PL206681B1

PL206681B1 - Carbohydrate derivatives of quinoline [2,3-b] indole and method of their receiving

Info

Publication number: PL206681B1
Application number: PL353811A
Authority: PL
Inventors: Łukasz Kaczmarek; Jan Ramza; Katarzyna Badowska-Rosłonek; Wiesław Szelejewski
Original assignee: Fundacja Na Rzecz Wspierania R; Inst Farmaceutyczny
Priority date: 2002-05-10
Filing date: 2002-05-10
Publication date: 2010-09-30
Also published as: PL353811A1

Description

^{(21) Numer zgłoszenia: 353811(21) Filing number: 353811} _{(51) Int.Cl.(51) Int.Cl.}

C07D 471/04 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) (22) Data zgłoszenia: 10.05.2002C07D 471/04 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) (22) Date of notification: 10.05.2002

Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej (54) Węglowodanowe pochodne indolo[2,3-b]chinoliny i sposób ich otrzymywania (73) Uprawniony z patentu:Patent Office of the Republic of Poland (54) Indole [2,3-b] quinoline carbohydrate derivatives and the method of obtaining them (73) The patent holder:

INSTYTUT FARMACEUTYCZNY, Warszawa, PL FUNDACJA NA RZECZ WSPIERANIA ROZWOJU POLSKIEJ FARMACJIPHARMACEUTICAL INSTITUTE, Warsaw, PL FOUNDATION TO SUPPORT THE DEVELOPMENT OF POLISH PHARMACY

I MEDYCYNY, Starogard Gdań ski, PL (43) Zgłoszenie ogłoszono:I MEDYCYNY, Starogard Gdański, PL (43) Application was announced:

17.11.2003 BUP 23/03 (72) Twórca(y) wynalazku:17.11.2003 BUP 23/03 (72) Inventor (s):

(45) O udzieleniu patentu ogłoszono:(45) The grant of the patent was announced:

30.09.2010 WUP 09/10September 30, 2010 WUP 09/10

ŁUKASZ KACZMAREK, Warszawa, PLŁUKASZ KACZMAREK, Warsaw, PL

JAN RAMZA, Warszawa, PLJAN RAMZA, Warsaw, PL

KATARZYNA BADOWSKA-ROSŁONEK, Otwock, PLKATARZYNA BADOWSKA-ROSŁONEK, Otwock, PL

WIESŁAW SZELEJEWSKI, Warszawa, PL (74) Pełnomocnik:WIESŁAW SZELEJEWSKI, Warsaw, PL (74) Representative:

rzecz. pat. Krzywdzińska Ewaitem. stalemate. Krzywdzińska Ewa

PL 206 681 B1PL 206 681 B1

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku są nowe węglowodanowe pochodne indolo[2,3-b]chinoliny oraz sposób ich otrzymywania. Nowe pochodne wykazują aktywność przeciwnowotworową, a niektóre z nich mogą również stanowić cenne związki pośrednie do otrzymywania innych związków, biologicznie aktywnych.The subject of the invention is new indole [2,3-b] quinoline carbohydrate derivatives and a method of their preparation. The new derivatives show antitumor activity, and some of them may also constitute valuable intermediates for the preparation of other biologically active compounds.

Cytotoksyczna aktywność indolochinoliny i jej pochodnych jest znana od dawna (Arch. Pharm. Weinheim 321, 463-467, 1988). Systematyczne badania zależności struktura-aktywność i biotransformacji pochodnych indolochinolin pozwoliły na usta lenie, że związki te mają zdolność interkalacji DNA i tworzą kompleksy o strukturze lek-DNA-topoizomeraza II (Blochem. Pharm. 44, 2149-2155, 1992 i J. Med. Chem. 37, 3503-3510, 1994), co lokuje je wśród aktywnych związków o stosunkowo niskich ciężarach cząsteczkowych, posiadających zdolność selektywnego wiązania z DNA.The cytotoxic activity of indoloquinoline and its derivatives has been known for a long time (Arch. Pharm. Weinheim 321, 463-467, 1988). Systematic studies of the structure-activity relationship and biotransformation of indoloquinoline derivatives have made it possible to establish that these compounds have the ability to intercalate with DNA and form drug-DNA-topoisomerase II complexes (Blochem. Pharm. 44, 2149-2155, 1992 and J. Med. Chem. 37, 3503-3510, 1994), which places them among active compounds with relatively low molecular weights, having the ability to selectively bind to DNA.

Ligandy wiążące się z DNA atakują też zazwyczaj inne cele w komórce. Aktywność leku jest pochodną zarówno interkalacji z DNA, jak i hamowania enzymów replikacyjnych lub systemów naprawiających DNA.Typically, ligands that bind to DNA attack other targets in the cell. The activity of the drug is a derivative of both intercalation with DNA and inhibition of replication enzymes or DNA repair systems.

Topoizomerazy są enzymami kontrolującymi topologię DNA poprzez procesy przecinania nici DNA i ponownego łączenia ich po dokonaniu zmian konformacyjnych. Enzymy te biorą udział w prawie wszystkich procesach komórkowych odbywających się przy udziale DNA: replikacji, transkrypcji, segregacji chromosomów i mitozie. Ich aktywność związana jest szczególnie z procesami nowotworowymi i chorobami wirusowymi. Za działanie cytotoksyczne odpowiedzialne jest zakłócanie tych procesów przez tworzenie trwałych kompleksów DNA i enzymów z pochodnymi indolochinolin.Topoisomerases are enzymes that control DNA topology by cutting DNA strands and reassembling them after conformational changes have been made. These enzymes are involved in almost all DNA-mediated cellular processes: replication, transcription, chromosome segregation and mitosis. Their activity is associated especially with neoplastic processes and viral diseases. Interference with these processes by the formation of stable complexes of DNA and enzymes with indoloquinoline derivatives is responsible for the cytotoxic effect.

Poważną wadą dotychczas opisanych pochodnych indolochinolin jest jednak ich niewielka selektywność działania oraz niezadowalająca biodostępność, objawiająca się znikomą aktywnością tych pochodnych in vivo.However, a serious disadvantage of the indole quinoline derivatives described so far is their low selectivity of action and unsatisfactory bioavailability, which is manifested by the negligible activity of these derivatives in vivo.

Obecny wynalazek dostarcza szeregu pochodnych indolochinoliny o budowie hybrydowej, w których policykliczny, płaski układ indolochinoliny jest połączony z odpowiednio dobranym podstawnikiem zawierającym układ węglowodanowy. Podstawniki węglowodanowe wywierają pozytywny wpływ na rozpuszczalność związków w wodzie, a co za tym idzie również na ich biodostępność. Odpowiednio dobrany podstawnik cukrowy wpływa również na zdolność związku do tworzenia specyficznych kompleksów z DNA i topoizomeraza.The present invention provides a series of hybrid-structured indoloquinoline derivatives in which a polycyclic, planar indolequinoline system is linked to a suitably selected substituent containing a carbohydrate system. Carbohydrate substituents have a positive effect on the solubility of compounds in water, and thus also on their bioavailability. A properly selected sugar substituent also affects the ability of the compound to form specific complexes with DNA and topoisomerase.

Istotę wynalazku stanowią pochodne indolo[2,3-b]chinoliny o wzorze 1, w którym:The invention is based on the indolo [2,3-b] quinoline derivatives of the formula I, in which:

jeden z podstawników R1, R2 lub R3 oznacza grupę -O-(CH2)n-O-R, gdzie n = 2-6, R oznacza grupę monosacharydową, a pozostałe dwa podstawniki spośród R1, R2 i R3 są takie same lub różne i oznaczają niezależ nie grupę C1-C4-alkilową lub atom wodoru.one of R1, R2 or R3 is -O- (CH2) nOR, where n = 2-6, R is a monosaccharide group, and the other two of R1, R2 and R3 are the same or different and independently represent a group C1-C4-alkyl or hydrogen.

Przez określenie „grupa monosacharydowa należy rozumieć pochodną cukrów prostych: pentozy, heksozy, heptozy lub aminocukru w postaci cyklicznej lub łańcuchowej.By the term "monosaccharide group" is meant a derivative of simple sugars: pentose, hexose, heptose or an amino sugar in cyclic or chained form.

Korzystną grupę związków według wynalazku stanowią glikozydowe pochodne indolo[2,3-b]chinoliny, w których grupę monosacharydową stanowi grupa aminocukrowa w formie piranozowej, zwłaszcza L-akozaminyl lub L-daunozaminyl, lub 2-deoksy-heksozyl w formie piranozowej.A preferred group of compounds according to the invention are indole [2,3-b] quinoline glycoside derivatives in which the monosaccharide group is an aminosugar group in pyranose form, especially L-acosaminyl or L-daunosaminyl, or 2-deoxy-hexosyl in pyranose form.

W jednej odmianie wynalazku pochodne indolo[2,3-b]chinoliny mają wzór 1, w którymIn one embodiment of the invention the indole [2,3-b] quinoline derivatives have the formula 1, wherein

R1 stanowi grupę -O-(CH2)n-O-R, gdzie n = 2-6, R oznacza grupę aminocukrową lub 2-deoksy-heksozyl, R2 stanowi grupę metylową, a R3 stanowi atom wodoru.R1 is -O- (CH2) n-O-R, where n = 2-6, R is amino sugar or 2-deoxy-hexosyl, R2 is methyl and R3 is hydrogen.

W drugiej odmianie wynalazku pochodne indolo[2,3-b]chinoliny mają wzór 1, w którym R1 i R3 stanowią atomy wodoru; a R2 oznacza grupę -(CH2)n-O-R, gdzie n= 2-6 i R oznacza grupę aminocukrową lub 2-deoksy-heksozyl.In a second embodiment of the invention the indole [2,3-b] quinoline derivatives have the formula 1 in which R 1 and R 3 are hydrogen; and R2 is - (CH2) n-O-R, where n = 2-6 and R is amino sugar or 2-deoxy-hexosyl.

