PL185597B1 - Tricykliczne amidy, środek farmaceutyczny i ich zastosowania - Google Patents
Tricykliczne amidy, środek farmaceutyczny i ich zastosowaniaInfo
- Publication number
- PL185597B1 PL185597B1 PL96327312A PL32731296A PL185597B1 PL 185597 B1 PL185597 B1 PL 185597B1 PL 96327312 A PL96327312 A PL 96327312A PL 32731296 A PL32731296 A PL 32731296A PL 185597 B1 PL185597 B1 PL 185597B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- compound
- mmol
- cancer
- enantiomer
- compounds
- Prior art date
Links
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 title claims description 16
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 237
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 27
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims abstract description 14
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 claims abstract description 11
- 108010014186 ras Proteins Proteins 0.000 claims description 53
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 claims description 53
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 27
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 24
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 22
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 16
- 108010054353 p21(ras) farnesyl-protein transferase Proteins 0.000 claims description 13
- 108700042226 ras Genes Proteins 0.000 claims description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 13
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims description 9
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 claims description 9
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 201000003793 Myelodysplastic syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 claims description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 6
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 claims description 6
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 claims description 6
- 208000032791 BCR-ABL1 positive chronic myelogenous leukemia Diseases 0.000 claims description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 208000010833 Chronic myeloid leukaemia Diseases 0.000 claims description 5
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 claims description 5
- 208000033761 Myelogenous Chronic BCR-ABL Positive Leukemia Diseases 0.000 claims description 5
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims description 5
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- 101150040459 RAS gene Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 claims description 4
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 24
- -1 formulae (1.0) Chemical class 0.000 abstract description 13
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 abstract description 4
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 abstract description 4
- 125000004030 farnesyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 187
- 239000000047 product Substances 0.000 description 104
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 86
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 75
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 71
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 66
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 64
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 63
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 59
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 59
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 59
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 57
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 56
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 56
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 53
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 48
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 33
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 33
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 33
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 32
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 32
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 32
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 27
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 24
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 22
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 22
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 18
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 17
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 15
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 15
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 13
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 10
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 10
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 10
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 10
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 10
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 9
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N bis(2-methylpropyl)aluminum Chemical compound CC(C)C[Al]CC(C)C SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 8
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 8
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 7
- 108010050749 geranylgeranyltransferase type-I Proteins 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 6
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 6
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic anhydride Chemical compound FC(F)(F)C(=O)OC(=O)C(F)(F)F QAEDZJGFFMLHHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 5
- JRNVZBWKYDBUCA-UHFFFAOYSA-N N-chlorosuccinimide Chemical compound ClN1C(=O)CCC1=O JRNVZBWKYDBUCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 5
- 238000003821 enantio-separation Methods 0.000 description 5
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 239000003528 protein farnesyltransferase inhibitor Substances 0.000 description 5
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 5
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 4
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 4
- ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N dichloromethyl Chemical compound Cl[CH]Cl ZJULYDCRWUEPTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 4
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 4
- WOCIAKWEIIZHES-UHFFFAOYSA-N ruthenium(iv) oxide Chemical compound O=[Ru]=O WOCIAKWEIIZHES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 108010007508 Farnesyltranstransferase Proteins 0.000 description 3
- 102000007317 Farnesyltranstransferase Human genes 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 3
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 230000006126 farnesylation Effects 0.000 description 3
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 3
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 125000002686 geranylgeranyl group Chemical group [H]C([*])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C(C([H])([H])[H])/C([H])([H])C([H])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 3
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 3
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical class [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OINNEUNVOZHBOX-QIRCYJPOSA-K 2-trans,6-trans,10-trans-geranylgeranyl diphosphate(3-) Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CC\C(C)=C\COP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O OINNEUNVOZHBOX-QIRCYJPOSA-K 0.000 description 2
- VWFJDQUYCIWHTN-YFVJMOTDSA-N 2-trans,6-trans-farnesyl diphosphate Chemical compound CC(C)=CCC\C(C)=C\CC\C(C)=C\CO[P@](O)(=O)OP(O)(O)=O VWFJDQUYCIWHTN-YFVJMOTDSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VFTOHJFKIJLYKN-UHFFFAOYSA-N 7-nitro-9h-fluoren-2-ol Chemical group [O-][N+](=O)C1=CC=C2C3=CC=C(O)C=C3CC2=C1 VFTOHJFKIJLYKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- VWFJDQUYCIWHTN-UHFFFAOYSA-N Farnesyl pyrophosphate Natural products CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCOP(O)(=O)OP(O)(O)=O VWFJDQUYCIWHTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091006027 G proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000030782 GTP binding Human genes 0.000 description 2
- 108091000058 GTP-Binding Proteins 0.000 description 2
- OINNEUNVOZHBOX-XBQSVVNOSA-N Geranylgeranyl diphosphate Natural products [P@](=O)(OP(=O)(O)O)(OC/C=C(\CC/C=C(\CC/C=C(\CC/C=C(\C)/C)/C)/C)/C)O OINNEUNVOZHBOX-XBQSVVNOSA-N 0.000 description 2
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 238000003754 machining Methods 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 2
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 2
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- IOGXOCVLYRDXLW-UHFFFAOYSA-N tert-butyl nitrite Chemical compound CC(C)(C)ON=O IOGXOCVLYRDXLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N thionyl chloride Chemical compound ClS(Cl)=O FYSNRJHAOHDILO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000004565 tumor cell growth Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- GDKZRODQQVUUEB-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-4-oxido-1,4-diazoniabicyclo[2.2.2]octane Chemical compound C1C[N+]2(F)CC[N+]1([O-])CC2 GDKZRODQQVUUEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 1
- MENYRYNFSIBDQN-UHFFFAOYSA-N 5,5-dibromoimidazolidine-2,4-dione Chemical compound BrC1(Br)NC(=O)NC1=O MENYRYNFSIBDQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl beta-D-galactoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CNC2=CC=C(Br)C(Cl)=C12 OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N 0.000 description 1
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000010507 Adenocarcinoma of Lung Diseases 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- 235000011330 Armoracia rusticana Nutrition 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZHHNDCSESIXJW-UHFFFAOYSA-N C(=CC(C)=C)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O Chemical compound C(=CC(C)=C)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O VZHHNDCSESIXJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010048832 Colon adenoma Diseases 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000182067 Fraxinus ornus Species 0.000 description 1
- 235000002917 Fraxinus ornus Nutrition 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical class CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012359 Methanesulfonyl chloride Substances 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000009905 Neurofibromatoses Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 229910006124 SOCl2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- CLWRFNUKIFTVHQ-UHFFFAOYSA-N [N].C1=CC=NC=C1 Chemical group [N].C1=CC=NC=C1 CLWRFNUKIFTVHQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- OVLHQUWQINALPR-UHFFFAOYSA-N azane;dichloromethane Chemical compound N.ClCCl OVLHQUWQINALPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-BJUDXGSMSA-N carbon-11 Chemical compound [11C] OKTJSMMVPCPJKN-BJUDXGSMSA-N 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000010897 colon adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000005757 colony formation Effects 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 230000030944 contact inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- VRLDVERQJMEPIF-UHFFFAOYSA-N dbdmh Chemical compound CC1(C)N(Br)C(=O)N(Br)C1=O VRLDVERQJMEPIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N di-tert-butyl ether Chemical compound CC(C)(C)OC(C)(C)C AQEFLFZSWDEAIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;ethyl acetate Chemical compound ClCCl.CCOC(C)=O WBKFWQBXFREOFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YDVNLQGCLLPHAH-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hydrate Chemical compound O.ClCCl YDVNLQGCLLPHAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 125000002587 enol group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- IUDKTVXSXWAKJO-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-pyridin-2-ylacetate Chemical compound CCOC(=O)CC1=CC=CC=N1 IUDKTVXSXWAKJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 230000006130 geranylgeranylation Effects 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 1
- 150000002411 histidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000006122 isoprenylation Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000012633 leachable Substances 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 201000005249 lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N methanesulfonyl chloride Chemical compound CS(Cl)(=O)=O QARBMVPHQWIHKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 201000004931 neurofibromatosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000137 polyphosphoric acid Polymers 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000013823 prenylation Effects 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- ALDITMKAAPLVJK-UHFFFAOYSA-N prop-1-ene;hydrate Chemical group O.CC=C ALDITMKAAPLVJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N propylene glycol Substances CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000679 solder Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007514 turning Methods 0.000 description 1
- 150000003672 ureas Chemical class 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
- C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
Abstract
1. Tricykliczny amid wybrany z grupy obejmujacej: lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli. racemiczny racemiczny racemiczny racem iczny racemiczny (13) B1 PL PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku są tricykliczne aminy, środek farmaceutyczny zawierający te tricykliczne amidy, przedstawiono także zastosowanie tricyklicznych amidów i zastosowanie środka zawierającego tricykliczne amidy.
Biologiczne znaczenie onkogenu Ras oraz rolę Ras i enzymu znanego jako famesylotransferaza białkowa w przekształcaniu komórek normalnych w komórki rakowe opisano w międzynarodowych publikacjach zgłoszeń PCT o numerach WO 95/00497 i WO 95/10516. W każdej z tych publikacji opisano również odrębną klasę związków hamujących działanie enzymu famesylotransferazy białkowej, a tym samym famezylowanie białka Ras.
W międzynarodowej publikacji zgłoszenia PCT o numerze WO 95/10516 ujawniono tricykliczne związki amidowe i mocznikowe o poniższym wzorze ogólnym (1)
185 597 i ich zastosowanie w hamowaniu działania Ras i nienormalnego wzrostu komórek. Opisano szereg podgrup związków o wzorze (1), do których należą związki o wzorach (5.0c), (5.1c)i(5.2a)
oraz izomer 11-R i izomery 11-S związków (5.0c) i (5.1c). Opisano również szereg konkretnych związków w każdej z tych podgrup oraz działanie biologiczne tych związków.
Przedmiotem wynalazku są nowe tricykliczne związki amidowe wybrane z grupy obejmującej
185 597
185 597
185 597
Br
185 597
lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Szczególnie korzystne związki są wybrane z grupy obejmującej związki o wzorach: (22,0), (25,0), (27,0), (53,0), (55,0), (57,0), lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Jeszcze inna korzystna grupa obejmuje związki wybrane z grupy obejmującej związki o wzorach: (29,0), (31,0), (32,0), (36,0), (37,0), (39,0), (41,0), (62,0), (66,0), (68,0), lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Szczególnie korzystne są związki wybrane z grupy obejmującej związki o wzorach: (16,0), (39,0), (68,0) i (41,0), lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Przedmiotem wynalazku jest także środek farmaceutyczny zawierający skuteczną ilość związku aktywnego w połączeniu z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem, który jako związek aktywny zawiera wyżej określony tricykliczny amid.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie związku, którym jest związek wybrany z wyżej określonej grupy związków do wytwarzania leku do hamowania famezylotransferazy białkowej.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego tricyklicznego amidu do wytwarzania leku do leczenia raka trzustki, raka płuc, białaczki szpikowej przewlekłej, raka pęcherzyka tarczycy, zespołu mielodysplastycznego, raka naskórka, raka pęcherza, raka okrężnicy, raka piersi lub raka prostaty. ·
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego tricyklicznego amidu wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzrostu komórek.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego tricyklicznego amidu do wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzostu komórek nowotworowych eksprymujących aktywowany onkogen Ras.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego tricyklicznego amidu do wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzrostu komórek nowotworowych w których białko Ras zostaje uaktywnione w wyniku mutacji onkogenicznej w genach innych niż gen Ras.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego środka farmaceutycznego do wytwarzania leku do hamowania famezylotransferazy białkowej.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie wyżej określonego środka farmaceutycznego do wytwarzania leku do leczenia raka trzustki, raka płuc, białaczki szpikowej przewlekłej, raka pęcherzyka tarczycy, zespołu mielodysplastycznego, raka naskórka, raka pęcherza, raka okrężnicy, raka piersi lub raka prostaty.
Skręcalność optyczną związków według wynalazku ((+)- lub (-)-) mierzono w metanolu lub etanolu w 25°C.
Wynalazek obejmuje powyższe związki w stanie bezpostaciowym lub krystalicznym.
185 597
Korzystne są związki według wynalazku wybrane z grupy obejmującej związki 5.0, 6.0,
7.0, 8.0, 8.A, 9.0, 10.0, 11.0, 14.0, 15.0 i 16.0, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Do korzystnych związków według wynalazku należą również związki wybrane z grupy obejmującej związki 22.0, 25.0, 27.0, 29.0, 31.0, 32.0, 36.0, 37.0, 39.0 i 41.0, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Do korzystnych związków według wynalazku należą również związki wybrane z grupy obejmującej (+)-enancjomery związków 73.0 i 80.0, lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Do korzystnych związków według wynalazku należą także należą związki wybrane z grupy obejmującej związki 53.0, 55.0, 57.0, 58.0, 62.0, 66.0 i 68.0 lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Do korzystnych związków należą związki 3,7,8-trichlorowcowe o optycznej skręcalnośći (-), np. związki 22.0, 25.0 i 27.0.
Do korzystnych związków należą związki 3,7,8-trichlorowcowe o optycznej skręcalności (+), np. związki 10 29.0, 31.0, 32.0, 36.0, 37.0, 39.0 i 41.0.
Do korzystnych związków należą związki 3,10-dichlorowcowe o optycznej skręcalności (+), np. związek 20.0.
Do korzystnych związków należą związki 3,7-dibromo-8-chlorowe o stereochemii S w pozycji C-11, np. związki 53.0,15 55.0 i 57.0.
Do korzystnych związków należą związki 3,7-dibromo-8-chlorowe o stereochemii R w pozycji C-11, np. związki 62.0,66.0 i 68.0.
Do korzystnych związków należą także związki 16.0, 39.0, 0 41.0 i 68.0.
Do jeszcze korzystniejszych związków należą związki 16.0, 39.0 i 68.0. Wyjątkowo korzystny jest związek 39.0 lub 68.0.
Dla specjalistów zrozumiałe jest, że tricykliczny układ pierścieniowy numeruje się w sposób następujący:
Dla specjalistów zrozumiałe jest również, że stereochemie S i R przy wiązaniu C-11 są następujące:
Dotychczas nie było doniesień iż związki tricykliczne według wynalazku hamują farnezylotransferazę białkową. Tak związki według wynalazku mają zastosowanie w sposobie hamowania famezylotransferazy białkowej ponieważ związki tricykliczne według wynalazku: (i) potencjalnie hamują famezylotransferazę białkową, ale nie hamują geranylogeranyltransferazy I, in vitro; (ii) blokują zmiany fenotypowe wywoływane przez transformującą formę Ras, które jest akceptorem famezylu, ale nie blokują zmian wywoływanych przez transformującą
185 597 formę Ras, które zostało zmienione metodami inżynierii genetycznej, tak iż jest akceptorem geranylogeranylu; (iii) blokują wewnątrzkomórkową obróbkę Ras, które jest akceptorem farnezylu, ale nie blokują obróbki formy Ras, która została zmieniona metodami inżynierii genetycznej, tak iż jest akceptorem geranylogeranylu; i (iv) blokują nienormalny wzrost komórek w hodowli wywoływany przez tranformujące Ras. Dla związków według wynalazku wykazano na modelach zwierzęcych działanie przeciwnowotworowe.
Związki według wynalazku mają zastosowanie w sposobie hamowania nienormalnego wzrostu komórek, włącznie z komórkami transformowanymi, polegającym na podawaniu skutecznej ilości związku według wynalazku. Nienormalny wzrost komórek oznacza taki wzrost komórek, który jest niezależny od normalnych mechanizmów regulacyjnych (np. utratę hamowania kontaktowego). Odnosi się to do nienormalnego wzrostu: (1) komórek nowotworowych (nowotworów) eksprymujących aktywowany onkogen Ras; (2) komórki nowotworowe, w których białko Ras jest aktywowane w wyniku onkogennej mutacji w innym genie; i (3) komórki łagodne i złośliwe innych chorób proliferacyjnych, w których występuje aktywacja Ras.
Związki według wynalazku mają zastosowanie w sposobie hamowania wzrostu nowotworu polegającym na podawaniu skutecznej ilości opisanych trycyklicznych związków ssakom (np. człowiekowi) w przypadku gdy występuje potrzeba takiego leczenia. W szczególności wynalazek dostarcza sposobu hamowania nowotworów eksprymujących aktywowany onkogen Ras przez podawanie skutecznej ilości związków opisanych powyżej. Przykładami nowotworów, których rozwój można hamować są, ale nie tylko, rak płuc (np. gruczolakorak płuc), rak trzustki (np. rak trzustki taki jak, na przykład zewnątrz wydzielniczy rak trzustki), rak okrężnicy (np. rak jelita grubego, taki jak, na przykład, gruczolakorak okrężnicy i gruczolak okrężnicy), białaczka szpikowa przewlekła (na przykład białaczka szpikowa ostra (AML)), rak pęcherzyków tarczycy, zespół mielodysplastyczny (MDS), rak pęcherza, rak naskórka, rak piersi i rak prostaty.
Uważa się, że związki według wynalazku mają zastosowanie w sposobie hamowania chorób proliferacyjnych zarówno łagodnych i złośliwych, w których białko Ras jest niewłaściwie aktywowane w wyniku onkogennej mutacji w innych genach - tj. gen Ras nie jest sam aktywowany przez mutację do onkogennej formy - przy czym to hamowanie wywołuje się przez podanie skutecznej ilości opisanych związków tricyklicznych ssakom (np. człowiekowi) potrzebującym takiego leczenia. Za pomocą opisanych związków tricyklicznych można hamować, na przykład, łagodną proliferacyjną nerwiakowłókniakowatość lub nowotwory w których Ras jest aktywowany przez mutację lub nadekspresję onkogenów kinazy tyrozynowej (np., neu, src, abl, lek, i fyn).
Związki według wynalazku hamują famezylotransferazę białkową i famezylację onkogennego białka Ras. Ponadto związki według wynalazku mają zastosowanie w sposobie hamowania famezylotransferazy białkowej ras u ssaków, w szczególności u ludzi, przez podanie skutecznej ilości opisanych po wyżej związków tricyklicznych. Podawanie pacjentom związków według wynalazku, w celu hamowania famezylotransferazy białkowej, jest użyteczne w przypadku leczenia nowotworów opisanych powyżej.
Związków tricyklicznych używa się w sposobach hamowania nienormalnego wzrostu komórek. Nie mając zamiaru wiązać się z jakąkolwiek teorią, podejrzewa się iż związki te mogą działać przez hamowanie flinkcji białka G, takiego jak p21 ras, blokując izoprenylację białka G i przez to mogą być użyteczne w leczeniu chorób proliferacyjnych, takich jak rozrost nowotworowy i rak. Bez chęci wiązania się z jakąkolwiek teorią, podejrzewa się iż związki te hamują famezylotransferazę białkową ras przez to wykazują aktywność przeciwproliferacyjną przeciw komórkom transformowanym ras.
Szczegółowy opis wynalazku
Następujące określenia używa się w podanym niżej znaczeniu, o ile nie zaznaczono tego inaczej.
M+ oznacza jon cząsteczkowy cząsteczki w widmie masowym;
MH+ oznacza jon cząsteczkowy cząsteczki z atomem wodoru w widmie masowym;
185 597
N-tlenki pirydylu oznaczają grupę \N
Następujące rozpuszczalniki i reagenty określa się podanymi skrótami: tetrahydrofuran (THF); etanol (EtOH); metanol (MeOH); kwas octowy (HOAc lub AcOH); octan etylu (EtOAc); N,N-dimetyloformamid (DMF); kwas trifiuorooctowy (TFA); bezwodnik trifiuorooctowy (tFaA); 1-hydroksybenzotriazol (HOBT); kwas m-chloronadbenzoesowy (MCPBA); trietyloamina (Et3N); eter dietylowy (Et2O); chloromrówczan etylu (ClCO2Et); chlorowodorek 1-(3-dimetyloaminopropylo)-3-etylokarbodiimidu (DEC); wodorek diizobutyloglinu (DIbAl); izopropanol (iPrOH); dimetylosulfotlenek (DMSO).
