PL204911B1 - Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego - Google Patents
Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznegoInfo
- Publication number
- PL204911B1 PL204911B1 PL367563A PL36756304A PL204911B1 PL 204911 B1 PL204911 B1 PL 204911B1 PL 367563 A PL367563 A PL 367563A PL 36756304 A PL36756304 A PL 36756304A PL 204911 B1 PL204911 B1 PL 204911B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- parts
- weight
- oil
- biomass
- mucor circinelloides
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 10
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 7
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 24
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 21
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 21
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 20
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 claims description 12
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 12
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 12
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 11
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 11
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 11
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 9
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 8
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 8
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 7
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 claims description 7
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 claims description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910004619 Na2MoO4 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims description 6
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 claims description 6
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 claims description 6
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 claims description 6
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 4
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 claims description 4
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003760 tallow Substances 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 2
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 claims description 2
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 claims description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 claims description 2
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 2
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 2
- 241000306281 Mucor ambiguus Species 0.000 claims 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 241001489146 Mucor circinelloides Species 0.000 description 22
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 7
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 5
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 5
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 3
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108010023063 Bacto-peptone Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 1
- 241001221732 Mucor circinelloides f. circinelloides Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000003084 food emulsifier Nutrition 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, o wysokim stężeniu nienasyconych kwasów tłuszczowych.
W czasopismach Microbiology 144, (1998), s. 2639 i European Journal of Biochemistry 252, (1998), s. 513 opisano biosyntezę triacylogliceroli przez grzyb Mucor circinelloides hodowany na podłożu płynnym o składzie : 5,75 g/l glukozy, 7,02 g (NH)2SO4, 6,00 g KH2PO4, 1,20 g MgSO4 x 7H2O i 1,00 g/l ekstraktu droż d ż owego, w temperaturze 25°C w czasie 7-8 dni.
Z czasopisma Folia Microbiologica 37, (1992), s. 357 jest znany sposób otrzymywawania triacylogliceroli w drodze hodowli wgłębnej szczepu Mucor circinelloides CCF 127 na podłożu zawierającym w 1 l: 30 g sacharozy, 5 g ekstraktu drożdżowego, 1 g KH2PO4 x 3H2O, 3 g NaNO3, 0,5 g MgSO4 x x 7H2O, 0,5 g KCl, 0,01 g FeSO4 x 7H2O w temperaturze 28°C w czasie 14 dni.
Z czasopisma World Journal of Microbiology and Biotechnology 13, (197), s. 357 jest znany sposób biosyntezy triacylogliceroli w wyniku hodowli wgłębnej szczepu Mucor circinelloides f. circinelloides CBS 108.16 na podłożach zawierających w 1 l: 40 g oleju słonecznikowego, 0,1 g ekstraktu drożdżowego, 0,25 g MgSO4 x 7H2O, 10 g KH2PO4, 0,05 g CaCl2 x 2H2O, 1,28 g NH4Cl, Cl lub 30 g oleju słonecznikowego, 10 g octanu sodu, 0,1 g ekstraktu drożdżowego, 0,25 g MgSO4 x 7H2O, 10 g KH2PO4, 0,05 g CaCl2x2H2O, 1,28 g NH4Cl.
W czasopiś mie Biotechnology Letters 17, (195), 93 zamieszczono informację o sposobie otrzymywania substancji tłuszczowych w wyniku hodowli wgłębnej szczepu Mucor circinelloides CBS 203.28 na podłożu zawierającym glukozę lub kwas octowy jako źródło węgla.
W czasopiś mie Biochemica et Biophysica Acta 1289, (1996), s. 203 opisano sposób otrzymywania substancji lipidowych w wyniku hodowli wgłębnej szczepów Mucor circinelloides MSI i Mucor circinelloides MS9 na podłożu zawierającym w 1 l: 3 g ekstraktu drożdżowego, 10 g baktopeptonu, 20 g glukozy, w temperaturze 24°C.
Z czasopisma Applied Biochemistry and Microbiology 38(6), (2002), s. 553-557 jest znany sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego w drodze hodowli grzyba Mucor na pożywce hodowlanej zawierającej olej roślinny, ekstrakt z kukurydzy oraz sole mineralne.
W kolekcji Instytutu Biochemii Technicznej Politechniki Ł ódzkiej znajduje się , wyodrę bniony ze środowiska naturalnego, szczep pleśni Mucor circinelloides oznaczony symbolem T45.
Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor circinelloides, polegający na inkubacji szczep pleśni Mucor circinelloides na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające substancję tłuszczową, ewentualnie namok kukurydziany, ewentualnie sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, mikroelementy, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu biomasy 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy i następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowywaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem w temperaturze 4°C, według wynalazku charakteryzuje się tym, że stosuje się wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor circinelloides T45, który hoduje się na podłożu płynnym zawierającym w częściach wagowych: jako substancję tłuszczową olej roślinny lub tłuszcz zwierzęcy w ilości co najmniej 20 części, namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 0-10 części, NaCl w ilości 0-0,3 części, MgSO4 x 7H2O w ilości 0-1 części, CaCl2 x x 6H2O w iloś ci 0-0,4 części, Fe2(SO4)3 w iloś ci 0-4 części, roztwór wodny mikroelementów iloś ci 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto 0-50 części glukozy, o wyjściowym pH = 4,7-5.
