PL189044B1 - Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzania - Google Patents
Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzaniaInfo
- Publication number
- PL189044B1 PL189044B1 PL98329265A PL32926598A PL189044B1 PL 189044 B1 PL189044 B1 PL 189044B1 PL 98329265 A PL98329265 A PL 98329265A PL 32926598 A PL32926598 A PL 32926598A PL 189044 B1 PL189044 B1 PL 189044B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cytokine
- dressings
- spongy
- dressing
- collagen
- Prior art date
Links
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 68
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 68
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 229920002635 polyurethane Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 239000004814 polyurethane Substances 0.000 claims abstract description 21
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims abstract description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000011888 foil Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 claims abstract description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims abstract 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 5
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 5
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 5
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 claims description 3
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 claims description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 3
- LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N (2r,3r,4s,5r,6s)-4,5-dimethoxy-2-(methoxymethyl)-3-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-trimethoxy-6-(methoxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[(2r,3r,4s,5r,6r)-4,5,6-trimethoxy-2-(methoxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxane Chemical compound CO[C@@H]1[C@@H](OC)[C@H](OC)[C@@H](COC)O[C@H]1O[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](OC)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OC)[C@H](OC)O[C@@H]2COC)OC)O[C@@H]1COC LNAZSHAWQACDHT-XIYTZBAFSA-N 0.000 claims description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 2
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 claims description 2
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 claims description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009738 saturating Methods 0.000 claims 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 6
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 4
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000000515 collagen sponge Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 102000004269 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010017080 Granulocyte Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 2
- IHCDKJZZFOUARO-UHFFFAOYSA-M sulfacetamide sodium Chemical compound O.[Na+].CC(=O)[N-]S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=C1 IHCDKJZZFOUARO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N Dioxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940064004 antiseptic throat preparations Drugs 0.000 description 1
- 210000001142 back Anatomy 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 description 1
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 1
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000012792 lyophilization process Methods 0.000 description 1
- 238000001964 muscle biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229940057838 polyethylene glycol 4000 Drugs 0.000 description 1
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 1
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229960003600 silver sulfadiazine Drugs 0.000 description 1
- UEJSSZHHYBHCEL-UHFFFAOYSA-N silver(1+) sulfadiazinate Chemical compound [Ag+].C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)[N-]C1=NC=CC=N1 UEJSSZHHYBHCEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- MLGCXEBRWGEOQX-UHFFFAOYSA-N tetradifon Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC(Cl)=C(Cl)C=C1Cl MLGCXEBRWGEOQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
1. Gabczaste opatrunki na powierzchniowe rany, zwlaszcza zakazone drobnoustrojami patogennymi na bazie gabki kolagenowej lub poliuretanowej, znam ienne tym, ze zlozone sa z tamponu kolagenowego lub poliuretanowego o porach ponizej 0,5 mm oraz z co naj- mniej jednej cytokiny w ochronnym roztworze buforowym, przy czym stezenie cytokiny w opatrunku wynosi 0,1 - 50 µ g/cm 2. 5. Sposób wytwarzania gabczastych opatrunków na powierzchniowe rany, zwlaszcza zakazone drobnoustrojami patogennymi, znamienny tym, ze tampon kolagenowy lub po- liuretanowy o porach 0,5 mm i grubosci 1 - 6 mm nasacza sie co najmniej jedna cytokina w ochronnym roztworze buforowym o pH 4 - 7,8 zawierajacym srodki chroniace cytokiny przed denaturacja i/lub nieodwracalna adsorpcja, nastepnie suszy i pakuje w wysterylizo- wane opakowanie z laminowanej folii oraz zgrzewa, ewentualnie poddaje sterylizacji ra- diacyjnej i przechowuje w temperaturze 0 - 8°C. PL
Description
Przedmiotem wynalazku są gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany, zwłaszcza zakażone drobnoustrojami patogennymi oraz sposób wytwarzania tych opatrunków. Opatrunki te, sporządzone z biomateriałów o wysokiej czystości, jakimi są gąbka kolagenowa lub poliuretanowa, można stosować na powierzchnię ran u ludzi i zwierząt (ssaków). Rany pozbawione częściowo naskórka lub skóry narażone są na utratę wody, wpływy środowiska a przede wszystkim na kontaminację bakteryjną. Opatrunki gąbczaste według wynalazku są plastyczne i przybierają kształt powierzchni rany, są jałowe mikrobiologicznie i charakteryzują się odpowiednią wytrzymałością mechaniczną.