Pewne związki według wynalazku mogą występować w różnych formach izomerycznych (np. jako enancjomery lub diastereoizomery), w tym atropoizomery (czyli związki, w których 6członowy pierścień wykazuje ustaloną konformację, tak że atom węgla 11 znajduje się nad lub pod płaszczyzną skondensowanych pierścieni benzenowych z uwagi na obecność podstawnika 10bromo). Wynalazek obejmuje swym zakresem wszystkie takie izomery, w postaci czystej oraz w postaci mieszanin, w tym mieszaniny racemicznej. Obejmuje on także formy enolowe.
Pewne zasadowe związki tricykliczne tworzą także farmaceutycznie dopuszczalne sole, np. sole addycyjne z kwasami. Tak np. pirydynowe atomy azotu mogą tworzyć sole z mocnymi kwasami. Do przykładowych odpowiednich kwasów tworzących sole należy kwas chlorowodorowy, siarkowy, fosforowy, octowy, cytrynowy, szczawiowy, malonowy, salicylowy, jabłkowy, fumarowy, bursztynowy, askorbinowy, maleinowy, metanosulfonowy oraz inne kwasy mineralne i karboksylowe znane specjalistom. Sole wytwarza się kontaktując postać wolnej zasady z wystarczającą ilością pożądanego kwasu uzyskując sól w zwykły sposób. Postać wolnej zasady można zregenerować działając na sól odpowiednim rozcieńczonym wodnym roztworem zasady takim jak rozcieńczony wodny roztwór NaOH, węglanu potasu, amoniaku lub wodorowęglanu sodu. Postaci wolnej zasady różnią się w pewnym stopniu od odpowiednich postaci soli pewnymi właściwościami fizycznymi, takimi jak rozpuszczalność w polarnych rozpuszczalnikach, z tym że sole kwasowe i zasadowe są poza tym z punktu widzenia wynalazku równoważne postaciom wolnej zasady.
Wszystkie takie sole uważane za sole farmaceutycznie dopuszczalne objęte zakresem wynalazku i wszystkie uważa się za równoważne z punktu widzenia wynalazku odpowiednim wolnym postaciom związków według wynalazku.
Związki według wynalazku wytwarzać można sposobami opisanymi poniżej.
Związek z przykładu uzyskuje się w stanie krystalicznym. Dla specjalistów zrozumiałe jest, że wytworzone związki w stanie bezpostaciowym można uzyskać w stanie krystalicznym krystalizując materiał bezpostaciowy z rozpuszczalnika lub mieszanin rozpuszczalników takich jak aceton, eter dietylowy, octan etylu, etanol, 2-propanol, eter tert-butylowy, woda itp, zgodnie ze znanymi procedurami.
Dla specjalistów zrozumiałe jest również, że mieszaninę racemiczną związku 7.0A wytworzyć można podanymi sposobami. Tak np. półprodukt z przykładu syntezy 6 zastosować można do wytwarzania związku 7.0A.
Przykład pomocniczy syntezy 1
185 597
Połączyć 10 g (60,5 mmola) pirydylooctanu etylu i 120 ml suchego CH2O2 w -20°C, dodać 10,45 g (60,5 mmola) MCPBA i mieszać w-20°C przez 1 godzinę, a następnie w 25°C przez 67 godzin. Dodać więcej 3,48 g (20,2 mmoli) MCPBA i mieszać w 25°C przez 24 godziny. Rozcieńczyć CH2Cl2 i nasyconym wodnym roztworem NaHCO3, a następnie wodą. Wysuszyć nad MgSO4, zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, 2% 5,5% (10% NH4OH w MeOH)/CH2Cl2) uzyskując 8,12 g produktu.
Widmo masowe: MH+ = 182,15
Etap B:
O-N \
CO2Et
O-N \
co2h
Połączyć 3,5 g (19,3 mmola) produktu z etapu A, 17,5 ml EtOH i 96,6 ml 10% NaOH (roztwór wodny) i ogrzewać mieszaninę w 67°C przez 2 godziny. Dodać 2 N HCl (roztwór wodny) do pH = 2,37 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Dodać 200 ml suchego EtOH, przesączyć przez celite© i przemyć placek filtracyjny suchym EtOH (2 x 50 ml). Zatężyć połączone przesącze pod próżnią uzyskując 2,43 g tytułowego związku.
Przykład pomocniczy syntezy 2 (CH3)3C—.
co2h
Tytułowy związek wytworzono sposobem ujawnionym w międzynarodowej publikacji PCT nr WO 95/10516.
Przykład pomocniczy syntezy 3
185 597
Etap A:
Połączyć 14,95 g (39 mmola) 8-chloro-11-(1-etoksy-karbonylo-4-piperydynylo)-11Hbenzo [5,6]cyklohepto[1,2-b]pirydyny i 150 ml CH2CI2, po czym dodać 13,07 g (42,9 mmola) (nBu)4NNO3 i schłodzić mieszaninę do 0°C. Powoli dodać (po kropli) roztwór 6,09 ml (42,9 mmola) TFAA w20 ml CH^Ch wciągu 1,5 godziny. Utrzymywać mieszaninę w0°C przez noc, po czym przemyć kolejno nasyconym wodnym roztworem NaHCO3, wodą i solanką. Wysuszyć roztwór organiczny nad Na2SO4, zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, gradient EtOAc/heksan) uzyskując 4,32 g i 1,90 g dwóch produktów, odpowiednio 3A(i) i 3A(ii).
Widmo masowe związku 3 A(i): MH+ = 428,2.
Widmo masowe związku 3A(ii): MH+ = 428,3.
Etap B:
Połączyć 22,0 g (51,4 mmola) produktu 3A(i) z etapu A, 150 ml 85% EtOH (roztwór wodny), 25,85 g (0,463 mola) proszku Fe i 2,42 g (21,8 mmola) CaCl2, i ogrzewać we wrzeniu przez noc. Dodać 12,4 g (0,222 mola) proszku Fe i 1,2 g (10,8 mmo la) CaCh i ogrzewać
185 597 we wrzeniu przez 2 godziny. Dodać kolejne 12,4 g (0,222 mola) proszku Fe i 1,2 g (10,8 mmola) CaCh i ogrzewać we wrzeniu jeszcze przez 2 godziny. Przesączyć gorącą mieszaninę przez celite©, przemyć celite® 50 ml gorącego EtOH i zatężyć przesącz pod próżnią uzyskując pozostałość. Dodać 100 ml bezwodnego EtOH, zatężyć uzyskując pozostałość i chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, MeOH/C^Ch gradient) uzyskując 16,47 g produktu. MH+ = 398.
Etap C:
I
CO2Et
Połączyć 16,47 g (41,4 mmola) produktu z etapu B, i 150 ml 48% HBr (roztwór wodny) i schłodzić do -3°C. Powoli dodać (po kropli) 18 ml bromu, po czym powoli dodać (po kropli) roztwór 8,55 g (0,124 mola) NaNO2 w 85 ml wody. Mieszać przez 45 minut w temperaturze od -3° do 0°C, po czym doprowadzić do pH = 10 dodając 50% NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować EtO-Ac, przemyć ekstrakty solanką i wysuszyć ekstrakty nad Na2SO4. Zatężyć uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, gradient EtOAc/heksan) uzyskując 10,6 g i 3,28 g dwóch produktów, odpowiednio 3C(i) i 3C(ii).
Widmo masowe związku 3C(i) : MH+ = 461,2.
Widmo masowe związku 3C(ii) : MH+ = 539.
185 597
Zhydrolizować produkt 3C(i) z etapu C rozpuszczając go w stężonym HCl i ogrzewając do około 100°C na 16 godzin. Schłodzić mieszaninę, po czym zobojętnić IM NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować CH2CI2, wysuszyć ekstrakty nad MgSO4, przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując tytułowy związek.
Widmo masowe: MH+ = 466,9.
Przykład pomocniczy syntezy 4 ™
Połączyć 25,86 g (55,9 mmola) estru etylowego kwasu 4 (8-chloro-3-bromo-5,6-dihydrollH-benzo[5,6]cyklohepta[l,2-b]pirydyn-ll-ylideno)-l-piperydyno-l-karboksylowego i 250 ml stężonego H2SO4 w -5°C, po czym dodać 4,8 g (56,4 mmola) NaNCb i mieszać przez 2 godziny. Wylać mieszaninę do 600 g lodu i zalkalizować stężonym NH4OH (roztwór wodny). Przesączyć mieszaninę, przemyć 300 ml wody, po czym wyekstrahować 500 ml CH2CI2. Przemyć ekstrakt 200 ml wody, wysuszyć nad MgSO4, po czym przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 10% EtOAC/CH2CI2) uzyskując 24,4 g (86% wydajności) produktu.
Temperatura topnienia - 165-167°C,
Widmo masowe: MH+ = 506 (Cl).
Analiza elementarna:
wyliczono - C, 52,13; H, 4,17; N, 8,29
185 597
Połączyć 20 g (40,5 mmola) produktu z etapu A i 200 ml stężonego H2SO4 w 20°C, po czym schłodzić mieszaninę do 0°C. Dodać 7,12 g (24,89 mmola) 1,3-dibromo-5,5dimetylohydantoiny do mieszaniny i mieszać przez 3 godziny w 20°C. Schłodzić do 0°C, dodać więcej, 1,0 g (3,5 mmola) dibromohydantoiny i mieszać w 20°C przez 2 godziny. Wylać mieszaninę do 400 g lodu, zalkalizować stężonym NH4OH (roztwór wodny) w 0°C i odsączyć uzyskaną substancję stałą. Przemyć osad 300 ml wody, zawiesić w 200 ml acetonu i przesączyć uzyskując 19,79 g (85,6% wydajności) produktu. Temperatura topnienia - 236-237°C,
Widmo masowe: MH+ = 584 (CI).
Analiza elementarna:
wyliczono - C, 45,1; H, 3,44; N, 7,17 znaleziono- C, 44,95 H, 3,57; N, 7,16.
Połączyć 25 g (447 mmola) wiórków Fe, 10 g (90 mmola) CaCl2 i zawiesinę 20 g (34,19 mmola) produktu z etapu B w 700 ml mieszaniny 90:10 EtOH/woda w 50°C. Ogrzewać mieszaninę we wrzeniu przez noc, przesączyć przez Celite® i przemyć placek filtracyjny 2 x 200 ml gorącego EtOH. Połączyć przesącz i ciecze z przemycia i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Wyekstrahować pozostałość 600 ml CH2Cl2, przemyć 300 ml wody i wysuszyć nad MgSO.4. Przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość, po czym chromatografować (żel krzemionkowy, 30% EtOAc/CH2Cl2) uzyskując 11,4 g (60% wydajności) produktu.
Temperatura topnienia - 211-212°C,
Widmo masowe:
MH+ = 554 (CI).
Analiza elementarna:
wyliczono - C, 47,55; H, 3,99; N, 7,56 znaleziono- C, 47,45; H, 4,31; N, 7,49.
Etap D:
185 597
Powoli dodać (porcjami) 20 g (35,9 mmola) produktu z etapu C do roztworu 8 g (116 mmoli) NaNO2 w 120 ml stężonego HCl (roztwór wodny) w -10°C. Mieszać uzyskaną mieszaninę w0°C przez 2 godziny, po czym powoli dodać (po kropli) 150 ml (1,44 mola) 50% H3PO2 w 0°C w ciągu 1 godziny. Mieszać w 0°C przez 3 godziny, po czym wylać do 600 g lodu i zalkalizować stężonym NH4OH (roztwór wodny). Wyekstrahować 2 x 300 ml CH2CI2, wysuszyć ekstrakty nad MgSO4, po czym przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 25% EtOAc/heksany) uzyskując 13,67 g (70% wydajności) produktu.
Temperatura topnienia-163 - 165°C,
Widmo masowe: MH+ = 539 (CI).
Analiza elementarna:
wyliczono- C, 48,97; znaleziono - C, 48,86;
H, 4,05; N, 5,22
H, 3,91; N,5,18.
Etap E:
Połączyć 6,8 g (12,59 mmola) produktu z etapu D i 100 ml stężonego HCl (roztwór wodny) i mieszać w 85°C przez noc. Schłodzić mieszaninę, wylać ją do 300 g lodu i zalkalizować stężonym NH4OH (roztwór wodny). Wyekstrahować 2 x 300 ml CH2O2, po czym wysuszyć ekstrakty nad MgSO4. Przesączyć, zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość, po czym chromatografować (żel krzemionkowy, 10% MeOH/EtOAc + 2% NH4OH (roztwór wodny)) uzyskując 5,4 g (92% wydajności) tytułowego związku.
Temperatura topnienia - 172-174°C,
Widmo masowe: MH+ = 467.
Analiza elementarna:
wyliczono - C, 48,69; H, 3,65; N, 5,99 znaleziono - C, 48,83; H, 3,80; N, 5,197.
Przykład pomocniczy syntezy 5
// •N
185 597
Zhydrolizować 2,42 g estru etylowego kwasu 4-(8-chloro-3-bromo-5,6-dihydro-l 1Hbenzo[5,6]cyklohepta[ 1,4]-bipisydyny-ll-lideno)-l-pipery8yno-1 -k3rboksylowego zasadniczo be naki si6n jak w przyklradia a^^^^i1e^] e, otap Diuzyskutkr -,39 g )ó6% wydaj noscin proWuktu Mm* = 389.
Etap B:
Połączyć 1 g (2,48 mmola) produktu z etapu A i 25 ml suchego toluenu, dodać 2,5 ml 1M DIBAL w toluenie i ogrzewać mieszaninę we wrzeniu. Po 0,5 godzinie dodać kolejne 2,5 ml IM DIBAL w toluenie i ogrzewać we wrzeniu przez 1 godzinę. (Reakcję śledzi się metodą TLC stosując 50% MeOH/CHlCll B NH4OH (roztwór wodny). Schłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej, dodać 50 ml 1N HCl (roztwór wodny) i mieszać przez 5 minut. Dodać 100 ml 1N NaOH (roztwór wodny), po czym wyekstrahować EtOAc (3 x 150 ml). Wysuszyć ekstrakty nad MgSO4, przesączyć i zatężyć pod próżnią, uzyskując 1,1 g tytułowego związku. MH+ =391.
Przykład pomocniczy syntezy 6
[racemat oraz enancjomer- (+)- i (-)]
185 597
Połączyć 16,6 g (0,03 mola) produktu z przykładu syntezy 4, etap D, z roztworem 3:1 CH3CN : woda (212,65 ml CH3CN i 70,8 ml wody) i mieszać uzyskaną zawiesinę przez noc w temperaturze pokojowej. Dodać 32,833 g (0,153 mola) Na2O4, a następnie 0,31 g (2,30 mmola) RuO2 i mieszać w temperaturze pokojowej (dodawaniu RuO2 towarzyszy reakcja egzotermiczna i temperatura wzrasta z 20° do 30°C). Mieszać mieszaninę przez 1,3 godziny (temperatura powróciła 25°C po około 30 minutach), po czym przesączyć w celu usunięcia osadu i przemyć osad CH2CL Zatężyć przesącz pod próżnią uzyskując pozostałość i rozpuścić pozostałość w CH2CL Przesączyć w celu usunięcia nierozpuszczalnego osadu i przemyć osad CH2O2. Przemyć przesącz wodą, zatężyć do objętości około 200 ml i przemyć bielidłem, po czym wodą. Wyekstrahować 6 N HCl (roztwór wodny). Schłodzić wodny ekstrakt do 0°C i powoli dodać 50% NaOH (roztwór wodny) do pH = 4 utrzymując temperaturę <30°C. Wyekstrahować dwukrotnie CH2CI2, wysuszyć nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Zawiesić pozostałość w 20 ml EtOH i schłodzić do 0°C. Odsączyć uzyskaną substancję stalą i wysuszyć osad pod próżnią uzyskując 7,95 g produktu.
Ή HMR (CDCh, 200 MHz): 8,7 (s, 1H); 7,85 (m, 6H); 7,5 (d, 2H); 3,45 (m, 2H); 3,15 (m, 2H).
Etap B:
Połączyć 21,58 g (53,75 mmola) produktu z etapu a i 500 ml bezwodnej mieszaniny 1:1 EtOH i toluenu, dodać 1,43 g (37,8 mmola) NaBHt i ogrzewać mieszaninę we wrzeniu przez 10 minut. Schłodzić mieszaninę do 0°C, dodać 100 ml wody, po czym doprowadzić do pH- 45 1M HCl (roztwór wodny) utrzymując temperaturę <10°C. Dodać 250 ml EtOAc i rozdzielić warstwy. Przemyć warstwę organiczną solanką (3 x 50 ml) po czym wysuszyć nad Na2SO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość (24,01 g) i chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 30% heksan/CH2Cl2) uzyskując produkt. Zanieczyszczone frakcje oczyszczano przez ponowną chromatografię, łącznie uzyskano 18,57 g produktu.
*H NMR (DMSO-d6, 400 MHzz: 8,5 (s, 1H); 7,9 (s, 1H); 7,5 (dd, 2H); 6,2 (s, 1H); 6,1 (s, 1H); 3,5 (m, 1H); 3,4 (m, 1H); 3,2 (m, 2H).
185 597
Połączyć 18,57 g (46,02 mmola) produktu z etapu B i 500 ml CHCty, po czym dodać 6,70 ml (91,2 mmola) sOCl2 i mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez 4 godziny. Dodać roztwór 35,6 g (0,413 mola) piperazyny w 800 ml THF w ciągu 5 minut i mieszać mieszaninę przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Ogrzewać mieszaninę we wrzeniu przez noc, po czym schłodzić do temperatury pokojowej i rozcieńczyć mieszaninę 1 litrem CH2O2. Przemyć wodą (5 x 200 ml) i wyekstrahować wodę z płukania CHCf (3 x 100 ml). Połączyć wszystkie roztwory organiczne, przemyć solanką (3 x 200 ml) i wysuszyć nad MgSO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, gradient 5%, 7,5%, 10% Me-OH/CILCF + NH4 OH) uzyskując 18,49 g tytułowego związku w postaci mieszaniny racemicznej.
Etap D - Rozdzielanie enancjomerów;
Tytułowy związek racemiczny z etapu C rozdzielono metodą preparatywnej chiralnej chromatografii (Chiralpack AD, kolumna 5 cm x 50 cm, szybkość przepływu 100 ml/minut, 20% i-PrOH/heksan + 0,2% dietyloamina), uzyskując 9,14 g (+)-enancjomeru i 9,30 g (-)enancjomeru.
Dane fizykochemiczne (+)-enancjomeru: temperatura topnienia - 74,5-77, 5°C;
Widmo masowe MI-Γ = 471,9; [a]D 25 +97,4° (8,48 mg/2 ml MeOH).
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomeru: temperatura topnienia - 82,9-84,5°C;
Widmo masowe MH+ = 471,8; [a^5 -97,4° (8,32 mg/2 ml MeOH).
185 597
Połączyć 15 g (38,5 mmola) estru etylowego kwasu 4-(8-chloro-3-bromo-5,6-dihydro11 H-benzo[5,6]cyklohepta[1,2-b]pirydyi-1-ylideno)-1-piperydyno-1-karboksylowego i 150 ml stężonego H2SO4 w-5°C, po czym dodać 3,89 g (38,5 mmola) KNO3 i mieszać przez 4 godziny. Wylać mieszaninę do 3 litrów lodu i zalkalizować 50% NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować CH2Cl2, wysuszyć nad MgSO4, po czym przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Rekrystalizować pozostałość z acetonu uzyskując 6,69 g produktu.
’HNMR (CDCla, 200 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,75 (s, 1H); 7,6 (s, 1H); 7,35 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,8 (m, 2H); 3,5-3,1 (m, 4H); 3,0-2,8 (m, 2H); 2,6-2,2 (m, 4H); 1,25 (t, 3H).
