PL205098B1 - Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu - Google Patents
Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazoluInfo
- Publication number
- PL205098B1 PL205098B1 PL366643A PL36664304A PL205098B1 PL 205098 B1 PL205098 B1 PL 205098B1 PL 366643 A PL366643 A PL 366643A PL 36664304 A PL36664304 A PL 36664304A PL 205098 B1 PL205098 B1 PL 205098B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- cells
- new compound
- cancer
- cell
- fabt
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 14
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 title claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title description 17
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- -1 4-fluorophenylamino Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 5
- KQNHAXWTVPXGMP-UHFFFAOYSA-N (4-fluoroanilino)thiourea Chemical compound NC(=S)NNC1=CC=C(F)C=C1 KQNHAXWTVPXGMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 45
- GPBQVPZBUKXEJQ-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1,3-benzothiazol-5-amine Chemical compound N=1C2=CC(N)=CC=C2SC=1C1=CC=CC=C1 GPBQVPZBUKXEJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 11
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 6
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 5
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 4
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 4
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 4
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 3
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L carboplatin Chemical compound O=C1O[Pt](N)(N)OC(=O)C11CCC1 YAYRGNWWLMLWJE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 3
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Substances [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 3
- KCEKCKYZZHREFI-UHFFFAOYSA-N 3h-thiadiazol-2-amine Chemical compound NN1NC=CS1 KCEKCKYZZHREFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 102000053171 Glial Fibrillary Acidic Human genes 0.000 description 2
- 101710193519 Glial fibrillary acidic protein Proteins 0.000 description 2
- 208000000172 Medulloblastoma Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 2
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 description 2
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000005046 glial fibrillary acidic protein Anatomy 0.000 description 2
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 208000025036 lymphosarcoma Diseases 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 201000009410 rhabdomyosarcoma Diseases 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000000475 sulfinyl group Chemical group [*:2]S([*:1])=O 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QUKGLNCXGVWCJX-UHFFFAOYSA-N 1,3,4-thiadiazol-2-amine Chemical compound NC1=NN=CS1 QUKGLNCXGVWCJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHSMTGGSHPCDKA-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3h-thiadiazol-5-ol Chemical compound NN1NC=C(O)S1 AHSMTGGSHPCDKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CVICEEPAFUYBJG-UHFFFAOYSA-N 5-chloro-2,2-difluoro-1,3-benzodioxole Chemical group C1=C(Cl)C=C2OC(F)(F)OC2=C1 CVICEEPAFUYBJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005199 Dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 208000035859 Drug effect increased Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001431 Hyperuricemia Diseases 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 239000012124 Opti-MEM Substances 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000389 T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000024313 Testicular Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010057644 Testis cancer Diseases 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000002737 cell proliferation kit Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 238000002451 electron ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006323 endo cyclization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 238000012760 immunocytochemical staining Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003589 nefrotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 231100000381 nephrotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 231100000189 neurotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 231100000199 ototoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002970 ototoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 231100000338 sulforhodamine B assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000003210 sulforhodamine B staining Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 201000003120 testicular cancer Diseases 0.000 description 1
- VLLMWSRANPNYQX-UHFFFAOYSA-N thiadiazole Chemical compound C1=CSN=N1.C1=CSN=N1 VLLMWSRANPNYQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003441 thioacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 208000025421 tumor of uterus Diseases 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Przedmiotem wynalazku jest nowy związek, jego zastosowanie jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania nowego związku.
2-Aminotiadiazol i jego pochodne wykazują wielokierunkowe działanie biologiczne, przy czym dość istotne wydają się być właściwości przeciwnowotworowe.
