Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania nowych pochodnych kwasu 6-metylenopeni¬ cylanowego, pewnych estrów i farmakologicznie dopuszczalnych soli tego kwasu, bedacych inhibi¬ torami /3-laktamazy.Jedna z najbardziej znanych i szerokostosowanych klas srodkówprzeciwbakteryjnych stano¬ wia zwiazki znane pod nazwa antybiotyków /3-laktamowych. Cecha tych zwiazkówjest to, ze maja rdzen skladajacy sie z pierscienia 2-azetydynowego (/3-laktam) skondensowanego z pierscieniem tiazolidynowym lub dihydro-l,3-tiazynowym. Gdy rdzen ten zawiera pierscien tiazolidynowy, to zwiazki takie zwykle nazywa sie ogólnie penicylinami, zas gdy rdzen zawiera pierscien dihydrotia- zynowy, to takie zwiazki sa nazywane cefalosporynami.Typowymi przykladami penicylin sa zwiazki takie jak benzylopenicylina (penicylina G), fenoksymetylopenicylina (penicylina V), ampicylina i karbenicylina, a przykladami cefalosporyn sa cefalotyna, cefaleksyna i cefazolina.Aczkolwiek antybiotyki /3-laktamowe sa szeroko stosowane jako cenne srodki chemoleczni- cze, to jednak maja one te wade, ze pewne z nich nie sa aktywne przeciw niektórym mikroorganiz¬ mom. Uwaza sie, ze w wielu przypadkach ta odpornosc pewnych mikroorganizmów na dzialanie niektórych antybiotyków /3-laktamowych jest spowodowana tym, ze mikroorganizmy te wytwa¬ rzaja /3-laktamazy, bedace enzymami rozszczepiajacymi pierscien /3-laktamowy penicylin i cefalos¬ poryn, przeprowdzajac je w produkty nie dzialajace przeciwbakteryjnie. Jednakze stwierdzono, ze pewne substancje maja zdolnosc inhibitowania /3-laktamaz i gdy taki inhibitor stosuje sie razem z penicylina lub cefalosporyna, to moze on zwiekszac skutecznosc dzialania przeciwbakteryjnego tych antybiotyków, przy czym przeciwbakteryjne dzialanie takiej kombinacji inhibitora z antybio¬ tykiem moze byc znacznie wieksze niz suma przeciwbakteryjnej aktywnosci poszczególnych sklad¬ ników tej kombinacji.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku sa silnymi inhibitorami drobnoustrojo¬ wych/3-laktanaz i nadaja sie do zwiekszania skutecznosci dzialania antybiotyków/3-laktamowych.2 147 514 Ze zgloszenia do patentu europejskiego nr 50 805 znane sa zwiazki o wzorze 2, w którym n oznacza liczbe zero, 1 lub 2, Ri oznacza grupe CN lub pewne grupy karbonylowe, R2 oznacza atom wodoru, nizszy rodnik alkilowy lub atom chlorowca, a R3 oznacza atom wodoru albo grupe ulegajaca latwo hydrolizie. Zwiazki te sa przydatne jako inhibitory /3-laktamazy. Z tego samego zgloszenia znane sa równiez estry kwasu 6-ketopenicylanowego, ich sulfotlenki i sulfony, jak równiez stosowanie tych zwiazków w procesie wytwarzania zwiazków o wzorze 2 na drodze reakcji z fosforanem o wzorze RiR2C=P/C6H5/3, w którym R1 i R2 maja wyzej podane znaczenie.Z brytyjskiego zgloszenia wynalazku nr2053220A znane sa, miedzy innymi, pewne kwasy i estry o wyzej opisanym wzorze 2, w którym n oznacza liczbe 2, a R1 iR2 sa jednakowe lub rózne i oznaczaja atomy wodoru, ewentualnie podstawione rodniki alkilowe, rodniki arylowe, ewentual¬ nie podstawione rodniki cykloalkilowe, rodniki aralkilowe lub ewentualnie podstawione grupy aminowe, albo tez R1 i R2 razem z atomem wegla, z którym sa zwiazane, tworza pierscien karbocykliczny lub heterocykliczny o 3-7 atomach.Z opisu patentowego St. Zj. Am. nr 4 287 181 znane sa pewne, podstawione w pozycji 6, 1,1-dwutlenki kwasu penicylanowego oraz ich estry, przy czym podstawnik w pozycji 6 w tych zwiazkach stanowi grupa o wzorze 3, w którym R3 oznacza, miedzy innymi, atom wodoru lub grupe alkanoilowa, a R4 oznacza atom wodoru lub grupe (Ci-C4)-alkilowa, fenylowa, benzylowa lub pirydylowa. Zwiazki te sa przydatne jako inhibitory /34aktamazy.Zgodnie z wynalazkiem wytwarza sie nowe pochodne kwasu 6-metylenopenicylanowego o ogólnym wzorze 1, w którym n oznacza liczbe zero lub 2, R oznacza atom wodoru, rodnik allilowy lub rodnik benzylowy, jeden z symboli R5 i R6 oznacza atom wodoru, a drugi oznacza grupe o wzorze 4, 5 lub 6, przy czym we wzorach 4 i 6 symbol R7 oznacza atom wodoru lub rodnik (Ci-C4)-alkilowy i t oznacza licze zero, 1 lub 2, zas R8 we wzorze 5 oznacza atom wodoru, rodnik metylowy lub rodnik etylowy. Sposobem wedlug wynalazku wytwarza sie równiez farmakologi¬ cznie dopuszczalne kwasowe sole addycyjne zwiazków o wzorze 1, w którym grupa o symbolu R5 lub R6 zawiera zasadowy atom azotu, albo farmakologicznie dopuszczalne sole kationowe zwiaz¬ ków o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru.Korzystnewlasciwosci maje zwlaszcza zwiazki o wzorze 1, w którymjeden z podstawników R5 i R6 oznacza atom wodoru, a drugi oznacza grupe o jednym z wyzej opisanych wzorów 4 i 6.W celu zwalczania zakazen bakteryjnych u ssaków, w tym takze u ludzi, podaje sie ssakom skutecznie dzialajaca ilosc zwiazku o wzorze 1. Zwiazki te sa skutecznymi inhibitorami enzymów /3-laktamazy i zwiekszaja aktywnosc antybiotyków /3-laktamowych, to jest penicylin i cefalospo- ryn, przede wszystkim przeciwko takim mikroorganizmom, które sa odporne lub czesciowo odporne na dzialanie tych antybiotyków, poniewaz wytwarzaja enzymy, tojest /3-laktamazy, które w nieobecnosci zwiazków o wzorach 1 lub 2 moga powodowac calkowity lub czesciowy rozklad tych antybiotyków /3-laktamowych.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku zwiakszaja aktywnosc wszystkich antybio¬ tyków /3-laktamowych, ale szczególnie korzystnie stosuje sieje z penicylinami lub cefarosporynami o ustalonej przydatnosci klinicznej, takimi jak amoksycylina, ampicylina, apalcylina, azlocylina, aztreonam, bakampicylina, karbenicylina, ester indanylowy lub fenylowy karbenicyliny, cefaklor, cefadroksyl, cefaloram, cefamandol, cefaparol, cefatryzyna, cefazoiina, cefbuperazon, cefonicyd, cefmenoksym, cefodyzym, cefoperazon, ceforanid, cefotaksym, cefotiam, cefoksytyna, cefpiramid, cefpirom, cefsulodyna, ceftazydym, ceftizoksym, ceftriakson, cefuoksym, cefacenitryl, cefalo- ksyna, cefaloglicyna, cefalorydyna, cefalotyna, cefapiryna, cefradyna, cyklacylina, epicylina, furazlocylina, hetacylina, lenampicylina, lewopropylocylina, mecylinam, mezlocylina, penicylina G, penicylina V'fenetycylina, piperacylina, pirbenicylina, piwampicylina, sarmoksycylina, sarpicy- lina, suncylina, talampicylina i tikarcylina oraz ich farmakologicznie dopuszczalne sole. Podane wyzej nazwy tych /3-laktamów sa oparte na nazwach przyjetych w Stanach Zjedn. Ameryki, podanych w wykazie nazw USAN i odpowiednio spolszczone.