremstilte brune oljeåktige produkt tritureres med eter, og filtreres og tørkes Og dette gir 120 mg (60,4%)
av et pulver av den ønskede forbindelse. Forbindelsens egenskaper er følgende: IR KB£ v(cm_1): 3400, 1780, 1670,; 1640
maks
NMR (CD3OS)6: .7,27 (5H, s)
6,39 (1H, d, J = .'5,4 Hz)
5,46 (1H, d, J = .'5,1 Hz)
4,37 (1H, m)
4,01 (1H, m)
3,57 (2H, s)
2,0-1,1 (2H, m)
Eksempel 10
Fremstillin2_ay_^±V-cis-73-j;^ m§£oksYiminoacetamido]_-4 33h^23Stl2-en-8-on-karboksYls_Yre:
I dette eksempel oppløses 127 mg (0,286 mmol) 2—(2-tritylamino-4-tiazolyl)-2-syn-metbksyiminoeddiksyre i 1,3 ml vannfritt klormetan og 29 mg (0,286 mmol) trietylamin tilsettes ved en temperatur på -20°C.;Etter tilsetning av 60 mg (0,286 mmol) fosforpentaklorid omrøres blandingen
ved en temperatur på -18 til -20°C i 30 minutter. Reaksjonsblandingen konsentreres under redusert trykk og lyofiliseres i 30 minutter. Resten oppløses i 3 ml vannfritt tetrahydrofuran for å fremstille en oppløsning av syrekloridet.
63,8 mg (0,204 mmol) av trifluoracetat av (i)-cis-7(3-amino-43-hydroksy-l-azabicyklo [4,2,0] okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 9, oppslemmes separat i en blanding åv .1, 3 ml tetrahydrofuran, og 1,3 ml vann og 103 mg (1,02 mmol) ' trietylamin tilsettes. Til denne blanding tilsettes oppløsningen av syrekloridet
dråpevis under omrøring og isavkjøling, og 22 mg (0,22 mmol) trietylamin tilsettes. Blandingen får reagere i 4 timer og 45 minutter under omrøring og isavkjøling. Deretter ekstraheres reaksjonsblandingen etter tilsetning av 2 ml IN HC1 tre ganger med 20 ml etylacetat pr. gang. Ekstraktet tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentrasjon foretas under redusert trykk hvilket gir det tritylbeskyttede rå produkt
(forbindelse 16) av den ønskede forbindelse. Produktet opp-
løses i 20 ml 50% eddiksyre og oppløsningen omrøres ved en temperatur på 50-60°C på et bad i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur underkastes reaksjonsblandingen filtrering under redusert trykk. Filtratet konsentreres under redusert trykk og dette gir 173 mg av den rå forbindelse.
Forbindelsen renses under; 'anvendelse av 40 ml "Diaion HP-20AG" og et oppløsningsmiddel bestående av vann og metanol (10:1 til 1:1). Man får 32"mg (42% av et svakt gult pulver av forbindelsen. Forbindelsen har følgende egenskaper: IRvmaks(cm<_1>): 3475'1780, 1680, 1670, 1655, 1645.
NMR. (DMS0-dg)6: 9,33 (1H, d, J =8,8 Hz)
7,18 (2H, s)
6,75 (1H, s)
6,0 6 (1H, d, J = I', 4 Hz)
5,38 (2H, en H er q, J = 8,8, 5,4 Hz)
v 4,50 (1H, m)
3,98 (1H, m)
3,84 (3H, s)
2,17-1,37 (2H, m)
Eksempel 11
Frems ti lling_av_^±)_-cis-7&-^R^ Zzt. §nYlaE§£ami^°Ili^lh^^r_°k_§y_llla 8-on^2-kar^ok^Ylsy^e-t-bu^yle^ter:'
I dette eksempel oppløses. 23,.8 mg (0,095 mmol) av (R)-N-t-butyloksykarbonylfenylglycin;'i 1 ml vannfritt tetra-hydrof uran, og 0 ,09 5 ml (0 ,095 mmol):, lN-N-metylmorfolin-tetrahydrofuran og 0,095 ml (0,095 mmol) IN isobutylklor-format-tetrahydrofuran ved en temperatur på -30°C. Blandingen omrøres i 30 minutter og 20 mg (0,079 mmol)
(t)-cis-73-amino-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-
en-8-on-2-karbo.ksylsyre-t-butylester fremstilt som angitt i referanseeksempel 4 i 1 ml vannfritt metylenklorid, tilsettes. Man lar blandingen reagere ved en temperatur på -30°C i 45 minutter og ved 0°C i 4 timer. Deretter fortynnes reaksjonsblandingen med 5 ml metylenklorid og vaskes først med vann, deretter med IN HC1, 5%;NaHC03, vann og mettet natriumkloridoppløsning. Det vaskede materiale tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentreres og dette gir 51 mg av en rå acylforbindelse. Resning ved hjelp av silisiumdioksydgelkromatografi med 5 g silisiumdioksydgel og et oppløsningsmiddel bestående av n-heksan og etylacetat (1,5:1) utføres, og dette gir 10 mg av den mer polare isomer, 8 mg av den mindre polare isomer og 4 mg av en blanding av disse. Totalutbytte er 22 mg (57%). Forbindelsene har følgende egenskaper: Den mer polare isomer: IRvCH?13 (cm_1): 3430, 1780, 1725(sh), 1717, 1697, 1630 msjc s Den mindre polare isomer: — 1
IRmaks(cm ): 3430'1780, 1722(sh), 1715, 1695, 1630
Eksempel 12 ErSm§tiiiin2_§Y_2iE-ZP~IiRil2-f enYl2lY5inami^2Z4"I^Y^E2?SEYliz azabicYklo_[4 , 2^0iokt-2-en-8-on-2-karboksylsyre :
I dette eksempel oppløses. 56 mg (0,118 mmol) av den mindre polare isomer av cis-73-[(R)-2-t-butyloksykarbonyl-amino-2-f enylacetamido] -4a-hydroksy-\l-azabicyklo'[4 ,2,0] okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet i eksempel 11 i en blanding ■. av 1 ml vannfritt metylenklorid og 1 ml anisol, og 2 ml trifluoreddiksyre tilsettes under isavkjøling. Blandingen henrettes 4 timer under isav- kjøling hvoretter den konsentreres under redusert trykk. Etter tilsetning av tørr benzen foretas konsentrasjon på nytt, og dette gir et oljeaktig produkt; Produktet tritureres med eter og det dannede bunnfall frafiltreres, hvorved man får 4 2,1 mg (80%) av et svakt gult pulver bestående av trifluoracetatet av den ønskede forbindelse. Forbindelsen har følgende egenskaper: IR maksV(cm_1) : 3485'1880 (sh), 1870, 1700 (sh), 1685, 1635
maKs
