NO893324L - Behandling av maligne tumorer med 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og fremstilling derav. - Google Patents
Behandling av maligne tumorer med 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og fremstilling derav.Info
- Publication number
- NO893324L NO893324L NO89893324A NO893324A NO893324L NO 893324 L NO893324 L NO 893324L NO 89893324 A NO89893324 A NO 89893324A NO 893324 A NO893324 A NO 893324A NO 893324 L NO893324 L NO 893324L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- cyclic phosphate
- stated
- chloroadenosine
- aminoadenosine
- compound
- Prior art date
Links
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 title claims description 134
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 title claims description 134
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 title claims description 133
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title claims description 47
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 62
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 48
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- CLLFEJLEDNXZNR-UUOKFMHZSA-N (4ar,6r,7r,7as)-6-(6-amino-8-chloropurin-9-yl)-2-hydroxy-2-oxo-4a,6,7,7a-tetrahydro-4h-furo[3,2-d][1,3,2]dioxaphosphinin-7-ol Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1Cl CLLFEJLEDNXZNR-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims description 40
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 25
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 25
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims description 19
- JRNVZBWKYDBUCA-UHFFFAOYSA-N N-chlorosuccinimide Chemical compound ClN1C(=O)CCC1=O JRNVZBWKYDBUCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 13
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 13
- -1 compound 8-chloroadenosine-3',5'-cyclic phosphate Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 12
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 10
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 9
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 6
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 5
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 claims description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 claims 2
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 claims 2
- DVGWFQILDUEEGX-UUOKFMHZSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-(6,8-diaminopurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical compound NC1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O DVGWFQILDUEEGX-UUOKFMHZSA-N 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 36
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 33
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 27
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 22
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 14
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 11
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 10
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 8
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 8
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 8
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 8
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 8
- MHDPPLULTMGBSI-UUOKFMHZSA-N (2r,3r,4s,5r)-2-(6-amino-8-chloropurin-9-yl)-5-(hydroxymethyl)oxolane-3,4-diol Chemical class ClC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O MHDPPLULTMGBSI-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 7
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 6
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 6
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 5
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- ROPMUQKCJYNROP-UUOKFMHZSA-N 8-chloro-9-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1Cl ROPMUQKCJYNROP-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 4
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 4
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 3
- 125000006414 CCl Chemical group ClC* 0.000 description 3
- 101100219382 Caenorhabditis elegans cah-2 gene Proteins 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N Purine Natural products N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 3
- 150000003838 adenosines Chemical class 0.000 description 3
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- MWEQTWJABOLLOS-UHFFFAOYSA-L disodium;[[[5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] hydrogen phosphate;trihydrate Chemical compound O.O.O.[Na+].[Na+].C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O)C(O)C1O MWEQTWJABOLLOS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- PWBJWDKDPAPGED-UHFFFAOYSA-N n'-chlorobutanediamide Chemical compound NC(=O)CCC(=O)NCl PWBJWDKDPAPGED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- FBVALAOQISRDRY-UHFFFAOYSA-N 8-chloro-7h-purin-6-amine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1NC(Cl)=N2 FBVALAOQISRDRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 108091006374 cAMP receptor proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002716 delivery method Methods 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-KQYNXXCUSA-N 3'-AMP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H]1O LNQVTSROQXJCDD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- 208000005045 Interdigitating dendritic cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019759 Maize starch Nutrition 0.000 description 1
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004353 Polyethylene glycol 8000 Substances 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DMKPWSUIRIENJW-UUOKFMHZSA-N [(2r,3s,4r,5r)-5-(6-amino-8-chloropurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate Chemical compound ClC1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O DMKPWSUIRIENJW-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- HFDAOFFHSPQVJP-UUOKFMHZSA-N [(2r,3s,4r,5r)-5-(8-chloro-6-oxo-3h-purin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1Cl HFDAOFFHSPQVJP-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 1
- LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N adenosine monophosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(OP(O)(O)=O)C1O LNQVTSROQXJCDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 201000001531 bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940000425 combination drug Drugs 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 125000005131 dialkylammonium group Chemical group 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-O diethylammonium Chemical compound CC[NH2+]CC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000011363 dried mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 208000021045 exocrine pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 231100001269 lethally toxic Toxicity 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 1
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-O octylazanium Chemical compound CCCCCCCC[NH3+] IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940085678 polyethylene glycol 8000 Drugs 0.000 description 1
- 235000019446 polyethylene glycol 8000 Nutrition 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000001739 rebound effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 1
- DMRMZQATXPQOTP-GWTDSMLYSA-M sodium;(4ar,6r,7r,7as)-6-(6-amino-8-bromopurin-9-yl)-2-oxido-2-oxo-4a,6,7,7a-tetrahydro-4h-furo[3,2-d][1,3,2]dioxaphosphinin-7-ol Chemical compound [Na+].C([C@H]1O2)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1Br DMRMZQATXPQOTP-GWTDSMLYSA-M 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 125000005208 trialkylammonium group Chemical group 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O triethylammonium ion Chemical compound CC[NH+](CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 208000025421 tumor of uterus Diseases 0.000 description 1
- 238000007039 two-step reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Bakgrunn for oppfinnelsen
Oppfinnelsen vedrører behandling av maligne tumorer in vivo ved anvendelse av forbindelsene 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat. Forbindelsen 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og andre relaterte adenin- og adenosinforbindelser er fremstilt ved hjelp av to nye synteser ved anvendelse av hydrogenklorid og m-klorperoksybenzosyre i et passende løsningsmiddel i den første syntesen og N-klorsuccinamid og eddiksyre i et passende løsningsmiddel i den andre syntese.
Mens forrådet av kjemoterapeutiske midler for behandling av neoplastiske sykdommer inkluderer en rekke klinisk anvendbare midler, forblir kontroll av maligne tumorer i varmblodsdyr fremdeles et meget ettertraktet mål.
I et studium rapportert fra "People's Republic of China", men ikke bekreftet noe annet sted, ble det konstantert at 8-bromadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat inhiberte den faste form av uterintumor 14 Ehrlich carcinom, sarcom-180 og reticulum-cellesarcom i mus. Et sammendrag av dette studium fremkom i et Cancergram fra the International Cancer Research Data Bank, serie CB14 nummer 80/03, Mars 1980, publisert av the United States Department Health, Education and Welfare National Instutitute of Health, National Cancer Institute. I motsetning til denne rapport, er det i andre studier funnet at 8-bromadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat er inaktiv som et antitumormiddel i cellekultur.
Samtidig med ovennevnte rapport, rapporterte Y.S. Cho-Chung, J. Cyclic Nucleotide Res. 6: 163, 1980, visse undersøkelses-studier på en antagonistisk intraksjon mellom estrogen og adenosin 3',5'-cyklisk monofosfat (heretter alternativt referert til som cAMP) og hvilken rolle denne måtte spille for vekstkontroll av noen hormon avhengige brysttumorer.
Under studiene vedrørende virkningene av formidlet kontroll av tumorvekst ved hjelp av adenosin-3',5<1->cyklisk fosfat, har
Cho-Chung foreslått at cAMP virker ved binding til et cAMP-reseptorprotein som har to forskjellige cAMP-bindingsseter. cAMP-reseptorproteinet er en regulerende subenhet av et cAMP-avhengig proteinkinase. Det er tilsynelatende seteselek-tivitet når det gjelder binding til det ene eller andre av de to seter. Denne aktivitet kan således beskrives som sete 1-selektivitet og sete 2-selektivitet.
Med henblikk på den manglende evne som nåværende cancerkjemo-terapeutika har til vellykket kontroll av alle neoplastiske sykdommer, er det klart at det er et behov for nye og ytterligere cancerkjemoterapeutiske midler. Det eksisterer videre et behov for nye og bedre preparative prosedyrer for syntesen av slike nye og ytterligere cancerkjemoterapeutiske midler.