W praktyce medycznej znane jest stosowanie opatrunków z gąbki kolagenowej lub poliuretanowej na rany bez zakażenia klinicznego. W przypadku ran, których gojenie powikłane jest zakażeniem, używa się niekiedy gąbczastych opatrunków kolagenowych zawierających antybiotyki lub antyseptyki. Jednakże wiele tych leków powoduje występowanie reakcji uczu189 044 leniowych a także niektóre z nich powodują zwolnienie procesów gojenia ran. Od szeregu lat prowadzone są poszukiwania leków, którymi można by świadomie regulować bardzo złożone procesy gojenia ran. Substancjami, które mogą spełniać te oczekiwania są biologicznie czynne białkowe substancje regulacyjne zwane cytokinami, wchodzące w skład tak zwanej „sieci cytokinowej”. Jej działanie polega na przekazywaniu sygnałów regulatorowych między różnymi komórkami skóry i układu leukocytów. Cytokiny mogą pobudzać komórki skóry do odpowiednio ukierunkowanej, zwiększonej lub zmniejszonej aktywności.
Znane są próby stosowania cytokin w doświadczalnym leczeniu ran, przez podawanie miejscowe, w postaci wielokrotnego nastrzykiwania tkanek rany. Dwie z przebadanych cytokin, G-CSF oraz GM-CSF, są zarejestrowane jako leki krwiotwórcze i stosowane są ogólnoustrojowo w onkologii, w przypadku leukopenii. Wykorzystuje się je do pobudzania szpiku kostnego do wzmożonej produkcji komórek leukocytamych. Jednakże leki te wykazują również inne rodzaje aktywności, działają na dojrzałe leukocyty, które pobudzane są do wzmożonej fagocytozy tkanek martwicznych oraz mikroorganizmów zakażających rany i do ich zabijania wewnątrzkomórkowego, ponadto pobudzają komórki skóry do szybszej proliferacji, której efektem jest zwiększenie szybkości procesów naskórkowania, będącego najważniejszym ze sposobów gojenia ran. Jednakże kontrolowane ich podawanie do ran w potrzebnej ilości i z kontrolowaną kinetyką nie zostało jak dotąd opracowane. Wiąże się to częściowo z labilnością cytokin.
Podczas prób laboratoryjnych nieoczekiwanie okazało się, że cytokiny można wykorzystać do leczenia ran w postaci gąbczastych opatrunków według wynalazku, jeśli pozostaną one w odpowiednim roztworze substancji zabezpieczających przed denaturacją i/lub przed nieodwracalną adsorpcją o zdefiniowanym składzie chemicznym.
Materiałem wyjściowym do wytwarzania opatrunków są dwa (alternatywne) biomateriały o grubości 1 do 6 mm. Jednym z nich jest gąbka sporządzona z kolagenu zwierzęcego o wysokiej czystości, drugim gąbka poliuretanowa.
Opatrunki według wynalazku złożone są z tamponu kolagenowego lub poliuretanowego 0 porach poniżej 0,5 mm oraz z co najmniej jednej cytokiny w ochronnym roztworze buforowym. Roztwór buforowy zawiera substancje białkowe takie jak albuminę surowiczą, surowicę ludzką, żelatynę oraz inne dodatki fizjologicznie akceptowalne, zwłaszcza glikole, mannitol, metylocelulozę; korzystne pH roztworu wynosi 4 - 7,8. Stężenie cytokin w opatrunku jest zależne od rodzaju cytokiny i może się wahać od 0,1 do 50 pg na cm2 opatrunku. Nie zaleca się stosowania wyższych stężeń, gdyż w niektórych przypadkach mogą być niekorzystne dla chorego. Opatrunki według wynalazku mogą zawierać dodatkowo przeciwdrobnoustrojowe chemioterapeutyki, np. sól srebrową sulfadiazyny, które nie hamują procesów gojenia i nie wchodzą w interakcje z cytokinami. W opatrunku według wynalazku cytokiny zachowują dużą część swojej wyjściowej aktywności; można ją wykazać w ekstrakcie z opatrunku, w odpowiednich układach testowych. Aktywność ta ujawnia się po związaniu z odpowiednim receptorem na komórce docelowej.