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku stosuje sie tez w kombinacjach z takimi inhibitorami /3-laktamazy jak np. 7-[2-/2-amino-4-tiazolilo /-2-metoksyiminoacetamido]-3-/5,6- dihydro-4-pirydynio/-metylo-3-cefemokarboksylan-4 (HR-810), 7-[2-/2-amino-4-tiazolilo/ -2-me- toksyiminoacetamido] -3-/N -metylopirolidynio/ -metylo-3- cefemokarboksylan-4 (EMY-147514 3 28142) oraz kwas 7-{D-[2V4-karboksy-5~imidazolokarboksyamido/]-2-fenyloacetamido}-3-[4-/2- sulfonatoetylo/ -pirydynio]-3-cefemokarboksylan-4.Aczkolwiek zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku mozna podawac bez równo¬ czesnego podawania antybiotyków /3-laktamowych, to jednak korzystniej jest podawac je wraz z tymi antybiotykami. Takie preparaty do podawania doustnego lub pozajelitowego zawieraja zwiazki o wzorze 1 lub 2 oraz antybiotyki /3-laktamowe w stosunku wagowym od 1 : 3 do 3:1, w lacznej ilosci skutecznie dzialajacej przeciw bakteriom. Dawki te moga byc pojedyncze lub wielokrotne.Jak wspomniano wyzej, zgodnie z wynalazkiem wytwarza sie równiez farmakologicznie dopuszczalne sole addycyjne z kwasami tych zwiazków o wzorze 1, w którym jedna z grup R5 lub R6 zawiera zasadowy atom azotu. Przykladami takich soli sa sole z kwasem solnym, bromowodoro- wym, siarkowym, fosforowym, cytrynowym, jablkowym, winowym, maleinowym. fumarowym, glikonowym, cukrowym, benzenosulfonowym, p-toluenosulfonowym, p-chlorobenzenosulfono- wym i 2-naftalenosulfonowym.Równiez zgodnie z wynalazkiem wytwarza sie kationowe sole zwiazków o wzorze 1, zawiera¬ jace farmakologicznie dopuszczalne kationy. Przykladami takich soli sa sole sodowe, potasowe, amonowe, wapniowe, magnezowe, cynkowe i podstawione sole amoniowe, wytworzone z ami¬ nami, takimi jak np. dwuetanoloamina, cholina, etylenodwuamina, etanoloamina, N-metylo- glikamina i prokaina.Zwiazki wytwarzane sposobem wedlug wynalazku sa pochodnymi kwasu penicylanowego, majacego strukturalny wzór 7. We wzorach pochodnych tego kwasu linia przerywana [//////], oznaczajaca zwiazanie podstawnika z dwupierscieniowym rdzeniem, wskazuje, ze podstawnik ten znajduje sie pod plaszczyzna rdzenia, to jest w konfiguracji a, zas pogrubiona linia/ / laczaca podstawnik zjadrem wskazuje, ze podstawnik ten znajduje sie ponad plaszczyzna rdzenia, to jest w konfiguracji /3. Zwykla linia ciagla /-/, laczaca podstawnik z rdzeniem, oznacza, ze podstawnik ten moze byc w konfiguracji a albo/3.Zgodnie z wynalazkiem, zwiazki o wzorze 1 wytwarza sie przez odacetylowywanie zwiazków o wzorze 10, w którym n, R1, R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie, a R9 oznacza grupe acetylowa.Zwiazki o wzorze 10 sa zwiazkami nowymi i sposób ich wytwarzania wchodzi w zakres wynalazku.Przebieg reakcji prowadzonych zgodnie z wynalazkiem przedstawia schemat podany na rysunku, przy czym wszystkie symbole we wzorach wystepujacych w tym schemacie maja wyzej podane znaczenie, ale R1 oznacza rodnik allilowy lub benzylowy.Znany zwiazek o wzorze £ poddaje sie reakcji z równomolowa iloscia chlorku, bromku lub jodku (Ci-C4)-alkilomagnezowego albo (Ci-C4)-alkilotio, a nastepnie z równomolowa iloscia aldehydu o wzorze R5R6CO, w którym R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie. Reakcje te prowadzi sie w srodowisku obojetnego rozpuszczalnika eterowego, korzystnie tetrahydrofuranu lub eteru dwuetylowego, w temperaturze od - 100°C do 25°C, mieszajac w ciagu okolo 1 godziny.Otrzymany zwiazek o wzorze 9 wyosobnia sie znanymi metodami i acetyluje dzialajac chlor¬ kiem lub bromkiem acetylu lub bezwodnikiem kwasu octowego w srodowisku obojetnego rozpu¬ szczalnika w obecnosci równomolowej ilosci trzeciorzedowej aminy. Produkt acetylowania pod¬ daje sie hydrogenolizie dla odszczepienia atomu chlorowca i zastapienia go atomem wodoru.Hydrogenolize prowadzi sie znanymi metodami, dzialajac wodorkiem organocynowym, korzyst¬ nie wodorkiem trójfenylocynowym lub trój-n-butylocynowym, albo dzialajac wodorem w obec¬ nosci szlachetnego metalu jako katalizatora i otrzymuje sie zwiazek o wzorze 10.Reakcje oszczepiania grupy acetylowej R9 w zwiazku o wzorze 10 prowadzi sie znanymi metodami, stosowanymi przy odacetylowywaniu. Korzystnie, zwiazek o wzorze 10 poddaje sie reakcji z l,5-diazabicyklo[4,3,0]nonenem-5 w srodowisku rozpuszczalnika np. chlorku metylenu.Otrzymany zwiazek o wzorze 1, w którym n, R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie, a R1 oznacza rodnik allilowy lub R1 oznacza atom wodoru, to jest w wolne kwasy.Reakcje te prowadzi sie na drodze hydrolizy w srodowisku lagodnie kwasnym lub alkalicznym, a korzystnie metoda Jeffrey i McCombie, J. Org. Chem., 47, 587-590 (1982), przy uzyciu katalizatora w postaci rozpu¬ szczalnego kompleksu palladowego, np. tetrakis/trójfenylofosfino/palladu/O/. W tym celu, ester allilowy w obojetnym rozpuszczalniku, np. w dwuchlorku etylenu, chloroformie lub octanie etylu,4 147 514 miesza sie w atmosferze azotu z katalityczna iloscia, np. 1-5% w stosunku molowym do ilosci estru, katalizatora palladowego oraz taka sama iloscia trójfenylofosfiny, po czym dodaje sie równomo- lowa ilosc soli sodowej lub potasowej kwasu 2-etylo-n-kapronowego i miesza w pokojowej tempe¬ raturze az do calkowitego wytracenia sie soli zwiazku o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom sodu lub potasu, a pozostale symbole maja wyzej podane znaczenie. Reakcja ta trwa okolo 1 godziny, po czym odsacza sie wytworzona sól.Jak podano wyzej, zwiazki o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, a takze sole tych zwiazków, wykazuja w próbach in vitro w polaczeniu z antybiotykami /5-laktamowymi dzialanie synergiczne. Dzialanie takie wykazano mierzac najnizsze stezenie hamujace (MIC) w /ym/ml przeciwko róznym mikroorganizmom. Badania te prowadzono metoda podana w publikacji Ericcson i Sherris, Acta Pathologica et Microbiologia Scandinav., Supp. 217, sekcja B: 64-68 (1971) stosujac wyciag agarowy mózgowo-sercowy (BHI) oraz urzadzenie do reprodukowania szczepio¬ nek. Szczepionki poddane rozwojowi w ciagu nocy rozciencza sie stokrotnie i stosuje jako typowa szczepionke (20000-10000 komórek w okolo 0,002 ml umieszcza sie na powierzchni agaru, stosujac 20 ml BHI/agar na 1 naczynie). W próbach stosowano 12 dwukrotnie rozcienczonych roztworów zwiazków poddanych badaniom, przy poczatkowych stezeniu badanego zwiazku wynoszacym 200/ig/ml. Wyniki odczytywano po przechowywaniu prób w temperaturze 37°C w ciagu 18 godzin, przy czym pomijano pojedyncze kolonie. Za najnizszy stopien dzialania badanego zwiazku (MIC) uwaza sie najnizsze stezenie tego zwiazku lub kombinacji zwiazków, przy którym golym okiem mozna zauwazyc calkowite zahamowanie rozwoju mikroorganizmów.Wyniki prób podano nizej w tabeli, w której zastosowano nastepujace skróty i symbole: I oznacza stosowanie samego zwiazku o wzorze 1, II oznacza stosowanie kombinacji 1:1 zwiazku o wzorze 1 z ampicylina, III oznacza synergiczne dzialanie zwiazku o wzorze 1, a mianowicie: PS -silne dzialanie synergiczne, S - wystepowaniem synergizmu, A - dzialanie dodatkowe, N - brak widocznego skutku, NI - brak oceny.W tabeli podano wyniki dla zwiazków o wzorze 1, w którym n oznacza liczbe 2, R5 oznacza atom wodoru, R1 oznacza atom wodoru, sodu lub potasu, a R6 ma znaczenie podane w tabeli, przy czym t we wzorach 4 i 6 oznacza zero, a R8 we wzorze 5 oznacza rodnik metylowy.Tabela R6 Wzór 6 Wzór 5 Wzór 4 I II III I II III I II III Staph aureus 01A005 200 <0,20 NI 200 <0,10 NI 200 <0,20 NI Staph aureus 01A400 200 0,78 Ps 200 3,12 s 200 0,39 PS E. coli 51A129 200 100 Ni 200 50 NI 200 50 PS E. coli 51A266 200 6,25 N 200 3,12 N 200 3,12 N E. coli 51A470 200 <0,20 NI 200 <0,10 NI 200 <0,20 NI Ps. aerug. 52A104 200 100 NI 200 50 NI 200 100 NI Klcb. pneum. 