PL190150B1 - Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia - Google Patents

Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia

Info

Publication number
PL190150B1
PL190150B1 PL97331246A PL33124697A PL190150B1 PL 190150 B1 PL190150 B1 PL 190150B1 PL 97331246 A PL97331246 A PL 97331246A PL 33124697 A PL33124697 A PL 33124697A PL 190150 B1 PL190150 B1 PL 190150B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
vaccine
gene
plasmid
expresses
genes
Prior art date
Application number
PL97331246A
Other languages
English (en)
Other versions
PL331246A1 (en
Inventor
Jean-Christophe Audonnet
Annabelle Bouchardon
Michel Riviere
Original Assignee
Merial Sas
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9494495&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL190150(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Merial Sas filed Critical Merial Sas
Publication of PL331246A1 publication Critical patent/PL331246A1/xx
Publication of PL190150B1 publication Critical patent/PL190150B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/0225—Spirochetes, e.g. Treponema, Leptospira, Borrelia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18422—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18411—Morbillivirus, e.g. Measles virus, canine distemper
    • C12N2760/18434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/20011—Rhabdoviridae
    • C12N2760/20111—Lyssavirus, e.g. rabies virus
    • C12N2760/20134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/20011—Coronaviridae
    • C12N2770/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, znam ienna tym , ze obej- muje przynajmniej dwie wartosciowosci szczepionek, z których kazda obejmuje integruja- cy plazmid, obejmujacy gen jednej z wartosciowosci patogenu psów, który wyraza go in vivo w komórkach psowatego gospodarza, a konkretnie wartosciowosci wirusa choroby Carre CDV i wartosciowosc wirusa psiej parwowirozy CPV, przy czym plazmidy obejmuja dla kazdej wartosciowosci jeden albo wiecej genów wybranych z grupy obejmujacej geny HA 1 F wirusa choroby Carre i gen VP2 wirusa psiej parwowirozy. 13. Zestaw do szczepienia, znam ienny tym , ze obejmujacy kompozycje szcze- pionki okreslonej w jednym z zastrz. 1-10, i pierwsza szczepionke dla psów wybrana z grupy obejmujacej zywa pelna szczepionke, inaktywowana pelna szczepionke, szcze- pionke podjednostkowa, szczepionke rekombinowana, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen kodowany przez szczepionke polinukleotydowa albo antygen zapewniaja- cy odpornosc krzyzowa, do podawania tej pierwszej szczepionki podczas pierwszego szczepienia 1 kompozycji szczepionki podczas szczepienia przypominajacego. 18 Sposób szczepienia psów przeciwko wsciekliznie, znam ienny tym , ze psu poda- je sie szczepionke obejmujaca plazmid, który zawiera i wyraza in vivo gen G wscieklizny oraz odpowiedni nosnik. PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku jest kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanie plazmidu oraz sposób szczepienia psów.
Choroby zakaźne psów są niezwykle różnorodne i często trudne do opanowania ze względu na warunki spotykane w środowisku naturalnym.
Istnieje obecnie wiele szczepionek, zwłaszcza przeciwko chorobie Carre' (wirus CDV), parwowirozie (wirus CCV), koronawirozie, kaszlowi kennelowemu lub zespołowi zaburzeń oddechowych (wirus P12) i wściekliźnie (rabdowirus). Szczepionki te generalnie są szczepionkami żywymi obejmującymi szczepy atenuowane. Dotyczy to zwłaszcza szczepionki przeciwko chorobie Carre', szczepionki przeciwko zakażeniom adenowirusami, szczepionki przeciwko parwowirozie i szczepionki przeciwko psiemu koronawirusowi.
W niektórych przypadkach proponowano również szczepionki inaktywowane, podobnie jak dla wścieklizny i koronawirozy
Te różnorodne szczepionki są sprzedawane zarówno osobno, to znaczy w postaci szczepionek monowalentnych, jak i w postaci złożonej, jako szczepionki poliwalentne.
Wytwarzane do tej pory skojarzone poliwalentne szczepionki stwarzają problemy związane ze zgodnością i stabilnością. Istnieje rzeczywista potrzeba zapewnienia zgodności między różnymi wartościowościami szczepionki, z powodu zastosowania różnych antygenów, bądź z powodu samych kompozycji, szczególnie w przypadku gdzie połączone są szczepionki inaktywowane i szczepionki żywe. Istnieje również problem konserwacji takiej kombinacji szczepionek i ich bezpieczeństwa, szczególnie w obecności adiuwantu. Takie szczepionki są na ogół dosyć drogie.
Dodatkowo stopień ochrony i czas jej trwania może być bardzo zmienny i wrażliwy na warunki środowiska naturalnego. Ma to szczególnie znaczenie w przypadku szczepienia szczeniąt, u których przeciwciała pochodzenia matczynego zapobiegają immunizacji przez szczepionki inaktywowane, a nawet żywe.
Tak więc jest wskazane udoskonalenie szczepienia psowatych, a zwłaszcza psów, z uwzględnieniem ograniczeń ekonomicznych, które wykluczają stosowanie szczepionek drogich lub skomplikowanych w użyciu.
Badania dotyczące szczepień przeciwko chorobie Carre wykorzystujące oczyszczone preparaty antygenów fuzyjnych F i równoważników hemaglutyniny H w kompletnym adiuwancie Freunda sugerują, ze antygen F mógłby być interesującym immunogenem ze względu na zapewnienie ochrony przeciwko wirusowi CDV (E. Norrby i in., J. Virol. Maj 1986' 536-541) jako szczepionka podjednostkową.
Inny artykuł (P. de Vries i in., J. Gen, Virol. 1988, 69: 2071-2083) sugeruje z drugiej strony, ze białka F i HA CDV mogą być korzystne w szczepieniu według techniki kompleksów immunostymulujących (ISCOMS).
Myszy immunizowane rekombinowaną szczepionką wyrażającą gen dla białka F CDV były zabezpieczone przez prowokacją tym wirusem.
Wyniki te jednakże są jedynie doświadczalne, stąd są trudne do oceny zwłaszcza w środowisku naturalnym
W odniesieniu do zakazenia narwowiroza badania nad nodiednostkowa szczepionka
- — - - X - LZ — 1*--J --------- -C ---J------L obejmującą główne białko kapsydowe VP2 wirusa CPV uzyskane przez rekombinację genetyczną w bakulowirusach wykazały możliwą ochronę szczepionych psów przed prowokacją wirusem CPV.
W odniesieniu do psiego herpeswirusa, przeprowadzono badania nad wykorzystaniem glikoprotein jako składników szczepionek podjednostkowych. Badania te wykazały wzbudzenie
190 150 krzyżowej odporności z innymi wirusami herpes takimi jak FHV, ale nie przedstawiono żadnych wniosków, co do możliwości wytworzenia szczepionki ochronnej.
Dla choroby z Lyme, kompozycja OspA i OspB wywołuje ochronę u myszy i psów, a sam OspA u myszy, chomików i psów.
W zgłoszeniach patentowych WO-A-90 11092, WO-A-93 19183, WO-A-94 21797 i WO-A-95 20660 doniesiono o stosowaniu ostatnio rozwijanych technik szczepionek polinukleotydowych Wiadomo, ze szczepionki te wykorzystują plazmid zdolny do wyrażania w komórkach gospodarza antygenu włączonego do plazmidu. Proponowano wszystkie drogi podawania (dootrzewnową, dożylną, domięśniową, przezskórną, śródskórną, śluzówkową i podobne) Do szczepień stosowane są różne środki, takie jak DNA osadzone na powierzchni cząstek złota, które są wystrzeliwane tak, ze penetrują przez skórę zwierzęcia (Tang i in., Nature 356, 152-154, 1992) i wtryskiwacze do wstrzyknięć strumienia płynu, które powodują, ze jest możliwa jednoczesna transfekcja skóry, tkanek mięśniowych, tkanek tłuszczowych i tkanek gruczołu sutkowego (Furth i in., Analytical Biochemistry, 205, 365-368, 1992).