W kolejnej odmianie wynalazku pochodne indolo[2,3-b] chinoliny mają wzór 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, R2 oznacza grupę metylową, R3 oznacza grupę -O-(CH2)n-O-R, gdzie n = 2-6 i R oznacza grupę aminocukrową lub 2-deoksy-heksozyl.In a further embodiment of the invention the indolo [2,3-b] quinoline derivatives have the formula 1, in which R1 is hydrogen, R2 is methyl, R3 is -O- (CH2) nOR, where n = 2-6 and R is an amino sugar group or 2-deoxy-hexosyl group.

Wynalazek obejmuje ponadto sposób otrzymywania nowych pochodnych indolo[2,3-b]chinoliny.The invention also includes a process for the preparation of novel indolo [2,3-b] quinoline derivatives.

Sposób według wynalazku otrzymywania pochodnych indolo[2,3-b] chinoliny o wzorze 1, w którym jeden z podstawników R1, R2 lub R3 oznacza grupę -O-(CH2)n-O-R, gdzie n = 2-6, R oznacza grupę monosacharydową, a pozostałe dwa podstawniki spośród R1, R2 i R3 są takie same lub różne i oznaczają grupę C1-C4-alkilową lub atom wodoru, polega na tym, że pochodne indolo[2,3-b]chinoliny o wzorze 1, w którym jeden z podstawników R1, R2 lub R3, będący prekursorem grupy -O-(CH2)n-O-R, stanowi grupę hydroksylową, a pozostałe dwa podstawniki spośród R1, R2 i R3 stanowią niezależnie grupę C1-C4-alkilową lub atom wodoru, poddaje się alkilowaniu za pomocą czynnika alkilującegoThe process of the invention for the preparation of indolo [2,3-b] quinoline derivatives of formula 1, in which one of the substituents R1, R2 or R3 is the group -O- (CH2) nOR, where n = 2-6, R is a monosaccharide group, and the other two substituents of R1, R2 and R3 are the same or different and represent a C1-C4-alkyl group or a hydrogen atom, such that the indolo [2,3-b] quinoline derivatives of formula 1 wherein one of of R1, R2 or R3, which is a precursor of the group -O- (CH2) nOR, is a hydroxyl group, and the other two of R1, R2 and R3 are independently a C1-C4-alkyl group or a hydrogen atom, are alkylated with alkylating

PL 206 681 B1 o wzorze R4-O-(CH2)n-X, gdzie R4 stanowi grupę zabezpieczającą grupę hydroksylową , n ma wyżej określone znaczenie, a X oznacza atom chlorowca, następnie odbezpiecza się grupę hydroksylową, i tak otrzymany związek stanowią cy akceptor glikozylowy przedstawiony wzorem 1, w którym jeden z podstawników R1, R2 i R3, będ ący prekursorem grupy -O-(CH2)n-O-R, oznacza -O-(CH2)n-OH, pozostałe dwa podstawniki spośród R1, R2 i R3 oraz n mają wyżej określone znaczenie, poddaje się reakcji glikozydowania z donorem glikozylowym, który stanowi monosacharyd w formie glikalu, w obecności promotora, w rozpuszczalniku aprotonowym.Of the formula R4-O- (CH2) nX, where R4 is a hydroxyl protecting group, n is as defined above and X is a halogen atom, then the hydroxyl group is deprotected, and the thus obtained compound is a glycosyl acceptor shown in Formula 1, wherein one of R1, R2 and R3, which is a precursor to -O- (CH2) nOR, is -O- (CH2) n-OH, the other two of R1, R2 and R3 and n are above as defined, undergoing a glycosylation reaction with a glycosyl donor, which is a monosaccharide in the form of a glycal, in the presence of a promoter, in an aprotic solvent.

Związki wyjściowe w sposobie według wynalazku są znane z publikacji Bioorg. Med. Chem. 7, 2457, 1999.The starting materials for the process according to the invention are known from Bioorg. Med. Chem. 7, 2457, 1999.

Grupa hydroksylowa w stosowanym jako czynnik alkilujący halogenku alkilowym o wzorze R4-O-(CH2)n-X może być zabezpieczona w postaci estru, eteru lub eteru sililowego.The hydroxyl group of the alkyl halide of formula R4-O- (CH2) n-X used as the alkylating agent may be protected as an ester, ether or silyl ether.

Reakcję alkilowania prowadzi się w obecności silnej za sady, wybranej z grupy wodorków, alkoholanów lub wodorotlenków metali alkalicznych.The alkylation reaction is carried out in the presence of a strong base selected from the group of alkali metal hydrides, alcoholates or hydroxides.

W korzystnej odmianie wynalazku reakcję alkilowania prowadzi się w dimetyloformamidzie przy pomocy octanu 2-bromoetylu lub octanu 6-bromo-n-heksanylu w obecności wodorku sodu.In a preferred embodiment of the invention, the alkylation reaction is carried out in dimethylformamide with 2-bromoethyl acetate or 6-bromo-n-hexanyl acetate in the presence of sodium hydride.

Grupę hydroksylową po reakcji alkilowania odbezpiecza się jedną ze znanych metod solwolizy, na przykład prowadzoną w alkoholu, wybranym z grupy alkoholi alifatycznych C1-C6, korzystnie w metanolu, w obecnoś ci zasady wybranej z grupy alkoholanów, wę glanów lub wodorotlenków metali lub trzecio rzędowych amin alifatycznych, alifatyczno-aromatycznych i aromatycznych, korzystnie węglanu potasowego.After the alkylation reaction, the hydroxyl group is deprotected by one of the known solvolysis methods, for example carried out in an alcohol selected from the group of C1-C6 aliphatic alcohols, preferably in methanol, in the presence of a base selected from the group of metal alcoholates, carbonates or hydroxides or tertiary amines aliphatic, aliphatic-aromatic and aromatic, preferably potassium carbonate.

Reakcja przyłączania akceptora glikozylowego do glikalu znana jest na przykład z publikacji w Journal of Organic Chemistry, 55, 5812-5813, 1990. W znanych procesach stosuje się glikale, w których grupy hydroksylowe został y w odpowiedni sposób zabezpieczone w postaci estrów, eterów, eterów sililowych, korzystnie estrów kwasu octowego, a grupy aminowe - w przypadku zastosowania glikali aminocukrów - w postaci amidów, karbaminianów, korzystnie karbaminianu benzylowego, karbaminianu allilowego, karbaminianu t-butylowego lub karbaminianu trichloroetylowego.The reaction of attaching a glycosyl acceptor to a glycal is known, for example, from the publication in Journal of Organic Chemistry, 55, 5812-5813, 1990. Known processes use glycals in which the hydroxyl groups have been appropriately protected in the form of esters, ethers, silyl ethers. , preferably acetic acid esters, and the amino groups - when amino sugar glycals are used - in the form of amides, carbamates, preferably benzyl carbamate, allyl carbamate, t-butyl carbamate or trichloroethyl carbamate.

W sposobie według wynalazku grupy hydroksylowe glikalu zabezpiecza się w postaci estrów, a grupy aminowe w postaci karbaminianów. Korzystnie, grupy hydroksylowe glikalu s ą za bezpieczone w postaci estrów kwasu octowego, a grupy aminowe w postaci karbaminianu allilowego.In the process of the invention, the hydroxyl groups of the glycal are protected as esters and the amino groups as carbamates. Preferably, the hydroxyl groups of the glycal are protected as acetic acid esters and the amino groups as allyl carbamate.

Rozpuszczalnik aprotonowy w reakcji glikozydowania według wynalazku korzystnie stanowi dichlorometan lub dichloroetan.The aprotic solvent for the glycosidation reaction according to the invention is preferably dichloromethane or dichloroethane.

Generalnie, reakcję glikozydowania prowadzić można w warunkach kwaśnych wobec kwasówIn general, the glycosidation reaction can be carried out under acidic conditions towards acids

Lewisa lub Bronsteda lub też, w przypadku reakcji wymiany anomerycznej, w warunkach zasado wych. Odpowiednie kwasy Bronsteda stanowią na przykład kwas toluenosulfonowy lub triflowy, bromowodorek trifenylofosfiny, 4-toluenosulfonian pirydyny, zaś odpowiednie kwasy Lewisa stanowią tetrachlorek cyny, trichlorek glinu lub tetrachlorek tytanu.Lewis or Bronsted or, in the case of an anomeric exchange reaction, under basic conditions. Suitable Bronsted acids are, for example, toluenesulfonic or triflic acid, triphenylphosphine hydrobromide, pyridine-4-toluenesulfonate, and suitable Lewis acids are tin tetrachloride, aluminum trichloride or titanium tetrachloride.

W sposobie według wynalazku jako promotor reakcji glikozydowania stosuje się bromowodorek trifenylofosfiny.In the process of the invention, triphenylphosphine hydrobromide is used as a glycosidation reaction promoter.

Reakcję glikozydowania prowadzi się temperaturze od -78°C do 80°C, korzystnie w temperaturze pokojowej, w atmosferze gazu obojętnego.The glycosidation reaction is carried out at a temperature of -78 ° C to 80 ° C, preferably at room temperature, under an inert gas atmosphere.

Produkt reakcji glikozydowania wydziela się przez wylanie mieszaniny reakcyjnej do wody lub wodnego roztworu soli o odczynie zasadowym, korzystnie wodnego roztworu kwaśnego węglanu sodowego, lub soli o odczynie kwaśnym, korzystnie chlorku amonowego i ekstrakcję produktu reakcji przy pomocy rozpuszczalnika organicznego nie mieszającego się z wodą wybranego z grupy estrów eterów, eterów cyklicznych, halogenopochodnych węglowodorów alifatycznych i aromatycznych, korzystnie przy pomocy octanu etylu, lub dichlorometanu.The glycosidation reaction product is isolated by pouring the reaction mixture into water or an alkaline aqueous salt solution, preferably aqueous sodium bicarbonate, or acidic salt, preferably ammonium chloride, and extracting the reaction product with a water-immiscible organic solvent selected from ester groups of ethers, cyclic ethers, halogenated aliphatic and aromatic hydrocarbons, preferably with the aid of ethyl acetate or dichloromethane.

Produkt reakcji po usunięciu rozpuszczalnika można, w razie potrzeby, oczyścić metodą chromatografii żelowej lub krystalizacji.After the solvent has been removed, the reaction product can, if necessary, be purified by gel permeation chromatography or crystallization.

