PL204912B1 - Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego - Google Patents
Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznegoInfo
- Publication number
- PL204912B1 PL204912B1 PL367564A PL36756404A PL204912B1 PL 204912 B1 PL204912 B1 PL 204912B1 PL 367564 A PL367564 A PL 367564A PL 36756404 A PL36756404 A PL 36756404A PL 204912 B1 PL204912 B1 PL 204912B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- parts
- weight
- amount
- culture
- temperature
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 12
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 title description 8
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 241000235526 Mucor racemosus Species 0.000 claims description 30
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 28
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 26
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 25
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 25
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 18
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 claims description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 16
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 claims description 14
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 14
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 14
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 14
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 14
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 13
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 13
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 13
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 13
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 13
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 10
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 claims description 10
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 claims description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 9
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229910004619 Na2MoO4 Inorganic materials 0.000 claims description 8
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 claims description 8
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 claims description 8
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 8
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 claims description 8
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims description 6
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 5
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 5
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 5
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 4
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 4
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 claims description 4
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000003760 tallow Substances 0.000 claims description 3
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 2
- 240000006240 Linum usitatissimum Species 0.000 claims description 2
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 claims description 2
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 2
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 claims description 2
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 claims description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 claims description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 8
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 7
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 7
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000003084 food emulsifier Nutrition 0.000 description 1
- 239000004459 forage Substances 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 description 1
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019871 vegetable fat Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, o wysokim stężeniu nienasyconych kwasów tłuszczowych.
Z czasopisma Folia Microbiologica 37, (1992), s. 357 jest znany sposób otrzymywania triacylogliceroli w wyniku hodowli wgłębnej szczepu Mucor racemosus CCF197 nagromadzonego na podłożu zawierającym w 1 l: 30 g sacharozy, 5 g ekstraktu drożdżowego, 1 g KH2PO4 x 3H2O, 3 g NaNO3, 0,5 g MgSO4 x 7H2O, 0,5 g KCl, 0,01 g FeSO4 x 7H2O, w temperaturze 28°C w czasie 14 dni.
W czasopiśmie Journal of Bacteriology 152, (1982), s. 880 omówiono syntezę substancji lipidowych w czasie morfogenezy pleśni Mucor racemosus ATCC 1216b hodowanej na podłożu płynnym zawierającym, 0,5% ekstraktu drożdżowego, 2% glukozy i 0,5% peptonu, w atmosferze azotu w temperaturze 28°C.
Z czasopisma Applied Biochemistry and Microbiology 38(6), (2002), s. 553-557 jest znany sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego w drodze hodowli grzyba Mucor na pożywce hodowlanej zawierającej olej roślinny, ekstrakt z kukurydzy oraz sole mineralne.
W kolekcji Instytutu Biochemii Technicznej Politechniki Ł ódzkiej znajduje się , wyodrę bniony ze środowiska naturalnego, szczep pleśni Mucor racemosus oznaczony symbolem A37.
Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor racemosus, polegający na inkubacji szczepu pleśni Mucor racemosus na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające substancję tłuszczową, ewentualnie namok kukurydziany, ewentualnie sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, mikroelementy, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem w temperaturze 4°C, według wynalazku charakteryzuje się tym, że stosuje się wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor racemosus A37, który hoduje się na podłożu hodowlanym zawierającym w częściach wagowych: jako substancję tłuszczową olej roślinny lub tłuszcz zwierzęcy w ilości co najmniej 20 części, namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 0-10 części, NaCl w ilości 0-0,3 części, MgSO4 x 7H2O w ilości 0-1 części, CaCl2 x 6H2O w ilości 0-0,4 części, Fe2(SO4)3 w ilości 0-4 części, roztwór wodny mikroelementów ilości 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto 0-50 części glukozy, o wyjściowym pH = 4,7-5,0.
Jako olej roślinny stosuje się korzystnie olej rzepakowy, oliwkowy, słonecznikowy, lniany lub sojowy. Jako tłuszcz zwierzęcy stosuje się korzystnie łój wieprzowy, wołowy lub drobiowy. Roztwór mikroelementów zawiera korzystnie w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4.
Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor racemosus, polegający na inkubacji szczepu pleśni Mucor racemosus na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, ewentualnie mikroelementy, ewentualnie namok kukurydziany, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem
PL 204 912 B1 w temperaturze 4°C, według wynalazku polega również na tym, że wyodrębniony ze ś rodowiska naturalnego szczep pleśni Mucor racemosus A37, hoduje się na podłożu hodowlanym zawierającym w częściach wagowych: namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 8-10 części, NaCl w ilości 0,1-0,3 części, MgSO4 x 7H2O w ilości 0,5-1 części, CaCl2 x 6H2O w ilości 0,2-0,4 części, Fe2(SO4)3 w ilości 0,25-4 części, roztwór wodny mikroelementów ilości 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto co najmniej 20 części glukozy, o wyjściowym pH = 4,7-5,0.
Sposób według wynalazku zezwala na otrzymanie oleju mikrobiologicznego z wydajnością 5-19 g z 1 litra podłoża hodowlanego tj. wyższą od wydajności znanych sposobów otrzymywania tego oleju. Skład ilościowy i jakościowy otrzymanego oleju jest uzależniony od składu podłoża hodowlanego stosowanego do hodowli grzyba Mucor racemosus A37. Otrzymany sposobem według wynalazku olej zawiera w swym składzie wyższe kwasy tłuszczowe w następującej proporcji: 0,8-1,7% C14:0, 7-23% C16:0, 9-11% C18:0, 37-76% C18:1, 19-55% C18:2, 8-16% C18:3 i 1-2,3% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
Olej mikrobiologiczny otrzymany sposobem według wynalazku znajduje zastosowanie w kosmetyce jako składnik kremów, w farmacji i medycynie jako składnik preparatów stosowanych w profilaktyce reumatoidalnego zapalenia stawów, atopowego zapalenia skóry, schizofrenii, stwardnienia rozsianego, miażdżycy, preparatów stosowanych w leczeniu nadciśnienia oraz zatruć alkoholem i lekami oraz preparatów stosowanych w zapobieganiu niedokrwiennej chorobie serca. Nadto znajduje zastosowanie jako składnik preparatów odżywczych i pasz, a także jako składnik emulgatorów żywności i jako nutraceutyk.
Sposób według wynalazku ilustrują bliżej podane niżej przykłady.
P r z y k ł a d I.
Wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor racemosus A37 poddano inkubacji na podłożu stałym zawierającym 30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 30°C, w czasie 3 dni, po czym otrzymane w wyniku inkubacji zarodki pleśni przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 29 części oleju rzepakowego, 59 części namoku kukurydzianego, 1000 części wody wodociągowej i wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 180 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w cią gu 3 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, odfiltrowano przy użyciu przegrody celulozowej i zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l wody wodociągowej, mieszano za każdym razem przez 2 minuty i sączono na przegrodzie celulozowej. Oddzieloną od wody biomasę zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l acetonu o temperaturze pokojowej, mieszano za każdym razem po 5 minut i sączono na przegrodzie celulozowej, pozostałą biomasę zalewano kolejno 2 porcjami heksanu po 0,075 l i mieszano za każ dym razem po 5 minut. Aceton i heksan oddzielone po przemycia biomasy zmieszano i poddano destylacji.
Uzyskano 11 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1% C14:0, 2,8% C16:0, 1,7% C18:0, 60,6% C18:1, 23,7% C18:2, 7,7% C18:3 i 2,4% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d II.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 5 części glukozy, 25 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 180 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Oddzieloną od wody biomasę zalewano kolejno 3 porcjami po 0,1 l etanolu o temperaturze pokojowej, mieszano za każdym razem po 5 minut i sączono na przegrodzie celulozowej. Pozostałą biomasę zalewano kolejno 2 porcjami heksanu po 0,075 l i mieszano za każdym razem po 5 minut. Etanol i heksan stosowany do przemycia biomasy mieszano i poddano destylacji. Uzyskano 15,2 g oleju mikrobiologicznego z 11 podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,1% C14:0, 6,0% C16:0, 4,1% C18:0, 30,8% C18:1, 55,3% C18:2, 0,6% C18:3 i 1,6% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
PL 204 912 B1
P r z y k ł a d IIl.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 25 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4) i 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 220 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykł adzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykł adzie I.
