PL201772B1 - Analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń serii produkcyjnej lewosimendanu, [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitryl, jego zastosowanie i zawierająca go kompozycja odniesienia - Google Patents
Analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń serii produkcyjnej lewosimendanu, [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitryl, jego zastosowanie i zawierająca go kompozycja odniesieniaInfo
- Publication number
- PL201772B1 PL201772B1 PL347577A PL34757799A PL201772B1 PL 201772 B1 PL201772 B1 PL 201772B1 PL 347577 A PL347577 A PL 347577A PL 34757799 A PL34757799 A PL 34757799A PL 201772 B1 PL201772 B1 PL 201772B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- compound
- levosimendan
- solution
- reference compound
- sample
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 52
- WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N levosimendan Chemical compound C[C@@H]1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 WHXMKTBCFHIYNQ-SECBINFHSA-N 0.000 title claims abstract description 40
- 229960000692 levosimendan Drugs 0.000 title claims abstract description 38
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 230000001738 genotoxic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 231100000024 genotoxic Toxicity 0.000 claims abstract description 10
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims abstract description 6
- 125000002098 pyridazinyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 claims description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 6
- KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 2-[[4-(2-azido-3-methyl-5-oxooxolan-2-yl)phenyl]hydrazinylidene]propanedinitrile Chemical compound CC1CC(=O)OC1(N=[N+]=[N-])C1=CC=C(NN=C(C#N)C#N)C=C1 KWFMPQFMZALWEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 claims description 5
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N dimethyl sulfoxide Natural products CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N malononitrile Chemical compound N#CCC#N CUONGYYJJVDODC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- -1 2-azido-3-methyl-5-oxotetrahydrofuran-2-yl Chemical group 0.000 description 8
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 5
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 4
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 4
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical group [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 125000005638 hydrazono group Chemical group 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 3-(4-aminophenyl)-4-methyl-4,5-dihydro-1h-pyridazin-6-one Chemical compound CC1CC(=O)NN=C1C1=CC=C(N)C=C1 GDMRFHZLKNYRRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 231100000150 mutagenicity / genotoxicity testing Toxicity 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N propionitrile Chemical compound CCC#N FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- AAILEWXSEQLMNI-UHFFFAOYSA-N 1h-pyridazin-6-one Chemical compound OC1=CC=CN=N1 AAILEWXSEQLMNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 2-Chlorobenzylidenemalononitrile Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C=C(C#N)C#N JJNZXLAFIPKXIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010953 Ames test Methods 0.000 description 1
- 231100000039 Ames test Toxicity 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N cyclohexatrienamine Chemical group NC1=CC=C=C[CH]1 UKJLNMAFNRKWGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;toluene Chemical compound CCOC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 OAMZXMDZZWGPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 230000001435 haemodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000012088 reference solution Substances 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D307/32—Oxygen atoms
- C07D307/33—Oxygen atoms in position 2, the oxygen atom being in its keto or unsubstituted enol form
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
- C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D307/26—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D307/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/142222—Hetero-O [e.g., ascorbic acid, etc.]
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/14—Heterocyclic carbon compound [i.e., O, S, N, Se, Te, as only ring hetero atom]
- Y10T436/145555—Hetero-N
- Y10T436/147777—Plural nitrogen in the same ring [e.g., barbituates, creatinine, etc.]
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Abstract
Przedmiotem wynalazku jest analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycz- nych zanieczyszcze n w próbkach z serii produk- cyjnej lewosimendanu, w którym okre sla si e st ezenie zwi azku o strukturze przedstawionej wzorem (I) w próbce. Ponadto, przedmiotem wynalazku jest zwi azek o wzorze (I), jego diaste- reomery oraz kompozycja odniesienia, zawiera- j aca, jako zwi azek odniesienia, zwi azek o wzo- rze (I) i zastosowanie zwi azku tego zwi azku. PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu. Ponadto, przedmiotem wynalazku jest [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]propanodinitryl (I) i jego zastosowanie jako związku odniesienia w analizie serii produkcyjnej lewosimendanu oraz kompozycja odniesienia zawierająca ten związek.