Sposób wytwarzania gąbczastych opatrunków według wynalazku polega na tym, że tampon kolagenowy lub poliuretanowy o grubości 1 - 6 mm nasącza się co najmniej jedną cytokiną w ochronnym roztworze buforowym, korzystnie o pH 4 - 7,8, zawierającym środki chroniące cytokiny przed denaturacją i/lub nieodwracalną adsorpcją, następnie suszy i pakuje w wysterylizowane opakowania z laminowanej folii, zgrzewa ewentualnie poddaje sterylizacji radiacyjnej i przechowuje w temperaturze 0 - 7°C. W sposobie według wynalazku korzystnie nasączony roztworem cytokin tampon poddaje się liofilizacji, to znaczy szybkiemu głębokiemu zamrożeniu w temperaturze od -70 do -180°C i suszy w próżni w niskich temperaturach tak, aby temperatura końcowa suszenia wynosiła poniżej 20°C. Początkowa temperatura suszonych opatrunków powinna wynosić poniżej 0°C przez około 5 pierwszych godzin procesu liofilizacji. Można też roztwór cytokin rozprowadzić w kremie, korzystnie eucerynowym, i tak otrzymaną mieszaninę nanieść na powierzchnię gąbki kolagenowej lub poliuretanowej. Tak otrzymany opatrunek pokrywa się cienką, jałową mikrobiologicznie folią z tworzywa sztucznego o grubości poniżej 0,3 mm i przepuszczalności pary wodnej poniżej 3,5 mg/cm2-h, poddaje się lekkiemu sprasowaniu w temperaturze 35 - 45°C i szybko schładza się do temperatury poniżej 4°C.
189 044
Korzystny sposób wytwarzania opatrunku według wynalazku polega na tym, że po nasączeniu tamponu roztworem cytokin wilgotny opatrunek pakuje się w uprzednio wysterylizowany radiacyjnie odcinek rękawa foliowo-papierowego, zamyka się przez zgrzewanie i poddaje llofiiizacji. Papier tego rękawa jest dobrze przepuszczalny dla gazów i par. Opatnuiki cytokmowe należy sporządzać w warunkach jałowości mikrobiologicznej, stosując stoły z laminamym przepływem jałowego powietrza. Powinny być zamknięte w hermetyczne opakowania z laminowanej folii aluminiowej przez zgrzanie i przechowywane w temperaturze 0 - 8°C.
Zastosowanie kompozycji środków chroniących cytokiny przed nieodwracalną adsorpcją i/lub denaturacją oraz naniesienie jej na gąbkę kolagenową lub poliuretanową w sposobie według wynalazku pozwoliło na uzyskiwanie opatrunków cytokinowych wykazujących nieoczekiwane właściwości. Sprawdzenie kinetyki uwalniania z tych opatrunków cytokin oraz sprawdzenie aktywności biologicznej ekstraktów umożliwia rozwinięcie nowej dziedziny w leczeniu ran, którą można nazwać cytokinową bioterapią ran.
Opatrunki cytokinowe oraz sposób ich wytwarzania według wynalazku bliżej ilustrują poniższe przykłady nie ograniczając zakresu ochrony wynalazku.
Przykład I. Mikrobiologicznie jałową gąbkę kolagenową służącą jako opatrunek biologiczny, o grubości 4 mm (np. gąbka kolagenowa BIOKOL produkcji firmy Stalmed s. c., Kielce), nasącza się roztworem cytokiny rhGM-CSF (ludzki rekombinowany czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów - makrofagów) rozpuszczonej w buforze o następującym składzie: kwas cytrynowy 0,05 M, fosforan dwusodowy 0,05 M, mannitol 20 mg/ml, glikol polietylenowy 4000 20 mg/ml, białka surowicy krwi ludzkiej 60 mg/ml; pH buforu powinno wynosić 6,8. Gąbkę poddaje się liofilizacji. Ilość cytokiny wprowadzona do opatrunku wynosi 5 μ g/cm2. Opatrunek pakuje się w wysterylizowaną radiacyjnie laminowaną folię aluminiową i zamyka przez zz^trze^-vwan<e. Opatrunek przechowuje się w 4°C. Opaarunek można dodatkowo wysterylizować radiacyjnie.
