PL187982B1 - Szczepionka przeciw grypie - Google Patents

Szczepionka przeciw grypie

Info

Publication number
PL187982B1
PL187982B1 PL98325722A PL32572298A PL187982B1 PL 187982 B1 PL187982 B1 PL 187982B1 PL 98325722 A PL98325722 A PL 98325722A PL 32572298 A PL32572298 A PL 32572298A PL 187982 B1 PL187982 B1 PL 187982B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
influenza
surface antigen
cell culture
influenza viruses
dna
Prior art date
Application number
PL98325722A
Other languages
English (en)
Other versions
PL325722A1 (en
Inventor
Scharrenburg Gustaaf J.M. Van
Rudi Brands
Original Assignee
Duphar Int Res
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8228174&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL187982(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Duphar Int Res filed Critical Duphar Int Res
Publication of PL325722A1 publication Critical patent/PL325722A1/xx
Publication of PL187982B1 publication Critical patent/PL187982B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16051—Methods of production or purification of viral material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
    • C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

1. Szczepionka oparta na powierzchniowym antygenie grypy znamienna tym, ze w ytw arza sie j a z w iru sów grypy hodow anych w hodow li kom órek zw ierzecych i o zaw artosci D N A kom órki go sp o d arza rów nej lub m niejszej od 25 pg na daw ke. 3. S posób w ytw arzanie bialek pow ierzchniow ego antygenu z w irusów grypy hodow anych w ho- dow li kom órek zw ierzecych, znam ienny tym, ze obejm uje nastepujace etapy: a. dzialanie enzym u traw iacego D NA na caly plyn z hodow li kom órek zaw ierajacy w irus, oraz b. dodanie detergentu kationow ego, po czym nastepuje izolacja bialek pow ierzchniow ego antygenu. 4. Sposób w edlug zastrz. 3, znamienny tym, ze dzialanie enzym u traw iacego D N A nastepuje po d - czas hodow ania w irusów grypy w hodow li kom órek. 5. S posób w edlug zastrz. 3, znam ienny tym, ze detergent kationow y sklada sie glów nie ze zw iaz- ku o ogólnym w zorze: w którym R 1 , R 2 i R 3 sa takie sam e lub rózne i kazdy oznacza grupe alkilow a lub arylow a, lub R 1 i R2 razem z atom em azotu do którego sa przylaczone tw orza 5- lub 6 - czlonow y nasycony pierscien hete- rocykliczny i R 3 oznacza grupe alkilow a lub arylow a, lub R 1 , R 2 i R 3 razem z atom em azotu do którego sa przylaczone tw orza 5- lub 6 - czlonow y pierscien heterocykliczny, nienasycony przy atom ie azotu, R 4 oznacza grupe alkilow a lub arylow a, a X oznacza anion. PL PL PL