W szczepionkach polinukleotydowych mogą również być stosowane zarówno nagie DNA jak i kompozycje DNA, na przykład wewnątrz kationowych lipidów albo liposomów.
Wcześniejszy stan techniki nie podaje żadnych wyników mówiących o ochronie psów z wykorzystaniem sposobu szczepień polinukleotydowych przeciwko tym chorobom. Znacznie mniej wiadomo do tej pory o psich koronawirusach CCV i o czynnikach odpowiedzialnych za zespół zaburzeń oddechowych.
W odniesieniu do wścieklizny, ochronę myszy przeciwko prowokacji czynnikiem zjadliwym wykazano po leczeniu szczepionką polinukleotydową wyrażającą gen dla białka G pod kontrolą wczesnego wirusowego promotora SV40 (Xiang i in., Virology 199, 1994, 132-140), podobne wyniki osiągnięto stosując promotor CMV IE.
Celem wynalazku jest dostarczenie kompozycji multiwalentnej szczepionki, która zapewni skuteczne szczepienie psów przeciwko wielu czynnikom chorobotwórczym, która zawiera różne wartościowości, oraz spełnia wszystkie wymagane kryteria wzajemnej zgodności i stabilności wartościowości Taka kompozycja szczepionki, która umożliwi połączenie różnych wartościowości w tym samym nośniku, jest łatwa w użyciu i niedroga Dodatkowo celem wynalazku jest dostarczenie takiego sposobu szczepień psów, który umożliwi zwiększenie skuteczności szczepionki według wynalazku albo znaczące zmniejszenie ilości szczepień i uzyskanie zadowalającego bezpieczeństwa.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, obejmująca przynajmniej dwie wartościowości szczepionek, z których każda obejmuje integrujący plazmid, obejmujący gen jednej z wartościowości patogenu psów, który wyraża go in vivo w komórkach psowatego gospodarza, a konkretnie wartościowości wirusa choroby Carre CDV i wartościowość wirusa psiej parwowirozy CPV, przy czym plazmidy obejmują dla każdej wartościowości jeden albo więcej genów wybranych z grupy obejmującej geny HA i F wirusa choroby Carre i gen VP2 wirusa psiej parwowirozy.
Korzystnie dla wartościowości dla wirusa choroby Carre, plazmid(y) obejmuje geny HA i F zarówno włączone do jednego plazmidu jak i włączone do różnych plazmidów
Kompozycja szczepionki według wynalazku może również obejmować wartościowość dla psiego koronawirusa CCV, z jednym lub więcej genami wybranymi z grupy genów S i M, korzystnie gen S albo geny S i M. Geny te mogą być włączone do różnych plazmidów lub połączone razem w tym samym plazmidzie w sposób pozwalający na ich wyrażanie
W korzystnym wykonaniu powyżej wymienione kompozycje szczepionki b1- i triwalentne według wynalazku mogą również obejmować, dodatkowo, wartościowości skuteczne w zapobieganiu zespołowi zaburzeń oddychania, mianowicie wartościowość PI2, które obejmują przynajmniej jedne z genów HA i F, korzystniej oba geny HA i F.
Kompozycja szczepionki według wynalazku korzystnie obejmuje również jedną albo wiele wartościowości wybranych z grupy obejmującej herpeswirozę CHV, chorobę z Lyme albo wściekliznę, plazmidy obejmujące dla każdej wartościowości, jeden albo wiele genów wybranych z grupy obejmującej geny gB i gD dla wirusa CHV, geny OspA, OspB i p100 dla B burgdorferi (choroba z Lyme) i gen G dla wścieklizny.
190 150
Korzystnie dla zakażenia wirusem herpes dwa geny gB i gD są połączone zarówno w dwóch plazmidach, jak i w jednym Dla choroby z Lyme, korzystny jest gen OspA.
W korzystnym wykonaniu wynalazku kompozycja szczepionki według wynalazku ma dołączoną instrukcję obsługi wskazującą, ze tę kompozycję można zastosować jako szczepionkę przypominającą dla pierwszej szczepionki dla psów wybranej z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, maktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową, szczepionkę rekombinowaną, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen kodowany przez szczepionkę polinukleotydową albo antygen zapewniający odporność krzyżową.
Wartościowość według mniejszego wynalazku należy rozumieć jako przynajmniej jeden antygen zapewniający ochronę przeciwko wirusowi jako rozważanemu patogenowi, i jest możliwe, ze wartościowość zawiera, jako podwartościowości, jeden lub więcej zmodyfikowanych lub naturalnych genów z jednego lub więcej szczepów rozważanego patogenu
Gen czynnika patogennego należy rozumieć nie tylko jako gen kompletny, lecz również jako różnorodne sekwencje nukleotydowe, w tym fragmenty zachowujące zdolność do wywołania odpowiedzi odpornościowej. Wyrażenie, że geny obejmują sekwencje nukleotydowe równoważne z tymi opisanymi szczegółowo w przykładach, dotyczy sekwencji różniących się, lecz kodujących to samo białko. Oznacza to również sekwencje nukleotydowe innych szczepów rozważanego patogenu, które zapewniają ochronę krzyżową albo ochronę charakterystyczną dla danego szczepu albo grupy szczepu. Oznacza również sekwencje nukleotydowe, które zostały zmodyfikowane w celu ułatwienia ekspresji in vivo w zwierzęciu będącym gospodarzem, lecz ciągle kodują to samo białko.
Kompozycja szczepionki według wynalazku zawiera różne wartościowości w terapeutycznie skutecznych ilościach.
Korzystnie kompozycja szczepionki według wynalazku obejmuje od 10 ng do 1 mg, korzystnie od 100 ng do 500 pg, jeszcze korzystniej od 1 pg do 250 pg każdego z plazmidów Nośnik stosowany do podawania szczepionki, na przykład drogą domięśniową będzie w objętości dawki między 0,1 a 5 ml, korzystniej między 0, 5 a 2 ml.
Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie jednego albo wielu plazmidów według wynalazku do wytwarzania szczepionki dla psów, uprzednio szczepionych pierwszą szczepionką wybraną z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, inaktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową, szczepionkę rekombinowaną, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen(y) kodowane(y) przez plazmid albo antygen(y) zapewniający(e) odporność krzyżową.
Wskazane jest stosowanie nagich plazmidów po prostu w nośniku do szczepionki, którym zazwyczaj będzie sól fizjologiczna (0,9% NaCl), woda destylowana, bufor TE i tym podobne Mogą w ten sposób oczywiście być wykorzystane wszystkie formy szczepionki polinukleotydowej wcześniej opisane w stanie techniki. Każdy plazmid zawiera promotor zdolny do zapewnienia ekspresji włączonego genu, pod jego kontrolą w komórkach gospodarza Zazwyczaj będzie to silny promotor eukariotyczny, a zwłaszcza wczesny promotor CMV-IE wirusa cytomegalu pochodzenia ludzkiego lub mysiego, albo ewentualnie o innym pochodzeniu np. od szczurów, świń albo od świnek morskich.