Umiarkowaną aktywność układu wyjściowego stwierdzono w stosunku do linii nowotworowych S91 melanoma (czerniak), 8110 glioblastoma 6C3HED lymphosarcoma. Metylo- i acetylo- aminopochodne mają obniżoną czynności antyproliferacyjną. Potwierdzono ich właściwości przeciwnowotworowe w stosunku raka gruczołowego piersi, sarcoma 180 i białaczki P 1534 u myszy. Związki te były dodatkowo aktywne przeciwko białaczce L1210 i 8174 myszy (M.M. Ciotti, S.R. Humphreys, J.M. Venditti, NO. Kaplan, A. Goldin, Cancer. Res. 20, 1195, 1960). Natomiast w przypadku fenylopochodnej nie wykazano czynności w stosunku do wymienionych linii (D.L. Hill, Cancer. Chemother. Pharmacol. 4, 215-220, 1980).
Znaczną aktywność 2,2'-(metylenodiamino)bis-1,3,4-tiadiazolu stwierdzono w stosunku do białaczki L1210, 6C3HED lymphosarcoma, C1498 białaczki meloblastycznej, sarcoma 180, B16 melanoma (czerniak) i dość słabą w stosunku do wątrobiaków (T. Matsumoto, K. Ootsu, Y. Okada, Cancer Chemother. Rep. 58, 331, 1974).
Podstawienie w pozycji C-5 pierścienia heterocyklicznego prowadzi z reguły do osłabienia właściwości przeciwnowotworowych. Dla 5-hydroksy-2-aminotiadiazolu stwierdzono aktywność w stosunku do czerniaka i glioblastoma, natomiast 5-tiolo- i 5-chloropochodne był nieaktywne (D.L. Hill, Cancer. Chemother. Pharmacol. 4, 215-220, 1980).
Kliniczne zastosowanie 2-aminotiadiazolu komplikuje hiperurikemia i boleści żołądkowe, co wymusza jednoczesne działania zapobiegające tym efektom, jakkolwiek substancja ta została objęta II etapem badań klinicznych. Badania obejmowały między innymi chorych na raka płuc (J.A. Stewart, CC. Ackerly, C.F. Myers, R.A. Newman, I.H. Krakoff, Cancer. Chemother. Pharmacol. 16, 287-291, 1986), raka nerki (PI. Elson, L.K. Kvols, SE. Vogl, D.I. Glover, r.G. Hahn, D.L. Trump, P.P. Carbone, ID. Earle, T.E. Davis Invest. New Drugs 6, 97-103, 1988), zaawansowanego nowotwora okrężnicy (R.F. Asbury, A. Kramar, D.G. Haller, Am. J. Klin. Oncol. 10, 380-382, 1987), zaawansowanego nowotwora jajników (R.F. Asbury, I. Wilson, I. A. Blessing, H.I. Buchsbaum, P.I. DiSaia, Am. J. Klin. Oncol. 9, 334-336, 1986), guza mezodermalnego trzonu macicy (R.F. Asbury, I.A. Blessing, D. Moore, Am. J. Klin. Oncol. 19, 400-4002, 1996) czy zaawansowanego nowotwora jelita grubego (G.Y. Locker, L. Kilton, I.D. Khandeker, T.E. Lad, R.H. Knop, K. Albain, R. Blough, S. French, A.B. Benson, Invest. New Drugs, 12, 299-301, 1994).
Otrzymane wyniki testów klinicznych z reguły nie dawały podstaw do kontynuowania badań w tym zakresie ze względu na brak dostatecznie pozytywnej reakcji czy pojawianie się różnego rodzaju objawów ubocznych.
Ostatnio, szerokie spektrum aktywności w warunkach „in vitro” wykazano dla N-podstawionego 5-amino-1,3,4-tiadiazolo-2-sulfonamidu testując związki na komórkach kilkudziesięciu linii różnorakich nowotworów ludzkich. Stwierdzono przy tym wyraźny wpływ rodzaju N-podstawienia, zarówno jakościowy jak i ilościowy, na efekt antyproliferacyjny (C.T. Supuran, A. Scozzafava, Eur. J. Med. Chem. 35, 867-874, 2000).