Lewosimendan, który jest (-)-enancjomerem [[4-(1,4,5,6-tetrahydro-4-metylo-6-okso-3-pirydazynylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitrylu, oraz sposób jego wytwarzania opisane są np. w EP 565546 B1. Lewosimendan jest aktywny w leczeniu niewydolności serca i wykazuje znaczne, zależne od wapnia, wiązanie z troponiną. W publikacji WO 93/21921 opisano zastosowanie lewosimendanu w leczeniu niedokrwienia mięśnia sercowego. S. Sundberg i in., w Am. J. Cardiol.; 1995; 1061-1066 opisali hemodynamiczne działanie lewosimendanu. Lewosimendan jest przedstawiony wzorem:
Korzystne działanie lewosimendanu u pacjentów z niewydolnością serca potwierdzono badaniami klinicznymi.
Lewosimendan można wytworzyć z wysoką czystością i prawie ilościową wydajnością przez działanie na (-)-6-(4-amino-fenylo)-5-metylo-4,5-dihydro-3(2H)-pirydazynon azotynem sodu i malononitrylem, jak opisano w EP 565546 B1. Stwierdzono jednakże, że próbki zsyntetyzowanego lewosimendanu w badaniu mutagenności bakterii (test Amesa) wykazują czasami potencjalne własności genotoksyczne.
Obecnie stwierdzono, że potencjalne własności genotoksyczne próbek lewosimendanu są spowodowane przez zanieczysz czenie pochodną azydową o wzorze (I):
Ta pochodna azydową jest silnym mutagenem, który może wytworzyć się w czasie syntezy lewosimendanu w ilości wystarczającej do uzyskania dodatniego wyniku w badaniu mutagenności bakterii. A zatem, związek o nazwie [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]propano-nitryl (I) jest użyteczny jako związek odniesienia w rutynowej analizie serii produkcyjnej syntezy lewosimendanu, a zwłaszcza do oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń serii lewosimendanu. Obecność związku (I) w serii produkcyjnej lewosimendanu wskazuje, że do uzyskania materiału odpowiedniego do stosowania jako lek konieczna jest dalsza rekrystalizacja.
Na fig. 1 przedstawiono chromatogram HPLC [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitrylu jako wzorca (0,4 μg/ml).
Na fig. 2 przedstawiono chromatogram HPLC dla surowego lewosimendanu.
Niniejszy wynalazek dostarcza analitycznego sposobu oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu, który charakteryzuje się tym, że
PL 201 772 B1 określa się stężenie związku o wzorze (I) w próbce. W szczególności próbkę lewosimendanu analizuje się metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC).
W korzystnym wykonaniu analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach serii lewosimendanu obejmuje wytworzenie standardowego roztworu związku odniesienia przez rozpuszczenie związku (I) w roztworze, wytworzenie roztworu do badań przez rozpuszczenie próbki lewosimendanu w roztworze, uzyskanie chromatogramu HPLC dla roztworu związku odniesienia, uzyskanie chromatogramu roztworu badanego i oznaczenie stężenia związku (I) w próbce.
Wynalazek niniejszy dostarcza również związku odniesienie, którym jest [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitryl o strukturze przedstawionej wzorem (I). Związek ten ma zastosowanie jako związek odniesienia do oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu, które stanowi kolejny przedmiot niniejszego wynalazku. Wynalazek dostarcza także kompozycji odniesienia zawierającej związek o wzorze (I) i ewentualnie analitycznie dopuszczalny nośnik, zwłaszcza zasadniczo w nieobecności pochodnych pirydazynylowych.
Określenie „analitycznie dopuszczalny nośnik oznacza nośnik, który nie zakłóca jakościowej lub ilościowej analizy związku (I). Dobór odpowiedniego, analitycznie dopuszczalnego nośnika, będzie oczywisty dla specjalisty w tej dziedzinie techniki. Przykładem takiego nośnika jest sulfotlenek dimetylu.