Bardziej ogólnie, promotor może być zarówno pochodzenia wirusowego jak i komórkowego Jako promotor wirusowy inny niż CMY-IE można wymienić wczesny i późny promotor wirusa SV40 albo promotor LTR wirusa mięsaka Rous'a Możliwy jest również promotor wirusa, z którego pochodzi gen, na przykład własny promotor genu.
Jako promotor komórkowy może być wymieniony promotor genu cytoszkieletu, taki jak na przykład promotor desminy (Bolmont i in., Journal of Submicroscopic Cytology and pathology, 1990. 22. 117-122; i Zhenlin i in.. Gene, 1989, 78, 243-254). albo alternatywnie promotor aktyny
Gdy kilka genów jest prezentowanych w tym samym plazmidzie, mogą one być prezentowane w tej samej jednostce transkrypcyjnej lub w dwóch różnych jednostkach.
Kombinacja różnych wartościowości szczepionki według wynalazku może być korzystnie uzyskana przez zmieszanie plazmidów polinukleotydowych wyrażających antygen(y) każdej wartościowości, lecz antygeny kilku wartościowości mogą być również wyrażane w tym samym plazmidzie.
190 150
Przedmiotem wynalazku jest również zestaw do szczepienia obejmujący kompozycję szczepionki według wynalazku i pierwszą szczepionkę dla psów wybraną z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, inaktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową, szczepionkę rekombinowaną, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen kodowany przez szczepionkę polinukleotydową albo antygen zapewniający odporność krzyżową, do podawania tej pierwszej szczepionki podczas pierwszego szczepienia i kompozycji szczepionki podczas szczepienia przypominającego.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest szczepionka do szczepienia psów przeciwko wściekliźnie obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedni nośnik.
W zakres wynalazku wchodzi również zastosowanie plazmidu, który zawiera i wyraża in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedniego nośnika do wytwarzania szczepionki do szczepienia psów przeciwko wściekliźnie
Przedmiotem mniejszego wynalazku jest również sposób szczepienia psów przeciwko wściekliźnie, według którego psu podaje się szczepionkę obejmującą plazmid zawierający i wyrażający in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedni nośnik.
Kompozycje szczepionki według wynalazku mogą być podawane różnymi sposobami podawania opisanymi we wcześniejszym stanie techniki dla szczepionek polinukleotydowych albo znanymi technikami podawania, przy czym korzystną drogą podawania jest droga domięśniowa.
Wydajność prezentowania antygenów układowi odpornościowemu różni się zależnie od tkanki Błony śluzowe układu oddechowego służą jako bariera przeciwko wnikaniu patogenów i są związane z tkankami limfatycznymi wspomagającymi miejscową odporność. Podawanie szczepionki przez kontakt z błonami śluzowymi, zwłaszcza błoną śluzową policzka i błoną śluzową gardła i błoną śluzową okolicy oskrzeli jest szczególnie wskazane dla szczepień przeciwko chorobom układu oddechowego i pokarmowego.
Możliwe jest podawanie szczepionki przez błony śluzowe, szczególnie z zastosowaniem nebulizacji albo rozpylacza albo wody pitnej. W związku z tym możliwe jest podawanie tą drogą kompozycji szczepionki według wynalazku..
Przedmiotem wynalazku jest również szczepionka dla psów obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen P12 HA lub gen P12 F oraz odpowiedni nośnik, korzystnie plazmid zawiera i wyraża oba geny HA i F, korzystniej szczepionka obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen HA oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen F.
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest szczepionka dla psów obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CHV gB lub CHV gD oraz odpowiedni nośnik, korzystnie plazmid zawiera i wyraża oba geny gB i gD, korzystniej szczepionka obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen gB oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen gD.
W zakres wynalazku wchodzi również szczepionka dla psów obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CCV S lub gen CCV M oraz odpowiedni nośnik, korzystnie plazmid zawiera i wyraża oba geny S i M, korzystniej szczepionka obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen S oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen M
Kolejnym przedmiotem wynalazku jest szczepionka dla psów obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CPV VP2 oraz odpowiedni nośnik.
Przedmiotem wynalazku jest również szczepionka dla psów obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CDV HA lub gen CDV F oraz odpowiedni nośnik, korzystnie plazmid zawiera i wyraża oba geny HA i F, korzystniej szczepionka obejmuje pierwszy plazmid, któiy- zawiera i wyraża, gen HA i d rugi plazmid, który zawiera i wyraża gen F
W zakres wynalazku wchodzi również szczepionka do szczepienia psów przeciwko chorobie z Lyme obejmująca plazmid, który zawiera i wyraża in vivo geny OspA, OspB lub p100 oraz odpowiedni nośnik, korzystniej plazmid zawiera i wyraża gen OspA.
W korzystnym wykonaniu szczepionki według wynalazku gen jest pod kontrolą promotoia wybranego z grupy składającej się z promotora CMY-IE, wczesnego promotora SV40, późnego promotora SV40, promotora LTR wirusa mięsaka Rousa, promotora genu cytoszkieletu, korzystniej ekspresja genu jest pod kontrolą promotora CMY-lE.
190 150
Szczepionki monowalentne zawierające jeden lub więcej plazmidów kodujących jeden lub więcej wcześniej opisanych genów z jednego z powyższych wirusów, mogą różnić się odnośnie, co do wyboru genów, ich kombinacji, kompozycji plazmidów, objętości dawki, dawek i innych cech
Kompozycje monowalentnej szczepionki mogą być również stosowanie (i) do przygotowania kompozycji opisanej powyżej szczepionki poliwalentnej, (ii) pojedynczo w przypadku aktualniej patologii, (iii) do połączenia ze szczepionką innego typu (żywą lub w całości inaktywowaną, rekombinowaną, podjednostkową) przeciwko innej patologii, albo (iv) jako dawka przypominająca dla szczepionki opisanej powyżej.
Warte odnotowania jest, ze szczepionka polinukleotydowa posiada potencjalne działanie dawki przypominającej, co powoduje spotęgowanie odpowiedzi immunologicznej i nabycie długotrwałej odporności.
Ogólnie, szczepionka służąca do pierwszego szczepienia może być wybrana ze szczepionek różnych producentów szczepionek weterynaryjnych dostępnych na rynku.
Możliwe jest również szczepienie obejmujące pierwsze szczepienia, tak jak to opisano powyżej i dawkę przypominającą kompozycją szczepionki według wynalazku.
Wskazane jest podawanie w pierwszej kolejności zwierzęciu skutecznej dawki szczepionki tradycyjnej, szczególnie inaktywowanej, żywej, atenuowanej albo rekombinowanej albo alternatywnie szczepionki podjednostkowej, zapewniającej pierwsze szczepienie i podawanie po czasie korzystnie od 2 do 6 tygodni poliwalentnej albo monowalentnej szczepionki według wynalazku
Sposób przygotowania kompozycji szczepionek, to znaczy przygotowania wartościowości i ich mieszanin, wynika jasno z opisu wynalazku.
Wynalazek teraz zostanie opisany bardziej szczegółowo przez wykonania wynalazku podane w odniesieniu do towarzyszących rysunków.
