PL126984B1 - Method of obtaining cyclodextrin-matricaria inclusion complex compounds - Google Patents

Description

Przedmiotem wynalazku jeslt spos6b wytwarza¬ nia inkluzyjnych kompleksów cyklodekstryno^ru- miankowych.Rumianek (ifllores dhaimonillae), krwawnik pospo¬ lity (Achfflea coUina) oraz rumian (lAntihemis no- bitts) sa od dawna znane ze swych skladników czynnych i szeroko stosowane w lecznictwie. Wy¬ war z kwiatów tych roslin jest stosowany we¬ wnetrznie w przypadku niezyttu jeiiit, zoladka lub pecherza, a jako oklad zewnetrzny w przypadku zapalenia spojówek, zatok szczekowych lub prze¬ wodów sluchowych. Zawarty w olejku eterycznym rumdanku kamazulen uwalnia histamine, uaktyw¬ nia uklad siateczkOwo-sr6dlbtonkowy i przyspiesza leczenie przewleklych procesów zapalnych typu odretwienia.Surowiec rumiankowy mozna przetwarzac diwo- ma sposohaimd: 1) sporzadza sie wodny wyciag fltzw. herbate mmiiiankowa) zawierajacy fflawonoi- dy, kumaryne i charakterystyczne dla rumianku skladnika zapachowe, który jednakze zawiera tyfllko mala czesc farmakologicznie czynnych terpeno- wych skladników olejku eterycznego, lufo 2) spo¬ rzadza sie olejek rumiankowy, którego nie stosulje sie bezposrednio, lecz jako dodatek do preparatów przeciwzapalnych, jak mascie, kremy, czy pudry.Olejek ma mala trwalosc i równiez malo trwale sa preparaty zawieraj alce ten olej*. Ponadto ole¬ jek jest pozbawiony charakterystycznego zapachu rumianku. 10 Waznymi sklatinskaimti czynnymi olejku rumian¬ kowego sa 1-ibiisabolol, ka-mazulen, dwucykloeter, bisaibololHtlenek I, bisafoolol-tlenek II, farnezen i herniaryna.Dalsza wada stosowania kwdatu jeist to, ze w czasie skladowania zawartosc ^klatikrików czyn¬ nych ulega stalemu zmniejtezaniu, a surowiec ule¬ ga znacznemu zakazeniu mikrobiologicznemu i pa¬ sozytniczemu. Olejek ekstrahowany z kwiatu nie ulega zakazeniom i zanieczyszczeniu, lecz jest jesz¬ cze rrindej trwaly. Zawartosc skladników czynnych w preparatach zawieraj^acych olejek rumiankowy moze byc gwarantowana tylko na krótki czas. Nie rozwiazano równiez stalailazacji skladników czyn¬ nych za pomoca jakiegokolwiek dostejpnego w han¬ dlu preiparatu.Handlowe preparaty rumiankowe (w postaci cieklej lub tabletkowanej) maja calkowicie inny sklad niz rumianek natturalhy, i zawieraja jedy¬ nie mala czesc pierwotnych skladników czynnyich, natomiast przewazaja w nich produkty rozkladu.Jedyoie w króifciim czasie po wytworzeniu pro¬ dukty .przypominaja rumianek, lecz chemiczna ana¬ liza mozna juz wtedy wykazac znaczne róznice.Handlowy produkt ciekly zanalizowano chroma¬ tograficznie. W 6 mriesdejcy po wytworzeniu mozna bylo w preparacie wykazac w sumie 2 nie rozlo¬ zone skladniki olejku rumiankowego. Jednym z nich byl kamazulen, lecz jego zawartosc w olejku gtanowffla jedynie 16M2flP/t zawartosci poczaftko- 126 984126 984 3 wej. Jest prawdopodobne, ze skladnik uwazany za kanrazulen jest jedynie azulenem (azulen wytwo¬ rzony .sztucznie). W kroplach rumiankowych moz¬ na bylo wykazac ponadto slady l^bilsabololu i dal¬ szych dwóch