Det fremstilte trifluoracétat oppløses i 2 ml 1M-fosfatbuffer (pH 7,0) og renses undér anvendelse av 50 ml "Diaion HP-20AG" og et oppløsningsmiddel bestående av vann til vann og metanol (9:1). Den rensede oppløsning lyofiliseres og dette gir 28 mg (72%) av den ønskede forbindelse. Forbindelsen har følgende egenskaper:
[a]p = -26,0 (c=0,53, H20)
IRmaksV(cm<_1>): 3480'1780, 1770, 1680-1705, 1570-1650
NMR (D20)6: 7,52 (5H, s)
6,03 (1H, d, J = 5,4 Hz)
5.5 (1H, d, J = 5>'l Hz)
5,21 (1H, s)
4,28 (1H, m)
4.06 - 3,85 (1H, m)
1,76 - 0,99 (2H, iti)
Eksempel 13
Fremstilling_av_cis = 7gzj;^R)^ EiE§£§^inYl|Sa£225Ylåmi22ia9§tamidb]_-4 I4A^^O^okt-^-en-S-on-g-karbok :
I dette eksempel oppløses 10 mg cis-73-[(R)-2-fenyl-glycinamido]-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-én-8-on-2-karboksylsyre fremstilt i eksempel 12 i en blanding av 180 yl aceton og 50 yl vann, og en oppløsning av 9,2 yl (0,066mmol) trietylamin og 8,0 mg (0,0399 mmol); 4-etyl-2,3-diokso-l-piperadinylkarboksylsyreklorid i 100 ml vannfri tetrahydrofuran tilsettes under isavkjøling. Blandingen omrøres i 3 timer, og 50 yl 20% vandig fosforsyre tilsettes. Det organiske oppløsningsmiddel fjernes ved avdestillasjon, hvor- . ved man får en vandig oppløsning som inneholder den ønskede forbindelse. Oppløsningen renses. iinder anvendelse av 7 ml "HP-20AG", og et oppløsningsmiddel; bestående av vann og metanol (10:1 til 1:2), hvorved man får 9,8 mg (65%) av et svakt gult pulver av den ønskede forbindelse. Forbindelsen har følgende egenskaper:
[a]2^ =^-57° (c=0,l, metanol)
TC R r* IRmaksV(cm<_1>): 3475'1770, 1760, 1715, 1670-1690
NMR (D20)6: 7,47 (5H, s)
6,21 (1H, d, J = .5,4 Hz)-
5,47 (1H, s) 5,4 5 (1H, d, J = 5,1 Hz)
4,30 (1H, m)
3,32 - 4,08 (7H, m).':0,99 - 1,68 (2H, m): 1,18 (3H, t, J = 7,;2 Hz.)
Den antimikrobielle virkning av forbindelsene fremstilt i eksemplene 8, 10, 12 og 13 er følgende. Man benytter hjerteinfusjonsagar-fortynningsmetoden (pH 7,2). Cefazolin ble benyttet som kontroll.
Eksempel 14 ££§S§£iiiiQ2_§Y_izil2i§z22zI2ii23amino-5-brom-4-tiazolYl) ~ 2;:§YnIm§£2!S§Yimin2§2§tamido2-4a Ili^^O^okt^g-en-S^on-g^karbok :
I dette eksempel tilsettes 72,3 mg (0,348 mmol) fosforpentaklorid til en oppløsning bestående av 182 mg (0,348 mmol) 2- (2-tritylamino-5-brom-4-t.iazolyl) -2-syn-metoksyimino-eddiksyre og 48 yl (0,,348 mmol) trietylamin i 2 ml tetrahydrofuran under omrøring ved -20°C, og!blandingen omrøres i 40 minutter. Denne oppløsning tilsettes dråpevis til en blanding av 46 mg. (0,232 mmol) (±)-cis-7P-amino-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre og 79 yl (0,58 mmol) trietylamin i 6 ml 50% vandig tetrahydrofuran under omrøring og isavkjøling. Man lar blandingen reagere i 2 timer under isavkjøling, hvoretter pH-verdien innstilles til 2,0 med IN saltsyre, og ekstraksjon foretas noen ganger med 10 ml etylacetat.
De organiske lag kombineres, og vaskes med 20 ml mettet saltvannsoppløsning og tørkes over natriumsulfat. Etter inn-dampning under redusert trykk oppløses resten i en blanding av 8 ml metanol og 1 ml vann. Oppløsningen innstilles til pH 1,0 med IN saltsyre og det foretas omrøring il time ved romtemperatur for å fjerne tritylgruppen. Etter innstilling av pH-verdien til 7 med trietylamin tilsettes 10 ml vann til reaksjonsblandingen. Deretter foretas vasking av oppløsningen med 10 ml etylacetat. Det vandige lag innstilles til pH 2,0 med IN saltsyre, og helles på en søyle som er pakket med 30 ml "Diaion HP-10". Elueringen utføres med en blanding av vann og metanol (4:1 til 2:1). Fraksjoner som viser en Rf-verdi på 0,45 ved silisiumdioksydg.éltynnsjiktskromatografi (oppløsningsmiddel: butanol:eddiksyre:vann = 4:1:1) kombi neres og inndampes under redusert trykk, og dette gir 54 mg av et hvitt pulver (utbytte 50,5%). Forbindelsen har følg-ende egenskaper: IR maks v(KBr) cm"<1>: 1780, 1770, 1670, 1630, 1540
NMR(CD3OD)S: 6,44 (1H, d, J = 5,4 Hz)
5,59 (1H, d,, J .= 5,1 Hz)
4,4 (1H, m)
4,1 (1H, m)
3,98 (3H, s) ,
2,8 - 1,8 (2H, m)
Eksempel 15
Fremstilling_ay_J4Si6Ri7S)_-7=^ ^ZSYn-metoksYiminoacetamido^-°]S.£l2-en-8-on-2-karboksylsY£e:
I dette eksempel oppløses 170 mg (0, 356 mmol) 2-(2-tri-tylamino-5-brom-4-tiåzolyl) -2-syn-tmetoksyiminoeddiksyre i 2 ml vannfritt tetrahydrofuran, 49 yl (0,356 mmol) trietylamin ved -20°C. Etter tilsetning av' 74 mg (0,356 mmol) fosforpentaklorid hensettes blandingen for å reagere under omrøring i en time ved -20°C. Separat oppløses 32 mg (0,162 mmol) (4S,6R,7S)-7-amino-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre i en blanding av 2 ml tetrahydrofuran og 2 ml vann, og 71 yl (0,518 mmol) trietylamin tilsettes. Oppløsningen av syrekloridet fremstilt ovenfor tilsettes dråpevis til denne oppløsning; under omrøring og is-avkjøling. Man lar blandingen reagere i 2 timer under is-avkjøling. Deretter.innstilles blandingen til pH 2,0 med. IN saltsyre og ekstraksjon foretas- to. ganger med 10 ml etylacetat. De organiske lag vaskes med 20 ml mettet salt- vannsoppløsning, tørking foretas over natriumsulfat og konsentrering under redusert trykk. Resten oppløses i 10 ml 50% vandig eddiksyre og omrøres i-30 minutter ved 50°C.