Jako olej roślinny stosuje się korzystnie olej rzepakowy, oliwkowy, słonecznikowy, lniany lub sojowy. Jako tłuszcz zwierzęcy stosuje się korzystnie łój wieprzowy, wołowy lub drobiowy. Roztwór mikroelementów zawiera korzystnie w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4.
PL 204 911 B1
Sposób według wynalazku zezwala na otrzymanie oleju mikrobiologicznego z wydajnością 5-20 g z 1 litra podłoża hodowlanego tj. wyższą od wydajności znanych sposobów otrzymywania tego oleju. Skład ilościowy i jakościowy otrzymanego oleju jest uzależniony od składu podłoża hodowlanego stosowanego do hodowli grzyba Mucor circinelloides T45. Otrzymany sposobem według wynalazku olej zawiera w swym składzie wyższe kwasy tłuszczowe w następującej proporcji: 0,8-1,1% C14:0, 9-25% C16:0, 3-12% C18:0, 27-74% C18:1, 10-51% C18:2, 1-12% C18:3 i 1-5,0% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
Olej mikrobiologiczny otrzymany sposobem według wynalazku znajduje zastosowanie w kosmetyce jako składnik kremów, w farmacji i medycynie jako składnik preparatów stosowanych w profilaktyce reumatoidalnego zapalenia stawów, atopowego zapalenia skóry, schizofrenii, stwardnienia rozsianego, miażdżycy, preparatów stosowanych w leczeniu nadciśnienia oraz zatruć alkoholem i lekami oraz preparatów stosowanych w zapobieganiu niedokrwiennej chorobie serca. Nadto znajduje zastosowanie jako składnik preparatów odżywczych i pasz, a także jako składnik emulgatorów żywności i jako nutraceutyk.
Sposób według wynalazku ilustrują bliżej podane niżej przykłady.
P r z y k ł a d I.
Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor circinelloides T45 poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym 30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 30°C w czasie 3 dni, po czym otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 27 części oleju rzepakowego, 59 części namoku kukurydzianego, 1000 części wody wodociągowej i wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 180 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w cią gu 3 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, odfiltrowano przy użyciu przegrody celulozowej i zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l wody wodociągowej, mieszano za każdym razem przez 2 minuty i sączono na przegrodzie celulozowej. Oddzieloną od wody biomasę zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l acetonu o temperaturze pokojowej, mieszano za każdym razem po 5 minut i sączono na przegrodzie celulozowej, pozostałą biomasę zalewano kolejno 2 porcjami heksanu po 0,075 l i mieszano za każ dym razem po 5 minut. Aceton i heksan oddzielone po przemyciu biomasy zmieszano i poddano destylacji.
Otrzymano 15 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 0,8% C14:0, 8,2% C16:0, 3,4% C18:0, 74,0% C18:1, 11,9% C18:2, 1,7% C18:3.
P r z y k ł a d II.
Zarodki pleśni Mucor circinelloides T45, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 5 części glukozy, 35 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 180 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Oddzieloną od wody biomasę zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l etanolu o temperaturze pokojowej, mieszano za każdym razem po 5 minut i sączono na przegrodzie celulozowej. Pozostałą biomasę zalewano kolejno 2 porcjami heksanu po 0,075 l i mieszano za każdym razem po 5 minut. Etanol i heksan stosowany do przemycia biomasy mieszano i poddano destylacji.
Otrzymano 13,6 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 0,9% C14:0, 8,7% C16.0, 5,2% C18:0, 27,4% C18:1, 48,5% C18:2, 2,9% C18:3 i 5,3% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d III.
Zarodki pleśni Mucor circinelloides T45, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 25 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4) i 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obroto4
PL 204 911 B1 wej wstrząsarki 220 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykł adzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykł adzie I.
Otrzymano 6,4 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,0% C14:0, 4,2% C16:0, 4,2% C18:0, 31,6% C18:1, 57,0% C18:2, 0,5%C18:3.
P r z y k ł a d IV.
Zarodki pleśni Mucor circinelloides T45, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 50 części glukozy, 10 części namoku kukurydzianego, 25 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 200 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w cią gu 5 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie II.
Otrzymano 17,0 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 0,8% C14:0, 6,3% C16:0, 4,2% C18:0, 32,4% C18:1, 51,0% C18:2, 1,9% C18:3.
P r z y k ł a d V.
Zarodki pleśni Mucor circinelloides T45, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 50 części glukozy, 35 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4,) 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 250 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie I.