MH+ = 506.
Etap B:
Połączyć 6,69 g (13,1 mmola) produktu z etapu A i 100 ml 85% EtOH/woda, po czym dodać 0,66 g (5,9 mmola) CaCE i 6,56 g (117,9 mmola) Fe i ogrzewać mieszaninę we wrzeniu przez noc. Przesączyć gorącą mieszaninę reakcyjną przez Celite® i przemyć placek filtracyjny gorącym EtOH. Zatężyć przesącz pod próżnią uzyskując 7,72 g produktu.
Widmo masowe: MH = 476,0.
185 597
Etap C:
Połączyć 7,70 g produktu z etapu B i 35 ml HOAc, po czym dodać 45 ml roztworu Br2 w HOAc i mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez noc. Dodać 300 ml 1N NaOH (roztwór wodny), po czym 75 ml 50% NaOH (roztwór wodny) i wyekstrahować EtOAc. Wysuszyć ekstrakt nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 20% - 30% EtOAc/heksan) uzyskując 3,47 g produktu (wraz z kolejnym 1,28 g częściowo oczyszczonego produktu).
Widmo masowe: MH+ = 554.
Ή NMR (CDCla, 300 MHz): 8,5 (s, 1H); 7,5 (s, 1H); 7,15 (s, 1H); 4,5 (s, 2H); 4,15 (m, 3H); (m, 1H); 3,8 (br s, 2H); 3,4-3,1 (m, 4H); 9-2,75 (m, 1H); 2,7-2,5 (m, 2H); 2,4-2,2 (m, 2H); 1,25 (m, 3H).
Etap D:
Połączyć 0,557 g (5,4 mmola) azotynu t-butylu i 3 ml DMF i ogrzewać mieszaninę w 6070°C. Powoli dodać (po kropli) mieszaninę 2,00 g (3,6 mmola) produktu z etapu C i 4 ml DMP, po czym schłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej. Dodać kolejne 0,64 ml azotynu t-butylu w 40°C i ponownie ogrzewać mieszaninę do 60-70°C przez 0,5 godziny. Schłodzić do temperatury pokojowej i wylać mieszaninę do 150 ml wody. Wyekstrahować CH2CI2, wysuszyć ekstrakt nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 10%-20% EtOAc/heksan) uzyskując 0,74 g produktu.
Widmo masowe: MH+ = 539,0.
*H NMR (CDCl·,, 200 MHz): 8,52 (s, 1H); 7,5 (d, 2H); 7,2 (s, 1H); 4,15 (q, 2H); 3,93,7 (m, 2H); 3,5-3,1 (m, 4H); 3,0-2,5 (m, 2H); 2,4-2,2 (m, 2H); 2,1-1,9 (m, 2H); 1,261, H).
185 597
Połączyć 0,70 g (1,4 mmola) produktu z etapu D i 8 ml stężonego HCl (roztwór wodny) i ogrzewaćmiesz7ninęwe mmoemu prdez noc. Dodać 3 0 ml IN NaOH (roztwór wodny), po czym 5 nić 50% NaOH (romrwór wpdny) i wyD^i^tadi3wać CN2CI2. Wyroz^c ewsorakt upo MgSO4 i 58ϊ50%% pcd próżnrcnzysknrąc 059 w lutow^o zwitku.
Widmę masowa: ΜΗ* = ztU.
TemseraSa-atnpnienia - 123,9-124,2°C.
PrzykłarlsorpoceιiczH oonrrzy U
[racemat i enancjomery ( + ) - i (-)]
Przygotować roztwór 8,1 g tytułowego związku z przykładu syntezy 7 w toluenie i dodać 17,3 ml IM roztworu DIBAL w toluenie. Ogrzewać mieszaninę we wrzeniu i powoli dodać (po kropli) kolejne 21 ml 1M roztworu DIBAL/toluen w ciągu 40 minut. Schłodzić mieszaninę reakcyjną do około 0°C i dodać 700 ml 1M HCl (roztwór wodny). Oddzielić i odrzucić fazę organiczną. Przemyć fazę wodną CHCŁ, odrzucić ekstrakt, po czym zanalizować fazę wodną dodając 50% NaOH (roztwór wodno). Wyekstrahować CH2O2, wysuszyć ekstrakt nad MgSO4 i zatężgć pod próżnią uzyskując 7,30 g tytułowego związku, będącego mieszaniną racemiczną enancjomerów.
MH+ = 469.
185 597
Etap B - Rozdzielanie enancjomerów':
Tytułowy racemiczny związek z etapu a rozdziela się metodą preparatywnej chiralnej chromatografii (Chiralpack AD, kolumna 5 cm x 50 cm, stosując 20% iPrOH/heksan + 0,2% dietyloaminy), uzyskując (+)-enancjomer i (-)-enancjomer tytułowego związku.
Dane fizykochemiczne (+)-enancjomeru: temperatura topnienia - 148,8°C,
Widmo masowe MH+ = 469; [α]ρ25 +65,6° (12,93 mg/2 ml MeOH).
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomer: temperatura topnienia - 112°C,
Widmo masowe MH+ = 469; [α]ρ25 -65,2° (3,65 mg/2 ml MeOH).
[racemat i enancjomery ( + ) - i (-)]
185 597
Połączyć 40,0 g (0,124 mola) wyjściowego ketonu i 200 ml H2SO4 i schłodzić do 0°C. Powoli dodać 13,78 g (0,136 mola) KNO3 w ciągu 1,5 godziny, po czym ogrzać do temperatury pokojowej i mieszać przez noc. Mieszaninę poddać obróbce zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie syntezy 4, etap A. Chromatografować (żel krzemionkowy, 20%, 30%, 40%, 50% EtO-Ac/heksan, po czym 100% EtOAc) uzyskując 28 g produktu 9-nitro, wraz z niewielką ilością produktu 7-nitro i 19 g mieszaniny związków 7-nitro i 9-nitro.
MH+ (9-nitro) = 367.
Poddać reakcji 28 g (76,2 mmola) produktu 9-nitro z etapu A, 400 ml 85% EtOH/woda, 3,8 g (34,3 mmola) CaCf i 38,28 g (0,685 mola) Fe zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie syntezy 4, etap C, uzyskując 24 g produktu. MH+ = 337.
Etap C:
Połączyć 13 g (38,5 mmola) produktu z etapu B, 140 ml HOAc i powoli dodać roztwór 2,95 ml (57,8 mmola) Br2 w 10 ml HOAc w ciągu 20 minut. Mieszać mieszaninę reakcyjną w temperaturze pokojowej, po czym zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Dodać CH2Cl2 i wody, po czym doprowadzić do pH = 8-9 50% NaOH (roztwór wodny). Przemyć fazę organiczną wodą, po czym solanką i wysuszyć nad Na2SO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując 11,3 g produktu.
‘H NMR (200 MHz, CDCl,) : 8,73 (d, 1H); 7,74 (d, 1H); 7,14 (s, 1H); 4,63 (s, 2H); 3,23-3,15 (m, 2H); i 3,07-2,98 (m, 2H).
Etap D:
Schłodzić 100 ml stężonego HCl (roztwór wodny) do 0°C, po czym dodać 5,61 g (81,4 mmola) NaNO2 i mieszać przez 10 minut. Powoli dodać (porcjami) 11,3 g (27,1 mmola) produktu z etapu C i mieszać mieszaninę w 0-3°C przez 2,25 godziny. Powoli dodać (po kropli) 180 ml 50% H3PO4 (roztwór wodny) i pozostawić mieszaninę w 0°C przez noc. Powoli dodać
185 597 (po kropli) 150 ml 50% NaOH wciągu 30 minut, do pH = 9, po czym wyekstrahować
CH2CI2. Przemyć ekstrakt wodą, po czym solanką i wysuszyć nad Na2SOą. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, 2% EtOAc/CHhCh) uzyskując 8,6 g produktu. MH+ = 399,9.
*H NMR (200 MHZ, CDCh): 8,75 (d, 1H); 7,77 (d, 1H); 7,56 (d, 1H); 7,21 (d, 1H); i 3,3-3,0 (m, 4H) .
Etap E:
Połączyć 8,6 g (21,4 mmola) produktu z etapu D i 300 ml MeOH i schłodzić do 0-2°C. Dodać 1,21 g (32,1 mmola) NaBR.i i mieszać mieszaninę w -0°C przez 1 godzinę. Dodać kolejne 0,121 g (3,21 mmola) NaBH4, mieszać przez 2 godziny w 0°C, po czym odstawić na noc w 0°C. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość po czym wymieszać pozostałość z CH2G2 i wodą. Oddzielić fazę organiczną i zatężyć pod próżnią (50°C) uzyskując 8,2 g produktu.
Ή NMR (200 MHZ, CDCh) : 8,44 (d, 1H); 7,63 (d, 1H); 7,47 (d, 1H); 7,17 (d, 1H); 6.56 (d, 1H); 4,17-4,0 (m, 1H); 7,39 (d, 1H); 3,46-3,3 (m, 1H); 3,05-2,74 (m, 2H).
Etap F:
Połączyć 8,2 g (20,3 mmola) produktu z etapu E i 160 ml CH2CI2, schłodzić do 0°C, po czym powoli dodać (po kropli) 14,8 ml (203 mmola) SOCh wciągu 30 minut. Ogrzać mieszaninę do temperatury pokojowej i mieszać przez 4,5 godziny, po czym zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość, dodać CH2G2 i przemyć 1N NaOH (roztwór wodny), po czym solanką i wysuszyć nad Na2SO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość, po czym dodać suchy THF i 8,7 g (101 mmola) piperazyny i mieszać w temperaturze pokojowej przez noc. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość, dodać CH2G2 i przemyć 0,25 N NaOH (roztwór wodny), wodą, a następnie solanką. Wysuszyć nad Na2SO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując 9,46 g surowego produktu. Chromatografować (żel krzemionkowy, 5% MeOH/ClhCh + NH3) uzyskując 3,59 g tytułowego związku, jako racemat.
*H NMR (CDCl3, 200 MHz): 8,43 (d, 1H); 7,55 (d, 1H); 7,45 (d, 1H); 7,11 (d, 1H); 5,31 (s, 1H); 4,864,65 (m, 1H); 3,57-3,40 (m, 1H); 2,98-2,55 (m, 6H); 2,45-2,20 (m, 5H).
MH+ = 470.
185 597
Etap G - Rozdzielanie enancjomerów:
Tytułowy racemiczny związek z etapu F (5,7 g) chromatografuje się jak w przykładzie syntezy 6, etap D, stosując 30% iPrOH/heksan + 0,2% dietyloaminę, uzyskując 2,88 g enancjomeru R-(+) i 2,77 g enancjomeru S-(-) tytułowego związku.
Dane fizykochemiczne R-(+)-enancjomeru:
Widmo masowe MH+ = 470; [a] u +12,1° (10,9 mg/2 ml MeOH).
Dane fizykochemiczne S-(-)-enanciomeru:
Widmo masowe MH+ = 470; [a]D 25 -13,2° (11,51 mg/2 ml MeOH).
Przykład pomocniczy syntezy 10
[racemat i enancjomery (+)- i (-)]
Połączyć 13 g (33,3 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 4, etap D i 300 ml toluenu w 20°C, po czym dodać 32,5 ml (32,5 mmola) 1M roztworu DIBAL w toluenie. Ogrzewać
185 597 mieszaninę we wrzeniu przez 1 godzinę, schłodzić do 20°C, dodać kolejne 32,5 ml 1M roztworu DIBAL i ogrzewać we wrzeniu przez 1 godzinę. Schłodzić mieszaninę do 20°C i wylać ją do mieszaniny 400 g lodu, 500 ml EtOAc i 300 ml 10% NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować warstwę wodną CH2O2 (3 x 200 ml), w-susz-ć warstwy organiczne nad MgSO4, po czym zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować (żel krzemionkowa, 12% MeOH/CHlCll B 4% NH4OH) uzyskując 10,4 g tytułowego związku jako racemat.
Widmo masowe: MH+ = 469 (FAB).
Częściowy *H NMR (CDCh, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,06 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Etap B - Rozdzielanie enancjomerów;
Br
T-tułow- racemiczny związek z etapu a rozdziela się metodą preparatywnej chiralnej chromatografii (Chiralpack AD, kolumna 5 cm x 50 cm, stosując 5% iPrOH/heksan B 0,2% diet-loamin-), uzyskując (B)-enancjomer i (-)-enancjomer tytułowego związku.
Dane fizykochemiczne (B)-enancjkmeru:
Widmo masowe MH+ = 469 (FABS); [α]^ = +43,5° (c=0,402, EtOH); częściowy
1h NMR (CDCI3, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomer:
Widmo masowe MH+ = 469 (FaB); [a]d25 = - 41,8° (c = 0,328 EtOH); częściowy *HNMR (CDCls, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,57 (s, 1H); 7,27 (d, 1H); 7,05 (d, 1H); 3,95 (d, 1H).
[racemat i enancjomer- R-(b)- i S-(-)]
185 597
Potraktować ester etylowy kwasu 4-(8-chloro-3-bromo-5,6-dihydro-11 H-benzo[5,6] cyklohepta[ 1,2-b]pirydyn-11 -ylideno)-1 -piperydyno-1 -karboksylowego zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie syntezy 6, etapy A-D, uzyskując jako produkt z etapu C, racemiczny tytułowy związek i jako produkty z etapu D R-(+)-enancjomer i S-(-)-enancjomer tytułowego związku.
Dane fizykochemiczne R-(+)-enancjomeru: 13C NMR (CDCh): 155,8 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,4 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,6 (CH); 119,3 (C); 79,1 (CH); 52,3 (CH2); 52,3 (CH2); 45,6 (CH2); 45,6 (CH2); 30,0 (CH2); 29,8 (CH2). [α]ο 25 = +25,8° (8,46 mg/2 ml 15 MeOH).
Dane fizykochemiczne S-(-)-enancjomeru: 13C NMR (CDCh): 155,9 (C); 146,4 (CH); 140,5 (CH); 140,2 (C); 136,2 (C); 135,3 (C); 133,3 (C); 132,0 (CH); 129,9 (CH); 125,5 (CH); 119,2 (C); 79,1 (CH); 52,5 (CH2); 52,5 (CH2); 45,7 (CH2); 45,7 20 (CH2); 30,0 (CH2); 29,8 (CH2). [α]π25- -27,9° (8,90 mg/2 ml MeOH).
Przykład 1
Rozpuścić 1,160 g (2,98 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 3 w 20 ml DMF, mieszać w temperaturze pokojowej i dodać 0,3914 g (3,87 mmola) 4-metylomorfoliny, 0,7418 g (3,87 mmola) DEC, 0,5229 g (3,87 mmola) HOBT i 0,8795 g (3,87 mmola) kwasu 1-N-t-butoksykarbonylopiperydynylo-4-octowego. Mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez 2 dni, po czym zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i wymieszać pozostałość z CH2Cl2 i wodą. Przemyć fazę organiczną kolejno nasyconym wodnym roztworem NaHCOs, 10%% NaHPO4 (roztwór wodny) i solanką. Wysuszyć fazę organiczną nad MgSO4, przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 2% MeOH/CHCL + NH3) uzyskując 1,72 g produktu.
Temperatura topnienia = 94,0-94,5°C,
Widmo masowe: MH+ = 614.
Analiza elementarna:
wyliczono- C, 60,54; H, 6,06 ; N, 6,83 znaleziono- C, 59,93; H, 6,62 ; N, 7,44.
185 597
Połączyć 1,67 g (2,7 mmola) produktu z etapu A i 20 ml CH2G2 i mieszać w 0°C. Dodać 20 ml TFA, mieszać mieszaninę przez 2 godziny, po czym zalkalizować mieszaninę 1N NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować CH2O, wysuszyć fazę organiczną nad MgSO4, przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując 1,16 g produktu.
Temperatura topnienia - 140,2-140,8°C,
Widmo masowe: MH+ = 514.
Połączyć 0,50 g produktu z etapu B, 20 ml CH2G2 i 4,5 równoważników (CH3)SiNCO i mieszać w temperaturze pokojowej przez 3 godziny. Wyekstrahować mieszaninę nasyconym wodnym roztworem NaHCO3 i wysuszyć fazę organiczną nad MgSO4. Przesączyć i zatężyć pod próżnią uzyskując 0,8 g surowego produktu. Chromatografować surowy produkt (żel krzemionkowy, 5% Me-OH/CH2Cl2 + NH3) uzyskując 0,26 g produktu.
Temperatura topnienia - 170,2-170,5°C,
Widmo masowe: MH+ = 557.
/związek 5.0/
185 597
Połączyć 0,5 g (1,06 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 4, 0,4 g (2,61 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 1,5 ml suchego DMF i 0,5 ml (4,53 mmola) 4-metylomorfoliny wO°C, po czym dodać 0,6 g (3,12 mmola) DEC i 0,4 g (2,96 mmola) HOBT i mieszać mieszaninę przez noc w 20°C. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i wyekstrahować pozostałość CI-ECE (2 x 50 ml). Przemyć ekstrakty 25 ml wody, wysuszyć nad MgSO4, po czym zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, 10% Me-OH/EtOAc + 2% NH4OH (roztwór wodny)) uzyskując 0,6 g (93,7% wydajności) tytułowego związku.
Widmo masowe: MH+ = 602 (FABS); częściowy *H NMR (CDCla, 300 MHz) : 8,48 (s, 1H), 8,16 (d, 2H); 7,61 (s, 1H); 7,29 (m, 1H); 7,18 (d, 2H); 7,04 (d, 1H); 3,71 (s, 2H).
Analiza elementarna: wyliczono- C, 48,81; H, 4,10; N, 6,57 znaleziono- C, 49,10; H, 3,79; N, 6,74.
Przykład 3
Rozpuścić 5,9 g (9,78 mmola) tytułowego związku z przykładu 2 w 300 ml 1:5 CH2O2 /EtOAc w 0°C. Powoli dodać (po kropli) 3 ml 4N HCl (roztwór wodny) i mieszać mieszaninę w 0°C przez 5 minut. Dodać 200 ml Et2O, odsączyć powstały osad i przemyć osad 50 ml Et20. Wysuszyć osad w20°C/0,2 mm Hg uzyskując 5,9 g (96% wydajności) tytułowego związku.
Widmo masowe: MH+ = 602 (FAB).
Częściowy 'H NMR (DMSO-dft, 300 MHz): 8 8,66 (d, 2H); 8,51 (s, 1H); 7,95 (s, 1H); 7,67 (d, 2H); 7,47 (m, 1H); 7,15 (m, 1H); 3,99 (s, 2H).
Analiza elementarna:
wyliczono - C, 48,77; H, 3,62; N, 66>6 znaleziono - C, 48,34; H, 3,95; N, 6,84.
Przykład 4
185 597
Połączyć 0,501 g (1,28 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 5 i 20 ml suchego DMF, po czym dodać 0,405 g (1,664 mmola) kwasu 1-N-t-butoksykarbonylopiperydynylo-4-octowego, 0,319 g (1,664 mmola) DEC, 0,225 g (1,664 mmola) HOBT i 0,168 g (1,664 mmola) 4-metylomorfoliny i mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez noc. Zatężyć mieszaninę pod próżnią uzyskując pozostałość, po czym wymieszać pozostałość z 150 ml CH2CE i 150 ml nasyconego NaHCO3 (roztwór wodny). Wyekstrahować fazę wodną kolejnymi 150 ml CH2G2. Wysuszyć fazę organiczną nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 500 ml heksan, 1 litr 1/ MeOH/CH2Cl2 + 0,1% NH4OH (roztwór wodny), po czym 1 litr 2% MeOH/CH2G + 0,1% NH4OH (roztwór wodny)) uzyskując 0,575 g produktu.
Temperatura topnienia - 115-125°C;
Widmo masowe: MH+ = 616.