Etter konsentrering oppløses resten i 10 ml vann og opp-løsningen vaskes med 10 ml etylacétat. Etter innstilling av pH-verdien til 2 med IN saltsyre, helles det vandige lag på en søyle som er pakket med 20 ml "Diaion HP-10" og elueringen utføres med en blanding av vann og'metanol (4:1 til 2:1). Fraksjoner som viser en Rf-verdi på 0,45 ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografi (oppløsningsmiddel butanol:eddiksyre: vann = 4:1:1) kombineres, og konsentreres under redusert trykk, og dette gir 34,2 mg av et:hvitt pulver (utbytte 46%). Forbindelsen har følgende egenskaper: IR maks(KBr)vern-1: 1780, 1770, 1670, 1630, 1540
NMR(CD3OD)6; 6,44 (1H, d, J, = 5,4 Hz)
5,50 (1H, d, J = 5,1 Hz)
4,4 (1H, m)
4,1 (1H, m)
3,98 (3H, s)
2,8 - 1,8 (2H, m)
[a]2^ = -35,6° (c=0,5, metanol)
Referanseeksempel 1
E£emstillin^_av_ j±)_-cis-^
Forbindelsen fremstilles gjennom fremgangsmåtene 1 og 2. (1) Fremstilling av 2-[ 4-( 3- butenyl)- 3- azido- 2- okso- azetidin-1- yl]- 2- dietylfosfonoacetat- t- butylester: I dette eksempel oppløses 447 mg (1,78 mmol) t-butyl-a-aminodietylfosfonoacetat i 25 mlivannfri eter og til opp- løsningen tilsettes 164 mg (1,96 mmol) 4-penten-l-al. Opp-løsningen omrøres ved romtemperatur i en time og 20 0 mg molekylarsil (4A) (den samme molekylarsil anvendes i det følgende) tilsettes sammen med 150' mg vannfritt magnesiumsulfat. Blandingen omrøres i 1 time;
Reaksjonsblandingen filtreres under redusert trykk og filtratet konsentreres under redusert trykk og dette gir et svakt gult oljeaktig produkt. ' Produktet tilsettes vannfritt benzen og blandingen konsentreres under redusert trykk og dette gir et svakt gult oljeaktig produkt. Tilstede-værelsen av en Schiff-base i produktet beskreftes ved kjerne-magnetisk resonansspektrum. Produktet oppløses i 12,5 ml cykloheksan og 12,5 ml vannfri benzen, og 0,369 ml (2,66 mmol) trietylamin og 200 ml molekylarsil tilsettes. Azidoacetyl-klorid [319 mg (2,66 mmol)] oppløst i 1.2,5 ml cykloheksan tilsettes deretter dråpevis til blandingen under omrøring ved romtemperatur iløpet av 1,5 timer. Blandingen omrøres ytterligere i 30 minutter hvoretter den fortynnes med 10 ml benzen. Reaksjonsoppløsningen vaskes med 5% fortynnet saltsyre, deretter med mettet natriumbikarbonat, avionisert vann og mettet natriumkloridoppløsning, og det foretas tørking med vannfritt natriumsulf at og konsentirering under redusert trykk, og produktet identifiseres som råproduktet av den ønskede forbindelse. Det oljeaktige produkt helles på en søyle som er pakket med 45 g silisiumdioksydgel.' Elueringen utføres, med en blanding av n-heksan og etylacetat (1:2) og dette gir to typer isomere. De isomeres; egenskaper er angitt nedenfor, og de er identifisert som de. isomere ved 3- og 4-stillingene, dvs. 345 mg cis-isomer og 58 mg trans-isomer. Totalutbyttet er 54,2%.
Cis-isomer:
IRVmaks3(cm<_1>): 2120'1775'1770(sh), 1750, 1740(sh) 1645
NMR (CDC13)6: 6,13 - 6,33 (1H, m) .
4, 93 - 5,17 (2H, iri)'
4,50 - 4,93 (2H, m)
3,80 - 4,40 (5H,>)(fortE.,
1,93 - 2,17 (4H, m)
1,50 (9H, s)
1,33 (6H, t)
Trans-isomer:
IRvmaks3 (cm_1) : 2120>1780, 1755!/1750 (sh) , 1650 NMR (CDC13)6: 5,43 - 6,20 (1H, m) 4,80 - 5,30 (2H, m) 3,75 - 4,75 (7H,,m) 2,0 - 2,50 (4H, m) 1,50 (9H, d) 1,17 (6H, m) (2) Fremstilling av ( t )- cis- 7- azido- 1- azabicyklo[ 4, 2, 0] okt-. 2- en- 8- on- karboksylsyre- t- butylester: I dette eksempel oppløses 298 mg - (0,716 mmol) 2-[4-(3--" butenyl)-3-azido-2-oksoacetidin-l-yl]-2-dietylfosfonoacetat-t-butylester fremstilt ovenfor under (1) i 8,5 ml dioksan og 2,5 ml avionisert vann, og til dette tilsettes 30 mg osmium-tetroksyd. Oppløsningen omrøres i 30 minutter. Pulverisert natriumperiodat [496 mg (2,32 mmol)] tilsettes til den sorte reaksjonsblandingen iløpet av 20 minutter. Étter omrøring i 1,5 timer ekstraheres reaksjonsoppløsningen tre ganger med 50 ml eter pr. gang. Eterekstraktene kombineres og vaskes med mettet natriumkloridoppløsning. Den dannede oppløsning tørkes ved vannfritt natriumsulfat og konsentrering foretas under redusert trykk, og dette gir' en mørk brun oljeaktig forbindelse. Denne forbindelse helles på en søyle som er pakket med 5 g silisiumdioksydgel .og eluering foretas med et oppløsningsmiddel bestående av benzen og. etylacetat (1:2). Fraksjoner som er positive overfor 2•, 4-dinitrof enylhydrazin, oppsamles og konsentreres hvilket:gir. 235 mg av et oljeaktig produkt. Det oljeaktige produkt oppløses i 15 ml vannfritt acetonitril. Natriumhydrid [50%, 27,1 mg (0,563 mmol)] tilsettes til oppløsningen i en strøm åy nitrogen under omrør-ing ved romtemperatur.
Etter omrøring i 20 minuttér uthelles reaksjonsblandingen i 20 ml 2% vandig eddiksyre og oppløsningen ekstraheres
med 50 ml eter fire ganger. Eterekstraktene kombineres og vaskes med mettet natriumkloridoppløsning. Den dannede opp-løsning tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk, hvilket gir 180 mg av et oljeaktig produkt. Det oljeaktige.produkt påhelles en søyle som er pakket med 5 g silisiumdioksydgel!og-eluering foretas med et oppløsningsmiddelsystem bestående av n-heksan og etylacetat '
(3,5:1, volumforhold). Man-får hvite krystaller (51 mg) av den ønskede■forbindelse. Utbytte 51%.
Forbindelsen har følgende•egenskaper: Smeltepunkt: 64,5 - 65,5°C.
IR vCHp13 (cm-1): 2130, 1790, 1730, 1640 maks .
NMR (CDC13)6: 6,30 (1H, t, J.'= 4Hz)
4,93 (1H, d, J 5 Hz)
3,80 (1H, q)
1,6 - 2,6 (4H,,m)
1,52 (9H, s)
Referanseeksempel 2
Fremstilling_av_^±)_-cis-7-azido-^ 2lS2l§l2Dl2llSS£^2]SSYi5Y£§l£z^y£YiS§tÉE :
Dette eksempel viser en alternativ fremgangsmåte til fremstilling av forbindelsen i' referanseeksempel 1. Denne forbindelse f remstilles ved:'følgende prosesser (a) og (b).