substancji* przypuszczalnie produk¬ tów rozkladu. Produkt mial slalby zapach slpaleniz- ny i postac brazowej barwy roztworu alkoholo¬ wego* Mozna bylo wykazac obecnosc jiednego flawonu, który jednakze nie byl identyczny z zadnylri flla- wonem rumianku. lAnaldzie chromatograficznej .poddano równiez „¦herbate instant", otrzylmana z suszonego naparu rumdankowego. Herbata nie zawierala zadnego z wyzej wymienionych skladników lotnych. Wytwór¬ czym odczynnikiem na terpeny wykazano obecnosc jednego nie zidentyfikowanego produktu rozkladu.Produkt zawieral znaczna liczbe, fflawonow — prafwdopodobnie roznych glfikozydów flawonu apd- geniny.Sposób wedlug wynalazku umozliwia stabilizacje sfcladndków czynnych i zapachowych rumianku.Wedlug wynalazku, sporzadza sie kompletóy in- kluzyjne, zawierajace w stalym nosncku cyklo- dekstrynie, ciekfte skladniki czynne i skladniki za¬ pachowe. IntótBzyjne komjpleksy umozliwiaja prost¬ sze postepowanie i znacznie precyzyjniejsze daw¬ kowanie, Cyklodetóhryny stanowia zamkndejte pierscienie gllcopftranozowe, o konfiguracji steryczinej charak¬ teryzujacej sie hydrofilowa powierzchnia zewnejbrz- na i hydrofobowa, zamknieta przestrzenia we¬ wnetrzna. Przy podstawianiu cyklodefcstryny w roztworze wodnym hydrofobowymi czasteczkami powstaja tzw. komlpiLeksy inkfoizyjne.CzasteczkaJeku lub substancji zapachowej zamk¬ nieta w kompleksie inkluzyjnym jest w znacz¬ nej mierze chroniona przed dzialaniem czynndków zewnetrznych (np. tlenu, cietala, swiatla irtip.). Sklad¬ niki czynne sa w kompleksie trwale i w tej po¬ staci moga byc bezposrednio formulowane sposo¬ bami farmaceutyczno^echnologicmymi (Stwierdzono, ze nowe infcluzytfne kompleksy we¬ dlug wynaflazfcu wytwarza sie a) dzialajac na a-, P- hub y-cy^lód^ksbrytma lub na dowolna ich mie¬ szanine roztworem otrzymanego znanym sposobem ekstraktu surowca rumiankowego lub b) dzialajac na surowa brzeczke Jermentacyjna, uzyskana przy wytwarzaniu cyklodekstiryny eklstraktem otrzyma¬ nym znanym sposobem z surowca rumiankowego lub c) dzialajac w dbecnosci enzymu cyklodefcstry- notraaasHgflufcozylaizy na czesciowo, wslejpnae zhy- droKzowany roztwór skrobi ekstraktem otrzyma¬ nym znanym sposobem z surowca rumiankowego i wyodrebniajac utworzony infckazyijny kampleks.W wykonaniu sposobu wedlug wynalazku sto¬ suje sie ekstrakt z roslin Flores chamondllae, Aetuiltea collina i Antthemls nofoilis. Ekstrakt — tak zwany olejek niebieski — i/frub substancje aromatyczne i zapachowe otrzymuje sie z surowca roslinnego znanym sposobem. Kompleks wytwarza sie w tenlperatUTze 151—0OflC, korzystnie w 50°C, po czym przy intensywnym mieszaniu mieszanine reakcyjna oziebia sie. 10 Bnkluizyjne kompleksy cyklcdekstryno-rumianko- we wytworzone wedlug wynalazku sa trwalymi produktami proszkowymi, które w wodzie dysocju¬ ja, wykazujac czynnosc rumianku. ilnkluzyjne kompleksy moga byc wprowadzane do preparatów farmaceuttylcznych lulb srodków kos¬ metycznych, bez obawy rozkladu skladników czyn¬ nych. Do wytwarzania preparatów mozna stoso¬ wac zwykle nosniki, srodki wiazace, srodki smar¬ ne, substancje poprawiajace smak i ewentualnie równiez inne substancje czynne farmakologicznie./Mozna równiez wytwarzac preparaty kombino¬ wane, zawierajace, w dowolnym stosunku, kom¬ pleks cyklodekstryny z ekstraktem rumiankowym 15 i kompleks cyklodefcstryny z substancjami aroma¬ tycznymi i/lufb zapachowymi Stosowanie inkluzyjnego kompleksu ekstraktu jako preparatu farmaceutycznego lub Jako farma- M ceutycznego produktu przetfsriowego, njp, w pu¬ drach i masciach, jeislt szczególnie korzystne, po¬ niewaz dotychczas do itego cehi sluzyly jedynie maio skuteczne skladniki zapachowe w ekistrak- tach wodnych. 25 Stosowanie inkluizyjnych kompleksów wyflworzo- nyCh .sposobem wedlug wynalazku wykazuje na¬ stepujace zalety: fi) kompleksy sa wytwarzane z naturalnych substancji czynnych, 2) zawarte sa w ndch wszyslkie farmakologicznie wazne skladniki 30 substancji czynnej, 3) parodukt jest towaly przy dzialaniu ciepla, swiatla, tlenu i jonów imetalli, 4) produkt ma postac krystalicznego proszku, któ¬ ry mozna tabletkowac i 15) mozna wytwarzac latwe do dawkowania farmaceutyczne preparaty o stalej u zawartosci skladników czynnych. i Szczególy wynalazku sa zilustrowane ponizszymi przykladami, które nie ograniczaja jego zakresu.Przyklad I. I10JO g P-cyklodektsItryny Ifcawar- tosc wilgoci IM^/iH rozpulszCza sie, przy staftym mieszaniu, w 180 ml 30*/o (obiejtoSciowO) wodnego etanolu, w 60°IC. Do roztworu 0-cykflodefcstryny wkrapla sie 1 g olejku rumilankowelgo 10-krotnie rozcienczonego etanolem. Po uplywie 9—4 minut uklad metnieje i zaczyna wytracac sie krystaliczny addukt. Po uplywie 4-^U godzin uklad powoli oziebia sie do temperatury pokojowej. Przerywa sie mieszanie i w ciagu 16 godzin utrzymuje mie¬ szanine w lodówce, po czym przesacza przez szkla¬ ca ny ispiek i suszy nad pieciotlenkiem fosforu, w temperaturze pokojowej. Otrzymuje sie 10,06 g krystalicznego kompleksu olejku rumiankowego z j3-cyklodetostryna.Zawartosc Substancji czynnej w kompleksie wy- 55 nosi 8A&I; a wydajnosc, w przeliczeniu na olejek rumiankowy, Ibfli&h. Efektywnosc tworzenia kom¬ pleksu mozna zwiekszyc stosujac szybkoobrotowe mieszadlo.(Empiryczny wzór i ciezar czasteczkowy mozna eo podac tylko dla j3ncyklodekstryny, (CtflidOsh Mbcd: 1135,0, Przecietny ciezar czasteczkowy seskwiter- penowego olejku rumiankowego wynosi okolo 2130, a przecietny ciezar czasteczkowy kompleksu o oko¬ lo 7*/» zawartosci wody okolo 1480..W Wzór strukturalny mozna podac tylko dla cykjo-126 984 dekstryny, sposród skladników czynnych rumian¬ ku nie wszystkie sa znane.Produkt wytworzony wedlug przykladu I nia postac jasnoniebieskiej barwy, mikrokrystalicznego proszku, o niklylm zapachu rumianku. Produkt nie ma okreslonej temperaltoury topnienia; w okolo 20SJPC zaczyna sie rozkladac. Ta temperatura jest charakterystyczna dla rozkladu p^yklodekstryny.Rozpuszczalnosc: w destylowanej wodzie 0,0)310— 0,0315 gi/1100 ma, w «96P/o etanolu 0,030 gi/100 ml, w benzenie i chloroformie rozpuszcza isie tydko ole¬ jek; 0-cyfcQodekstryna jest w tych rozpuszczalni¬ kach (praktycznie nierozpuszczalna ((powyzsze dane dotycza temperatury 2)5%).