Lista Figur
Figura nr 1: Plazmid pVR1012
Figura nr 2: Plazmid pAB044
Figura nr 3. Plazmid pAB036
Figura nr 4: Plazmid pAB024
Figura nr 5' Plazmid pAB021
Figura nr 6‘ Plazmid pAB022
Figura nr 7 Plazmid pAB037
Figura nr 8' Plazmid pAB038
Figura nr 9. Plazmid pAB017
Figura nr 10 Plazmid pAB041
Lista sekwencji Id Sekw. nn 1. Id. Sekw. nn 2' Id Sekw. nn 3 Id. Sekw. nn 4 Id Sekw. nn 5 Id. Sekw. nn 6. Id. Sekw. nn 7: Id. Sekw. nn 8: Id. Sekw. nn 9. Id Sekw nr 10: Id SSkw. nr11: Id SsIcw. m- 12 Id SSew. nr13 Id SSekw nr 14-: Id SSew. nr15
Id. Sekw. nr : oligonukleotyd AB017 oligonukleotyd ABO 18 oligonukleotyd AB08 5 oligonukleotyd AB086 oligonukleotyd AB053 ollgomukleotyd AB054 oligonukleotyd AB045 oligonukleotyd AB048 oHgonuklcotyd ABQ^9 oligonnuieotyd AB050 ollgonukleotyd AB087 ollgonukleotyd AB08 8 ollgonukleotyd AB 08 9 otlgonukleotyd AB090 ollgonukleotyd AB03 8
190 150
Id Sekw nr 16 oligonukleotyd AB039
Id Sekw. nr 17: oligonukleotyd AB011
Id Sekw. nr 18. oligonukleotyd AB012
Przykłady
Przykład 1: Hodowla wirusa
Wirusy hoduje się w odpowiednim układzie komórkowym, do uzyskania efektu cytopatycznego. Układy komórkowe do zastosowania dla każdego z wirusów są znane specjalistom Pokrótce, komórki wrażliwe na wirusa, które hoduje się w minimalnej niezbędnej pożywce Eagle'a (MEM) albo w innej odpowiedniej pożywce, zakaża się badanym szczepem wirusa stosując wielokrotność zakażenia równą 1. Zakażone komórki inkubuje się w 37°C przez czas niezbędny do wystąpienia całkowitego efektu cytopatycznego (średnio 36 godzin).
Przykład 2: Hodowla bakterii
Szczepy Borrelia burgdorferi hodowano w odpowiedniej pożywce i w warunkach dobrze znanym specjalistom. Warunki te i pożywkę opisał szczegółowo A. Barbour (J. Biol. Med 1984, 57, 71-75). Ekstrakcję bakteryjnego DNA przeprowadzono w warunkach opisanych przez W. Simpson i in., (Infect. Immunol.. 1990, 58, 847-853). Również można było wykorzystać klasyczne techniki opisane przez J. Sambrook i in., (Molecular clomng. A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989)
Przykład 3: Ekstrakcja wirusowych genomowych DNA
Po hodowli, nadsącz i rozłożone komórki zbiera się i całą zawiesinę wirusa wiruje się przy 1000 g przez 10 minut w 4°C w celu usunięcia resztek komórkowych. Cząstki wirusa zbiera się przez ultrawirowanie przy 400000 g przez godzinę w 4°C. Osad pobiera się w minimalnej objętości buforu (10 mM Tris, 1 mM EDTA). Tę zatężoną zawiesinę wirusa traktuje się protein aząK (100 pg/ml objętości końcowej) w obecności soli sodowej siarczanu dodecylu (SDS) (0,5%) przez 2 godziny w 37°C Wirusowy DNA ekstrahuje się mieszaniną fenol/chloroform i precypituje 2 objętościami absolutnego etanolu. Po pozostawieniu przez noc w -20°C, DNA wiruje się przy 10000 g przez 15 minut w 4°C. Osad DNA suszy się i pobiera w minimalnej objętości sterylnej, ultraczystej wody. Następnie można go trawić enzymami restrykcyjnymi.
Przykład 4: Izolacja wirusowych genomowych RNA
Wirusy RNA oczyszczono według technik znanych specjalistom. Następnie, genomowy wirusowy RNA każdego z wirusów izolowano stosując technikę ekstrakcji „rodankiem guanidyny/fenol-chloroform” opisaną przez Chomczynski i Sacchi (Anal. Biochem., 1987, 162 •156-159)
Przykład 5 Techniki biologii molekularnej
Wszystkie konstrukcje plazmidów przeprowadzono stosując standardowe techniki biologii molekularnej, opisane przez Sambrook i in., (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, wyd. 2, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Wszystkie fragmenty restrykcyjne zastosowane w wynalazku wyizolowano stosując zestaw „Geneclean” (BIO 101 Inc., La Jolla, CA).
Przykład 6: Technika RT-PCR
Swoiste oligonukleotydy (obejmujące miejsca restrykcyjne na końcach 5' w celu ułatwienia klonowania amplifikowanych fragmentów) syntetyzowano w taki sposób, ze pokrywały w całości regiony kodujące genów, które miały być amplifikowane (patrz, konkretne przykłady) Reakcję odwrotnej transkrypcji (RT) i reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) przeprowadzono technikami standardowymi (Sambrook i in., 1989). Każdą z reakcji RT-PCR przeprowadzono z parą swoistych starterów amplifikacji z ekstrahowanym genomowym wirusowym RNA jako matrycą. Amplifikowany komplementarny DNA ekstrahowano mieszaniną fenol/chloroform/alkohol izoamylowy (25:24:1), po czym trawiono enzymami restrykcyjnymi.
Przykład 7: plazmid pVR1012
Plazmid pVR1012 (figura 1) otrzymano z Vical inc , San Diego, CA, USA. Jego konstrukcję opisano w Hartikka i in. (Human Gene Therapy, 1996, 7:1205-1217).
Przykład 8: Konstruowanie plazmidu pAB044 (gen HA CDV)
190 150
Reakcję RT-PCR techniką według przykładu 6 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa choroby Carre (CDV) (szczep Onderstepoort) (M. Sidhu i in., Virology, 1993, 193, 66-72) wytworzonym techniką według przykładu 4 z następującymi oligonukleotydami:
AB0 17 (35-mer) (Id Sekw'. nr 1)
5'AAAACTGCAGAATGCTCCCCTACCAAGACAAGGTG3'
AB018 (37-mer) (Id. Sekw nr 2)
5' CGCGGATCCTTAACGGTTACATGAGAATCTTATACGG3' w taki sposób, ze izolowano gen kodujący glikoproteinę HA CDV w postaci fragmentu PstI-BamHI o wielkości 1835 bp. Po oczyszczeniu, fragment PCR o wielkości 1835 bp trawiono PstI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu PstI-BamHI o wielkości 1817 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawionym uprzednio PstI i BamHI, otrzymując plazmid pAB044 (6676 bp) (figura 2).
Przykład 9: Konstruowanie plazmidu AB036 (gen F CDV)
Reakcję RT-PCR techniką według przykładu 6 przeprowadzono z genomowym RNA wirusa choroby Carre (CDV) (szczep Onderstepoort) (R. Driellen, Genbank nr dostępu Χ65509) wytworzonym techniką według przykładu 4 z następującymi oligonukleotydami:
AB085 (40-mer) (Id Sekw. nr 3)
5'ATAAGAAGCGGCCGCACATGCACAAGGGAATCCCCAAAAG3'
AB086 (32-mer) (Id. Sekw. nr 4)
5'CGCGGATCCACTTCAGTGTGATCTCACATAGG3’ w taki sposób, ze izolowano gen kodujący glikoproteinę f CDV w postaci fragmentu NotI-BamHI Po oczyszczeniu, produkt PCR-RT o wielkości 2018 bp trawiono NotI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu NotI-BamHI o wielkości 2000 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawiony uprzednio PstI i BamHI, otrzymując plazmid pAB036 (6893 bp) (figura 3).