(a) Fremstilling av ( ±)- cis- 7- azido- l- azabicyklo[ 4, 2, 0]-okt- 2 , 4- dien- 8- on- 2- karboksylsyr, e- t- butylester: (1) . Fremstilling av azidoacetylkloridoppløsning: Azidoeddiksyre [5 g (49,5 mmol)I oppløses i 37,5 ml metylenklorid, og under omrøring og ved romtemperatur tilsettes dråpevis 5,96 g (5,01 mmol)•tionylklorid i 12,5 ml metylenklorid. Deretter kokes blandingen med tilbakeløp i ■ 6,5 timer. Etter avkjøling tilsettes 150 ml metylenklorid, idet blandingen skal anvendes i den etterfølgende reaksjon.
(2) t-butyl-a-aminodietylfosfonOaeetat [7,9 g (29,6 mmol)] og 4,6 g (35,3 mmol) 4,4-dimetoksy-2-butenal oppløses i 250 ml metylenklorid, og 5,0 g vannfritt ,magnesiumsulfatpulver og 385 g molekylarsil 4A tilsettes under omrøring. Den dannede blanding reageres i 3,5 timer ved:romtemperatur. Deretter fjernes magnesiumsulfat og molekylarsil ved filtrering og oppløsningen konsentreres under redusert trykk, og dette gir en oljeaktig Schiff-base. Denne oppløses i 312,5 ml metylenklorid og etter tilsetning av 5,08,;g (50,2 mmol) trietylamin tilsettes azidoacetylkloridoppløsningen fremstilt under trinn (1) iløpet av 1 time under isavkjøling. Man lar reaksjonen foregå i ytterligere en time hvoretter reaksjons-oppløsningen vaskes, først med en mettet vandig natriumbi-karbonatoppløsning og en mettet vandig natriumkloridoppløs-ning, hvoretter tørking foretas med vannfritt natriumsulfat, og til slutt foretas konsentrering.under redusert trykk. Den således dannede rå acetatforbindelse oppløses i 150 ml aceton, 2,5 g (13,1 mmol) p-toluensulfonsyremonohydrat tilsettes, og blandingen reagerer ved romtemperatur i 2 timer. Deretter tilsettes 300 ml etylacetat ■ og oppløsningen vaskes med 150 ml mettet vandig natriumbikarbonatoppløsning. Det vaskede materiale ekstraheres med.etylacetat og etylacetat-ekstraktene kombineres, vaskes med mettet vandig natrium-kloridoppløsning, hvoretter man tørker"med vannfritt natriumsulfat. Etter frafiltrering av det'yandige natirumsulfat, konsentreres filtratet under redusert trykk og dette gir den rå aldehydforbindelse. Denne oppløses i 125 ml benzen, 3,5 g (31,3 mmol) diazabicyklo[2,2,2]oktan tilsettes og reaksjonsblandingen hensettes natten over ved romtemperatur. Til reaksjonsoppløsningen tilsettes 150: ml etylacetat og den dannede oppløsning vaskes med 100 ml mettet vandig ammonium- kloridoppløsning, tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk. Den således fremstilte sorte olje helles på en søyle som er pakket med 120 g silisiumdioksydgel, og eluering foretas under anvendelse av en blanding av etylacetat og n-heksan (1:3) som elueringsmiddel. Konsentrering av fraksjonene 9-23 (en fraksjon = 18 ml) under redusert trykk gir 3,2 g (utbytte 40,5% basert på t-butyl-a-amino-dietylfosfonoacetatet) av sluttproduktet i form av krystaller. Forbindelsen har følgende egenskaper:
Smeltepunkt: 6 8,0 - 6 9,2°C
IRV<maks>3 (cm<_1>): 2130'1790, 1720, 1630
NMR (CDC13)6: 6,64 (d, 1H, J = 6 Hz)
6,24 (ddd, 1H, J.'= 2,5, 6,0, 6,0 Hz)
6,04 (dd, 1H, J 2,0, 10,0 Hz)
5,26 (d, 1H, J =;5,0 Hz)
4,64 (m, 1H)
1,50 (s, 9H)
(a<1>) Fremstilling av ( ±)- cis- 7- azido- l- azabicyklo[ 4, 2, 0] okt-2, 4- dien- 8- on- 2- karboksylsyre- t- butylester En forbedring av den ovennevnte metode (2): I dette eksempel oppløses 2,67 g t-butyl-cx-amidino-dietylfosfonoacetat og 2,00 g 4,4-dimetyoksy-2-butenal i 15 ml vannfritt metylenklorid. Oppløsningen helles på en søyle som er pakket med 35 ml molekylarsil (4A,, 1/16), og elueringen utføres med 80 ml metylenklorid og dette gir en oppløsning inneholdende en Schiff-base. 5,57 ml; trietylamin, 2,02 g azidoeddiksyre og 1,85 g molekylarsil-pulver tilsettes til opp-løsningen. Etter tilsetning av 2,30 g fosforoksyklorid i 5 ml metylenklorid under isavkjøling iløpet av 1 time lar man blandingen reagere en time. 20 ml aceton og 3,0 g p-toluensulfonsyremonohydrat tilsettes' og blandingen hensettes natten over. Blandingen vaskes med mettet natriumbikarbonat og mettet saltoppløsning, og tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentreres, hvilket gir.'en oljeaktig forbindelse. Forbindelsen oppløses i 80 ml vannfri benzen og 3,0 g DABCO
(N-^n) tilsettes. Blandingen hensettes i 4 timer uten å
reagere. Reaksjonsblandingen vaskes med mettet ammoniumklor-id og mettet saltvannsoppløsning, og tørkes og konsentreres. Konsentratet underkastes silisiumdioksydgel-kromatrografi
(100 ml silisiumdioksydgel, oppløsningsmiddel n-heksan:
etylacetat = 3:1). Eluatet fra fraksjonene 6-18 (en fraksjon = 15 ml) konsentreres og dette gir 1,57 g (60,4%) av den orangefargede ønskede forbindelse. Forbindelsens egenskaper er i overensstemmelse med egenskapene oppnådd fra forbindelsen i referanseeksempel 2-(a). (b) Fremstilling av ( ±)- cis- 7- azido- l- azabicyklo[ 4, 2, 01okt-2- en- 8- on- 2- karboksylsyre- t- butylester
I dette eksempel oppløses ■' 5 ,4 5 g av dienf orbindelsen fremstilt i referanseeksempel 2-(a) eller 2-(a<1>) i 360 ml etylacetat og 900 mg 10% palladium-karbon tilsettes. Blandingen underkastes katalytisk reduksjon ved romtemperatur i en strøm av hydrogen i 55 minutter-. Deretter frafiltreres katalysatoren og filtratet vaskes med 100 ml 10% vandig sitronsyre og 100 ml mettet saltvannsoppløsning. Det vaskede materiale tørkes med vannfritt natriumsulfat, og konsentreres under redusert trykk. Konsentratet underkastes væskekromatografi ved 25 kg/cm 2 , idet man benytter 500 cm<3>"Prepak"-silisiumdioksydgelsøyle for å fraskille det uom-satte utgangsmateriale, og dette gir 12,58 g (48,0%) av den ønskede forbindelse. Følgende egenskaper ved den fremstilte forbindelse er i god overensstemmelse med egenskapene for forbindelsen fra ref eranseeksempel 1,.