Związek o wzorze (I) można wytworzyć przez działanie na 6-(4-aminofenylo)-5-metylo-4,5-dihydro-3(2H-pirydazynon azotynem sodu i malononitrylem, przy czym azotyn sodu stosuje się w molowym nadmiarze, i wyodrębnienie związku (I) z mieszaniny reakcyjnej. Sposób ten opisano szczegółowo w przykładzie 1.
Produkt z serii produkcyjnej lewosimendanu korzystnie analizuje się metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC). Odpowiednie urządzenia obejmują np. kolumnę C-8 do HPLC w odwróconym ukł adzie faz z detekcją UV przy 360 nm. Faze ruchomą stanowi na przykł ad mieszanina buforu fosforanowego o pH 2,1 i acetonitrylu. Próbkę lewosimendanu rozpuszcza się w odpowiednim rozpuszczalniku, takim jak mieszanina sulfotlenku dimetylu, metanolu i wody. Roztwory odniesienia przygotowuje się przez rozpuszczenie związku (I) w odpowiednim rozpuszczalniku. Czasy retencji lewosimendanu i związku (I) lub jego diastereomerów oznacza się w stosowanych warunkach chromatograficznych. Ilość związku (I) w próbce lewosimendanu określa się przez porównanie chromatogramów otrzymanych dla roztworu próbki i dla roztworu związku odniesienia. Procedurę tę opisano szczegółowo w przykładzie 2.
Ilość niepożądanych zanieczyszczeń (I) w serii produkcyjnej lewosimendanu można zmniejszyć sposobami znanymi w technice, takimi jak rekrystalizacja. Rekrystalizację lewosimendanu prowadzi się w dowolnym odpowiednim rozpuszczalniku, przy czym korzystny jest aceton.
P r z y k ł a d 1
Wytwarzanie [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydro-furan-2-ylo)fenylo]hydrazono]propanodinitrylu (mieszanina diastereomerów)
6-(4-aminofenylo)-4,5-dihydro-5-metylo-3(2H)-pirydazynon (153 g, 0,75 mola) rozpuszczono w kwasie octowym (750 ml). Do roztworu w temperaturze 10 - 20°C powoli dodano stałego azotynu sodu (210 g, 3,0 mola). Po zakończeniu dodawania mieszaninę mieszano przez 90 minut w temperaturze 10 - 20°C. Mieszaninę reakcyjną przelano szybko do roztworu malononitrylu (150 g, 2,3 mola) i wody (1500 ml) o temperaturze 20°C. Wytworzoną mieszaninę mieszano w temperaturze 20 - 25°C przez 60 minut, a następnie przesączono i przemyto wodą. Wilgotną substancję stałą ekstrahowano kolejno tetrahydrofuranem (300 ml) i octanem etylu (1900 ml). Połączone ekstrakty wysuszono nad siarczanem sodu i rozpuszczalniki odparowano pod próżnią. Pozostałość roztarto z octanem etylu (200 ml), przesączono i przesącz odparowano pod próżnią. Pozostałość (8,0 g) oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, stosując jako eluent mieszaninę toluen-octan etylu, 2:1. Po krystalizacji z toluenu wydajność czystej mieszaniny diastereomerów wynosiła 1,0 g. Główny składnik mieszaniny można wzbogacić przez wielokrotne krystalizacje z toluenu, ale mieszanina taka nadaje się do celów analitycznych.1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, σ) główny diastereomer 1,05 (d, 3H, J = 6Hz), 2,55 (dd, 1H, J = 16 Hz, 11 Hz), 2,67 (m, 1H), 2,78 (dd, 1H, J = 16 Hz, 8 Hz), 7,59 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,62 (d, 1H, J = 9 Hz), 12,6 (szeroki s, 1H), drugorzędny diastereomer 0,60 (d, 3H, J = 7 Hz), 2,43 (dd, 1H, J = 18 Hz, 2 Hz), 2,78 (m, 1H), 3,14 (dd, 1H, J = 8 Hz, 18 Hz), 7,54 (d, 1H, J = 9 Hz), 7,61 (d, 1H, J = 9 Hz), 12,6 (szeroki s, 1H).
