PL186385B1 - Zastosowanie 3-tlenku 2,4-diaminopirymidyny lub jednej z jego soli w leczeniu zaburzeń dojrzewania i strukturalizacji kolagenu - Google Patents

Abstract

1. Zastosowanie 3-tlenku 2,4-diaminopirymidyny (2,4-DPO) lub jednej z jego soli fi- zjologicznie dopuszczalnych jako substancji aktywnej do wytwarzania kompozycji tera- peutycznej do uzytku farmaceutycznego lub weterynaryjnego, wystepujacej w postaci, nadajacej sie do podawania zewnetrznego, droga transdermalna lub sródskórna, a przeznaczonej do leczenia zaburzen dojrzewania i strukturalizacji kolagenu. PL PL PL

Description

Przedmiotem niniejszego wynalazku jest zastosowanie 3-tlenku 2,4-diaminopirymidyny lub jednej z jego soli, jako substancji aktywnej do wytwarzania kompozycji terapeutycznej do użytku farmaceutycznego lub weterynaryjnego, przeznaczonej do leczenia zaburzeń dojrzewania i strukturalizacji kolagenu.

Otrzymanie pasm prokolagenu natywnego wymaga hydroksylowania pewnej liczby reszt prolilowych i lizylowych preprokolagenu wewnątrz retikulum endoplazmatycznego szorstkiego, następnie glikozylowania reszt hydroksylizylowych w aparacie Golgiego. To dojrzewanie kolagenu było przedmiotem licznych badań.

A wiec minoksydyl, czyli 3-tlenek 2,4-diamino-6-piperydynopirymidyny opisany już i stosowany w leczeniu pewnych przypadków nadciśnienia oraz w leczeniu wyłysienia związanego z hormonami męskimi, był przedmiotem licznych badań jako specyficzny inhibitor hydroksylazy lizylowej, enzymu, biorącego udział w dojrzewaniu kolagenu.

Badania Murada i in., w tym przedmiocie, opublikowane w Arch. of Biochem.Biophys.Vol.292, nr 1; str. 234-238 (1992) iVol. 308 nr 1; str. 42-47 (1994) istotnie

186 385 pozwoliły na wykazanie, że zdolność hamowania hydroksylazy lizylowej wymaga obecności trzeciorzędowej grupy aminowej w pozycji para w stosunku do grupy N-tlenku pierścienia

2.4- diaminopirymidyny i że korzystnie grupa ta powinna być grupą, piperydynową jak w minoksydylu.

Otóż obecnie stwierdzono w sposób zaskakujący i zupełnie nieoczekiwany, że 3-tlenek

2.4- diaminopirymidyny, czyli 2,4-DPO (w dalszym ciągu), chociaż nie zawiera trzeciorzędowej grupy aminowej w pozycji para wobec grupy N-tlenku pierścienia 2,4-diaminopirymidyny, pozwala na inhibicję specyficzną hydroksylazy lizylowej.

Związek ten został już opisany w WO-92/01437 jako czynnik aktywny do traktowania kosmetycznego przy wypadaniu włosów, przez stosowanie zewnętrzne. Jednakże odwrotnie niż minoksydyl, 2,4-DPO nie posiada żadnego działania przeciw nadciśnieniu; wykazuje więc szczególnie zadowalającą nieszkodliwość, mając aktywność hamującą hydroksylazę lizylową, taką samą lub nawet wyższą od aktywności minoksydylu.

Przedmiotem niniejszego wynalazku jest więc zastosowanie 2,4-DPO lub jednej z jego soli jako substancji aktywnej do wytwarzania kompozycji terapeutycznej do użytku farmaceutycznego lub weterynaryjnego, przeznaczonej do leczenia zaburzeń dojrzewania kolagenu u ludzi i zwierząt.

W dalszym ciągu wyrażenie „2,4-DPO” będzie oznaczało nie tylko sam 2,4-DPO, ale również jedną z jego soli, takich jakie określono poniżej.