Połączyć 0,555 g (0,9 mmola) produktu z etapu A i 15 ml CH2G2 i schłodzić mieszaninę do 0°C. Dodać 15 ml TFA i mieszać w0°C przez 2 godziny. Zatężyć pod próżnią w 4045°C uzyskując pozostałość, po czym wymieszać pozostałość z 150 ml CH2G2 i 100 ml nasyconego NaHCO3 (roztwór wodny). Wyekstrahować warstwę wodną 100 ml CH2CE, połączyć ekstrakty i wysuszyć nad MgSO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując 0,47 g produktu.
Temperatura topnienia - 140-150°C;
Widmo masowe: MH+ = 516.
185 597
Połączyć 0,449 g (0,87 mmola) produktu z etapu B, 20 ml CH2CI2 i 0,501 g (0,59 mmola) (CH3)3 SiNCO i mieszać w temperaturze pokojowej przez noc. Dodać 50-75 ml nasyconego NaHCO3 (roztwór wodny) i mieszać przez 0,5 godziny. Rozcieńczyć CH2G2, rozdzielić warstwy i wyekstrahować warstwę wodną 2 x 100 ml CH2G2. Wysuszyć połączone ekstrakty CH2Ó2 nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość. Chromatografować pozostałość (żel krzemionkowy, 500 ml CH2G2; 1 litr 1% Me-OH/Ch2Cl2 + 0,1% NH4OH; 1 litr 2% MeOH/CH2Cl2 + 0,2% NH4OH; po czym 3% MeOH/CłFCh + 0,3% NH4OH) uzyskując 0,33 g tytułowego związku.
Temperatura topnienia - 145-155°C;
Widmo masowe: MH+ = 559.
/związek 22.0/ /związek 53.0 ma stereochemię R/
Połączyć 3,0 g (6,36 mmola) (-)-enancjomeru tytułowego związku z przykładu syntezy 6, etap D i 70 ml suchego DMF. Dodać 3,84 ml (34,94 mmola) N-metylomorfoliny, 3,28 g (17,11 mmola) DEC, 2,23 g (16,52 mmola) HoBt i 2,09 (13,55 mmola) N-tlenku kwasu 4-pirydylooctowego z przykładu syntezy 1 i mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez noc. Zatężyć pod próżnią w celu usunięcia DMF, dodać 100 ml nasyconego NaHCO3 (roztwór wodny) i 10 ml CH2G2 i mieszać przez 15 minut. Wyekstrahować mieszaninę CH2G2 (2 x 500 ml), wysuszyć ekstrakty nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość.
Chromatografować pozostałość (500 g z odwróceniem faz, krzemionka C18, gradient 75%, 80%, po czym 85% MeOH/woda + 0,1% HOAc). Zatężyć pożądane frakcje pod próżnią w celu usunięcia MeOH i dodać 50 ml 1M NaOH (roztwór wodny). Mieszać przez 15 minut,
185 597 po czym wyekstrahować CH2CI2 (2 x 500 ml). Wysuszyć ekstrakt nad MgSCh i zatężyć pod próżnią uzyskując 3,4 g tytułowego związku.
Temperatura topnienia - 148,9-150,5°C; [a ]D 25 = -56,37° (9,4 mg/2 ml MeOH);
Widmo masowe MH+ = 605.
Tytułowy związek z przykładu 5 można także wydzielić w postaci soli HCl przez obróbkę roztworu produktu w HCl i CH2CI2 w temperaturze pokojowej, a następnie zatężanie pod próżnią uzyskując sól HCl. [a]o25 -31,9° (4,80 mg/2 ml MeOH + 1 ml wody).
Stosując (+)-enancjomer produktu z przykładu syntezy 6 i postępując zasadniczo w taki sam sposób jak powyżej w przykładzie przykład 5, otrzymano analogiczny (+)-enancjomer (przyldad 5 A), czyli enancjomer tytułowego związku z przykładu 5.
Temperatura topnienia - 149,0-150,5°C;
Widmo masowe: MH+ = 605; [a]o = +67,1° (7,0 mg/2 ml MeOH).
Tytułowy związek z przykładu 5A można także wydzielić w postaci soli HCl, jak to opisano powyżej w przykładzie 5.
Temperatura topnienia - 152,9°C (dec.); [a]D 25 = +41,7° (2 ml MeOH + 1 ml wody).
Stosując racemiczny tytułowy związek z przykładu syntezy 6, etap C i postępując zasadniczo w sposób opisany powyżej w przykładzie 5, otrzymano racemat (przykład 5B związek 7.0/).
Temperatura topnienia = 84,3-85,6°C;
Widmo masowe: MH+ = 607.
Przykład 6
(-)-enancjomer
Połączyć 3,21 g (6,80 mmola) (-)-enancjomeru z przykładu syntezy 6 i 150 ml bezwodnego DMF. Dodać 2,15 g (8,8 mmola) kwasu l-N-t-butoksykarbonyłopiperydynylo-4octowego, 1,69 g (8,8 mmola) DEC, 1,19 g (8,8 mmola) HOBT i 0,97 ml (8,8 mmola) Nmetylomorfoliny i mieszać mieszaninę w temperaturze pokojowej przez noc. Zatężyć pod próżnią w celu usunięcia DMF i dodać 50 ml nasyconego NaHCO3 (roztwór wodny). Wyeks38
185 597 trahować CHCh (2 x 250 ml), przemyć ekstrakty 50 ml solanki i wysuszyć nad MgSO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, 2% MeOH/CH2Cl2 +10% NH4OH) uzyskując 4,75 g produktu.
Temperatura topnienia = 75,7-78,5°C;
Widmo masowe: MH+ = 695; [a]D - -5,5° (6,6 mg/2 ml MeOH).
Etap B:
Połączyć 4,70 g (6,74 mmola) produktu z etapu a i 30 ml MeOH, po czym dodać 50 ml 10% HSO^dioksan w 10 ml porcjach w ciągu 1 godziny. Wylać mieszaninę do 50 ml wody i dodać 15 ml 50% NaOH (roztwór wodny) do pH = 10-11. Przesączyć w celu usunięcia wytrąconego osadu i wyekstrahować przesącz CH2Cl2 (2 x 250 ml). Zatężyć warstwę wodną pod próżnią w celu usunięcia MeOH i wyekstrahować ponownie 250 ml CH2CI2. Wysuszyć połączone ekstrakty nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując produkt.
Temperatura topnienia - 128,1-131,5°C;
Widmo masowe:
MH+ = 595; [a]D 25 - -6,02° (9,3 mg/2 ml MeOH).
Etap C:
Połączyć 3,64 g (5,58 mmola) produktu z etapu B i 30 ml CH2C12, po czym dodać 6,29 ml (44,64 mmola) (CH3)SiNCO i mieszać mieszaninę przez 2 dni w temperaturze pokojowej. Dodać 25 ml NaHCO3 (roztwór wodny), po czym wyekstrahować CH2CI2 (2 x 250 ml). Przemyć ekstrakty 25 ml solanki i wysuszyć nad MgSO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, gradient 2,5%, 5,0%, po czym 7,5% MeOH/CH2CI2 + 10% NH4OH) uzyskując tytułowy związek.
Temperatura topnienia - 150,5-153,0°C;
Widmo masowe: MH+ = 638; [α]ϋ - -61,4° (8,18 mg/2 ml MeOH).
185 597
Przykład 7
/związek 9.0/
Poddać reakcji tytułowy związek z przykładu syntezy 7 i tytułowy związek z przykładu syntezy 1 zasadniczo w taki sam upouób jak w przykładzie 2, uzyskując 0,25 g tytułowego związku, będącego mieszaniną racemiczną. atropoicrmórów.
Widmo masowe: MH+ = 602.
Temperatura topnienia = 167,2-167,8°C.
Sól HCl tytułowego związku z przykładu 7 wytwarza się mieszając go przez 1 godzinę, z HCl/CH2Cl2, po czym zatęża uię mieszaninę pod próżnią uzyskując sól.
Przykłady 7Ai7B
/związek 29.0/ /związek 58.0 o konfiguracji R/
Tytułowy związek z przykładu 7 jeut pacemiczoą mieszaniną atpopoizomópów. Atropoizomery te rozdziela się metodą.preoaratynoej chromatografii (HPLC), stosując kolumnę Chiralpack AD (5 cm x 50 cm) i 40% i-PrOH/heksan + 0,2% dietyloaming jako fazę ruchomą uzyskując enancjomerg (+) i (-), odpowiednio przykłady 7B i 7A.
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomere, przykład 7A: temperatura topnienia - 114,2114,8°C; - -154,6° (8,73 mg/2 ml, MeOH).
Dane fizgkochómicznó (+)-enancjomer, przykład 7B: temperatura topnienia - 112,6113,5°C; [α^2 ’ = +159,7° (10,33 mg/2 ml, MeOH).
185 597
Przykład 8
Poddać reakcji 6,0 g (12,8 mmola) tytułowego związku z przykładu syntezy 7 i 3,78 g (16,6 mmola) kwasu 1-N-a-butoks-kaabon-lo=i=ea-danylo-4-octowego zasadniczo w taki sam sppsób jak w przykładzie 6, etap A, uzyskując 8,52 g produktu.
Widmo masowe: MH+ = 692 (PAB). Ή NMR (CDCla, 200 MHz): 8,5 (d, 1H); 7,5 (d, 2H); 7,2 (d, 1H); 4,15-3,9 (m, 3H); 3,8-3,6 (m, 1H); 3,5-3,15 (m, 3H); 2,9 (d, 2H); 2,8-2,5 (m, 4H); 2,4-1,8 (m, 6H); 1,8-1,6 (brd, 2H); 1,4 (s, 9H); 1,251,0 (m, 2H).
Etap B:
Połączyć 8,50 g produktu z etapu A i 60 ml CH2Cl2, po czym schłodzić do 0°C i dodać 55 ml TFA. Mieszać mieszaninę przez 3 godziny w 0°C, po czym dodać 500 ml 1N NaOH (roztwór wodny) a następnie 30 ml 50% NaOH (roztwór wodny). Wyekstrahować CH2CI2, wysuszyć nad MgSO4 i zatężyć pod próżnią uzyskując 7,86 g produktu.
Widmo masowe: MH+ = 592 (FAB).
185 597 lH NMR (CDCl3, 200 MHz): 8,51 (d, 1H); 7,52 (dd, 2H); 7,20 (d, 1H); 4,1-3,95 (m,
2H); 3,83,65 (m, 2H); 3,5-3,05 (m, 5H); 3,0-2,5 (m, 6H); 2,45-1,6 (m, 6H); 1,4-1,1 (m, 2H).
Etap C:
Potraktować 7,80 g (13,1 mmola) produktu z etapu B 12,1 g (105 mmola) (CH3)3SiNCO zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 6, etap C, uzyskując 5,50 g tytułowego związku, będącego mieszaniną racemiczną atropoizomerów.
Temperatura topnienia - 163,6 - 164,0°C.
Widmo masowe: MH+ = 635 (FAB) *H NMR (CDCh, 200 MHz): 8,5 (d, 1H); 7,52 (d, 1H); 7,48 (d, 1H); 7,21 (d, 1H); 4,54, (s, 2H); 4,1-3,6 (m, 4H); 3,45-3,15 (m, 4H); 3,0-2,5 (m, 5H); 2,45-1,6 (m, 7H); 1,4-1,0, (m, 2H).
Przykłady 8A i 8B
Przykład 8B /związek 31.0/
Tytułowy związek z przykładu 8 jest racemiczną mieszaniną atropoizomerów. Atropoizomery te rozdziela się metodą preparatywnej chromatografii (HPLC), stosując kolumnę Chiralpack AD (5 cm x 50 cm) i 20% i-PrOH/heksan + 0,2% dietyloaminy jako fazę ruchomą, przy szybkości przepływu 100 ml/minut, uzyskując enancjomery (+) i (-), odpowiednio przykłady 8B i 8A.
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomeru, przykład 8A: temperatura topnienia - 142,9 143,5°C; [αβ2 - -151,7° (11,06 mg/2 ml, MeOH).
Dane fizykochemiczne (+)-enancjomer, przykład 8B: temperatura topnienia - 126,5127,0°C; [a]o2S = +145,6° (8,38 mg/2 ml, MeOH).
185 597
Przykład 9
/związek 37.0/ /związek 66.0 o stereochemii R/
Połączyć 3,32 g (+)-enancjomeru tytułowego związku z przykładu syntezy 8, etap B, 2,38 g tytułowego związku z przykładu syntezy 1, 1,92 g HoBt, 2,70 g DEC, 1,56 ml Nmetylomorfoliny i 50 ml suchego DMF i mieszać w25°C przez 24 godziny. Zatężyć pod próżnią, po czym rozcieńczyć pozostałość CH2CI2. Przemyć 1N NaOH (roztwór wodny), a następnie nasyconym NaH2PO4 (roztwór wodny) i wysuszyć nad MgSO4. Zatężyć pod próżnią uzyskując pozostałość i chromatografować (żel krzemionkowy, 2% MeOH/CH2Cl2 + NH4OH) otrzymując 3,82 g tytułowego związku.
Widmo masowe: MH’ = 604 (FAB).
Chlorowodorek uzyskano przez rozpuszczenie tytułowego związku z przykładu 9 w dichlorometanie nasyconym chlorowodorem. Po zatężeniu pod próżnią uzyskano tytułowy związek z przykładu 9 jako sól HC1.
Temperatura topnienia - 166,5°C [a]o25 = +70,8° (9,9 mg/2 ml MeOH).
Przykłady 9Ai9B
(-)-enancjomer Przykład 9A
(-)-Enancjomer tytułowego związku z przykładu syntezy 8, etap B, (3,38 g) poddaje się reakcji z 2,20 g tytułowego związku z przykładu syntezy 1, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 9 uzyskując 3,58 g tytułowego związku z przykładu 9A.
Sól HCl tytułowego związku z przykładu 9A wytwarza się rozpuszczając go tytułowego związku w CH2Ó2, dodając 6M HCl (g) w CH2O2, po czym zatężając pod próżnią, uzyskując sól.
Temperatura topnienia = 129°C; [ajo^ = -72,3° (3,32 mg/2 ml MeOH).
185 597
Tytułowy racemiczny związek z przykładu syntezy 8, etap A, poddaje się reakcji z tytułowym związkiem z przykładu syntezy 1, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 9 uzyskując tytułowy związek z przykładu 9B.
Temperatura topnienia = 145,0 C.
Poddać reakcji 1,33 g (+)-enancjomeru tytułowego związku z przykładu syntezy 8, etap B, 1,37 g kwasu 1-N-t-butoksykarbonylopiperydynylo-4-octowego zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 6, etap A, uzyskując 2,78 g produktu. Widmo masowe: MH+ = 694,0 (FAB) ; (5,45 mg/2 ml, MeOH). Etap B:
Etap B:
Potraktować 2,78 g produktu z etapu A zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 8, etap B, uzyskując 1,72 g produktu. Temperatura topnienia = 104,1°C; Widmo masowe: MH+ = 594; [a]D25 +53,4° (1 1,42 mg/2 ml, MeOH).
185 597
Etap C:
Potraktować 1,58 g produktu z etapu B 6 ml (CHESiNCO zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 6, etap C, uzyskując 1,40 g tytułowego związku. Temperatura topnienia = 140°C; Widmo masowe: MH+ = 637; [α]ο - +49,1° (4,24 mg/2 ml, MeOH).
W wyniku rekrystalizacji z acetonu uzyskano tytułowy związek jako substancję stałą. Temperatura topnienia - 214,5-215,9°C.
Przykłady 10AilOB
Prykład 10B /związek 16.0/ (-)-Enancjomer tytułowego związku z przykładu syntezy 8, etap B, (3,38 g) przekształca się uzyskując tytułowy związek, (przykład 10A) zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 10, etapy A-C, uzyskując tytułowy związek z przykładu 10A. Temperatura topnienia 152°C; Widmo masowe: MH = 637; [afr43 -62,5° (1,12 mg/2 ml MeOH).
Tytułowy racemiczny związek z przykładu syntezy 8, etap A, przekształca się uzyskując tytułowy związek (przykład 9B) zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 10, etapy AC uzyskując tytułowy związek przykład 10B. Temperatura topnienia 111,2°C (dec). Przykład 11
185 597
Tytułowy związek wytwarza się stosując racemiczn- tytułowy związek z przykładu s-ntezy 9, etap F, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 2.
Ή NMR (CDCla, 400 MHz) : 8,44 (d, 1H); 8,14 (d, 2H): 7,58 (d, 1H); 7,47 (d, 1H);
7,14 (m, 3H); 5,32 (s, 1H); 4,65-4,57 (m, 1H); 3,68 (s, 2H); 3,65-3,39 (m, 4H); 2,91-2,87 m,
1H); 2,69-2,63 (m, 1H); 2,45-2,33 (m, 4H). MH+ = 605.
Przykłady- 1A i 11B
Przykład 11A Przykład 11B (związek 62.0 o stereochemii R) (związek 32.0 (B)-enancjomer)
Stosując R(B)- lub S (r)-enancjomer tytułowego związku z przykładu syntez- 9, etap G, R(B)-enancjomer (przykład 11 A) lub S-(-)-enancjomer (przykład 11B) wytwarza się zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 2.
Dane fizykochemiczne R-(B)-enancjomeru, =rz-kład 11 A: temperatura topnienia - 167,0-167,8°C; [a]o = B32,6° (c = 1, MeOH);
*H NMR (CDCla, 400 MHz) : 8,44 (d, 1H); 8,14 (d, 2H): 7,58 (d, 1H); 7,47 (d, 1H);
7,14 (m, 3H); 5,32 (s, 1H); 4,65-4,57 (m, 1H); 3,68 (s, 2H); 3,65-3,39 (m, 4H); 2,91-2,87 (m, 1H); 2,69-2,63 (m, 1H); 2,45-2,33 (m, 4H). MH+ = 605.
Dane fizykochemiczne S-(-)-enancjomeru, przykład 118: [a]D 2'5 -38,2° (14,67 mg/2 ml, MeOH);
*H NMR (CDCla, 400 MHz): 8,44 (d, 1H); 8,14 (d, 2H): 7,58 (d, 1H); 7,47 (d, 1H); 7,14 (m, 3H); 5,32 (s, 1H); 4,64-4,57 (m, 1H); 3,67 (s, 2H); 3,70-3,34 (m, 4H); 2,95-2,87 (m, 1H); 2,69-2,63 (m, 1H); 2,452,31 (m, 4H). MU* = 605.
Przykład 12
Tytułowy związek z tego przykładu wytwarza się stosując racemiczny tytułowa związek z przykładu syntezy 9, etap F, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 8, etap- A-C. Związek ten jest racematem.
185 597
Przykłady 12A i 12B
(-)-enancjomer Przykład 12A (+}-enancjonser Przykład 12B
Tytułowy związek z przykładu 12 jest mieszanina racemiczną. Chromatografować 2,45 g związku z przykładu 12, stosując kolumnę Chiralpack AD i 20% i-PrOH/heksan + 0,2% dietyloaminy jako fazę ruchomą, przy szybkości przepływu 100 ml/minut, uzyskując 0,970 g (+)-enancjomeru i 0,982 g (-)-enancjomeru, odpowiednio przykłady 12B i 12A.
Dane fizykochemiczne (-)-enancjomeru, przykład 12A:
Ή NMR (CDCl·,, 200 MHz): 8,43 (d, 1H); 7,58 (d, 1H); 7,48 (d, IH); 7,14 (d, 1H); 5,32 (s, 1H); 4,5-4,75 (m, 1H); 4,4 (s, 2H); 3,9 (d, 2H); 3,2-3,7 (m, 5H); 2,52-3,05 (m, 4H); 1,852,5 (m, 6H), 1,5-1,85 (m, 4H); 1,0-1,4 (m, 1H). [α]0 25 - -31,2° (c = 0,453, MeOH).