PL 201 772 B1
P r z y k ł a d 2
Zastosowanie [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]propanodinitrylu (I) jako związku odniesienia w chromatografii HPLC
Analizę związku (I) w surowym lewosimendanie prowadzono metodą HPLC, stosując kolumnę do HPLC C-8 w odwróconym układzie faz z detekcją UV przy 360 nm. Faza ruchoma obejmowała acetonitryl i bufor fosforanowy o pH 2,1.
Reagenty:
1. Metanol, gatunek do HPLC
2. Diwodorofosforan sodu, NaH2PO4 x H2O, Merck
3. Kwas ortofosforowy, H3PO4, Merck
4. Bufor fosforanowy, pH 2,1: rozpuścić 1,8 g diwodorofosforanu sodu (NaH2PO4) w wodzie i dodać 2,0 ml kwasu fosforowego. W razie potrzeby wyregulować pH 2M wodorotlenkiem sodu lub 1M kwasem fosforowym. Rozcieńczyć wodą do 1000,0 ml.
5. Sulfotlenek dimetylu, BDH
6. Acetonitryl, gatunek do HPLC
7. Rozpuszczalnik: zmieszać 200 ml metanolu z 800 ml wody
8. [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydro-furan-2-ylo)-fenylo]]hydrazono]propanodinitryl jako związek odniesienia.
Standardowe roztwory (kompozycje związku odniesienia (I)):
Roztwór podstawowy: 10,00 mg [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydro-furan-2-ylo)fenylo]hydrazono]]propanonitryl rozpuszczono w 100 ml kolbie pomiarowej w 20 ml sulfotlenku dimetylu i uzupełniono do pełnej objętości metanolem.
Roztwór standardowy 1 (50 μg/ml): 5,00 ml roztworu podstawowego rozcieńczono rozpuszczalnikiem do objętości 10,00 ml.
Roztwór standardowy 2 (0,4 μg/ml = 40 ppm): 1,00 ml roztworu podstawowego rozcieńczono rozpuszczalnikiem do objętości 250,0 ml.
Roztwór do oznaczenia granicznego (0,1 μg/ml = 10 ppm): 5,00 ml roztworu standardowego 2 rozcieńczono rozpuszczalnikiem do objętości 20,0 ml.
Roztwór do badań
100 mg próbki do badań rozpuszczono w 10 ml kolbie pomiarowej w 8 ml sulfotlenku dimetylu i uzupełniono rozpuszczalnikiem do pełnej objętości.
Warunki chromatografii:
Aparat
Detektor
Kolumna
Temperatura pieca Faza ruchoma % B
Chromatograf cieczowy UV-VIS, długość fali detekcji 360 nm Symetryczna C8, 3,0 um, 7,5 cm x 4,6 mm temperatura otoczenia
A: bufor fosforanowy o pH 2,1 B: acetonitryl 0 min. 20% min. 30% min. 30% min. 90%
Szybkość przepływu 0,8 ml/min.
Objętość wtrysku 100 ul
Czas szarży 30 min.
Czas po: 10 min.
Czasy retencji:
Lewosimendan: około 13 min.
Drugorzędny diastereomer związku (I): około 24 min.
Główny diastereomer związku (I): około 25 min.
Dobór odpowiedniego układu:
Kolejne wstrzyknięcia roztworów do oznaczenia granicznego muszą być powtarzalne, 6 wstrzyknięć, RSD = 10,0%.