Odbezpieczenia grup hydroksylowych lub grupy aminowej w przypadku zastosowania pochodnej aminocukru w podstawniku monosacharydowym dokonuje się jedną z powszechnie znanych metod solwolizy lub hydrogenolizy. W sposobie według wynalazku solwolizę estrów kwasu octowego przeprowadza się w alkoholu, wy branym z grupy alkoholi alifatycznych C1-C6, korzystnie metanolu w obecności zasady wybranej z grupy alkoholanów, węgla nów lub wodorotlenków metali lub trzeciorzędowych amin alifatycznych, alifatyczno-aromatycznych i aromatycznych, korzystnie węglanu potasowego, a solwolizę karbaminianu allilowego przeprowadza się w obecności kompleksu palladu z trifenylofosfiną.Deprotection of the hydroxyl groups or the amino group in the case of using an amino sugar derivative in a monosaccharide substituent is performed by one of the commonly known methods of solvolysis or hydrogenolysis. In the process of the invention, the solvolysis of acetic acid esters is carried out in an alcohol selected from the group of C1-C6 aliphatic alcohols, preferably methanol, in the presence of a base selected from the group of alkoxides, carbonates or metal hydroxides or tertiary aliphatic, aliphatic-aromatic and aromatic amines, preferably potassium carbonate and solvolysis of the allyl carbamate is carried out in the presence of a palladium triphenylphosphine complex.

PL 206 681 B1PL 206 681 B1

Nowe węglowodanowe pochodne 11-metylo-indolochinoliny wykazują silne działanie przeciwnowotworowe oraz korzystne własności fizykochemiczne. Obecność podstawnika sacharydowego znacząco wpływa na zwiększenie rozpuszczalności substancji w płynach ustrojowych, powinowactwo do biopolimerów, podatność na biodegradację, a co za tym idzie na własności farmakokinetyczne, a w szczególnoś ci na biodostę pność.The new carbohydrate derivatives of 11-methyl-indolequinoline show a strong anti-cancer effect and favorable physicochemical properties. The presence of a saccharide substituent significantly increases the solubility of substances in body fluids, affinity to biopolymers, biodegradability, and thus pharmacokinetic properties, and in particular bioavailability.

Związki według wynalazku mogą znaleźć zastosowanie w leczeniu lub profilaktyce różnych rodzajów nowotworów u człowieka, takich jak nowotwory głowy i szyi, sutka, prostaty, chłoniaki, mięsaki i gruczolaki, nie ograniczają c się do wymienionych.The compounds of the present invention may find use in the treatment or prophylaxis of various types of human cancers, such as cancers of the head and neck, breast, prostate, lymphomas, sarcomas and adenomas, but not limited to those mentioned.

Dobór dawki leku i schematu dawkowania zależy od rodzaju choroby, wieku, wagi i stanu zdrowia chorego i może być określony przez specjalistę w oparciu o znane schematy leczenia i profilaktyki nowotworów. Odpowiednia dawka może być podawana choremu raz lub kilka razy dziennie, sama lub w połączeniu z innymi substancjami leczniczymi. Substancje takie mo ż na podawać jednocześ nie w postaci jednego preparatu lub osobnych preparatów, albo kolejno po sobie w ustalonej przez specjalistę kolejności i odstępach czasu.The choice of drug dose and dosing regimen depends on the nature of the disease, age, weight and state of health of the patient, and can be determined by the skilled artisan based on known cancer treatment and prevention regimens. The appropriate dose may be administered to the patient once or several times daily, alone or in combination with other therapeutic substances. Such substances can be administered simultaneously in the form of one preparation or separate preparations, or successively in a sequence and at intervals determined by the skilled person.

Wynalazek ilustrują następujące, nie stanowiące ograniczenia, przykłady wykonania.The following non-limiting examples illustrate the invention.

P r z y k ł a d 1P r z k ł a d 1

2-[5'-(2-Deoksy -a-D-laktopiranozyloksy)pentyloksy-]-6,11-dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (3) (wzór 1, R₁ = -O-(CH₂)_n-O-R, n= 5, R= 2-deoksy-a-D-laktopiranozyl, R₂= CH₃, R₃= H)2- [5 '- (2-Deoxy -aD-lactopyranosyloxy) pentyloxy -] - 6,11-dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (3) (formula 1, R ₁ = -O- ( CH ₂ ) _n -OR, n = 5, R = 2-deoxy-aD-lactopyranosyl, R ₂ = CH ₃ , R ₃ = H)

6,11-Dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-2-ol (4) (26,2 g, 0,1 mola) zawieszono w toluenie (250 ml), dodano octan bromopentylu (23,0 g, 0,11 mola), bromek tetrabutyloamoniowy (2,5 g) i sproszkowany KOH (20 g) i całość intensywnie mieszano w temperaturze wrzenia w ciągu 30 min. Po ochłodzeniu dodano wodę (500 ml), oddzielono warstwę organiczną, a warstwę wodną ekstrahowano toluenem (2 x 100 ml). Połączone warstwy toluenowe przemyto wodą (4 x 200 ml) i oddestylowano toluen pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość rozcieńczono metanolem (1 l), dodano K2CO3 (15 g) i mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 24 godzin. Po oddestylowaniu metanolu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość rozcieńczono wodą (500 ml) i ekstrahowano chloroformem (4 x 200 ml). Połączone ekstrakty przemyto wodą (2 x 100 ml), suszono nad siarczanem magnezu i odparowano otrzymując 5-(6,11-Dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-2-yloksy)pentanol (5) z wydajnością 27,3 g (78%). Po krystalizacji z toluenu t.t. 131-133°C.6,11-Dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-2-ol (4) (26.2 g, 0.1 mol) was suspended in toluene (250 ml), bromopentyl acetate (23.0 g, 0.11 mol), tetrabutylammonium bromide (2.5 g) and powdered KOH (20 g) and vigorously stirred at reflux for 30 min. After cooling, water (500 ml) was added, the organic layer was separated and the aqueous layer was extracted with toluene (2 x 100 ml). The combined toluene layers were washed with water (4 x 200 ml) and toluene was distilled off under reduced pressure. The residue was diluted with methanol (1 L), K2CO3 (15 g) was added and stirred at room temperature for 24 hours. After methanol was distilled off under reduced pressure, the residue was diluted with water (500 ml) and extracted with chloroform (4 x 200 ml). The combined extracts were washed with water (2 x 100 ml), dried over magnesium sulfate and evaporated to give 5- (6,11-Dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-2-yloxy) pentanol (5) in a yield of 27 . 3 g (78%). After crystallization from toluene, mp. 131-133 ° C.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3): 8,26 (d, 1H, J=7.7), 8.05 (d, 1H J=9.1), 7.55 (ddd, 1H, J=7.3, J=6.04, J=1,28), 7.40 (m, 5 4H), 4.14 (dd, 2H, J1=J2=6.4), 3.96 (s, 3H), 3.72 (bdd, 2H, J1=J2=6.05), 3.12 (s, 3H), 1.92 (m, 2H), 1.66 (m, 4H). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.26 (d, 1H, J = 7.7), 8.05 (d, 1H J = 9.1), 7.55 (ddd, 1H, J = 7.3, J = 6.04, J = 1 , 28), 7.40 (m, 5 4H), 4.14 (dd, 2H, J1 = J2 = 6.4), 3.96 (s, 3H), 3.72 (ndd, 2H, J1 = J2 = 6.05), 3.12 (s, 3H ), 1.92 (m, 2H), 1.66 (m, 4H).

IR (KBr, cm^-1) : 3411, 3931, 3862, 1625, 1600, 1491, 1474, 1430, 1395, 1220, 1112, 1050, 824,IR (KBr, cm ^-1 ): 3411, 3931, 3862, 1625, 1600, 1491, 1474, 1430, 1395, 1220, 1112, 1050, 824,

794, 737.794, 737.

MS (-70eV, m/e, rel.int.): 348 (100, M+).MS (-70eV, m / e, int. Rel): 348 (100, M +).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C22H24 N2O2 (348,44) obl.: 75,9% C; 6,9% H; 8,0% N; znal.: 75,8% C; 6,7% H; 7,9% N.For C22H24 N2O2 (348.44) calculated: 75.9% C; 6.9% H; 8.0% N; found: 75.8% C; 6.7% H; 7.9% N.

Do roztworu pochodnej indolochinoliny (5) (0.697 g, 2 mmol) w suchym CH2CI2 (30 ml), dodano heksa-O-acetylo-D-laktal (2.264 g, 4 mmol) i bromowodorek trifenylofosfiny (1.716 g, 5 mmol). Kolbkę reakcyjną zabezpieczono przed wilgocią rurką ze środkiem suszącym. Reakcję prowadzono 7 dni w temperaturze pokojowej, mieszając za pomocą mieszadła magnetycznego. Mieszaninę reakcyjną wylano do nasyconego roztworu NaHCO3 (30 ml), mieszano przez około 15 min., a następnie oddzielono w rozdzielaczu warstwę organiczną, którą po przemyciu wodą suszono (MgSO4). Suchy ekstrakt organiczny przesączono i zatężono otrzymując 5.535 g surowego produktu (brązowy olej). Produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako układ eluujący heksan : octan etylu o rosnącej polarności od 3:1 do 1:1. Otrzymano 1.394 g czystego produktu, 2-[5'-(3,6,2',3',4',6'-heksa-O-acetylo-2-deoksy-a-D-laktopiranozyloksy)pentyloksy-]-6,11-dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (6) (82%) w postaci lekko żółtego oleju.To a solution of the indoloquinoline derivative (5) (0.697 g, 2 mmol) in dry CH2Cl2 (30 ml), hexa-O-acetyl-D-lactal (2.264 g, 4 mmol) and triphenylphosphine hydrobromide (1.716 g, 5 mmol) were added. The reaction flask was protected against moisture with a tube containing a desiccant. The reaction was carried out for 7 days at room temperature while stirring with a magnetic stirrer. The reaction mixture was poured into a saturated solution of NaHCO3 (30 ml), stirred for about 15 min, and then the organic layer was separated in a separatory funnel and washed with water and dried (MgSO4). The dry organic extract was filtered and concentrated to give 5.535 g of crude product (brown oil). The product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using hexane: ethyl acetate of increasing polarity from 3: 1 to 1: 1 as eluting system. 1.394 g of pure product was obtained, 2- [5 '- (3,6,2', 3 ', 4', 6'-hexa-O-acetyl-2-deoxy-αD-lactopyranosyloxy) pentyloxy -] - 6.11 -Dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (6) (82%) as a slightly yellow oil.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3): 8,26 (d, 1H, J=7.5), 8.04 (d, 1H J=9.0), 7.55 (ddd, 1H, J=7.5, J=6.0, J=1,1), 7.51 (d, 1H, J=2.8), 7.43 (m, 2H), 7.32 (m, 1H), 5.36 (dd, 1H, J=1.1, J=3.5), 5.33 (ddd, 1H), ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.26 (d, 1H, J = 7.5), 8.04 (d, 1H J = 9.0), 7.55 (ddd, 1H, J = 7.5, J = 6.0, J = 1 , 1), 7.51 (d, 1H, J = 2.8), 7.43 (m, 2H), 7.32 (m, 1H), 5.36 (dd, 1H, J = 1.1, J = 3.5), 5.33 (ddd, 1H) ,