Otrzymano 5,9 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 0,8% C14.0, 5,0% C16:0, 3,9% C18:0, 30,8% C18:1, 57,1% C18:2, 0,4% C18:3 i 1,5% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d IV.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 50 części glukozy, 10 części namoku kukurydzianego, 25 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 200 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w cią gu 5 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie II.
Otrzymano 14,7 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,3% C14:0, 9,5% C16:0, 4,7% C18:0, 32,7% C18:1, 49,5% C18:2, 2,0% C18:3 i 1,4% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d V.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 50 części glukozy, 35 części oleju oliwkowego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zawierającego w 1 l: 500 mg H3BO3), 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4,), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 250 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 5 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie I.
Uzyskano 10,1 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,2% C14:0, 5,1% C16:0, 4,1% C18:0, 31,1% C18:1, 47,5% C18:2, 1,7% C18:3 i 6,8% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
P r z y k ł a d VI.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 20 części łoju zwierzęcego, 59 części namoku kukurydzianego, 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 280 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 7 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie I.
Uzyskano 10 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,5% C14:0, 7,5% C16:0, 3,4% C18:0, 74% C18:1, 11,9% C18:2 i 1,7% C18:3.
P r z y k ł a d VII.
Zarodki pleśni Mucor racemosus A37, otrzymane jak w przykładzie I, przeszczepiono na uprzednio wysterylizowane podłoże hodowlane o składzie w częściach wagowych: 20 części glukozy, 59 części namoku kukurydzianego, 8 części KH2PO4, 0,1 części NaCl, 0,5 części MgSO4 x 7H2O, 0,2 części CaCl2 x 6H2O, 0,25 części Fe2(SO4)3, 0,1 części roztworu wodnego mikroelementów (zaPL 204 912 B1 wierającego w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4), 1000 części wody wodociągowej, o wyjściowym pH 4,8 i prowadzono hodowlę wstrząsaną przy szybkości obrotowej wstrząsarki 280 min-1, stopniu napełnienia kolb 30%, w temperaturze 30°C w ciągu 6 dni. Biomasę Mucor racemosus A37, otrzymaną w wyniku hodowli produkcyjnej, filtrowano i przemywano jak w przykładzie I. Nagromadzone lipidy ekstrahowano jak w przykładzie I.
Uzyskano 5 g oleju mikrobiologicznego z 1 l podłoża. Olej ten zawierał następujące wyższe kwasy tłuszczowe w ilości: 1,7% C14:0, 20,9% C16:0, 7,4% C18:0, 35,7% C18:1, 21,0% C18:2, 6,1% C18:3 i 2,6% innych wielonienasyconych kwasów tłuszczowych.
Claims (5)
1. Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor racemosus, polegający na inkubacji szczepu pleśni Mucor racemosus na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające substancję tłuszczową, ewentualnie namok kukurydziany, ewentualnie sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, mikroelementy, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem w temperaturze 4°C, znamienny tym, że stosuje się wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor racemosus A37, który hoduje się na podłożu hodowlanym zawierającym w częściach wagowych: jako substancję tłuszczową olej roślinny lub tłuszcz zwierzęcy w ilości co najmniej 20 części, namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 0-10 części, NaCl w ilości 0-0,3 części, MgSO4 x 7H2O w ilości 0-1 części, CaCl2 x 6H2O w ilości 0-0,4 części, Fe2(SO4)3 w ilości 0-4 części, roztwór wodny mikroelementów ilości 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto 0-50 części glukozy, o wyjściowym pH = 4,7-5,0.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako olej roślinny stosuje się korzystnie olej rzepakowy, oliwkowy, słonecznikowy, lniany lub sojowy, zaś jako tłuszcz zwierzęcy stosuje się korzystnie łój wieprzowy, wołowy lub drobiowy.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że stosuje się wodny roztwór mikroelementów korzystnie zawierający w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4.
4. Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego, w drodze hodowli szczepu Mucor racemosus, polegający na inkubacji szczepu pleśni Mucor racemosus na podłożu stałym zawierającym 20-30 części wagowych agaru i 1000 części wagowych brzeczki piwowarskiej zawierającej 8% wagowych suchej masy, w temperaturze 29-31°C, w czasie 3-5 dni, przeszczepieniu na uprzednio wysterylizowane, ciekłe podłoże hodowlane zawierające sole mineralne jak KH2PO4, NaCl, MgSO4 x 7H2O, CaCl2 x 6H2O, Fe2(SO4)3, ewentualnie mikroelementy, ewentualnie namok kukurydziany, prowadzeniu hodowli wstrząsanej w temperaturze 28-32°C, w czasie 3-8 dni, oddzieleniu otrzymanej w wyniku hodowli produkcyjnej biomasy od cieczy pohodowlanej, poddaniu jej 2-5-krotnemu przemyciu wodą wodociągową stosowaną w ilości 5-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, odsączeniu nadmiaru wody i poddaniu 2-5-krotnej ekstrakcji, korzystnie acetonem i następnie heksanem, mieszaniną metanolu i chloroformu o stosunku objętościowym składników 1:1 lub mieszaniną etanolu i heksanu o stosunku objętościowym składników 1:1, o temperaturze od -20°C do 20°C, użytymi w ilości 10-20 części wagowych na 1 część wagową odfiltrowanej biomasy, następnie oddestylowaniu roztworów użytych rozpuszczalników i przechowaniu otrzymanych lipidów pod zamknięciem w temperaturze 4°C, znamienny tym, że wyodrębniony ze środowiska naturalnego szczep pleśni Mucor racemosus A37, hoduje się na podłożu hodowlanym zawierającym w częściach wagowych: namok kukurydziany w ilości 0-70 części, KH2PO4 w ilości 8-10 części, NaCl w ilości 0,1-0,3 części,
PL 204 912 B1
MgSO4 x 7H2O w ilości 0,5-1 części, CaCl2 x 6H2O w ilości 0,2-0,4 części, Fe2(SO4)3 w ilości 0,25-4 części, roztwór wodny mikroelementów ilości 0-0,3 części, wodę wodociągową w ilości 1000 części, a nadto co najmniej 20 części glukozy, o wyjś ciowym pH = 4,7-5,0.
5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że stosuje się wodny roztwór mikroelementów korzystnie zawierający w 1 l: 500 mg H3BO3, 100 mg KI, 40 mg CuSO4, 500 mg MnSO4, 200 mg Na2MoO4, 400 mg ZnSO4.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367564A PL204912B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL367564A PL204912B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL367564A1 PL367564A1 (pl) | 2005-10-31 |
| PL204912B1 true PL204912B1 (pl) | 2010-02-26 |
Family
ID=36645250
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL367564A PL204912B1 (pl) | 2004-04-26 | 2004-04-26 | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL204912B1 (pl) |
-
2004
- 2004-04-26 PL PL367564A patent/PL204912B1/pl not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL367564A1 (pl) | 2005-10-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP1976973B1 (en) | Novel strain of schizochytrium limacinum useful in the production of lipids and extracellular polysaccharides and process thereof | |
| JP4165827B2 (ja) | ドコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸を含む化合物 | |
| DE69621663T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Arachidonsäure | |
| JP4127860B2 (ja) | 高度不飽和脂肪酸及びこれを含有する脂質の製造方法 | |
| US6410282B1 (en) | Method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid fungi | |
| AU2021202832B2 (en) | Repeated fed-batch culture methods | |
| JP6888035B2 (ja) | フィチウム種からのオメガ−３脂肪酸の生産 | |
| EP1606413B1 (en) | A method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid protists | |
| CN1986822A (zh) | 用寇氏隐甲藻发酵生产二十二碳六烯酸油脂的方法 | |
| US20160102328A1 (en) | Microalgae Aurantiochytrium sp. LA3 (KCTC12685BP) and Method for Preparing Bio-Oil Using the Same | |
| DE60020271T2 (de) | Verfahren zur erhöhung von mehrfachungesättigten fettsäuren in thraustochytriden | |
| PL204911B1 (pl) | Sposób wytwarzania oleju mikrobiologicznego | |
| JPWO2019130535A1 (ja) | ラビリンチュラ類の培養方法 | |
| RU2851050C2 (ru) | Биомасса микроводорослей с высоким содержанием белка, характеризующаяся высокой перевариваемостью пепсином, способ культивирования и ее применение | |
| TWI844072B (zh) | 具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| JP2019135989A (ja) | 藻類及びその使用 | |
| WO2012128396A1 (en) | Method of producing lauric acid-containing oil or fat and lauric acid or esters thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20100426 |