PL 201 772 B1
Procedura
Gdy kryteria dotyczące doboru odpowiedniego układu zostaną spełnione, wstrzykuje się roztwór standardowy i próbkę
Obliczenia
Stężenie głównego diastereomeru związku (I) w ppm oblicza się z następującego równania
Cst • Rx •10 •1000000 Rst · w
Cst = stężenie głównego diastereomeru związku (I) w standardowym roztworze [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetra-hydrofuran-2-ylo)hydrazono]propanodinitrylu (mg/ml)
Rx = powierzchnia piku głównego diastereomeru związku (I) w chromatogramie badanego roztworu Rst = powierzchnia piku głównego diastereomeru związku (I) w chromatogramie standardowego roztworu [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetra-hydrofuran-2-ylo)hydrazono]propanodinitrylu w = ciężar próbki = współczynnik rozcieńczenia próbki (ml)
Stężenie drugorzędnego diastereomeru związku (I) w ppm można obliczyć z następującego równania. Jako wzorzec odniesienia stosuje się główny diastereomer związku (I).
Cst • Rx • 10 • 1000000 —---· 1,023
Rst • w
Cst = stężenie głównego diastereomeru związku (I) w standardowym roztworze [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetra-hydrofuran-2-ylo)hydrazono]propanodinitrylu (mg/ml)
Rx = powierzchnia piku głównego diastereomeru związku (I) w chromatogramie roztworu do badań Rst = powierzchnia piku głównego diastereomeru związku (I) w chromatogramie standardowego roztworu [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetra-hydrofuran-2-ylo)hydrazono]propanodinitrylu w = ciężar próbki = współczynnik rozcieńczenia próbki (ml)
1,023 = współczynnik korekcji dla drugorzędnego diastereomeru związku (I).
Chromatogram dla wzorca, [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]propanodinitrylu, przedstawiono na fig. 1. Czas retencji dla głównego diastereomeru związku (I) wynosi 25,180 min., zaś dla drugorzędnego diastereomeru związku (I) = 24,866 min. Chromatogram surowego lewosimendanu przedstawiono na fig. 2.
Claims (7)
1. Analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu, znamienny tym, że określa się stężenie związku o strukturze przedstawionej wzorem (I) w próbce.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że próbkę z serii produkcyjnej lewosimendanu analizuje się metodą wysoko-sprawnej chromatografii cieczowej (HPLC).
PL 201 772 B1
3. Sposób według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że przygotowuje się standardowy roztwór związku odniesienia przez rozpuszczenie związku określonego w zastrz. 1 w roztworze, przygotowuje się roztwór do badań przez rozpuszczenie próbki lewosimendanu w roztworze, uzyskuje się chromatogram HPLC dla standardowego roztworu związku odniesienia, uzyskuje się chromatogram dla badanego roztworu i oznacza się stężenie związku określonego w zastrz. 1 w próbce.
4. [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]propanodinitryl o strukturze przedstawionej wzorem I oraz jego diastereomery.
5. Kompozycja odniesienia do oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu, zawierają ca zwią zek odniesienia i analitycznie dopuszczalny nośnik, znamienna tym, że jako związek odniesienia zawiera związek o wzorze (I) określony w zastrz. 1.