Również kompleksowe połączenia kationów metali z aminotiadiazolem charakteryzują właściwości przeciwnowotworowe. Dla jonów żelaza(II) i III z 5-podstawionym-1,3,4-tiadiazolem stwierdzono właściwości antyproliferacyjne w stosunku do linii komórkowej P388 (białaczka limfatyczna myszy). (L. Mishra, M. K. Said, H. Itokawa, K. Takeya, Bioorg. Med. Chem. 3, 1241-1245, 1995).
Zgodnie z wynalazkiem opracowano nowy związek 2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazol (zwany dalej FABT) o wzorze 1, otrzymywany według schematu, przedstawionego na rysunku.
2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazol (FABT) o wzorze 1 otrzymuje się w reakcji sulfinylo-bis(2,4-dihydroksybenzkarbotioilu), znanego z opisu zgłoszeniowego wynalazku nr P-330263 o wzorze 3 z 4-fluorofenylo-3-tiosemikarbazydem o wzorze 2. Reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku organicznym, korzystnie alkoholu metylowym, w podwyższonej temperaturze, korzystnie w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika organicznego. Wykorzystanie odczynnika sulfinylo-bis(2,4-dihydroksybenzkarbotioilu) (SBKT) zapewnia przebieg reakcji z zasadami organicznymi i selektywną endocyklizację tioacylopochodnych. Po reakcji SE tego związku z 4-fluorofenylo-3-tiosemikarbazydem dalszy
PL 205 098 B1 przebieg procesu warunkuje zdolność stabilizacji struktur liniowych przez przejście tiolowe i oksydacyjne wiązanie H2S przez nadmiar elektrofilowego reagenta. W syntezie układu tiadiazolu przebieg cyklizacji z reguły umożliwia zastosowanie FeCl3 lub Cu(ClO4)2.
Wielkości obliczonych minimalnych energii dla obu izomerów wskazują na ograniczone prawdopodobieństwo tworzenia struktur anularnych Y związku o wzorze 1.
Specyficznie podstawiony 2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazol stanowi nowy związek heterocykliczny o interesującym spektrum aktywności biologicznej nadający się do zastosowania jako czynnik antynowotworowy. FABT już przy stężeniu 100 μΜ wykazuje silne działanie antyproliferacyjne w stosunku do wszystkich badanych rodzajów komórek nowotworowych. Jednocześnie przy tym stężeniu nie wykazuje aktywności cytotoksycznej. Na podkreślenie zasługuje fakt bardzo silnej aktywności tej substancji w stosunku do komórek białaczkowych (Jurkat). FABT ma szczególne, nieopisywane w piśmiennictwie medycznym właściwości, co można wykorzystać w leczeniu nowotworów.
P r z y k ł a d I. 0,02 mola sulfinylo-bis(2,4-dihydroksybenzkarbotioilu) i 0,01 mola 4-fluorofenylo-3-tiosemikarbazydu przeniesiono do 50 ml metanolu i ogrzewano do wrzenia (3h). Mieszaninę poreakcyjną przesączono na gorąco a przesącz zadano 100 ml wody. Wydzielony związek odsączono, przemywano wodą i wysuszono.
Krystalizowano z metanolu (70 ml), t.t. 279-280°C
Charakterystyka analityczna
Analiza elementarna dla wzoru: C14H10FN3O2S (303,34) %N obliczony: 13,84; znaleziony: 13,76
EI-MS:
M' 303 m/z (pik główny), fragmentacje (m/z): 168, 141,136, 109, 94, 83, 66, 52.
[1H]NMR (DMSO-d6,TMS), δ (ppm): 10,85; 10,27; 9,92
IR (cm-1): 3400, 3259, 3218, 3166, 1629, 1590, 1510, 1476, 1449, 1411, 1325, 1252, 1231, 1183, 1134, 1113, 1052, 1013, 987, 967, 875, 825.
