PL212020B1 - Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione) - Google Patents

Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)

Info

Publication number
PL212020B1
PL212020B1 PL386883A PL38688308A PL212020B1 PL 212020 B1 PL212020 B1 PL 212020B1 PL 386883 A PL386883 A PL 386883A PL 38688308 A PL38688308 A PL 38688308A PL 212020 B1 PL212020 B1 PL 212020B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
substrate
testoloactane
androst
oxa
dione
Prior art date
Application number
PL386883A
Other languages
Polish (pl)
Other versions
PL386883A1 (en
Inventor
Teresa Kołek
Anna Szpineter
Alina Świzdor
Original Assignee
Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Przyrodniczy We Wrocławiu filed Critical Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority to PL386883A priority Critical patent/PL212020B1/en
Publication of PL386883A1 publication Critical patent/PL386883A1/en
Publication of PL212020B1 publication Critical patent/PL212020B1/en

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania testololaktonu, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku.The present invention relates to a process for the preparation of testolactone of formula 2 shown in the drawing.

Steroidowe laktony wykazują różnorodną aktywność biologiczną, m.in. antynowotworową, antyandrogenną i antybakteryjną (G. E. Serafini, S. Moslemi. Mol. Cell. Endocrinol. 2001, 178, 117-131). Testolakton jest inhibitorem aromatazy, dzięki czemu hamuje rozwój hormono-zależnych nowotworów, głównie raka piersi i prostaty, a także ogranicza przerost prostaty. Jest skutecznym lekiem w przypadku zaburzenia równowagi estrogeny - androgeny, której skutkiem jest ginekomastia lub przedwczesne dojrzewanie. Enzymatyczne utlenienie, w którym nie stosuje się toksycznych odczynników jest konkurencyjną metodą w stosunku do utlenienia chemicznego. Szereg szczepów z rodzaju Penicillium, Aspergillus i Cylindrocarpon prowadzi efektywne utlenienie progesteronu lub androstendionu do testololaktonu, natomiast literatura nie podaje przykładów mikrobiologicznego utlenienia pregnenolonu do testololaktonu (H-M Liu, H. Li, L. Shan, J. Wu, Steroids 2006, 71, 931-934).Steroidal lactones exhibit various biological activities, including anti-cancer, anti-androgenic and anti-bacterial (G. E. Serafini, S. Moslemi. Mol. Cell. Endocrinol. 2001, 178, 117-131). Testolactone is an aromatase inhibitor, thanks to which it inhibits the growth of hormone-dependent neoplasms, mainly breast and prostate cancer, as well as reduces prostate hypertrophy. It is an effective drug in the case of estrogen-androgen imbalance, which results in gynecomastia or premature puberty. Enzymatic oxidation, which does not use toxic reagents, is a competitive method to chemical oxidation. A number of strains of the genus Penicillium, Aspergillus and Cylindrocarpon efficiently oxidize progesterone or androstenedione to testololactone, while the literature does not provide examples of microbiological oxidation of pregnenolone to testolactone (HM Liu, H. Li, L. Shan, J. Wu, Steroids 2006, 71, 931 -934).

Istota wynalazku polega na tym, że pregnenolon (33-hydroksy-5-pregnen-20-on) przekształcany jest do testololaktonu za pomocą kultury szczepu Penicillium camembertii.The essence of the invention lies in the fact that pregnenolone (33-hydroxy-5-pregnen-20-one) is converted into testolactone by means of the Penicillium camembertii strain culture.

Korzystne jest, gdy proces transformacji prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 293-300K.It is advantageous if the transformation process is carried out with the aqueous strain, with continuous mixing of the reagents, at the temperature of 293-300K.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach grzyba PeniciIlium camembertii pregnenolon utleniany jest do testololaktonu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem przez ekstrakcję chloroformem.Proceeding according to the invention, due to the action of the enzyme system contained in the cells of the fungus PeniciIlium camembertii pregnenolone is oxidized to testolactone. The product obtained in this way is separated from the aqueous culture of the microorganism by a known method by extraction with chloroform.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie testololaktonu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością 74%, w temperaturze pokojowej i pH bliskim obojętnemu.The main advantage of the invention is that testolactone is obtained as the main reaction product with a yield of 74%, at room temperature and pH close to neutral.

Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.The invention is explained in more detail using an exemplary embodiment.

P r z y k ł a dP r z k ł a d

Do kolby Erlenmajera o pojemności 250 cm3, w której znajduje się 100 cm3 sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1g aminobaku, wprowadza się szczep Penicillium camembertii. Po trzech 3 dniach wzrostu dodaje się 20 mg pregnenolonu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 24 godziny w pięciu powtórzeniach w tych samych warunkach, w temperaturze 295K, przy pH=6,9. Następnie uzyskane roztwory transformacyjne ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 130 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie używając jako eluentu mieszaniny: octan etylu:chlorek metylenu:aceton (3:1:1).The Penicillium camembertii strain is introduced into an Erlenmajer flask with a capacity of 250 cm 3 , in which there is 100 cm 3 of a sterile medium containing 3 g of glucose and 1 g of aminobac. After three 3 days of growth, 20 mg of pregnenolone of formula 1 dissolved in 1 cm 3 of acetone are added. The transformation is performed by shaking continuously for 24 hours in five replications under the same conditions at 295K, pH = 6.9. The resulting transformation solutions were then extracted three times with chloroform, dried with anhydrous magnesium sulfate, and the solvent was evaporated. 130 mg of crude product are obtained, which product is purified by chromatography using as eluent a mixture of: ethyl acetate: methylene chloride: acetone (3: 1: 1).

Na tej drodze otrzymuje się 74 mg testololaktonu (wydajność 74%).In this way 74 mg of testolactone are obtained (74% yield).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi: t.t. 209-210oC; [a]20 = +46,2 (c 0.16 CHCI3);The obtained product is characterized by the following spectral data: mp 209-210 o C; [a] 20 = +46.2 (c 0.16 CHCl 3);

IR Vmax (cm-1): 1716, 1666, 1614, 1214; 1H-NMR δ (ppm): 1.16 (s, 19-H3), 1.35 (s, I8-H3), 2.59 (m, 16a-H), 2.68 (m, 16β-Η), 5.75 (s, 4-H);IR Vmax (cm -1 ): 1716, 1666, 1614, 1214; 1H-NMR δ (ppm): 1.16 (s, 19-H3), 1.35 (s, I8-H3), 2.59 (m, 16a-H), 2.68 (m, 16β-Η), 5.75 (s, 4- H);

13C-NMR: δ (ppm): 199.2 (C-3), 171.1 (C-17), 169.2 (C-5), 124.1 (C-4), 82.7 (C-13), 52.5 (C-9), 45.7 (C-14), 39.1 (C-12), 38.4 (C-10), 38.0 (C-8), 35.5 (C-1), 33.8 (C-2), 32.4 (C-6), 30.5 (C-7), 28.6 (C-16), 21.9 (C-11), 20.1 (C-18), 19.9 (C-15), 17.44 (C-19). 13 C-NMR: δ (ppm): 199.2 (C-3), 171.1 (C-17), 169.2 (C-5), 124.1 (C-4), 82.7 (C-13), 52.5 (C-9 ), 45.7 (C-14), 39.1 (C-12), 38.4 (C-10), 38.0 (C-8), 35.5 (C-1), 33.8 (C-2), 32.4 (C-6) , 30.5 (C-7), 28.6 (C-16), 21.9 (C-11), 20.1 (C-18), 19.9 (C-15), 17.44 (C-19).

Claims (4)

1. Sposób wytwarzania testololaktonu o wzorze 2, na drodze transformacji mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się pregnenolon, o wzorze 1, znamienny tym, że substrat przekształcany jest za pomocą systemu enzymatycznego szczepu grzyba z gatunku Penicillium camembertii.A method for the production of testolactone of the formula 2 by means of microbial transformation, wherein the substrate is pregnenolone of the formula 1, characterized in that the substrate is transformed with the enzyme system of the Penicillium camembertii fungus strain. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces biotransformacji substratu prowadzi się wodną kulturą szczepu przy ciągłym mieszaniu.2. The method according to p. The method of claim 1, wherein the substrate biotransformation process is carried out with an aqueous culture of the strain under constant agitation. 3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces biotransformacji substratu prowadzi się w temperaturze 293-300K.3. The method according to p. The method of claim 1, characterized in that the substrate biotransformation process is carried out at the temperature of 293-300K. 4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że proces biotransformacji substratu prowadzi się przy pH 6,8-7,1.4. The method according to p. The method of claim 1, wherein the substrate biotransformation process is carried out at a pH of 6.8-7.1.
PL386883A 2008-12-22 2008-12-22 Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione) PL212020B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL386883A PL212020B1 (en) 2008-12-22 2008-12-22 Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL386883A PL212020B1 (en) 2008-12-22 2008-12-22 Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL386883A1 PL386883A1 (en) 2009-06-22
PL212020B1 true PL212020B1 (en) 2012-07-31