6. Kompozycja według zastrz. 5, znamienna tym, że nie zawiera związków pirydazynylowych.
7. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1 jako związku odniesienia do określania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń w próbkach z serii produkcyjnej lewosimendanu.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI981428A FI104718B (fi) | 1998-06-18 | 1998-06-18 | [[4-(2-atsido-3-metyyli-5-oksotetrahydrofuran-2-yyli)fenyyli]hydratsono]propaanidinitriili käytettäväksi referenssiaineena levosimendaanierien analyysissä |
| PCT/FI1999/000539 WO1999065888A2 (en) | 1998-06-18 | 1999-06-18 | A reference compound for use in the analysis of levosimendan batches |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL347577A1 PL347577A1 (en) | 2002-04-08 |
| PL201772B1 true PL201772B1 (pl) | 2009-05-29 |
Family
ID=8552039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL347577A PL201772B1 (pl) | 1998-06-18 | 1999-06-18 | Analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń serii produkcyjnej lewosimendanu, [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitryl, jego zastosowanie i zawierająca go kompozycja odniesienia |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6340764B1 (pl) |
| EP (1) | EP1087956B1 (pl) |
| JP (1) | JP4550279B2 (pl) |
| KR (1) | KR100661772B1 (pl) |
| CN (1) | CN1129590C (pl) |
| AR (1) | AR018879A1 (pl) |
| AT (1) | ATE253566T1 (pl) |
| AU (1) | AU755699B2 (pl) |
| BR (1) | BR9911230A (pl) |
| CA (1) | CA2334864C (pl) |
| CZ (1) | CZ298659B6 (pl) |
| DE (1) | DE69912604D1 (pl) |
| EA (1) | EA002854B1 (pl) |
| ES (1) | ES2211113T3 (pl) |
| FI (1) | FI104718B (pl) |
| HR (1) | HRP20000866B1 (pl) |
| HU (1) | HU229582B1 (pl) |
| ID (1) | ID29239A (pl) |
| IL (1) | IL139964A (pl) |
| MX (1) | MXPA00012436A (pl) |
| NO (1) | NO325393B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ508557A (pl) |
| PL (1) | PL201772B1 (pl) |
| RS (1) | RS49929B (pl) |
| SK (1) | SK284353B6 (pl) |
| WO (1) | WO1999065888A2 (pl) |
| ZA (1) | ZA200006993B (pl) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2563776A1 (en) | 2004-04-21 | 2005-11-10 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Processes for preparing montelukast sodium |
| FR2877013A1 (fr) * | 2004-10-27 | 2006-04-28 | Assist Publ Hopitaux De Paris | Indentification d'une mutation de jak2 impliquee dans la polyglobulie de vaquez |
| US7812168B2 (en) * | 2005-07-05 | 2010-10-12 | Teva Pharmaceutical Industries Ltd. | Purification of montelukast |
| CN104230816B (zh) * | 2014-09-19 | 2017-02-15 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦潜在基因毒性杂质及其制备、检测方法 |
| CN104478809B (zh) * | 2014-11-14 | 2016-08-17 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种左西孟旦杂质及其制备和检测方法 |
| CN105817632A (zh) * | 2015-01-09 | 2016-08-03 | 中国科学院宁波材料技术与工程研究所 | 片状粉末的制备装置及方法 |
| CN105784895B (zh) * | 2015-10-30 | 2018-05-22 | 成都欣捷高新技术开发有限公司 | 一种用高效液相色谱仪检测左西孟旦中杂质的方法 |
| CN111474289A (zh) * | 2019-10-31 | 2020-07-31 | 武汉嘉诺康医药技术有限公司 | 一种利用反相色谱分离分析左西孟旦中右西孟旦的方法 |
| EP4076398B1 (en) | 2019-12-16 | 2026-02-18 | Tenax Therapeutics, Inc. | Levosimendan for treating pulmonary hypertension with heart failure with preserved ejection fraction (ph-hf-pef) |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB383449A (en) * | 1931-12-12 | 1932-11-17 | Percy Charles Barton | Improvements relating to masts, poles, or like supports and their manufacture |
| GB565546A (en) * | 1943-04-13 | 1944-11-15 | Leslie Frederick Reeve | A pneumatically operated pickup unit for use in electric organs and the like |
| FI894035A7 (fi) * | 1988-09-07 | 1990-03-08 | Orion Yhtymae Oy | Foerfarande foer framstaellning av nya substituerade pyridazinoner. |
| GB8903130D0 (en) * | 1989-02-11 | 1989-03-30 | Orion Yhtymae Oy | Substituted pyridazinones |
| GB2251615B (en) * | 1991-01-03 | 1995-02-08 | Orion Yhtymae Oy | (-)-[[4-(1,4,5,6-tetrahydro-4-methyl-6-oxo-3-pyridazinyl)phenyl]hydrazono]pro panedinitrile |