Przykład 10' Konstrukcja plazmidu pAB024 (gen VP2 psiego parwowirusa)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA psiego parwowirusa (CPV) (szczep CPV-B) (C. Pamsh i in., GenBank nr dostępu M19296) wytworzonym techniką według przykładu 3 z następującymi oligonukleotydami:
AB053 (33-mer) (Id. Sekw. nr 5)
5’ACGCGTCGACATGAGTGATGGAGCAGTTCAACC3'
AB054 (33-mer) (Id. Sekw. nr 6)
C(GkC<kATCXTTAATAF\AITrTCTAG(GrGCTAG3’ (5634 bp) (figura 6).
w taki sposób, ze izolowano gen kodujący białko kapsydowe VP2 (CPV VP2) w postaci fragmentu SalI-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt PCR trawiono SalI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu SalI-BamHI o wielkości 1760 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawionym uprzednio SalI i BamHI, otrzymując plazmid pAB024 (6629 bp) (figura 4).
Przykład 11: Konstrukcja plazmidu pAB021 (gen S CCV)
Reakcję RT-PCR techniką według przykładu 6 przeprowadzono z genomowym RNA psiego koronawirusa (CCV) (B. Horsburgh i in.. J. Gen. Virol., 1992, 73. 2849-2862) z następującymi oligonukleotydami:
AB045 (32-mer) (Id. Sekw. nr 7) 'ACGCGTCGACATGATTGTGCTTACATTGTGCC 3'
AB048 (35-mer) (Id Sekw nr 8)
5' CGCGGATCCTCAGTGAACATGAACTTTTTCAATAG3' w taki sposób, ze amplifikowano fragment obejmujący gen kodujący glikoproteinę S CCV w postaci fragmentu SalI-BamHI. Po oczyszczeniu, produkt RT-pCr trawiono SalI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu SalI-BamHI o wielkości 4361 bp.
Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawionym uprzednio SalI i BamHI, otrzymując plazmid pAB021 (9030 bp) (figura 5).
Przykład 12: Konstrukcja plazmidu pAB022 (gen M CCV)
Reakcję RT-PCR techniką według przykładu 6 przeprowadzono z genomowym RNA psiego koronawirusa (CCV) (B. Horsburgh i m., J. Gen. Virol., 1992, 73, 2849-2862) przeprowadzono według techniki z przykładu 4, z następującymi oligonukleotydami:
AB049 (34-mer) (Id. Sekw. nr 9)
5'AAAACTGCAGAAATGAAGAAAATTTTGTTTTTAC3'
AB050 (33-mer) (Id. Sekw. nr 10)
5'CGCGGATCCTTATACCATATGTAATAATTTTTC3' w taki sposób, ze izolowano sekwencję kodującą gliko-proteinę M w postaci fragmentu PstI-BamHI. Po oczyszczemu, produkt PCR-RT trawiono PstI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu Pstl-BamHI o wielkości 792 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawionym uprzednio PstI i BamHI, otrzymując plazmid pAB022 (5651 bp) (figura 6)
Przykład 13 - Konstrukcja plazmidu pAB037 (gen gB CHV)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA psiego wirusa herpes (CHV) (szczep Carmichael) (K Limbach i in., J. Gen. Virol., 1994, 75, 2029-2039), według techniki z przykładu 3, z następującymi oligonukleotydami:
AB087 (34-mer) (Id. Sekw. nr 11)
5' AAAACTGCAGAAGTATGTTTTCATTGTATCTATA3'
AB088 (34-mer) (Id Sekw·-. nr 12)
5’ CTAGTCTAGATTATT/AA\CTTTACTTTCATTTTC3' w taki sposób, ze izolowano gen kodujący glikoproteinę gB wirusa CHV w postaci fragmentu. Po oczyszczeniu, produkt PCR o wielkości 2667 bp trawiono PstI i XbaI w celu uwolnienia fragmentu PstI-XbaI o wielkości 2648 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawiony uprzednio PstI-XbaI, otrzymując plazmid pAB037 (6107 bp) (figura 7)
Przykład 14: Konstrukcja plazmidu pAB038 (gen gD CHV)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA psiego wirusa herpes (CHV) (szczep Carmichael) (K. Limbach i in., J. Gen. Virol., 1994, 75, 2029-2039), według techniki z przykładu 3, z następującymi oligonukleotydami:
AB089 (34-mer) (Id Sekw nr 13) 'AAAACTGCAGAAAATGATTAAACTTCTATTTATC3'
AB090 (35-mer) (Id Sekw nr 14)
5'ALA\GAATGCGGCCGCAAAGGCTAAACATTTGTTG3' w taki sposób, ze izolowano gen kodujący glikoproteinę gD wirusa CHV w postaci fragmentu PstI-NotI Po oczyszczeniu, produkt PCR o wielkości 1072 bp trawiono PstI i NotI w celu uwolnienia fragmentu PstI-NotI o wielkości 1049 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawiony uprzednio PstI i NotI, otrzymując plazmid pAB038 (5930 bp) (figura 8)
Przykład 15. Konstrukcja plazmidu pAB017 (gen ospA Borrelia burgdorferi)
Reakcję PCR przeprowadzono z genomowym DNA Borrelia burgdorferi (szczep B31) (S Bergstrom i in., Mol Microbiol 1989, 3, 479-486), według techniki z przykładu 2, z następującymi oligonukleotydami:
190 150
AB038 (37-mer) (Id. Sekw. nr 15)
5'ACGCGTCGACTATGAAAAAATATTTATTGGGAATAGG3'
AB039 (34-mer) (Id. Sekw. nr 16)
5'CGCGGATCCCTTATTTTAAAGCGTTTTTAATTTC3' w taki sposób, ze izolowano gen białko błonowe OspA w postaci fragmentu SalIBamHI. Po oczyszczeniu, produkt PCR o wielkości 842 bp trawiono SalI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu SalI-BamHI o wielkości 829 bp. Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawiony uprzednio SalI i BamHI, otrzymując plazmid pAB017 (5698 bp) (figura 9).
Przykład 16 Konstrukcja plazmidu pAB041 (gen G)
Reakcję RT-PCR techniką według przykładu 6 przeprowadzono z genomowym RNA bydlęcego wirusa wścieklizny (szczep ERA) (A. Anilionis i in., Naturę, 1981, 294, 275-278), przygotowano techniką według przykładu 4, z następującymi oligonukleotydami'
AB011 (33-mer) (Id. Sekw. nr 17)
5'AAAACTGCAGAGATGGTTCCTCAGGCTCTCCTG3'
AB012 (34-mer) (Id. Sekw. nr 18)
5'CGCGGATCCTCACAGTCTGGTCTCACCCCCACTC3' w taki sposób, ze amplifikowano fragment 1589 bp zawierający gen kodujący glikoproteinę G wirusa wścieklizny. Po oczyszczeniu, produkt RT-PCR trawiono PstI i BamHI w celu uwolnienia fragmentu PstI-BamHI o wielkości 1578 bp Fragment ten następnie poddano ligacji z wektorem pVR1012 (przykład 7), trawiony uprzednio PstI i BamHI, otrzymując plazmid pAB041 (6437 bp) (figura 10)
Przykład 17: Wytwarzanie i oczyszczanie plazmidów
Do wytwarzania plazmidów przeznaczonych do szczepienia zwierząt, można zastosować dowolną technikę, która umożliwia otrzymanie zawiesiny oczyszczonych plazmidów, głównie w postaci super-skręconej. Techniki te znane są specjalistom. W szczególności można wymienić technikę lizy alkalicznej, a następnie dwa kolejne ultrawirowania na gradiencie chlorku cezu, w obecności bromku etydyny, jak to opisano w Sambrook i in., (Molecular Clomng A Laboratory Manual, wyd. 2, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, 1989). Można również powołać zgłoszenie patentowe PCT WO 95/21250 i PCT WO 96/02658 opisujące metodę wytwarzania, na skalę przemysłową, plazmidów, które można zastosować do szczepienia. W celu wytwarzania szczepionek (patrz, przykład 17), oczyszczone plazmidy zawiesza się w celu otrzymania zawiesin o wysokim stężeniu (> 2 mg/ml), które są możliwe do przechowywania. W tym celu, plazmidy zawiesza się w ultraczystej wodzie albo w buforze TE (10 mM Tris; 1 mM EDTA, pH 8,0).