53A079 200 25 S 200 25 A 200 3,12 PS Serr. mar. 63A095 200 100 S 200 50 S 200 25 PS Inter. cloa. 67B009 200 100 NI 200 <50 NI 200 100 A Mórg. mórg. 97A001 200 50 PS 200 12,5 A 200 3,12 PS Zwiazki o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, jak równiez ich sole, w kombinacjach ze znanymi antybiotykami /J-laktamowymi sa przydatne w przemysle jako srodki mikrobójcze np. do-traktowania wody lub szlamów, do konserwacji farb i drewna, a takze moga byc stosowane miejscowo jako srodki odkazajace. Przy takich zastosowaniach czesto korzystnie jest mieszac czynna substancje z nietoksycznym nosnikiem, takim jak olej roslinny lub mineralny albo krem zmiekczajacy. Mozna tez rozpuszczac lub dyspergowac te zwiazki w cieklych rozpuszczalnikach lub rozcienczalnikach, takichjak woda, alkanole, glikole lub ich mieszaniny. Najczesciej stosuje sie takie preparaty zawierajace od okolo 0,1 do okolo 10% wagowych czynnej substancji w stosunku do calosci preparatu.Jak równiez podano wyzej, zwiazki o wzorze 1 sa szczególnie cenne jako srodki silnie inhibitujace drobnoustroje /J-laktamazy i zwiekszaja skuteczne dzialanie bakteriobójcze antybio147 514 5 tyków /3-laktamowych (penicylin i cefalosporyn) przeciwko wielu drobnoustrojom, a zwlaszcza tym, które wytwarzaja /3-laktamaze. Takie korzystne dzialanie zwiazków o wzorze 1 mozna okreslic w doswiadczeniach, w których okresla sie wartosc MIC samych antybiotyków oraz samych zwiazków o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru. Wartosc MIC dla kombinacji tych zwiazków z antybiotykami mierzy sie metoda podana przez Barry i Sabath w „Manual of Clinical Microbiology", wydawnictwo Lenette, Spaulding i Truant, wydanie 2, 1974, American Society for Microbiology.Zwiazki o wzorze 1 zwiekszaja przeciwbakteryjne dzialanie antybiotyków/J-laktamowych in vivo. Oznacza to, ze przy ich stosowaniu ulega obnizeniu ilosc antybiotyku, konieczna do ochrony myszy przed zabójczym dzialaniem szczepionki bakterii wytwarzajacych /3-laktamaza. W próbach prowadzonych dla ustalenia takiej aktywnosci wywolywano u myszy doswiadczenie infekcje przez dootrzewnowe zaszczepienie myszy typowa hodowla badanego mikroorganizmu w postaci 5% zawiesiny w sluzie zoladkowym wieprza. Natezenie zakazenia regulowano tak, aby mysz otrzymy¬ wala smiertelna dawke, to jest najnizsza dawke smiertelna, powodujaca zabicie 100% myszy w porównaniu z myszami z próby kontrolnej, którym nie podano szczepionki. Badany zwiazek podano w kombinacji z antybiotykiem w róznych dawkach doustnie lub dootrzewnowo myszom zakazonym. Aktywnosc badanej mieszaniny okreslano liczac myszy pozostale przy zyciu, którym podano okreslona dawke mieszaniny. Aktywnosc te wyrazano w procentach zwierzat pozostalych przy zyciu dla okreslonej dawki, albo wyrazano jako wartosc PD50, to jest wielkosc dawki, przy której polowa zakazonych myszy pozostaje przy zyciu.Zdolnosc zwiazków o wzorze 1 zwiekszania skutecznosci dzialania antybiotyków /3- laktamowych przeciwko bakteriom produkujacym /3-laktamaze sprawia, ze zwiazki te stanowia cenne srodki, które mozna razem z antybiotykami /3-laktamowymi stosowac przy zwalczaniu zakazen bakteryjnych u ssaków, a w szczególnosci u ludzi. W praktyce, zwiazek o wzorze 1 mozna mieszac z antybiotykiem /3-laktamowym, lub podawac oddzielnie. Niekiedy korzystnie jest naj¬ pierw podawac zwiazek o wzorze 1 i dopiero pózniej stosowac leczenie antybiotykiem.Jezeli zwiazek o wzorze 1 stosuje sie dla zwiekszenia efektywnosci antybiotyku /3-lakta- mowego, wówczas mieszanine tego zwiazku z antybiotykiem /3-laktamowym, albo sam zwiazek o wzorze 1, podaje sie korzystnie z farmakologicznie dopuszczalnym nosnikiem lub rozcienczalni¬ kiem. W preparatach takich zawartosc nosnika stanowi zwykle 5-80% wagowych.Preparaty zawierajace zwiazek o wzorze 1 i antybiotyk /3-laktamowy mozna podawac doustnie lub pozajelitowo, np. domiesniowo, podskórnie lub dootrzewnowo. W preparatach takich stosu¬ nek wagowy zwiazku o wzorze 1 do antybiotyku /3-laktamowego wynosi od okolo 1:3 do okolo 3:1. Jezeli zwiazki o wzorze 1 stosuje sie razem z antybiotykiem /3-laktamowym, to dzienna dawka takiego preparatu dla ludzi wynosi przy podawaniu doustnym od okolo 10 do okolo 200 mg, a przy podawaniu pozajelitowym od okolo 10 do okolo 40 mg na 1 kg ciezaru ciala. Niekiedy moga byc tez stosowane inne wielkosci dawek.Jak wiadomo, niektóre antybiotyki /3-laktamowe dzialaja skutecznie wtedy, gdy sa podawane doustnie lub pozajelitowo, podczas gdy inne sa skuteczne tylko przy podawaniu pozajelitowym.Jezeli zwiazek o wzorze 1 ma byc stosowany razem, np. w mieszaninie z antybiotykiem, który dziala skutecznie tylko przy podawaniu pozajelitowym, wówczas trzeba stosowac preparat nadajacy sie do podawania pozalitowego. Podobnie postepuje sie wtedy, gdy zwiazek o wzorze 1 lub 2 ma byc podawany doustnie lub pozajelitowo razem, np. w mieszaninie, z antybiotykiem. Mozna jednak takze podawac zwiazki o wzorze 1 doustnie i równoczesnie podawac antybiotyki /3-laktamowe pozajelitowo, albo tez odwrotnie.Wynalazek zilustrowano ponizej w przykladach. Dla otrzymanych zwiazków podano widmo protonowe oraz widmo C13 magnetycznego rezonansu jadrowego mierzone przy 60,90,250 lub 300 MHz dla roztworów w deuterochloroformie (CDCI3), w tlenku deuteru (D2O), w deuteroacetonie (CD3COCD3) lub w sulfotlenku deuterodwumetylu (DMSO-de), a szczyty podawane w czesciach na 1 milion (ppm) w dól od czterometylosilanu. Skróty literowe maja ogólnie przyjete znaczenie.Przyklad I. A. Ester allilowy 1,1-dwutlenku kwasu 6-bromo-6-/2-tiazolilo/-hydroksy- metylopenicylanowego. Roztwór 8,84 g (20 mmoli) estru allilowego 1,1-dwutlenku kwasu 6,6- dwubromopenicylanowego w 100 ml bezwodnego tetrahydrofuranu chlodzi sie do temperatury - 78°C, dodaje 7,02 ml (20 mmoli) bromku metylomagnezowego i miesza w ciagu 5 minut, po czym,6 147 514 nadal w temperaturze -78°C, dodaje sie roztwór 2,26 g (20 mmoli) 2-formylotiazolu w 10 ml tetrahydrofuranu i miesza w ciagu 20 minut. Nastepnie dodaje sie 1,2 ml kwasu octowego, wlewa mieszanine do wody i ekstrahuje octanem etylu i chloroformem. Polaczone wyciagi suszy sie nad Na2S04 i odparowuje rozpuszczalniki pod zmniejszonym cisnieniem, otrzymujac 8,5 g surowego produktu o konsystencji szklistej. Produkt ten oczyszcza sie chromatograficznie na kolumnie z zelu krzemionkowego, eluujac chloroformem z octanem etylu 89:11 i otrzymuje sie 6,2 g (72% wydaj¬ nosci teoretycznej) czystego zwiazku podanego w tytule, bedacego jednym izomerem. 1H-NMR (CDCL3) ppm (delta): 1,4 (s, 3H); 1,6 (s, 3H); 4,0 (bs, 1H); 4,42 (s, 1H); 4,6 (d, 2H); 5,3 (s, 1H); 5,55 (s, 1H); 5,1-6,3 (m, 3H); 7,35 (d, 1H); 7,75 (d, 1H).B. Ester benzylowy 1,1-dwutlenku kwasu 6-bromo-6-/2-tiazololi/-hydroksymetylopenicyla- nowego. Postepujac w sposób podany w ustepie A, lecz stosujac zamiast estru allilowego ester benzylowy, otrzymuje sie zwiazek podany w tytule. Produkt ten, majacy konsystencje piany o barwie pomaranczonej, otrzymuje sie z wydajnoscia równa teoretcyznej. H-NMR (CDCb) ppm (delta): 1,32 (s, 3H); 1,60 (s, 3H); 4,5 (s, 2H); 5,2-5,8 (m, 4H); 7,3 (d, 1H); 7,4 (s, 5H); 7,8 (d, 1H).Przyklad II. Proces wytwarzania zwiazków o wzorze 9, opisany w przykladzie I, mozna polaczyc z procesem acetylowania. Postepuje sie w ten sposób, ze do roztworu 1 równowaznika estru allilowego lub benzylowego 1,1-dwutlenku kwasu 6,6-dwubromopenicylanowego w tetra- hydrofuranie dodaje sie w temperaturze - 78°C 1,3 równowaznika bromkumetylomagnezowego w tetrahydrofuranie i miesza w ciagu 5-10 minut, po czym w tej samej temperaturze dodaje sie 1,3 równowaznika aldehydu o wzorze R6HCO i miesza w ciagu 30-60 minut. Nastepnie, nadal w temperaturze - 78°C, dodaje sie 1,3 równowaznika chlorku acetylowego, miesza w ciagu 10 minut, wlewa do lodowatej wody, ekstrahuje octanem etylu, suszy wyciag i odparowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym cisnieniem.Postepujac w ten sposób, wychodzac z estru benzylowego o wzorze 8 i stosujac aldehyd o wzorze R6HCO, w którym R6 oznacza grupe tiazolilowa, otrzymuje sie ester benzylowy 1,1- dwutlenku kwasu bromo-6-/tiazolilo-2/-acetoksymetylopenicylanowego. 