| GB2266841A (en) * | 1992-05-06 | 1993-11-17 | Orion Yhtymae Oy | Compounds for use as anti-ischemic medicaments |
| GB9606474D0 (en) * | 1996-03-27 | 1996-06-05 | Orion Yhytmo Oy | Method for obtaining pure enantiomers of a pyridazinone derivative |
| GB9614098D0 (en) * | 1996-07-05 | 1996-09-04 | Orion Yhtymae Oy | Transdermal delivery of levosimendan |
| GB9915179D0 (en) * | 1999-06-29 | 1999-09-01 | Orion Corp | A method for the treatment or prevention of coronary graft vasospasm |
-
1998
- 1998-06-18 FI FI981428A patent/FI104718B/fi not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-06-16 AR ARP990102890A patent/AR018879A1/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 CA CA002334864A patent/CA2334864C/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 AU AU47863/99A patent/AU755699B2/en not_active Expired
- 1999-06-18 SK SK1872-2000A patent/SK284353B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 MX MXPA00012436A patent/MXPA00012436A/es active IP Right Grant
- 1999-06-18 EP EP99931312A patent/EP1087956B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 ES ES99931312T patent/ES2211113T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 RS YUP-767/00A patent/RS49929B/sr unknown
- 1999-06-18 CZ CZ20004555A patent/CZ298659B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 NZ NZ508557A patent/NZ508557A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 IL IL13996499A patent/IL139964A/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 HR HR20000866A patent/HRP20000866B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 BR BR9911230-2A patent/BR9911230A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-06-18 KR KR1020007014413A patent/KR100661772B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 PL PL347577A patent/PL201772B1/pl unknown
- 1999-06-18 WO PCT/FI1999/000539 patent/WO1999065888A2/en not_active Ceased
- 1999-06-18 HU HU0102020A patent/HU229582B1/hu unknown
- 1999-06-18 ID IDW20010086A patent/ID29239A/id unknown
- 1999-06-18 EA EA200100055A patent/EA002854B1/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 AT AT99931312T patent/ATE253566T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-06-18 US US09/719,806 patent/US6340764B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 DE DE69912604T patent/DE69912604D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 CN CN99807544A patent/CN1129590C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1999-06-18 JP JP2000554714A patent/JP4550279B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-11-28 ZA ZA200006993A patent/ZA200006993B/en unknown
- 2000-12-15 NO NO20006444A patent/NO325393B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100322354B1 (ko) | 화합물 및 그의 용도 | |
| PL201772B1 (pl) | Analityczny sposób oznaczania potencjalnie genotoksycznych zanieczyszczeń serii produkcyjnej lewosimendanu, [[4-(2-azydo-3-metylo-5-oksotetrahydrofuran-2-ylo)fenylo]hydrazono]-propanodinitryl, jego zastosowanie i zawierająca go kompozycja odniesienia | |
| EP1726304A1 (en) | Solifenacin-containing composition | |
| US20080145946A1 (en) | Impurity of anastrozole intermediate, and uses thereof | |
| JP2008510020A6 (ja) | アナストロゾール中間体の不純物及びその使用 | |
| CN114621138A (zh) | 一种尼可地尔三聚体的合成方法 | |
| HK1032779B (en) | A reference compound for use in the analysis of levosimendan batches | |
| JP3686657B2 (ja) | ステロイド性生体内微量物質の測定方法 | |
| US11390645B2 (en) | Process for the preparation of 3β-hydroxy-17-(1H-benzimidazol-1-YL) androsta-5,16-diene | |
| EP4467536A1 (en) | Crystalline form of sulfur-containing isoindoline derivative | |
| CN114805200A (zh) | 一种盐酸丙卡特罗杂质及其制备方法和用途 | |
| MXPA99002202A (en) | Computeros marcadores y su su | |
| US20070191425A1 (en) | Solifenacin-containing composition | |
| CA2606945A1 (en) | An impurity of anastrozole intermediate, and uses thereof | |
| Zhou et al. | SUPPLEMENTARY INFORMATION TOPOISOMERASE IIα MEDIATES TCF-DEPENDENT | |
| CZ82099A3 (cs) | Způsob zjištění čistoty a stálosti vzorku lanotriginu |