Przykład 18 Wytwarzanie szczepionek skojarzonych
Różne plazmidy konieczne do wytwarzania szczepionek skojarzonych miesza się wychodząc z ich stężonych roztworów (przykład 16). Mieszaniny wytwarza się w taki sposób, ze stężenie końcowe każdego z plazmidów odpowiada skutecznej dawce każdego z nich. Roztwory, które można zastosować do ustalenia stężenia końcowego szczepionki mogą być roztworami 0,9% NaCl albo buforem PBS.
Szczególnie formulacje takie jak liposomy lub kationowe lipidy można również wykorzystać w przygotowaniu szczepionek
Przykład 19: Szczepienie psów.
Psy szczepi się dawkami 10 pg, 50 pg albo 250 pg na plazmid
Wstrzykiwanie można przeprowadzić igłą, drogą domięśniową. W tym przypadku objętość podawanej dawki szczepionki wynosi 1 albo 2 mi. Wstrzykiwanie można przeprowadzić igłą, drogą śródskórną. W tym przypadku dawki podawane są w całkowitej objętości 1 ml w dziesięciu punktach po 0,1 ml albo w 20 punktach po 0,05 ml. Wstrzyknięcia śródskórne przeprowadza się po ogoleniu skóry (bok klatki piersiowej) albo w okolicach nieowłosionych, na przykład na wewnętrznej stronie ud. Wtryskiwacz do wstrzyknięć płynu może być również wykorzystany do wstrzyknięć śródskórnych
190 150
190 150
G ” 2-
A
N· 3
190 150
5.
190 150
Fi N
Ł
F N
190 150
Fi N
Fm
190 150
Łr~ N ’10
Departament Wydawnictw UP RP Nakład 50 egz Cena 4,00 zł

Claims (35)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, znamienna tym, ze obejmuje przynajmniej dwie wartościowości szczepionek, z których każda obejmuje integrujący plazmid, obejmujący gen jednej z wartościowości patogenu psów, który wyraża go in vivo w komórkach psowatego gospodarza, a konkretnie wartościowości wirusa choroby Carre CDV i wartościowość wirusa psiej parwowirozy CPV, przy czym plazmidy obejmują dla każdej wartościowości jeden albo więcej genów wybranych z grupy obejmującej geny HA i F wirusa choroby Carre i gen VP2 wirusa psiej parwowirozy.
  2. 2. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, że dla wartościowości wirusa choroby Carre, plazmid(y) obejmuje(ą) geny HA i F, w tym samym plazmidzie albo w różnych plazmidach.
  3. 3. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, ze obejmuje wartościowość psiego koronawirusa CCV, z jednym albo kilkoma plazmidami zawierającymi jeden lub więcej genów wybranych z grupy genów S i M.
  4. 4. Kompozycja według zastrz. 3, znamienna tym, ze obejmuje gen S albo geny S i M.
  5. 5 Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, ze dodatkowo obejmuje wartościowość skuteczną w zapobieganiu zespołowi zaburzeń oddechowych, mianowicie PI2 w jednym albo w wielu plazmidach, które obejmują przynajmniej jeden spośród genów HA i F.
  6. 6 Kompozycja szczepionki według zastrz. 5, znamienna tym, ze obejmuje geny HA i F wartościowości dla zespołu zaburzeń oddechowych.
  7. 7. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, że obejmuje jedną albo wiele wartościowości wybranych z grupy obejmującej herpeswirozę CHV, chorobę z Lyme albo wściekliznę, przy czym plazmidy obejmują dla każdej wartościowości jeden albo wiele genów wybranych z grupy obejmującej geny gB i gD dla wirusa CHV, geny OspA, OspB i p100 dla B. burgdorferi i gen G dla wścieklizny.
  8. 8 Kompozycja szczepionki według zastrz. 7, znamienna tym, ze obejmuje herpeswirozę, przy czym dwa geny gB i gD są włączone do dwóch różnych plazmidów albo do jednego plazmidu.
  9. 9 Kompozycja szczepionki według zastrz. 8, znamienna tym, ze dla choroby z Lyme obejmuje gen OspA.
  10. 10. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1, znamienna tym, ze obejmuje od 10 ng do 1 mg, korzystnie od 100 ng do 500 pg, jeszcze korzystniej od 1 pg do 250 pg każdego z plazmidów.
  11. 11. Kompozycja szczepionki według zastrz. 1 znamienna tym, ze ma dołączoną instrukcję obsługi wskazującą, ze tę kompozycję można zastosować jako szczepionkę przypominającą dla pierwszej szczepionki dla psów wybranej z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, inaktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową, szczepionkę rekombinowaną, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen kodowany przez
    d.o wą albo vniający odporność Kizyżową.
    _________-λι;„„μ ......
    szczepionkę punnukleuty antygen zape’
  12. 12. Zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, jak określone w jednym z zastrz od 1 do 10, do wytwarzania szczepionki dla psów, uprzednio szczepionych pierwszą szczepionką wybraną z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, inaktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową, szczepionkę rekombinowaną, przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen(y) kodowane(y) przez plazmid albo antygen(y) zapewmajacy(e) odporność krzyżową
    190 150
  13. 13. Zestaw do szczepienia, znamienny tym, ze obejmujący kompozycję szczepionki określonej w jednym z zastrz 1-10, i pierwszą szczepionkę dla psów wybraną z grupy obejmującej żywą pełną szczepionkę, inaktywowaną pełną szczepionkę, szczepionkę podjednostkową szczepionkę rekombinowaną przy czym ta pierwsza szczepionka posiada antygen kodowany przez szczepionkę polinukleotydową albo antygen zapewniający odporność krzyżową do podawania tej pierwszej szczepionki podczas pierwszego szczepienia i kompozycji szczepionki podczas szczepienia przypominającego.
  14. 14. Szczepionka do szczepienia psów przeciwko wściekliźnie, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedni nośnik
  15. 15. Szczepionka według zastrz. 14, znamienna tym, ze gen jest pod kontrolą promotora wybranego z grupy składającej się z promotora CMY-IE, wczesnego promotora SV40, późnego promotora SV40, promotora LTR wirusa mięsaka Rousa, promotora genu cytoszkieletu
  16. 16. Szczepionka według zastrz. 14, znamienna tym, że ekspresja genu jest pod kontrolą promotora CMY-IE.
  17. 17. Zastosowanie plazmidu, który zawiera i wyraża in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedniego nośnika do wytwarzania szczepionki do szczepienia psów przeciwko wściekliźnie.
  18. 18 Sposób szczepienia psów przeciwko wściekliźnie, znamienny tym, ze psu podaje się szczepionkę obejmującą plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen G wścieklizny oraz odpowiedni nośnik.
  19. 19. Szczepionka dla psów, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen P12 HA lub gen P12 F oraz odpowiedni nośnik.