1 H-NMR: 1,6 (s, 3H); 1,8 (s, 3H); 2,2 (s, 3H); 2,3 (s, 6H); 4,4 (s, 1H); 5,2 (s, 2H); 5,3 (s, 1H); 6,4 (s, 1H); 7,3 (s, 5H).Przyklad III. A. Ester benzylowy 1,1-dwutlenku kwasu 6-/3-/tiazolilo-2/-acetoksymetylo- penicylanowego. Do roztworu 74,6 g (134 mmola) estru benzylowego 1,1-dwutlenku kwasu 6- bromo-6-/tiazolilo-2/-acetoksymetylopenicylanowego w 850 ml benzenu dodaje sie 43,99 g (151,2 mmola) wodorku trój-n-butylocyny i mieszanine utrzymuje sie w stanie wrzenia pod chlodnica zwrotna w ciagu 5,5 godziny, po czym pozostawia przez noc. Nastepnie odparowuje sie rozpu¬ szczalnik pcd zmniejszonym cisnieniem, pozostalosc rozpuszcza w heksanie i ekstrahuje 2 porcjami po 260 ml acetonitrylu. Wyciagi odparowuje sie, pozostalosc miesza z eterem dwuetylowym, odsacza osad i przemywa go eterem, otrzymujac 33,28 g bezbarwnych krysztalów. Przesacz odpa¬ rowuje sie do sucha, pozostalosc rozpuszcza w heksanie, dodaje 10 g trój-n-butylocyny i postepujac dalej w sposób wyzej opisany otrzymuje sie druga partie produktu w ilosci 2,8 g. Laczna wydajnosc wynosi 56,3% wydajnosci teoretycznej.Pierwsza partie produktu chromatografuje sie na kolumnie z zelu krzemionkowego, eluujac chloroformem z octanem etylu 9:1. Czyste frakcje odparowuje sie, pozostalosc miesza z miesza¬ nina eteru dwuetylowego z octanem etylu 4:1, odsacza, przemywa eterem i suszy, otrzymujac 22,6 g stalego produktu o barwie bialej. 1H-NMR (CDC13) ppm (delta): 1,25 (s, 3H); 1,53 (s, 3H); 2,1 (s,3H);4,58(s, lH);4,80(d, lH);5,2(dd, 1H); 5,22(q,2H); 6,75 (d, 1H); 7,35 (s,5H); 7,4 (d, 1H); 7,8 (d, 1H); 13C-NMR (CDC13) ppm (delta): 17,7; 19,9; 20,5; 54,5; 63,06; 63,6; 63,8; 64,5; 68,1; 121,8; 128,8; 128,9.P r z y k l a d IV. Ester allilowy 1,1-dwutlenku kwasu 6-/2-tiazolilo/-metylenopenicylanowego i przeprowadzenie tego estru w sól.A. 0,688 g (1,29 mmola) estru allilowego 1,1-dwutlenku kwasu 6-/2-tiazolilo/-acetoksymetylo- penicylanowego miesza sie z 0,16g (1,29 mmola) l,5-diazabicyklo[4,3,0]nonenu-5 i 5 ml chlorku metylenu w temperaturze pokojowej w ciagu 1 godziny, po czym rozciencza chlorkiem metylenu, plucze 2 porcjami po 50 ml wody, suszy nad Mg2S04 i odparowuje. Oleista pozostalosc chromato¬ grafuje sie na kolumnie z zelu krzemionkowego, eluujac octanem etylu z heksanu 1:1. Otrzymuje147514 7 sie 0,189 g (39% wydajnosci teoretycznej) oleistego produktu o barwie zóltej. 1H-NMR (CDCI3) ppm (delta): 1,53 (s, 3H); 1,65 (s, 3H); 4,33 (s, 1H); 4,55 (d, 2H): 5.0-* A (-, 2H); 5,45 (s, 1H); 5,4-6,0 (m, 1H); 7,1 (m, 1H); 7,75 (m, 1H); 7,65 (d, 1H).B. Ester allilowy wytworzony sposobem podanym w poprzedzajacym ustepie poddaje sie hydrolizie za pomoca tetrakis/trójfenylofosfino/palladu/O/ w obecnosci trójfenylofosfiny, w sro¬ dowisku chlorku metylenu. Po 5 minutach mieszania rozciencza sie octanem etylu, dodaje roz¬ tworu soli sodowej kwasu 2-etylokapronowego w octanie etylu i miesza w pokojowej temperaturze w ciagu 1 godziny, a nastepnie odsacza produkt i suszy. Otrzymuje sie sól potasowa 1,1 -dwutlenku kwasu 6-/2-tiazolilo/-metylopenicylanowego w postaci ciala stalego o barwie zóltej, z wydajnoscia wynoszaca 84,7% wydajnosci teoretycznej. 1H-NMR 250 MHz (DMSO-D6) ppm (delta): 1,40 (s, 3H); 1,45 (s, 3H); 3,80 (s, 1H); 5,83 (s, 1H); 7,66 (s, 1H); 8,04 m, 2H).PrzykladV.A. 1,1-dwutlenek kwasu 6-/benzotiazolilo-2/-metylenopenicylanowego, mie¬ szanina izomerów E i Z. Do roztworu 400 mg (0,91 mmola) 1,1-dwutlenku kwasu 6-/benzotia- zolilo-2/-acetoksymetylopenicylanowego w 5 ml wody dodaje sie roztwór 0,15 g (1,82 mmola) wodoroweglanu sodowego w 2 ml wody i miesza w ciagu 2 godzin, po czym wymraza sie produkt przy wartosci pH-7,55 i miesza go z woda, zakwasza rozcienczonym kwasem solnym do wartosci pH-3,5 i ekstrahuje octanem etylowym. Organiczne wyciagi suszy sie nad MgS04, odparowuje rozpuszczalnik pod zmniejszonym cisnieniem i otrzymuje produkt podany w tytule w postaci mieszaniny izomerów (E) i (Z) w stosunku 60:40, co wykazuje widmo NMR. 1H-NMR (CDCI3) ppm (delta): 1,55 (s, 12H); 1,6 (s, 1,8G); 1,65 (s, 1,2H); 1,67 (s, 1,8G); 4,55 (s, 0,6H); 4,58 (s, 0,4H); 5,38 (s, 0,4H); 5,74 (s, 0,6H); 7,44 (s, 0,4H); 7,48 (s, 0,6H); 7,5 (m, 4H); 7,89 (d, 1H); 8,07 (d, 0,4H); 8,15(d,0,6H).B. W analogiczny sposób, z odpwiednio podstawionego 1,1-dwutlenku kwasu 6-R5-CH- acetoksymetylopenicylanowego wytwarza sie zwiazek o wzorze 1, w którym R1 i R6 oznaczaja atomy wodoru, a R5 oznacza grupe o wzorze 5, gdzie R8 oznacza metyl. Zwiazek ten otrzymuje sie z wydajnoscia wynoszaca 84% wydajnosci teoretycznej, w postaci mieszaniny 60:40 izomerów (E) i (Z).1H-NMR(D20) ppm (delta): 1,54 (s,3H); 1,62 (s, 3H); 4,04 (s, 3H); 4,35 (s, 1H); 5,7(s,0,6H); 5,95 (s, 0,4H); 7,26 (s, 0,6H); 7,55 (s, 0,4H); 8,09 (s, 2H).Zastrzezenia patentowe 1. Sposób wytwarzania nowych pochodnych kwasu 6-metylopenicylanowego o ogólnym wzorze 1, w którym n oznacza liczbe zero lub 2, R1 oznacza atom wodoru, rodnik allilowy lub rodnik benzylowy, jeden z symboli R5 i R6 oznacza atom wodoru, a drugi oznacza grupe o wzorze 4,5 lub 6, przy czym we wzorach 4 i 6 symbol R7 oznacza atom wodoru lub rodnik (Ci-C4)-alkilowy i t oznacza liczbe zero, 1 lub 2, zas R8 we wzorze 5 oznacza atom wodoru, rodnik metylowy lub rodnik etylowy, albo farmakologicznie dopuszczalnych kwasowych soli addycyjnych zwiazków o wzorze 1, w którym grupa R5 lub R6 zawiera zasadowy atom azotu, albo farmakologicznie dopuszczalnych soli kationowych zwiazków o wzorze 1, w którym R1 oznacza atom wodoru znamienny tym, ze zwiazek o wzorze 8, w którym n i R1 maja wyzej podane znaczenie, lecz R1 ma znaczenie inne niz atom wodoru, poddaje sie reakcji z równomolowa iloscia chlorku,bromku lub jodku (Ci-C4)-alkilomagenzowego albo (Ci-C4)-alkilolitu oraz aldehydu o wzorze R5R6CO, w którym R i R maja wyzej podane znaczenie, prowadzac te reakcje w srodowisku obojetnego rozpuszczalnika, w temperaturze od - 100°C do 25°C, po czy, otrzymany zwiazek o wzorze 9, w którym n, R1, R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie, acetyluje sie chlorkiem lub bromkiem acetylu albo bezwodnikiem kwasu octowego w srodowisku obojetnego rozpuszczalnika organicznego i w obecnosci równowaznej molowo ilosci trzeciorzedowej aminy i poddaje hydrogenolizie dzialajac wodorkiem organocynowym albo wodorem w obecnosci szlachetnego metalu jako katalizatora i wytworzony nowy zwiazek o wzorze 10, w którym n, R1, R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie, a R9 oznacza grupe acetylowa, poddaje sie reakcji odacetylowania, po czym w otrzymanym zwiazku o wzorze 1, w którym n, R5 i R6 maja wyzej podane znaczenie, a R1 oznacza rodnik allilowy lub benzylowy, ewentualnie przeprowadza sie grupe o symbolu R1 w atom wodoru, sodu lub potasu.8 147 514 2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze otrzymany zwiazek o wzorze 1, w którym R1 oznacza grupe allilowa lub benzylowa, a pozostale symbole maja znaczenie podane w zastrz. 