5.16 (dd, 1H, J1=8.0, J2=10.6), 4.98 10 (dd, 1H, J1=4.5, J2=10.6 ), 4.89 (bd, 1H, J=2.5), 4.58 (d, 1H, J=8.0), 4.39 (dd, 1H, J1=11.7, J2=2.2), 4.20-4.02 (m, 6H), 3.98 (s, 3H), 3.90 (m, 2H), 3.63 (m, 2H),5.16 (dd, 1H, J1 = 8.0, J2 = 10.6), 4.98 10 (dd, 1H, J1 = 4.5, J2 = 10.6), 4.89 (na, 1H, J = 2.5), 4.58 (d, 1H, J = 8.0), 4.39 (dd, 1H, J1 = 11.7, J2 = 2.2), 4.20-4.02 (m, 6H), 3.98 (s, 3H), 3.90 (m, 2H), 3.63 (m, 2H),

3.17 (s, 3H), 2.26 (ddd, 1H, J1=1.65, J2=5.49, J3=12.99), 2.15, 2.12, 2.07, 2.06, 2.05, 2.04 (6 x s 6 x 3H), 1.92 (m, 2H), 1.66 (m, 5H).3.17 (s, 3H), 2.26 (ddd, 1H, J1 = 1.65, J2 = 5.49, J3 = 12.99), 2.15, 2.12, 2.07, 2.06, 2.05, 2.04 (6 xs 6 x 3H), 1.92 (m, 2H ). 1.66 (m, 5H).

PL 206 681 B1PL 206 681 B1

IR (KBr, cm^-1) : 2940, 1751, 1369, 1222 (max), 1052, olej.IR (KBr, cm ^-1 ): 2940, 1751, 1369, 1222 (max), 1052, oil.

MS (LSIMS, m/e, rel. int.): 849 (2, M⁺-H), 331 (27), 262 (40), 81 (100).MS (LSIMS, m / e, int rel): 849 (2, M ⁺ -H), 331 (27), 262 (40), 81 (100).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C22H54N2O5+H2O (868.92) obl.: 60.8% C; 6.5% H; 3.2% N znal.: 60.7% C; 6.9% H; 2.7% NFor C22H54N2O5 + H2O (868.92) calculated: 60.8% C; 6.5% H; 3.2% N found: 60.7% C; 6.9% H; 2.7% N

Bezwodny, sproszkowany K2CO3 (0.4 g) dodano do roztworu pochodnej acetylowej (6) (1.21 g, 1.42 mmol) w 8 ml MeOH : CH2CI2 (1:1). Reakcję prowadzono w ciągu 24 godzin w temperaturze pokojowej, mieszając za pomocą mieszadła magnetycznego (Tlc CHCI3 : MeOH = 9:1). Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą, ekstrahowano roztworem CHCI3 : MeOH/9:1. Ekstrakt organiczny odparowano do sucha, rozpuszczono w roztworze CHCI3 : MeOH = 8:2 (ok. 100 ml), przesączono przez MgSO4, a następnie naniesiono na kolumnę (silica gel 230-400 mesh), z której eluowano produkt roztworem CHCI3 : MeOH/8:2. Po odparowaniu frakcji produkt krystalizowano z mieszaniny EtOH/heksan. Otrzymano 0.385 g czystego produktu (3) w postaci drobnego żółtego osadu (42 %).Anhydrous powdered K2CO3 (0.4 g) was added to a solution of the acetyl derivative (6) (1.21 g, 1.42 mmol) in 8 mL of MeOH: CH2Cl2 (1: 1). The reaction was carried out for 24 hours at room temperature while stirring with a magnetic stirrer (Tlc CHCl3: MeOH = 9: 1). The reaction mixture was diluted with water, extracted with 9: 1 CHCl3: MeOH solution. The organic extract was evaporated to dryness, dissolved in CHCl3: MeOH = 8: 2 (approx. 100 ml), filtered through MgSO4, and then applied to a column (silica gel 230-400 mesh), from which the product was eluted with CHCl3: MeOH / 8: 2. After evaporation of the fractions, the product was crystallized from EtOH / hexane. 0.385 g of pure product (3) was obtained in the form of a fine yellow solid (42%).

¹H NMR (200 MHz, CDCI3): 8,34 (bd, 1H, J=8.1), 7.92 (d, 1H J=9.2), 7.58 (m, 3H), 7.40 (dd, 1H), 7.30 (dd, 1H), 5.06 (d, 1H, J=4.4), 4.84 (bdd, 1H J1<1.0, J2=2.7), 4.76 (d, 1H J=5.31), 4.62 (m, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.18 (m, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.76-3.30 (m, 8H), 3.22 (dd, 1H, 2 x J=9.0), 3.17 (s, 3H), 1.97 (ddd, 1H, J1=1.65, J2=5.49, J3=12.99), 1.88-1.39 (m, 7H). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.34 (bd, 1H, J = 8.1), 7.92 (d, 1H J = 9.2), 7.58 (m, 3H), 7.40 (dd, 1H), 7.30 (dd , 1H), 5.06 (d, 1H, J = 4.4), 4.84 (ndd, 1H J1 <1.0, J2 = 2.7), 4.76 (d, 1H J = 5.31), 4.62 (m, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.18 (m, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.76-3.30 (m, 8H), 3.22 (dd, 1H, 2 x J = 9.0), 3.17 (s, 3H), 1.97 (ddd, 1H, J1 = 1.65, J2 = 5.49, J3 = 12.99), 1.88-1.39 (m, 7H).

IR (KBr, cm^-1) : 3376, 2941, 2864, 1631, 1603, 1475, 1431, 1395, 1244, 1130, 1080, 1027 (max)IR (KBr, cm ^-1 ): 3376, 2941, 2864, 1631, 1603, 1475, 1431, 1395, 1244, 1130, 1080, 1027 (max)

MS (ESI, m/e rel. int.): 657 (100, M⁺)MS (ESI, m / e rel. Int.): 657 (100, M ⁺ )

P r z y k ł a d 2P r z k ł a d 2

9-[2'-(2-Deoksy -a-L-ramnopiranozyloksy)etoksy-]-6,11-25 dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (7) (wzór 1, R₁= H, R₂= CH₃, R₃= -O-(CH₂)_n-O-R, n = 2, R= 2-deoksy-a-L-ramnopiranozyl)9- [2 '- (2-Deoxy-aL-rhamnopyranosyloxy) ethoxy -] - 6,11-25 dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (7) (formula 1, R ₁ = H, R ₂ = CH ₃ , R ₃ = -O- (CH ₂ ) _n -OR, n = 2, R = 2-deoxy-aL-rhamnopyranosyl)

6,11-Dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-9-ol (8) (26,2 g, 0,1 mola) zawieszono w DMF (300 ml), dodano 80% wodorek sodowy (4,5 g, 0,15 mola) i mieszano w temperaturze pokojowej w 30 ciągu 2 godzin. Następnie dodano octan 2-bromoetylu (5) (16,7 g, 0,1 mola), mieszano całość w temperaturze pokojowej przez 3 godziny, po czym wylano do wody i ekstrahowano dichlorometanem (4 x 500 ml). Pozostałość po usunięciu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem rozcieńczono metanolem (1 l), dodano K2CO3 (15 g) i mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 24 godzin. Po oddestylowaniu metanolu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość rozcieńczono wodą (500 ml) i ekstrahowano chloroformem (4 x 200 ml). Połączone ekstrakty przemyto wodą (2 x 100 ml), suszono nad siarczanem magnezu i odparowało no otrzymując 2-(6,11-Dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-9-yloksy)etanol (9).6,11-Dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-9-ol (8) (26.2 g, 0.1 mol) was suspended in DMF (300 ml), 80% sodium hydride (4 , 5 g, 0.15 mol) and stirred at room temperature for 2 hours. Then 2-bromoethyl acetate (5) (16.7 g, 0.1 mol) was added, the mixture was stirred at room temperature for 3 hours, then poured into water and extracted with dichloromethane (4 x 500 ml). After removal of the solvent under reduced pressure, the residue was diluted with methanol (1 L), K2CO3 (15 g) was added and stirred at room temperature for 24 hours. After methanol was distilled off under reduced pressure, the residue was diluted with water (500 ml) and extracted with chloroform (4 x 200 ml). The combined extracts were washed with water (2 x 100 ml), dried over magnesium sulfate and evaporated to give 2- (6,11-Dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-9-yloxy) ethanol (9).

¹H NMR (200 MHz, CDCI3): 8,14 (m, 2H), 7.72 (m, 2H), 7.45 (m, 1H), 7.20 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.05 (s, 3H). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.14 (m, 2H), 7.72 (m, 2H), 7.45 (m, 1H), 7.20 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.05 (m , 2H), 3.89 (s, 3H), 3.05 (s, 3H).

IR (KBr, cm^-1) : 3288, 3061, 2926, 1606, 1484 (max), 1458, 1391, 1295, 1234, 759.IR (KBr, cm ^-1 ): 3288, 3061, 2926, 1606, 1484 (max), 1458, 1391, 1295, 1234, 759.