Dane fizykochemiczne (+)-enancjomer, przykład 12B:
Ή NMR ' (CDCl3, 200 MHz): 8,43 (d, 1H); 7,58 (d, 1H), 7,48 (d, 1H); 7,14 (d, 1H); 5,32 (s, 1H); 4,5-4,75 (m, 1H); 4,4 (s, 2H); 3,9 (d, 2H); 3.2-3,7 (m, 5H); 2,52-3,05 (m, 4H); 1,85-2,5 (m, 6H); 1,5-1,85 (m, 4H), 1,0-1,4 (m, 1H). [a]D^ = +29,8° (c - 0,414, MeOH).
Przykład 13
(związek 27.0) (związek 57.0 o stereochemii R)
185 597
Poddać reakcji 1,35 g (-)-enancjomeru tytułowego związku z przykładu syntezy 10, etap B, 1,4 g kwasu 1-N-t-butoksykarbonylopiperydynylo-4-octowego, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 6, etap A, uzyskując 2,0 g produktu. Widmo masowe: MH+ = 694 (FAB). Częściowy Ή-H NMR (CDCh, 300 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,60 (s, 1H); 7,25 (d, 1H); 7,05 (m, 1H); 1,45 (s, 9H).
Potraktować 1,95 g produktu z etapu A zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 8, etap B, uzyskując 1,63 g produktu. Widmo masowe MH* = 594 (FAB). Częściowy Ή NMR (CDCh, 300 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,60 (s, 1H); 7,25 (d, 1H); 7,03 (m, 1H); 4,64 (d, 1H); 3,90 (m, 2H).
Etap C:
izomer (-)
185 597
Potraktować 1,6 g produktu z etapu B 1,3 ml (CHs^SiNCO zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 6, etap C, uzyskując 1,27 g tytułowego związku. Widmo masowe: MH+ = 637 (FABS); [α]ο25 -33,1° (c=0,58, EtOH). Częściowy Ή NMR (CDClj, 400 MHz): 8,38 (u, 1H); 7,59 (s, 1H); 7,25 (d, 1H); 7,04 (m, 1H); 4,60 (d, 1H); 4,41 (s, 2H).
Przykłady 13Ail3B
/związek 8.0/ (+1-Enancjomer tytułowego związku z przykładu syntezy 10, etap B, (2,1 g) przekształca uię uzyskując tytułowy związek zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 10, etapy A-C, uzyskując tytułowy związek, przykład 13A. Widmo masowe: MH+ = 637 (FABS); [a]D = +32,4° (¢=0,57, EtOH). Częściowy ‘H NMR (CDCh, 400 MHz): 8,39 (s, 1H); 7,59 (s1. 1H); 7,25 (d, 1H); 7,04 (m, 1H); 4,60 (d, 1H); 4,41 (s, 2H). Częściowy *H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 8,42 (u, 1H); 7,88 (s, 1H); 7,41 (d, 1H); 7,29 (m, 1H); 5,85 (u, 2H); 4,20 (d, 1H).
Tytułowy racómiczoy związek z przykładu syntezy 10, etap A, przekształca się w racemiczno tytułowy związek, przykład 13B, w analogiczny sposób. Częściowg *H NMR (CDCI3, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 7,59 (s, 1H); 7,25 (d, 1H); 7,04 (m, 1H); 4,60 (d, 1H); 4,41 (s, 2H). Częściowo NMR (DMSO-d«, 400 MHz): 8,42 (s, 1H); 7,88 (s, 1H); 7,41 (d, 1H); 7,29 (d, 1H); 5,85 (s, 2H); 4,20 (d, 1H).
Przykład 14
Poddać reakcji 2,6 g (+1-enancjomóru tytułowego związku z przykładu syntezy 10, etap Bi 1,68 g tytułowego związku z przykładu syntezy 1 zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 9 uzyskując 2,10 g tytułowego związku. Widmo masowe: MH+ = 604 (FAB); [α]ο = +34,1° (10,98 mg/2 ml, EtOH). Częściowg 'H NMR (CDCb, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 8,15 (d, 2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d, 1H); 7,15 (d, 2H); 7,03 (d, 1H); 4,57 (d, 1H).
185 597
W celu uzyskania soli HCl tytułowego związku z przykładu 14 rozpuścić 700 mg tytułowego związku w 4 ml CH2CI2, dodać 4 ml Et2, schłodzić do 0°C i powoli dodać (po kropli) ml HC1 (g) w dioksanie. Dodać 2 ml Et2O i mieszać w 0°C przez 7 minut. Rozcieńczyć 30 ml Et2O, przesączyć w celu zebrania produktu i przemyć 30 ml Et2O. Wysuszyć osad pod próżnią uzyskując 0,836 g soli HCl z przykładu 14. [a] d25 = +64,8° (9,94 mg/2 ml, EtOH).
Przykład 14Ai 1 4B
(-)-enancjomer Przykład 14A
(związek 55.0 o stereochemii R) (związek 8.0A) (-)-Enanejomer tytułowego związku z przykładu syntezy 10, etap B, (0,60 g) poddaje się reakcji z 0,39 g tytułowego związku z przykładu syntezy 1, zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 9 uzyskując 0,705 g tytułowego związku. Widmo masowe: MH = 604 (FABS); [α]ο25 - -41,8° (EtOH). Częściowy *H NMR (CDCh, 300 MHz): 8,38 (s, 1H); 8,15 (d, 2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d, 1H); 7,15 (d, 2H); 7,03 (d, 1H); 4,57 (d, 1H).
Sól HCl tytułowego związku z przykładu 14A wytwarza się zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 14. [a]o - -63,2° (EtOH).
Tytułowy racemiczny związek z przykładu syntezy 10, etap A, przekształca się w racemiczny tytułowy związek z przykładu 14B zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 9. Częściowy *H NMR (CDCI3, 400 MHz): 8,38 (s, 1H); 8,15 (d, 2H); 7,58 (s, 1H); 7,26 (d, 1H); 7,15 (d, 2H); 7,03 (d, 1H); 4,57 (d, 1H). Częściowy ’H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 8,77 (d, 2H); 8,47 (s, 1H); 7,95 (s, 1H); 7,74 (d, 2H); 7,43 (m, 1H); 7,27 (d, 1H); 4,35 (d, 1H).
Przykład 15
racemat (związek 6.0)
Tytułowy związek z przykładu syntezy 4 poddaje się reakcji zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 8, etapy A-C, uzyskując tytułowy związek, będący racematem. Widmo
185 597 masowe: MH+ = 635 (FAB). Częściowy 'H NMR (CDCI3): 8,45 (s, 1H); 7,60 (s, 1H); 7,35 (d,
1H); 7,05 (d, 1H); 4,45 (s, 1H).
Przykłady 16Ai 1 6B
(+)-enancjomer (-)-enancjonner
Przykład 16A Przykład 16B
R-(+)-Enancjomer lub S-(-)-enancjomer tytułowego związku z przykładu syntezy 11 zadaje się zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 2 uzyskując R-(+)-enancjomer tytułowego związku lub S-(-)-enancjomer tytułowego związku, odpowiednio w przykładzie 16A i 16B.
Dane fizykochemiczne R-(+)-enancjomeru: 13C NMR (CDCh): 166,5 (C); 154,8 (C);
146.6 (CH ; 140,8 (CH); 140,4 (C); 138,5 (CH); 138,5 (CH); 136,3 (C); 134,6 (C); 133,8 (C);
133.6 (C); 132,0 (CH); 130,0 (CH); 126,3 (CH); 126,3 (CH); 125,8 (CH); 119,6 (C); 78,4 (CH)· 51,1 (CHz); 50,6 (CHz); 45,4 (CH2); 41,5 (CH2); 38,0 (CH2); 30,1 (CH2); 30,0 (CH2). [(x]2 = +30,7° (10,35 mg/2 ml MeOH).
Dane fizykochemiczne S-(-)-enancjomeru: BC NMR (CDCh): 166,5 (C); 154,8 (C);
146.6 (CH); 140,8 (CH); 140,4 (C); 138,5 (CH); 138,5 (CH); 136,3 (C); 134,6 (C); 133,8 (C);
133.6 (C); 132,0 (CH); 130,0 (CH); 126,3 (CH); 126,3 (CH); 125,8 (CH); 1 19,6 (C); 78,4 (CH); 51,1 (CHz); 50,6 (CH2); 45,4 (CH;); 41,5 (CH2); 38,0 (CHz); 30,1 (CHz); 29,9 (CH2). [a]D 25 -30,9° (9,70 mg/2 ml MeOH).
Przykłady 17 i 17A
Przykład 17 Przykład 17A
Potraktować (+)-enancjomer lub (-)-enancjomer tytułowego związku z przykładu syntezy 11 zasadniczo w taki sam sposób jak w przykładzie 1, etapy A-C, uzyskując R-(+)enancjomer tytułowego związku lub S-(-)-enancjomer tytułowego związku, odpowiednio przykład 17 i 17A.
Dane fizykochemiczne R-(+)-enancjomeru: 13C NMR (CDCh): 169,3 (C); 157,5 (C); 155,0 (C); 1^6,6 (CH); 140,8 (CH); 140,4 (C); 136,3 (C); 134,8 (C); 133,7 (C); 132,0 (CH);
185 597
130,0 (CH); 125,8 (CH); 119,6 (C); 78,5 (CH); 51,4 (CH2); 50,9 (CH2); 45,2 (CH2); 43,9 (CH2); 43,9 (CH,); 41,1 (CH2); 38,8 (CH2), 32,5 (CH); 31,5 (CH2); 31,5 (CH2C); 30,1 (CH2);
30,0 (CH2). [cc]d2S +28,7° (10,1 mg/2 ml MeOH).
Dane fizykochemiczne S-(-)-enancjomeru: I3C NMR (CDCI3): 169,3 (C); 157,6 (C); 155,0 (C); 146,6 (CH); 140,8 (CH); 140,4 (C); 136,3 (C); 134,8 (C); 133,7 (C); 132,0 (CH); 130,0 (CH); 125,8 (CH); 119,6 (C); 78,5 (CH); 51,4 (CH2); 50,9 (CH2); 45,2 (CH2); 43,9 (CH2); 43,9 (CH,); 41,1 (CH2); 38,8 (CH2); 32,5 (CH); 31,5 (CH2); 31,5 (CH2); 30,1 (CH2); 30,0 (CH2). [cc]d = -28,5° (10,1 mg/2 ml MeOH).
Przykład 18
Etap A:
Rozpuścić 9,90 g (18,9 mmola) produktu z przykładu syntezy 7, etap B, w 150 ml CH2CI2 i 200 ml CH2CI2 i 200 ml CH3CN i ogrzać do 60°C. Dodać 2,77 g (20,8 mmola) Nchlorosukcynimidu i ogrzewać we wrzeniu przez 3 godziny, śledząc reakcję metodą TLC (30%EtOAc/H2O). Dodać więcej 2,35 g (10,4 mmola) N-chlorosukcynimidu i ogrzewać we wrzeniu jeszcze przez 45 minut. Schłodzić mieszaninę reakcyjną do temperatury pokojowej i wyekstrahować IN NaOH i CH2CI2. Wysuszyć warstwę CH2CI2 nad MgSOzt, przesączyć i oczyszczać metodą chromatografii rzutowej (1200 ml żelu krzemionkowego jako zwykła faza, eluowanie 30% EtOAc/H2O), uzyskując 6,24 g pożądanego produktu. Temperatura topnienia 193-195,4°C. MH+ = 510.
135 597
Do 160 ml stężonego HC1 w -10°C dodać 2,07 g (30,1 mmola) NaNO2 i mieszać przez 10 minut. Dodać 5,18 g (10,1 mmola) produktu z etapu A i ogrzać mieszaninę reakcyjną od 10°C do 0°C przez 2 godziny. Schłodzić mieszaninę reakcyjną do -10°C, dodać 100 ml H3PC2 i odstawić na noc. W celu wyekstrahowania mieszaniny reakcyjnej wylać ją na pokruszony lód i zalkalizować na OH/CH2CI2. Wysuszyć warstwę organiczną nad MgSO4, przesączyć i zatężyć do sucha. Oczyszczać metodą chromatografii rzutowej (600 ml żelu krzemionkowego jako faza normalna, eluowanie 20% EtOAc/heksan) uzyskując 3,98 g produktu. Widmo masowe: MH+ = 495.
Etap C:
G OCH2CH3
Rozpuścić 3,9 g produktu z etapu B w 100 ml stężonego HCl i ogrzewać we wrzeniu przez noc. Schłodzić mieszaninę, zalkalizować 50% wag. NaOH i wyekstrahować uzyskaną mieszaninę CH2G2. Wysuszyć warstwę CH2CI2 nad MgSO4, odparować rozpuszczalnik i wysuszyć pod próżnią uzyskując 3,09 g pożądanego produktu. Widmo masowe: MH+ = 423.
Etap D
185 597
Sposobem zbliżonym do opisanego w przykładzie syntezy 8 uzyskano 1,73 g pożądanego produktu, temperatura topnienia 169,6-170,1°C; [α]^ = +48,2° (c=1, MeOH). MH+ = 425.
Etap E:
Sposobem zbliżonym do opisanego w przykładzie 4, stosując produkt z etapu D jako materiał wyjściowy uzyskano tytułowy związek. Temperatura topnienia 152,3-153,3°C; [α]d25 = +53,0° (c=1, MeOH). MH+ = 593.
Przykład 19
Potraktować 15,0 g (44,4 mmola) produktu z przykładu syntezy 9, etap B, 6,52 g (48,9 mmola) f N-chlorosukcynimidu sposobem zbliżonym do opisanego w przykładzie 18, etap A i wyekstrahować w opisany sposób otrzymując 16,56 g pożądanego produktu, temperatura topnienia 234,7-235,0°C. MH+ = 370.
Etap B:
Potraktować 16,95 g (45,6 mmola) produktu z etapu A w sposób opisany w przykładzie 18, etap B, uzyskując 13,07 g pożądanego produktu, temperatura topnienia 191,7-192,1°C. MH+ = 356.
185 597
Sposobem podanym w przykładzie syntezy 9, etap E, potraktować 10,0 g (28,0 mmola) produktu z etapu B NaBH4 uzyskując pożądany produkt, który stosuje się w następnym etapie bez dalszego oczyszczania.
Etap D:
Rozpuścić 10,0 g (27,9 mmola) produktu z etapu C w 200 ml CH2G2 w atmosferze azotu z mieszaniem w temperaturze pokojowej. Schłodzić mieszaninę reakcyjną do 0°C i dodać 2,63 g trietyloaminy i 4,80 g (41,9 mmola) chlorku metanosulfonylu. Do uzyskanego roztworu w 0°C dodać roztwór 16,84 g (19,6 mmola) piperazyny i 100 ml THF, a natychmiast po.tem 100 ml DMF. Mieszać przez noc w temperaturze pokojowej. Odparować rozpuszczalnik i wyekstrahować uzyskaną pozostałość CH2G2 i nasyconym roztworem NaHCO3. Wysuszyć warstwę CH2G2 nad MgSO4, przesączyć i zatężyć uzyskując surowy produkt. Chromatografować surowy produkt na 1200 ml żelu krzemionkowego, z eluowaniem 5% CH3OH (nasyconym NH3) w CH2G2 uzyskując mieszaninę racemiczną. Rozdzielić związek racemiczny metodą chiralnej chromatografii stosując kolumnę Chiralpack AD (5 cm x 50 cm), z eluowaniem 30% i PrOH/heksan 0,2% dietyloamina. Widmo masowe: MH - 426. Pożądany izomer jest (+)-enancjomerem.
Etap E:
Mieszać 2,0 g (4,7 mmola) produktu z etapu D w 40 ml DMF w atmosferze azotu, schłodzić mieszaninę do 0° i dodać 0,615 g (6,1 mmola) N-metylomorfoliny, 1,1668 g (6,1 mmola) DEC, 0,8225 g (6,1 mmola) HOBT i 1,6042 g (6,1 mmola) produktu z przykładu syntezy 1. Mieszać przez noc w temperaturze pokojowej. Odparować rozpuszczalnik i wyekstrahować uzyskaną pozostałość CHCĘ/wodą, nasyconym roztworem NaHCO3, 10% NaH2PO4 i solanką. Oddzielić warstwę CH2G2, wysuszyć nad MgSO4, przesączyć i zatężyć do sucha. Oczyszczać uzyskaną pozostałość metodą chromatografii rzutowej na 400 ml żelu krzemionkowego jako fazie normalnej, z eluowaniem 5% CH3OH/NH3-CH2G2 uzyskując 2,43 g tytułowego związku, temperatura topnienia 145,3-146,1°C; [α]ο25 = +33,6° (c=1, MeOH). MH’ = 561.
185 597
Przykład 20
Etap A:
Ogrzewać 200 mg wyjściowego materiału cyjankowego w 17 g polikwasu fosforowego w 190-200°C przez 45 minut. Wylać uzyskaną mieszaninę na lód, dodać 30% HC1 i mieszać przez 30 minut. Wyekstrahować CH2Cl2, przemyć solanką w-susz-ć nad Na2SO4, przesączyć i zatężyć. Oczyszczać metodą =re=arat-wnej TLC, z eluowaniem EtOAc/heksan uzyskując 21 mg pożądanego produktu (uzyskano także 59 mg produktu 10-chloro).
Sposobem zasadniczo takim jak w przykładzie syntezy 9, etap E, potraktować 1,75 g (5,425 mmola) produktu z etapu A NaBH4 uzyskując pożądany produkt.
Etap C:
Rozpuścić pozostałość uzyskana w etapie B w 50 ml CH2Cl2 w temperaturze pokojowej, dodać 3,95 ml (5,425 mmola) SOCl2 i mieszać w temperaturze pokojowej przez noc.
185 597
Usunąć nadmiar SOCh rozpuszczalnik pod próżnią. Rozpuścić pozostałość w CH2G2, przemyć nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszyć nad Na2SO4, przesączyć i zatężyć. Dodać 25 ml THF uzyskanej pozostałości, dodać 2,33 g (27,125 mmola) piperazyny i mieszać w temperaturze pokojowej przez noc. Odparować rozpuszczalnik, dodać CH2CI2 przemyć nasyconym roztworem NaHCO3 i solanką, wysuszyć nad Na2SO4, przesączyć i zatężyć. Oczyszczać uzyskaną pozostałość metodą chiralnej chromatografii stosując kolumnę Chiralpack AD z eluowaniem 20% iPrOH/heksan 0,2% dietyloaminy. Widmo masowe: MH* = 392. Pożądanym izomerem jest (+)-enancjomer.
Etap D:
Połączyć 770 mg (1,960 mmola) produktu z etapu C, 323 pl (2,548 mmola) Nmetylomorfoliny, 344 mg (2,548 mmola) HOBT, 487 mg (2,548 mmola) DEC i 390 mg (2,548 mmola) związku z przykładu syntezy 1 w 8 ml DMF i mieszać w temperaturze pokojowej przez noc. Odparować rozpuszczalnik, dodać EtOAc i przemyć nasyconym roztworem NaHCO3, wodą i solanką wysuszyć nad Na2SO4. Oczyszczać metodą chromatografii rzutowej na żelu krzemionkowym, z eluowaniem gradientowym EtOAc do 10, 12% (10%NH4OH/CH3OH)/EtOAc. Oczyszczać dokładniej metodą preparatywnej TLC (1000 pg żelu krzemionkowego) uzyskując 750 mg tytułowego związku, [a]D 25 = +23,3° (c=0,322, MeOH).
Przykład 21
Rozpuścić 10,0 g (29,6 mmola) produktu z przykładu syntezy 9, etap B, w 150 ml CH2CI2 i 200 ml CH3 CN w temperaturze pokojowej. Ogrzewać mieszaninę do 60°C, dodać 10,45 g (32,6 mmola) bis(tetrafluorobornu) 1-fluoro-4-hydroksy-1,4-diazoniabicyklo[2,2,2]oktanu i ogrzewać we wrzeniu przez 4 g. Schłodzić mieszaninę do temperatury pokojowej, wyekstrahować CH2G2 i 1N NaOH. Wysuszyć warstwę CH2G2 nad MgSO4, przesączyć i zatężyć do sucha. Oczyszczać uzyskaną pozostałość metodą chromatografii rzutowej stosując 1400 ml żelu krzemionkowego jako zwykłą fazę, z eluowaniem 10% EtOAc-CH2Cl2 + 2 krople NILOH uzyskując 2,00 g produktu, temperatura topnienia 103,2-103,5°C. MH* = 355.