Description

Niniejszy wynalazek dotyczy szczepionek opartych na powierzchniowym antygenie grypy możliwych do otrzymania poprzez wytwarzanie z wirusów grypy namnażanych w hodowli komórek zwierzęcych i sposobu przygotowania białek powierzchniowych antygenów wirusów grypy hodowanych w kulturze komórek zwierzęcych.
Cząstka wirusa grypy ma wielkość około 125 nm i składa się z rdzenia zawierającego kwas rybonukleinowy (RNA) związany z nukleoproteiną, otoczonego otoczką wirusową o strukturze dwuwarstwy lipidowej. Warstwa wewnętrzna otoczki wirusa jest złożona głównie z białka macierzy a warstwa zewnętrzna zawiera w większości lipid pochodzący z komórki gospodarza.
187 982
Tak zwane „białka powierzchniowe”, neuraminidaza (NA) i hemaglutynina (HA) występują w postaci kolców na powierzchni cząstki wirusa.
Większość handlowo dostępnych inaktywowanych szczepionek przeciw grypie stanowią tak zwane „szczepionki rozszczepione” oraz „szczepionki podjednostkowe”.
„Szczepionki rozszczepione” są wytwarzane przez poddanie całego wirusa grypy działaniu detergentu o roztwarzającym stężeniu i następnie usunięcie detergentu oraz większości wirusowego materiału lipidowego.
„Szczepionki podjednostkowe” przeciw grypie w przeciwieństwie do „szczepionek rozszczepionych” nie zawierają całych białek wirusa. Zamiast tego, „szczepionki podjednostkowe” są wzbogacone w powierzchniowe białka odpowiedzialne za powstawanie po szczepieniu pożądanych przeciwciał (ochronnych) neutralizujących wirus.
Większość z handlowo dostępnych szczepionek przeciw grypie pochodzi z wirusów grypy hodowanych w zarodkach kurzych. Jest jednakże powszechnie wiadomo, że hodowanie wirusa grypy w jajkach kurzych przeznaczonego do wytwarzania szczepionki posiada liczne wady:
1. Zmienna (mikro)biologiczna jakość jajek może być przyczyną niepowodzenia w takim sposobie wytwarzania.
2. Nie istnieje możliwość przystosowania takiego sposobu wytwarzania do warunków zwiększonego zapotrzebowania np. w przypadku poważnej epidemii bądź pandemii, ze względu na problemy logistyczne związane z niemożnością pozyskania dużej ilości odpowiednich jajek.
3. Przeciwwskazane jest stosowanie w ten sposób wytwarzanej szczepionki u osób uczulonych na białka kurze i/lub białka jajek.
Rozwiązaniem tych problemów może być hodowanie wirusa grypy w kulturze tkankowej. Jest oczywistym, iż taka metoda produkcji posiada liczne zalety:
1. Linie komórkowe kultury tkankowej są dostępne w dobrze określonych systemach bankowania komórek wolne od (mikro)biologicznych zanieczyszczeń, przez co znacznie poprawia się powtarzalność i uzyskiwany jest produkt o wyższej jakości.
2. Wzrastają szanse otrzymania wystarczającej ilości dostępnej szczepionki w przypadku zagrożenia poważną epidemią lub pandemią..
3. Otrzymany materiał wirusa grypy jest odpowiedni dla alternatywnych dróg podawania (doustnie, donosowo, wziewnie).
4. Z punktu widzenia WHO (Światowej Organizacji Zdrowia), technologia taka pozwoli na opóźnienie zalecania corocznego stosowania kompozycji szczepionki (z połowy lutego na połowę marca), zwiększając możliwość dopasowania szczepionki do rozprzestrzeniających się szczepów wirusa.
Jednakże, pozostaje poważny problem w odniesieniu do tkankowej kultury wirusa grypy, gdyż materiał genetyczny z ciągłej linii komórek może pozostać w szczepionce.
Problem ten stanowi zagrożenie, które jeśli mu nie zapobiec może być przyczyną odrzucenia przez organy nadzorcze, ze względów bezpieczeństwa, starań o zezwolenie na produkcję takich szczepionek. Na przykład, U.S. Food and Drug Administration (Urząd do spraw Żywności i Leków) wymaga, aby produkty biotechnologiczne przeznaczone dla ludzi nie zawierały więcej niz 100 pg DNA komórek gospodarza na dawkę.
Dlatego więc, niniejszy wynalazek dostarcza metody wytwarzania preparatu antygenu powierzchniowego wirusa grypy w celu wykorzystania go w szczepionce, która jest bezpieczna i nie zawiera niedopuszczalnych ilości szkodliwego materiału genetycznego oraz sprosta wymaganiom stawianym przez organizacje nadzorcze. Jednakże, pożądanym było przygotowanie szczepionki przeciw grypie o zawartości DNA komórki gospodarza znacznie mniejszej niż 100 pg/dawkę i zaskakującym jest, iż to osiągnięto.
W związku z tym niniejszy wynalazek dotyczy szczepionki opartej na antygenie powierzchniowym grypy możliwej do otrzymania poprzez wytwarzanie z wirusów grypy hodowanych w kulturze komórek i zawierającej DNA komórki gospodarza w ilości równej bądź mniejszej od 25 pg na dawkę.
W szczególnym wykonaniu niniejszy wynalazek ujawnia sposób wytwarzania białek powierzchniowego antygenu użytecznych w przygotowywaniu szczepionki przeciw grypie o tak
187 982 niskiej zawartości DNA z wirusów grypy hodowanych w kulturze komórek obejmujący następujące etapy:
a. działanie enzymu trawiącego DNA na cały płyn z kultury komórkowej zawierający wirus, oraz
b. dodanie detergentu kationowego, po czym następuje wyizolowanie białek powierzchniowego antygenu.
Sposób według wynalazku może być stosowany podczas produkcji szczepionek zawierających rozmaite szczepy wirusów grypy takie jak wirusy typowe dla grypy ludzkiej, grypy świńskiej, wirusowego zapalenia tętnic koni, czy grypy ptasiej.
Zgodnie z niniejszym wynalazkiem kultura komórek zwierzęcych może zawierać komórki pierwotne, takie jak fibroblasty zarodka kurczaka (CEF, Chicken Embryo Fibroblasts) lub ciągłą linię komórkową taką jak komórki nerki psa Madin Darby (MDCK, Madin Darby Canine Kidney Cells), komórki jajnika chomika chińskiego (CHO, Chinese Hamster Ovary Cells) oraz komórki Vero.
Działanie enzymu trawiącego DNA na cały płyn zawierający wirus może być prowadzone bezpośrednio w fermentorze, ewentualnie podczas wzrostu komórek i procesu hodowania wirusa.
Odpowiednimi przykładami enzymów trawiących DNA są Dnazy (np. klasyfikowane jako EC 3.1.21 i EC 3.1.22) oraz nukleazy (np. klasyfikowane jako EC 3.1.30 i 3.1.31).
Odpowiednie detergenty kationowe zgodnie z niniejszym wynalazkiem przeważnie składają się ze związku o ogólnym wzorze:
R1 \ +/R3 γ w którym: Ri, R2 i R3 są takie same bądź różne i każdy oznacza grupę alkilową lub arylową lub Ri i R2 razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, tworzą 5-cio lub 6-cio członowy nasycony pierścień heterocykliczny i R3 oznacza grupę alkilową lub arylową lub Ri, R2 i R3 razem z atomem azotu, do którego są przyłączone, oznaczają 5-cio lub 6-cio członowy pierścień heterocykliczny nienasycony przy atomie azotu, R4 oznacza grupę alkilową bądź arylową oraz X oznacza anion.