MS (-70eV, m/e, rel. int.): 306 (77, M⁺), 261 (100).MS (-70eV, m / e, int rel): 306 (77, M ⁺ ), 261 (100).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C19H18 N2O2 (306,36) obl.: 74,5% C; 5,9% H; 9,1% N; znal.: 75.1% C; 5.9% H; 8.9% N.For C19H18 N2O2 (306.36) calculated: 74.5% C; 5.9% H; 9.1% N; found: 75.1% C; 5.9% H; 8.9% N.

Do roztworu pochodnej indolochinoliny (9) (0.5 g, 1.63 mmol) i 3,4-di-O-acetylo-L-ramnalu (0.524 g, 2.45 mmol) w suchym chlorku metylenu (50 ml) dodano HBr x Ph3P (1.4 g, 4.08 mmol). Mieszaninę reakcyjną zabezpieczono rurką z CaCl2. Reakcję prowadzono w temperaturze pokojowej przez 48 godzin, mieszając za pomocą mieszadła magnetycznego, a następnie wylano do nasyconego roztworu NaHCO3 (50 ml) i mieszano jeszcze 15 min. w r.t. Oddzieloną w rozdzielaczu warstwę organiczną przemyto wodą, suszono (MgSO4), odsączono i odparowano. Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako układ eluujący heksan: octan etylu od 5:1 do 1:2. Otrzymano 0.230 g czystego produktu, 9-[2'-(3,4-di-O-acetylo-2-deoksy-a-L-ramnopiranozyloksy)etoksy-]-6,11-dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (10) w postaci oleju. Wydajność 27%.To a solution of the indoloquinoline derivative (9) (0.5 g, 1.63 mmol) and 3,4-di-O-acetyl-L-rhamnal (0.524 g, 2.45 mmol) in dry methylene chloride (50 ml) was added HBr x Ph3P (1.4 g , 4.08 mmol). The reaction mixture was protected with a CaCl2 tube. The reaction was carried out at room temperature for 48 hours while stirring with a magnetic stirrer, then poured into saturated NaHCO3 solution (50 ml) and stirred for an additional 15 min. in r.t. The organic layer separated in the separatory funnel was washed with water, dried (MgSO4), filtered and evaporated. The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using 5: 1 to 1: 2 hexane: ethyl acetate as eluting system. 0.230 g of pure product was obtained, 9- [2 '- (3,4-di-O-acetyl-2-deoxy-aL-rhamnopyranosyloxy) ethoxy -] - 6,11-dimethyl-6H-indolo [2,3-b ] quinoline (10) in the form of an oil. 27% yield.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,20 (m, 2H), 7.87 (bd, 1H J=2.2), 7.70 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.30 (m, 2H), 5.32 (ddd, 1H, J1=11.7, J2=9.5, J3=5.1), 5.03 (bd, 1H, J=2.6), 4.76 (dd, 1H, 2 x J=9.5), 4.30 (m, 2H), 4.10-3.80 (m, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.32 (ddd, 1H, J1=1.1, J2=5.4, J3=12.80), 2.02, 2.01 (2 x s 2 x 3H), 1.84 (ddd, 1H, J1=4.0, J2=11.7, J3=12.8), 1.19 (d, 3H, J=6.2). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.20 (m, 2H), 7.87 (bd, 1H J = 2.2), 7.70 (m, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.30 (m, 2H), 5.32 (ddd, 1H, J1 = 11.7, J2 = 9.5, J3 = 5.1), 5.03 (bd, 1H, J = 2.6), 4.76 (dd, 1H, 2 x J = 9.5), 4.30 (m, 2H), 4.10-3.80 (m, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.32 (ddd, 1H, J1 = 1.1, J2 = 5.4, J3 = 12.80), 2.02, 2.01 (2 xs 2 x 3H), 1.84 (ddd, 1H, J1 = 4.0, J2 = 11.7, J3 = 12.8), 1.19 (d, 3H, J = 6.2).

IR (CHCI3, cm^-1) : 2939, 1740 (max), 1608, 1484, 1368, 20 1298, 1121, 1001, 542.IR (CHCl3, cm ^-1 ): 2939, 1740 (max), 1608, 1484, 1368, 1298, 1121, 1001, 542.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 520 (100, M⁺), 277 (85), 43 (27).MS (70 eV, m / e, int rel): 520 (100, M ⁺ ), 277 (85), 43 (27).

PL 206 681 B1PL 206 681 B1

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C29H34N2O8 + H2O (538.59) obl.: 64.7% C; 6.4% H; 5.2% N; znal.: 65.1% C; 6.6% H; 3.7% N.For C29H34N2O8 + H2O (538.59) calculated: 64.7% C; 6.4% H; 5.2% N; found: 65.1% C; 6.6% H; 3.7% N.

Acetylową pochodną (10) (0.230 g, 0.44 mmol) rozpuszczono w 4 ml roztworu MeOH : CH2CI2 (1:1). Do otrzymanego roztworu dodano 0.15 g bezwodnego sproszkowanego K2CO3, a następnie mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono niewielką ilością H2O, ekstrahowano chlorkiem metylenu. Połączone ekstrakty organiczne przemyto wodą, suszono (MgSO4). Otrzymany surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako eluent CH2CI2, CH2CI2: MeOH od 99:1 do 95:5. Otrzymano 0.13 g czystego produktu 9-[2'-(2-deoksy -a-L-ramnopiranozyloksy)etoksy-]-6,11-dimetylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (7). Wydajność 67%.The acetyl derivative (10) (0.230 g, 0.44 mmol) was dissolved in 4 ml of a MeOH: CH2Cl2 solution (1: 1). 0.15 g of anhydrous powdered K2CO3 was added to the obtained solution, followed by stirring at room temperature for 2 hours. The reaction mixture was diluted with a little H 2 O, extracted with methylene chloride. The combined organic extracts were washed with water, dried (MgSO4). The obtained crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh), eluting with CH2Cl2, CH2Cl2: MeOH from 99: 1 to 95: 5. 0.13 g of pure product 9- [2 '- (2-deoxy-α-L-rhamnopyranosyloxy) ethoxy -] - 6,11-dimethyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline was obtained (7). 67% yield.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,34 (dd, 1H), 8,00 (dd, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.73 (ddd, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.28 (dd, 2H), 4.94 (bs, 1H), 4.89 (bd, 1H, J1<1, J2=3.0), 4.74 (bs, 1H), 4.28 (dd, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.85 (m, 1H), 5 3.75 (m, 1H), 3.62 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, 2 x J=9.2), 1.94 (ddd, 1H, J1=1.2, J2=5.1, J3=13.0), 1.51 (ddd, 1H, J1=3.5, J2=11.7, J3=13.1), 1.14 (d, 3H, J=6.2). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.34 (dd, 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.73 (ddd, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.28 (dd, 2H), 4.94 (bs, 1H), 4.89 (bs, 1H, J1 <1, J2 = 3.0), 4.74 (bs, 1H), 4.28 (dd, 2H), 3.90 (s, 3H), 3.85 (m, 1H), 5 3.75 (m, 1H), 3.62 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 2.80 (dd, 1H, 2 x J = 9.2), 1.94 (ddd, 1H, J1 = 1.2, J2 = 5.1, J3 = 13.0), 1.51 (ddd, 1H, J1 = 3.5, J2 = 11.7, J3 = 13.1), 1.14 (d, 3H, J = 6.2).

IR (KBr, cm^-1) : 3366, 2931, 1608, 1575, 1484, 1392, 1298, 1122, 1062, 985, 757.IR (KBr, cm ^-1 ): 3366, 2931, 1608, 1575, 1484, 1392, 1298, 1122, 1062, 985, 757.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 436 (54, M⁺), 332 (17), 306 (36), 262 (100), 89 (31), 73 (28).MS (70 eV, m / e, int rel): 436 (54, M ⁺ ), 332 (17), 306 (36), 262 (100), 89 (31), 73 (28).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C25H28N2O6 + H2O (454.51) obl.: 66.1% C; 6.7% H; 6.2% N; znal.: 65.6% C; 6.4% H; 5.7% N.For C25H28N2O6 + H2O (454.51) calculated: 66.1% C; 6.7% H; 6.2% N; found: 65.6% C; 6.4% H; 5.7% N.

P r z y k ł a d 3P r z k ł a d 3

6-N-[5'-(2-Deoksy -a-D-glukopiranozyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (11) (wzór 1, R₁ = H, R₂= -O-(CH₂)_n-O-R, n = 5, R= 2-deoksy-a-D-glukopiranozyl, R₃= H)6-N- [5 '- (2-Deoxy -aD-glucopyranosyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (11) (formula 1, R ₁ = H, R ₂ = -O- (CH ₂ ) _n -OR, n = 5, R = 2-deoxy-aD-glucopyranosyl, R ₃ = H)