1, poddaje sie w srodowisku obojetnego rozpuszczalnika reakcji z katalityczna iloscia tetrakis/trójfe- nylofosfino/palladu/O/ i trójfenylofosfiny oraz z równomolowa iloscia soli sodowej lub potasowej kwasu 2-etylokapronowego.R5 Rb-C R-,R£< 0 (0)n -N ^S CH3 Ch+j er " "coor1 Wzór1 ^ J—N y/COOR, Wzór 2 0R3' Ra-CH Wzór 3 (R7)'^- Wzór A (R7), Wzór 6 n-n-r8 Wzór 5 K c CH3 V '/¦ 0" "N 'COOH Wzór 7 Br ?r ^ CH n/ ^S 0* L-N Wzór 8 _ i-ChbMgBr Chh l-rz-C^HgLi COOR1 2.R5r6C.0 R6-Cv f2^CH3 0"^ "COOR1 Wzór 1 Schemat 6 AH Br Ru-C R^ 0 0R- \z // ;h3 j///C00R1 Wzór 9 R6-C Cojh CH. o' N "COOR1 Wzór 10 Pracownia Poligraficzna UP PRL. Naklad 100 egz.^ Cena 400 zl PLThe subject of the invention is a process for the preparation of new derivatives of 6-methylenicilanic acid, certain esters and pharmacologically acceptable salts of this acid, which are inhibitors of β-lactamase. One of the best known and widely used classes of antibacterial agents is the compounds known as antibiotics / 3 -lactam. A feature of these compounds is that they have a core consisting of a 2-azetidine (β-lactam) ring fused to a thiazolidine or dihydro-1,3-thiazine ring. When the core contains a thiazolidine ring, such compounds are generally called penicillins, and when the core contains a dihydrothiazine ring, such compounds are called cephalosporins. , ampicillin and carbenicillin, and examples of cephalosporins are cephalotin, cephalexin and cefazolin. Although antibiotics / 3-lactam are widely used as valuable chemotherapy agents, they have the disadvantage that some of them are not active against certain microorganisms . It is believed that in many cases this resistance of certain microorganisms to the action of certain (3-lactam) antibiotics is due to the fact that these microorganisms produce (3-lactamases), which are ring-splitting / 3-lactam penicillin and cephalosporin enzymes, by disrupting them. with non-antibacterial products. However, it has been found that some substances have the ability to inhibit 3-lactamase and when such an inhibitor is used together with penicillin or a cephalosporin, it may increase the antimicrobial efficacy of these antibiotics, and the antibacterial activity of such an inhibitor / antibiotic combination may be much greater. than the sum of the antimicrobial activity of the individual components of this combination. The compounds according to the invention are potent inhibitors of microbial / 3-lactanase and are suitable for increasing the effectiveness of antibiotics / 3-lactam. 2 147 514 European patent application no. 50 805 There are known compounds of formula II, in which n is zero, 1 or 2, Ri is CN group or some carbonyl groups, R2 is hydrogen atom, lower alkyl radical or halogen atom, and R3 is hydrogen or easily hydrolysable group. These compounds are useful as inhibitors / 3-lactamase. From the same application, 6-ketopenicillanic acid esters, their sulfoxides and sulfones are also known, as well as the use of these compounds in the preparation of compounds of formula 2 by reaction with a phosphate of formula RiR2C = P / C6H5 / 3, where R1 and R2 have the meaning given above. From British Inventory Application No. 2053220A, certain acids and esters of formula 2, as described above, are known, in which n is the number 2, and R1 and R2 are the same or different and represent hydrogen atoms, optionally substituted alkyl radicals, aryl radicals, optionally substituted cycloalkyl radicals, aralkyl radicals or optionally substituted amino groups, or R1 and R2 together with the carbon atom to which they are bonded form a 3-7 atom carbocyclic or heterocyclic ring. Zj. Am. In No. 4,287,181 certain 6-substituted penicillanic acid 1,1-dioxides and esters are known, the substituent in the 6-position of these compounds being a group of formula III, in which R3 is, inter alia, hydrogen or an alkanoyl group and R4 is a hydrogen atom or a (Ci-C4) alkyl, phenyl, benzyl or pyridyl group. These compounds are useful as inhibitors of β-lactamase. According to the invention, new 6-methylene penicillanic acid derivatives of the general formula I are prepared in which n is zero or 2, R is a hydrogen atom, an allyl radical or a benzyl radical, one of the symbols R5 and R6 is a hydrogen atom and the second is a group of formula 4, 5 or 6, where in formulas 4 and 6 R7 represents a hydrogen atom or a (C1-C4) -alkyl radical and t is zero, 1 or 2, and R8 in Formula 5 represents a hydrogen atom, a methyl radical or an ethyl radical. The present invention also provides pharmacologically acceptable acid addition salts of compounds of formula I in which the group represented by R5 or R6 contains a basic nitrogen atom, or the pharmacologically acceptable cationic salts of compounds of formula I in which R1 is hydrogen. The compounds of formula I, in particular, in which one of the substituents R5 and R6 is hydrogen, and the other is a group of one of the above-described formulas 4 and 6, have beneficial properties. In order to combat bacterial infections in mammals, including humans, they are administered to mammals an effective amount of the compound of formula 1. These compounds are effective enzyme / 3-lactamase inhibitors and increase the activity of antibiotics / 3-lactam antibiotics, i.e. penicillins and cephalosporins, especially against those microorganisms that are resistant or partially resistant to the action of these antibiotics because they produce enzymes, i.e. / 3-lactamases, which in the absence of compounds of formulas 1 or 2 may cause complete or complete The compounds according to the invention enhance the activity of all / 3-lactam antibiotics, but are particularly preferably used with penicillins or cepharosporins of established clinical utility, such as amoxicillin, ampicillin, azreocillin, aztonylamilin. , bacampicillin, carbenicillin, indanyl or phenyl ester of carbenicillins, cefaclor, cefadroxil, cephaloram, cefamandol, cefaparol, cefatrizine, cefazoin, cefbuperazone, cephoneicide, cefmenoxime, cefirefirin, cefodefiridimin, cefaxotepimide , ceftizoxime, ceftriaxone, cefuoxime, cefacenitrile, cephaloxin, cefaloglycin, cephaloridine, cephalotin, cefapyrin, cefradin, cyclacillin, epicillin, furazlocillin, hetacillin, penicillin, penicillin, penicillicillin, penicillicillin, penicillicillicillin , pivampicillin, sarmoxicillin, sarpi Citin, Suncyline, Thalampicillin, and Ticarcillin, and their pharmacologically acceptable salts. The names of these / 3-lactams given above are based on the names adopted in the United States. The compounds of the invention are also used in combinations with / 3-lactamase inhibitors such as 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl / -2-methoxyiminoacetamido]) in the USAN list and correspondingly polonized. -3- (5,6-dihydro-4-pyridinium) -methyl-3-cephem carboxylate-4 (HR-810), 7- [2- (2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoacetamido] - 3- (N-methylpyrrolidinium) -methyl-3-cephem-4-carboxylate (EMY-147514 3 28142) and 7- {D- [2V4-carboxy-5-imidazole carboxamido] -2-phenylacetamido} -3- [4- (2-sulfonatoethyl) -3-cephem-4-carboxylate. Although the compounds of the present invention may be administered without the simultaneous administration of (3-lactam) antibiotics, it is preferable to administer them together with these antibiotics. Such formulations for oral or parenteral administration contain compounds of formula I or formula 2 