Przez zaburzenia dojrzewania kolagenu powinno się rozumieć według wynalazku każdą nie pożądaną akumulację kolagenu, a zwłaszcza każde zaburzenie struktury matrycy kolagenowej tkanki skórnej lub spojówki gałki ocznej; zaburzenia te mogą mieć pochodzenie samorzutne, ur^^owe lub pooperacyjne. Wśród tych zaburzeń można zwłaszcza wymienić witreoretinopatię, układowe zapalenia i stwardnienia skóry, stwardnienia skóry wywołane przez promienie ultrafioletowe oraz bliznowce wtórne.

Zastosowanie 2,4-DPO według wynalazku pozwala więc na uzyskanie przede wszystkim poprawy wyglądu estetycznego leczonego pacjenta.

O ile według wynalwzku frzktowanie może być lecynieze, kozeystniz isti^suje się je zępobiegawczo, to znaczy podczas okresu, w którym zachodzi strukturallzacja i w następstwie akumulacja kolagenu, co ma miejsce zwłaszcza w okresie bliznowacenia.

2,4-DPO można stosować do wytwarzania kompozycji terapeutycznej, występującej w postaci, nadającej się do podawania zewnętrznego, transdermalnegt^ lub śródskórouan.

Przez sole fizjologicznie dopuszczalne powinno się rozumień według wynalazku sole addycyjne kwasu, takiego jak kwas siarkowy, chlorowodorowy, fosforowy, octowy, benzoesowy, salicylowy, glikolowy, acetylnamiooncinwy, bursztynowy, nikotynowy, winowy, maleinowy, mutaonsulfonowy, pikrynowy i mlekowy.

Gdy kompozycja terapeutyczna występuje w postaci nadającej się do podawania zewnętrznego, zawartość w niej 2,4-DPO zazwyczaj wynosi 0,0001-5% wagowych, a korzystnie 0,01-2% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

Podłoże może mieć charakter bardzo różny, ale korzystnie jest środowiskiem fizjologicznie dopuszczalnym dla stosowania zewnętrznego, oczywiście kompatybilnym z substancją aktywną.

W tym środowisku 2,4-DPO może znajdować się w postaci rozpuszczonej albo w postaci zdyspergowanej, a zwłaszcza w postaci sproszkowanej.

Środowisko fizjologicznie dopuszczalne może stimowić woda lub mieszanina wody i rozpuszczalnika, lub mieszanina rozpuszczalników. Spośród rozpuszczalników, które nadają się do użycia, można wymienić zwłaszcza niższe alkohole o C1-C4 jak etanol, ^propanol, turt-butaonl, glikole amila-iowe etery alkilowe glikolu alkilenowugn i glikolu dialkilenowugn, takie jak eter monoetylowy glikolu etylenowego, eter monnmutylowy glikolu propylenowego i eter mnooetylog^,y glikolu dietyluoowego. Kompozycje te przeznaczone do użytku zewnętrznego mogą również zawierać co najmniej jeden nooweocjooaloy dodatek lub składnik czynny.

Spośród nich można zwłaszcza wymienić filtry UV.A i UV.B, jak mufoksycyoamoniaoy i pochodne Ceoznfenonu, pr/eciwutleoiaczu i/lub substancje wychwytujące woIou rodniki, takie jak DMSO, α-ionnferol, BHA, BHT, nadtlenek dysmutazy, nawilżacze, takie jak mocz4

186 385 nik, gliceryna, kwas mlekowy, hydroksykwasy, tiamorfolinon i jego pochodne oraz pochodne kwasu pirolidonokarboksylowego zwłaszcza jego sole sodowe i potasowe, środki przeciwzapalne steroidowe i niesteroidowe, takie jak hydrokortyzon, β-metazon, deksametazon, kwas acetylosalicylowy, indometacyna, izoprofen, witamina D lub kwas niflumowy oraz środki przeciwbakteryjne, takie jak substancje należące do grupy makrolidów, piranozydów i tetracyklin, takich jak erytromycyna.

Kompozycje te mogą również zawierać konserwanty, stabilizatory, regulatory pH, modyfikatory ciśnicnia o smotycznego i emulgatory.

Kompozycje te pyzeznacznnz do użytku zewnętrznego na osnowie 2,4-DPO mogą występować w różnych postaciach, takich jak np. w postaci lotionów, żeli, pianek, dyspersji pęcherzykowych, sprayów lub pianek aerozolowych.