P r z y k ł a d II. Wyniki badań aktywności cytostatycznej FABT
Badania wykonano w Laboratorium Immunologii Nowotworów Instytutu Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu. W teście przesiewowym zastosowano linię komórkową HCV29T (rak pęcherza moczowego) a ponadto linie A549 (rak płuc), SW707 (rak odbytnicy) i T47D (rak piersi). Aktywność cytostatyczna
FABT badano pod względem przydatności do hamowania podziału komórek. Wymienione linie były hodowane w medium opti-MEM z dodatkiem 5% FCS, 50 μg/ml streptomycyny, 50 U/ml penicyliny i 2 mM glutaminy. Komórki utrzymywano w 37°C w wilgotnej atmosferze 5% CO2.
Test hamowania proliferacji
Do 24-godzinnej hodowli komórek dodawano badany FABT, przygotowując roztwory wyjściowe o stężeniu 1 mg/ml ex tempore do każdego doświadczenia przez rozpuszczenie 1 mg związku w 100 μL DMSO + 900 μL medium hodowlanego. Rozpuszczalnikiem dla dalszych rozcieńczeń było medium hodowlane. Związek testowano w stężeniach końcowych 100, 10, 1, 0.1 μg/mL. Po 72-godzinnej inkubacji z testowanym związkiem badano zahamowanie proliferacji komórek. Badania wykonano przy użyciu testu SRB mierzącego zahamowanie proliferacji komórek docelowych (Skehan et al., J. Natl. Cancer Inst., 82:1107-1112, 1990) w hodowli in vitro. Próby wykonano w trzech powtórzeniach. Równolegle prowadzono badania w stosunku do kompleksów Pt(II), jako układów porównawczych.
Wyniki w postaci ID50 (dawka powodująca zahamowanie proliferacji 50% populacji komórek nowotworowych) wyznaczone na poszczególnych liniach nowotworowych zebrano w tabeli. Wartości ID wyznaczano dla każdego doświadczenia, a następnie obliczono średnie i odchylenie standardowe (SD). Przyjętym kryterium selekcji w zastosowanych badaniach przesiewowych in vitro jest poziom ID50 nie wyższy niż 4 μg/ml (Geran RI i wsp. Cancer Chemotherapy Reports, 3, 2(part3): 59-61, 1972).
PL 205 098 B1
T a b e l a.
Aktywność cytotoksyczna FABT oraz chemioterapeutyków przeciwnowotworowych:
cis-platyna, karboplatyna, wobec komórek ludzkich linii nowotworowych, wyrażona jako ID50 w μg/ml
| Związek | linia komórkowa / ID50 [pg/ml] | |||
| HCV29T | A549 | SW707 | T47D | |
| FABT | 6,2 ± 1,4 | Neg | 3,6 ± 1,1 | 4,2 ± 1,2 |
| Cisplatyna | nie badano | 3,6 ± 1,4 | nie badano | 6,2 ± 1,5 |
| Karboplatyna | nie badano | 40 ± 1,0 | nie badano | Neg. |
Przedstawione chemioterapeutyki należą do kompleksów Pt(II). Cisplatyna (cisdichlorodiaminoplaty-nall) stosowana jest w monoterapii, jak i łącznie z innymi statykami, m. in. w raku jajnika, jądra, pęcherza moczowego. Jest lekiem skutecznym, ale ze względu na działania uboczne: nefrotoksyczne, ototoksyczne, neurotoksyczne jest też lekiem niebezpiecznym.
Karboplatyna (cyklobutanodikarboksylodiaminoplatynall) zaliczana jest do leków drugiej generacji. Wykazuje mniej objawów niepożądanych i jest lepiej tolerowana przez chorych.
P r z y k ł a d III. Przeciwnowotworowa aktywność FABT
Wyniki badań realizowanych w Katedrze Immunologii i Wirusologii UMCS w Lublinie.