8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble først rapportert av R. K. Robins som er oppfinner i den foreliggende oppfinnelse og andre medarbeidere i K. Muneyama et al, J. Carbohydr. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974. 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble først rapportert av R. K. Robins som er oppfinner i den foreliggende oppfinnelse og andre medarbeidere i K. Muneyama et al, Biochemistry, 10, 2390, 1971. Man har nå funnet at 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat (heretter alternativt også identifisert som 8-klor-cAMP) og 8-aminoadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat (heretter alternativt også identifisert som 8-amino-cAMP) sammen eller separat utviser slik signifikant antitumoraktivitet slik at de kan anvendes som antitumormidler in vivo. Videre ga to nye operative synteser 8-kloradenosinforbindelser slik som 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat direkte fra respektive adenosinforløpere.
Kort beskrivelse av oppfinnelsen
Den foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av 8-kloradenosin-3<1>,5<1->cyklisk fosfat (8-klor-cAMP) og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat (8-amino-cAMP) sammen eller separat i behandling av maligne tumorer i varmblodsdyr. I overens-stemmelse med oppfinnelsen oppnås antitumoregenskapene for 8- kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ved tilførsel, til et varmblodsdyr, av en effektiv mengde av et farmasøytisk preparat inneholdende 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat, sammen eller separat, eller farma-søytisk tålbare salter derav som aktive forbindelser i minst 0,1 vekt% basert på totalvekten av preparat.
For anvendelse i farmasøytiske preparater i henhold til oppfinnelsen vil en farmasøytisk bærer kunne anvendes. Bæreren vil foretrukket velges til å tillate tilførsel av en passende konsentrasjon av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat enten ved oral til-førsel, optalmisk tilførsel, topisk påføring, tilførsel i form av stikkpiller eller ved passende injeksjon i form av en løsning eller suspensjon inn i det rammede varmblodsdyr. Dosen og valgt tilførsel av 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen vil være avhengig av verten som har den maligne tumor, typen tumor og tumorsete. For injeksjon, kan 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen tilføres intravenøst, intramuskulært, intracerebralt, subkutant eller intraperitonealt. Videre, for å forenkle anvendelsen av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3 ' , 5'-cyklisk fosfat kan et fysiologisk tålbart salt, som f. eks natrium, kalium eller ammoniumsalt, anvendes. Det er foretrukket å tilføre forbindelsene ved infusjon.
Videre inkluderer oppfinnelsen forbedrede fremgangsmåter for fremstilling av 8-klorderivater av adenin, adenosin, adenosin-5<1->monofosfat og adenosin-35'-cyklisk fosfat og relaterte forbindelser. I disse forbedrede fremgangsmåter fremstilles 8-kloradenin, 8-kloradenosin, 8-kloradenosin-51 - monofosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat eller andre relaterte adenosinforbindelser direkte fra tilsvarende respektive adenosinforløperforbindelser ved fremgangsmåter for fremstilling av klorforbindelser med formelen
hvori R er H eller hvori Ri og R2er H eller eller R^og R2er sammen og R3og R4er H eller en av R3eller R4er OH og den andre er H, og farmasøytisk tålbare salt derav, omfattende trinnene med behandling av utgangsforbindelsen med formelen: hvori Ri og R2er H eller eller R^og R2er sammen
og R3og R4er H eller en av R3eller R4er OH og den
andre er H:
enten,
1) med N-klorsuccinimid og en svak syre i et passende løsningsmiddel eller 2) med hydrogenklorid og et oksydasjonsmiddel i et passende løsningsmiddel.
Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen
8-aminoadenosin-35'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen fremstilles som beskrevet i overnevnte referanse, K. Mumeyama et al, Biochemistry, 10, 2390, 1971. 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen kan fremstilles som beskrevet i overnevnte referanse, K. Muneyama et al, J. Carbohydr. Nucleosides Nucleotides, 1, 55, 1974, via et 8-brom mellomprodukt. Ved imidlertid å anvende nye og forbedrede fremgangsmåter som omtalt heri oppnås 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og relaterte forbindelser direkte fra respektive adenosinforløpere idet man unngår syntetisering av mellomprodukter. Således oppnås forbedringer når det gjelder omkostninger i forbindelse med syntesene.
I den første av disse forbedrede fremgangsmåter kloreres adenosin-3',5<1->cyklisk fosfat direkte til 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ved anvendelse av N-klorsuccinimid og en passende svak ,syre i et passende løsningsmiddel. Eddiksyre er passende som den svake syre. Alternativt kan maursyre eller andre svakere organiske syrer anvendes. Ved utvelgning av syrene, overveier man om syren har en slik styrke at den er tilstrekkelig svak slik at den ikke spalter den sukker-heterocykliske glukosidiske binding (Cl' - N9-bindingen). Som løsningsmiddel er dimetylacetamid, dimetylformamid eller et vandig medium passende.
I den andre av disse forbedrede fremgangsmåter kloreres også adenosin-3',5'-cyklisk fosfat i direkte til 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ved anvendelse av vannfri hydrogenklorid og et passende oksydasjonsmiddel slik som m-klorperoksybenzosyre. Denne reaksjon gjennomføres i et passende løsningsmid-del som f. eks dimetylacetamid eller dimetylformamid. Som et alternativt oksydasjonsmiddel kan natriumhypokloritt nevnes. Foruten fremstilling av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, kan begge disse fremgangsmåter anvendes for å fremstille 8-kloradenosin fra adenosin eller 8-kloradenosin-5'-fosfat fra adenosin-5'-fosfat. Videre, dersom hydrogenklorid/m-klorper-oksybenzosyrereaksjonen gjennomføres i nærvær av fuktighet, kan den anvendes for fremstilling av 8-kloradenin fra adenosin .
I tillegg vil disse to nye fremgangsmåter også kunne anvendes for å omdanne passende derivater av adenosin, adenosin-5'-fosfat, adenosin-3'-fosfat og adenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat til deres respektive 8-klorderivater. Slike derivater vil omfatte 2-deoksy-p-D-erytropentofuranosylsukkerderivatet og 2-p-D-arabinofuranosylsukkerderivatet og vil også omfatte substituenter på purinaminogruppen, 2-stillingen i purin-ringen, sukkerhydroksylgrupper eller til og med andre heterocykliske rester slik som et deazapurin eller lignende.
Syntesen av 8-klorinosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-klorinosin-5'-fosfat og 8-klorinosin forenkles ved anvendelse av disse fremgangsmåter ved at de respektive 8-kloradenosinforbindelser deretter direkte kan deaminiseres ved anvendelse av salpetersyrling til de respektive 8-klorinosinderivater. For denne reaksjon kan salpetersyrlingen dannes in situ fra natriumnitritt og eddiksyre. Således er 8-klorinosin og dets 5'-fosfat og 3',5<1->cyklisk fosfatderivater syntetisert i en direkte to-trinnsreaksjon. I de følgende eksempler på de nye fremgangsmåter i henhold til oppfinnelsen som vist i reaksjonsskjemaet I, kloreres en adenosinforbindelse, f. eks adenosin, AMP eller cAMP, direkte i 8-stillingen på purin-ringen til en passende 8-kloradenosin eller adeninfor-bindelse. Således gir adenosin forbindelser 1 og 2, AMP gir forbindelser 3 og 5 og cAMP gir forbindelse 4. Dette oppnås ved anvendelse av den ene, den andre eller begge de to nye fremgangsmåter.
En fremgangsmåte anvender hydrogenklorid og m-klorperoksybenzosyre i et passende løsningsmiddel slik som dimetylacet amid eller dimetylformamid. Den andre fremgangsmåte anvender N-klorsuccinamid og eddiksyre i et passende løsningsmiddel slik som dimetylacetamid, dimetylformamid eller en vandig eddiksyre. Hvilken som helst av de således dannede 8-klorforbindelser kan deretter ytterligere omdannes i et videre trinn til deres 8-klorinosinanaloger, som f. eks omdannelsen av 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat, forbindelse 4, til 8-klorinosin-3',5'-cyklisk fosfat, forbindelse 5.