Smeltepunkt: 64,5 - 65,5°C
IR maks (cm ): 2130'1790'1730,: 1640
NMR (CDCl3-)6: 6,30 (1H, t, J = 4,0 Hz) 4,93 (1H, d, J = 5,0 Hz) 3,80 (1H, q) 1,6 - 2,6 (4H, m)
Referanseeksempel 3
E^§.m!i£iiiin2_aY_l=ll2isiZP^ Iii2z.?_l2lS£z2-en-83on-2-karboksYls :
I dette eksempel oppløses 200 mg (<+>)-cis-7-azido-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som i ref eranseeksempel. 1 eller 2 i 8,8 ml karbo-tetraklorid, og 134,9 mg N-bromsuccinimid og en katalytisk mengde av a,a 1-azobizisobutyronitril tilsettes. Blandingen oppvarmes med tilbakeløp i 30 minutter. Etter avkjøling fortynnes reaksjonsblandingen med!5 ml kloroform og vaskes med 3 ml vann og 3 ml mettet vandig natriumkloridoppløsning. Det vaskede materiale tørkes med vannfritt natriumsulfat og filtreres.
Filtratet konsentreres og.dette gir en oljeaktig 4-bromforbindelse. Forbindelsen oppløses straks i 10 ml aceton og 50 mg sølvkarbonat og 50' yl' vann tilsettes. Blandingen omrøres ved romtemperatur i' 10 minutter. Reaksjonsblandingen filtreres, og konsentreres for oppnåelse av en rå forbindelse. Den rå forbindelse helles på en søyle som er pakket med 20 g silisiumdioksydgel, og elueringen utføres med en blanding av n-heksan og etylacetat (2:1). Eluatetene konsentreres og dette gir 86,4 mg av'denønskede forbindelse i form av gule krystaller. Utbytte,:40 , 7% . Krystallenes egenskaper er angitt nedenfor.
Smeltepunkt: 100,0 - 101,0°C
IRvmaks3 (cm<-1>): 2130, 1790, 1635, 1630
NMR (CDC13)S: 6,30 (1H, d, J =.5Hz)
5,03 (1H, d, J 5,2 Hz)
4,47 (1H, m)
3,9 3 (1H, m)
3,20 (1H, br)
2,1 - 1,8 (2H, m)
1,55 (9H, s)
Referanseeksempel 4 Fremstillin2_av (±izcis-73-amino-4a-h^d^ lii^^O^okt-g-en^S-on-g-karboks :
I dette eksempel oppløses ' 54,0 mg (0,19 mmol)
(±) -cis-7(3-azido-4a-hydroksy-l-azabicyklo [4,2,0] okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 3 i 20 ml etanol, og 15 ml 10% palladium-karbon tilsettes. Blandingen underkastes katalytisk reduksjon ved romtemperatur i en strøm_åv hydrogen i 1,5 timer hvoretter katalysatoren fjernes, o.g kpnsentrering foretas under redusert trykk. Konsentratet underkastes silisiumdioksydgel-kromatografi (5 g silisiumdioksydgel, oppløsnings-middel kloroform:metanol = 4:1), og dette gir 21,7 mg
(44,3%) av den ønskede forbindelse som et gult glass.
Produktet har følgende egenskaper:
IRVmaks3 (cm<_1>): 3250-3400, 1775,1730, 1635
NMR (CDC13)6: 6,28 (1H, d, J 6,0 Hz)
4,6 2 (1H, d, J =:5,0 Hz)
4,47 (1H, m) , - ■ \
' (forts.) .
4,50 - 3,30 (1H, m)
2,52 (3H, br)
2,50 - 1,50 (2H, m)
1,93 (9H, s)
Referanseeksempel 5
hYdroksy-l-azabicYklo^^^a^O ]_ok :
I dette eksempel oppløses 21,7 mg (±)-cis-7|3-amino-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 4 i en blanding av 1 ml metylenklorid og 1 ml trifluoreddiksyre og blandingen hensettes ved 0°C il time og 15 minutter. Blandingen.konsentreres under redusert trykk og oppløses i
en blanding av 0,5 ml metylenklorid og 1,0 ml trifluoreddiksyre. Oppløsningen hensettes 1 time og konsentreres under redusert trykk, hvilket gir et rødt Oljeaktig produkt. Produktet påføres en søyle pakket med 5 ml "HP-20AG" og elueringen utføres med vann for oppnåelse av ninhydrin-positive fraksjoner. De kombinerte fraksjoner påføres igjen en søyle som er pakket med 50 ml ''Sephadex LH-20" og elueringen utføres med vann, og dette1gir ninhydrin-positive fraksjoner. Fraksjonene konsenteres under redusert trykk, hvilket gir 5,0 mg (28,6%) av den ønskede forbindelse. Forbindelsen har følgende egenskaper:
TCR t* •IRvKBf (cm"1): 3420, 2960, 1780, 1735(sh), 1620 maks '
NMR (E^1^' med DSS som en indre standard)6:
6,15 (1H, d, J = 5,4, Hz)
4,91 (1H, d, J = 5,41' Hz)
4,57 (1H, m)
4,08 (1H, ddd, J = 12,1, 5,4, 4,0 Hz)
(forts.)
2,22 (1H, m)
1,79 (1H, ddd - sekstett tilsynelatende,
J = 12,1, 12,1, 4,0 Hz)
Referanseeksempel 6
Fremstilling_av_^±)_-cis-7-a'zi §<n>lli§I^i2!}Z<2>l]S<a>E22lS§Yl§YE2l£l2H£Yi§2ter£
I dette eksempel tilsettes 374 mg (2,760 mmol) N-klorsuccinimid til 7 ml vannfri toluen, og blandingen om-røres i en strøm av nitrogen ved en temperatur på -25°C. Deretter tilsettes 0,35 ml (4,766 mmol) metylsulfid og blandingen omrøres i 10 minutter. Etter å ha hevet temperaturen til -15°C tilsettes 107 mg (0,382 mmol) (±) -cis-7|3-azido-4a-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet.i referanseeksempel 3
til reaksjonsblandingen i 25 ml vannfri toluen og blandingen omrøres i 2,5' timer. En oppløsning hvori 0,773 ml vannfritt trietylamin er oppløst i 1,4 ml vannfri petroleumeter tilsettes til reaksjonsblandingen iløpet av 2 minutter. Is-badet fjernes og blandingen omrøres i 15 minutter. Etter tilsetning av 20 ml eter vaskes oppløsningen med en blanding av 3 ml 5% saltsyre og 20 ml mettet 'saltvannsoppløsning og vaskes deretter med 5 ml mettet saltvannsoppløsning to ganger. Eterlaget tørkes med vannfritt natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk og dette gir .145,7 mg av et rått oljeaktig produkt av den ønskede forbindelse. Produktet underkastes silisiumdioksydgelkromatografi under benyttelse av 10 g "Wako-gel C-200" og et oppløsnxngsmiddelsystem bestående av n-heksan og etylacetat (2:1), og dette gir 42,5 mg (0,153 mmol) av et oljeaktig produkt av den'ønskede forbindelse. Utbytte 40,1%.