Kom^yozycje te mogą także występować w postaci kompozycji zżelowanych lub zagęszczonjmch. Spośród ^yomppz^ycji zżelowanych, można .szczególnie wymienić; tnlkie, które są zasadniczo wodne, ale zżelowane przez Zeterobiopolisachaaydy, takie jak guma ksantanowa, sklieroglukany lub pochodne calulozy, a w sz^cgó^^ etery celuloey, albo też kompozycje wodno-alkoholowe zżelowagg przez polihydaoksyetylpayaylage lub wotaerylgny. Wśród wodnych kompozycji zagęszczonych, można w^omienić te, które otrzymano zwłaszcza przy użyciu kwasu polⁱakaylowego rjiecinwanggp prmez cćennik wielofunkcyjny, waki jakte komercjalizuje pod nazwą ^orbopolg” towarzystwo Gρρdr^jch. Oczy/wiśnie jent jednak możliwe użycie jako środka zggęszcrającego ka^rgo czejjgika zwykle siρspwenego w farmacji lub deamofarmacei.

Zeauyętrenie 2,4-DPO zwykle stosuje się na traktowane części ciała w ilości 0,0001-5 mg/kg'dzień, a korzystnie 0,001-1 mg/kg/dzień. Leczenie kontynuuje nię zwykle przez cały okrei, w którym zachodzi akumulacja kolagenu i można prowadzić jy po neim jeazłze przez 90 dnii.

Można również, według wegalazek, stosować 2,4-DPO do wytwarzania kompozycji terapeutycznych przeznauzon^uch do podawania drogą transdermalną

Zawartość 2,4-cDPO wenopi wtedy zwykle 0,00^l-^e%, a korzystnie wymosi 0,01-2% w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

Podłoże używane w tych kompozycjach wybiera się zazwyczaj spośród kopolimerów lub kopolimerów winylowych, do których dodaje się ewentualnie promotor penetracji.

Kompozycje przeugazzoge do stosowania taansdermalnćgp można podawać zwłaszcza przy użyciu układu samoprzylepnego, przylegającego do skóry i zapewniającego podczas co najmniej 2^u godziu, pryei^ćłie w sposób ciągły kon^gΌⁱPwanej ilości substii^cji gkpewnej przez skórę do krwiobiegu.

Wśkócl tych układów można zwłaszcza wymienić układy opisane w zgłoszeniu FR8 811 685 (2 635 979)., jak rówgie^a te, które kpmea^yjaⁱizuje towgez^pćtwo Tilderm.

2,4-DPO mo/ma róeugież stosować do wytwcazgg^ra kompozycji terapeul^ycznecZ przeznaczonych do podawania drogą śródskórną.

ya_wartość 2,4-DPO zżawecaaj megpsi wtedy 0,0001-5% wagowych, a korzystnie wynosi 0,01-1% wagowego w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

2,4-DPO ma wtedy postać rozposzczoną w podłożu fizio^lpgiczme dopuszczalnym, takim jak fizjologiczny roztwór soli.

Kompozy^e pżaeznuczone do ćoPgmggig śrópskórnego mogą ponadto zawierać różne środki tetómcze, takte jak np. środki ćraucijv^gaeteżej'ne, prpey^lmutlegiacpe i ca^mjjiiei przecimzaćalne steroidowe lub niesteroidomz.

2,4-DPO pppą.e są proⁿąśródpk^prngzgzmeczgj w pwce mniejszej lub równej 5 mg/ke/dzieó, a korzystate o d 0,0)001 do 1 mg/k^cteień. Leczenip zaawyceą) stosuie są. w ciągu całego okresu, tn któaem zachodzi akumulacja kolagenu i możm je ewentua⁾gie po nim epgtygep nmać w ciągu 30 dni.

Zhogiaż powyżej pdnizsinno się w szczególności do kompozycji przeznaczonych do użytku fgπuacertvcagzgo, rozumie się, że można je sporządzić w postaci bardziej odpowiepuiej do użytku weterynaryjnego zwłaszcza w teczeniu koniowatyuh, o^teh jak koo .