Przykład II. Mikrobiologicznie jałową gąbkę poliuretanową przeznaczoną jako opatrunek na rany (np. gąbka poliuretanowa LIGAS ANO produkcji Ligamed Medical Produkte GmbH), o grubości 3 mm, nasącza się roztworem cytokiny rhG-CSF (ludzki rekombinowany czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów) rozpuszczonej w buforze o następującym składzie: 0,05 M bufor octanowy sodowy pH 4,0, mannitol 20 mg/ml, Tween 80 - 0,5 mg/ml, albumina ludzka 2 mg/ml. Ilość cytokiny wprowadzona do opatrunku wynosi 50 pg/cnT. Wilgotny opatrunek pakuje się w wysterylizowany radiacyjnie odcinek rękawa foliowo-papierowego firmy WIPAK MEDICAL Steriking R40F, zamyka przez zgrzewanie i poddaje liofilizacji. Opatrunek przechowuje się w temperaturze 4°C.
Przykład III. Mikrobiologicznie jałową gąbkę kolagenową służącą jako opatrunek biologiczny, o grubości 6 mm, nasącza się roztworem cytokiny rh EGF (ludzki rekombinowany czynnik stymulujący proliferację keratynocytów) rozpuszczonej w buforze o następującym składzie: chlorek sodu 0,010 M, fosforan dwusodowy 0,01 M, mannitol 20 mg/ml, albumina ludzka 20 mg/ml; pH buforu wynosiło 6,5. Gąbkę poddawano liofilizacji. Ilość cytokiny wprowadzona do opatrunku wynosi 5 pg/cm2. Opatrunek liofilizuje się i pakuje się w wysterylizowaną radiacyjnie laminowaną folię aluminiową oraz zamyka przez zgrzewanie. Opatrunek przechowuje się w temperaturze 4°C.
Przykład IV. Mikrobiologicznie jałową gąbkę kolagenową służącą jako opatrunek biologiczny, o grubości 6 mm, nasącza się roztworem cytokiny EGF rozpuszczonej w buforze o następującym składzie: chlorek sodu 0,010 Mj fofforan dwusodowy 0,0j Mj marmttoj 20 mg/ml, żelatyna z kolagenu bydlęcego 80 mg/ml; pH buforu wynosiło 6,5. Gąbkę poddawano liofilizacji. Ilość cytokiny wprowadzona do opatrunku wynosi 0,1 Lig/cm2. Opatrunek liofilizuje się i pakuje się w wysterylizowaną radiacyjnie laminowaną folię aluminiową oraz zamyka przez zgrzewanie. Opatrunek przechowuje się w temperaturze 4°C.
Przykład V. Na mikrobiologicznie jałową gąbkę poliuretanową nanosi się warstwę antyseptycznej maści (np. preparat Flammazine produkcji Solvay Duphar B.V., Weesp, Holandia) do którego dodaje się uprzednio roztwór cytokiny rhGM-CSF rozpuszczonej w buforze jak w przykładzie I. Na gąbkę pokrytą kremem Flammazine z cytokiną nakłada się jałową mikrobiologicznie folię z polichlorku winylu o grubości 0,05 mm. Opatrunek poddaje się lekkiemu sprasowaniu w temperaturze 35°C, po czym schładza do temperatury 4°C. Ilość cyto189 044 kiny wprowadzona do opatrunku wynosi 10 pg/cm2. Opatrunek pakuje się w wysterylizowaną radiacyjnie laminowaną folię aluminiową i zamyka przez zgrzewanie. Opatrunek przechowuje się w temperaturze 4°C.