Uzyskano 10,1 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,1% C14:0, 5,2% C16:0, 4,1% C18:0, 31,1% C18:1, 47,5% C18:2, 1,7% C18:3 i 6,8% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d VI.
Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor circinelloides T45 poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym 30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 30°C w czasie 3 dni, po czym przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 20 części łoju zwierzęcego, 59 części namoku kukurydzianego, 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 280 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 6 dni. Biomasę Mucor circinelloides T45, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie I.
Otrzymano 10 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 0,8% C14:0, 8,2% C16:0, 3,4% C18:0, 74,0% C18:1, 11,9% C18:2 i 1,7% C18:3.
Claims (3)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor circinelloides, polegający na inkubacji szczepu pleśni Mucor circinelloides na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające substancję tłuszczową, ewentualnie namok kukurydziany, ewentualnie sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, miPL 204 911 B1 kroelementy, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu biomasy 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy i następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowywaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem w temperaturze 4°C, znamienny tym, że stosuje się wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor circinelloides T45, który hoduje się na podłożu płynnym zawierającym w częściach wagowych: jako substancję tłuszczową olej roślinny lub tłuszcz zwierzęcy w ilości co najmniej 20 części, namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 0-10 części, NaCl w ilości 0-0,3 części, MgSO4 x 7H2O w ilości 0-1 części, CaCl2 x 6H2O w ilości 0-0,4 części, Fe2(SO4)3 w ilości 0-4 części, roztwór wodny mikroelementów ilości 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto 0-50 części glukozy, o wyjściowym pH = 4,7-5.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako olej roślinny stosuje się korzystnie olej rzepakowy, oliwkowy, słonecznikowy, lniany lub sojowy, zaś jako tłuszcz zwierzęcy stosuje się korzystnie łój wieprzowy, wołowy lub drobiowy.
- 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się wodny roztwór mikroelementów korzystnie zawierający w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367563A PL204911B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367563A PL204911B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL367563A1 PL367563A1 (pl) | 2005-10-31 |
| PL204911B1 true PL204911B1 (pl) | 2010-02-26 |
Family
ID=36645249
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL367563A PL204911B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL204911B1 (pl) |
-
2004
- 2004-04-26 PL PL367563A patent/PL204911B1/pl not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL367563A1 (pl) | 2005-10-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE69621663T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Arachidonsäure | |
| EP1976973B1 (en) | Novel strain of schizochytrium limacinum useful in the production of lipids and extracellular polysaccharides and process thereof | |
| JP3985035B2 (ja) | （ｎ−６）系ドコサペンタエン酸含有油脂ならびに該油脂の製造方法および用途 | |
| EP3978597A1 (en) | Algal lipid compositions and methods of preparing and utilizing the same | |
| KR102202287B1 (ko) | 미세조류 시조카이트리움 만그로베이의 바이오매스 및 이의 제조 방법 | |
| US20060014268A1 (en) | Method for producing highly unsaturated fatty acids and lipid containing same | |
| CN103667068A (zh) | 一种由微生物（单细胞真菌高山被孢霉）产生的富含花生四烯酸的油及其制备工艺 | |
| AU2008338017B2 (en) | Method for the cultivation of microorganisms of the order thraustochytriales | |
| WO2014137538A2 (en) | Production of omega-3 fatty acids from crude glycerol | |
| JP6888035B2 (ja) | フィチウム種からのオメガ−３脂肪酸の生産 | |
| CN1986822A (zh) | 用寇氏隐甲藻发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方法 | |
| CA2577676A1 (en) | Process for production of microbial fat/oil containing discretional amount of diacylglycerol and said fat/oil | |
| JP2024539683A (ja) | 芳香を生成するための組成物及び方法 | |
| US8652814B2 (en) | Method for production of DHA-containing phospholipid through microbial fermentation | |
| PL204912B1 (pl) | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego | |
| JP6647593B2 (ja) | 緑藻を用いた有用脂質製造法 | |
| RU2851050C2 (ru) | Биомасса микроводорослей с высоким содержанием белка, характеризующаяся высокой перевариваемостью пепсином, способ культивирования и ее применение | |
| TWI844072B (zh) | 具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| KR20070046143A (ko) | 1 종류의 고도 불포화 지방산 잔기 3 개로 이루어지는트리글리세라이드의 제조 방법 및 그 이용 | |
| TWI842054B (zh) | 易於萃取細胞中之油的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| CN120005738B (zh) | 裂殖壶菌及其应用以及生产epa、dha和十七烷酸的方法和产品 | |
| CN103484385B (zh) | 一种高产花生四烯酸的高山被孢霉突变株及发酵方法和应用 | |
| HK40073050A (en) | Algal lipid compositions and methods of preparing and utilizing the same | |
| JP5903214B2 (ja) | 微生物発酵によるｄｈａ含有ホスファチジルセリンの製造方法 | |
| JP4047354B2 (ja) | ドコサヘキサエン酸（ｄｈａ）の生産性の高い新規ラビリンチュラ類微生物およびその利用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20100426 |