11-Metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (12) (23,2 g, 0,1 mola) zawieszono w DMF (400 ml), dodano t-butanolan potasu (11,2 g, 0,1 mola) i mieszano w temperaturze pokojowej do rozpuszczenia substratu (30 min.), a następnie wkroplono roztwór octanu 5-bromopentylu (20,9 g, 0,1 mola) w DMF (100 ml). Całość mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 24 godzin, po czym wylano do wody (21) i ekstrahowano dichlorometanem (4 x 500 ml). Połączone ekstrakty przemyto wodą (2 x 100 ml), suszono nad siarczanem magnezu i oddestylowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość zawieszono w metanolu (1,5 l), dodano K2CO3 (1 g) i mieszano w temperaturze pokojowej w ciągu 24 godzin. Po oddestylowaniu metanolu pod zmniejszonym ciśnieniem pozostałość rozcieńczono wodą i ekstrahowano dichlorometanem. Połączone ekstrakty przemyto wodą, suszono nad siarczanem magnezu i po oddestylowaniu rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem chromatografowano na kolumnie z silikażelu wymywając eluentem heksan-octan etylu 3 : 1 i 1 : 1. Otrzymano 19,8 g (62%) 5-(11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-6-ylo)pentanol (13), t.t. 115-117°C.11-Methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (12) (23.2 g, 0.1 mol) was suspended in DMF (400 ml), potassium t-butoxide (11.2 g, 0.1 mol) was added. 1 mol) and stirred at room temperature until the starting material dissolved (30 min), then a solution of 5-bromopentyl acetate (20.9 g, 0.1 mol) in DMF (100 ml) was added dropwise. The mixture was stirred at room temperature for 24 hours, then poured into water (2 l) and extracted with dichloromethane (4 x 500 ml). The combined extracts were washed with water (2 x 100 ml), dried over magnesium sulfate, and the solvent was distilled off under reduced pressure. The residue was suspended in methanol (1.5 L), K2CO3 (1 g) was added and stirred at room temperature for 24 hours. After methanol was distilled off under reduced pressure, the residue was diluted with water and extracted with dichloromethane. The combined extracts were washed with water, dried over magnesium sulfate and, after distilling off the solvent under reduced pressure, chromatographed on a silica gel column, eluting with 3: 1 and 1: 1 hexane-ethyl acetate with the eluent. 19.8 g (62%) of 5- (11-methyl) were obtained. -6H-indolo [2,3-b] quinolin-6-yl) pentanol (13), m.p. 115-117 ° C.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,27 (m, 2H), 8.15 (d, 1H J=7.9), 7.71 (ddd, 1H, J=8.4, J=6.77, J=1,46), 7.50 (m, 3H), 7.32 (ddd, 1H, J=8.0, J=6.78, J=1,1), 4.56 (dd, 2H, J1=J2=6.9), 3.66 (dd, 2H, J1=J2=5.9), 3.21 (s, 3H), 1.99 (m, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.52 (m, 2H). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.27 (m, 2H), 8.15 (d, 1H J = 7.9), 7.71 (ddd, 1H, J = 8.4, J = 6.77, J = 1.46), 7.50 (m, 3H), 7.32 (ddd, 1H, J = 8.0, J = 6.78, J = 1.1), 4.56 (dd, 2H, J1 = J2 = 6.9), 3.66 (dd, 2H, J1 = J2 = 5.9), 3.21 (s, 3H), 1.99 (m, 2H), 1.68 (m, 2H), 1.52 (m, 2H).

IR (KBr, cm^-1) : 3273, 2931, 1603, 1573, 1472, 1441, 745.IR (KBr, cm ^-1 ): 3273, 2931, 1603, 1573, 1472, 1441, 745.

MS (-70 eV, m/e, rel. int.): 318 (29, M^+.), 287 (17), 246 (92), 232 (100).MS (-70 eV, m / e, int rel): 318 (29, M ^+. ), 287 (17), 246 (92), 232 (100).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C21H22N2O (318,41) obl.: 79,2% C; 7,0% H; 8,8% N; znal.: 79,3% C; 6,9% H; 8,8% N.For C21H22N2O (318.41) calcd: 79.2% C; 7.0% H; 8.8% N; found: 79.3% C; 6.9% H; 8.8% N.

HBr.Ph3P (1.716 g, 5 mmol) dodano do roztworu pochodnej indolochinoliny (13) (0.637 g, 2 mmol) i 3,4, 6-tri-O-acetylo-D-glukalu (1.089 g, 4 mmol) w suchym CH2CI2 (30 ml). Reakcję prowadzono 6 dni w temperaturze pokojowej, w kolbce zabezpieczonej przed wilgocią. Mieszaninę reakcyjną wylano do nasyconego roztworu NaHCO3 (30 ml), mieszano ok. 15 min. w r.t., a następnie oddzieloną w rozdzielaczu warstwę organiczną przemyto wodą, suszono (MgSO4). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh) stosując jako układ eluujący heksan/octan etylu 5:1. Pozostałe śladowe zanieczyszczenia usunięto na krótkiej kolumnie (silica gel), eluując chloroformem. Otrzymano 1.046 g czystego produktu 6-N-[5'-(3,4,6-tri-O-acetylo-2-deoksy-a-D-glukopiranozyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinoliny (14) (jasny olej). Wydajność 89%.HBr. Ph3P (1.716 g, 5 mmol) was added to a solution of the indoloquinoline derivative (13) (0.637 g, 2 mmol) and 3,4,6-tri-O-acetyl-D-glucal (1.089 g, 4 mmol) in dry CH2Cl2 (30 ml). The reaction was carried out for 6 days at room temperature in a moisture-proof flask. The reaction mixture was poured into a saturated NaHCO3 solution (30 ml), stirred for approx. 15 min. at r.t., and then the organic layer separated in a separatory funnel was washed with water, dried (MgSO4). The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using 5: 1 hexane / ethyl acetate as eluent. Residual trace impurities were removed through a short column (silica gel), eluting with chloroform. 1.046 g of pure product 6-N- [5 '- (3,4,6-tri-O-acetyl-2-deoxy-αD-glucopyranosyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b ] quinoline (14) (light oil). 89% yield.

PL 206 681 B1 ¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,28 (m, 2H), 8.12 (d, 1H 15 J=8.4), 7.12 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.32 (m, 1H), 5.31 (ddd, 1H, J=5.1, J=11.3, J=9.3), 4.97 (dd, 1H, 2 x J=9.5), 4.88 (bd, 1H, J=2.9), 4.55 (bdd, 2H), 4.24 (m, 1H), 3.94 (m, 2H), 3.58 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.16 (m, 1H), 2.02-2.00 (3 x s, 3 x 3H), 1.98-1.22 (m, 5H), 0.92 (m, 2H). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.28 (m, 2H), 8.12 (d, 1H 15 J = 8.4), 7.12 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.32 ( m, 1H), 5.31 (ddd, 1H, J = 5.1, J = 11.3, J = 9.3), 4.97 (dd, 1H, 2 x J = 9.5), 4.88 (nd, 1H, J = 2.9), 4.55 ( bdd, 2H), 4.24 (m, 1H), 3.94 (m, 2H), 3.58 (m, 1H), 3.36 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.16 (m, 1H), 2.02-2.00 (3 xs, 3 x 3H), 1.98-1.22 (m, 5H), 0.92 (m, 2H).

IR (film, cm^-1) : 2939, 1746 (max), 1602, 1472, 1405, 1367, 1229, 1048, 748.IR (film, cm ^-1 ): 2939, 1746 (max), 1602, 1472, 1405, 1367, 1229, 1048, 748.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 590 (19, M⁺), 531 (27), 317 (61), 301 (53), 246 (100), 232 (90).MS (70 eV, m / e, int rel): 590 (19, M ⁺ ), 531 (27), 317 (61), 301 (53), 246 (100), 232 (90).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C₃₃H₃₈N₂O₈ + H₂O (608.68) obl.: 66.1% C; 6.6% H; 4.6% N; znal.: 65.3% C; 6.8% H; 4.4% N.For C ₃₃ H ₃₈ N ₂ O ₈ + H ₂ O (608.68) calculated: 66.1% C; 6.6% H; 4.6% N; found: 65.3% C; 6.8% H; 4.4% N.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 465 (79, M⁺+H), 319 (35), 245 (38), 232 (28), 154 (100), 136 (56).MS (70 eV, m / e, int rel): 465 (79, M ⁺ + H), 319 (35), 245 (38), 232 (28), 154 (100), 136 (56).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C27H32N2O5 (464.56) obl.: 69.8% C; 6.9% H; 6.0% N;For C27H32N2O5 (464.56) calculated: 69.8% C; 6.9% H; 6.0% N;

znal.: 69.2% C; 7.0% H; 5.5% N.found: 69.2% C; 7.0% H; 5.5% N.

P r z y k ł a d 4P r z k ł a d 4

9-N-[5'-(a-L-Akozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (15) (wzór 1, R₁ = H, R₂ = H, R₃= -O-(CH₂)_n-O-R, n = 5, R= α-L-akozaminyl)9-N- [5 '- (aL-Acosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (15) (formula 1, R ₁ = H, R ₂ = H, R ₃ = -O- (CH ₂ ) _n -OR, n = 5, R = α-L-acosaminyl)

Do roztworu 5-(11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-9-ylo)pentanolu (13) (1.5 g, 4.71 mmol) i 4-O-acetylo-3-N-alliloksykarbonylo-L-akozaminalu (1.33 g, 4.71 mmol) w suchym CH2CI2 (50 ml) dodano HBr.Ph3P (3.33 g, 11.78 mmol). Reakcję prowadzono 68 h w r.t., w kolbce zabezpieczonej przed dostępem wilgoci. Mieszaninę reakcyjną wylano do nasyconego roztworu NaHCO3 (ok. 50 ml), oddzielono warstwę organiczną, którą przemyto wodą, suszono (MgSO4). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako układ eluujący heksan/octan etylu od 5:1 do 2:1. Po krystalizacji z układu Et2O/heksan otrzymano 0.731 g czystego pro duktu, 9-N-[5'-(4'-O-acetylo-3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-akozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinoliny (16). Wydajność 27%.To a solution of 5- (11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-9-yl) pentanol (13) (1.5 g, 4.71 mmol) and 4-O-acetyl-3-N-allyloxycarbonyl-L -acosamine (1.33 g, 4.71 mmol) in dry CH2Cl2 (50 ml) was added HBr. Ph3P (3.33 g, 11.78 mmol). The reaction was carried out for 68 h at r.t. in a moisture-proof flask. The reaction mixture was poured into a saturated solution of NaHCO3 (ca. 50 ml), the organic layer was separated and washed with water, dried (MgSO4). The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using 5: 1 to 2: 1 hexane / ethyl acetate as the elution system. After crystallization from Et2O / hexane, 0.731 g of the pure product 9-N- [5 '- (4'-O-acetyl-3'-N-allyloxycarbonyl-aL-acosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H- was obtained indolo [2,3-b] quinoline (16). 27% yield.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,28 (m, 3H), 7.76 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.33 (m, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.24 (m, 2H), 4.77 (bd, 1H, J=1.8), 4.54 (bd, 2H), 4.46 (d, 1H, J=9.6), 4.16 (m, 1H), 3.84 (dq, 1H, J=6.3, J=9.7), 3.50 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.20 (ddd, 1H, J=4.7, J=13.0, J<1), 2.08 (s, 3H), 1.98 (m, 1H), 1.60 (m, 6H), 1.12 (d, 3H, J=6.3). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.28 (m, 3H), 7.76 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.33 (m, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.24 (m , 2H), 4.77 (na, 1H, J = 1.8), 4.54 (na, 2H), 4.46 (d, 1H, J = 9.6), 4.16 (m, 1H), 3.84 (dq, 1H, J = 6.3, J = 9.7), 3.50 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.20 (ddd, 1H, J = 4.7, J = 13.0, J <1), 2.08 (s, 3H), 1.98 (m, 1H ), 1.60 (m, 6H), 1.12 (d, 3H, J = 6.3).