Materiały i metody.
Stosowano wyjściowe 10mM i 100mM w DMSO. Roztwory robocze przygotowywano poprzez odpowiednie rozcieńczenie roztworów wyjściowych w podłożu hodowlanym.
Wykorzystano następujące hodowle komórkowe.
1. Jurkat E6.1 - ludzkie komórki nowotworowe białaczki T-limfocytarnej;
2. TE 671 - ludzkie komórki nowotworowe rhabdosarcoma/medulloblastoma;
3. SK-N-AS - ludzkie komórki nowotworowe neuroblastoma;
4. A549 - ludzkie komórki nowotworowe raka płuc;
5. HT-29 - ludzkie komórki nowotworowe raka jelita grubego;
6. FTC 238 - ludzkie komórki raka tarczycy;
7. FAO - linia hepatocytów szczura jako linia porównawcza.
Linie 1, 4 i 5 otrzymano z Instytutu Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu. Hodowle 2, 3, 6 i 7 uzyskano z European Collection of Cell Cultures, Salisbury, UK.
Podłoża hodowlane
Komórki Jurkat E6.1 hodowano w podłożu RPMI-1640, komórki linii TE 671, SK-N-AS i FTC 238 hodowano w podłożu DMEM:F-12 HAM (1:1), komórki linii A549 hodowano w podłożu DMEM:F-12 HAM (2:1), komórki HT-29 w podłożu DMEM a komórki linii FAO w podłożu HAM's F12K. Do podłoża hodowlanego dodawano 10% płodowej surowicy bydlęcej (FBS), 100 j/ml penicyliny i 100 pg/ml streptomycyny. Podłoża hodowlane RPMI-1640, DMEM:F-12 HAM, DMEM pochodziły z firmy Sigma (Sigma, St. Louis, MO, USA), podłoże HAM's F-12K pochodziło z firmy ICN (ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, CA, USA). Bydlęca surowica płodowa (FBS) pochodziła z firmy Life Technologies (Life Technologies, Karlsruhe, Germany). Pozostałe odczynniki pochodziły z firmy Sigma.
Przygotowanie hodowli komórkowych.
Komórki przechowywane w banku tkanek w ciekłym azocie, rozmrażano w temp. 37°C, następnie przelewano do butelek plastykowych zawierających odpowiednie podłoże hodowlane. Komórki hodowano w temperaturze 37°C w inkubatorze z 5% przepływem CO2. Po namnożeniu komórek, płyn zlewano, komórki przepłukiwano PBS (bez jonów wapnia i magnezu) i poddawano działaniu 0.25% roztworu trypsyny + EDTA, w celu otrzymania zawiesiny komórek potrzebnej do założenia doświadczenia. Hodowla astrogleju
Hodowle zakładano z mózgów 18-dniowych płodów szczurzych. Tkankę mózgową poddano dysocjacji na pojedyncze komórki roztworem 0.25% trypsyny-EDTA. Komórki zawieszano w podłożu hodowlanym (DMEM:F-12 HAM (1:1) + 10% FBS) i wylewano na plastykową butelkę hodowlaną o powierzchni 75 cm2. Komórki hodowano w temperaturze 37°C w inkubatorze z 5% przepływem CO2. Selekcję w kierunku astrocytów przeprowadzono w momencie całkowitego pokrycia przez rosnące komórki powierzchni butelki hodowlanej. W tym celu butelkę poddano intensywnemu wytrząsaniu tak aby usunąć komórki słabiej przyklejone do podłoża. Identyfikację astrocytów potwierdzono immunocytochemicznie barwiąc komórki w kierunku charakterystycznego markera GFAP (glial fibryllary acidic protein).
PL 205 098 B1
Oznaczanie aktywności antyproliferacyjnej badanych substancji w hodowli komórkowej.