•Wodne roztwory komlpleksu nie opalizuja.Kompleks jest trwaly w temperaturze pokojowej, i nie ultegajac rozkladowi moze (byc ptrzechowywa- ny w ciagu co najmniej 5 lat lOdpornosc produktu na utJLemianie przedfstawiono w tablicy I.Tablica I Czas (godziny) 70 80 120 160 200 240 1 280 320 1 Pobór tlenu, ul/mg ^ | Olejek rumiankowy 6 14 18 23 30 58 ao 100 Komipleks -ruimiankowy 2 4 5 7 7 7 7 7 W porównaniu z poborem tlenu pTzez "czysty ole¬ jek rumiankowy, (pobór itilenu przez kompleks jest pomi|jainy.'Ani alejek (rumiankowy, ani cykl©dekstryna nie sa toksyczne przy podawaniu doustnym. Oba sklad¬ niki nie tworza wiazania kowalencyjnego i kom¬ pleks w warunkach fizjologicznych dysocjuje.^Wykazanie czynnosci ptrzez badanie dzialania ukladu sialteczkowo-sródblonkowego.Fagocyfcowe dzialanie ukladu siateczkowoHSród- blonfcowego jest wywolywane histamina, która sta¬ nowi chemiczny aktywator. Histamina powoduje, ze komórki src^bftonkowe obwodowych zyl kapi- larnych w kiróltkiim czasie ulegaja przemianie w fagocyty, które akuimuiluja w sobie, podobnie jak komórki BBS watroby, sledziony lulb szpiku kost¬ nego, wsltrzykiwany tusz.(Poniewaz równiez rumianek uwalnia histamine i aktywuje RlflS, efektywnosc czystego olejku ru¬ miankowego i komjpleksu dnkluzyjnego mozna po¬ równac sledzajc eliminacje z krwiobdegu wstrzyki¬ wanego tuszu* Jako zwierzeta doswiadczalne zastosowano sam¬ ce myszy szczepu OTUP o wadze ciala 05l±i2 g (GEUP jest miedzynarodowym oznaczeniem szcze¬ pu posiadajacego okreslona informacje genetycz- 10 15 25 30 40 45 na). Metodyka odpowiada praktycznie metodzie Jancsó (Jamcsó M.: Orvosok Lapja, 10l4T7, UH, 2B, 10125). Do zyly ogonowej wstrzykiwano 0J5 (ml ilOP/o tuszu ;(waga ciala 05 g) w fizjologicznym roztiwo- rze soli. Do roztworu dodawano, w celu stabffl- zacji ukladu koloidalnego, 'l°/o zelatyny.Stosowano zawiesine zawiierajaca czasteczki we¬ gla o srednicy jedynie 0#—A ^m, poniewaz wiek¬ sze czasteczki zatykaly zyly plucne i zwierzeta padaly wskuitek emlbolii. (Przed wstrzyknieciem tu¬ szu podskórnde wstrzykiwano myszom dwukrotnie po 0J5 ml [fizjologicznego, roztworu soli. Na godzine przed wstrzyknieciem tuszu zwierzetom podawano doustnie 5 mg olejku rumiankowego i 6 mg za¬ wierajacego olejek rumiankowy produktu z przy¬ kladu I. Eliminacje tuszu sledzono fotometryeznie.Po dozylnym wprowadzeniu tuszu co 5 minut pobierano pipeta miarowa po ilO ml krwi, która homogenizowano w lekko zalkalizowanej wodzie, po czym fotometrycznie mierzono absorpcje swiatila przez roztwór.'Eliminacje tuszu z krwi zwierzat traktowanych i kontrolnych zestawiono w tablicy H.(Badania toksykologiczne wykazaly, ze inkhizyj- ny kompleks p^cykiodekstryno-rumiankowy nie jest toksyczny. 10 sannie myszy (waga ciala 20—bfe g) otrzymalo doustnie, w postaci zawiesiny, kompleks rumian¬ kowy, w ilosci do 31000 mg^kg wagi ciala (co odlpo¬ wiada 234 mg substancji czynnej na kg wagi cia¬ la).Taka sama próbe przeprowadzono na 10 sam¬ cach myszy PL PL PL PL PL PL PL

Claims (1)

1.