IR (KBr, cm^-1) : 3323, 2935, 1737, 1691 (max), 1604, 1538, 1473, 1404, 1248, 1128, 1050, 739.IR (KBr, cm ^-1 ): 3323, 2935, 1737, 1691 (max), 1604, 1538, 1473, 1404, 1248, 1128, 1050, 739.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 573 (19, M⁺), 516 (19), 318 (25), 301 (55), 287 (22), 259 (27), 246 (100), 232 (98), 43 (20).MS (70 eV, m / e, int rel.): 573 (19, M ⁺ ), 516 (19), 318 (25), 301 (55), 287 (22), 259 (27), 246 ( 100), 232 (98), 43 (20).

Analiza elementarna:Elemental analysis:

Dla C33H39N3O6 (573.90) obl.: 69.1% C; 6.9% H; 7.3% N; znal.: 68.9% C; 7.0% H; 7.3% N.For C33H39N3O6 (573.90) calculated: 69.1% C; 6.9% H; 7.3% N; found: 68.9% C; 7.0% H; 7.3% N.

9-N-[5'-(4'-O-Acetylo-3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-akozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (16) (0.721 g, 1.26 mmol) rozpuszczono w 20 ml roztworu MeOH : CH2CI2 (1:1), dodano K2CO3 (0.150 g). Reakcję prowadzono 1 godz. w r.t. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą, ekstrahowano CHCI3, przemyto NH4CI, suszono (MgSO4). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako eluent heksan/octan etylu 3:1-1:1. Otrzymano 9-N-[5'-(3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-akozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (17) (0.261 g), którą rozpuszczono w suchym tetrahydrofuranie 10 mL i dodano tetrakis (trifenylofosfino) pallad (15 mg) i kwas mrówkowy (1 mL). Całość mieszano w temperaturze pokojowej w atmosferze argonu przez 12 godzin. Mieszaninę przesączono przez celit, a przesącz zatężono. Pozostałość oczyszczono na kolumnie chromatograficznej, eluując układem chloroform/metanol 9:1. Otrzymano 9-N-[5'-(a-L-akozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (15) (127 mg).9-N- [5 '- (4'-O-Acetyl-3'-N-allyloxycarbonyl-aL-acosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (16) (0.721 g, 1.26 mmol) was dissolved in 20 ml of MeOH: CH2Cl2 (1: 1) solution, K2CO3 (0.150 g) was added. The reaction was carried out for 1 hour. in r.t. The reaction mixture was diluted with water, extracted with CHCl3, washed with NH4Cl, dried (MgSO4). The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using hexane / ethyl acetate 3: 1-1: 1 as eluent. There was obtained 9-N- [5 '- (3'-N-allyloxycarbonyl-αL-acosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (17) (0.261 g), which was dissolved in dry tetrahydrofuran 10 mL and added tetrakis (triphenylphosphine) palladium (15 mg) and formic acid (1 mL). The mixture was stirred at room temperature under argon for 12 hours. The mixture was filtered through celite and the filtrate was concentrated. The residue was purified by column chromatography eluting with 9: 1 chloroform / methanol. There was obtained 9-N- [5 '- (α-L-acosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (15) (127 mg).

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,27 (m, 2H), 8.12 (m, 1H), 5 7.71 (ddd, 1H), 7.48 (m, 3H), 7.32 (m, 1H), 4.72 (dd, 1H, J<1, J=2.2), 4.45 (dd, 2H, 2 x J=7.1), 3.58 (m, 2H), 3.32 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.95 (m, 2H), 2.36 (bs, 3H), 2.04-1.40 (m, 8H), 1.22 (d, 3H, J=6.2). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.27 (m, 2H), 8.12 (m, 1H), δ 7.71 (ddd, 1H), 7.48 (m, 3H), 7.32 (m, 1H), 4.72 ( dd, 1H, J <1, J = 2.2), 4.45 (dd, 2H, 2 x J = 7.1), 3.58 (m, 2H), 3.32 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.95 (m , 2H), 2.36 (bs, 3H), 2.04-1.40 (m, 8H), 1.22 (d, 3H, J = 6.2).

IR (KBr, cm^-1) : 3376, 2931, 1602, 1471, 1405, 1124, 1061, 745.IR (KBr, cm ^-1 ): 3376, 2931, 1602, 1471, 1405, 1124, 1061, 745.

MS (70 eV, m/e, rel. int.): 447 (55, M⁺), 347 (46), 317 (88), 301 (44), 246 (80).MS (70 eV, m / e, int rel): 447 (55, M ⁺ ), 347 (46), 317 (88), 301 (44), 246 (80).

PL 206 681 B1PL 206 681 B1

P r z y k ł a d 5P r z k ł a d 5

9-N-[5'-(a-L-Daunozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolina (17) (wzór 1, R₁= H, R₂ = H, R₃= -O-(CH₂)_n-O-R, n = 5, R= α-L-daunozaminyl)9-N- [5 '- (aL-Daunosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (17) (formula 1, R ₁ = H, R ₂ = H, R ₃ = -O- (CH ₂ ) _n -OR, n = 5, R = α-L-daunosaminyl)

Do roztworu 5-(11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolin-6-ylo)pentanolu (13) (1.5 g, 4.71 mmol) i 4-O-p-nitrobenzoilo-3-N-alliloksykarbonylo-L-daunozaminalu (1.68g, 4.71 mmol) w suchym CH2CI2 (50 ml) dodano HBr.Ph3P (3.33 g, 11.78 mmol). Reakcję prowadzono w ciągu 68 godzin w r.t., w kolbce zabezpieczonej przed dostępem wilgoci. Mieszaninę reakcyjną wylano do nasyconego roztworu NaHCO3 (ok. 50 ml), oddzielono warstwę organiczną, którą przemyto wodą, suszono (MgSO4). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako układ eluujący heksan: octan etylu od 5:1 do 2:1. Po krystalizacji z układu Et2O/heksan otrzymano 0.688 g czystego produktu, 9-N-[5'-(4'-O-p-nitrobenzoilo-3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-daunozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinoliny (18).To a solution of 5- (11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinolin-6-yl) pentanol (13) (1.5 g, 4.71 mmol) and 4-Op-nitrobenzoyl-3-N-allyloxycarbonyl-L -daunosamine (1.68 g, 4.71 mmol) in dry CH2Cl2 (50 ml) was added HBr. Ph3P (3.33 g, 11.78 mmol). The reaction was carried out for 68 hours at r.t. in a moisture-proof flask. The reaction mixture was poured into a saturated solution of NaHCO3 (ca. 50 ml), the organic layer was separated and washed with water, dried (MgSO4). The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh) using 5: 1 to 2: 1 hexane: ethyl acetate as eluent. After crystallization from Et2O / hexane, 0.688 g of pure product was obtained, 9-N- [5 '- (4'-Op-nitrobenzoyl-3'-N-allyloxycarbonyl-aL-daunosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indole [2,3-b] quinoline (18).

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,28 (m, 6H), 8.14 (d, IH, 5 J=7.8), 7.70 (ddd, 1H, J=1.2, J=6.8, J=8.2), 7.50 (m, 3H), 7.32 (ddd, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.30 (m, 3H), 4.92 (bs, 1H), 4.57 (m, 4H), 4.36 (m, 1H), 4.02 (dq, 1H, J=5.86, J<1) 3.60 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.08-1.40 (m, 8H), 1.02 (d, 3H, J=6.0). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.28 (m, 6H), 8.14 (d, 1H, 5 J = 7.8), 7.70 (ddd, 1H, J = 1.2, J = 6.8, J = 8.2), 7.50 (m, 3H), 7.32 (ddd, 1H), 5.90 (m, 1H), 5.30 (m, 3H), 4.92 (bs, 1H), 4.57 (m, 4H), 4.36 (m, 1H), 4.02 (dq, 1H, J = 5.86, J <1) 3.60 (m, 1H), 3.38 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.08-1.40 (m, 8H), 1.02 (d, 3H, J = 6.0).

9-N-[5'-(4'-O-p-Nitrobenzoilo-3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-daunozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (18) (0.721 g, 1.26 mmol) rozpuszczono w 20 ml roztworu MeOH : CH2CI2 (1:1), dodano K2CO3 (0.150 g). Reakcję prowadzono przez 1 godzinę w r.t. Mieszaninę reakcyjną rozcieńczono wodą, ekstrahowano CHCI3, przemyto NH4CI, suszono (MgSO4). Surowy produkt oczyszczano chromatograficznie (silica gel 230-400 mesh), stosując jako eluent heksan : octan etylu 3:1-1:1. Otrzymano 9-N-[5'-(3'-N-alliloksykarbonylo-a-L-daunozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (19) (0.261 g), którą rozpuszczono w suchym tetrahydrofuranie 10 mL i dodano tetrakis(trifenylofosfino)pallad (15 mg) i kwas mrówkowy (1 mL). Całość mieszano w temperaturze pokojowej w atmosferze argonu przez 12 godzin. Mieszaninę przesączono przez celit, a przesącz zatężono. Pozostałość oczyszczono na kolumnie chromatograficznej, eluując układem chloroform/metanol 9:1. Otrzymano 9-N-[5'-(a-L-daunozaminyloksy)pentylo]-11-metylo-6H-indolo[2,3-b]chinolinę (17) (160 mg), jako bezpostaciowy osad.9-N- [5 '- (4'-Op-Nitrobenzoyl-3'-N-allyloxycarbonyl-aL-daunosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (18) (0.721 g, 1.26 mmol) was dissolved in 20 ml of MeOH: CH2Cl2 (1: 1) solution, K2CO3 (0.150 g) was added. The reaction was carried out for 1 hour at r.t. The reaction mixture was diluted with water, extracted with CHCl3, washed with NH4Cl, dried (MgSO4). The crude product was purified by chromatography (silica gel 230-400 mesh), eluting with hexane: ethyl acetate 3: 1-1: 1. There was obtained 9-N- [5 '- (3'-N-allyloxycarbonyl-aL-daunosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (19) (0.261 g), which was dissolved in dry tetrahydrofuran 10 mL and added tetrakis (triphenylphosphine) palladium (15 mg) and formic acid (1 mL). The mixture was stirred at room temperature under argon for 12 hours. The mixture was filtered through celite and the filtrate was concentrated. The residue was purified by column chromatography eluting with 9: 1 chloroform / methanol. 9-N- [5 '- (α-L-daunosaminyloxy) pentyl] -11-methyl-6H-indolo [2,3-b] quinoline (17) (160 mg) was obtained as an amorphous solid.