Krmpozyc)e wytwarza są znanymi metodami, zateżnte od drogi ćpdategj^po lub użytku, do jakiego są przeznaczone.

186 385

Obecnie tytułem objaśnienia zostaną podane wyniki badań, ukazujące skuteczność 2,4-DPO jak również różne przykłady kompozycji terapeutycznych.

I Badanie OoRowonia ekspresji mRNA, kodujących hydroksylazę lizylową (LH).

Wychodząc z hodowli fibroblastów, pochodzących z pochewek łącznych zewnętrznych włosa ludzkiego, piątego przesiewu, wysiewa się 2-10⁵ fibroblastów na płytki Petriego o średnicy 60 mm, zawierające środowisko hodowli typu „Eagle”, zmodyfikowane Dulbecco i uzudcłnio60 2 mM L-glutaminy, 1 mM pirogronianu sodu, 100 jednostkami/ml penicyliny G, ^{i u}0 }..iji/⁶t1 υΓερίοϊΏγο-ην- ^o, 250 mRml iU^tfo^t6I'⁰^^u i ^1d% oso cza zptods ciel ęcego kcmercjobzowAegu przoo towarzystwo Giboo BRL.

Po 24 godamzcłt hodow^a w tempnraiipze 37°C w cieplarce o atmosferze, zawierającej 95% powteOrcy/5% CO₂, -^00(^0^0 w(entepio sit; na śroOowioUo analoRŻczne, niz wawiarająj C5jednaa osoczś z płodu αζ^Ϊ8. KomórGi inkubujn oię lta-Wpiniz w tempcratunno 30^^c^ał przez c gedn^^y -fig. t A) l/ob u 8 eodzm (fig. IB) in />0^tϊor^oS<ci ' mM minokąo-dylu, u mM. nł-Dzez tog 5 z26ó siagcziAu minoksydyto.

G MajOago prRarato komórkowego ekstrahuje się całkowity mRNA metodą opisaną w„Short pratocWs Ui molecu/z bio/omą, HamanO mediciU sd/oow 2.óVilley Ad son pu-pisOna WFS”. u» prym owannyGkuic sia gb oa grodze uomiarów 2pekCofotomeWcznyo6 UV w 28Ό nm.

Aby omożhwićz2ofieę eksyresji mRNA OokoauJ'o sięlz-ι yowietemóonuez taćkochową reakcję by Ui^^jlzrniji OPGR)Wozhodząc aj μρ rełkowitego RNA otrzymAego poprzednio z każdego preparatu komórkowóOhl ayaj)Ίyzujc siy DNA komplemznioyny ο6 cWnO. pa edmocą Kastawy po p0wrotkzj trans/zmpcji kómercjabeowAeżP /oG nazwa „Finy) StrAd CDNA Zyą!esis ap’’ zroaa ittnej rao5iwoPhaπzoGla LKO Ηiotechnoiygn AB. Frakcję, równoważną DNA iomp”emzątnrzago uoóceazto oórzsmanego powieto się nactępnie mato0ą z^^O^łz wwAą DNA w obeeoośni unetęppjącdnh st^i^ó^św' spepyficznych 6ydjrop5yl οζν ΙίζνΚ^Ό/ )ΌΗó i hyTeoΗsylEeo -^r^olitowęj (PH):

Starter LH sensowny: 5’ GAAATGGGCCATGTGAGAGCG3’

Staatea LH 5’ CATTGGGGCCTATAGCCGGCACG3'

Starter PH nensowny: GTGGATGGAGAGAACCTTGGGGCa:

Starter PH s^n^i^^n^-wnyGT^i^^i^A^rDrZę^lDa^i^l^iai^^lACAT^^GS’

So .Β^ΡΉ' Zońcowwj ó0 μΐ.

di yi mieszaninc' o-ąr.ymnnej po PCR nAOsi się na żel do elektroforezy o 2% agarozy w obecoość G,5 zOnT^' bromko a6yj)om (atRdiom) i s>ufoA do a1ektąoforzzu Tri s octA EDTA Πάει 1x.