Do mikropłytki 96-dołkowej z płaskim dnem (firmy NUNC, Roskilde, Denmark) rozlewano przygotowaną wcześniej zawiesinę komórek w podłożu hodowlanym, o gęstości: 1·104 kom/ml (Jurkat, TE
671, A549), 2·104 kom/ml (FTC 238) oraz 3·104 kom/ml dla HT-29 i SK-N-AS w objętości 100 μΐ na dołek. Po przyklejeniu komórek (24 godz.) ostrożnie ściągano płyn i następnie dodawano różne stężenia badanej substancji w płynie z dodatkiem 10% FBS (100 μl na dołek). Hodowle na płytkach poddawano 96-godzinnej inkubacji w temp. 37°C, w atmosferze 95% powietrza i 5% CO2. Aktywność antyproliferacyjną badanego związku określano metodą MTT.
Oznaczanie aktywności cytotoksycznej.
Do mikropłytki 96-dołkowej z płaskim dnem rozlewano przygotowana wcześniej zawiesinę komórek linii FAO oraz astrogleju o gęstości 2.5·105 kom/ml w objętości 100 μ! na dołek. Następnego dnia po przyklejeniu się komórek, ostrożnie ściągano płyn i następnie dodawano różne stężenia badanej substancji w podłożu hodowlanym, w którym stężenie surowicy zostało obniżone do 2%. Płytki inkubowano przez 48 godzin w temperaturze 37°C, w inkubatorze z przepływem 5% CO2. Żywotność komórek określano metodą MTT.
Metoda MTT (wg kitu „Cell proliferation kit III”, Boehringer Manheim)
Metoda ta została opracowana w celu oznaczania proliferacji i żywotności komórek w badaniach substancji o działaniu cytotoksycznym i antyproliferacyjnym. W komórkach metabolicznie czynnych żółta sól tatrazoliowa MTT, redukowana jest do niebieskiego formazanu, przy udziale dehydrogenaz mitochondrialnych. Nierozpuszczalne w wodzie kryształki formazanu gromadzą się w komórkach i do ich rozpuszczenia konieczne jest użycie organicznego detergentu rozbijającego błony i jednocześnie rozpuszczającego barwnik. W tym celu używany jest bufor SDS-HCl o pH 7,4. Stężenie uwolnionego barwnika mierzy się ilościowo w czytniku do płytek 96-dołkowych przy długości fali 570 nm. Intensywność zabarwienia jest wprost proporcjonalna do ilości żywych komórek.
Roztwór MTT w PBS o stężeniu 5 mg/ml, dodawano w ilości 15 μl do każdego dołka na plastykowej płytce. Płytki inkubowano przez 3 godz. w temp. 37°C, po tym czasie dodawano do każdego dołka 100 μl buforu SDS-HCl i pozostawiano na noc w temp. 37°C. Wynik odczytywano następnego dnia przy użyciu czytnika E-max Reader (Molecular Devices Corporation, Menlo Park, CA, USA). Ocena morfologii komórek.
Komórki linii TE671 wylewano na komorę typu Lab-Tek Chamber Slide (NUNC) w ilości 5 x 104. Następnego dnia zmieniono podłoże hodowlane i dodawano świeże podłoże z dodatkiem FABT w stężeniach 50 i 100 μΜ. Po 48 godzinach komórki barwiono metodą May-Grunwalda-Giemsy. Oceny morfologii komórek dokonano przy pomocy mikroskopu świetlnego Olympus B-51 (Olympus Optical Co, LTD, Tokyo, Japan). Zdjęcia wykonano przy użyciu programu analySiS® (Soft Imaging Sysytem GmGH, Mϋnster, Germany).
Wyniki
Ocena aktywności antyproliferacyjnej
Aktywność antyproliferacyjną FABT określano w hodowlach różnego rodzaju ludzkich komórek nowotworowych: białaczkowych (Jurkat), rhabdosarcoma/medulloblastoma (TE671), neuroblastoma (SK-N-AS), raka płuc (A549), raka jelita grubego (HT-29), raka tarczycy (FTC 238). Komórki poddano działaniu substancji w stężeniach 10, 25, 50 i 100 μΜ przez okres 96 godzin.