¹H NMR (200 MHz, CDCI3) : 8,27 (m, 2H), 8.10 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.30 (m, 1H), 4.76 (bs, 1H), 4.52 (dd, 2H, 2 x J=7.2), 3.67 (q, 1H, J=6.5), 3.60-3.04 (m, 7H), 2.31 (bs, 3H), 2.04-1.06 (m, 8H), 1.11 (d, 3H, J=6.5). ¹ H NMR (200 MHz, CDCl 3): 8.27 (m, 2H), 8.10 (m, 1H), 7.71 (m, 1H), 7.50 (m, 3H), 7.30 (m, 1H), 4.76 (bs , 1H), 4.52 (dd, 2H, 2 x J = 7.2), 3.67 (q, 1H, J = 6.5), 3.60-3.04 (m, 7H), 2.31 (bs, 3H), 2.04-1.06 (m, 8H), 1.11 (d, 3H, J = 6.5).

IR (KBr, cm^-1) : 3386, 2932, 1602, 1472, 1405, 1121, 1022, 984, 745.IR (KBr, cm ^-1 ): 3386, 2932, 1602, 1472, 1405, 1121, 1022, 984, 745.

MS (70 eV, me, rel. int.): 447 (16, M⁺), 347 (43), 318 (82), 301 (37), 245 (83), 232 (100).MS (70 eV, me, int. Rel.): 447 (16, M ⁺ ), 347 (43), 318 (82), 301 (37), 245 (83), 232 (100).

Wyniki badań biologicznychResults of biological research

Wybrane pochodne indolochinoliny według wynalazku badano pod kątem aktywności biologicznej na wybranych liniach komórek nowotworowych. W badaniach wykorzystuje się linię nowotworową KB (uznawaną za subklon HeLa - raka szyjki macicy). Linia ta znajduje się w kolekcji Instytutu Immunologii i Terapii Doświadczalnej PAN we Wrocławiu. Komórki hodowane są w medium Opti-MEM z dodatkiem 5% FCS, 50 μg/ml streptomycyny, 50 U/ml penicyliny i 2 mM glutaminy. Utrzymywane są w temp. 37°C, w wilgotnej atmosferze nasyconej 5% CO2.Selected indoloquinoline derivatives according to the invention were tested for biological activity on selected tumor cell lines. The research uses the KB neoplastic line (recognized as the HeLa subclone - cervical cancer). This line is in the collection of the Institute of Immunology and Experimental Therapy of the Polish Academy of Sciences in Wrocław. Cells are grown in Opti-MEM medium supplemented with 5% FCS, 50 µg / ml streptomycin, 50 U / ml penicillin and 2 mM glutamine. They are kept at 37 ° C, in a humid atmosphere saturated with 5% CO2.

Test hamowania proliferacjiProliferation inhibition test

Do 24-godzinnej hodowli komórek dodawano związki badane. Po 72-godzinnej inkubacji z testowanymi związkami badano zahamowanie proliferacji komórek. Badania wykonano przy użyciu testu SRB mierzącego zahamowanie proliferacji komórek docelowych [Skehan et al., J. Nat. Cancer. Inst., 82: 1107-1112, 1990], mierzącego zahamowanie komórek docelowych w hodowli in vitro. W każdym doświadczeniu próbki zawierające określone stężenia preparatu nanoszono w trzech powtórzeniach. Doświadczenia powtarzano 3-12 razy. Wyniki wyrażone w postaci ID50 (dawka powodująca zahamowanie proliferacji 50% populacji komórek nowotworowych) zebrano w Tabeli 1.The test compounds were added to the 24-hour cell culture. After 72 hours of incubation with test compounds, the inhibition of cell proliferation was investigated. The studies were performed using the SRB assay measuring inhibition of target cell proliferation [Skehan et al., J. Nat. Cancer. Inst., 82: 1107-1112,1990], measuring the inhibition of target cells in in vitro culture. In each experiment, samples containing specific concentrations of the preparation were applied in triplicate. The experiments were repeated 3-12 times. Results expressed as ID50 (dose inhibiting proliferation of 50% of the tumor cell population) are summarized in Table 1.

T a b e l a 1T a b e l a 1

Nr No R1 R1 R2 R2 R3 R3 n n R R ID50 (pg/mL) ID50 (pg / mL) 1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 1 1 -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R CH3 CH3 H H. 5 5 2-deoksy-a-D-glukopiranozyl 2-deoxy-α-D-glucopyranosyl 22.9 22.9 2 2 H H. CH3 CH3 -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R 5 5 2-deoksy-a-D-glukopiranozyl 2-deoxy-α-D-glucopyranosyl 28.5 28.5

PL 206 681 B1 cd. tabeli 1PL 206 681 B1 cont. table 1

1 1 2 2 3 3 4 4 5 5 6 6 7 7 3 3 H H. CH3 CH3 -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R 5 5 2-deoksy-a-L-ramnopiranozyl 2-deoxy-α-L-rhamnopyranosyl 18.9 18.9 4 4 H H. CH3 CH3 -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R 2 2 2-deoksy-a-L-ramnopiranozyl 2-deoxy-α-L-rhamnopyranosyl 19.1 19.1 5 5 H H. -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R H H. 5 5 2-deoksy-a-D-glukopiranozyl 2-deoxy-α-D-glucopyranosyl 31.7 31.7 6 6 H H. -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R H H. 5 5 2-deoksy-a-L-ramnpiranozyl 2-deoxy-α-L-rhamnpyranosyl 31.8 31.8 7 7 H H. -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R H H. 5 5 2-deoksy-a-D-laktopiranozyl 2-deoxy-α-D-lactopyranosyl 28.7 28.7 8 8 H H. -O-(CH2)n-O-R -O- (CH2) n-O-R H H. 5 5 2-deoksy-a-L-akozaminyl 2-deoxy-α-L-acosaminyl 3.2 3.2

Zastrzeżenia patentowePatent claims

Claims

CLAIMS 1. Indolo [2,3-b] quinoline derivatives of the formula I wherein: one of R1, R2 or R3 is -O- (CH2) nOR, where n = 2-6, R is a monosaccharide group, and the other two substituents of R1, R2 and R3 are the same or different and are independently a C1-C4 alkyl group or a hydrogen atom.

2. Derivatives according to claim 1 represented by Formula 1, wherein the monosaccharide group is an amino sugar group.

3. Derivatives according to claim 1 or 2 as represented by formula 1, wherein the monosaccharide group is L-acosaminyl or L-daunosaminyl.

4. Derivatives according to p. 1 represented by formula 1, wherein the monosaccharide group is 2-deoxy-hexosyl in pyranose form.

5. Derivatives according to claim 1 1 or 2 or 4 represented by formula 1, in which:

R1 is -O- (CH2) n-O-R, where n = 2-6, R is amino sugar or 2-deoxyhexosyl, R2 is methyl and R3 is hydrogen.

6. Derivatives according to claim 1 or 2 or 4 represented by formula 1, wherein R1 and R3 are hydrogen and R2 is - (CH2) n-O-R, where n = 2-6 and R is an amino sugar or 2-deoxy-hexosyl group.

7. Derivatives according to claim 1 or 2 or 4 represented by the formula 1, wherein R1 is hydrogen, R2 is methyl, R3 is -O- (CH2) nOR, where n = 2-6 and R is an amino sugar or 2-deoxy-hexosyl group .

8. The method for the preparation of indolo [2,3-b] quinoline derivatives of formula 1, wherein one of R1, R2 or R3 is the group -O- (CH2) nOR, where n = 2-6, R is a monosaccharide group, and the other two substituents of R1, R2 and R3 are the same or different and represent a C1-C4-alkyl group or a hydrogen atom, characterized in that the indolo [2,3-b] quinoline derivatives of formula 1 wherein one of the substituents R1, R2 or R3, being a precursor of the group -O- (CH2) nOR, is a hydroxyl group, and the other two substituents of R1, R2 and R3 are independently C1-C4-alkyl or hydrogen, are alkylated with an alkylating agent of the formula R4-O- (CH2) nX, where R4 is a hydroxyl protecting group, n is as defined above, and X is a halogen atom, then the hydroxyl group is deprotected, and the glycosyl acceptor compound represented by the formula 1 thus obtained, wherein one of R1, R2 and R3, which is a precursor to the group -O- (CH2) nOR , is -O- (CH2) n-OH, the other two substituents of R1, R2 and R3 and n are as defined above, are glycosylated with a glycosyl donor which is a glycal monosaccharide in the presence of a promoter in an aprotic solvent .

9. The method according to p. 8. The process of claim 8, wherein the alkylation reaction is carried out in the presence of a strong base selected from the group of alkali metal hydrides, alcoholates or hydroxides.

10. The method according to p. The process of claim 8 or 9, characterized in that the alkylation reaction is carried out in dimethylformamide with 2-bromoethyl acetate or 6-bromo-n-hexyl acetate in the presence of sodium hydride.

11. The method according to p. 8. The process of claim 8, wherein the hydroxyl groups of the glycal are protected as esters and the amino groups as carbamates.

12. The method according to p. The process of claim 8 or 11, characterized in that the hydroxyl groups of the glycal are protected as acetic acid esters and the amino groups as allyl carbamate.

PL 206 681 B1

13. The method according to p. 8. The process of claim 8, wherein the glycosidation reaction is carried out in dichloromethane or dichloroethane.

14. The method according to p. The process of claim 8, characterized in that a hydrobromide is used as a glycosidation reaction promoter