Przykładami takich kationowych detergentów są sole cetylotrimetyloamoniowe, takie jak bromek cetylotrimetyloamoniowy (C.T.A.B), i sól mirystylotrimetyloamoniowa. Odpowiednimi detergentami są także lipofektyna, lipofektamina, DOTMA.
Istnieje możliwość uzupełnienia tych detergentów kationowych detergentami niejonowymi takimi jak Tween.
Izolacja białek powierzchniowego antygenu następująca po etapie potraktowania detergentem może przykładowo zawierać następujące etapy:
1. Oddzielenie cząstki RNP od białek powierzchniowego antygenu, np. poprzez odwirowywanie bądź też poprzez ultrafiltrację, oraz
2. Usunięcie detergentu z białek powierzchniowego antygenu, np. poprzez oddziaływania hydrofobowe detergentu z odpowiednią żywicą (taką jak Amberlite XAD-4) oraz/lub poprzez ultra(dia)filtrację.
Zaskakująco sposób według niniejszego wynalazku dostarcza produktu niezwykle ubogiego w swej zawartości w DNA pochodzące z komórek zwierzęcych. Stężenia DNA, tak niskie jak 25 pg/dawkę i w wielu wypadkach tak niskie jak 10 pg/dawkę są łatwo osiągalne.
W celu przygotowania szczepionki przeciw grypie białka powierzchniowego antygenu mogą być przetwarzane, np. poprzez dodanie buforu (np. PBS) i/lub poprzez wymieszanie z antygenami innych szczepów wirusów grypy.
Do dalszego przygotowywania szczepionki ewentualnie wymagane jest zatężanie antygenu powierzchniowego.
187 982
Przykład 1
A. Namnażanie wirusa.
1. Wirus grypy o antygenie typu B/Yamagata jest namnażany w komórkach (ATCC CCL34) nerek psa Madin Darby (MDCK - Madin Darby Canine Kidney) w fermentorze przez inkubację komórek z posianym wirusem przez dwa dni w temperaturze 35°C.
2. Następnie pH płynu w fermentorze podniesiono do 8 przez dodanie rozcieńczonego wodorotlenku sodu i dodawano nukleazy Benzon do końcowego stężenia 1000 jednostek (1 pg) na litr.
3. Inkubację prowadzono w temperaturze 35°C przez następne cztery godziny.
B. Izolowanie wirusa..
1. Płyn sączono przez gęsty (depth) filtr o porach wielkości 0.5 mikrona, w celu usunięcia pozostałości komórkowych.
2. Następnie, wirus grypy zatężono i oczyszczono przez ultrafiltrację przy użyciu membrany o ciężarze odcięcia wynoszącym 300 000.
3. Do koncentratu dodawano sacharozę do otrzymania 30% (wag./obj.) końcowego stężenia, po czym dodawano formaldehyd do otrzymania 0,015% (wag./obj.) końcowego stężenia. Mieszaninę mieszano przez 72 godziny w temperaturze 2-8°C.
4. Następnie koncentrat wirusów rozcieńczono pięciokrotnie solanką buforowaną fosforanem i naniesiono na kolumnę do chromatografii powinowactwa zawierającą Amicon Cellufine Sulphate. Po usunięciu zanieczyszczeń przez przemycie solanką buforowaną fosforanem, wirus wymywano 1,5 molowym roztworem chlorku sodu w solance buforowanej fosforanem. Eluat zatężono i odsolono przez ultrafiltrację przy użyciu membrany odcinającej przy masie cząsteczkowej wynoszącej 300 000.
C. Izolowanie podjednostki.
1. Niejonowy detergent Tween-80 dodawano do końcowego stężenia 300 pg/ml, a bromek cetylotrimetyloamoniowy dodawano do końcowego stężenia 750 pg/ml. Mieszaninę mieszano w temperaturze 4°C przez trzy godziny, po czym drobinę RNP oddzielono od białka powierzchniowego antygenu przez odwirowywanie.
2. Supernatant mieszano z Amberlite XAD-4 przez noc w temperaturze 2-8°C w celu usunięcia detergentów. Amberite usunięto przez sączenie, a przesącz poddano następnie jałowemu sączeniu poprzez przepuszczenie przez 0,22 pm filtr.
Podczas tego procesu analizowano zawartość DNA komórek gospodarza w próbkach zgodnie z zatwierdzonym testem, na podstawie hybrydyzacji slot biot przy użyciu jako sondy psiego DNA znakowanego 32P.
Wyniki oznaczania DNA przeprowadzonego po różnych etapach, są podane w tabeli niżej (w tej tabeli ilość DNA na dawkę IVV przedstawiono w pikogramach na 50 pg HA).
Tabela
Próbka Zawartość DNA Po etapie
Płyn z fermentora 48 hpi 19.000.000 Al
Płyn z fermentora po podziałaniu nukleazą 370.000 A2
Płyn po wstępnym sączeniu 10.000 B1
Koncentrat po ultra filtracji 4350 B2
Płyn po inaktywacji i chromatografii powinowactwa 4200 B4
Supernatant po podziałaniu Tween/C.T.A.B. i odwirowaniu <25 C1
Przesącz po usunięciu detergentu <25 C2
187 982
Przykład 2
Namnażanie, oczyszczanie, inaktywację i rozszczepianie wirusa przeprowadzono jak w przykładzie 1.
Podziałanie nukleazą Benzon na płyn w fermentorze podczas ostatnich godzin namnażania wirusa (etapy A2 i A3), przy zastosowaniu pH środowiska wykorzystanego do namnażania (etap Al), daje zbliżone wyniki w usuwaniu DNA.
DNaza I, mimo, że wymagana jest w wyższych stężeniach, jest równie skuteczna w usuwaniu DNA komórki gospodarza (podczas etapów A1-A3). Zbliżone wyniki otrzymano przy zastosowaniu innych endonukleaz.
Przykład 3
Proces przeprowadzono zgodnie z przykładem 1 lub 2, z wyjątkiem tego, że usuwanie pozostałości komórkowych (etap B1) przeprowadzono przez odwirowywanie.
Przykład 4
Proces przeprowadzono zgodnie z przykładem 1, 2 lub 3, z wyjątkiem tego, że wirus zatężono i oczyszczono (etap B2) z płynu z fermentora przez odwirowywanie w wirówce strefowej z ciągłym przepływem np. Electro-Nucleonics (model RK) przy zastosowaniu gradientu sacharozy w np. solance buforowanej fosforanem.
Przykład 5
Proces przeprowadzono zgodnie z przykładem 1 - 4, z wyjątkiem tego, że dodawanie bromku cetylotrimetyloamoniowego w etapie Cl zastąpiono dodawaniem roztworu bromku cetylopirydyniowego, bromku mirystylotrimetyloamoniowego, chlorku benzetoniowego, chlorku metylobenzetoniowego, chlorku dekametoniowego lub bromku stearylodimetylobenzyloamoniowego. Otrzymano zbliżone wyniki w usuwaniu DNA komórki gospodarza.
Przykład 6
Proces przeprowadzono zgodnie z przykładem 1, z wyjątkiem tego, że sacharozę dodano po przeprowadzeniu kolumnowej chromatomatografii powinowactwa oraz formaldehyd dodano do maksymalnego stężenia 0,05% (w/v) na 120 godzin.
Przykład 7
Sposoby zgodnie z przykładami 1, 2, 3, 4 i 6 zastosowano pomyślnie do wytwarzania szczepionek o niskiej zawartości DNA z wirusa grypy szczepów B/Harbin, B/Panama, A/Texas (H1N1), A/Taiwan (H1N1), A/Johannesburg (H3N2), a takżeA/Wuhan (H3N2).