FABT charakteryzował się silną aktywnością antyproliferacyjną w stosunku do komórek białaczkowych - Jurkat. Już przy stężeniu 10 μΜ następowało 80% zahamowanie wzrostu komórek a dawka 50 μΜ hamowała wzrost w 99%. W przypadku komórek linii A549, TE671, HT-29 znaczące zahamowanie wzrostu następowało przy stężeniu 25 μΜ i wynosiło odpowiednio 52%, 48% i 40%. Komórki neuroblastoma (SK-N-AS) były mniej wrażliwe. Zahamowanie wzrostu o 35% następowało przy stężeniu 50 μΜ. Komórki raka tarczycy (FTC 238) charakteryzowały się największą opornością na działanie FABT. W tym przypadku stężenie 50 μΜ powodowało nieznaczne 11% zahamowanie wzrostu. Dopiero dawka 100 μΜ powodowała silny, 76% efekt (Wykres 1).
Ocena morfologii komórek
FABT powodował znaczące zmiany w morfologii komórek TE671. W porównaniu z hodowlą kontrolną następowało wyraźne obkurczenie cytoplazmy i wydłużenie komórek. Efekt ten nasilał się ze wzrostem dawki. Fotografia 1 przedstawia hodowlę kontrolną, fotografia 2 przedstawia hodowlę poddaną działaniu dawki 50 μΜ zaś fotografia 3 przedstawia hodowlę poddaną działaniu dawki 100 μΜ. Ocena aktywności cytotoksycznej
PL 205 098 B1
Ocenę cytotoksyczności FABT przeprowadzono w hodowli hepatocytów szczurzych (linia FAO) i astrogleju. Komórki poddano działaniu związku w dawce 10, 50, 100, 250 i 500 μΜ przez okres 48 godzin.
Badany związek charakteryzował się niską cytotoksycznością w stosunku do komórek FAO (wykres 2) i astrogleju (wykres 3). Znaczący spadek żywotności komórek o 25% (hepatocyty) i 97,5% (astroglej) pojawiał się dopiero przy stężeniu 250 μM.
Claims (5)
1. 2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazol o wzorze 1.
2. 2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazol o wzorze 1 dla zastosowania jako czynnik antynowotworowy.
3. Sposób otrzymywania 2-(4-fluorofenyloamino)-5-(2,4-dihydroksybenzeno)-1,3,4-tiadiazolu o wzorze 1, znamienny tym, że poddaje się reakcji sulfinylo-bis(2,4-dihydroksybenzkarbotioil o wzorze 3 z 4-fluorofenylo-3-tiosemikarbazydem o wzorze 2 a reakcję prowadzi się w rozpuszczalniku organicznym w podwyższonej temperaturze.
4. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że jako rozpuszczalnik organiczny stosuje się alkohol metylowy.