  20. 20 Szczepionka według zastrz. 19, znamienna tym, ze plazmid zawiera i wyraża oba geny HA i F
  21. 21. Szczepionka według zastrz. 19, znamienna tym, ze obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen HA oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen F,
  22. 22 Szczepionka dla psów, znamienna tym, że obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CHV gB lub CHV gD oraz odpowiedni nośnik.
  23. 23 Szczepionka według zastrz. 22, znamienna tym, że plazmid zawiera i wyraża oba geny gB i gD.
  24. 24. Szczepionka według zastrz. 22, znamienna tym, ze obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen gB oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen gD.
  25. 25. Szczepionka dla psów, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CCV S lub gen CCV M oraz odpowiedni nośnik.
  26. 26. Szczepionka według zastrz. 25, znamienna tym, ze plazmid zawiera i wyraża oba geny S i M.
  27. 27. Szczepionka według zastrz. 25, znamienna tym, ze obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen S oraz drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen M.
  28. 28 Szczepionka dla psów, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CPV VP2 oraz od powiedni nośnik.
  29. 29. Szczepionka dla psów, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo gen CDV HA lub gen CDV F oraz odpowiedni nośnik.
  30. 30. Szczepionka według zastrz. 27, znamienna tym, ze plazmid zawiera i wyraża oba geny HA i F.
  31. 31. Szczepionka według zastrz 29, znamienna tym, ze obejmuje pierwszy plazmid, który zawiera i wyraża gen HA i drugi plazmid, który zawiera i wyraża gen F.
  32. 32. Szczepionka do szczepienia psów przeciwko chorobie z Lyme, znamienna tym, ze obejmuje plazmid, który zawiera i wyraża in vivo geny OspA, OspB lub p100 oraz odpowiedni nośnik
  33. 33. Szczepionka według zastrz. 32, znamienna tym, że plazmid zawiera i wyraża gen OspA.
  34. 34. Szczepionka według dowolnego z zastrz. od 19 do 33, znamienna tym, że gen jest pod kontrolą promotora wybranego z grupy składającej się z promotora CMY-IE, wczesnego promotora SV40, późnego promotora SV40, promotora LTR wirusa mięsaka Rousa, promotora genu cytoszkieletu.
    190 150
  35. 35 Szczepionka według dowolnego z zastrz od 19 do 33, znamienna tym, ze ekspresja genu jest pod kontrolą promotora CMY-IE.
PL97331246A 1996-07-19 1997-07-15 Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia PL190150B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609401A FR2751227B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
PCT/FR1997/001316 WO1998003199A1 (fr) 1996-07-19 1997-07-15 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL331246A1 PL331246A1 (en) 1999-07-05
PL190150B1 true PL190150B1 (pl) 2005-11-30

Family

ID=9494495

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL97331246A PL190150B1 (pl) 1996-07-19 1997-07-15 Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia

Country Status (17)

Country Link
US (2) US6228846B1 (pl)
EP (1) EP0954332B2 (pl)
JP (1) JP2000515521A (pl)
KR (3) KR20000067866A (pl)
AR (1) AR034997A1 (pl)
AU (1) AU733563B2 (pl)
BR (1) BR9710509A (pl)
CA (1) CA2260273C (pl)
CZ (1) CZ300385B6 (pl)
DE (1) DE69731309T3 (pl)
FR (1) FR2751227B1 (pl)
NZ (1) NZ333780A (pl)
PL (1) PL190150B1 (pl)
RU (1) RU2319504C2 (pl)
TW (1) TW587942B (pl)
WO (1) WO1998003199A1 (pl)
ZA (1) ZA976284B (pl)

Families Citing this family (72)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7294338B2 (en) * 1996-07-19 2007-11-13 Merial Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
FR2751227B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
EP0863151A1 (en) * 1997-02-12 1998-09-09 Akzo Nobel N.V. "Canine parvovirus dna vaccines"
CA2223029A1 (en) 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
US6368603B1 (en) * 1997-03-05 2002-04-09 Merial Limited Lyme combination compositions and uses
AU782154C (en) * 1999-06-10 2006-02-09 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. DNA vaccines for pets and sport animals
FR2794648B1 (fr) * 1999-06-10 2003-03-07 Merial Sas Vaccins adn pour animaux de compagnie et de sport
CA2431938A1 (en) * 2001-02-15 2002-10-10 The Registrar, Indian Institute Of Science A novel vaccine formulation consisting of dna vaccine inactivated virus
FR2823222B1 (fr) 2001-04-06 2004-02-06 Merial Sas Vaccin contre le virus de la fievre du nil
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
JP2006512368A (ja) * 2002-12-19 2006-04-13 アクゾ・ノベル・エヌ・ベー 乳汁を介して母親由来抗体を伝達する三価ワクチン
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
US8541003B2 (en) 2003-06-20 2013-09-24 Protein Sciences Corporation Vectors expressing SARS immunogens, compositions containing such vectors or expression products thereof, methods and assays for making and using
US20050214316A1 (en) 2003-11-13 2005-09-29 Brown Thomas P Methods of characterizing infectious bursal disease virus
US20050202484A1 (en) 2004-02-19 2005-09-15 The Governors Of The University Of Alberta Leptin promoter polymorphisms and uses thereof
HRP20100314T1 (hr) 2005-04-25 2010-08-31 Merial Ltd. Cjepivo protiv nipah virusa
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
JP2009515529A (ja) 2005-11-14 2009-04-16 メリアル リミテッド 腎不全のための遺伝子療法
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
US7767686B2 (en) * 2006-03-03 2010-08-03 Covidien Ag Method of using adenosine receptor blockers during tissue ablation
WO2007115059A2 (en) 2006-03-29 2007-10-11 Merial Limited Vaccine against streptococci
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
MX2009011851A (es) 2007-05-02 2010-03-04 Merial Ltd Plasmidos de dna que tienen expresion y estabilidad mejoradas.
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
RU2559527C2 (ru) 2008-11-28 2015-08-10 Мериал Лимитед Рекомбинантная вакцина от птичьего гриппа и её применение
MX2011010406A (es) 2009-04-03 2012-01-20 Merial Ltd Vacunas aviares vectorizadas con el virus de la emfermedad de newcastle.