Claims (9)

1. Szczepionka oparta na powierzchniowym antygenie grypy znamienna tym, że wytwarza się ją z wirusów grypy hodowanych w hodowli komórek zwierzęcych i o zawartości DNA komórki gospodarza równej lub mniejszej od 25 pg na dawkę.
2. Szczepionka oparta na powierzchniowym antygenie grypy według zastrz. 1, znamienna tym, że ma zawartość DNA komórki gospodarza mniejszą niż 10 pg na dawkę.
3. Sposób wytwarzanie białek powierzchniowego antygenu z wirusów grypy hodowanych w hodowli komórek zwierzęcych, znamienny tym, że obejmuje następujące etapy:
a. działanie enzymu trawiącego DNA na cały płyn z hodowli komórek zawierający wirus, oraz
b. dodanie detergentu kationowego, po czym następuje izolacja białek powierzchniowego antygenu.
4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że działanie enzymu trawiącego DNA następuje podczas hodowania wirusów grypy w hodowli komórek.
5. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że detergent kationowy składa się głównie ze związku o ogólnym wzorze:
Rl\+/R3 w którym: R), R2 i R3 są takie same lub różne i każdy oznacza grupę alkilową lub arylową, lub Rj i R2 razem z atomem azotu do którego są przyłączone tworzą 5- lub 6- członowy nasycony pierścień heterocykliczny i R3 oznacza grupę alkilową lub arylową, lub Rj, R2 i R3 razem z atomem azotu do którego są przyłączone tworzą 5- lub 6- członowy pierścień heterocykliczny, nienasycony przy atomie azotu, R4 oznacza grupę alkilową lub arylową, a X oznacza anion.
6. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że detergent kationowy składa się głównie z bromku cetylotrimetyloamoniowego.
7. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, ze detergent kationowy jest uzupełniony detergentem niejonowym.
8. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że wirusy grypy są hodowane w lini komórek zwierzęcych.
9. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że wirusy grypy są hodowane w komórkach MDCK.
PL98325722A 1997-04-09 1998-04-06 Szczepionka przeciw grypie PL187982B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP97201007 1997-04-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL325722A1 PL325722A1 (en) 1998-10-12
PL187982B1 true PL187982B1 (pl) 2004-11-30

Family

ID=8228174

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL98325722A PL187982B1 (pl) 1997-04-09 1998-04-06 Szczepionka przeciw grypie

Country Status (31)

Country Link
US (1) US5948410A (pl)
EP (1) EP0870508B1 (pl)
JP (1) JP5258127B2 (pl)
KR (1) KR100593235B1 (pl)
CN (1) CN1138564C (pl)
AR (1) AR011216A1 (pl)
AT (1) ATE197406T1 (pl)
AU (1) AU728939B2 (pl)
BR (1) BR9801015A (pl)
CA (1) CA2234208C (pl)
CZ (1) CZ297492B6 (pl)
DE (2) DE69800383T2 (pl)
DK (1) DK0870508T3 (pl)
DZ (1) DZ2462A1 (pl)
ES (1) ES2129386T3 (pl)
GR (2) GR990300017T1 (pl)
HR (1) HRP980187B1 (pl)
HU (1) HUP9800802A3 (pl)
ID (1) ID20399A (pl)
IL (1) IL123961A (pl)
NO (1) NO323349B1 (pl)
NZ (1) NZ330131A (pl)
PL (1) PL187982B1 (pl)
PT (1) PT870508E (pl)
RU (1) RU2197264C2 (pl)
SI (1) SI0870508T1 (pl)
SK (1) SK282614B6 (pl)
TR (1) TR199800613A1 (pl)
TW (1) TW570803B (pl)
UA (1) UA42089C2 (pl)
ZA (1) ZA982915B (pl)