Produktet har følgende egenskaper:
<I>Rmaks (cm 2125, 1802, 1740, 1698(sh), 1690
NMR (CDC13)6: 6,16 (1H, s)
5,22 (1H, d, J 5,5 Hz)
4,44 (1H, m)
3,10 - 2,48 (2H7 m)
1,55 (9H,'s)
Referanseeksempel 7
Fremst ill ing_av_^±)_-c is-7g-a I4i<2>i2l2lS£z2-en-8-on-2-karbok
I dette eksempel oppløses 47 ml (0,169 mmol)
(±)-cis-7-azido-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-4,8-dion-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 6 i 1,6 ml tetrahydrofuran inneholdende 1% vann, og oppløsningen omrøres ved en temperatur på -4 0°C. Deretter tilsettes 3,2 mg (0,0845 mmol) natriumborhydrid, og blandingen omrøres i 15 minutter. Etter tilsetning av en blanding av 10 ml mettet saltvannsoppløsning og 1 ml 10% saltsyre ekstraheres blandingen med 20 ml eter to ganger. Eterlagene tørkes med vannfritt natriumsulfåt og konsentreres til tørr-het under redusert trykk og dette' gir 4 3,9 mg (0,157 mmol)
av et oljeaktig produkt av den ønskede forbindelse. Utbytte 9 2,7%i Produktet har følgende egenskaper.
IRVmaks<3>(cm<_1>): 345°/2118, 1789,,1784(sh) 1729(sh),
1722, 1629, 1632(sh)
NMR (CDC13)6: 6,20 (1H, d, J = 1,22 Hz)
4,86 (1H, d, J = 5,37 Hz)
4,62 (1H, m)
3,98 (1H, m)
2, 45 - 1, 65 (2H., m)
1,53 (9H, s)
Referanseeksempel 8
Fremstilling_av_X=lzcis-733amin liii^O ]_okt-22§n-8-on-2-karbo :
I dette eksempel oppløses 41,9 mg (0,149 mmol) (±) -cis-73-azido-4(3-hydroksy-l-azabicyklo [4,2,0] okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt i referanseeksempel 7 i 1,5 ml etylalkohol, og 12 mg 10% palladium-karbon tilsettes. Blandingen omrøres i en strøm av nitrogen under isavkjøling i 2 timer og 15'minutter. Deretter fjernes palladium-karbon ved filtrering og filtratet konsentreres under redusert trykk, hvoretter den konsentrerte rest opp-løses i 10 ml etylacetat. Oppløsningen ekstraheres med 5 ml 10% vandig sitronsyreoppløsning fire .ganger, og ekstraktet vaskes med 5 ml etylacetat. Etter' innstilling av pH til 8 med natriumkarbonat, mettes det vaskede materiale med natriumklorid og esktraheres med 30 ml etylacetat tre ganger. Ekstraktet vaskes med 30 ml mettet saltvannsoppløsning, tørkes med vannfritt natriumsulfat, hvoretter man konsentrerer til tørrhet under redusert trykk,; hvilket gir 23,4 mg (0,092 mmol) av et svakt gult pulver av den ønskede forbindelse. Utbytte 61,6%. Forbindelsen har følgende egenskaper: IRvmaks3(cm<-1>) 3430, 1774, 1734 (sh) , 1724 , 1625 (sh),
1618
NMR (CDC13)6: 6,18 (1H, bs)
4,53 (1H, m)
3,83 (1H, m)
2,83 (3H, bs)
2,2 0 (1H, m)
1,51 (9H, s)
Referanseeksempel 9
?E§m§tiiIin2_aY_££if iH2ES2§t壧£_§X it,). Z9. :L^. Zl^ Z§:^ ii.^ l' 2Z^~ hY^EolSSYlizÉ^abicYklo^^g^O ]_okt-2- :
I dette eksempel oppløses 172,4 mg (0,678 mmol) ( + )-cis-7-amino-4(3-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre-t-butylester fremstilt som beskrevet i referanseeksempel 8 i 8 ml vannfritt metylenklorid, og 8 ml trifluoreddiksyre tilsettes under omrøring og isavkjøling. Blandingen omrøres ved denne temperatur i 1,5 timer. Reak-sjonsoppløsningsmidlet fjernes ved destillasjon under redusert trykk og den dannede brune olje behandles med etyleter, hvilket gir 121,3 mg (0,389 mmol).av et gulbrunt pulver. Utbytte 57,3%. Produktet har følgende egenskaper: IRvKB5 (cm"1): 3440, 1770, 1750(sh), 1700(sh), 1685. maks ' ' ■ ,

Claims (10)

1. Cefalosporin-analoge,karakterisertved formelen:
hvor X betegner en acylgruppe med formelen X^CO, hvor X^betegner en gruppe valgt blant følgende fem grupper: (1) en cyanometylgruppe eller en gruppe med formelen:
hvor B betegner en cykloheksenylgriippe, en cykloheksadienylgruppe, en fenylgruppe, eller en 5- eller 6-leddet heterocykel valgt blant furyl, tienyl, pyrrolyl, tiazolyl, oksa-zolyl, isotiazolyl, isoksazolyl,:imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyrazinyl, pyridazinyl, triazinyl, 1,2,4-tiadiazolyl og 5,6-dihydro-1,4-ditiin-2-yl, A^betegner en eller flere substituenter på ringen B, som er valgt blant et hydrogenatom, en hydroksygruppe, en alkoksygruppe med 1-4 karbonatomer, en halogengruppe, en nitrogruppe, en aminogruppe, en aminometylgruppe, en metylsulfonamidogruppe og en acyloksygruppe med 1-4 karbonatomer, n er 0 eller et helt tall på 1 til 5, og A^betegner et hydrogenatom, en aminogruppe, én hydroksygruppe, en karboksygruppe eller en sulfogruppe, (2) en gruppe med formelen:
hvor A^, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^og A^er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, en gruppe med formelen:
hvor Aj. betegner en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer; eller en gruppe med formelen:
hvor Ag og A^er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer eller et alkalimetall, og betegner en gruppe med formelen:
hvor Ag og A'g er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe'med 1-4 karbonatomer; eller en gruppe med formelen:
hvor Ag betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, en metansulfonylgruppe,eller en furfuryliden-iminogruppe, og A'g betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, (3) en gruppe med formelen: ,":
hvor A^, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^Qbetegner en substituert arylgruppe eller en substituert eller usubstituert mono-, bi- eller tricyklisk heterocykel med formelen:
Y betegner et oksygen- eller svovelatom, (4) en gruppe med formelen:
hvor , B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^ betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkenylgruppé med 2-6 karbonatomer, en lavere alkinylgruppe med 2-6 karbonatomer, en cykloalkyl-gruppe med 3-6 karbonatomer eller en arylgruppe, og disse gruppe kan være substituert med en passende substituent valgt blant karboksy, cyano, halogen, karbamoyl og en lavere alkyloksykarbonylgruppe med .1-4 karbonatomer, og (5) en gruppe med formelen:
hvor B.^ betegner en trifluormetylgruppe, en cyanometylgruppe eller en gruppe (A-j-f-^—B- (hvor A^,, n og B har den ovenfor angitte betydning), og Z betegner et oksygenatom eller et svovelatom; R, betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-5 karbonatomer eller en lavere; acylgruppe med 1-5 karbonatomer; og R2betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-5 karbonatomer valgt blant metyl ,:■ etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.-butyl og t-butyl, en halogenert alkylgruppe med 1-5 karbonatomer valgt blant 2 , 2,2-trifluoretyl og 2,2,2-trikloretyl, en arylmetylgruppe med 7-20 karbonatomber valgt blant benzyl, difenylmetyl og trifenylmetyl, en arylmetylgruppe■med 7-20 karbonatomer, som har metoksy, nitro osv. på fehylringen, en substituert silylgruppe valgt blant trimetylsilyl og trifenylsilyl eller en gruppe som enzymatisk eller ikke-enzymatisk lett kan fjernes in vivo, f.eks. en gruppe:.med formelen:
hvor betegner et hydrogenatom eller en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, og R,- betegner en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkoksygruppe med 1-6 karbonatomer eller en fenylgruppe; og farmasøytisk akseptable salter derav.