Etap B:
185 597
Sposobem zasadniczo takim jak w przykładzie syntezy 9, etap D, potraktować 1,80 g (5,1 mmola) produktu z etapu A. Oczyszczać surowy produkt metodą chromatografii rzutowej stosując 200 ml żelu krzemionkowego jako zwykłą fazę, z eluowaniem 20% EtOAc/heksan.
Widmo masowe: MH+ = 339.
Etap C:
Sposobem zasadniczo takim jak w przykładzie syntezy 9, etap E, potraktować 0,47 g (1,4 mmola) produktu z etapu B NaBłL uzyskując pożądany produkt. Widmo masowe: MH = 342.
Rozpuścić 0,37 g (1,1 mmola) produktu z etapu C w 20 ml toluenu w atmosferze azotu i schłodzić od temperatury pokojowej do 0°C. Dodać 0,3855 g (3,2 mmola) SOCl2 i mieszać w temperaturze pokojowej, po czym dodać 10 ml CHCl, i mieszać przez 3 godziny. Odparować rozpuszczalnik, wyekstrahować uzyskaną pozostałość 1N NaOH-CHCh, wysuszyć warstwę CH2CI2 nad MgSO4, przesączyć i zatężyć do sucha. Rozpuścić pozostałość w 10 ml THF w atmosferze azotu, dodać 0,465 g (5,4 mmola) piperazyny, 10 ml THF i mieszać przez noc w temperaturze pokojowej. Powtórzyć -procedurę ekstrakcji uzyskując pożądany produkt. Widmo masowe: MH+ = 410.
Etap E:
Potraktować 0,44 g (1,1 mmola) produktu z etapu D N-metylomorfoliną, N-tlenkiem kwasu 4-pirydylooctowego, DEC i HOBT w DMF w sposób opisany w przykładzie 5. Odparować rozpuszczalnik i wyekstrahować uzyskaną pozostałość CH2CI2-H2O, nasyconym roztworem NaHCO3, 10% NaH2PO4 i solanką. Wysuszyć warstwę CH2CL· nad MgSO4, przesączyć i zatężyć do sucha. Oczyszczać uzyskaną pozostałość metodą chromatografii rzutowej na 150 ml żelu krzemionkowego jako zwykłej fazy, z eluowaniem 5% CH3OH/NH3-CH2Ch uzyskując 0,41 g tytułowego związku, temperatura topnienia 155,0-155,6°C; Widmo masowe: MH+ = 545.
Testy
1. Test enzymatyczne in vitro\ hamowanie famesylotransferazy białkowej i geranylogeranyltranserazy białkowej.
Oczyszczono częściowo zarówno famesylotransferazę białkową (FTP) i geranylogeranyltranserazę białkową (GGPT) I z mózgu szczura przez frakcjonowanie siarczanem amonu i następnie chromatografię anionowymienną na Q-Scpharo.se (Pharmacia, Inc.), zasadniczo w sposób opisany przez Yokoyamę i innych (Yokoyama, K. I inni, (1991), A protein geranylgeranyltransferase from boyine brain: Implications for protein prenylation specificity. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 5302-5306, którego ujawnienie jest tutaj wymienione jako pozycja literaturowa). Ludzką famesylotransferazę białkową, eksprymowano w E. coli przy użyciu klonów cDNA kodujących zarówno pod jednostkę a jak i b. Użyte metody były podobne do już opublikowanych (Omer, C. i inni, (1993), Characterization of recombinant human famesyl protein transferase: Cloning, expression, famesyl diphosphate binding, and functional homo58
185 597 logy with yeast prenyl-protein transferases, Biochemistry 32:5167-5176). Ludzką famesylotransferazę białkową częściowo oczyszczono z frakcji białek wymywalnych E. coli, jak opisano powyżej. Tricykliczne inhibitory famezylotransferazy białkowej ujawnione tutaj, hamowały zarówno ludzki, jak i szczurzy enzym z podobną mocą. Przygotowano jako substraty dla tych enzymów dwie formy białka val -Ha-Ras, różniące się sekwencją swoich C-końców. Jedno było zakończone sekwencją cysteina-walina-leucyna-seryna (Ras-CVLS), a drugie sekwencją cyste-ina-walina-leucyna-leucyna (Ras-CVLL). Ras-CVLS jest substratem dla famezylotransferazy białkowej, podczas gdy Ras-CVLL jest substratem dla geranylogeranyltransferazy białkowej I. cDNA kodujące to białko skonstruowano w taki sposób, aby oba białka miały N-koniec przedłużony o g histydyn. Oba białka eksprymowano w Escherichia coli i oczyszczono przy pomocy chromatografii powinowactwa z chelatem metalowym. Znakowane radioaktywnie substraty pirofosforan izoprenylu substrates, pirofosforan [3H] famezylu i pirofosforan [3H] geranylogeranylu zakupiono w DuPont/New England Nuclear.
Opisano kilka metod mierzenia aktywności famezylotransferazy białkowej Several (Reiss i inni 1990, Cell 62: 81; Schaber i inni 1990, J. Biol.. Chem. 265: 14701; Mannę i inni 1990, PNAS 87: 7541; i Barbacid & Mannę 1993, Patent U.S. nr 5,185,248). Aktywność przetestowano przez pomiary przenoeszenia [3H]famesylu z pirofosforanu [3H]famesylu na Ras-CVLS w warunkach podobnych do tych opisanych przez Reissa i innych 1990 (Cell 62: 81). Mieszanina reakcyjna zawierała 40 mM Hepes, pH 7,5; 20 mM chlorek magnezu; 5 mM ditiotreitol; 0,25 ###M pirofosforan [3H] famesylu; 10 ml oczyszczonej na Q-Sepharose farnezylotransferazy białkowej; oznaczoną ilość związku tricyklicznego lub dimetylsulfotlenek (DMSO) w podłożu kontrolnym (5% DMSO końcowe); i 5 mM Ras-CVLS w całkowitej objętości 100 ml. Reakcję prowadzono przez 30 minut w temperaturze pokojowej i następnie zatrzymano przy pomocy 0,5 ml 4% dodecylosiarczan sodu (SDS), a następnie 0,5 ml zimnego 30% TCA. Następnie próbki inkubowano w lodzie przez 45 minut, a następnie zebrano wytrącone białko Ras na sączkach z papieru filtrowego GF/C przy użyciu harwestera Brandel celi. Sączki przepłukano jeden raz 6% TCA, 2% SDS i zmierzono radioaktywność liczniku scyntylacyjnym do płynów Wallac 1204 Betaplate BS. Procent hamowania obliczono w odniesieniu do kontroli z podłożem zawierającym DMSO.
Test na geranylogeranyltransferazę białkową I był zasadniczo podobny do opisanego powyżej testu na famezylotransferazę, z dwoma wyjątkami: pirofosforan [Ή] geranylogeranylu zastąpił pirofosforan famezylu jako donor izoprenoidu i Ras-CVLL było białkiem akceptorowym. Metoda ta jest podobna do opisanej przez Caseya i innych (Casey, P.J., i inni (1991), Enzymatic modification of proteins with a geranylgeranyl isoprenoid. Proc. Natl. Acad. Sci., USA 88: 86318635, którego ujawnienie jest tutaj przytoczone jako pozycja literaturowa.
2. Test oparty na komórkach: Tymczasowa ekspresja valn-Ha-Ras-CVLS i vaj12-HaRas-CyLL w komórkach COS nerki myszy: Efekt wywierany przez inhibitory famezylotransferazy białkowej na obróbkę Ras i zaburzony wzrost komórek, indukowany przez Ras.
Komórki COS z nerki myszy transfekowano przez elektroporację plazmidem pSVSPORT (Gibco/BRL) zawierającym wstawkę cDNA kodującego Ras-CVLS lub Ras-CVLL oraz uzyskano tymczasową nadekspresję substratu Ras dla, odpowiednio, famezylotransferazy białkowej lub geranylogeranyltransferazy białkowej I (patrz wyżej).
Po elektroporacji komórki umieszczono w 6-stusdzienkowych pojemnikach do hodowli komórkowej zawierających 1,5 ml pożywki Dulbecco-modified Eagle (GIBCO, Inc.) wzbogaconej 10% płodowej surowicy cielęcej i odpowiedni inhibitor famezylotransferazy białkowej. Po 24 godzinach pożywkę usunięto i dodano świeżej pożywki i zawierającej odpowiednie leki.
Po 48 godzinach od elektroporacji komórki przebadano pod mikroscope w celu monitorowania nienormalnego wzrostu komórek wywołanego przez transformujące Ras. Komórki zawierające transformujące Ras stały się bardziej okrągłe i bardziej załamywały światło oraz wyrosły ponad warstwę komórek na powierzchni pożywki, co przypominało transformowany fenotyp. Komórki sfotografowano, przemyto dwukrotnie 1 ml zimnego soli buforowanej fosforanem (PBS) i oraz usunięto z naczynia wyskrobując gumową pałeczką do 1 ml buforu zawierającego 25 mM Tris, pH 8,0; 1 mM kwas etylenodiamino tetraoctowy; 1 mM fluorek fe185 597 nolometolosulfonylu; 50 mM leupeptinę; i 0,1 mM oepstatinę. Komórki zlizowano przez homogenizację i usunięto resztki komórek odwirowując przy 2000 x g przez 10 min.
Białka komórkowe wytrącono dodając lodowatego kwasu trichlorooctHWógo i rozpuszczono ponownie w 100 ml buforze do próbek doelrktpoforezg SDS. Próbki (5-10 ml) naniesiono na 14% miniżel ooliakrylamidowo (Novex, Inc.) i prowadzono elektroforezę do momentu aż barwnik znacznikowy dotarł do dolnej krawędzi żelu. Białka rozdzielone na żelach przeniesiono przg pomocy elektryczności na błony nitrocelulozowe do immuoHdótókcji.
Błong zablokowano inkubując przez noc przg 4°C w PBS zawierającym 2,5% mleka w proszku i 0,5% Twóóo-20 i następnie iokubowano ze specyficznym do Ras przeciwciałem monoklonalnom, Y13-259 (Furth, M.E. i inni, (1982), Monoclonal a^^dies to the p21 products of the traosformiog gene of Han^y mur^e sarcome wrus i of the cellular ras gene familg. J. Virol. 43: 294304), w PBS zawierającym 1% płodowej surowicy cielęcej przez godzinę w temperaturze pokojowej. Po przepłukaniu, błony inkubowano przez godzinę w temperaturze pokojowej z rozcieńczonym w stosunku 1:5000 wtórnym przeciwciałem, króliczym prcrciw-szccupzój IgG, połączonym z peroksodazą chrzanową, w PBS zawierającym 1% płodowej surowicy cielęcej. Obecność Ras-CVLS lub Ras-CVLL, które uległy lub nie uległy obróbce wykrOto używając kolorymetrycznego reagent oeroksydazg (4-chlor(r-1-oaftol), w sposób opisany przez producenta (Bio-Rad).
3. Test warstwo komórek:
Normalne ludzkie fibroblasty HEPM umieszczono w 3,5 cm naczyniach w gęstości 5x‘O4 komórók/na¢zyoió w 2 ml pożywki wzrostowej i inkubowano przez 3 do 5 dni, by osiągnąć efekt zlewania się. Pożywkę odessano z każdego naczynia i na powierzchni warstwy fibroblastów umieszczono wskaźnikowych komórek nowotworowych, T24-BAG4 ludzkich komórek raka pęcherza eksprymującoch aktywowany gen H-ras, w gęstości 2x103 komórek/naczynie w 2 ml pożywki wzrostowej i zostawiono je, aby się przyczepiły, przez noc. Testowano hamowanie kolonii wywołane związkiem dodając różne rozcieńczenia związku bezpośrednio do pożywki wzrostowej 24 godziny po zaszczepieniu komórkami nowotworowymi i inkubując komórki przez dodatkowe 14 dni, aby umożliwić tworzenie się kolonii. Testy zakończono przez dwukrotne przepłukanie warstw komórek solą buforowaną fosforanem (PBS), utrwalenie warstw 1% roztworem aldehydu glutarowego w PBS oraz uwidoczniono komórki nowotworowe przez wybawienie X-Gal (Price, J. i inni, Lineage analysis in the wrtebrate nervous system bg rótpovipes-mrdiated gene transfer, Proc. Natl. Acad. Sci. 84, 156160 (1987)). W testach na hamowanie kolonii oszacowano związki na podstawie dwóch wartości IC50 stężenia leku wymaganego do tego bg zapobiec wzrostowi ilości komórek nowotworowych o 50% (tICso) oraz stężenia leku wymaganego do tego aby zmniejszyć'gęstość komórek tworzących warstwę (mat) o 50% (mIC50). Obie wartości IC50 wyznaczono przez określenie stężeń komórek nowotworowych i komórek warstwy przez wzrokowe oględziny i zliczenie pod mikroskopem komórek przypadających na kolonie w wielu koloniach. Wskaźnik leczniczy związku został wyrażony ilościowo jako stosunek mIC5s/tIC5s przg czgm wartości większe od jeden wskazują specyficzności docelowej dla komórek nowotworowych.
Dodatkowe testg przeprowadzono według następującej, zasadniczo takiej samej jak poprzednia procedury, ale z podstawieniem innych wskaźnikowych komórek nowotworowych w miejsce komórek T24-BAG. Testy przeprowadzono używając DLD-1-BAG komórek ludzkich raka okrężnicy ókuprymującgch jako aktywowany gen K-ras lub SW620-BAG komórek ludzkich raka okrężnicy ekUprymejącgch aktywowany gen K-ras. Używając innych linii komórkowych, znanych w tej dziedzinie wiedzy, można zademonstrować aktywność związków według wynalazku przeciw komórkom innych typów nowotworów (takich jak te wcześniej womieniHOó).
4. Test w miękkim agarze:
Wzrost niezależny od przyczepienia jest charakterystyczny dla linii komórek nowotworowych. Ludzkie komórki nowotworowe zawieszono w pożywce wzrostowej zawierającej 0,3% agarozę i oznaczone stężenie inhibitora famezolotpaosferazy. Roztwór nawarstwiono na pożywkę wzrostową zestaloną 0,6% agarozą i zawierającą to samo co warstwa wierzchnia stężenie inhibitora farnózglotraoufrrazo. Po zestaleniu warstwy wierzchniej płytki inkubowano przez 10-16 dni w 37°C w atmosferze 5% CO2, aby pozwolić kolonii wyrosnąć. Po inku60
185 597 bacji kolonie wybarwiono przez nawarstwienie agaru w roztworze MMT bromku (3-[4, 5dimetylotiazol-2-ilo]-2,5-difenylotetrazoliowego, błękitu Tiazolilowego) (1 mg/ml w PBS).
Kolonie zliczono i wyznaczono wartości IC50.
Tabela 1. Hamowanie wzrostu komórek nowotworowych - test warstwy komórek
| Przykład | FTP IC50 μΜ) | Przykład | FTP IC50 (μΜ) |
| 1 | < 0,034 | 2 | 0,010 0,016 |
| 4 | 0,046 | 16A | 0,032 0,026 |
| 16B | 0,038 | 11 B | > 0,095 0,023 |
| 15 | 0,022 | 7 | 0,012 |
| 8 | 0,021 | HA | 0,0018 0,0021 |
| 5 | 0,0023 | 12B | 0,0025 |
| 9 | 0,0013 | 10 | 0,0019 |
| 7B | < 0,003 | 8B | 0,013 |
| 14A | 0,0026 | 14 | 0,062 |
| 13A | 0,078 | 13 | 0,005 |
| 5A | > 0,099 | 7A | >0,1 |
| 8A | > 0,094 | 10A | > 0,094 |
| 9A | > 0,088 | 6 | 0,0031 |
| 11 | 0,002 | 5B | ~ 0,003 |
| 12A | > 0,094 | 13B | 0,005 |
| 14B | 0,005 | 5 · HCl sól | 0,0038 |
| 14A · HC1 sól | <0,0031 | 9B | 0,003 |
| 10B | 0,003 | 17 | 0,043 |
| 17A | 0,048 | 18 | 0,0031 |
| 19 | < 0,0038 | 20 | 0,0062 |
| 21 | 0,0084 |
Tabela 2: Porównanie hamowania FPT i hamowania GGPT
| Przykład | Hamowanie emzymu FPT IC50, gM | Hamowanie emzymu GGPT IC50, μΜ |
| 1 | 2 | 3 |
| 2 | 0,010 0,016 | >300 |
| 4 | 0,046 | >35,7 |
| 5B | ~ 0,003 | >300 |
185 597
c.d tabeli 2
| 1 | 2 | 3 |
| 16A | 0,032 0,026 | >38 |
| 16B | 0,038 0,023 | >76 |
| HA | 0,0018 0,0021 | >66 |
| 9 | 0,0013 | >59 |
| 5 | 0,0023 | >66 |
| 14A | 0,0026 | >62 |
| 13 | 0,005 | >63 |
| 7B | < 0,003 | >66 |
| 8B | 0,013 | >60 |
| 18 | 0,0031 | >50 |
| 20 | 0,0062 | >38 |
Tabela 3: Aktywność w komórkach COS
| Prz-kład | Hamowanie obróbki RasIC50 (gM) | Przykład | Hamowanie obróbki Ras IC50 (gM) |
| 8 | <0,25 | 2 | 0,25 |
| 15 | 0,60 | 16A | 0,5 |
| 16B | 0, 125 | 11 | <0,25 |
| 7 | <01,25 | 5B | 0,05 |
| 10 | < 0,025 | 10A | 2,0 |
| 12B | < 0,025 | 12A | 0,95 |
| 11A | < 0,025 | 11 B | 2,25 |
| 5 | 0,098 | MA-Sól HCl | 0,015 |
| 13 | 0,420 | 9 | 0,010 |
| 7B | 0,025 | 8B | 0,280 |
| 9A | 0,85 | HCl | 0,010 |
| 5A | 5,0 1,0 | 14A | 0,480 |
| 14 | > 1,0 | 13A | >1,0 |
| 7A | > 1,0 | 8A | >1,0 |
| 17 | 0,350 | 17A | 0,500 |
| 14B | 0,045 | 6 | 0,040 |
| 18 | 0,025 | 19 | 0,045 |
| 20 | ~ 0,030 | 21 | 0,42 |
185 597
Tabela 4: Hamowanie wzrostu komórek nowotworowych - test warstwy komórek
| Przykład | Nowotwór (T-4) 1050 (pM) | Nowotwór (DLD-1) 1C50 (gM) | Nowotwór (SW620) C5o(pM) | Normalne 1C5o( gM) |
| 1 | <1,6 | - - | - - | >25 |
| 4 | 3,1 | - - | >25 | |
| 7 | <1,6 | <1,6 | 6,25 | >25 |
| 5B | <1,6 | 3,1 | 10 | >5 |
| 13B | <1,6 | 3,1 | >31 | 25 |
| 11 B | <1,6 | 8 | 18 | >25 |
| 9A | <1,6 | 12,5 | 12,5 | 18 |
| 10A | <1,6 | 2,0 | 1,6 | 8 |
| 5 | <1,6 | 3,1 | 6,25 | >25 |
| 14A | <1,6 | 6,25 | 12,5 | >25 |
| 13A | 3,1 | 6,25 | 6,25 | >25 |
| 7B | <1,6 | 1,6 | 3,1 | >25 |
| 8A | <1,6 | < 1,6 | 3,1 | >25 |
| 2 | <1,6 | 6,25 | 6,25 | >25 |
| 16B | <1,6 | 6,25 | 25 | >25 |
| 8 | <1,6 | 3,1 | 3,1 | >25 |
| 15 | 3,1 | 6,25 | >6,25 | >25 |
| 11A | <1,6 | <1,6 | >6,25 | >25 |
| 9 | <1,6 | <1,6 | 6,25 | >25 |
| 10 | <1,6 | < 1,6 | 3,1 | >25 |
| 12A | <1,6 | 2,0 | 4 | >25 |
| 5A | 12,5 | 12,5 | >25 | >25 |
| 14 | <1,6 | 6,25 | > 12,5 | >25 |
| 13 | <1,6 | 3,1 | >1,6 | >25 |
| 8B | <1,6 | <1,6 | 3,1 | >25 |
| 17 | 1,6 | 6,25 | 25 | >25 |
| 17A | 3,1 | 4 | 18 | >25 |
| 10B | <1,6 | 1,6 | 1,6 | >25 |
| 12B | <1,6 | 3,1 | 6,25 | >25 |
| 7A | <1,6 | 1,6 | 3,1 | >25 |
| 6 | <1,6 | 4,0 | 6,24 | - - |
| 19 | <1,6 | <1,6 | 6,25 | >25 |
185 597
Hamowanie wzrostu ludzkich komórek nowotworowych - test w miękkim agarze
Wykonano test w miękkim agarze ze związkiem z przykładu 10 i następującymi liniami komórkowymi: K ras NIH 3T3; H ras NIH 3T3; HTB 177 (NSCLC) mutacja K ras ; HTB 173 (NCI H146) (SCLC) nie wykryto mutacji ras; A549 (płuco) mutacja K ras; HTB 175 (SCLC) nie wykryto mutacji ras; HTB 119 (NCl H69) (SCLC); HTB 183 (NCI H661) (NSCLC) nie wykryto mutacji ras; HPAF II (trzustka) mutacja K ras; MCF-7 (pierś) nie wykryto mutacji ras; HBL100 (pierś) nie wykryto mutacji ras; Du4475 (pierś) nie wykryto mutacji ras; MDA MB 468 (pierś) nie wykryto mutacji ras; DU 145 (prostata) nie wykryto mutacji ras; MDA MB453 (pierś); BT474 (pierś); PC3 (prostata); DLD 1 (okrężnica) mutacja K ras; i AsPc-1 (trzustka) mutacja K ras. Fakt istnienia mutacji ras określono przy pomocy testu ELISA (Oncogene Science). Wartość IC50 (pM) dla każdego typu komórek wynosiła od 0,04 do 3,0.