Families Citing this family (107)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL355287A1 (pl) * 1999-09-24 2004-04-05 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Donosowa szczepionka przeciw wirusowi grypy
GB9923176D0 (en) * 1999-09-30 1999-12-01 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
CN100415769C (zh) * 2002-02-07 2008-09-03 中国科学院过程工程研究所 寡聚或多聚亚基蛋白质分离纯化的方法
DE60327069D1 (de) 2002-04-30 2009-05-20 Oncolytics Biotech Inc Verbesserte reinigungsmethode für viren
EP2481819A1 (en) * 2003-02-25 2012-08-01 MedImmune Vaccines, Inc. Cross flow filtration in the production of stabilized influenza vaccine compositions
US20060110406A1 (en) * 2003-02-25 2006-05-25 Medimmune Vaccines, Inc. Refrigerator-temperature stable influenza vaccine compositions
CA2503774C (en) * 2003-06-20 2007-09-25 Microbix Biosystems Inc. Improvements in virus production
US8080255B2 (en) 2003-07-11 2011-12-20 Novavax Inc. Functional influenza virus like particles (VLPs)
US8506967B2 (en) 2003-07-11 2013-08-13 Novavax, Inc. Functional influenza virus like particles (VLPs)
US8992939B2 (en) 2003-07-11 2015-03-31 Novavax, Inc. Highly efficient influenza matrix (M1) proteins
US8592197B2 (en) 2003-07-11 2013-11-26 Novavax, Inc. Functional influenza virus-like particles (VLPs)
US20070207461A1 (en) * 2004-02-23 2007-09-06 Crucell Holland B.V. Virus Purification Methods
JP5600375B2 (ja) 2004-03-09 2014-10-01 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド インフルエンザウイルスワクチン
ATE489965T1 (de) 2004-09-09 2010-12-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Verminderung von potentiellen iatrogenen risiken in verbindung mit influenza impfstoffen
US7901921B2 (en) 2004-10-22 2011-03-08 Oncolytics Biotech Inc. Viral purification methods
US20090004222A1 (en) 2004-11-03 2009-01-01 O'hagan Derek Influenza Vaccination
DK2368975T3 (en) 2004-12-23 2015-01-05 Medimmune Llc Non-tumorigenic MDCK cell line for the propagation of viruses
AR054020A1 (es) 2005-03-23 2007-05-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Nuevo uso
CA2602944C (en) * 2005-04-11 2015-08-11 Crucell Holland B.V. Virus purification using ultrafiltration
ES2525518T3 (es) * 2005-11-01 2014-12-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh Vacunas virales derivadas de células con niveles reducidos de ADN celular residual
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
NZ568211A (en) 2005-11-04 2011-11-25 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccines including combinations of particulate adjuvants and immunopotentiators
CN102755645A (zh) 2005-11-04 2012-10-31 诺华疫苗和诊断有限公司 佐剂配制的包含细胞因子诱导剂的流感疫苗
NZ594482A (en) 2005-11-04 2012-11-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Influenza vaccines with reduced amount of oil-in-water emulsion as adjuvant
CA2628152C (en) 2005-11-04 2016-02-02 Novartis Vaccines And Diagnostics S.R.L. Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
JP2009514844A (ja) * 2005-11-04 2009-04-09 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル スプリットインフルエンザワクチン用のアジュバントとしての遊離水相界面活性剤を含むエマルション
PL2478916T3 (pl) * 2006-01-27 2020-11-16 Seqirus UK Limited Szczepionki przeciw grypie zawierające hemaglutyninę i białka macierzy
CN101448523A (zh) 2006-03-24 2009-06-03 诺华疫苗和诊断有限两合公司 无需冷藏储存流感疫苗
CA2647985C (en) 2006-03-31 2014-12-30 Warf-Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses for vaccines
MX2009000660A (es) 2006-07-17 2009-04-08 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna de influenza.
GB0614460D0 (en) * 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP4585610A3 (en) 2006-09-11 2025-09-24 Seqirus UK Limited Making influenza virus vaccines without using eggs
EP2615167A1 (en) 2006-09-15 2013-07-17 MedImmune, LLC Method for eliminating DNA contaminants from viral preparations
PT2121011E (pt) 2006-12-06 2014-07-31 Novartis Ag Vacinas compreendendo um antigénio a partir de quatro estirpes do vírus da gripe
SI2114421T1 (en) * 2007-03-05 2018-04-30 Om Pharma A bacterial extract for respiratory disorders and a process for its preparation
US20090060889A1 (en) * 2007-03-12 2009-03-05 Von Hofe Eric Ii-RNAi involved Ii suppression in cancer immunotherapy
PE20090146A1 (es) 2007-04-20 2009-03-23 Glaxosmithkline Biolog Sa Composicion inmunogenica contra el virus influenza
US9474798B2 (en) 2007-06-18 2016-10-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines
KR20100045437A (ko) 2007-06-27 2010-05-03 노파르티스 아게 첨가물이 적은 인플루엔자 백신
EP2772267B1 (en) * 2007-08-27 2016-04-27 Longhorn Vaccines and Diagnostics, LLC Immunogenic compositions and methods
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
JP5518041B2 (ja) 2008-03-18 2014-06-11 ノバルティス アーゲー インフルエンザウイルスワクチン抗原の調製における改良
EP2344634A4 (en) * 2008-09-24 2012-08-29 Medimmune Llc METHODS OF CELL CULTURE, AND PROPAGATION AND PURIFICATION OF VIRUSES
CA2741961A1 (en) 2008-11-05 2010-05-14 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Novel method
EP3173097A3 (en) 2009-02-10 2017-07-12 Seqirus UK Limited Influenza vaccines with reduced amounts of squalene
CA2752041A1 (en) 2009-02-10 2010-08-19 Novartis Ag Influenza vaccines with increased amounts of h3 antigen
EA201171032A1 (ru) 2009-02-10 2012-02-28 Новартис Аг Схемы лечения с помощью вакцины против гриппа, связанного с пандемическими штаммами
USH2283H1 (en) 2009-04-27 2013-09-03 Novartis Ag Vaccines for protecting against influenza
EA021009B1 (ru) 2009-05-21 2015-03-31 Новартис Аг ОБРАТНАЯ ГЕНЕТИКА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ НЕЭНДОГЕННЫХ ПРОМОТОРОВ pol I
WO2010144797A2 (en) 2009-06-12 2010-12-16 Vaccine Technologies, Incorporated Influenza vaccines with enhanced immunogenicity and uses thereof
CA2803282C (en) 2009-07-06 2018-05-01 David E. Anderson Methods for preparing vesicles and formulations produced therefrom
JP5854559B2 (ja) 2009-07-06 2016-02-09 ヴァリエーション バイオテクノロジーズ インコーポレイテッド 小胞を調製する方法及びこれから製造される製剤
CN104862335A (zh) 2009-07-31 2015-08-26 诺华股份有限公司 反向遗传系统
US20120237536A1 (en) 2009-09-10 2012-09-20 Novartis Combination vaccines against respiratory tract diseases
CA2778332A1 (en) 2009-10-20 2011-04-28 Novartis Ag Improved reverse genetics methods for virus rescue
EP2493912B1 (en) 2009-10-26 2020-07-29 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in vero cells