I de preparative eksempler i det følgende, ble smeltepunktene målt på et Thomas-Hoover kapillært smeltepunktapparat eller et Haake-Buchler digitalt smeltepunktapparat og er ukor-rigerte. NMR (<1>H NMR) spektra ble bestemt ved 30 0,1 MHz med et IBM NR300AF-spektrometer. De kjemiske skift er uttrykt i 6-verdier (deler pr million) i forhold til tetrametylsilan som intern standard. UV-spektra (UV: sh = shoulder) ble målt på et Beckman DU-50-spektrometer. Elementanalyse ble gjennomført ved Robertson Laboratory, Madison, N.J. Av-dampninger ble gjennomført under redusert trykk med en badtemperatur på under 40°C. Tynnsjiktkromatografi (TLC) ble gjennomført på silika-gel 60 F-254-plater (EM-reagenser). E. Merck silikagel (230 - 400 mesh) ble anvendt for hurtig-kolonnekromatografering.
EKSEMPEL 1
8- kloradenin ( 1)
Til en løsning av adenosin (2,67 g, 10 mmol) i DMA/HC1 (0,5 M, 45 ml) ble det tilsatt m-klorperoksybenzosyre (MCPBA, 3,22 g, 16 mmol, 87 %) og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 time. En ytterligere mengde MCPBA (0,9 g, 5 mmol) ble tilsatt og omrøringen ble fortsatt i ytterligere en time. Toluen (50 ml) ble tilsatt til reaksjonsblandingen og løsningsmidlene avdampet ved 60°C under vakuum til tørrhet. Resten ble oppløst i vann (50 ml) og ekstrahert med eter
(3 x 50 ml). pH i den vandige fase ble justert til 5 med 2N NaOH og deretter fortynnet med EtOH (100 ml). Løsningen ble lagret i kjøleskap over natten. Det lysegule faststoff som separerte ble samlet, vasket med kald EtOH (2 x 25 ml) og tørket til å gi 1,44 g (85,2 %) av 1: Smp 305 - 310°C (spalting) [Lit. smp > 300oC (spalting)]: IR (KBr): 630 (C-Cl), 3100 - 3300 (NH2z ) cm-1:UV X max (pH 1) 262 nm (E 8.700): *™= v (PH 7) 268 nm (E 7.900) : \ v (pH 11) 269 nm (E 8.300): ;ITlciX ITlciX;<X>H NMR (Me2SO-d6): 6 7,48 (br s, 2, NH2), 8,10 (s, 1, C2H) og 13,60 (br s, 1, N9H). ;EKSEMPEL 2;8- kloradenosin ( 2);Metode A;Til en løsning av adenosin (2,67 g, 10 mmol, tørket ved 80°c under vakuum) i DMA/HC1 (0,5 M, 25 ml) ble det raskt tilsatt en løsning av renset MCPBA (3,09 g, 18 mmol) i DMA (20 ml) ;(adenosin vil utpresipitere fra reaksjonsblandingen dersom MCPBA-løsningen ikke tilsettes raskt). Etter omrøring ved romtemperatur i to timer, ble ytterligere MCPBA (0,7 g, 4 mmol) tilsatt og blandingen ble omrørt i ytterligere en halv time inntil alt adenosinet forsvant. DMA ble avdampet i vakuum og resten ble renset ved HPLC på en C-18 revers fasekolonne ved anvendelse av MeOH: AcOH:H20 (18:1:81, v/v) til å gi 1,25 g (41 %) av 2: Smp 188 - 189°C (Lit. smp 188 - 190°C): IR (KBr): 795 (C-Cl), 3150 - 3400 (NH2, OH) cm-<1>: UV ;Xmav(pH 1) 261 nm (E 17.100): Xm (pH 7) 262 nm (E 17.800) ;max max;: Xmax(pH 11) 263nm (E 16.700):<1>H NMR (Me2SO-d5): 6 5,83 ;(d, 1, Jr 2, = 7,0 Hz, C1( H) , 7,59 (br s, 1, NH2) og 8,14 (s, 1, C2H). ;Metode B;Til en løsning av adenosin (1,09 g, 4,1 mmol) i DMF (50 ml) og AcOH (10 ml) ble N-klorsuccinamid tilsatt (NCS, 2,0 g, 15 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i seks døgn. Løsningsmidlene ble avdampet til tørrhet og resten ble renset ved HPLC på en C-18 revers fasekolonne ved anvendelse av MeOH:AcOH:H20 (18:1:81, v/v) til å gi 0,8 g ;(65 %) av 2, som var identisk med tittelforbindelsen fremstilt ved hjelp av metode A. ;EKSEMPEL 3 ;8- kloradenosin- 5'- monofosfat ( 3);Metode A;Til en løsning av adenosin-5'-monofosfat (1,3 g, 3,5 mmol) i tørr DMF (75 ml, destillert over CaH2) ble en løsning av DMF mettet med vannfri HCl (5 ml) tilsatt dråpevis etterfulgt av en løsning av renset MCPBA (1,1 g, 6,4 mmol) i DMF (10 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i to og en halv time, før DMF ble avdampet til tørrhet under vakuum ved 4 5°C. Resten ble oppløst i en minimal mengde vann (tilnærmet 10 ml) og produktet ble: presipitert fra løsningen ved dråpevis tilsetning av MeOH. Faststoffet ble samlet og renset ved HPLC på en C-18 revers fasekolonne ved anvendelse av 0,5 % vandig AcOH for å tilveiebringe 0,64 g (45 %) av 3: Smp 180°C. IR (KBr): 635 (C-Cl) , .3100 - 3400 (NH2, OH) cm-<1>: UV Xm = v (pH 1) 260 nm (EL 10.800): \_ (pH 7) 262 nm (E 10.400): ;max max;Xmax(pH 1:L) 261 ^ (E 10-00°):<1>r nmr (Me2SO-d6) : 6 5,86;(d, 1, J1( 2, = 6,0 Hz, Ci, H), 7,50 (br s, 2,NH2) og 8,16 (s, 1, C2H). ;Metode B;Adenosin-5<1->monofosfatmonohydrat (3,11 g, 8,5 mmol), NaCl (3,11 g, 53 mmol) og NCS (3,33 g, 25 mmol) ble oppløst i 50 % vandig AcOH (100 ml) og løsningen ble omrørt ved romtemperatur i fem døgn. Avdamping av reaksjonsblandingen og rensing av resten ved HPLC på en C-18 revers fasekolonne ved anvendelse av 0,5 % vandig AcOH ga 2,30 g (60 %) av tittelforbindelsen, som var identisk med 3 fremstilt ved hjelp av metode B. ;EKSEMPEL 4 ;8- kloradenosin- 3', 5'- cvklisk fosfat ( 4);Metode C;En blanding av tørr 8-brom-cAMP (20 g, 49 mmol) og CaCl2;(20 g, 180 mmol, tørket ved 7 5°C under vakuum over natten) i vannfri DMF (800 ml, destillert over CaH2under vakuum) ble oppvarmet ved 80 - 85°C under vannfrie betingelser med omrøring i 15 timer. DMF ble avdampet under redusert trykk ved 50°C og resten ble oppløst i kald 2N NaOH (20 ml). Den vandige løsning ble nøytralisert (til pH 7) med kald 2N HC1, filtrert gjennom et membranfilter og renset ved preparativ HPLC på en C-18 revers fasekolonne. Initial vasking med 0,5 % ACOH/H2O ga 8-hydroksy-cAMP og cAMP. Videre eluering med 15 % MeOH/H20 ga den rene tittelforbindelse. Avdamping av løsningsmiddelet ga et hvitt faststoff, som ble samlet, vasket med kaldt vann etterfulgt av EtOH og tørket til å gi 14,0 g (79 %) av 4, Smp 232 - 234°C: IR (KBr): 655 (C - Cl), 3280 (NH2, OH) cm-1:UV: X rricix (pH 1) 260 nm (E 15,600): X iricix (pH 7) 261 nm (E 15,700): \ v (pH 11) 261 nm (E 15,900):<1>H NMR (Me2SO-d6): 6 4.13 (m, 2, C5, H2), 4.56 - 4.39 (m, 1, C4, H), 4.99 - 4.97 og 5.17 - 5.13 (m, 2, C2, H og C3, H), 5,85 (s, 1, CjH) , 7,67 (br s, 2, NH2) og 8,21 (s, 1, C2H). Anal. beregnet for C10E11ClH5O6P. U2°' C, 31.47: H, 3.43: N, 18.35: Cl, 9.29. Funnet: C, 31,69: H, 3.19: N, 18.26: Cl, 9.52. ;Metode A;Til en løsning av adenosin-3',5'-cyklisk fosfat (1,15 g, 3,5 mmol) i tørr DMF (75 ml, destillert over CaH2) tilsettes dråpevis en løsning av DMF mettet med vannfri HC1 (5 ml), etterfulgt av en løsning av renset MCPBA (1,1 g, 6,4 mmol) i DMF (10 ml). Reaksjonsblandingen omrøres deretter ved romtemperatur i to og en halv time, før DMF avdampes til tørrhet under vakuum ved 45°C. Resten oppløses deretter i en minimal mengde vann (tilnærmet 10 ml) og produktet presipi-terte fra løsningen ved hjelp av dråpevis tilsetning av MeOH. Faststoffet som samles deretter og renset ved HPLC på en C-18 revers fasekolonne ved anvendelse av 0,5 % vandig AcOH til å gi 4, indentisk med 4 fremstilt ved hjelp av metode C. ;Metode B;Til en løsning av cAMP (30,3 g, 92 mmol) og NaCl (30,6 g, 52 mmol) i AcOH (250 ml) og H20 (150 ml) ble det tilsatt NCS (30,3 g, 227 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i tre døgn. Løsningsmidlene ble avdampet til tørrhet under redusert trykk og resten ble renset som beskrevet over i metode A til å gi 13,0 g (39 %) av 4, som er identisk med 4 fremstilt ved hjelp av metode C. ;EKSEMPEL 5 ;8- klorinosin- 3', 5'- cvklisk fosfat ( 5);Til en suspensjon av 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat (4, 1,0 g, 2,7 mmol) i H20 (3 ml) ble 2 N NaOH tilsatt dråpevis inntil det ble oppnådd en klar løsning. NaN02(1,05 g, 15 mmol) ble tilsatt til reaksjonsløsningen, etterfulgt av dråpevis tilsetning av AcOH (2 ml). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur over natten og deretter avdampet til tørrhet under redusert trykk ved 3 5°C. Resten ble:renset på en Dowex 50 x 2 - 200 (H<+>) harpikskolonne (5 x 20 cm) med H20 som elueringsmiddel. De homogene fraksjoner inneholdende 8-klor-cIMP samlet og avdampet til tørrhet. Samtidig avdamping av resten med EtOH (3 x 25 ml.) ga et hvitt faststoff, som etter tørking ved 7 8°C under vakuum i 15 timer ga 0,56 g ;(56 %) av 5: Smp 216 - 218°C: IR (KBr): 785 (C - Cl), 1680 ;(C=0), 3200 - 3400 (OH) cm-1: UV: X (pH 1) 251 nm (E ;ITlciX;17.100): \^ (pH 7) 251 nm (E 17.000): \ v (pH 11.) 255 nm ;lUciX ITlciX;(E 17.300):1H NMR (Me2SO-d6): 6 5,85 (s, 1, C1( H), 8,17 ;(s, 1, C2H) , og 12,71 (br s, 1, N]H) . Anal. beregnet for (s, 1'C10H10clN4°7<p>): c- 32,94: H, 2,76: N, 15,37. Funnet: C, 32,75: H, 2,69: N, 15,14. ;For anvendelse i farmasøytiske preparater i henhold til- oppfinnelsen vil normalt salt av den 3',5'-cykliske fosfatdel av enten 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat anvendes og vil passende gis til en vert i form av en løsning i en passende bærer. Alternativt, kan den frie cykliske form av forbindelsene anvendes. ;Aksepterbare salter av fosfatdelen kan velges fra, men er ikke nødvendigvis begrenset til gruppen bestående av alkali-og jordalkalimetallene, f. eks natrium, kalium, kalsium, magnesium, litium eller ammonium og substituert ammonium, trialkylammonium, dialkylammonium, alkylammonium, f. eks trietylammonium, trimetylammonium, dietylammonium, oktyl-ammonium, cetyltrietylammonium og cetylpridium. Et slikt salt vil foretrukket velges fra gruppen bestående av alkalimetall-saltet, som f. eks et natrium- eller kaliumsalt eller et ammoniumsalt. ;Ved utførelsen av oppfinnelsen, blandes 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat, som frie syrer eller som salter, passende med en passende farmasøytisk bærer som, siden forbindelsene i henhold til oppfinnelsen er vannoppløselige, kan være noe så enkelt som sterilt vann eller en kompleks bærer med hensiktsmessige midler for passende å etterligne et bestemt biologisk miljø, dvs pH eller salt tilpasset for en løsning som er passende for intravenøs, intramuskulær eller andre injeksjoner. ;Ved utvelging av en passende farmasøytisk bærer, må typen tumor, tumorsetet og helsetilstand og alder for verten overveies. 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat kan passende anvendes i nærvær av en passende buffer eller som et salt som omtalt over. Forbindelsene i henhold til oppfinnelsen er særlig anvendbare ved behandling av carcinom. I en slik gruppe er bryst, tarm, blære, lunge, prostata, mage og pancreascarcinom innbefattet. Behandlingsmetoden er effektiv til å bevirke regresjon, lindring, vekstinhibering og remisjon av tumorer. ;8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen eller salter derav vil foretrukket bli blandet med en passende farma-søytisk bærer slik at 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-351-cyklisk fosfat vil bli oppløst i bæreren. Alternativt, kan imidlertid suspensjoner, emulsjoner eller andre utformninger av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen anvendes hvor dette er indikert. Den farmasøytiske bærer, i tillegg til å ha et oppløsende eller suspenderende middel deri, kan også omfatte passende fortynningsmidler, buffere, overflateaktive midler, og andre lignende midler som typisk anvendes i farmasøytiske bærere. Den totale sammensetning av den farmasøytiske bærer vil imidlertid velges til å være forenelig med avleveringssetet, konsentrasjonen av den aktive bestanddel og andre parametre som er standard innen farmasøytisk industri. ;8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen vil passende kunne blandes med den farmasøytiske bærer slik at de vil være tilstede i en konsentrasjon på minst 0,1 vekt% av den totale sammensetning. De vil foretrukket være tilstede i den farmasøytiske bærer i en konsentrasjon på omtrent 10 til omtrent 90 vekt% av den totale sammensetning. ;Basert på nåværende studier, vil effektive mengder av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat typisk strekke seg fra omtrent 13 milligram pr kilogram pr døgn (mg/kg/døgn) av den totale kroppsvekt av det behandlede varmblodsdyr til omtrent 288 mg/kg/døgn. Dette område vil foretrukket være fra 22 mg/kg til omtrent 17 3 mg/kg/døgn. Basert på nåværende undersøkelser, vil effektive mengder av 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat typisk strekke seg til omtrent 13 milligram pr kilogram pr døgn (mg/kg/døgn) av den totale kroppsvekt for det behandlede varmblodsdyr fra omtrent 104 mg/kg/døgn. Dette område vil foretrukket være fra ;13 mg/kg til omtrent 37 mg/kg/døgn. Som med andre faktorer som er nevnt i det foregående, vil mengdene av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat som anvendes i behandling av et rammet dyr ta hensyn til parametere slik som typen tumor, tumorsetet, tilførselsform og den fysiske størrelse og tilstand hos verten. Uansett bør den aktuelle mengde være tilstrekkelig til å tilveiebringe en kjemoterapeutisk effektiv mengde av middelet i verten i et passende volum, som den fagkyndige på området lett vil kunne bestemme utifrå den foreliggende beskrivelse. ;8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat kan tilføres sammen, blandet med en passende farmasøytisk bærer. Som det klart fremgår fra eksemplene og ;tabellene i det følgende, utviser begge disse forbindelsene når de tilføres uavhengig av hverandre til en vert, en bestemt antitumoraktivitet. Når begge forbindelsene tilføres sammen til en vert beholdes antitumoraktiviteten og forbindelsene er ikke antagonistiske overfor hverandre. Videre, da søkerne ikke ønsker å være bundet til noen teori, tror man på dette tidspunkt at når forbindelsene tilføres sammen utviser forbindelsene 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat synergistisk aktivitet. ;8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat alene, som det klart fremgår fra forsøkene og tabellen i det følgende, utviser et svært bredt aktivitetsspekter mot en rekke forskjellige tumorer. 