Wykonano test w miękkim agarze ze związkiem z przykładu 18 i następującymi liniami komórkowymi: K ras NIH 3T3; H ras NIH 3T3; HTB 177 (NSCLC) mutacja K ras; A549 (płuco) mutacja K ras; i HTB 175 (SCLC) nie wykryto mutacji ras. Fakt istnienia mutacji ras określono przy pomocy testu ELISA (Oncogene Science). Wartość IC50 (pM) dla każdego typu komórek wynosiła od 0,175 do 0,8.
Wyniki:
1. Enzymologia:
Wyniki świadczą o tym iż związki według wynalazku są inhibitorami famezylacji RasCVLS przez częściowo oczyszczoną z mózgu szczura famezylotransferazę białkową (FPT). Wyniki świadczą także o tym iż są związki według wynalazku, które mogą zostać uznane za bardzo silne (K5o« 0,1 pM) famezylacji Ras-CVLS przez częściowo oczyszczoną z mózgu szczura FPT.
Wyniki wskazują także iż związki według wynalazku są słabszymi inhibitorami geranylogeranyltransferazy białkowej (GGPT) przetestowanej przy użyciu Ras-CVLL jako akceptora izoprenoidowego. Selektywność ta jest ważna dla możliwości leczniczych związków użytych w sposobach według wynalazku i zwiększa szansę iż związki będą wykazywać selektywne właściwości hamujące przeciw komórkom z transformowanym przez Ras.
2. Oparty na komórkach: Test z komórkami COS
Analiza hybrydyzacji typu Western białka Ras, eksprymowanego w transfekowanych Ras komórkach COS, po traktowaniu tricyklicznymi inhibitorami famezylotransferazy białkowej według wynalazku, wykazała iż hamują one obróbkę Ras-CVLS oraz powodują nagromadzenie niemodyfikowanego Ras (patrz tabela 3). Związek z przykładu 2, na przykład, hamuje obróbkę Ras-CVLS z wartością ICso wynoszącą 0,025 pM, ale nie blokuje geranylogeranylacji Ras-CVLL w stężenia aż do 33 pM.
Wyniki te dostarczają dowodu przemawiającego za tym iż hamowanie związkami według wynalazku w famezylotransferazy białkowej w komórkach nie uszkodzonych jest specyficzne i nie powoduje hamowania geranylogeranyltransferazy I i przez to wskazują na ich potencjalną zdolność blokowania transformacji komórkowej przez aktywowane onkogeny Ras.
3. Oparty na komórkach: Test Warstwowy komórek
Tricykliczne inhibitory famezylotransferazy według wynalazku hamują również wzrost transformowanych Ras komórek nowotworowych w teście warstwowym, bez wykazywania właściwości cytotoksycznych przeciw normalnej warstwie komórek.
Badania przeciw-nowotworowe in vivo:
Komórki nowotworowe (5X105 do 8X106) z linii DLD-1 (komórki ludzkiego raka okrężnicy, ATCC # CCL 221) wstrzyknięto podskórnie do boku 5-6 tygodniowych pozbawionych grasicy nu/nu samicy myszy. Zwierzęta noszące nowotwór wyselekcjonowano i wybrano przypadkowo w momencie gdy nowotwory zaczęły się rozwijać. Zwierzętom podawano podłoże (3-cyklodekstrynę dodotrzewnowo lub olej kukurydziany doustnie) samo lub z dodatkiem związku według wynalazku w podłożu, cztery razy na dzień (QID), przez 7 dni w tygodniu, przez 4 tygodnie. Procent hamowania wzrostu nowotworu w stosunku do kontroli z podłożem oceniano przez pomiary nowotworów.
185 597
Uśredniony % hamowania dla związków z każdego z przykładów 1, 2, 4, 5, 6, 7, 7A,
8B, 9, 10, HA, 11B, 12B, 13, 14A, 16B, i 18 wynosił 7 do 50% dla dawki 10 mg/kg podawanej doustnie, i 35,4 do 83 dla dawki 50 mg/kg podawanej doustnie.
Przy wytwarzaniu środków farmaceutycznych ze związków według wynalazku stosować można stałe lub ciekłe farmaceutycznie dopuszczalne nośniki. Do stałych postaci preparatów należą proszki, tabletki, granulaty do dyspergowania, kapsułki, opłatki i czopki. Proszki i tabletki mogą zawierać od około 5 do około 70% substancji czynnej. Do odpowiednich znanych stałych nośników należy węglan magnezu, stearynian magnezu, talk, cukier i laktoza. Tabletki, proszki, opłatki i kapsułki można stosować jako stałe postaci dawkowania do podawania doustnego.
Przy wytwarzaniu czopków niskotopliwy wosk, taki jak mieszanina glicerydów kwasów tłuszczowych lub masło kakaowe, najpierw topi się, po czym substancję czynną równomiernie dysperguje się w nim przez mieszanie. Stopioną jednorodną mieszaninę wylewa się następnie do form odpowiedniej wielkości i pozostawia do ostygnięcia, a tym samym zestalenia.
Do ciekłych postaci preparatów należą roztwory, zawiesiny i emulsje. Jako przykład wymienić można roztwory w wodzie lub w mieszaninie wody z glikolem propylenowym, do podawania pozajelitowego.
Ciekłe postaci preparatów mogą także stanowić roztwory do podawania do nosa.
Preparaty aerozolowe nadające się do wdychania mogą zawierać roztwory i substancje stałe w postaci proszku, przy czym można je połączyć z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem, takim jak obojętny sprężony gaz.
Zakresem wynalazku są także stałe preparaty przeznaczone do przekształcenia bezpośrednio przed użyciem w preparaty ciekłe do podawania doustnego lub pozajelitowego. Do takich ciekłych postaci preparatów należą roztwory, zawiesiny i emulsje.
Związki według wynalazku mogą być również podawane przezskómie. Środki przezskóme mogą być w postaci klejów, płynów, aerozoli i/lub emulsji, przy czym mogą znajdować się w powszechnie stosowanych plasterkach typu matrycowego lub zbiorniczkowego.
Korzystnie związek podaje się doustnie.
Korzystnie preparat farmaceutyczny jest w postaci dawki jednostkowej. W takiej postaci preparat dzieli się na dawki jednostkowe zawierające odpowiednie ilości substancji czynnej, czyli skuteczną ilość niezbędną do osiągnięcia pożądanego celu.
Ilość substancji czynnej w dawce jednostkowej preparatu można zmieniać lub regulować w zakresie od około 0,1 do 1000 mg, jeszcze korzystniej od około 1 do około 300 mg, w zależności od konkretnego zastosowania.
Konkretne stosowane dawki mogą zmieniać się w zależności od wymagań pacjenta i ostrości leczonego stanu. Określenie właściwej dawki w konkretnej sytuacji jest znane specjaliście. Zazwyczaj leczenie rozpoczyna się od mniejszych dawek, poniżej dawki optymalnej związku. Następnie dawkę zwiększa się niewielkimi porcjami aż do uzyskania optymalnego efektu w określonych warunkach. Dla wygody całkowitą dzienną dawkę można dzielić i podawać porcjami w ciągu dnia, zależnie od potrzeb.
Ilość i częstotliwość podawania związków według wynalazku i ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli będzie regulowana w zależności od ustaleń nadzorującego lekarza przy uwzględnieniu takich czynników jak wiek, stan i rozmiary pacjenta, a także ostrość leczonych objawów. Typowa zalecana dawka przy podawaniu doustnym w celu blokowania wzrostu nowotworu wynosi od 10 do 2000 mg/dzień, korzystnie 10-1000 mg/dzień w 2-4 podzielonych dawkach. Związki są nietoksyczne przy podawaniu w dawkach w podanym zakresie.
Poniżej podano przykłady farmaceutycznych postaci dawkowania, zawierających związek według wynalazku. Zakres wynalazku w odniesieniu do środka farmaceutycznego nie jest ograniczony podanymi przykładami.
Przykłady farmaceutycznych postaci dawkowania
185 597
Przykład A: Tabletki
| Nr | Składnik | mg/tabletkę | mg/tabletkę |
| 1. | Substancja czynna | 100 | 500 |
| 2. | Laktoza USP | 122 | 113 |
| 3. | Skrobia kukurydziana, spożywcza, w postaci 10% pasty w oczyszczonej wodzie | 30 | 40 |
| 4. | Skrobia kukurydziana, spożywcza | 45 | 40 |
| 5. | Stearynian magnezu | 3 | 7 |
| Razem | 300 | 500 |
Sposób wytwarzania
Zmieszać składniki nr 1 i 2 w odpowiedniej mieszarce przez 10-15 minut. Zgranulować mieszankę ze składnikiem nr 3. W razie potrzeby zetrzeć wilgotne granulki przez grube sito (mp. 1/4 cala, 0,63 cm). Wysuszyć wilgotne granulki. Przeciąć wysuszone granulki w razie potrzebny i wymieszać ze składnikiem nr 4 przez 10-15 minut. Dodać składnik nr 5 i mieszać przez 1-3 minuty. Sprasować z mieszanki tabletki o odpowiednich wymiarach i wadze w odpowiedniej tabletkarce.
Przykład B: Kapsułki
| Nr | Składnik | mg/kapsułkę | mg/kapsułkę |
| 1 | Substancja czynna | 100 | 500 |
| 2. | Laktoza USP | 106 | 123 |
| 3 | Skrobia kukurydziana, spożywcza | 40 | 70 |
| 4. | Stearynian magnezu NF | 7 | 7 |
| Razem | 253 | 700 |
Sposób wytwarzania
Zmieszać składniki nr 1, 2 i 3 w odpowiedniej mieszarce przez 10-15 minut. Dodać składnik nr 5 i mieszać przez 1-3 minuty. Napełnić mieszanką odpowiednie dwuczęściowe twarde kapsułki żelatynowe w odpowiednim urządzeniu do kapsułkowania.
Jakkolwiek wynalazek opisano w odniesieniu do konkretnych rozwiązań podanych powyżej, dla specjalistów oczywistych jest wiele innych możliwości, modyfikacji i wariantów. Wszystkie takie możliwości, modyfikacje i warianty należy uważać za objęte istotą i zakresem wynalazku.
185 597
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz.
Cena 6,00 zł.
Claims (16)
- Zastrzeżenia patentowe1. Tricykliczny amid wybrany z grupy obejmującej:BrBr185 597Br (-)-enancj omer (-)-enancjomer185 597 (-t-)-enancjomer185 597 lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
- 2. Związek według zastrz. 1, wybrany z grupy obejmującej związki o wzorach: (22,0), (25,0), (27,0), (53,0), (55,0), (57,0), lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
- 3. Związek według zastrz. 1, wybrany z grupy obejmującej związki o wzorach: (29,0), (31,0), (32,0), (36,0), (37,0), (39,0), (41,0), (62,0), (66,0), (68,0), lub ich farmaceutycz nie dopuszczalnych soli.
- 4. Związek według zastrz. 1, wybrany z grupy obejmującej związki o wzorach: (16,0), (39,0), (68,0), lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli.
- 5. Związek według zastrz.4, którym jest związek oznaczony wzorem (16,0).
- 6. Związek według zastrz.4, którym jest związek oznaczony wzorem (39,0).
- 7. Związek według zastrz.4, którym jest związek oznaczony wzorem (68,0).
- 8. Związek według zastrz. 1, którym jest związek oznaczony wzorem (41,0).185 597
- 9. Środek farmaceutyczny zawierający skuteczną ilość związku aktywnego w połączeniu z farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem, znamienny tym, że jako związek aktywny zawiera tricykliczny amid określony w zastrz. 1.
- 10. Zastosowanie związku którym jest związek wybrany z grupy przedstawionej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do hamowania famezylotransferazy białkowej.
- 11. Zastosowanie tricyklicznego amidu wybranego z grupy przedstawionej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia raka trzustki, raka płuc, białaczki szpikowej przewlekłej, raka pęcherzyka tarczycy, zespołu mielodysplastycznego, raka naskórka, raka pęcherza, raka okrężnicy, raka piersi lub raka prostaty.
- 12. Zastosowanie tricyklicznego amidu wybranego z grupy przedstawionej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzrostu komórek.
- 13. Zastosowanie tricyklicznego amidu wybranego z grupy przedstawionej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzostu, komórek nowotworowych eksprymujących aktywowany onkogen Ras.
- 14. Zastosowanie tricyklicznego amidu wybranego z grupy przedstawionej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do hamowania nienormalnego wzostu komórek nowotworowych w których białko Ras zostaje uaktywnione w wyniku mutacji onkogenicznej w genach innych niż gen Ras.
- 15. Zastosowanie środka farmaceutycznego przedstawionego w zastrz. 9 do wytwarzania leku do hamowania famezylotransferazy białkowej.