US10130697B2 (en) 2010-03-23 2018-11-20 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses
CN103025350A (zh) 2010-05-21 2013-04-03 诺华有限公司 流感病毒的重配方法
WO2011151723A2 (en) 2010-06-01 2011-12-08 Novartis Ag Concentration of vaccine antigens without lyophilization
CA2801151A1 (en) 2010-06-01 2011-12-08 Novartis Ag Concentration of vaccine antigens with lyophilization
WO2012006367A2 (en) 2010-07-06 2012-01-12 Variation Biotechnologies, Inc. Compositions and methods for treating influenza
WO2012023044A1 (en) 2010-08-20 2012-02-23 Novartis Ag Soluble needle arrays for delivery of influenza vaccines
US10736844B2 (en) 2011-01-13 2020-08-11 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating viral infections
BR112013018074A2 (pt) 2011-01-13 2020-12-01 Variation Biotechnologies, Inc. métodos para a preparação de vesículas e formulações produzidas a partir dessas
JP2014527799A (ja) 2011-08-26 2014-10-23 ダブリュエーアールエフ−ウィスコンシン アラムナイ リサーチ ファウンデーション 変異型ｐｂ２遺伝子セグメントを有する弱毒化生ワクチンとしてのインフルエンザウイルス
EP2768528A1 (en) 2011-10-20 2014-08-27 Novartis AG Adjuvanted influenza b virus vaccines for pediatric priming
US20140328876A1 (en) 2011-11-18 2014-11-06 Variation Biotechnologies Inc. Synthetic derivatives of mpl and uses thereof
AU2013208693B2 (en) 2012-01-12 2017-12-07 Variation Biotechnologies Inc. Compositions and methods for treating viral infections
EP2806894A4 (en) 2012-01-27 2015-11-04 Variation Biotechnologies Inc METHODS AND COMPOSITIONS FOR THERAPEUTIC AGENTS
CN103608453B (zh) 2012-03-02 2018-07-24 思齐乐 流感病毒重配
EP2855701A1 (en) 2012-06-04 2015-04-08 Novartis AG Improved safety testing
GB201218195D0 (en) 2012-10-10 2012-11-21 Istituto Zooprofilattico Sperimentale Delle Venezie Composition
KR20150110494A (ko) 2012-12-03 2015-10-02 노파르티스 아게 재배열 인플루엔자 a 바이러스
SG11201507454XA (en) 2013-03-13 2015-10-29 Novartis Ag Influenza b virus reassortment
SG11201509265SA (en) 2013-05-10 2015-12-30 Novartis Ag Avoiding narcolepsy risk in influenza vaccines
DE202013005130U1 (de) 2013-06-05 2013-09-10 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
DE202013005100U1 (de) 2013-06-05 2013-08-26 Novartis Ag Influenza Virus Reassortierung
CN105722976A (zh) 2013-06-06 2016-06-29 诺华股份有限公司 流感病毒重配
WO2015009743A1 (en) 2013-07-15 2015-01-22 Wisconsin Alumni Research Foundation High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in mdck or vero cells or eggs
RU2535153C1 (ru) * 2013-09-04 2014-12-10 Федеральное государственное унитарное предприятие "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток и предприятие по производству бактерийных препаратов" Федерального медико-биологического агентства России (ФГУП СПбНИИВС ФМБА России) Способ получения высокоочищенных вирионных концентратов
JP6373376B2 (ja) 2013-11-15 2018-08-15 ノバルティス アーゲー 残留細胞培養不純物の除去
US10053671B2 (en) 2014-06-20 2018-08-21 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
EP2966093A1 (en) 2014-07-07 2016-01-13 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Process for the preparation of magnetic sulfated cellulose particles, magnetic sulfated cellulose particles and their use
US10633422B2 (en) 2015-06-01 2020-04-28 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA
RU2614127C2 (ru) * 2015-06-04 2017-03-22 Общество с ограниченной ответственностью "НТфарма" Способ получения концентрата рекомбинантных псевдоаденовирусных частиц, экспрессирующих ген гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1)
US11013795B2 (en) 2015-06-26 2021-05-25 Seqirus UK Limited Antigenically matched influenza vaccines
US9890363B2 (en) 2015-07-06 2018-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication for vaccine development
KR102790570B1 (ko) 2015-07-07 2025-04-04 세퀴러스 유케이 리미티드 인플루엔자 효능 검정
US11197925B2 (en) 2016-02-19 2021-12-14 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza B virus replication for vaccine development
WO2018183429A1 (en) 2017-03-30 2018-10-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Addition of nucleases directly to cell culture to facilitate digestion and clearance of host cell nucleic acids
WO2019084310A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Yoshihiro Kawaoka HAS RECOMBINANT INFLUENZA VIRUSES STABILIZED FOR EGG REPLICATION
RU2670001C1 (ru) * 2017-12-25 2018-10-17 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биохимии и физиологии растений и микроорганизмов Российской академии наук Способ получения белков клеточной поверхности
US11338020B2 (en) 2018-01-09 2022-05-24 Synthetic Biologics, Inc. Alkaline phosphatase agents for treatment of neurodevelopmental disorders
ES3032290T3 (en) 2018-03-20 2025-07-16 Theriva Biologics Inc Intestinal alkaline phosphatase formulations
US11654184B2 (en) 2018-03-20 2023-05-23 Theriva Biologics, Inc. Alkaline phosphatase agents for treatment of radiation disorders
US12343390B2 (en) 2018-08-07 2025-07-01 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Recombinant biologically contained filovirus vaccine
JP7655849B2 (ja) 2018-08-20 2025-04-02 ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション ヘマグルチニン（ｈａ）タンパク質内の非ドミナントエピトープに対する免疫応答を誘起するためのベクター
EP3914295A2 (en) 2019-01-23 2021-12-01 Yoshihiro Kawaoka Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
EP3921413A1 (en) 2019-02-08 2021-12-15 Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) Humanized cell line
CN114929269A (zh) 2019-05-01 2022-08-19 威斯康星校友研究基金会(Warf) 用于疫苗开发的改进的流感病毒复制
JP7660523B2 (ja) 2019-05-06 2025-04-11 セリバ・バイオロジクス・インコーポレイテッド アルカリリン酸塩に基づいた癌治療
US11807872B2 (en) 2019-08-27 2023-11-07 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Recombinant influenza viruses with stabilized HA for replication in eggs
KR20220098370A (ko) * 2019-11-07 2022-07-12 세퀴러스 유케이 리미티드 감소된 입자 크기를 가지는 바이러스 백신을 제조하기 위한 조성물 및 방법
EP4061930A1 (en) 2019-11-18 2022-09-28 Seqirus Pty Ltd Method for producing reassortant influenza viruses
JP2023511444A (ja) 2020-01-24 2023-03-17 ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション 安定化されたｎａを有する組換えインフルエンザウイルス
WO2021195410A1 (en) 2020-03-25 2021-09-30 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Recombinant multivalent influenza viruses
KR102444684B1 (ko) * 2020-04-29 2022-09-16 에스케이바이오사이언스(주) 일회용 배양 공정 시스템을 이용한 인플루엔자 바이러스 생산 방법