WO2011090708A2 (en) 2009-12-28 2011-07-28 Merial Limited Recombinant ndv antigen and uses thereof
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
RU2575599C2 (ru) 2010-03-12 2016-02-20 Мериал Лимитед Рекомбинантные вакцины против вируса "синего языка", их применение
EP3156070A3 (en) 2010-08-31 2017-06-14 Merial Inc. Newcastle disease virus vectored herpesvirus vaccines
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
WO2012138789A2 (en) 2011-04-04 2012-10-11 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
AU2012240240A1 (en) 2011-04-04 2013-05-09 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment with protein kinase inhibitors
WO2012145577A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Merial Limited Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
EP2701736A1 (en) 2011-04-25 2014-03-05 Advanced Bioscience Laboratories, Inc. Truncated hiv envelope proteins (env), methods and compositions related thereto
ES2764079T3 (es) 2011-05-27 2020-06-02 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas genéticas contra el virus Hendra y el virus Nipah
CA2837375C (en) 2011-06-01 2019-07-16 Merial Limited Needle-free administration of prrsv vaccines
HUE035774T2 (en) 2011-08-12 2018-05-28 Merial Inc Biological substances, in particular vaccines, preserved by vacuum
US9402894B2 (en) 2011-10-27 2016-08-02 International Aids Vaccine Initiative Viral particles derived from an enveloped virus
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
CA2864119C (en) 2012-02-14 2022-05-24 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
CA2864106C (en) 2012-02-14 2017-10-17 Merial Limited Rotavirus subunit vaccines and methods of making and use thereof
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
US9347065B2 (en) 2012-03-29 2016-05-24 International Aids Vaccine Initiative Methods to improve vector expression and genetic stability
BR112014031133B1 (pt) 2012-06-13 2023-02-07 The University Court Of The University Of Glasgow Vacinas reordenadas de btv e ahsv
US20140170180A1 (en) 2012-12-17 2014-06-19 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine parvovirus 5a, methods of use and vaccine
US20140234354A1 (en) 2013-02-15 2014-08-21 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Porcine parvovirus 5b, methods of use and vaccine
WO2014164697A1 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Merial Limited Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
CN105517569A (zh) * 2013-08-21 2016-04-20 库瑞瓦格股份公司 狂犬病疫苗
US10801070B2 (en) 2013-11-25 2020-10-13 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer
WO2015085147A1 (en) 2013-12-05 2015-06-11 The Broad Institute Inc. Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data
CN120695169A (zh) 2013-12-20 2025-09-26 博德研究所 使用新抗原疫苗的联合疗法
US10010499B2 (en) 2014-11-03 2018-07-03 Merial Inc. Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
WO2016100975A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Massachsetts Institute Ot Technology Molecular biomarkers for cancer immunotherapy
WO2016100977A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 The Broad Institute Inc. Methods for profiling the t-cel- receptor repertoire
EP3297660A2 (en) 2015-05-20 2018-03-28 The Broad Institute Inc. Shared neoantigens
TWI750122B (zh) 2015-06-09 2021-12-21 美商博德研究所有限公司 用於贅瘤疫苗之調配物及其製備方法
CA2990643C (en) 2015-06-23 2023-10-17 Merial, Inc. Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
EP3337503A1 (en) 2015-08-20 2018-06-27 Merial, Inc. Fcv recombinant vaccines and uses thereof
HUE065661T2 (hu) 2015-09-29 2024-06-28 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Kutya parvovírus (CPV) vírusszerû részecske (VLP) vakcinák és alkalmazásuk
EP3380119B1 (en) 2015-11-23 2021-08-25 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Fmdv and e2 fusion proteins and uses thereof
RU2626605C2 (ru) * 2015-11-25 2017-07-28 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая (рекомбинантная) ДНК-конструкция, содержащая кодон-оптимизированный ген гликопротеина (белка G) вируса бешенства с консенсусной аминокислотной последовательностью, которая составлена с учетом аминокислотных последовательностей белка G, выделяемого из штаммов вируса бешенства, циркулирующих на территории Российской Федерации
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途
US20190346442A1 (en) 2016-04-18 2019-11-14 The Broad Institute, Inc. Improved hla epitope prediction
US11549149B2 (en) 2017-01-24 2023-01-10 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide
CN108704128B (zh) * 2018-05-15 2022-06-21 青岛农业大学 一种犬瘟热细小病毒二联亚单位疫苗
US20210382068A1 (en) 2018-10-02 2021-12-09 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Hla single allele lines
US20220062394A1 (en) 2018-12-17 2022-03-03 The Broad Institute, Inc. Methods for identifying neoantigens
RU2707544C1 (ru) * 2018-12-28 2019-11-27 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение Науки Институт Молекулярной Биологии Им. В.А. Энгельгардта Российской Академии Наук (Имб Ран) Генетическая конструкция на основе оптимизированного гена консенсусного гликопротеина вируса бешенства для профилактики бешенства
US12394502B2 (en) 2019-10-02 2025-08-19 The General Hospital Corporation Method for predicting HLA-binding peptides using protein structural features
CN116735873B (zh) * 2023-08-09 2023-10-31 北京纳百生物科技有限公司 特异性结合犬细小病毒vp2蛋白的单克隆抗体在检测试剂中的应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LU56248A1 (pl) * 1968-06-11 1970-01-15
DE69233158T2 (de) * 1991-03-07 2004-05-13 Connaught Technology Corp., Greenville Gentechnologisch hergestellter stamm für impfstoffe
DE69536091D1 (de) * 1994-01-27 2010-09-09 Univ Massachusetts Medical Immunisierung durch Impfung von DNS Transkriptionseinheit
DK0914440T3 (da) 1996-04-19 2007-05-21 Merial Ltd Nukleinsyrevaccination mod parvovirusinfektioner
WO1997041236A1 (en) 1996-04-29 1997-11-06 Andreas Zurbriggen Polynucleotide vaccine against canine distemper
US5846946A (en) 1996-06-14 1998-12-08 Pasteur Merieux Serums Et Vaccins Compositions and methods for administering Borrelia DNA
FR2751227B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-27 Rhone Merieux Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies canines, notamment les pathologies respiratoires et digestives
CA2223029A1 (en) 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
IT1292422B1 (it) * 1997-06-26 1999-02-08 Agip Petroli Reattore a bolle con draft tube e procedimento per la rigenerazione del catalizzatore in esso contenuto
US6063385A (en) * 1997-11-07 2000-05-16 Wisconsin Alumni Research Foundation DNA vaccine for parvovirus

Also Published As

Publication number Publication date
JP2000515521A (ja) 2000-11-21
PL331246A1 (en) 1999-07-05
KR100620302B1 (ko) 2006-09-06
ZA976284B (en) 1999-01-19
CA2260273A1 (en) 1998-01-29
FR2751227A1 (fr) 1998-01-23
NZ333780A (en) 2000-10-27
EP0954332B1 (fr) 2004-10-20
EP0954332B2 (fr) 2014-12-31
KR20000067866A (ko) 2000-11-25
FR2751227B1 (fr) 1998-11-27
BR9710509A (pt) 1999-08-17
WO1998003199A1 (fr) 1998-01-29
CZ15899A3 (cs) 1999-05-12
KR20060013432A (ko) 2006-02-09
RU2002132833A (ru) 2005-01-20
AU3699397A (en) 1998-02-10
CZ300385B6 (cs) 2009-05-06
DE69731309D1 (de) 2004-11-25
EP0954332A1 (fr) 1999-11-10
US6586412B2 (en) 2003-07-01
KR20050087885A (ko) 2005-08-31
AR034997A1 (es) 2004-04-14
DE69731309T3 (de) 2015-06-03
AU733563B2 (en) 2001-05-17
CA2260273C (en) 2010-12-21
TW587942B (en) 2004-05-21
DE69731309T2 (de) 2005-11-17
RU2319504C2 (ru) 2008-03-20
US20010009959A1 (en) 2001-07-26
US6228846B1 (en) 2001-05-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL190150B1 (pl) Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia
AU734442B2 (en) Polynucleotide vaccine formula in particular against bovine respiratory pathology
RU2312676C2 (ru) Формула кошачьей вакцины
CA2660355C (en) Polynucleotide vaccine formulation against pathologies of the horse
PL190615B1 (pl) Kompozycja szczepionki dla świń, zastosowanie kompozycji szczepionki, zestaw do szczepienia, szczepionka dla świń i zastosowanie plazmidu
KR20000065258A (ko) 조류 폴리뉴클레오티드 백신 제제
US7294338B2 (en) Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
AU776827B2 (en) Polynucleotide vaccine formula, particularly for treating bovine respiratory disease
NZ506427A (en) A canidae vaccine comprising the rabies G gene under the control of the CMV-IE promoter
AU2004205140B2 (en) Feline polynucleotide vaccine formula
AU5427401A (en) Polynucleotide vaccine formula for treating horse diseases
HK1083763A (zh) 针对马科动物病变的多核苷酸疫苗配方