2. Forbindelse ifølge krav l,''karakterisertved at hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene har cis-konfigurasjon..
3. Forbindelse ifølge krav 2,karakterisertved at R^ betegner hydrogen.
4. Forbindelse ifølge krav 3,.karakterisertved at hydroksygruppen ved 4-stillingen har cis-konfigura sjon i forhold til hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene.
5. Forbindelse ifølge krav 3,karakterisertved at hydroksygruppen ved 4-stillingen har trans-konfigurasjon i forhold til hydrogenatomene ved 6- og 7-stillingene.
6. Forbindelse ifølge krav 4, k;arakteri sert ved at X betegner en acylgruppe med formelen:
hvor A^, n, B og A^ har den ovenfor/angitte betydning.
7. Forbindelse ifølge krav 6,.karakterisertved at acylgruppen er en gruppe med formelen:
hvor A-j^ har den ovenfor angitte betydning, og Q betegner et hydrogenatom eller en halogengruppe.
8. Forbindelse,karakterisert vedat den utgjøres av (4S,6R,7S)-7-[2-(2-amino-4-tiazolyl)-2-syn-(2-karboksy-2-prop-2-oksyimino)acetamido]-4-hydroksy-l-azabicyklo[4,2,0]okt-2-en-8-on-2-karboksylsyre.
9. Fremgangsmåte til fremstilling av cefalosporin-analoge med formelen:
hvor X betegner en acylgruppe med formelen X^CO, hvor X^betegner en gruppe valgt blant følgende fem grupper: (1) en cyanometylgruppe eller ,en gruppe med formelen:
hvor B betegner en cykloheksenylgruppe, en cykloheksadienylgruppe, en fenylgruppe eller en 5- eller 6-leddet heterocykel valgt blant furyl, tienyl, pyrrolyl, tiazolyl, oksa-zolyl, isotiazolyl, isoksazolyl, imidazolyl, pyrazolyl, triazolyl, tetrazolyl, pyridinyl, pyrimidinyl, pyradinyl, pyridazinyl, triazinyl, 1,2,4-tiadiazolyl og 5,6-dihydro-l,4-di-tiin-2-yl, A^betegner en eller flere substituenter på ringen B, som er valgt blant et hydrogenatom, en hydroksygruppe, en alkoksygruppe med 1-4 karbonatomer, en halogengruppe, en nitrogruppe, en aminogruppe, en aminometylgruppe, en metylsulfonamidogruppe og en acyloksygruppe. med 1-4 karbonatomer, n er 0 eller et tall fra 1-5, A2betegner et hydrogenatom,, en aminogruppe, en hydroksygruppe, en karboksygruppe eller en sulfogruppe, (2) en gruppe med formelen:
hvor A^, B og n har den ovenfor angitte betydning, A^og A^er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomeren gruppe med.formelen:
hvor A^betegner en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer; eller en gruppe med formelen:
hvor Ag og A_, er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer eller et alkalimetall; og
betegner en gruppe med formelen:
hvor Ag og A'g er like eller forskjellige og betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe méd 1-4 karbonatomer; eller en gruppe med formelen: ,
hvor Ag betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, en metansulfonylgruppe eller en furfuryliden-iminogruppe, og A'g betegner et hydrogenatom eller en alkylgruppe med 1-4 karbonatomer, (3) en gruppe med formelen:
hvor A^, B og n har den ovenfor angitte betydning og A^q betegner en substituert arylgruppe eller en substituert eller usubstituert mono-, di- eller tricyklisk heterocykel med formelen:
Y betegner et oksygen- eller svovelatom, (4) en gruppe med formelen:
hvor A^, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^ betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkenylgruppe med 2-6 karbonatomer, en lavere alkinylgruppe med 2-6 karbonatomer, en cykloalkyl-gruppe med 3-6 karbonatomer eller en. arylgruppe, og disse gruppene kan være substituert med en passende substituent valgt blant karboksy, cyano, halogen,: karbamoyl og en lavere alkyloksykarbonylgruppe med 1-4 karbonatomer, og (5) en gruppe med formelen:
hvor betegner en trifluormetylgruppe, en cyanometylgruppe eller en gruppe med formelen —B~ i hvor A^, n og B har den ovenfor angitte betydning, og Z betegner et oksygenatom eller et svovelatom; R-, betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe med 1-5 karbonatomer eller en lavere acylgruppe med 1-5 karbonatomer; og R2betegner et hydrogenatom, en alkylgruppe med 1-5 karbonatomer valgt blant metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl", isobutyl, sek.butyl og t-butyl, en halogenert alkylgruppe med 1-5 karbonatomer valgt blant 2,2,2-trifluoretyl og 2,2,2-trikloretyl, en arylmetylgruppe med 7-20 karbonatomer valgt blant benzyl, difenylmetyl og trifenylmetyl, en arylmetylgruppe med 7-20 karbonatomer, som har metoksy, nitro osv. på fenylringen, en substituert silylgruppe valgt blant trimetylsilyl og trifenylsilyl eller en gruppe som enzymatisk eller ikke-enzymatisk lett kan fjernes in vivo, f.eks. en gruppe méd formelen:
hvor R^betegner et hydrogenatom eller en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, og R,- betegner en lavere alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkoksygruppe med 1-6 karbon atomer eller en fenylgruppe, samt. farmasøytisk akseptable salter derav,karakterisert vedat man acylerer cefalosporin-analoge med.formelen:
hvor R'^ er lik eller forskjellig fra. R^ og betegner et hydrogenatom, en lavere alkylgruppe,,med 1-5 karbonatomer, eller en beskyttende gruppe for en,hydroksygruppe, og R'2er den samme som éller forskjellig fraR2og betégner et hydrogenatom eller en beskyttende.gruppe for karboksygruppen; eller funksjonelt ekvivalente forbindelser med en karboksylsyre med formelen:
hvor X_ betegner en gruppe valgt blant følgende fem grupper: (!') en cyanometylgruppe eller 'en gruppe med formelen:
hvor B og n har den ovenfor'angitte betydning, A1^ betegner en substituent som er valgt blant et hydrogenatom, en hydroksygruppe, en beskyttet hydroksygruppe,.en alkoksygruppe med 1-4 karbonatomer, en halogengruppe, en rtitrogruppe, en beskyttet aminogruppe, en beskyttet aminometylgruppe, en metylsulfonamidogruppe og en acyloksygruppe med 1-4 karbonatomer, og A'2 betegner et hydrogenatom, en beskyttet aminogruppe, en hydroksygruppe, en beskyttet hydroksygruppe, en karboksygruppe, en beskyttet karboksygruppe, en sulfogruppe, eller en beskyttet sulfogruppe, (2<1>) en gruppe med formelen:
hvor A<1>^, A^, A^, B og n har den ovenfor angitte betydning, (3') en gruppe med formelen:
hvor A'^, A-^q, B og n har den ovenfor angitte betydning, (4') en gruppe med formelen:
hvor A'^, B og n har den ovenfor angitte betydning, og A^2betegner et hydrogenatom, en lavere''alkylgruppe med 1-6 karbonatomer, en lavere alkenylgruppe med 2-6 karbonatomer, en lavere alkinylgruppe med 2-6 karbonatomer, en cyklo-alkylgruppe med 3-6 karbonatomer eller en arylgruppe, og disse grupper kan være substituert med en passende substituent som er valgt blant en beskyttet karboksygruppe, en cyanogruppe, en halogengruppe, en karbamoylgruppe og en lavere alkyloksykarbonylgruppe med 1-4 karbonatomer, og (5') en gruppe méd formelen:
hvor B<1>^betegner en trifluormetylgruppe, en cyanometylgruppe, en gruppe med formelen (A1^-}-^—B_> hvor A<1>^, n 0<3 B har den ovenfor angitte betydning, og Z betegner et oksygenatom eller et svovelatom; eller et reaksjonsdyktig derivat derav og at man deretter eventuelt fjerner den beskyttende gruppe i gruppen X2CO-, OR^ og/eller -CØOR'2, og at man eventuelt omdanner til farmasøytisk akseptable salter derav.