Family

ID=42986468

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL386883A PL212020B1 (en) 2008-12-22 2008-12-22 Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL212020B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
PL386883A1 (en) 2009-06-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Świzdor et al. Microbial Baeyer–Villiger oxidation of 5α-steroids using Beauveria bassiana. A stereochemical requirement for the 11α-hydroxylation and the lactonization pathway
Milecka-Tronina et al. Hydroxylation of DHEA and its analogues by Absidia coerulea AM93. Can an inducible microbial hydroxylase catalyze 7α-and 7β-hydroxylation of 5-ene and 5α-dihydro C19-steroids?
Kollerov et al. Deoxycholic acid transformations catalyzed by selected filamentous fungi
Hunter et al. Transformation of 5-ene steroids by the fungus Aspergillus tamarii KITA: Mixed molecular fate in lactonization and hydroxylation pathways with identification of a putative 3β-hydroxy-steroid dehydrogenase/Δ5–Δ4 isomerase pathway
Yang et al. Biotransformations of steroids to testololactone by a multifunctional strain Penicillium simplicissimum WY134-2
Liu et al. Synthesis of steroidal lactone by penicillium citreo-viride
Özçinar et al. Biotransformation of ruscogenins by Cunninghamella blakesleeana NRRL 1369 and neoruscogenin by endophytic fungus Neosartorya hiratsukae
Huang et al. Synthesis and cytotoxicity of 17a-Aza-D-homo-androster-17-one derivatives
Iglesias-Arteaga et al. BF3· Et2O-induced Beckmann rearrangement of 23-hydroxyiminosapogenins. A shortcut to bisnorcholanic lactones
PL212020B1 (en) Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)
Hunter et al. An unusual ring—A opening and other reactions in steroid transformation by the thermophilic fungus Myceliophthora thermophila
Hunter et al. Ring-B functionalized androst-4-en-3-ones and ring-C substituted pregn-4-en-3-ones undergo differential transformation in Aspergillus tamarii KITA: Ring-A transformation with all C-6 substituted steroids and ring-D transformation with C-11 substituents
de Queiroz et al. Bio-oxidation of progesterone by Penicillium oxalicum CBMAI 1185 and evaluation of the cytotoxic activity
Yildirim et al. Biotransformation of testosterone by Ulocladium chartarum MRC 72584
PL239842B1 (en) Method of preparing 19-nortestolactone
Hunter et al. Transformation of some 3α-substituted steroids by Aspergillus tamarii KITA reveals stereochemical restriction of steroid binding orientation in the minor hydroxylation pathway
PL212016B1 (en) Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)
PL212045B1 (en) Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)
Hunter et al. Fate of novel Quasi reverse steroidal substrates by Aspergillus tamarii KITA: Bypass of lactonisation and an exclusive role for the minor hydroxylation pathway
Yang et al. Microbial metabolism of steviol and steviol-16α, 17-epoxide
PL212019B1 (en) Production method of testoloactane (17a-oxa—D-homo-androst-4-en-3,17-dione)
Yildirim et al. Baeyer–Villiger oxidation of some steroids by Aspergillus tamarii MRC 72400
Świzdor et al. Biohydroxylation of 7‐oxo‐DHEA, a natural metabolite of DHEA, resulting in formation of new metabolites of potential pharmaceutical interest
PL246161B1 (en) Method of producing 19-nortestololactone
PL212717B1 (en) Method of manufacturing of testololactone of (17a-oxa-D-homo-androst-4-en-3,17-dione)

Legal Events

Date Code Title Description
LICE Declarations of willingness to grant licence

Effective date: 20120404

LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20111222