8-aminoadenosin-3 1 , 5-' -cyklisk fosfat alene utviser signifikant aktivitet mot tarmcarcinom. Kombinasjonen av forbindelsene 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat utviser også signifikant aktivitet mot tarmcarcinom, men aktiviteten av kombinasjonen av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat er imidlertid større enn aktiviteten av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat anvendt alene. ;Når forbindelsene 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat anvendes i de doseområder som er angitt over, men anvendes sammen, økes aktiviteten sammenlignet med aktiviteten for 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat når denne anvendes alene. Denne økte aktivitet opprettholdes videre utover en endt behandlingperiode. I tillegg, med kombinasjon av de to forbindelsene 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat har man en nedsatt "rebound"-virkning for medikamentet etter en diskontinuerlig tilførsel. ;8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen kan gis som enkle doser eller som multiple doser oppdelt i 100 doser som gis daglig eller over en periode på flere dager. Som det klart fremgår fra eksemplene i det følgende, utviser 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen visse forsterkede responser når de tilføres i form av en infusjon og, som sådan, vil dette bli tatt hensyn til i optimaliseringen av en doseplan såvel som innen teknikken gitt i den foreliggende ansøkning. ;Følgende eksempler er gitt for anvendelse av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og kombinasjonen av 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat pluss 8-aminoadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen som terapeutiske midler overfor neoplastiske sykdommer. I disse eksempler er effektiviteten av 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat som antitumormidler demostrert vad anvendelse av standardtester og for bestemte maligne tumorer. ;Disse standardtester anvender forskrifter utviklet under beskyttelsen av The Developmental Therapeutic Program, Division of Cancer Treatment, United States National Cancer Institute, Bethesda, Maryland, United States of America, som gitt i In Vitro Cancer Models, National Institute of Health, publikasjoner nr 84-2635, februar 1984, United States Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Institute of Health. ;Dannelse, vekst og testing av tumor ble gjennomført som fremsatt i publikasjonen i det foregående avsnitt. Til-førselsmåte og avlevering av 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat avviker imidlertid noe fra disse forskrifter og er som gitt i hvert av de enkelte eksempler. Evalueringsprotokollene med hensyn til aktiviteten av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat som antitumormidler, følger imidlertid de kriterier som er definert i overnevnte refererte publikasjon. ;For disse eksempler er visse standardforkortelser anvendt som følger: i.p.-intraperitoneal, qd - en gang pr døgn: og mg/kg/døgn - milligram pr kilogram pr døgn. ;I eksemplene ved anvendelse av L1210 som test-tumorcellelinjen, er testresultatene indikert som %T/C. I overens-stemmelse med forskriftene i The United States National Cancer Institute for L1210 tumorcellelinjen, betraktes en verdi som er større enn 125 % å ha statistisk relevant aktivitet. For tester mot faste humane tumorcellelinjer, er testresultatene gitt som forandring i gjennomsnittlig tumorvekt. Dette er uttrykt på to måter. Dersom man hadde en økning i tumorvekt er resultatene uttrykt som AT/AC. Dersom det imidlertid var en netto negativ forandring i tumorvekt er resultatene uttrykt som AT/T. Disse to måter for å uttrykke dataene følger igjen forskriftene og kriteriene som er fremsatt som angitt over av the National Cancer Institute. ;EKSEMPEL 6 ;8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat som et natriumsalt ble testet ved anvendelse av ikke-tumorbærende BOF^-mus for å etablere en dødelig toksisitet for dette medikament. For denne test ble medikamentet tilført intraperitonealt ved en bolusinjeksjon gitt som en enkel dose på dag 1. Som det klart fremgår fra tabell 1 i det følgende, var det ingen toksiske dødsfall ved 104 milligram pr kilogram pr injeksjon. Ved en mengde på 17 3 milligram pr kilogram pr injeksjon var der 40 % ;toksiske dødsfall og ved 288 milligram pr kilogram pr injeksjon utviste forbindelsen 100 % dødelig toksisitet. Som det vil fremgå i eksempel 6 i det følgende, tolererte testdyrene en større medikamentdose før man så dødelig toksisitetnår forbindelsen tilføres ved hjelp av infusjon. ;
EKSEMPEL 7;Aktiviteten av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat overfor L1210 inokulerte BDF]_-mus ble bestemt ved både bolusinjeksjon og ved infusjon. Som det ses i tabell 2 i det følgende, når forbindelsen ble tilført ved bolusinjeksjon var der ingen signifikant aktivitet, men når forbindelsen imidlertid ble infusert inn i testdyret i en dose fra 22 mg til 173 mg/kg/- dag, utvist 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat signifikant anti-tumoraktivitet. Videre ble toksisiteten bestemt for de infusjonstestede dyr. Som det også fremgår fra tabell 2, var forbindelsen ikke toksisk når den ble infusert i en dose på 17 3 mg/kg/dag, men ved 288 mg/kg/dag ble imidlertid både aktivitet og'toksisitet konstantert og ved høyere konsentrasjoner, ved 480 og 800 mg/kg/dag, er forbindelsen dødelig toksisk. ;Resultatene i tabell 2 indikerer at 8-klorade*nosin-3 ' , 5 '-cyklisk fosfat er et effektivt anti-tumormiddel overfor L1210 i inokulerte mus når den infuseres inn i testdyrene. Videre viste forbindelsen en doserespons for denne aktivitet. Som indikert over, indikerer en T/C som er større enn 125 signifikant aktivitet.
Na<+>dødelig toksiske for alle behandlede mus mens 280 mg/kg dosen drepte to av fem mus.
8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble testet mot en rekke faste humane tumorcellelinjer. I testene i eksempel 8-11 som er vist i tabell 3-6, måles tumorregresjonsstørrelse og ikke økning i levetid for testdyrene. Denne tilkjennegivelse følger de aksepterte Nation Cancer Institute forskriftsprose-dyrer for de respektive faste tumorcellelinjer som ble testet.
EKSEMPEL 8
I dette eksempel, ble 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, gitt ved infusjon, testet overfor human brystcarcinom i atymiske mus. I en første undersøkelse som er vist i øvre del av tabell 3a ved de dosemengder som er gitt, fikk man en gjennomsnittlig reduksjon i tumorvekst. Som sådan er forandringen i denne gjennomsnittlige reduksjon i tumorvekt i følge the National Cancer Institute forskrifter som bemerket over, uttrykt somAT/T. I den undersøkelsen som er vist i den nedre del av tabell 3a, ved lavere dosenivåer, var A-vekten mellom utgangstumorvekten og endelig tumorvekt større enn enhet og som sådan, idet man igjen følger de etablerte forskrifter, er resultatene vist som AT/AC.
Enhver verdi for AT/AC eller AT/T som er under 25 betraktes som indikativ på signifikant aktivitet ifølge the National Cancer Institute forskriftene. Som det fremgår fra tabell 3a ble signifikant aktivitet indikert og et stort doseområde fra 22 mg/kg opptil og inkluderende 17 3 mg/kg.