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH589453A5 (pl) * 1974-01-14 1977-07-15 Sandoz Ag
SU487541A1 (ru) * 1974-05-22 1976-03-25 Всесоюзный научно-исследовательский институт гриппа Способ получени препаратов вируса гриппа
US4500513A (en) * 1979-05-15 1985-02-19 Miles Laboratories, Inc. Influenza vaccine production in liquid cell culture
US4317811A (en) * 1980-09-11 1982-03-02 Merck & Co., Inc. Herpes simplex type 1 subunit vaccine
DE3237313A1 (de) * 1982-10-08 1984-04-12 Werner Heese Verfahren zur gewinnung und reinigung antigenhaltiger loesungen, insbesondere fuer influenza-viren, aus antigenhaltiger allantoisfluessigkeit
US4783411A (en) * 1984-10-22 1988-11-08 Janis Gabliks Influenza-A virus vaccine from fish cell cultures
US5173418A (en) * 1985-05-10 1992-12-22 Benzon Pharma, A/S Production in Escherichia coli of extracellular Serratia spp. hydrolases
US5006472A (en) * 1988-06-03 1991-04-09 Miles Inc. Enzymatic purification process
WO1990010058A2 (en) * 1989-02-07 1990-09-07 Bio-Technology General Corp. Method for production and purification of hepatitis b vaccine
DE69024392T2 (de) * 1989-03-29 1996-07-25 Univ New York Verfahren zur Reinigungbvon Aussenmembran-Protein von Haemophilus influenzae
US5643577A (en) * 1990-04-24 1997-07-01 The University Of Newcastle Research Associates Limited Oral vaccine comprising antigen surface-associated with red blood cells
DZ1706A1 (fr) * 1992-08-07 2002-02-17 Merck & Co Inc Vaccin contre le virus de l'hepatite a.
RU2082431C1 (ru) * 1993-05-12 1997-06-27 Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера Способ получения инактивированной гриппозной вакцины
HRP950097A2 (en) * 1994-03-08 1997-06-30 Merck & Co Inc Hepatitis a virus culture process
US5612037A (en) * 1994-07-26 1997-03-18 Connaught Laboratories, Inc. Influenza virus subunit conjugates
CA2205015C (en) * 1994-11-10 2003-04-08 Otfried Kistner Method for producing biologicals in protein-free culture
US5681746A (en) * 1994-12-30 1997-10-28 Chiron Viagene, Inc. Retroviral delivery of full length factor VIII
CN1122531C (zh) * 1995-08-01 2003-10-01 巴斯德梅诺血清和疫苗公司 抗日本脑炎疫苗的工业生产方法和所获得的疫苗
TR199800573T2 (xx) * 1995-09-28 1998-07-21 University Of Pittsburgh-Commonwealth System Of Higher Edu. Hedeflenen partik�lat genetik immunizasyonu sureti ile h�cre medyasyonlu immun cevaplar�n stim�lasyonu.
RU2100033C1 (ru) * 1995-10-05 1997-12-27 Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток Способ получения вакцинных штаммов вируса гриппа в для производства инактивированных и живых гриппозных вакцин
RU2080124C1 (ru) * 1995-10-19 1997-05-27 Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток Способ получения живой гриппозной вакцины
RU2164148C1 (ru) * 2000-08-09 2001-03-20 Петров Рэм Викторович Вакцина против вируса гриппа и способ ее получения