5. Sposób według zastrz. 3, znamienny tym, że reakcję prowadzi się w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika organicznego.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL366643A PL205098B1 (pl) | 2004-03-26 | 2004-03-26 | Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL366643A PL205098B1 (pl) | 2004-03-26 | 2004-03-26 | Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL366643A1 PL366643A1 (pl) | 2005-10-03 |
| PL205098B1 true PL205098B1 (pl) | 2010-03-31 |
Family
ID=36645464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL366643A PL205098B1 (pl) | 2004-03-26 | 2004-03-26 | Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL205098B1 (pl) |
-
2004
- 2004-03-26 PL PL366643A patent/PL205098B1/pl not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL366643A1 (pl) | 2005-10-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Colina-Vegas et al. | Half sandwich Ru (II)-acylthiourea complexes: DNA/HSA-binding, anti-migration and cell death in a human breast tumor cell line | |
| Li et al. | PCC0208017, a novel small-molecule inhibitor of MARK3/MARK4, suppresses glioma progression in vitro and in vivo | |
| Chrysouli et al. | Chloro (triphenylphosphine) gold (I) a forefront reagent in gold chemistry as apoptotic agent for cancer cells | |
| Zeglis et al. | Role of metalation in the topoisomerase IIα inhibition and antiproliferation activity of a series of α-heterocyclic-N4-substituted thiosemicarbazones and their Cu (II) complexes | |
| JP6322770B2 (ja) | Ｅｒｋ阻害剤 | |
| Asif et al. | Human colon cancer targeted pro-apoptotic, anti-metastatic and cytostatic effects of binuclear Silver (I)–N-Heterocyclic carbene (NHC) complexes | |
| Lenis-Rojas et al. | Heteroleptic mononuclear compounds of ruthenium (ii): Synthesis, structural analyses, in vitro antitumor activity and in vivo toxicity on zebrafish embryos | |
| Rahman et al. | Dimetallic Ru (II) arene complexes appended on bis-salicylaldimine induce cancer cell death and suppress invasion via p53-dependent signaling | |
| CN110467633B (zh) | 主族金属配合物及其制备方法和应用 | |
| Huang et al. | Synthesis, characterization and biological evaluation of labile intercalative ruthenium (II) complexes for anticancer drug screening | |
| Manuel-Manresa et al. | Novel indole-based tambjamine-analogues induce apoptotic lung cancer cell death through p38 mitogen-activated protein kinase activation | |
| Mertens et al. | Synthetic control of mitochondrial dynamics: developing three-coordinate Au (I) probes for perturbation of mitochondria structure and function | |
| Zhou et al. | Iridium (III)-BBIP complexes induce apoptosis via PI3K/AKT/mTOR pathway and inhibit A549 lung tumor growth in vivo | |
| Rahman et al. | Homo-and heteroleptic Pt (II) complexes of ONN donor hydrazone and 4-picoline: A synthetic, structural and detailed mechanistic anticancer investigation | |
| Peerzada et al. | Identification of morpholine based hydroxylamine analogues: selective inhibitors of MARK4/Par-1d causing cancer cell death through apoptosis | |
| Arafath et al. | Schiff base‐nickel, palladium, and platinum complexes derived from N‐cyclohexyl hydrazine carbothioamide and 3‐hydroxy‐4‐methoxybenzaldehyde: Selective antiproliferative and proapoptotic effects against colorectal carcinoma | |
| Jiang et al. | Systematic evaluation of the antitumor activity of three ruthenium polypyridyl complexes | |
| Wieczorek-Błauż et al. | Impact of the ferrocenyl group on cytotoxicity and KSP inhibitory activity of ferrocenyl monastrol conjugates | |
| CN107200716A (zh) | 苯并噁嗪类化合物及其制备方法与应用 | |
| Hui et al. | Fusaricide is a novel iron chelator that induces apoptosis through activating caspase-3 | |
| PL205098B1 (pl) | Pochodna 1,3,4-tiadiazolu, zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu jako czynnika antynowotworowego oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu | |
| Bravo et al. | Phenyl-guanidine derivatives as potential therapeutic agents for glioblastoma multiforme: catalytic syntheses, cytotoxic effects and DNA affinity | |
| Nandakumar et al. | Anti-proliferative activity of nitroquinolone fused acylhydrazones as non-small cell human lung cancer agents | |
| PL204750B1 (pl) | Pochodna 1,3,4-tiadiazolu , zastosowanie pochodnej 1,3,4-tiadiazolu w leczeniu chorób neurologicznych oraz sposób otrzymywania pochodnej 1,3,4-tiadiazolu | |
| CN108030777B (zh) | 氯胍在制备抗肿瘤药物中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20070326 |