Przykład VI. Mikrobiologicznie jałową gąbkę poliuretanową przeznaczoną jako opatrunek na rany (np. gąbka poliuretanowa LIGASANO produkcji Ligamed medical Produkte GmbH), o grubości 3 mm, nasącza się roztworem cytokiny rhG-CSF (ludzki rekombinowany czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów) rozpuszczonej w buforze o następującym składzie: 0,05 M bufor octanowy sodowy pH 4,0, metyloceluloza 30 mg/ml, Tween 80 - 0,5 mg/ml, albumina ludzka 2 mg/ml. Ilość cytokiny wprowadzona do opatrunku wynosi 15 pg/cm2. Wilgotny opatrunek pakuje się w wysterylizowany radiacyjnie odcinek rękawa foliowo-papierowego firmy WIPAK MEDICAL Steriking R40f, zamyka przez zgrzewanie i poddaje liofilizacji. Opatrunek przechowuje się w temperaturze 4°C.
Przykład VII. Wyniki badania kinetyki uwalniania cytokin z opatrunków Badania in vitro
1. Kinetyka uwalniania cytokiny rhGM-CSF z 1 cm2 opatrunku kolagenowego, zawierającego 0,5 pg/cm2 do 0,3 ml PBS (płyn fizjologiczny o pH 7,4) użytego jako płyn ekstrakcyjny, w temperaturze 37°C. Po 24, 48 i 72 godzinach uwalniania cytokiny z opatrunków oznaczano w ekstraktach jej zawartość immunoenzymatyczną metodą ELISA.
Tabela 1
Wydajność ekstrakcji cytokiny rhGM-CSF z opatrunku cytokinowego
| Dzień | |||
| 1 | 2 | 3 | |
| Stężenie rhGM-CSF (μ g/ml) | 0,15 | 0,05 | 0,01 |
| Wydajność ekstrakcji (dane skumulowane) | 30% | 40% | 42% |
2. Kinetyka uwalniania cytokiny EGF z 1 cm opatrunku kolagenowego, zawierającego 0,5 pg/cm2 do 0,3 ml PBS (płyn fizjologiczny o pH 7,4) użytego jako płyn ekstrakcyjny, w temperaturze 37°C. Po 24, 48 i 72 godzinach uwalniania cytokiny z opatrunków oznaczano w ekstraktach jej zawartość immunoenzymatyczną metodą ELISA.
Tabela 2
Wydajność ekstrakcji cytokiny EGF z opatrunku cytokinowego
| Dzień | |||
| 1 | 2 | 3 | |
| Stężenie EGF (pg/ml) | 0,125 | 0,010 | 0,015 |
| Wydajność ekstrakcji (dane skumulowane) | 2,5% | 4,5% | 7,5% |
Przykład VIII. Wyniki badania skuteczności przeciwbakteryjnej opatrunków cytokinowych
1. Badania in vitro
Aktywność biologiczna ekstraktów z opatrunków cytokinowych, zawierających cytokiny rhGM-CSF lub rhG-CSF. Badania wykonane przy użyciu zestawów diagnostycznych „Bursttest” produkcji firmy ORPEGEN Pharma (Heidelberg, RFN). Zawierające wymienione cytokiny ekstrakty opatrunków cytokinowych posiadały aktywność biologiczną manifestującą się pobudzaniem ludzkich leukocytów do znacznego wzmożenia procesu zwanego „wybuchem tlenowym”; proces ten posiada zasadnicze znaczenie w wewnątrzkomórkowym zabijaniu sfagocytowanych mikroorganizmów.
189 044
2. Badania in vivo
Redukcja liczby żywych komórek bakterii Pseudomonas aeruginosa (ATCC 2785) w doświadczalnie zakażonych ranach u myszy. Po nacięciu płata skórnego (1,5 x 1,5 cm) na grzbiecie u 40 myszy, w narkozie eterowej, między mięsień skórny i grzbietowy wstrzykiwano 107 żywych komórek bakteryjnych, po czym u 20 myszy rany pokrywano opatrunkami cytokinowymi sporządzonymi z gąbki poliuretanowej zawierającej 15 pg/cm2 ludzkiej rekombinacyjnej cytokiny rhG-CSF (mysie leukocyty reagują na preparat ludzki rhG-CSF). U pozostałych 20 myszy, zakażoną ranę pokrywano identycznym opatrunkiem z gąbki poliuretanowej, zawierającej tylko bufor, będący rozpuszczalnikiem cytokiny; myszy te stanowiły grupę kontrolną. Opatrunki pokrywano odchylonymi wcześniej płatami skóry, które przyszywano kilkoma szwami chirurgicznymi. Po 1, 2, 3 i 8 dniach, myszy poddawano powtórnie narkozie eterowej i pobierano biopsje z zakażonych mięśni. W biopsjach oznaczano liczbę żywych bakterii metodą płytkową.