Po migracji w ciągu 1 godziny w polu elektrycznym o 100 V, intensywność pasm, odpo wiaPzj ąoych mRNA, kodujoyom oapow-edmo hydroksylazę li zyjowe i ÓΗdryksolazo ptdÓilową Aahzsj e się i PwoyiyfiauJs zz p0moeyawnlióatoro óbooęÓ2z ó oarogromowoma 0ęmazcjalizowanego pod noKwą „Bi2korfil®’ ’ przez iowooystwo Wbibert Lo-puzi.

Wedtog tej d amzj .nore-torz ope(acvjnct: jaką o-i-^o uurzednio. mierzy się również wskaźWe względy okspresjl mUNA, Uodującydo hydroCo6lazę iizytową i heaiiOksęjuóa 'κν -iłową po - oodainach ipo j got/maek 1apjaotii fihóoblzoiów bez żódnaąo U^rdiowanta.

Wyrnki przedsta ηνόοηο w -i^. 'A i j B.

Stwic/j)o.a .sids Ow iznwWazjc fiProblrstów w ciągu 3 godzin w obecności minoksydylu lub siarcwanu minoksydyto zbonjojfZE wskaźnik akjprcoji wzgiojine- mRNA, ^oGij^c^ksó^ óydroksyiazyn żyłowy wyrosi mi wtedy . Po 3 gzól^l^^t^h -ó6yCacji w odrcności 2,4-DPO wskaźnik ekspresji względnej mRNA, kodujpcych hydraOch!ank bzytowąwynn-i G,55.

.^440Ρ<0 Uzmuja wlęc ł^^<^zwt eksjoesśę mRNA, kodujących hydroksylazę lizylową, niż minokcydd) lub jugo -iarczAOwyAotog.

AzKlogióznawyniki oOoy60Ηjó ony yc 18 godzinach hodowli w obecności różnych testowapynh mhibitoraw.

'μο lympo U wodzinach hodowli w obecności minoksydylu lub siarczAu minoksydylu wskażplk e^t^Rey) jcz.glęnncj m^NW, kojtusycyzh Ηοή'ΌΡκνΝό^ pooliiową o6Ói^^, yoiióiąiąp adooą5eilnio (.2a i wzC,

186 385

Po 3 godzinach inkubacji w obecności 2,4-DPO wskaźnik ekspresji względnej mRNA, kodujących hydroksylazę pndilco^'ą.jest także wyższy i jest rzędu 1,3.

Po 18 godzinach hodowli w obecności minoksydylu, siarczanu minoksydylu lub 2,4-DPO wskaźniki ekspresji względnej mRNA, kodujących hydroksylazę prolilową wynoszą odpowiednio 1,6, 1,3 i 1,15.

Nie zauważa się więc hamowania wskaźnika ekspresji względnej mRNA, kodujących hydroksylazę prolilową w odpowiedzi na te trzy związki.

Testowane związki wykazują więc specyficzną aktywność hamującą wobec hydroksylazy lizylowej.

II Badania c^^ialania 2,n-DPO na siatkę kolagenową obecną w matrycy zewnątrzkomórkowej hodowanych fibroblastów.

Do hodowli pierwotnej fibroblastów skórnych ludzkich, pochodzących z plastyki sutka, w środowisku DMEM uzupełnionym 10% osocza z płodu cielęcego, dodaje się 10 μΜ 2,4-DPO.

Po trzech dniach przeprowadza się lizę komórek przez wstrząs hipbbsmbtyczon i ustala się osad kolagenu 5% roztworem aldehydu gitarowego.

Następnie obserwuje się matrycę zewnątrzaomótkową fibroblastów za pomocą mikroskopu elektronowego z przemiataniem.

Obserwuje się również w mikroskopie elektronowym z przemiataniem matrycę zewnąttzaomótkową hodowli pierwotnej fibroblastów nie traktowanych.

Fotografie te przedstawiono na fig. 2 i 3.

Jak można stwierdzić na podstawie fotografii na fig. 2 i 3, matryca óewnątrókomótkbwa fibroblastów nie traktowanych przedstawia wielkie włókniste skupiska, otaczające rozległe pola, pozbawione siatki kolagenowej, podczas gdy matryca zewnątrzkbmótabwa fibroblastów traktowanych 2,4-DPO wykazuje zorganizowanie dużo bardziej regularne, w którym nie obserwuje się wielkich włóknistych skupisk i gdzie rozmiary pól pozbawionych siatki kolagenowej są dużo mniejsze.