Gjennomsnittlig tumorvekt for. hver dose vist i tabell 3a for alle testdyrene på dagene 1 og 8 er indikert i tabell 3b.
EKSEMPEL 9 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus og overfor human koloncarcinom LoVo. Som f. eks 8, ble tilførselen også utført ved infusjon. Resultatene av testen er vist i tabell 4a i det følgende. Gjennomsnittlig forandring i tumorvekt er indikert enten som AT/AC for de positive verdiene eller AT/T for de negative verdiene som omtalt i forbindelse med eks. 8 over. Som det fremgår ved 37 og 62 kg/mg dosen utviser forbindelsen signifikant aktivitet.
Gjennomsnittlig tumorvekt for hver dose vist i tabell 4a for alle testdyrene på dagene 1 og 8 er indikert i tabell 4b.
EKSEMPEL 10 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human brystcarcinom MDA-MB-231. Testen ble også gjennomført ved at forbindelsen ble tilført ved infusjon. Resultatene fra denne testen er vist i tabell 5a under. Forbindelsene utviste signifikant aktivitet ved doser på 62 og 104 mg/kg/dag. Videre, mens forbindelsen ikke viste signifikant aktivitet ved alle doser, viste den en respons-linearitet gjennom det testede doseområde overfor denne tumorlinj en.
Gjennomsnittlig tumorvekt for hver dose vist i tabell 5a for alle testdyrene på dagene 1 og 8 er indikert i tabell 5b.
EKSEMPEL 11 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human lungecarcinom LX-1. Som for resultatene vist i tabell 6a under, utviste forbindelsen signifikant aktivitet ved en dose som strekker seg fra 37 mg - 104 mg/kg/dag. For denne testen var infusjonen kun 5 dager i motsetning til de syv dagene som ble anvendt for de tidligere testene av faste tumorer i eksemplene 8, 9 og 10. Videre, som i eksempel 8, er resultater for positive gjennomsnittlige tumorvekter vist som AT/AC og negative gjennomsnittlige tumorvekter som AT/T. Det er signifikant å konstatere at ved 62 og 104 mg doseområdet var det en høy grad av vekttap av tumoren i motsetning til bare inhibering av tumorvekst, dvs ved 62 og 104 mg dosenivåene hadde man en tumorregresj on.
Gjennomsnittlig tumorvekt for hver dose vist i tabell 6a for alle testdyrene på dagene 1 og 8 er indikert i tabell 6b.
EKSEMPEL 12 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human koloncarcinom MeC-1. Som for resultatene vist i tabell 7a under utviste forbindelsen signifikant aktivitet i et doseområde fra 37 mg/kg/dag til 104 mg/kg/dag. Medikamentet ble tilført ved infusjon. Som for resultatet i tabell 7a ble det utvist signifikant aktivitet for alle de testede doser overfor denne tumorlinjen. i EKSEMPEL 13 8-aminoadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat som et natriumsalt ble testet ved anvendelse av ikke-tumorbærende BDFi-mus for å etablere en dødelig toksisitet for medikamentet. For denne test ble medikamentet tilført intraperitonealt ved bolus-inj eks jon gitt som en enkel dose på dag 1. Som det fremgår fra tabell 8 under var der ingen toksiske dødsfall ved en injeksjon på 104 g/kg. Ved høyere konsentrasjoner på 173 mg/kg og 288 mg/kg var der dødelig toksisitet for henholdsvis 1/5 og 5/5 mus. Når 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble tilført 24 timer/døgn i fem påfølgende døgn ved intraperi-toneal infusjon, var 62 mg/kg den maksimalt tolererte dose og ved en dose på 104 mg/kg eller større var forbindelsen dødelig toksisk for 13/13 mus.
Aktiviteten av 8-aminoadenosin-35'-cyklisk fosfat overfor forskjellige faste humane tumorer ble testet ved anvendelse av atymiske mus behandlet ved infusjon med den aktive forbindelse. Forskriftene omtalt i eksempel 8 over ble anvendt for disse tester.
EKSEMPEL 14
I dette eksempel ble 8-aminoadenosin-35'-cyklisk fosfat gitt ved infusjon mot human koloncarcinom MeC-1. Som det fremgår fra tabell 9 ble signifikant aktivitet indikert over det testede doseområde.
EKSEMPEL 15
8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human koloncarcinom HT-29. Som i
eksempel 14 ble tilførsel også gjennomført ved infusjon. Som det fremgår av tabell 10 utviste forbindelsen signifikant aktivitet over hele området av testede doser.
EKSEMPEL 16
8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human koloncarcinom CX-1. Denne test ble også gjennomført ved anvendelse av infusjon som tilførsels-måte. Denne spesielle humane tumorlinje har felles opp-rinnelse med ovennevnte refererte HT-29 tumorlinjen i eksempel 15, unntatt at CX-1 tumorlinjen var utviklet in vivo mens HT-29 tumorlinjen var utviklet in vitro. Resultatene av denne test er vist i tabell 11 i det følgende. Som det fremgår av tabell 11 viste forbindelsen større aktivitet ved
et lavere dosenivå på 8 mg/kg/dag. Idet man ikke ønsker å bli bundet til noen teori på dette tidspunkt, antar man at vertens toksisitet overfor 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat synes å være innvirket av tumorlinjen som behandles. Videre, som for resultatene vist i tabellene 9, 10 og 11, utviste forbindelsene 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat særlig signifikant aktivitet overfor humane koloncarcinomer.
EKSEMPEL 17 8-aminoadenosin-3',5<1->cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human lungecarcinom LX-1. Denne testen ble ytterligere gjennomført ved infusjon og med behandling over en periode på fem dager. Resultatene for testen er vist i tabell 12.
EKSEMPEL 18
På lignende måte som i eksempel 17 ble 8-aminoadenosin-3 ' , 5 ' - cyklisk fosfat ytterligere testet i atymiske mus overfor human lungecarcinom LX-1 idet behandlingen varte i syv dager. Resultatene for denne testen er vist i tabell 13 i det følgende.
EKSEMPEL 19 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human brystcarcinom MX-1. Denne test ble også gjennomført ved infusjon og behandling ble utført i syv dager. Resultatene av to separate undersøkelser som anvendte denne forskriften er vist i tabellene 14a og 14b under. EKSEMPEL 20 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat ble ytterligere testet i atymiske mus overfor human koloncarcinom LOVO. Denne test ble også gjennomført ved anvendelse av infusjon som tilførsels-måte. Resultatene for denne test overfor denne spesielle humane koloncarcinom er vist i tabell 15 under.
Kombinasjonen av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat tilført sammen ble ytterligere testet. Hver forbindelse ble gitt i en mengde innen dens aktive doseområde som vist i eksemplene over.
EKSEMPEL 21
I denne test tilføres 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat sammen til atymiske mus mot human koloncarcinom HT-29. Denne kombinerte medika-mentterapi ble sammenlignet med tilførsel av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat som et uavhengig medikament i samme dose som anvendt x kombinasjonsterapien. Både kombinasjonsmedika-mentterapien og terapien med enkel medikamentdose ble gjennomført ved infusjon idet behandlingen varte i syv dager. Som man ser fra resultatene av denne testen i tabell 16 under, viste kombinasjonen av 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat økt aktivitet sammenlignet med tilførsel av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat som et uavhengig medikament. Dette indikerer at 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat ikke er antagonister. Man antar videre at 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat kan virke i synergisme som antitumormidler.
I testen i eksempel 21 ble behandling gjennomført opptil og omfattende syv dager. Testdyrene ble imidlertid fulgt til dag 21. På dag 12 var tumorvekten fremdeles mindre enn den for kontrolldyrene på dag 1 i dyr behandlet med kombinasjonen av 8-aminoadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, dvs at tumorvekten på dag 12 for kombinasjon av de to forbindelser var fremdeles mindre enn den initiale tumorvekt på dag 1. På dag 21 utviklet kombinasjonen av 8-aminoadenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat mindre rebound-virkning sammenlignet med 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat som et uavhengig medikament.