and antibiotics / 3-lactam in a weight ratio of 1: 3 to 3: 1, in a total amount effective against bacteria. These doses may be single or multiple. As mentioned above, the present invention also produces pharmacologically acceptable acid addition salts of the compounds of formula I in which one of the groups R5 or R6 contains a basic nitrogen atom. Examples of such salts are those with hydrochloric, hydrobromic, sulfuric, phosphoric, citric, apple, tartaric and maleic acid. fumaric, glyconic, sugar, benzenesulfonic, p-toluenesulfonic, p-chlorobenzenesulfonic and 2-naphthalenesulfonic acid. The invention also produces cationic salts of the compounds of formula I containing pharmacologically acceptable cations. Examples of such salts are the sodium, potassium, ammonium, calcium, magnesium, zinc and substituted ammonium salts prepared with amines such as, for example, diethanolamine, choline, ethylenediamine, ethanolamine, N-methylglycamine and procaine. according to the invention, they are derivatives of penicillanic acid having the structural formula 7. In the derivative formulas of this acid, the dashed line [//////], denoting the bond of the substituent to the bicyclic core, indicates that this substituent is located under the plane of the core, i.e. in the configuration a, and the bold line / / joining the nucleus substituent indicates that the substituent is above the core plane, i.e. in the / 3 configuration. The usual continuous line (-) joining a substituent to the core means that the substituent may be in the a-configuration or the /-3 configuration. According to the invention, the compounds of formula I are prepared by deacetylation of compounds of formula 10 wherein n, R1, R5 and R6 are as defined above, and R9 is acetyl. Compounds of Formula 10 are novel compounds and are within the scope of the invention to prepare them. The reactions carried out in accordance with the invention are represented by the diagram in the figure, all symbols in the formulas in this The scheme is as defined above, but R1 is an allyl or benzyl radical. The known compound of formula E is reacted with an equimolar amount of (C1-C4) -alkylmagnesium chloride, bromide or iodide (C1-C4) -alkylthio, followed by an equimolar the amount of the aldehyde of formula R5R6CO in which R5 and R6 are as defined above. These reactions are carried out in an inert ether solvent, preferably tetrahydrofuran or diethyl ether, at a temperature of - 100 ° C to 25 ° C, with stirring for about 1 hour. The obtained compound of formula 9 is isolated by known methods and acetylated with chloride. or acetyl bromide or acetic anhydride in an inert solvent in the presence of an equimolar amount of a tertiary amine. The acetylation product is hydrogenolyzed to split a halogen atom and replace it with a hydrogen atom. The hydrogenolysis is carried out by known methods by treatment with an organotin hydride, preferably triphenyltin or tri-n-butyltin hydride, or by treatment with hydrogen in the presence of a noble metal catalyst. to give the compound of formula 10. The acetyl straining of R9 in the compound of formula 10 is carried out by known methods for deacetylation. Preferably, the compound of formula 10 is reacted with l, 5-diazabicyclo [4,3.0] nonenem-5 in an environment of a solvent such as methylene chloride. The resultant compound of formula I, wherein n, R5 and R6 are as defined above, and R1 is allyl or R1 is hydrogen, ie free acids. These reactions are carried out by hydrolysis in a mildly acidic or alkaline medium, preferably by the method of Jeffrey and McCombie, J. Org. Chem., 47, 587-590 (1982), using a soluble palladium complex catalyst, for example tetrakis (triphenylphosphine) palladium (O). For this purpose, the allyl ester in an inert solvent, e.g. ethylene dichloride, chloroform or ethyl acetate, 4 147 514 is mixed under a nitrogen atmosphere with a catalytic amount, e.g. 1-5% molar ratio to the amount of ester, palladium catalyst and such with the same amount of triphenylphosphine, then an equimolar amount of the sodium or potassium salt of 2-ethyl-n-caproic acid is added and stirred at room temperature until the salt of the compound of formula I has completely precipitated out, in which R1 is sodium or potassium and the other symbols have the meaning given above. This reaction takes about 1 hour, after which the formed salt is filtered off. As stated above, the compounds of formula I in which R1 is hydrogen, as well as the salts of these compounds, show an in vitro activity in combination with antibiotics / 5-lactam. synergistic. This effect has been demonstrated by measuring the lowest inhibitory concentration (MIC) in / µm / ml against various microorganisms. These studies were carried out using the method described in Ericcson and Sherris, Acta Pathologica et Microbiologia Scandinav., Supp. 217, section B: 64-68 (1971) using a cerebrocardial agar extract (BHI) and a vaccine reproductive device. Overnight developed vaccines are diluted a hundredfold and used as a conventional vaccine (20,000-10,000 cells of approximately 0.002 ml are placed on the agar surface using 20 ml BHI / agar per vessel). In the tests, 12 two-fold diluted solutions of the compounds to be tested were used, with the initial concentration of the test compound being 200 µg / ml. The results were read after the samples had been stored at 37 ° C for 18 hours, individual colonies were omitted. The lowest level of action of a test compound (MIC) is considered to be the lowest concentration of this compound or combination of compounds at which the naked eye can see complete inhibition of microbial growth. The results of the tests are given below in the table, which uses the following abbreviations and symbols: I denotes the use of the compound alone of formula 1, II means the use of a 1: 1 combination of the compound of formula 1 with ampicillin, III means the synergistic action of the compound of formula 1, namely: PS - strong synergistic effect, S - synergism, A - additional action, N - no visible effect effect, NI - no assessment The table shows the results for the compounds of formula 1, where n is the number 2, R5 is hydrogen, R1 is hydrogen, sodium or potassium, and R6 has the meaning given in the table, where t in 4 and 6 is zero, and R8 in formula 5 is methyl. Table R6 Formula 6 Formula 5 Formula 4 I II III I II III I II III Staph aureus 01A005 200 <0.20 NI 200 <0.10 NI 200 < 0.20 NI Staph aureus 01A400 200 0.78 Ps 200 3.12 s 200 0.39 PS E. coli 51A129 200 100 Ni 200 50 NI 200 50 PS E. coli 51A266 200 6.25 N 200 3.12 N 200 3.12 N E. coli 51A470 200 <0.20 NS 200 <0.10 NS 200 <0.20 NS Ps. aerug. 52A104 200 100 NI 200 50 NI 200 100 NI Klcb. pneum. 