10.. Fremgangsmåte til fremstilling av cefalosporin-analoge med formelen:
hvor X, R^og R2har den ovenfor angitte betydning, og farmasøytisk akseptable salter derav,karakterisert vedat man acylereir cefalosporin-analoge med formelen:
hvor R'^og R'2har den ovenfor åhgitte betydning, eller en funksjonelt ekvivalent forbindelse med en karboksylsyre med formelen:
hvor X2har den ovenfor angitte betydning, eller et reaksjons dyktig derivat derav, og at man eventuelt fjerner den beskyttende gruppe i gruppen X2CO-, OR'^og/eller -COOR'2, og at man eventuelt omdanner til farmasøytisk akseptable salter derav.
NO802713A 1979-09-13 1980-09-12 Fremgangsmaate til fremstilling av racemiske eller optisk aktive cefalosporin-analoge karbacefemforbindelser eller farmaseutisk akseptable salter derav NO802713L (no)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP11672079A JPS5640683A (en) 1979-09-13 1979-09-13 Cephalosporin analogue
JP13698779A JPS5661378A (en) 1979-10-25 1979-10-25 Optically active cephalosporin analog
JP2203580A JPS56118084A (en) 1980-02-23 1980-02-23 Optically active cephalosporin analogue

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO802713L true NO802713L (no) 1981-03-16

Family

ID=27283683

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO802713A NO802713L (no) 1979-09-13 1980-09-12 Fremgangsmaate til fremstilling av racemiske eller optisk aktive cefalosporin-analoge karbacefemforbindelser eller farmaseutisk akseptable salter derav

Country Status (6)

Country Link
EP (1) EP0025602B1 (no)
CA (1) CA1178957A (no)
DE (1) DE3069832D1 (no)
DK (1) DK389080A (no)
ES (1) ES8200689A1 (no)
NO (1) NO802713L (no)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4347183A (en) * 1981-02-02 1982-08-31 Schering Corporation Process for the synthesis of penems and carbapenems
IE52837B1 (en) * 1981-03-30 1988-03-16 Squibb & Sons Inc Beta-lactams
EP0082501A1 (en) * 1981-12-18 1983-06-29 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Beta-lactam compound and a pharmaceutical composition containing the same
EP0112481A1 (en) * 1982-11-12 1984-07-04 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Beta-lactam compound
DE3803169A1 (de) 1988-02-03 1989-08-17 Bayer Ag Ss-lactam-antibiotika, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als und in arzneimitteln
US5099015A (en) * 1991-01-10 1992-03-24 Eli Lilly And Company Trifluoromethyl 1-carba(1-dethia)cephems

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4012383A (en) * 1975-01-02 1977-03-15 Bristol-Myers Company Δ2,3 -1,4-morpholine-2-carboxylic acids and derivatives thereof useful in preparation of antibacteria agents
US4089956A (en) * 1976-09-08 1978-05-16 Smithkline Corporation 7-Acylamino-8-oxo-3-oxa-1-azabicyclo[4.2.0]octane-2-carboxylic acid derivatives and bactericidal compositions and use thereof
JPS54128591A (en) * 1978-03-25 1979-10-05 Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd Cephalosporin analog

Also Published As

Publication number Publication date
ES495035A0 (es) 1981-11-16
EP0025602B1 (en) 1984-12-19
EP0025602A1 (en) 1981-03-25
DK389080A (da) 1981-03-14
CA1178957A (en) 1984-12-04
DE3069832D1 (en) 1985-01-31
ES8200689A1 (es) 1981-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4556559A (en) Antibiotics
US4110165A (en) Process for the production of clavulanic acid
JPS5946954B2 (ja) 抗生物質の製法
US4529720A (en) Antibiotic from Streptomyces clavulicerus
US6031093A (en) Solid salts of clavulanic acid
EP0014476B1 (en) Optically active acylated cephalosporin analogs, processes for their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
US4335211A (en) Process for producing optically active cephalosporin analogs
EP0527686B1 (en) Cephalosporin derivatives
NO802713L (no) Fremgangsmaate til fremstilling av racemiske eller optisk aktive cefalosporin-analoge karbacefemforbindelser eller farmaseutisk akseptable salter derav
US4525353A (en) Antibiotics
EP0014475B1 (en) Optically active cephalosporin analogs, process for their preparation and their use in the preparation of pharmaceutical compositions
KR900002042B1 (ko) 3-치환된 세팔로스포린의 제조방법
US4140764A (en) β-Lactamase inhibitors and process for their preparation
EP0027882B1 (en) Optically active cephalosporin analogs, process for their preparation and their use
US4302540A (en) Process of producing optically active cephalosporin analogs by enzyme selective deacylation
US4663450A (en) Optically active cephalosporin analogs
INOUYE et al. Discovery, isolation and structure of novel cephamycins of Streptomyces chartreusis
JPH0240669B2 (no)
US4755596A (en) Optically active carbacephems
US4061649A (en) Clavulanic acid sulphates
US4316958A (en) Process for producing optically active cephalosporin analogs
JPH0240667B2 (no)
US4123540A (en) Isoclavulanic acid as an antibacterial and a β-lactamase inhibitor
NO744526L (no)
CA1074325A (en) Clavulanic acid and its salts