- 16. Zastosowanie środka farmaceutycznego przedstawionego w zastrz. 9 do wytwarzania leku do leczenia raka trzustki, raka płuc, białaczki szpikowej przewlekłej, raka pęcherzyka tarczycy, zespołu mielodysplastycznego, raka naskórka, raka pęcherza, raka okrężnicy, raka piersi lub raka prostaty.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US57795195A | 1995-12-22 | 1995-12-22 | |
| US61576096A | 1996-03-13 | 1996-03-13 | |
| PCT/US1996/019603 WO1997023478A1 (en) | 1995-12-22 | 1996-12-19 | Tricyclic amides useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL327312A1 PL327312A1 (en) | 1998-12-07 |
| PL185597B1 true PL185597B1 (pl) | 2003-06-30 |
Family
ID=27077386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL96327312A PL185597B1 (pl) | 1995-12-22 | 1996-12-19 | Tricykliczne amidy, środek farmaceutyczny i ich zastosowania |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1019392B1 (pl) |
| JP (1) | JP3193725B2 (pl) |
| KR (1) | KR100295224B1 (pl) |
| CN (1) | CN1326847C (pl) |
| AR (1) | AR005152A1 (pl) |
| AT (1) | ATE309238T1 (pl) |
| AU (1) | AU730194B2 (pl) |
| BR (1) | BR9612203A (pl) |
| CA (2) | CA2358394C (pl) |
| CZ (1) | CZ292791B6 (pl) |
| DE (1) | DE69635424T2 (pl) |
| DK (1) | DK1019392T3 (pl) |
| ES (1) | ES2248826T3 (pl) |
| HU (1) | HU228352B1 (pl) |
| IL (1) | IL125062A (pl) |
| MX (1) | MX9804956A (pl) |
| MY (1) | MY119007A (pl) |
| NO (1) | NO318232B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ326035A (pl) |
| PL (1) | PL185597B1 (pl) |
| SK (1) | SK86198A3 (pl) |
| TW (1) | TW350844B (pl) |
| WO (1) | WO1997023478A1 (pl) |
Families Citing this family (123)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6524832B1 (en) | 1994-02-04 | 2003-02-25 | Arch Development Corporation | DNA damaging agents in combination with tyrosine kinase inhibitors |
| WO1998004549A1 (en) * | 1996-07-26 | 1998-02-05 | Schering Corporation | Method for preparing substituted 1-piperidinecarboxamide derivatives |
| US5925757A (en) * | 1996-07-26 | 1999-07-20 | Schering Corporation | Method for preparing carboxamides |
| US6030982A (en) * | 1996-09-13 | 2000-02-29 | Schering Corporationm | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US5985879A (en) * | 1996-09-13 | 1999-11-16 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| DE69731481T2 (de) * | 1996-09-13 | 2005-10-27 | Schering Corp. | Verbindungen als inhibitoren von farnesylprotein-transferase |
| US5945429A (en) * | 1996-09-13 | 1999-08-31 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| CN1237176A (zh) * | 1996-09-13 | 1999-12-01 | 先灵公司 | 用作fpt抑制剂的三环化合物 |
| ES2235252T3 (es) * | 1996-09-13 | 2005-07-01 | Schering Corporation | Inhibidores triciclicos de la farnesil proteina transferasa. |
| US6040305A (en) * | 1996-09-13 | 2000-03-21 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| JP2001500508A (ja) * | 1996-09-13 | 2001-01-16 | シェーリング コーポレイション | ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害に有用な置換ベンゾシクロヘプタピリジン誘導体 |
| US5861395A (en) * | 1996-09-13 | 1999-01-19 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl proteins transferase |
| US6071907A (en) * | 1996-09-13 | 2000-06-06 | Schering Corporation | Tricyclic compounds useful as FPT inhibitors |
| US5958890A (en) * | 1996-09-13 | 1999-09-28 | Schering Corporation | Tricyclic compounds useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative diseases |
| AU4801197A (en) * | 1996-09-13 | 1998-04-02 | Schering Corporation | Tricyclic antitumor compounds being farnesyl protein transferase inhibit ors |
| US5994364A (en) | 1996-09-13 | 1999-11-30 | Schering Corporation | Tricyclic antitumor farnesyl protein transferase inhibitors |
| ES2234036T3 (es) * | 1996-09-13 | 2005-06-16 | Schering Corporation | Compuestos utiles para inhibir la farnesil-protein-transferasa. |
| US6130229A (en) * | 1996-10-09 | 2000-10-10 | Schering Corporation | Tricyclic compounds having activity as RAS-FPT inhibitors |
| US20030060434A1 (en) | 1997-02-18 | 2003-03-27 | Loretta Nielsen | Combined tumor suppressor gene therapy and chemotherapy in the treatment of neoplasms |
| IL131447A0 (en) * | 1997-02-18 | 2001-01-28 | Canji Inc | Combined tumor supressor gene therapy and chemotherapy in the treatment of neoplasms |
| US5998620A (en) * | 1997-03-25 | 1999-12-07 | Schering Corporation | Synthesis of intermediates useful in preparing tricyclic compounds |
| US5760232A (en) * | 1997-06-16 | 1998-06-02 | Schering Corporation | Synthesis of intermediates useful in preparing bromo-substituted tricyclic compounds |
| US6051582A (en) * | 1997-06-17 | 2000-04-18 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6218401B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-04-17 | Schering Corporation | Phenyl-substituted tricyclic inhibitors of farnesyl-protein transferase |
| US5877177A (en) * | 1997-06-17 | 1999-03-02 | Schering Corporation | Carboxy piperidylacetamide tricyclic compounds useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative diseases |
| US6211193B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-04-03 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6159984A (en) | 1997-06-17 | 2000-12-12 | Schering Corporation | Farnesyl protein transferase inhibitors |
| US6689789B2 (en) | 1997-06-17 | 2004-02-10 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6239140B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-29 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6225322B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-01 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| ZA985205B (en) * | 1997-06-17 | 1998-12-15 | Schering Corp | Novel n-substituted urea inhibitors of arnesyl-protein transferase |
| US6358968B1 (en) | 1997-06-17 | 2002-03-19 | Schering Corporation | N-substituted urea inhibitors of farnesyl-protein transferase |
| US6228865B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-05-08 | Schering Corporation | Compounds useful for inhibition of farnesyl protein transferase |
| US6576639B1 (en) | 1997-06-17 | 2003-06-10 | Schering Corporation | Compounds for the inhibition of farnesyl protein transferase |
| NZ501613A (en) * | 1997-06-17 | 2001-11-30 | Schering Corp | Benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-yl)-4-(4-pyridinylacetyl) piperazine derivatives useful as inhibitors of farnesyl-protein transferase |
| KR20010013825A (ko) * | 1997-06-17 | 2001-02-26 | 둘락 노먼 씨. | 파네실 단백질 전이효소를 억제하기에 유용한비스피리도-사이클로헵탄 화합물 |
| BR9813728A (pt) * | 1997-12-22 | 2000-10-10 | Schering Corp | Composição de dispersão molecular com elevada biodisponibilidade |
| US6096757A (en) * | 1998-12-21 | 2000-08-01 | Schering Corporation | Method for treating proliferative diseases |
| DK1041985T3 (da) * | 1997-12-22 | 2006-06-19 | Schering Corp | Kombination af benzocycloheptapyridinforbindelser og antineoplastiske lægemidler til behandling af profilerative sygdomme |
| US6632455B2 (en) | 1997-12-22 | 2003-10-14 | Schering Corporation | Molecular dispersion composition with enhanced bioavailability |
| AU4828299A (en) * | 1998-07-02 | 2000-01-24 | Schering Corporation | Process for producing (8- chloro-3,10- dibromo-6,11- dihydro- 5h-benzo (5,6)cyclohepta (1,2-b)pyridin-11-yl)- 1-piperidine |
| US6706883B1 (en) * | 1998-07-02 | 2004-03-16 | Schering Corporation | Process for producing (8-chloro-3,10-dibromo-6,11-dihydro-5H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-B]pyridin-11-YL)-1-piperdine |
| US6535820B1 (en) * | 1998-08-28 | 2003-03-18 | Schering Corporation | Crystalline farnesyl protein transferase compositions and methods for use |
| US6307048B1 (en) | 1998-11-20 | 2001-10-23 | Schering Corporation | Enantioselective alkylation of tricyclic compounds |
| US6372909B1 (en) | 1998-11-20 | 2002-04-16 | Schering Corporation | Synthesis of intermediates useful in preparing tricyclic compounds |
| EP1131313B1 (en) * | 1998-11-20 | 2003-02-26 | Schering Corporation | Enantioselective alkylation of tricyclic compounds |
| AU3790200A (en) | 1998-11-20 | 2000-06-13 | Schering Corporation | Synthesis of intermediates useful in preparing tricyclic compounds |
| US6316462B1 (en) | 1999-04-09 | 2001-11-13 | Schering Corporation | Methods of inducing cancer cell death and tumor regression |
| US7342016B2 (en) * | 2000-08-30 | 2008-03-11 | Schering Corporation | Farnesyl protein transferase inhibitors as antitumor agents |
| EP1337522B1 (en) * | 2000-11-29 | 2007-08-29 | Schering Corporation | farnesyl protein transferase inhibitors |
| WO2004030669A1 (en) * | 2002-09-30 | 2004-04-15 | Schering Corporation | Use of tricyclic amides for the treatment of disorders of calcium homeostasis |
| SI1556358T1 (sl) * | 2002-10-03 | 2007-10-31 | Schering Corp | Enantioselektivna alkilacija tricikličnih spojin |
| EP1660477B1 (en) * | 2003-08-07 | 2008-12-10 | Schering Corporation | Novel farnesyl protein transferase inhibitors as antitumor agents |
| WO2005017160A2 (en) | 2003-08-13 | 2005-02-24 | Children's Hospital Medical Center | Mobilization of hematopoietic cells |
| JP2007529555A (ja) * | 2004-03-18 | 2007-10-25 | ザ ブライハム アンド ウイメンズ ホスピタル， インコーポレイテッド | シヌクレイノパチーを治療する方法 |
| ES2382814T3 (es) | 2005-05-17 | 2012-06-13 | Merck Sharp & Dohme Ltd. | Ácido cis-4-[(4-clorofenil)sulfonil]-4-(2,5-difluorofenil)ciclohexanopropanoico para el tratamiento del cáncer |
| TWI387592B (zh) | 2005-08-30 | 2013-03-01 | Novartis Ag | 經取代之苯并咪唑及其作為與腫瘤形成相關激酶之抑制劑之方法 |
| GB0603041D0 (en) | 2006-02-15 | 2006-03-29 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Therapeutic compounds |
| CA2649288C (en) | 2006-04-19 | 2015-11-24 | Novartis Ag | 6-o-substituted benzoxazole and benzothiazole compounds and methods of inhibiting csf-1r signaling |
| US8173629B2 (en) | 2006-09-22 | 2012-05-08 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method of treatment using fatty acid synthesis inhibitors |
| US20080090242A1 (en) * | 2006-09-29 | 2008-04-17 | Schering Corporation | Panel of biomarkers for prediction of fti efficacy |
| US20110218176A1 (en) | 2006-11-01 | 2011-09-08 | Barbara Brooke Jennings-Spring | Compounds, methods, and treatments for abnormal signaling pathways for prenatal and postnatal development |
| JP4611444B2 (ja) | 2007-01-10 | 2011-01-12 | イステイチユート・デイ・リチエルケ・デイ・ビオロジア・モレコラーレ・ピ・アンジエレツテイ・エツセ・ピー・アー | ポリ（ａｄｐ−リボース）ポリメラーゼ（ｐａｒｐ）阻害剤としてのアミド置換インダゾール |
| CA2679659C (en) | 2007-03-01 | 2016-01-19 | Novartis Ag | Pim kinase inhibitors and methods of their use |
| AU2008254425A1 (en) | 2007-05-21 | 2008-11-27 | Novartis Ag | CSF-1R inhibitors, compositions, and methods of use |
| AU2008269154B2 (en) | 2007-06-27 | 2014-06-12 | Merck Sharp & Dohme Llc | 4-carboxybenzylamino derivatives as histone deacetylase inhibitors |
| WO2009145852A1 (en) * | 2008-04-17 | 2009-12-03 | Concert Pharmaceuticals, Inc. | Tricyclic benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridine derivatives and uses thereof |
| US20110294794A1 (en) * | 2008-11-13 | 2011-12-01 | Link Medicine Corporation | Treatment of proteinopathies using a farnesyl transferase inhibitor |
| WO2010114780A1 (en) | 2009-04-01 | 2010-10-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Inhibitors of akt activity |
| US8765747B2 (en) | 2009-06-12 | 2014-07-01 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Fused 2-aminothiazole compounds |
| PE20121172A1 (es) | 2009-10-14 | 2012-09-05 | Merck Sharp & Dohme | Piperidinas sustituidas con actividad en la hdm2 |
| WO2011090738A2 (en) | 2009-12-29 | 2011-07-28 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Type ii raf kinase inhibitors |
| US8987275B2 (en) | 2010-03-16 | 2015-03-24 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Indazole compounds and their uses |
| WO2011163330A1 (en) | 2010-06-24 | 2011-12-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel heterocyclic compounds as erk inhibitors |
| EP3330377A1 (en) | 2010-08-02 | 2018-06-06 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of catenin (cadherin-associated protein), beta 1 (ctnnb1) gene expression using short interfering nucleic acid (sina) |
| US9029341B2 (en) | 2010-08-17 | 2015-05-12 | Sirna Therapeutics, Inc. | RNA interference mediated inhibition of hepatitis B virus (HBV) gene expression using short interfering nucleic acid (siNA) |
| US8883801B2 (en) | 2010-08-23 | 2014-11-11 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidines as mTOR inhibitors |
| EP2613782B1 (en) | 2010-09-01 | 2016-11-02 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Indazole derivatives useful as erk inhibitors |
| US9242981B2 (en) | 2010-09-16 | 2016-01-26 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Fused pyrazole derivatives as novel ERK inhibitors |
| WO2012058210A1 (en) | 2010-10-29 | 2012-05-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | RNA INTERFERENCE MEDIATED INHIBITION OF GENE EXPRESSION USING SHORT INTERFERING NUCLEIC ACIDS (siNA) |
| WO2012087772A1 (en) | 2010-12-21 | 2012-06-28 | Schering Corporation | Indazole derivatives useful as erk inhibitors |
| AU2012245971A1 (en) | 2011-04-21 | 2013-10-17 | Piramal Enterprises Limited | A crystalline form of a salt of a morpholino sulfonyl indole derivative and a process for its preparation |
| EP2770987B1 (en) | 2011-10-27 | 2018-04-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel compounds that are erk inhibitors |
| US9382239B2 (en) | 2011-11-17 | 2016-07-05 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Inhibitors of c-Jun-N-terminal kinase (JNK) |
| US20150299696A1 (en) | 2012-05-02 | 2015-10-22 | Sirna Therapeutics, Inc. | SHORT INTERFERING NUCLEIC ACID (siNA) COMPOSITIONS |
| RU2660429C2 (ru) | 2012-09-28 | 2018-07-06 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Новые соединения, которые являются ингибиторами erk |
| EP2909194A1 (en) | 2012-10-18 | 2015-08-26 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7) |
| USRE48175E1 (en) | 2012-10-19 | 2020-08-25 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Hydrophobically tagged small molecules as inducers of protein degradation |
| WO2014063054A1 (en) | 2012-10-19 | 2014-04-24 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Bone marrow on x chromosome kinase (bmx) inhibitors and uses thereof |
| RS56680B1 (sr) | 2012-11-28 | 2018-03-30 | Merck Sharp & Dohme | Kompozicije i postupci za lečenje kancera |
| KR102196882B1 (ko) | 2012-12-20 | 2020-12-30 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | Hdm2 억제제로서의 치환된 이미다조피리딘 |
| WO2014120748A1 (en) | 2013-01-30 | 2014-08-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 2,6,7,8 substituted purines as hdm2 inhibitors |
| WO2015034925A1 (en) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
| EP3057956B1 (en) | 2013-10-18 | 2021-05-05 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Polycyclic inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 (cdk7) |
| WO2015058126A1 (en) | 2013-10-18 | 2015-04-23 | Syros Pharmaceuticals, Inc. | Heteroaromatic compounds useful for the treatment of prolferative diseases |
| US9862688B2 (en) | 2014-04-23 | 2018-01-09 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Hydrophobically tagged janus kinase inhibitors and uses thereof |
| WO2015164614A1 (en) | 2014-04-23 | 2015-10-29 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Janus kinase inhibitors and uses thereof |
| US11311519B2 (en) | 2014-05-01 | 2022-04-26 | Eiger Biopharmaceuticals, Inc. | Treatment of hepatitis delta virus infection |
| US10076512B2 (en) | 2014-05-01 | 2018-09-18 | Eiger Biopharmaceuticals, Inc. | Treatment of hepatitis delta virus infection |
| JO3589B1 (ar) | 2014-08-06 | 2020-07-05 | Novartis Ag | مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها |
| KR20160072352A (ko) | 2014-12-12 | 2016-06-23 | 동보씨엠텍산업(주) | 저위투입구 믹서로더 |
| JP6854762B2 (ja) | 2014-12-23 | 2021-04-07 | ダナ−ファーバー キャンサー インスティテュート， インコーポレイテッド | サイクリン依存性キナーゼ７（ｃｄｋ７）の阻害剤 |
| USRE50776E1 (en) | 2015-03-27 | 2026-02-03 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Inhibitors of cyclin-dependent kinases |
| WO2016172342A1 (en) * | 2015-04-21 | 2016-10-27 | Eiger Biopharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical compositions comprising lonafarnib and ritonavir |
| WO2016201370A1 (en) | 2015-06-12 | 2016-12-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Combination therapy of transcription inhibitors and kinase inhibitors |
| AU2016319125B2 (en) | 2015-09-09 | 2021-04-08 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Inhibitors of cyclin-dependent kinases |
| JOP20190055A1 (ar) | 2016-09-26 | 2019-03-24 | Merck Sharp & Dohme | أجسام مضادة ضد cd27 |
| EP3525785B1 (en) | 2016-10-12 | 2025-08-27 | Merck Sharp & Dohme LLC | Kdm5 inhibitors |
| KR102702926B1 (ko) | 2017-04-13 | 2024-09-06 | 사이로파 비.브이. | 항-sirp 알파 항체 |
| EP3706747B1 (en) | 2017-11-08 | 2025-09-03 | Merck Sharp & Dohme LLC | Prmt5 inhibitors |
| US10947234B2 (en) | 2017-11-08 | 2021-03-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | PRMT5 inhibitors |
| WO2019148412A1 (en) | 2018-02-01 | 2019-08-08 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Anti-pd-1/lag3 bispecific antibodies |
| EP3810132A4 (en) | 2018-06-25 | 2022-06-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | TAIRE FAMILY KINASE INHIBITORS AND RELATED USES |
| EP3833668B1 (en) | 2018-08-07 | 2025-03-19 | Merck Sharp & Dohme LLC | Prmt5 inhibitors |
| US12173026B2 (en) | 2018-08-07 | 2024-12-24 | Merck Sharp & Dohme Llc | PRMT5 inhibitors |
| US12552826B2 (en) | 2018-08-07 | 2026-02-17 | Merck Sharp & Dohme Llc | PRMT5 inhibitors |
| US11981701B2 (en) | 2018-08-07 | 2024-05-14 | Merck Sharp & Dohme Llc | PRMT5 inhibitors |
| US12281126B2 (en) | 2018-12-28 | 2025-04-22 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Inhibitors of cyclin-dependent kinase 7 and uses thereof |
| WO2021126731A1 (en) | 2019-12-17 | 2021-06-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Prmt5 inhibitors |
| BR112022012015A2 (pt) | 2019-12-17 | 2022-08-30 | Merck Sharp & Dohme Llc | Inibidores de prmt5 |
| US12441730B2 (en) | 2019-12-17 | 2025-10-14 | Merck Sharp & Dohme Llc | PRMT5 inhibitors |
| EP4673747A1 (en) | 2023-03-02 | 2026-01-07 | CARCIMUN BIOTECH GmbH | Means and methods for diagnosing cancer and/or an acute inflammatory disease |
| WO2026027944A1 (en) | 2024-07-30 | 2026-02-05 | Sairopa B.V. | Anti-sirp alpha antibody formulations and uses thereof |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5089496A (en) * | 1986-10-31 | 1992-02-18 | Schering Corporation | Benzo[5,6]cycloheptapyridine compounds, compositions and method of treating allergies |
| IL111235A (en) * | 1993-10-15 | 2001-03-19 | Schering Plough Corp | Medicinal preparations for inhibiting protein G activity and for the treatment of malignant diseases, containing tricyclic compounds, some such new compounds and a process for the preparation of some of them |
| CA2174105C (en) | 1993-10-15 | 2002-02-12 | W. Robert Bishop | Tricyclic carbamate compounds useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases |
| US5721236A (en) * | 1993-10-15 | 1998-02-24 | Schering Corporation | Tricyclic carbamate compounds useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative diseases |
| US5719148A (en) * | 1993-10-15 | 1998-02-17 | Schering Corporation | Tricyclic amide and urea compounds useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases |
| IL117798A (en) * | 1995-04-07 | 2001-11-25 | Schering Plough Corp | Tricyclic compounds useful for inhibiting the function of protein - G and for the treatment of malignant diseases, and pharmaceutical preparations containing them |
-
1996
- 1996-12-19 IL IL12506296A patent/IL125062A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-12-19 AT AT96944779T patent/ATE309238T1/de active
- 1996-12-19 NZ NZ326035A patent/NZ326035A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-12-19 CA CA002358394A patent/CA2358394C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 MY MYPI96005357A patent/MY119007A/en unknown
- 1996-12-19 PL PL96327312A patent/PL185597B1/pl unknown
- 1996-12-19 DK DK96944779T patent/DK1019392T3/da active
- 1996-12-19 CZ CZ19981938A patent/CZ292791B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-12-19 AR ARP960105785A patent/AR005152A1/es active IP Right Grant
- 1996-12-19 JP JP52368497A patent/JP3193725B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 HU HU9903705A patent/HU228352B1/hu unknown
- 1996-12-19 TW TW085115686A patent/TW350844B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-12-19 BR BR9612203A patent/BR9612203A/pt active Search and Examination
- 1996-12-19 WO PCT/US1996/019603 patent/WO1997023478A1/en not_active Ceased
- 1996-12-19 DE DE69635424T patent/DE69635424T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 EP EP96944779A patent/EP1019392B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 ES ES96944779T patent/ES2248826T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 AU AU13311/97A patent/AU730194B2/en not_active Expired
- 1996-12-19 EP EP03023192A patent/EP1380581A1/en not_active Withdrawn
- 1996-12-19 CA CA002240846A patent/CA2240846C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 SK SK861-98A patent/SK86198A3/sk unknown
- 1996-12-19 CN CNB961800755A patent/CN1326847C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1996-12-19 KR KR1019980704766A patent/KR100295224B1/ko not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-06-19 NO NO19982878A patent/NO318232B1/no not_active IP Right Cessation
- 1998-06-19 MX MX9804956A patent/MX9804956A/es active IP Right Grant
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL185597B1 (pl) | Tricykliczne amidy, środek farmaceutyczny i ich zastosowania | |
| US6214828B1 (en) | Tricyclic amides useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative disease | |
| EP0819128B1 (en) | Tricyclic compounds useful in the treatment of cell proliferative disorders | |
| EP0815099B1 (en) | Tricyclic amide compounds useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases | |
| US6277854B1 (en) | Tricyclic antitumor farnesyl protein transferase inhibitors | |
| CA2266015C (en) | Tricyclic antitumor compounds being farnesyl protein transferase inhibitors | |
| EP0989978B1 (en) | Tricyclic keto amide derivatives useful as farnesyl protein transferase inhibitors | |
| NZ501570A (en) | Benzo(5,6) cycloheptapyridine cyclic ureas and lactams useful as farnesyl protein transferase inhibitors | |
| WO1998057949A1 (en) | Novel tricyclic sulfonamide inhibitors of farnesyl-protein transferase | |
| AU769687B2 (en) | Tricyclic amides useful for inhibition of G-protein function and for treatment of proliferative diseases | |
| AU753863B2 (en) | Benzo(5,6)cyclohepta(1,2-B)pyridine derivatives for the inhibition of farnesyl protein transferase | |
| EP0915869B1 (en) | Novel tricyclic n-cyanoimines useful as inhibitors of farnesyl-protein transferase | |
| HK1025571B (en) | Tricyclic amides useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases | |
| HK1058195A (en) | Tricyclic amides useful for inhibition of g-protein function and for treatment of proliferative diseases | |
| HK1022908B (en) | Benzo(5,6)cyclohepta(1,2-b)pyridine derivatives for the inhibition of farnesyl protein transferase | |
| HK1018446B (en) | Tricyclic antitumor compounds being farnesyl protein transferase inhibitors |