Zastosowanie 2,4-DPO do hodowli fibroblastów prowadzi więc do reorganizacji przestrzenoej miatosiatai włókien kolagenu.

Przykłady kompozycji terapeutycznych

Przykład 1: Krem do skóry

Krem do skóry sporządza się przez zmieszanie następujących składników:

- 2,4-DPO 0,5 g

- Ceteareth 30 7 g

- Stearynian glicerylu 2 g

- Alkohol cetylowy 1,5 g

- ablidimetylosiloksao 1,5 g

- Olej parafinowy 11 g

- Gliceryna o czystości farmakbpealnej 20 g

- Konserwanty q.s

- Woda mineralizowana q.s.ad 100 g

Przykład 2: Lotion do rozpylania na skórę

Lotion do rozpylania na skórę sporządza się przez zmieszanie następujących składników:

- 2,4-DPO 0,25 g

- Etanol 30 g

- Woda zdeminetalizowaoa q.s.ad 100g

Przykład 3: Roztwór do wstrzyknięć

Roztwór do wstrzyknięć na drodze śródskórnej sporządza się przez zmieszanie następujących składników:

- 2,4-DPO 0,7 mg

- Fizjologiczny roztwór soli (NaCl 9 g/H2O q.s.ad 100 ml) q.s.ad 1 ml

186 385

FIGURA 2

Maaryca zewnątrzkomórkowa fibroblastów nie traktowanych

FIGURA 3

Matryca zewnątr^i^i^c^mór^^^c^wa fibroblastów traktowanych 2,4-DPO

Strona wymienna /reguła 25//

186 385

Ekspresja względna mRNA

FIGURA

C : kontrola

Z.i : minoksydyl :25 : siarczan minoksydylu

2,i-E?0 : o-olenek 2,i-diaminopiryaidyny

LH : hydroksylaza lizylową py : hydroksylaza prolilowa

Claims (11)

1. Zastosowanie 3-tlenku 2,4-diaminopirymidyny (2,4-DPO) lub jednej z jego soli fizjologicznie dopuszczalnych jako substancji aktywnej do wytwarzania kompozycji terapeutycznej do użytku farmaceutycznego lub weterynaryjnego, występującej w postaci, nadającej się do podawania zewnętrznego, drogą transdermalną lub śródskórną, a przeznaczonej do leczenia zaburzeń dojrzewania i strukturahzacji kolagenu.

2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że sole wybiera się spośród soli addycyjnych kwasu, należącego do grupy utworzonej przez kwas siarkowy, chlorowodorowy, fosforowy, octowy, benzoesowy, salicylowy, glikolowy, acetyloaminooctowy, bursztynowy, nikotynowy, winowy, maleinowy, metanosulfonowy, pikrynowy i mlekowy.

3. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja ma postać, nadającą się do podawania zewnętrznego, przy czym zawartość 2,4-DPO wynosi 0,0001-5% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

4. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że zawartość 2,4-DPO wynosi 0,01-2% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

5. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja ma postać, nadającą się do podawania drogą transdermalną, przy czym zawartość 2,4-DPO wynosi 0,001-5% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

6. Zastosowanie według zastrz. 5, znamienne tym, że zawartość 2,4-DPO wynosi 0,01-2% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

7. Zastosowanie według z zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja ma postać, nadającą się do podawania drogą śródskórną, przy czym zawartość 2,4-DPO wynosi 0,0001-5% wagowych w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

8. Zastosowanie według zastrz. 7, znamienne tym, że zawartość 2,4-DPO wynosi 0,01-1% wagowego w stosunku do całkowitego ciężaru kompozycji.

9. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia zaburzeń dojrzewania kolagenu u ludzi.

10. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia zaburzeń dojrzewania kolagenu u zwierząt.

11. Zastosowanie według zastrz. 10, znamienne tym, że zwierzęciem jest koniowaty.