53A079 200 25 S 200 25 A 200 3.12 PS Serr. Mar. 63A095 200 100 S 200 50 S 200 25 PS Inter. cloa. 67B009 200 100 NS 200 <50 NS 200 100 A Mórg. morg. 97A001 200 50 PS 200 12.5 A 200 3.12 PS The compounds of formula I in which R1 is hydrogen, as well as their salts, in combination with known antibiotics / J-lactam antibiotics are useful in industry as microbicides e.g. for -treatment of water or sludge, for the preservation of paints and wood, and can also be used topically as disinfectants. In such applications, it is often advantageous to mix the active ingredient with a non-toxic carrier such as vegetable or mineral oil or an emollient cream. It is also possible to dissolve or disperse these compounds in liquid solvents or diluents such as water, alkanols, glycols or mixtures thereof. The most commonly used preparations are those containing from about 0.1 to about 10% by weight of active substance in relation to the total preparation. As also mentioned above, the compounds of formula I are especially valuable as potent inhibitors of microorganisms / J-lactamases and increase the effective bactericidal action. antibiotics / 3-lactam (penicillins and cephalosporins) against many microorganisms, especially those that produce / 3-lactamase. This beneficial effect of the compounds of formula I can be determined in experiments in which the MIC of the antibiotics themselves is determined and the compounds of formula I themselves, in which R1 is hydrogen. The MIC value for the combination of these compounds with antibiotics is measured by the method given by Barry and Sabath in the Manual of Clinical Microbiology, Lenette, Spaulding and Truant, 2nd Edition, 1974, American Society for Microbiology. Compounds of Formula 1 enhance the antimicrobial activity of antibiotics / J-lactam enzymes in vivo. This means that they reduce the amount of antibiotic necessary to protect mice from the lethal effects of the vaccine of / 3-lactamase producing bacteria. In trials to establish such activity, the mice experienced infection by intraperitoneal inoculation of mice, typical cultivation of the test microorganism as a 5% suspension in the gastric mucosa of the hog The rate of infection was regulated so that the mouse received a lethal dose, that is, the lowest lethal dose, killing 100% of the mice compared to untreated control mice. The test compound was administered in combination with the antibiotic rose orally or intraperitoneally in infected mice. The activity of the test mixture was determined by the number of surviving mice given a given dose of the mixture. This activity was expressed as the percentage of animals alive for a given dose, or expressed as a PD50 value, i.e. the dose amount at which half of the infected mice remain alive. The ability of compounds of formula 1 to increase the effectiveness of antibiotics / 3-lactam against producing bacteria / 3-lactamase makes these compounds valuable agents that can be used together with / 3-lactam antibiotics to combat bacterial infections in mammals, and in particular in humans. In practice, the compound of formula 1 can be mixed with the antibiotic / 3-lactam, or administered separately. Sometimes it is advantageous to administer the compound of formula 1 first and then to administer an antibiotic treatment. If the compound of formula 1 is used to increase the effectiveness of a 3-lactam antibiotic, then a mixture of this compound with a 3-lactam antibiotic or the compound itself. of formula I is preferably administered with a pharmacologically acceptable carrier or diluent. In such preparations, the carrier content is usually 5-80% by weight. The preparations containing the compound of formula I and the antibiotic / 3-lactam can be administered orally or parenterally, e.g. intramuscularly, subcutaneously or intraperitoneally. In such formulations, the weight ratio of the compound of Formula I to the (3-lactam) antibiotic is from about 1: 3 to about 3: 1. If the compounds of formula I are used together with an antibiotic / 3-lactam, the daily dose of such a preparation for humans is from about 10 to about 200 mg when administered orally, and from about 10 to about 40 mg per kg of body weight when administered parenterally. . Occasionally, other dose levels may also be used. As is known, some antibiotics / 3-lactam are effective when administered orally or parenterally, while others are only effective when administered parenterally. If the compound of Formula 1 is to be used together, e.g. in a mixture with an antibiotic which is effective only when administered parenterally, then a preparation suitable for parenteral administration must be used. The same is true if a compound of formula I or formula 2 is to be administered orally or parenterally together, e.g. in a mixture, with an antibiotic. However, it is also possible to administer the compounds of formula I orally and concurrently administer parenteral antibiotics / 3-lactam, or vice versa. The invention is illustrated in the Examples below. For the compounds obtained, the proton spectrum and the C13 nuclear magnetic resonance spectrum measured at 60, 90, 250 or 300 MHz for solutions in deuterochloroform (CDCl3), deuterium oxide (D2O), deuteroacetone (CD3COCD3) or deuterodimethyl sulfoxide (DMSO-de) were given. and peaks are reported in parts per million (ppm) down from tetramethylsilane. The abbreviations used herein have the usual meanings. Example I. A. 6-Bromo-6- (2-thiazolyl) -hydroxy-methylpenicillanic acid 1,1-dioxide allyl ester. A solution of 8.84 g (20 mmol) of 6,6-dibromopenicillanic acid 1,1-dioxide allyl ester in 100 ml of anhydrous tetrahydrofuran is cooled to -78 ° C, 7.02 ml (20 mmol) of methylmagnesium bromide are added and the mixture is stirred for 5 minutes, then, while still at -78 ° C, a solution of 2.26 g (20 mmol) of 2-formylthiazole in 10 ml of tetrahydrofuran is added and the mixture is stirred for 20 minutes. 1.2 ml of acetic acid are then added, the mixture is poured into water and extracted with ethyl acetate and chloroform. The combined extracts were dried over Na2SO4 and the solvents were evaporated under reduced pressure to give 8.5 g of a glassy crude product. This product is purified by chromatography on a silica gel column, eluting with chloroform / ethyl acetate 89:11, to give 6.2 g (72% of theory) of the pure title compound as a single isomer. 1 H-NMR (CDCL 3) ppm (delta): 1.4 (s, 3H); 1.6 (s. 3H); 4.0 (bs, 1H); 4.42 (s. 1H); 4.6 (d. 2H); 5.3 (s. 1H); 5.55 (s. 1H); 5.1-6.3 (m, 3H); 7.35 (d. 1H); 7.75 (d, 1H). B. 6-Bromo-6- (2-thiazolol) -hydroxymethylpenicillic acid 1,1-dioxide benzyl ester. Proceeding as in paragraph A, except using a benzyl ester instead of the allyl ester, to obtain the compound given in the title. This product, having the consistency of an orange foam, is obtained with a yield equal to the theoretical one. H-NMR (CDCl 2) ppm (delta): 1.32 (s, 3H); 1.60 (s, 3H); 4.5 (s. 2H); 5.2-5.8 (m, 4H); 7.3 (d. 1H); 7.4 (s. 5H); 7.8 (d, 1H). Example II. The process for the preparation of compounds of formula 9, as described in example 1, can be combined with the acetylation process. The procedure is that 1.3 equivalents of 6,6-dibromopenicillanic acid 1,1-dioxide in tetrahydrofuran are added to a solution of 1 equivalent of allyl or benzyl ester of 6,6-dibromopenicillanic acid at -78 ° C and mixed for 5 -10 minutes, then 1.3 equivalents of an aldehyde of formula R6HCO are added at the same temperature and stirred for 30-60 minutes. Then, still at -78 ° C, 1.3 equivalents of acetyl chloride are added, stirred for 10 minutes, poured into ice water, extracted with ethyl acetate, the extract is dried and the solvent is evaporated off under reduced pressure. benzyl ester of formula 8 and using an aldehyde of formula R6HCO in which R6 is a thiazolyl group, the benzyl ester of 1,1-dioxide bromo-6- (thiazolyl-2) -acetoxymethylpenicillanic acid is obtained. 