Tabela 3
Wyniki skuteczności opatrunków cytokinowych zawierających rhG-CSF w badaniach na myszach, którym wstrzyknięto do rany 1θ7 żywych bakterii (CFU).
| Dzień | ||||
| Liczba żywych bakterii (CFU) w biopsji z mięśni | 1 | 2 | 3 | 8 |
| Grupa kontrolna - opatrunek bez cytokiny | 5-106 | 1,5-106 | 1,5-106 | 2,5-105 |
| Grupa badana - opatrunek cytokinowy zawierający rhG-CSF | 106 | 6,3-105 | 105 1) | 5,8-103 2) |
1) - różnica statystycznie znamienna w stosunku do kontroli dnia trzeciego, p<0,001
2) - różnica statystycznie znamienna w stosunku do kontroli dnia ósmego, p<0,0001
Wniosek
Opatrunek cytokinowy zawierający cytokinę rhG-CSF posiada wysoką aktywność przeciwbakteryjną (leczniczą), powodując pobudzenie fagocytozy i w efekcie redukując liczbę bakterii w zakażonej ranie poniżej wartości 105, jako liczby granicznej różnicującej zakażenie kliniczne od kolonizacji tkanek.
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 50 egz.
Cena 2,00 zł.
Claims (9)
- Zastrzeżenia patentowe1. Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany, zwłaszcza zakażone drobnoustrojami patogennymi na bazie gąbki kolagenowej lub poliuretanowej, znamienne tym, że złożone są z tamponu kolagenowego lub poliuretanowego o porach poniżej 0,5 mm oraz z co najmniej jednej cytokiny w ochronnym roztworze buforowym, przy czym stężenie cytokiny w opatrunku wynosi 0,1 - 50 pg/cm2.
- 2. Gąbczaste opatrunki według zastrz, 1, znamienne tym, że ochronny roztwór buforowy zawiera substancje białkowe, oraz inne dodatki fizjologicznie akceptowalne, zwłaszcza glikole, mannitol, metylocelulozę.
- 3. Gąbczaste opatrunki według zastrz. 1 albo 2, znamienne tym, że pH roztworu buforowego wynosi 4-7,8.
- 4. Gąbczaste opatrunki według zastrz. 1, znamienne tym, że dodatkowo zawierają chemioterapeutyki nie wchodzące w interakcje z cytokinami.
- 5. Sposób wytwarzania gąbczastych opatrunków na powierzchniowe rany, zwłaszcza zakażone drobnoustrojami patogennymi, znamienny tym, że tampon kolagenowy lub poliuretanowy o porach 0,5 mm i grubości 1 - 6 mm nasącza się co najmniej jedną cytokiną w ochronnym roztworze buforowym o pH 4 - 7,8 zawierającym środki chroniące cytokiny przed denaturacją i/lub nieodwracalną adsorpcją, następnie suszy i pakuje w wysteryiizowane opakowanie z laminowanej folii oraz zgrzewa, ewentualnie poddaje sterylizacji radiacyjnej i przechowuje w temperaturze 0 - 8°C.
- 6. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że gąbczasty opatrunek nasycony roztworem cytokin poddaje się szybkiemu głębokiemu zamrożeniu w temperaturze od -70 do -180°C, suszy w próżni w niskich temperaturach, tak aby końcowa temperatura suszenia wynosiła poniżej 20°C.