Som man ser fra overnevnte eksempeler utviser 8-kloradenosin-3',5<1->cyklisk fosfat et bredt aktivitetsområde overfor mange humane tumorceller, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat utviser god spesifisitet overfor humane kolontumorer og kombinasjon en av 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat er ikke antagonistisk.
For tilførsel til en vert infisert med en neoplastisk sykdom kan 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen utformes på en rekke måter for fremstilling av farmasøytiske preparater inneholdende 8-kloradenosin-3<1>,5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat eller en kombinasjon av 8- kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i henhold til oppfinnelsen som aktive bestanddeler. Følgende illustrerende eksempler er gitt for utforminger av slike farmasøytiske preparater ved anvendelse av natriumsaltet av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat.
I disse eksempler, illustrerer farmasøytisk preparativt eksempel 22 anvendelsen av natriumsaltet av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i injiserbare former passende for en intravenøs eller andre typer injeksjon inn i vertsdyret. Farmasøytisk preparativt eksempel 23 omhandler et oralt siruppreparat. Farmasøytisk preparativt eksempel 24 omhandler et oralt
kapselpreparat og farmasøytisk preparativt eksempel 25 orale
tabletter. Farmasøytisk preparativt eksempel 26 er rettet på anvendelsen av natriumsaltet av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat i passende stikkpilleformer. For de farmasøytisk preparative eksempler 22 - 26, er bestanddelene gitt etterfulgt av metodene for fremstilling.
EKSEMPEL 22
Natriumsaltet av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat oppløses i vann og føres gjennom et 0,22 u filter. Filterløsningen tilsettes til ampuller eller glass, forsegles og steriliseres.
EKSEMPEL 23
EKSEMPEL 24
Natriumsaltet av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og laktosen ble kombinert i en blander med dobbel kappe utstyrt med en intensiveringsstav. Blandingen ble trommeIblandet i to minutter, etterfulgt av blanding i et minutt med intensiveringsstaven og deretter trommelblandet igjen i et minutt. En del av blandingen blandes deretter med Sterotex pulveret, føres gjennom en sikt nr 30 og tilsettes tilbake til resten av blandingen. De blandede bestanddeler blandes deretter i et minutt, blandes med intensiveringsstaven i 30 sekunder og trommelblandes i ytterligere et minutt. Kapsler med passe størrelse fylles med henholdsvis 141 mg, 352,5 mg eller 705 mg av blandingen, for de 10 0 mg, 2 60 mg og 500 mg inneholdende kapsler.
EKSEMPEL 25
Maisstivelse, cellulose og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat
kombineres i en planetarisk blander og blandes i to minutter. Vann tilsettes til- blandingen og man blander i et minutt. Den oppnådde blanding spres på skåler og tørkes i en varmluftsovn ved 50°C inntil et fuktighetsnivå på 1 - 2 % er oppnådd. Den tørkede blanding males deretter i en Fitz-mølle gjennom en siktnr. RH2B ved middels hastighet. Sterotex-pulveret tilsettes til en del av blandingen og føres gjennom en sikt nr 20 og tilsettes tilbake til den malte blanding og alt blandes i fem minutter ved trommelblanding. Utstansede
tabletter på henholdsvis 15 0 mg, 37 5 mg og 75 0 mg av den totale blanding utført ved hjelp av stempler med passende størrelse, dannes for de 100 mg, 250 mg eller 500 mg inneholdende tabletter.
EKSEMPEL 26
Polyetylenglykol 1540 og polyetylenglykol 8000 smeltes sammen ved 60°C og 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat-natriumsalt og/eller 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat oppløses i smeiten. Blandingen formes til passende stikkpiller ved 25°C.
Claims (34)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av klorforbindelser med formelen
hvori R er H eller
hvori Ri og R2 er H eller
eller R^ og R2 er sammen
og R3 og R4 er H eller en av R3 eller R4 er OH og den andre er H, og farmasøytisk tålbare salter derav, karakterisert ved trinnene:behandling av utgangsforbindelsen med formelen hvori R] _ og R er H eller
eller R] _ og R2 er sammen
og R3 og R4 er H eller en av R3 eller R4 er OH og den andre er H, med hydrogenklorid og et oksydasjonsmiddel i et
passende løsningsmiddel, og nevnte forbindelse isoleres.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at nevnte oksydasjonsmiddel velges fra gruppen bestående av m-klorperoksybenzosyre og natriumhypokloritt, og nevnte løsningsmiddel velges fra gruppen bestående av dimetylacetamid og dimetylformamid.
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 2,
karakterisert ved at nevnte oksydasjonsmiddel er m-klorperoksybenzosyre og nevnte hydrogenklorid er vannfritt hydrogenklorid.
4. Fremgangsmåte som angitt i krav 1, karakterisert ved at R3 er OH og R4 er H,
5. Fremgangsmåte som angitt i krav 4,
karakterisert ved at R]_ og R2 er eller R^ og R2 er sammen
6. Fremgangsmåte som angitt i krav 5, karakterisert ved at Ri og R2 er sammen
7. Fremgangsmåte for fremstilling av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat,
karakterisert ved at adenosin-3',5'-cyklisk fosfat behandles med m-klorperoksybenzosyre og vannfri hydrogenklorid i et løsningsmiddel valgt fra dimetylacetamid eller dimetylformamid, og nevnte 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat isoleres.
8. Fremgangsmåte for fremstilling av klorforbindelser med formel
hvori R-j_ er H eller
hvori Ri og R2 er H eller
eller R] _ og R2 er sammen
og R3 og R4 er H eller en av R3 eller R4 er OH og den andre er H, og farmasøytisk tålbare salter derav, karakterisert ved trinnene:behandling av en utgangsforbindelse med formel hvori R]_ og R2 er H eller
eller R] _ og R2 er sammen
og R3 og R4 er H eller en av R3 eller R4 er OH og den andre er H,
med N-klorsuccinimid og en svak syre, og nevnte forbindelse isoleres.
9. Fremgangsmåte som angitt i krav 8, karakterisert ved at den ytterligere omfatter behandling av nevnte utgangsforbindelse med nevnte N-klorsuccinimid og nevnte svake syre i et løsningsmiddel.
10. Fremgangsmåte som angitt i krav 9, karakterisert ved at nevnte løsningsmiddel velges fra gruppen bestående av dimetylacetamid, dimetylformamid og et vandig medium.
11. Fremgangsmåte som angitt i krav 10, karakterisert ved at nevnte svake syre er en organisk syre.
12. Fremgangsmåte som angitt i krav 11, karakterisert ved at nevnte svake organiske syre er valgt fra gruppen bestående av eddiksyre og maursyre.
13. Fremgangsmåte som angitt i krav 8, karakterisert ved at R3 er OH og R4 er H.
14. Fremgangsmåte som angitt i krav 13, karakterisert ved at R^ og R2 er eller R-j _ og R2 er sammen
15. Fremgangsmåte som angitt i krav 14, karakterisert ved at R;j_ og R2 er sammen
16.F remgangsmåte for fremstilling av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat,
karakterisert ved at adenosin-3',5'-cyklisk fosfat behandles med N-klorsuccinimid i fortynnet vandig eddiksyre, og nevnte 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat isoleres.
17. Fremgangsmåte som angitt i krav 16, karakterisert ved at nevnte adenosin-3',5'-cyklisk fosfat og nevnte N-klorsuccinimid er i løsning i nevnte vandige eddiksyre, og ytterligere omfattende tilsetning av natriumklorid til nevnte løsning.
18. Metode for å behandle tumorer i varmblodsdyr,
karakterisert ved at den omfatter til-førsel, til nevnte varmblodsdyr, og en effektiv mengde av et farmasøytisk preparat inneholdende, som aktiv bestanddel, en forbindelse valgt fra gruppen bestående av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og farmasøytisk tålbare salter derav.