1 H-NMR: 1.6 (s, 3H); 1.8 (s. 3H); 2.2 (s. 3H); 2.3 (s. 6H); 4.4 (s. 1H); 5.2 (s. 2H); 5.3 (s. 1H); 6.4 (s. 1H); 7.3 (s, 5H). Example III. A. 6- (3- (Thiazolyl-2) -acetoxymethyl-penicillanic acid 1,1-dioxide benzyl ester. To a solution of 74.6 g (134 mmol) of 6-bromo-6- (thiazolyl-2) -acetoxymethylpenicillanic acid 1,1-dioxide benzyl ester in 850 ml of benzene, 43.99 g (151.2 mmol) of tri-hydride are added. n-butyltin and the mixture was refluxed for 5.5 hours, then left to stand overnight. The pcd solvent is then evaporated under reduced pressure, the residue dissolved in hexane and extracted with 2 portions of 260 ml of acetonitrile. The extracts are evaporated, the residue is mixed with diethyl ether, the precipitate is filtered off and washed with ether to give 33.28 g of colorless crystals. The filtrate is evaporated to dryness, the residue is dissolved in hexane, 10 g of tri-n-butyltin are added, and by following the procedure described above, a second batch of 2.8 g of product is obtained. The total yield is 56.3% of theory. The first batch of product is chromatographed on a silica gel column, eluting with 9: 1 chloroform / ethyl acetate. The pure fractions are evaporated, the residue is mixed with a 4: 1 mixture of diethyl ether and ethyl acetate, filtered, washed with ether and dried to give 22.6 g of a white solid. 1 H-NMR (CDCl 3) ppm (delta): 1.25 (s, 3H); 1.53 (s, 3H); 2.1 (s, 3H); 4.58 (s, 1H); 4.80 (d, 1H); 5.2 (dd, 1H); 5.22 (q, 2H); 6.75 (d. 1H); 7.35 (s. 5H); 7.4 (d. 1H); 7.8 (d. 1H); 13 C-NMR (CDCl 3) ppm (delta): 17.7; 19.9; 20.5; 54.5; 63.06; 63.6; 63.8; 64.5; 68.1; 121.8; 128.8; 128.9.P r z y k l a d IV. 6- (2-thiazolyl) -methylene penicillanic acid 1,1-dioxide allyl ester and salification of this ester. 0.688 g (1.29 mmol) of 6- (2-thiazolyl) -acetoxymethyl-penicillanic acid 1,1-dioxide allyl ester is mixed with 0.16 g (1.29 mmol) 1,5-diazabicyclo [4.3.0 ] nonene-5 and 5 ml of methylene chloride at room temperature within 1 hour, then diluted with methylene chloride, rinsed with 2 portions of 50 ml of water, dried over Mg2SO4 and evaporated. The oily residue was chromatographed on a silica gel column, eluting with 1: 1 hexane ethyl acetate. 147514 7 August 0.189 g (39% of theory) of a yellow oily product are obtained. 1 H-NMR (CDCl 3) ppm (delta): 1.53 (s, 3H); 1.65 (s, 3H); 4.33 (s. 1H); 4.55 (d, 2H): 5.0- * A (-, 2H); 5.45 (s. 1H); 5.4-6.0 (m, 1H); 7.1 (m, 1H); 7.75 (m, 1H); 7.65 (d, 1H). B. The allyl ester prepared as described in the preceding paragraph is hydrolyzed with tetrakis (triphenylphosphine) palladium (O) in the presence of triphenylphosphine in a methylene chloride chloride. After stirring for 5 minutes, it is diluted with ethyl acetate, a solution of 2-ethylcaproic acid sodium in ethyl acetate is added and the mixture is stirred at room temperature for 1 hour, then the product is filtered off and dried. The potassium salt of 6- (2-thiazolyl) -methylpenicillanic acid 1,1-dioxide is obtained in the form of a yellow solid with a yield of 84.7% of theory. 1 H-NMR 250 MHz (DMSO-D 6) ppm (delta): 1.40 (s, 3H); 1.45 (s, 3H); 3.80 (s, 1H); 5.83 (s. 1H); 7.66 (s. 1H); 8.04 m, 2H). Example V.A. 6- (benzothiazolyl-2) -methylene-penicillanic acid 1,1-dioxide, mixture of E and Z isomers. For a solution of 400 mg (0.91 mmol) of 6- (benzothiazolyl-2) acid 1,1-dioxide acetoxymethylpenicillate in 5 ml of water, a solution of 0.15 g (1.82 mmol) of sodium bicarbonate in 2 ml of water is added and the mixture is stirred for 2 hours, then the product is frozen at pH-7.55 and mixed with water, acidified with dilute hydrochloric acid to pH-3.5 and extracted with ethyl acetate. The organic extracts are dried over MgSO 4 and the solvent is evaporated under reduced pressure to give the title product as a 60:40 mixture of (E) and (Z) isomers as shown by the NMR spectrum. 1 H-NMR (CDCl 3) ppm (delta): 1.55 (s, 12H); 1.6 (s, 1.8G); 1.65 (s, 1.2H); 1.67 (s, 1.8G); 4.55 (s, 0.6H); 4.58 (s, 0.4H); 5.38 (s, 0.4H); 5.74 (s, 0.6H); 7.44 (s, 0.4H); 7.48 (s, 0.6H); 7.5 (m, 4H); 7.89 (d. 1H); 8.07 (d, 0.4H); 8.15 (d, 0.6H). B. In an analogous manner, a compound of formula I is prepared from the appropriately substituted 6-R5-CH-acetoxymethylpenicillanic acid 1,1-dioxide where R1 and R6 are hydrogen and R5 is the group of formula 5, where R8 is methyl. The yield is 84% of theory as a 60:40 mixture of (E) and (Z) isomers. 1 H-NMR (D 2 O) ppm (delta): 1.54 (s, 3H); 1.62 (s, 3H); 4.04 (s, 3H); 4.35 (s. 1H); 5.7 (s, 0.6H); 5.95 (s, 0.4H); 7.26 (s, 0.6H); 7.55 (s, 0.4H); 8.09 (s, 2H). Claims 1. Method for the preparation of new 6-methylpenicillanic acid derivatives of the general formula 1, in which n is zero or 2, R1 represents a hydrogen atom, an allyl radical or a benzyl radical, one of the symbols R5 and R6 is a hydrogen atom and the second is a group of formula 4, 5 or 6, where in formulas 4 and 6 R7 is a hydrogen atom or a (C1-C4) -alkyl radical and t is zero, 1 or 2, and R8 in formula 5 is hydrogen, methyl or ethyl, or the pharmacologically acceptable acid addition salts of compounds of formula 1 in which the group R 5 or R 6 contains a basic nitrogen atom, or the pharmacologically acceptable cationic salt of the compounds of formula 1 in which R 1 is hydrogen, characterized in that the compound of formula 8 in which N and R 1 are as defined above, but R 1 is not hydrogen, is reacted with an equimolar amount of (C 1 -C 4) alkyl benzene chloride, bromide or iodide or (C 1 -C 4). C4) -alkyllithium and an aldehyde of formula R5R6CO, in which R and R are as defined above, carrying out these reactions in an inert solvent environment at a temperature of - 100 ° C to 25 ° C, followed by the obtained compound of formula 9, in which n, R1, R5 and R6 are as defined above, acetylated with acetyl chloride or bromide or acetic acid anhydride in an inert organic solvent environment and in the presence of an equivalent mole amount of a tertiary amine and hydrogenolyzed with organotin hydride or hydrogen in the presence of a noble metal catalyst and a new compound formed. 10, in which n, R1, R5 and R6 are as defined above, and R9 is acetyl, is subjected to a deacetylation reaction, and then in the obtained compound of formula I, in which n, R5 and R6 are as defined above, and R1 represents an allyl or benzyl radical, optionally converting a group R1 into a hydrogen, sodium or potassium atom. A compound according to claim 1, characterized in that the obtained compound of formula 1, wherein R 1 is allyl or benzyl, and the other symbols have the meaning given in claim 1, 1, is reacted in an inert solvent with a catalytic amount of tetrakis / triphenylphosphine / palladium / O / and triphenylphosphine and with an equimolar amount of sodium or potassium salt of 2-ethyl caproic acid. R5 Rb-C R-, R £ <0 (0 ) n -N ^ S CH3 Ch + j er "" coor1 Formula1 ^ J — N y / COOR, Formula 2 0R3 'Ra-CH Formula 3 (R7)' ^ - Formula A (R7), Formula 6 nn-r8 Formula 5 K c CH3 V '/ ¦ 0 "" N' COOH Formula 7 Br? R ^ CH n / ^ S 0 * LN Formula 8 _ i-ChbMgBr Chh l-rz-C ^ HgLi COOR1 2.R5r6C.0 R6- Cv f2 ^ CH3 0 "^" COOR1 Formula 1 Scheme 6 AH Br Ru-C R ^ 0 O R- \ z //; h3 J /// C00R1 Formula 9 R6-C Coh CH. o 'N "COOR1 Model 10 Printing House of the PRL. Mintage 100 copies ^ Price PLN 400 PL