Also Published As

Publication number Publication date
CZ105098A3 (cs) 1998-10-14
NZ330131A (en) 1999-10-28
PT870508E (pt) 2001-04-30
TR199800613A1 (xx) 1998-10-21
ES2129386T3 (es) 2001-01-01
HRP980187B1 (en) 2001-04-30
DE870508T1 (de) 1999-08-19
GR990300017T1 (en) 1999-06-30
IL123961A (en) 2000-07-16
HU9800802D0 (en) 1998-05-28
US5948410A (en) 1999-09-07
AR011216A1 (es) 2000-08-02
MX9802766A (es) 1998-12-31
KR100593235B1 (ko) 2007-12-04
HK1010833A1 (en) 1999-07-02
NO981557D0 (no) 1998-04-06
DZ2462A1 (fr) 2003-01-18
SK44598A3 (en) 1998-11-04
NO323349B1 (no) 2007-04-02
KR19980081114A (ko) 1998-11-25
CN1138564C (zh) 2004-02-18
ID20399A (id) 1998-12-10
HUP9800802A3 (en) 2003-08-28
HUP9800802A2 (hu) 1999-04-28
ES2129386T1 (es) 1999-06-16
PL325722A1 (en) 1998-10-12
TW570803B (en) 2004-01-11
CA2234208C (en) 2003-06-10
BR9801015A (pt) 2000-01-11
UA42089C2 (uk) 2001-10-15
AU728939B2 (en) 2001-01-18
NO981557L (no) 1998-10-12
JP5258127B2 (ja) 2013-08-07
JPH1121253A (ja) 1999-01-26
GR3034798T3 (en) 2001-02-28
EP0870508A1 (en) 1998-10-14
DK0870508T3 (da) 2000-11-20
CZ297492B6 (cs) 2007-01-03
RU2197264C2 (ru) 2003-01-27
SK282614B6 (sk) 2002-10-08
AU6065998A (en) 1998-10-15
HRP980187A2 (en) 1999-04-30
DE69800383T2 (de) 2001-08-16
CN1196956A (zh) 1998-10-28
SI0870508T1 (en) 2001-02-28
DE69800383D1 (de) 2000-12-14
ATE197406T1 (de) 2000-11-11
EP0870508B1 (en) 2000-11-08
ZA982915B (en) 1999-01-21
CA2234208A1 (en) 1998-10-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL187982B1 (pl) Szczepionka przeciw grypie
ES2653197T3 (es) Procedimiento para producir antígeno ortomixoviral y vacunas
CN101715487A (zh) 血凝素多肽中有变化的b型流感病毒
JP2000507448A (ja) インフルエンザウイルスの複製のための動物細胞および方法
EA014062B1 (ru) Вирусные вакцины, полученные из клеток с низкими уровнями остаточной клеточной днк
ES2778928T3 (es) Producción a gran escala de virus en cultivos celulares
JP5843615B2 (ja) 密度勾配超遠心分離によるウイルスまたはウイルス抗原の精製
EP3234113B1 (en) A method for a large scale virus purification
HK1010833B (en) Influenza vaccine
MXPA98002766A (en) Vaccine against influe
CN101274097B (zh) 喷雾流行性感冒疫苗组合物及其制备方法
CN117603922A (zh) 一种流感病毒裂解液、流感病毒抗原及其制备方法与应用