19. Metode som angitt i krav 18, karakterisert ved at den aktive forbindelse er tilstede i minst omtrent 0,1 vekt% basert på totalvekten av preparatet.
20. Metode for ,å behandle tumorer i varmblodsdyr, karakterisert ved tilførsel, til nevnte varmblodsdyr, av en effektiv mengde av et farmasøytisk preparat inneholdende, som aktiv bestanddel, en forbindelse valgt fra gruppen bestående av 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og farmasøytisk tålbare salter derav.
21. Metode som angitt i krav 18 eller 20, karakterisert ved at nevnte farmasøytiske preperarat tilføres til nevnte varmblodsdyr ved injeksjon.
22. Metode som angitt i krav 18 eller 20, karakterisert ved at nevnte farmasøytiske preparat tilføres til nevnte varmblodsdyr ved infusjon av nevnte preparat i nevnte varmblodsdyr.
23. Metode som angitt i krav 18 eller 20, karakterisert ved nevnte farmasøytiske preparat tilføres i en mengde slik at en mengde fra omtrent 3 mg/kg/dag til omtrent 208 mg/kg/dag av nevnte 8-kloradenosin-3 <1> ,5'-cyklisk fosfat tilføres til nevnte varmblodsdyr.
24. Metode som angitt i krav 18 eller 20, karakterisert ved at nevnte farmasøytiske preparat tilføres i en mengde slik at fra omtrent 13 mg/kg/dag til omtrent 104 mg/kg/dag av nevnte 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat tilføres til nevnte varmblodsdyr.
25. Metode som angitt i krav 18 eller 20, karakterisert ved at nevnte farmasøytiske preparat omfatter både 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat.
26. Antitumorpreparat for behandling av tumorer in vivo, karakterisert ved at det som aktiv bestanddel inneholder en effktiv mengde av forbindelsen 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og farmasøytisk tålbare salter derav.
27. Antitumorpreparat for behandling av tumorer in vivo, karakterisert ved at det som aktiv bestanddel inneholder en effektiv mengde av forbindelsen 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og farmasøytisk tålbare salter derav.
28. Antitumorpreparat som angitt i krav 27, karakterisert ved at den ytterligere omfatter en effektiv mengde av forbindelsen 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat og farmasøytisk tålbare salter derav.
29. Fremgangsmåte for fremstilling av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat,
karakterisert ved at 8-bromadenosin-3',5'-cyklisk fosfat bringes i kontakt med CaCl2 i et løsnings-middel.
30. Fremgangsmåte som angitt i krav 29, karakterisert ved at 8-bromadenosin-3 ' , 5.'-cyklisk fosfat bringes i kontakt med CaCl2 i et løsnings-middel under ialt vesentlig vannfrie betingelser.
31. Fremgangsmåte som angitt i krav 30, karakterisert ved at 8-bromadenosin-3 ' ,5'-cyklisk fosfat bringes i kontakt med CaCl2 i et løsnings-middel ved en økt temperatur.
32. Fremgangsmåte for fremstilling av 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat,
karakterisert ved at
a) 8-bromadenosin-3',5'-cyklisk fosfat bringes i kontakt med CaCl2 i et løsningsmiddel, under ialt vesentlig vannfrie betingelser og ved en økt temperatur,
b) løsningsmiddelet fjernes til å gi en rest;
c) resten oppløses i en basisk løsning;
d) den basiske løsning nøytraliseres med en syre;
e) 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat renses fra den nøytraliserte løsning.
33. Fremgangsmåte som angitt i krav 32, karakterisert ved at 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat renses ved kromatografi.
34. Fremgangsmåte som angitt i krav 32 eller 33, karakterisert ved at løsningsmiddelet er dimetylformamid.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/136,407 US4861873A (en) | 1987-12-21 | 1987-12-21 | 8-Chloroadenosine 3', 5'-cyclic monophosphate preparations |
| US18007088A | 1988-04-11 | 1988-04-11 | |
| PCT/US1988/001217 WO1989005648A1 (en) | 1987-12-21 | 1988-04-20 | Treatment of malignant tumors with 8-chloroadenosine 3',5'-cyclic phosphate, 8-aminoadenosine 3',5'-cyclic phosphate and preparation thereof |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO893324D0 NO893324D0 (no) | 1989-08-18 |
| NO893324L true NO893324L (no) | 1989-10-20 |
Family
ID=27375807
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO89893324A NO893324L (no) | 1987-12-21 | 1989-08-18 | Behandling av maligne tumorer med 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og fremstilling derav. |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| NO (1) | NO893324L (no) |
-
1989
- 1989-08-18 NO NO89893324A patent/NO893324L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO893324D0 (no) | 1989-08-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6211158B1 (en) | Desazapurine-nucleotide derivatives, processes for the preparation thereof, pharmaceutical compositions containing them and the use thereof for nucleic acid sequencing and as antiviral agents | |
| CN103816174B (zh) | 用于治疗病毒感染的化合物和方法 | |
| TWI268923B (en) | N6 heterocyclic 8-modified adenosine derivatives | |
| JPH10507772A (ja) | Ｌ−リボフラノシルヌクレオシド | |
| PT94788A (pt) | Processo para a preparacao de nucleosidos e necleotidos e de composicoes farma ceuticas que os contem | |
| EA007491B1 (ru) | Производные нуклеозидов в качестве ингибиторов рнк-зависимой рнк вирусной полимеразы | |
| JPH05508864A (ja) | 抗昇圧および抗虚血特性を有する化合物 | |
| EP3484504A1 (en) | Compounds, compositions, and methods for the treatment of disease | |
| JP2011032281A (ja) | 抗ガン剤及びｄｎａ複製阻害剤 | |
| Baraniak et al. | Synthesis of 3′-azido-3′-deoxythymidine (AZT)—Cinchona alkaloid conjugates via click chemistry: Toward novel fluorescent markers and cytostatic agents | |
| CA2967058A1 (en) | Cytidine derivative and application thereof | |
| WO2016014527A2 (en) | Stabilized nucleotides for medical treatment | |
| WO2018133854A1 (en) | Adenosine analog and its use in regulating the circadian clock | |
| CN101228171A (zh) | 作为5-脂氧化酶和环加氧酶抑制剂的吡咯里嗪和中氮茚化合物的大环内酯偶联物 | |
| CN104004039A (zh) | 6,11-桥联的联芳大环内酯类 | |
| CN101479290A (zh) | 新的2′,3′-亚甲基缩醛腺苷前药用作腺苷受体激动剂的前药 | |
| CN115785107B (zh) | 一种取代8,9-二氢嘧啶并[5,4-b]吲嗪类化合物、药物组合物及其用途 | |
| US4861873A (en) | 8-Chloroadenosine 3', 5'-cyclic monophosphate preparations | |
| US5041542A (en) | Substituted pyrimido[5,4-d]pyrimidine nucleosides | |
| NO893324L (no) | Behandling av maligne tumorer med 8-kloradenosin-3',5'-cyklisk fosfat, 8-aminoadenosin-3',5'-cyklisk fosfat og fremstilling derav. | |
| US20060287271A1 (en) | Dinucleoside poly(borano)phosphate derivatives and uses thereof | |
| Al-Sahaly et al. | Synthesis, Molecular Docking and Anticancer Activity of New Substituted Pyridine-1, 2, 3-Triazole Hybrid N-Glycosides Via Click Chemistry | |
| WO1989005648A1 (en) | Treatment of malignant tumors with 8-chloroadenosine 3',5'-cyclic phosphate, 8-aminoadenosine 3',5'-cyclic phosphate and preparation thereof | |
| Bussolari et al. | Synthesis and biological evaluation of N4-substituted imidazo-and v-triazolo [4, 5-d] pyridazine nucleosides | |
| JPH0692986A (ja) | 置換ヌクレオシド誘導体、その製造法およびそれを含む医薬組成物 |