- 7. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że roztwór cytokin najpierw wprowadza się do kremu i tak otrzymaną mieszaninę nanosi się na powierzchnię gąbki kolagenowej lub poliuretanowej, pokrywa się cienką jałową mikrobiologicznie folią z tworzywa sztucznego o grubości poniżej 0,1 mm, poddaje lekkiemu sprasowaniu w temperaturze 35 - 45°C i szybko schładza się do temperatury poniżej 4°C.
- 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że roztwór cytokiny miesza się z kremem eucerynowym.
- 9. Sposób według zastrz. 5, znamienny tym, że po nasyceniu tamponu roztworem cytokin wilgotny opatrunek pakuje się w wysterylizowany radiacyjnie odcinek medycznego rękawa foliowo-papierowego, zamyka się przez zgrzewanie i poddaje liofilizacji.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL98329265A PL189044B1 (pl) | 1998-10-19 | 1998-10-19 | Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzania |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL98329265A PL189044B1 (pl) | 1998-10-19 | 1998-10-19 | Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzania |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL329265A1 PL329265A1 (en) | 2000-04-25 |
| PL189044B1 true PL189044B1 (pl) | 2005-06-30 |
Family
ID=20073025
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL98329265A PL189044B1 (pl) | 1998-10-19 | 1998-10-19 | Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzania |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL189044B1 (pl) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2726113B1 (de) | 2011-06-30 | 2019-05-22 | Paul Hartmann AG | Wundversorgungsprodukt |
-
1998
- 1998-10-19 PL PL98329265A patent/PL189044B1/pl not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2726113B1 (de) | 2011-06-30 | 2019-05-22 | Paul Hartmann AG | Wundversorgungsprodukt |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL329265A1 (en) | 2000-04-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1320931C (zh) | 含药物、壳聚糖的聚乙烯醇水凝胶敷料及其制备方法 | |
| EP1695722B1 (en) | Collagen hemostatic foam | |
| US6855860B2 (en) | Composite dressings for the treatment of wounds | |
| US10576037B2 (en) | Compositions comprising placental collagen for use in wound healing | |
| US3419006A (en) | Novel dressing and use thereof | |
| Liu et al. | Cowberry extract loaded chitosan hydrogel with photothermal and antioxidant properties promotes infected wound healing | |
| CA2974361A1 (en) | Compositions and methods of treating microbes | |
| JP2018534275A (ja) | タウロリジンの皮膚浸透製剤 | |
| AU612387B2 (en) | Pharmaceutical compositions promoting the wound healing and process for preparing same | |
| Faulkner et al. | A new stable pluronic® F68 gel carrier for antibiotics in contaminated wound treatment | |
| PL189044B1 (pl) | Gąbczaste opatrunki na powierzchniowe rany i sposób ich wytwarzania | |
| Sawada et al. | Silicone gel including antimicrobial agent | |
| Sawada et al. | An evaluation of a new lactic acid polymer drug delivery system: A preliminary report | |
| CN210992033U (zh) | 一种羊膜或微液滴包载药物的复合敷料 | |
| Khaledi et al. | The effect of mesenchymal stem cells on the wound infection | |
| RU2850462C1 (ru) | Комбинированное аппликационное ранозаживляющее средство | |
| RU2832729C1 (ru) | Ранозаживляющая аппликационная салфетка для животных на основе биогенного стимулятора из тканей кожи | |
| JPH03500853A (ja) | 創傷および皮膚病巣の掩護用治療材料およびその調製方法 | |
| CN110917339A (zh) | 一种溶葡萄球菌酶凝胶剂及其在mrsa感染创面中的应用 | |
| Xu et al. | Study of novel platelet lysate film-forming spray on burn wounds in rats | |
| Thomas et al. | Improvements in medicated tulle dressings | |
| RU2839413C1 (ru) | Способ импрегнации пористых материалов антибактериальными препаратами для одномоментного замещения остеомиелитических дефектов и создания депо антимикробных препаратов | |
| RU2192266C2 (ru) | Способ подготовки дефекта кожного покрова к аутодермопластике | |
| US20200038479A1 (en) | Wound healing agent having antimicrobial activity and wound healing accelerating activity | |
| RU2455997C2 (ru) | Способ лечения инфицированных ожоговых ран iiia степени |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20051019 |